Name: Inchworming: BTBR A Novel Motor Stereotipi T + Itpr3 Tf / J Fare Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-05T16:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 3 s
Description: Öğrenin, BTBR farelerinde tekrarlayıcı motor stereotipilerini değiştirilmiş juvenile play test ile değerlendirmeyi. Bu yöntem otizm spektrum bozukluğu araştırmalarında motor davranışları analiz etmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar Gül Tobias, Younghee Ahn, ve David N. Ruskin tarafından sağlanan teknik ve lojistik destek ve uzmanlık için minnettarız. Burada anlatılan çalışma Alberta Çocuk Hastanesi Vakfı ve Alberta Çocuk Hastanesi Araştırma Enstitüsü tarafından finanse edildi.

Tüm prosedürler Kanada Hayvan Bakım Komitesi uygun olarak yapılmış ve Calgary Hayvan Bakım Komitesi Üniversitesi tarafından onaylanmıştır. 1.. Animal hazırlanması <ol><li> (12 saat) test öncesinde gecede fareler izole. Bunu yapmak için, kendi başlarına, bir gün önce test ile kafeslerde deneysel analiz için gerekli olan tüm BTBR ve B6 fareleri (P35-P40) yerleştirin. </li><li> Hayvanlar yeni ortama alıştırmak böylece testten önce davranış analizi oda 30 dakika içinde izole edilmiş fareler yerleştirin. </li></ol> 2.. Ekipmanları Hazırlık <ol><li> 30 x 30 cm pleksiglas test odasında çıkarılabilir bir kapak ile kutu yerleştirin. Bir masaya kutusunu yerleştirin ve alttan bir 45 ° açıyla video kamera yerleştirmek; Kameranın bu konumu muhafaza ve fare tüm zemin görselleştirme izin verecektir. Duvarından parlamayı en aza indirmek için bir kızılötesi ışığını kullanınkutusu. </li><li> Düşük lux ortamda filme optimize kızılötesi yetenekleri olan yüksek zoom fonksiyonu sahip bir video kamera kullanın. Fareler tüm kutusunda boyunca görsel böylece görüntü büyütme kasasındaki kamerayı odaklanın. </li><li> Odun talaşı (yaklaşık 1 inç derin olmalıdır) ile kutunun tüm zemini örtün. </li></ol> 3 Test Prosedürü <ol><li> Test muhafaza içinde - Bir farelerin içi gerginlik çifti (BTBR veya B6-B6 BTBR) yerleştirin. </li><li> Test odasında ışıkları kapatın. </li><li> Odayı kaydetmek ve çıkmak için video kamera başlatın. Bu, farelerin davranışı üzerinde bir etki deneyi önleyecektir. 11 dakika boyunca aktivitesini kaydedin. </li><li> Kayıt tamamlandıktan sonra, test odası yeniden girin ve orijinal kafeslerine fareler dönün. </li><li> , Talaş yatak imha% 70 etanol ile tüm test kutusu yıkama ve test altındaki yeni talaş yatak yerleştirmekmuhafaza. </li><li> Intra-leke çiftlerinin geri kalanı için tüm prosedürü tekrarlayın ve orijinal kafeslerine fareler dönün. </li></ol> Not: inchworming verilerin güvenilirliğini doğrulamak için, prosedür farklı BTBR-BTBR ve B6-B6 çifti kombinasyonları ile daha sonraki günlerde tekrar edilebilir. Bu görülen davranış, muhafazanın spesifik ortak bağımlı değildir, ancak tek tek inchworming sağlayacaktır. 4.. Veri Analizi <ol><li> Inchworming etkili bir şekilde değiştirir, bir yatak içeri doğru ve daha sonra ortak olarak meydana gelen daha sonraki dışa doğru bir hareket, minimum hayvanın ön ve Hind feet senkron içe doğru ve dışa doğru hareketi olarak tanımlanır. El ile izlemek ve 10 dk video inchworm için toplam süresini, sıklığını ve gecikme tespit etmek için iki kez (bir kez her fare için), her bir videoyu atar. Süresi, sıklığı ve gecikme inchworming Manuel puanlama takip dayalı olmalıdırtanımları ing: Inchworming Süre: Her bir fare inchworming davranış yapan harcadığı toplam süre olarak tanımlanır. Inchworming bu yönünü puan, başlamış ve durdurulabilir bir zamanlayıcı kullanın. Fare, fare inchworming durduğunda zamanlayıcıyı inchworm ve durdurmak başladığında zamanlama başlayın. Fare, tekrar yeniden bir başlangıç ​​inchworm ve zamanlayıcı yeniden durdurmak başladığında ve eğer. 10 dk gözlem süresi her zaman fare inchworms süresince zamanlayıcı başlatma ve durdurma tekrarlayın. Bu 0:00 ve 10:00 dakika arasında bir süre inchworming puan üretecektir. Inchworming Frekans: fareyi 10 dakika gözlem süresi içinde inchworming davranış yürütmektedir kat sayısı olarak tanımlanır. Tek sayımı her zaman fare başlar ve durur inchworming verilir. Inchworming sıklığı skoru 0 ve ∞ arasında bir sayı olacaktır. Inchworm için Gecikme: zaman inci gibi tanımlanmış mıaz önce inchworming ilk başlangıcı geçer. Video başladığında sayacını başlatmak, bu sefer 00:00 olabilir ve Sayacı durdurmak ne zaman ilk kez fare inchworms. Fare inchworming davranışlar sergilerler yoksa inchworm için gecikme 10:00 olacaktır. Inchworm gecikmeye analiz ederken, 0:01 ve 10:00 dakika arasında bir puan elde edilecektir. Test süresinin süresince inchworm başarısız Fareler sonuçların inchworming davranışlar farelerde bir nüfusa için uygun olduğundan emin olmak için, numune popülasyonundan çıkarılmalıdır. </li> <li> Toplam sıklığını ve video her fare için inchworming süresini hesaplayın. Farelerin belirli çifti için inchworm için gecikme için inchworm için çiftindeki birinci fare için gereken zamanı hesaplanır. Bu parametreler farelerde 6 tekrarlayan kazı davranışlarla ilgili önceki metodolojik çalışmalarına dayanmaktadır. </li><li> Ortalama süresini hesaplamak, frekans,ve gecikme analizi (B6 vs yani BTBR) her deney grubu için kazmak. Bir ANOVA veya soylar / deney grupları arasında verileri karşılaştırmak için t-testi kullanın. Not: işlem ikinci gününde tamamlandığında, hiçbir sonraki duruşma etkisi veya eşleştirme etkileri vardı emin olmak için bir tekrarlanan ölçümler için ANOVA kullanın. </li></ol>

<ol><li>McFarlane, H. G., Kusek, G. K., Yan, M., Phoenix, J. L., Bolivar, V. J., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autism-like+behavioral+phenotypes+in+BTBR+T%2Btf%2FJ+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%2C+Brain%2C+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Autism-like behavioral phenotypes in BTBR T+tf/J mice.</a> Genes, Brain, and Behavior. 7, 152-163 (2008).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designing+mouse+behavioral+tasks+relevant+to+autistic-like+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Mental+Retardation+and+Developmental+Disabilities+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Designing mouse behavioral tasks relevant to autistic-like behaviors.</a> Mental Retardation and Developmental Disabilities Research Reviews. 10 (4), 248-258 (2004).</li>
<li>Deacon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digging+and+marble+burying+in+mice%3A+simple+methods+for+in+vivo+identification+of+biological+impacts%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Digging and marble burying in mice: simple methods for in vivo identification of biological impacts.</a> Nature Protocols. 1 (1), 122-124 (2006).</li>
<li>Thomas, A., Burant, A., Bui, N., Graham, D., Yuva-Paylor, L. A., Paylor, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marble+burying+reflects+a+repetitive+and+perseverative+behavior+more+than+novelty-induced+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Marble burying reflects a repetitive and perseverative behavior more than novelty-induced anxiety.</a> Psychopharmacology. 204, 361-373 (2009).</li>
<li>Dudek, B. C., Adams, N., Boice, R., Abbott, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+influences+on+digging+behaviours+in+mice+%28Mus+musculus%29+in+laboratory+and+seminatural+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Genetic influences on digging behaviours in mice (Mus musculus) in laboratory and seminatural settings.</a> Journal of Comparative Psychology. 97 (3), 249-259 (1983).</li>
<li>Webster, D., Williams, M. H., Owens, R., Geiger, V., Dewsbury, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digging+behavior+in+12+taxa+of+muriod+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Learning+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Digging behavior in 12 taxa of muriod rodents.</a> Animal Learning and Behavior. 9 (2), 173-177 (1981).</li>
<li>Pobbe, R. H., Pearson, B. L., Defensor, E., Bolivar, V. J., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+social+behaviours+of+C57BL%2F6J+versus+BTBR+inbred+mouse+strains+in+the+visible+burrow+system%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Expression of social behaviours of C57BL/6J versus BTBR inbred mouse strains in the visible burrow system.</a> Behavioural Brain Research. 214, 443-449 (2010).</li>
<li>Lewis, M. H., Tanimura, Y., Lee, L., Bodfish, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+restricted+repetitive+behavior+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models of restricted repetitive behavior in autism.</a> Behavioural Brain Research. 176, 66-74 (2007).</li>
<li>Silverman, J. L., Yang, M., Lord, C., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioural+phenotyping+assays+for+mouse+models+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews%22%5BJournal%5D)">Behavioural phenotyping assays for mouse models of autism.</a> Nature Reviews. 11, 490-502 (2010).</li>
<li>Deacon, R., Rawlins, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+lesions%2C+species-typical+behaviours+and+anxiety+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Hippocampal lesions, species-typical behaviours and anxiety in mice.</a> Behavioural Brain Research. 156, 241-249 (2005).</li>
<li>Pearson, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+and+cognitive+sterotypies+in+the+BTBR+T%2Btf%2FJ+mouse+model+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%2C+Brain%2C+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Motor and cognitive sterotypies in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> Genes, Brain, and Behavior. 10, 228-235 (2011).</li>
<li>Pobbe, R. H., Defensor, E., Pearson, B. L., Bolivar, V. J., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+and+social+anxiety+in+the+BTBR+T%2B+tf%2FJ+mouse+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">General and social anxiety in the BTBR T+ tf/J mouse strain.</a> Behavioural Brain Research. 216 (1), 446-451 (2011).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Inchworming örneğin ASD gibi stereotipileri sergileyen birçok bozuklukları incelemek için kullanılabilir tekrarlayıcı davranış yeni bir ölçüsüdür. Modifiye çocuk sosyal etkileşim protokolü güvenilir inchworming verilerin üretilmesi için kritik öneme sahip olan 4 adım vardır: 1) uzun süre izolasyon inchworming testi için gereklidir ve protokol kaldırılır ya da kısaltılmış olmamalıdır. Bu gereklilik, burada açıklanan çiftli inchworming test özgüdür. 2) uygun bir şekilde yer alan video kamera ve fareler, tam olarak tüm Ple...

Anormal sosyal karşılıklılık, iletişim bozuklukları ve tekrarlayan / stereotipik davranışlar 1: otizm spektrum bozuklukları (ASD) patofizyolojisi belirsizliğini koruyor olsa da, tanı üç geniş belirti kategoriden varlığına bağlıdır. En kemirgen modelleri aynı anda tek bir hayvanda her üç belirti üretemezler. Böylece, güvenilir bir bozukluk bazı veya tüm yönleriyle taklit edebilir modelleri etkili önleyici ve tedavi edici stratejilerin geliştirilmesi için büyük bir değer tutun. ASD üç yönlerini göstermek yapar Bir model BTBR fare 1,2 olduğunu. Ultrasonik sesler ve sosyal yaklaşım deneyleri ile birlikte, çocuk sosyal etkileşim testi yaygın olarak pediatrik ASD fare modellerini karakterize etmek için kullanılır; Bu testler ölçü ASD temel özelliklerini temsil anormal sosyal davranışları azalmış ve. Çocuk sosyal etkileşim testine ek olarak, diğer birçoktestleri ASD hayvan modellerinde stereotipik davranışları ölçmek için kullanılmıştır. Örneğin, bir nesne karşılamak için çaba burun ve ön ayakların kullanılarak yatak malzemesinin yer değiştirmesi için bir hayvanın eğilimi inceler mermer gömme testi, caydırıcı 3,4 uyaranlara tepki olarak meydana gelen stereotipik kompulsif davranışlar ölçmek için düşünülmektedir. Buna göre, kazma testler ASD hayvan modellerinde ve kemirgenler 3,5-7 farklı türlerin bu yineleyici davranış ölçmek için uygulanmıştır. Kazma davranışları burun veya yatak malzemeleri yerinden için pençeleri açık yönettiği eylemler olarak tanımlanan ve tekrarlayıcı motor davranışları 4 duyarlı bir parametre olduğu ileri sürülmüştür. Burada, biz farelerin BTBR zorlanma &quot;inchworming,&quot; olarak adlandırdığı kazma bir roman türü, rapor. Bu yeni davranış karakterizasyonu daha val için kullanılabilen bir tekrar eden motor davranışları sağlam bir önlem sağlayabilirBöyle ASD, Huntington &#39;hastalığı ya da obsesif kompulsif davranış 8,9 gibi kemirgen modelleri idation. Bu içeriye doğru yatak malzemenin yer değiştirmesine neden olarak dışarı doğru bir senkron hareket ile, ardından ön ve Hind-kollarının en az bir senkron hareket olarak &quot;inchworming&quot; tanımlar. Bu pek çok açıdan tipik kazı davranış farklıdır. İlk olarak, inchworming davranış genellikle oldukça, tek bir olay üstünde bölüm bir birleşimi olarak görülmektedir. Buna karşılık, kazma Hind veya ön pençeleri 3 ya tek koordineli hareketi olarak ortaya çıkabilir. Buna ek olarak, hareketleri inchworming davranışları kazma karakteristiği olan sabit pozisyonları olarak karşı muhafaza zemin üzerinde yatay olarak oluşma eğilimindedir. Tipik bir kazma davranışları farelerin B6 ve BTBR suşlarında ortak olan ise, son olarak, aşağıda tarif edilen inchworming davranışı farelerin BTBR inbred soy sıklıkla ortaya çıkar, ancak nadiren B6 kontrol suşu olarak tanımlanır <sup&gt; 10. Bu çalışmada ana hatlarıyla inchworming test prosedürleri standart bir çocuk sosyal etkileşim protokolün 1. değişiklikleri temsil eder. Mermer gömülmesi, kazma, ve çocuk oyun ASD fare modellerinde anormal davranışını ölçmek için değer kurduk göz önüne alındığında, inchworming davranış stereotipik davranışları bu önceden tanımlı ölçümleri tamamlar. Özellikle, yaygın olarak inchworming davranış ASD 8,11 tanımlanır düşük sıra, motor sterotiplerin yararlı bir ölçü sağlar. Buna ek olarak, bu yeni inchworming yordam, ASD gibi gelişimsel bozukluklar ile ilgili tekrarlayan motor hareketlerin analizi için ek değerli bir araç olan araştırmacıların sağlayabilir.

<table><tbody><tr><td>30 cm X 30 cm Kapaklı</td><td></td><td></td> pleksiglas kutu <td>Yapılabilir </td></tr><tr><td>IR Kamera </td><td>Survshop (Calgary, Alberta)</td><td>Sony CCD Kamera DP955V- 30&#8217; Kızılötesi Zırh Kubbesi</td><td>Yüksek çözünürlük ve yakınlaştırma özelliklerine sahip bir kamera bulun</td></tr><tr><td>DVR</td><td>Süper Devreleri (Austin, Texas)</td><td>SİYAH DVD Yazıcılı Kurumsal Sınıf 4 Kanallı H.264 güvenlik DVR</td><td>Yüksek veri kapasitesi</td></tr><tr><td>Talaş</td><td></td><td></td><td>Yatak malzemesiyle aynı </td></tr></tbody></table>

inchworming: btbr a novel motor stereotipi<em&gt; t<sup&gt; +</sup&gt; itpr3<sup&gt; tf</sup</emotizm&gt; / j fare modeli

Inchworming: A Novel Motor Stereotypy in the BTBR T+ Itpr3tf/J Mouse Model of Autism

Otizm Spektrum Bozukluğu (ASD) kısıtlı ilgi azalmış karşılıklı sosyal etkileşim, anormal iletişim ve tekrarlayıcı davranışlar ile karakterize bir davranışsal tanımlanan nörogelişimsel bozukluktur. Tanı, klinik kriterlere dayalı olarak, bu heterojen hastalığın potansiyel olarak ilgili kemirgen modelleri ideal bu farklı davranış özellikleri özetlemek gerekir. BTBR T + Itpr3 tf / J (BTBR) fare gibi artan tımar yanı sıra bilişsel kararlılık gibi tekrarlayıcı davranışlar sergileme, ASD kurulmuş bir hayvan modelidir. Sosyal etkileşim ve ilgi açısından, çocuk oyun Test ASD birden kemirgen modellerinde istihdam edilmiştir. Burada, biz BTBR fareler talaş yataklar içeren bir çocuk sosyal etkileşim muhafaza test edilir, onlar bir tekrarlayan senkron kazma hareketini göstermek olduğunu göstermektedir. Olarak adlandırılan bu tekrar eden motor davranışları, &quot;inchworming,&quot; seçildizemin üzerinde yatay hareket ederken fareler tarafından sergilenen hareketlerin stereotip doğası çünkü. Inchworming fareler içe ve dışa doğru bir hareket tek bir minimum performans, yatak değiştirmesi için eşzamanlı olarak onların ön ve arka-uzuvları kullanmanız gerekir. BTBR ve C56BL/6J (B6) farenin her ikisi de bu davranışı sergiler, ancak BTBR fareler önemli ölçüde daha yüksek süresini ve sıklığını inchworming ve bir muhafaza tabakalı yerleştirildiğinde inchworming başlatmak için azalmış bir gecikme göstermektedir. Bu yeni tanımlanan davranışı kolaylıkla ASD hayvan modellerinde, ölçülebilen bir tekrarlayan motorlu stereotipi bir ölçüsünü sağlar sonucuna varıldı.

Burada açıklanan çocuk oyun testinin değiştirilmiş bir versiyonu gözlemlemek ve yeni tekrarlayan kazma davranış inchworming adlandırılır analiz etmek için kullanılabilir. Inchworming B6 kontrollerden daha BTBR fareler tarafından çok daha büyük ölçüde sergilenmektedir. Tipik bir 10 dk oturumda, BTBR fareler yaklaşık 5 dakika, ya da gözlem döneminin yarısı kadar (talaş yatak değiştirmesi için bir çaba pençeleri senkron içe ve dışa doğru hareket) ayrı inchworming davranışı gösterecektir. Ayrıca, inchworm için gecikme BTBR ...

Inchworming yeterli odun talaşı ile bir test kafese konulduğunda BTBR T + Itpr 3TF / J (BTBR) fareler tarafından görüntülenen bir çok tekrarlı senkron kazma harekettir. Bu prosedür, çocuk sosyal etkileşim protokolünün bir modifikasyonu olup Otizm Spektrum Bozukluğu ile ilgili tekrarlayan motorlu stereotipileri değerlendirmek için burada kullanılır.

Inchworming: BTBR A Novel Motor Stereotipi<em&gt; T<sup&gt; +</sup&gt; Itpr3<sup&gt; Tf</sup</emOtizm&gt; / J Fare Modeli

Autism Spectrum Disorder (ASD) is a behaviorally defined neurodevelopmental disorder characterized by decreased reciprocal social interaction, abnormal ...

Bu prosedürün genel amacı, yeni bir motor stereotipine ait olan inch worming (tırtıl yürüyüşü) davranışını gözlemlemek için modifiye edilmiş bir juvenil oyun testinden yararlanmaktır. Bu işlem, öncelikle test başlamadan 12 saat önce her bir fareyi bağımsız yiyecek ve su ile sosyal olarak izole ederek gerçekleştirilir. İkinci adım ise video kamerasının test kafesine 45 derecelik bir açıyla yerleştirilmesidir.Ardından, izole edilen fareler çiftler halinde, karanlık ortamda 11 dakika boyunca video kaydının alındığı bölmeye yerleştirilir. Son adım, "inch worming" (tırtıl yürüyüşü) davranışının süresini, sıklığını ve başlangıç gecikmesini ölçmek için videonun analiz edilmesidir. Nihayetinde, bu yöntem motor nöropatilerin analizine olanak tanır ve yeni terapötik müdahalelerin test edilmesi için bir gösterge olarak kullanılabilir.Bu yöntem, otizm alanındaki motor stereotipilerin insidansları ve düzenlenmesi gibi temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Davranışsal fenotipin tanımlanmasının zor olması ve inch worming davranışının hızlı ve tekrarlayıcı bir şekilde gerçekleşmesi nedeniyle, bu prosedürün görsel gösterimi görevin öğrenilmesi açısından kritiktir. BTBR ve black six farelerini, gece boyunca 12 saat boyunca ayrı kafeslerde izole ederek prosedür için hazırlayın.Bu çalışmada kullanılan BTBR farelerinin, test öncesinde farelerde görülen otizm spektrum bozukluklarının tüm temel özelliklerini sergilediği doğrulanmalıdır; kontrol grubu olarak black six fareler kullanılır. Deney gününde, hayvanların yeni ortama alışabilmeleri için izole edilmiş fareleri testten 30 dakika önce davranışsal analiz odasına yerleştirin. Ardından, çıkarılabilir kapaklı 30 by 30 santimetre boyutundaki pleksiglas kutuyu masanın üzerine çapraz şekilde yerleştirin.Test odasında, parlamayı en aza indirmek için kutuyu bir kızılötesi ışık kullanarak arkadan aydınlatın. Ardından, bölmenin tüm tabanını ve fareyi kaydedebilmesi için kızılötesi özelliklere ve yüksek yakınlaştırma fonksiyonuna sahip bir video kamerasını 45 derecelik bir açıyla konumlandırın. Farelerin tüm kutu boyunca görüntülenebilmesi için kamerayı bölmeye odaklayın.Kutu ve kamera kurulduktan sonra, kutunun tüm tabanını yaklaşık bir inç derinliğinde olacak şekilde talaş altlıkla kaplayın. Aynı anda iki BTBR veya siyah altı faresini test bölmesine yerleştirin ve test odasındaki ışıkları kapatın. Ardından, kayıt için video kamerayı başlatın ve farelerin davranışlarını etkilememek veya deney üzerinde nüfuz oluşturmamak için odadan çıkın.Aktiviteyi 11 dakika boyunca kaydedin. Kayıt tamamlandığında, test odasına tekrar girin ve fareleri orijinal kafeslerine geri koyun. Talaş altlığını atın.Tüm test kutusunu %70 etanol ile yıkayın ve ardından test bölmesinin tabanına yaklaşık bir inç derinliğinde yeni talaş altlık yerleştirin. Tüm prosedürü geri kalan ilgili suş çiftleri için tekrarlayın ve fareleri orijinal ev kafeslerine geri götürün. İşlem tamamlandığında, "inch worming" verilerinin güvenilirliğini doğrulamak için prosedürü sonraki günlerde farklı BTBR ve black six ilgili suş çift kombinasyonları ile tekrarlayın.Bu, gözlemlenen davranışın kafesteki belirli bir partnerden etkilenmemesini sağlayacaktır. Tırtıl hareketinin toplam süresini, frekansını ve gecikme süresini belirlemek için her videoyu, her fare için bir kez olmak üzere toplamda iki kez manuel olarak izleyin ve puanlayın. Videolarda.Her videoyu, üçüncü saniye zaman noktasından başlayarak 10 dakikaya kadar 10 dakika boyunca analiz edin. Üç saniye. İnç solucanı hareketini (inch worming), hayvanın ön ve arka ayaklarının eş zamanlı olarak içeri ve dışarı doğru hareketi ve yatağı etkili bir şekilde yer değiştiren, en az bir eş zamanlı içeri ve ardından dışarı doğru hareket olarak tanımlayın. İnç solucanı hareketi süresini, her bir farenin bu davranışla meşgul olduğu toplam süre olarak kaydedin.İnç solucanı hareketinin (inch worming) bu yönünü puanlamak için başlatılıp durdurulabilen bir zamanlayıcı kullanın. Fare inç solucanı hareketine başladığında zamanlamayı başlatın ve fare durduğunda zamanlayıcıyı durdurun. Fare tekrar inç solucanı hareketi yapmaya başlarsa, zamanlayıcıyı yeniden başlatın ve fare tekrar durana kadar çalıştırın.Bu işlem, 0 ile 10 dakika arasında bir kaşıma süresi puanı oluşturacaktır. Kaşıma frekansını, farenin kaşıma davranışını sergilediği sayı olarak tanımlayın. 10 dakikalık gözlem süresince, farenin her başladığı ve durduğu an için tek bir sayım kaydedilir.İnç solucanı hareketi (inch worming). İnç solucanı hareketine kadar olan gecikme süresini, ilk inç solucanı hareketinin başlangıcından önce geçen süre olarak tanımlayın. Zamanlayıcıyı video başladığında başlatın ve fare ilk kez inç solucanı hareketi yaptığında durdurun.Fare inchworm (tırtıl yürüyüşü) davranışını sergilemezse, inchworm davranışına kadar geçen süre 10 dakika olarak kaydedilir. Ardından, videodaki her bir fare için toplam inchworm frekansı ve süresi hesaplanır. İki farenin ortalaması, o video için toplam frekans ve süre olarak kullanılır.Ardından, çiftteki ilk fare için inchworm davranışının başlangıcına kadar geçen süreyi (latans) belirleyin. Söz konusu fare çifti için, sonuçların inchworm davranışını sergileyen fare popülasyonuyla ilgili olduğundan emin olmak amacıyla, test süresi boyunca inchworm davranışı göstermeyen fareleri örnek popülasyondan çıkarın. Analizde, her bir deneysel grup için ortalama kazma süresini, sıklığını ve kazmaya başlama latansını hesaplayın; ardından deneysel gruplardaki suşlar arasındaki verileri karşılaştırmak için ANOVA veya t-testleri kullanın. İkinci test gününün ardından, gösterilen verilerde sonraki deneme etkilerinin veya eşleştirme etkilerinin olmadığını doğrulamak için tekrarlanan ölçümlü ANOVA kullanın.BTBR ve black six fare çiftleri tarafından sergilenen tırtıl yürüyüşünün (inchworm) ortalama frekansı, süresi ve latansı burada sunulmuştur. BTBR suşu, black six kontrol suşuna kıyasla anlamlı derecede daha yüksek bir tırtıl yürüyüşü frekansı ve süresinin yanı sıra anlamlı derecede daha kısa bir latans sergilemiştir. Bu testler farklı eşleşmelerle tekrarlandığında anlamlı bir fark bulunmamış, böylece etkilerin ne belirli fare eşleşmelerine ne de testlerin tekrarlanmasına bağlı olmadığı doğrulanmıştır. Bu prosedür uygulanırken, tırtıl yürüyüşünün yalnızca hayvanın ön ve arka ayaklarının senkronize içe ve dışa hareketi şeklinde puanlanması gerektiğini hatırlamak önemlidir. Bu prosedürde uzmanlaşıldıktan sonra.Stereotipik davranışlar için terapötik hedefler gibi ek soruları incelemek amacıyla, paradigma ilaç uygulaması gibi diğer yöntemlerle genişletilebilir.

inchworming-novel-motor-stereotypy-btbr-t-itpr3tfj-mouse-model

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Bu video, vahşi tip veya ALS-mutant insan TDP-43 proteinini eksprese eden C. elegans'daki motor disfonksiyonu değerlendirmek için bir radyal hareket testinin kullanımını göstermektedir. Farklı seviyelerde vahşi tip veya mutant TDP-43 ekspresyonuna sahip solucanların sürünmesine izin verilir ve hareketleri, tahlil plakası üzerindeki merkezi noktadan kat edilen radyal mesafe ile ölçülür. Test, farklı C. elegans suşlarının kat ettiği mesafeye bağlı olarak hafif, orta ve şiddetli motor bozukluklar...

C. elegans Modellerinde Motor Bozukluğun Radyal Hareket Testi Kullanılarak Değerlendirilmesi

Hastalık, kafa travması, genetik modifikasyonlar ve farelerin ilaçlarla tedavisi davranış üzerinde derin etkilere sahip olabilir. Mermer gömme ve yuva parçalama gibi iyi karakterize edilmiş ve doğrulanmış yaklaşımlar kullanılarak, kompulsif benzeri davranışlar, insan obsesif-kompulsif bozukluğu ve otizm spektrum bozukluğu modelleri olarak farelerde doğru bir şekilde belgelenebilir.

Farelerde Tekrarlanan, Kompulsif gibi Davranışlarının Testler gibi mermer Burying ve Nestlet Parçalama

Bu makale, yetişkin farelerde kolonik motilitenin nöral regülasyonundaki değişiklikleri tanımlamak için bir video görüntüleme tekniği ve yüksek çözünürlüklü uzay-zamansal haritalamayı açıklamaktadır. Gastrointestinal (GI) fonksiyon üzerindeki ince etkiler, GI hastalığı hakkındaki anlayışımızı ilerletmek için izole doku preparatlarında bu yaklaşım kullanılarak tespit edilebilir.

Video Görüntüleme ve Spatiotemporal Haritalar Fare Gastrointestinal Motilite Analiz

Fare ultrasonik seslendirmeleri, nöropsikiyatrik bozukluklar için fare modellerinde sesli iletişim eksikliklerinin genetik temellerini modellemek için vekil olarak kullanılır. Mevcut protokol, yavrulardan (gelişim boyunca) ve yetişkin farelerden (aynı cinsiyetten etkileşimler, erkek-kızgınlık dişi etkileşimleri) ultrasonik seslendirmeleri güvenilir bir şekilde ortaya çıkaran üç deneysel bağlamı açıklamaktadır.

Fare Ultrasonik seslenmelere kayıt Sosyal İletişim değerlendirin

Yüksek dereceli kısıtlı, tekrarlayan davranışlar (RRB'ler) etkilenen bireylerin yaşamlarını bozar.  Bu davranışların kemirgenlerde modellenmesi zordur ve RRB'ler için potansiyel tedavilere veya müdahalelere yönelik temel biyomedikal araştırmaları zorlaştırır.  Burada, farelerde daha yüksek dereceli RRB'ler için potansiyel bir test olarak yeni nesne keşfini tanımlıyoruz.

Farelerde Yüksek mertebeden Tekrarlanan Davranışlar için bir potansiyel Testi olarak yeni nesne Keşif

Özgürce davranan sıçanlarda akut ve kronik deneysel tik ekspresyon modelleri üretmek için protokoller sunuyoruz. Modeller striatal kanül implantasyonu ve sonraki GABAA antagonist uygulamasına dayanmaktadır. Akut model geçici enjeksiyonlar kullanırken, kronik model deri altı implante edilmiş bir mini-ozmotik pompa aracılığıyla uzun süreli infüzyonlar kullanır.

Sıçanlarda Motor Tic Ekspresyonunun Akut ve Kronik Deneysel Modellerinin Oluşturulması

Bu protokol, C. elegans amyotrofik lateral skleroz modellerinde hafif, orta ve şiddetli motor bozukluk arasında ayrım yapmak için iki hassas tahlil, C. elegans suşları için genel yarar ile değiştirilmiş hareketlilik ile açıklanmaktadır.

C. elegans Amyotrofik Lateral Skleroz Modellerinde Motor Bozukluğun Değerlendirilmesi

Bu el yazması, bir Angelman sendromlu fare modelini doğrulamak için bir dizi yüksek oranda tekrarlanabilir davranış testi sunmaktadır.

Angelman Sendromlu Bir Fare Modelinin Davranışsal Karakterizasyonu

Otizm Spektrum Bozukluğu (OSB), bozulmuş sosyal ve iletişimsel davranış ve tekrarlayan davranışların ortaya çıkması ile ilişkilidir. Drosophila modelinde ASD genleri ve davranışsal eksiklikler arasındaki ilişkiyi incelemek için, bu yazıda sosyal boşluk, saldırganlık, kur yapma, tımar etme ve alışkanlık davranışını test etmek için beş davranışsal paradigma açıklanmaktadır.

Otizm Spektrum Bozukluğunun Drosophila Modelinde Davranışsal Değerlendirme Paradigmaları

Kemirgen modelleri, otizm spektrum bozukluğu (ASD) ile ilgili temel davranışları incelemek için değerli araçlardır. Bu makalede, farelerde ASD'nin temel özelliklerini modellemek için iki davranış testini açıklıyoruz: tekrarlayan davranışları değerlendiren kendi kendini tımar etme ve sosyal bozuklukları belgeleyen üç odacıklı sosyal etkileşim testi.

Farelerde Otistik Benzeri Davranışları Değerlendirme Stratejileri

Bu protokol, tüp testini kullanarak kemirgenlerde sosyal baskınlığı değerlendirmek için davranışsal bir testi tanımlar. Sosyal baskınlık zaman içinde sabit kalır ve çeşitli gelişimsel ve nörolojik bozukluk modelleri sağlam sosyal baskınlık anormallikleri sergiler. Bu nedenle, tüp testi, mekanik çalışmalar veya klinik öncesi terapötik tarama için uygun bir sonuç ölçüsü olarak hizmet eder.

Tüp Testi Kullanılarak Fare Modellerinde Sosyal Baskınlığın Değerlendirilmesi

Öğrenin, BTBR farelerinde tekrarlayıcı motor stereotipilerini değiştirilmiş juvenile play test ile değerlendirmeyi. Bu yöntem otizm spektrum bozukluğu araştırmalarında motor davranışları analiz etmeye yardımcı olur.

Inchworming: BTBR A Novel Motor Stereotipi

Daha fazla video keşfet