Ağaç Dokuların içinde eklembacaklı ve Mikrobiyal Toplulukları incelenmesi için Tekniği
16 Kasım 2014
Bozulmamış ağaç floemini korumak ve gözlem için hazırlamak için bir teknik sağlıyoruz. Eklembacaklıların, mikropların ve floem dokularında yaşayan diğer organizmaların tanıtılmasına ve gözlemlenmesine izin veren floem sandviç adı verilen bir aparat oluşturuyoruz.
Bu prosedürün genel amacı, eklembacaklıların, mikropların ve düşme dokusunda yaşayan diğer organizmaların tanıtılmasına ve gözlemlenmesine izin veren AOL sandviçi adı verilen bir aparat oluşturmaktır. Sağlanan protokol bazen küçük farklılıklarla, araştırmacılar ve eğitimciler için kabuk böcekleri, akarlar, Nematodlar ve mantarları incelemek için etkili bir araç olmuştur. İlk olarak, uygun bir ağaç bulunur.
Daha sonra F flom tabakasını ortaya çıkarmak için kabuk çıkarılır. Flom çıkarıldıktan sonra laboratuvara geri getirilir veya iki parça pleksiglas arasına yerleştirilir. Mühürlendikten ve sıkıca kenetlendikten sonra, organizmayı tanıtmaya hazırsınız.
İncelenen çam ağaçları, birkaç milimetre kalınlığında olabilen belirgin bir akış tabakasına sahiptir. İncelenen organizma, hangi F akışı türünün gerekli olduğunu belirleyecektir. Burada, Kuzey Arizona'da bir Ponderosa çam ormanındayız.
Mütevazı büyüklükte, büyük bir tacı ve birkaç alt dalı olan ideal bir ağaç arıyoruz. Burada uygun bir ağaç bulduk. Bu özellikler muhtemelen kalın ve çıkarılması daha kolay bir akış sağlayacaktır, çünkü akış çıkarılırken her dalın etrafının kesilmesi gerekir.
İşte bir ağacı hasat etmek için kullandığımız Ekipmanlara bir örnek. Unutmayın, bir ağacı doldurmak tehlikelidir ve yalnızca uygun güvenlik donanımına sahip deneyimli bir kişi tarafından yapılmalıdır. Ağaç güvenli bir şekilde yere düştükten sonra dalları çıkarmaya başlayın.
Daha sonra topu, ağacın çapına bağlı olarak genellikle altı ila sekiz fit civarında yönetilebilir parçalar halinde kesin. Şimdi kabuğu çıkarma zamanı. İşte bunu başarmak için kullandığımız araçlara bir örnek.
John Ice bu işlem sırasında vazgeçilmezdir, beyaz veya açık ten rengi veya akış tabakasını gösteren görünür hale gelene kadar kabuğu dikkatlice kazıyın. Bu katmanı oymamak önemlidir çünkü daha sonra kullanışlılığını büyük ölçüde azaltır. Ağacın bir kısmı yeterince soyulduktan sonra, fullam parçasını kesmek için bir bıçak kullanın.
Gerekirse alt tarafı keserken bu tabakayı dikkatlice yukarı çekin. Bazı ağaçların düşenleri çıkarmanın diğerlerinden daha kolay olduğunu unutmayın. Sabır anahtardır.
Zor bir ağaçla çalışırken, yaz genellikle düşenleri çıkarmak için yılın daha kolay bir zamanıdır. Plastik torbada beş ila yedi parça topladığımızda, bunu sahaya getirdiğimiz bir vakumlu mühürleme torbasına aktarıyoruz. Bu torbaları donma noktasının biraz üzerinde saklamak en iyisidir.
Şimdi bu Protokolün saha bileşenini tamamladık ve sandviçi inşa etmek için laboratuvara geri döndük. İşte sandviçi yapmak için kullandığımız şey. Alt kısım boyunca çeşitli pleksiglas plakalar ve çiftler vardır.
Kenarları kapatmak için paraform kullanılır ve pleksiglas ile akış arasında boşluk kalmamasını sağlamak için kelepçeler kullanılır. Pleksiglas parçalar kesildikten ve delindikten sonra, %90 veya daha fazla sterilize edilirler. Etanol, yeni bir akış ve boyut parçasını çıkararak sandviçi oluşturmaya başlar.
Pleksiglas parçası için uygundur. Pleksiglas yerine cam da kullanılabilir. Farklı organizmalara ve deneme uzunluklarına uyacak şekilde çeşitli boyutlarda sandviçler de yapılabilir.
Örneğin, bir çift kabuk böceği, bir ay boyunca dört metre karelik bir düşmüş parça kullanabilir, ancak çalışma birkaç gün içinde gerçekleşirse yalnızca bir Demetre kare parçaya ihtiyaç duyacaktır. Aynı anda birden fazla organizmayı tanıtmak için pleksiglastaki giriş noktalarının sayısını da değiştirebileceğinizi unutmayın. Bu, farklı türlerin rekabetini veya avlanmasını gözlemlemek için kullanışlıdır.
Şimdi, kenarları kapatmak için iki inçlik paraform kullanılıyor. Sızdırmazlık için G olmayan yapıştırma epoksi veya vazelin gibi başka malzemeler de kullanılabilir. Ardından, pleksiglası akış katmanına sıkıca tutmak için kenarın etrafına yeterli sayıda kelepçe yerleştirin.
Artık Organizma çalışmasını tanıtmaya hazırız. Laboratuvarımızda, kabuk böceklerini ve ilişkili organizmaları gözlemlemek için genellikle Sağlanan protokolü kullanırız. Diğer birçok şeyin yanı sıra günlük tünel açma uzunluğu ve yumurta üretimi gibi şeyleri gözlemlemek için harika bir fırsat sağlar.
Ayrıca kimyasal emisyonları çıkarabilir, kıvılcım böceklerini çıkarabilir, daha sonra üretebilir ve analiz edebiliriz veya bir tedavi başlatabilir ve tepkiyi gözlemleyebiliriz. Burada, bir kabuk böceği akustik bir tedaviden uzaklaşmaya çalışıyor. Bu protokolü kullanarak akarları, nematodları ve böcek avcılarını da gözlemledik.
Bu videoyu izledikten sonra, uçan bir sandviç yapabilmeli ve özel çalışma ihtiyaçlarınıza uyacak şekilde değiştirebilmelisiniz. Etkili bir araştırma aracı olmasının yanı sıra, bu prosedür ilkokuldan üniversite düzeyine kadar öğrenciler için eğitim ve keşif amaçlı mükemmeldir.
Genel Bakış
Bu makale, ağaç floeminin korunması ve gözlem için hazırlanmasına yönelik bir yöntemi sunmaktadır. Teknik, floem dokularında yaşayan çeşitli organizmaların incelenmesini kolaylaştıran bir "floem sandviçi" oluşturmayı içermektedir.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nörobilim
- Ekoloji
- Entomoloji
Arka Plan
- Floem, ağaçlarda çeşitli organizmaları destekleyen hayati bir dokudur.
- Floem içindeki etkileşimlerin anlaşılması, ekolojik dinamikler hakkında bilgiler sağlayabilir.
- Bu yöntem, söz konusu etkileşimlerin kontrollü bir şekilde gözlemlenmesine olanak tanır.
- Araştırmalar; kabuk böcekleri, akarlar, nematodlar ve mantarların incelenmesini kapsayabilir.
Çalışmanın Amacı
- Ağaç floemindeki organizmaları gözlemlemek için güvenilir bir yöntem geliştirmek.
- Floemde yaşayan türlerle ilgili araştırma ve eğitim fırsatlarını kolaylaştırmak.
- Orman ekosistemlerindeki ekolojik ilişkilerin anlaşılmasını geliştirmek.
Kullanılan Yöntemler
- Floem ekstraksiyonu için uygun ağaçların tanımlanması ve seçimi.
- Floem tabakasına erişmek için kabuğun dikkatlice çıkarılması.
- Pleksiglas ve parafilm kullanılarak bir floem sandviçinin oluşturulması.
- Gözlem amacıyla çalışma organizmalarının hazırlanan floem sandviçine yerleştirilmesi.
Ana Sonuçlar
- Floem sandviç yöntemi, çeşitli organizmaların incelenmesine etkili bir şekilde olanak tanır.
- Araştırmacılar, tünelleme ve üreme gibi davranışları gözlemleyebilirler.
- Bu yöntem, farklı türlere ve araştırma ihtiyaçlarına uyarlanabilir.
- Hem araştırma hem de eğitim amaçları için değerli bir araç görevi görür.
Sonuçlar
- Floem sandviçi, çok yönlü ve etkili bir araştırma aracıdır.
- Bu teknik, ekolojik etkileşimlerin anlaşılmasını geliştirir.
- Geniş bir eğitim ortamı yelpazesi için uygundur.
Sıkça Sorulan Sorular
Yönetici Sektörel Uygunluğu
Ağaç dokuları içindeki eklembacaklı ve mikrobiyal toplulukların incelenmesi, biyopestisid geliştirme ve orman sağlığı yönetimine ışık tutabilecek ekolojik etkileşimler hakkında bilgiler sağlar. Floem sandviç tekniği, organizma davranışlarının kontrollü bir şekilde gözlemlenmesine olanak tanıyarak zararlı kontrol araştırmalarında hedef doğrulamasını destekler. Bu yaklaşım, translasyonel biyobelirteç tanımlamasıyla ilgili konak-patojen ve konak-böcek dinamiklerini netleştirerek erken evre keşif süreçlerindeki risklerin azaltılmasına yardımcı olur.
Biyofarma Ar-Ge'sinde Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- Bilimsel Değer: Kontrollü bir floem ortamında eklem bacaklıların beslenme davranışlarını ve yaşam öyküsü özelliklerini gözlemleyerek terapötik hipotezlerin sorgulanmasına olanak tanır.
- Operasyonel Değer: Organizma etkileşimlerinin doğrudan gözlemlenmesi yoluyla biyolojik risk azaltımını destekleyerek hedef doğrulamadaki mekanistik belirsizliği azaltır.
- Öngörücü Değer: Tünelleme uzunluğunu, yumurta üretimini ve organizmaların tedavilere verdiği yanıtları nicelendirerek öngörücü güveni kolaylaştırır.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- Analiz Hazırlığı: Floem bütünlüğünü koruyarak ve tekrarlanabilir organizma girişini mümkün kılarak, onaylanmış biyolojik sistemleri sonraki iş akışları için hazırlar.
- Kantitatif Çıktılar: Günlük tünelleme uzunluğu ve üreme çıktısı gibi bağımlı değişkenlerin ölçülmesine izin vererek analiz standardizasyonunu destekler.
- Ölçeklenebilirlik: Değişken sandviç boyutu ve ayarlanabilir giriş noktaları, farklı organizmalara ve deney sürelerine uyum sağlayarak platformun yeniden kullanımını artırır.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Hastalıkla İlgililik: Vektörle bulaşan hastalık çalışmalarını ilgilendiren organizma-ağaç dokusu etkileşimlerini modelleyerek, keşif sürecini preklinik doğrulama ile birbirine bağlar.
- Translasyonel Süreklilik: Organizmaların akustik veya kimyasal tedavilere verdiği yanıtların gözlemlenmesini sağlayarak, riske göre ayarlanmış ilerleme kararlarını destekler.
- Mekanistik Risk Azaltma: Kontrollü koşullar altında davranışsal ve gelişimsel özellikleri açıklığa kavuşturarak, öngörücü risk azaltma değerine odaklanır.
Boru Hattı ve İş Akışı Entegrasyonu
Yöntem, hipotez testinden öncü bileşik tanımlamaya kadar olan keşif sürekliliğinde yer alarak, erken aşama biyolojik risk azaltma ve analiz geliştirme iş akışlarını desteklemektedir.
- Keşif Biyolojisi: Floem dokuları içindeki organizma davranışlarının ve etkileşimlerinin gözlemlenmesine olanak tanıyarak hipotez testlerini destekler.
- Tarama: Tekrarlanabilir floem koruması ve delinmiş giriş noktaları aracılığıyla standartlaştırılmış organizma girişimi ile analiz hazırlığını tanımlar.
- Analizler: Ekiplerin koşulları ve tedavi yanıtlarını karşılaştırmalarına yardımcı olan tünel uzunluğu ve yumurta üretimi gibi nicel ölçümleri vurgular.
- Translasyonel Araştırma: Vektör kontrol çalışmaları için uygun olan müdahalelere karşı organizma yanıtlarını modelleyerek yöntemi preklinik sürekliliğe bağlar.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: Değişken sandviç boyutu, yeniden açılabilirlik ve çoklu organizma giriş kapasitesi nedeniyle yöntemi yeniden kullanılabilir bir yetkinlik olarak çerçeveler.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: Öngörücü güven, hedef doğrulaması, organizma-ağaç doku etkileşimlerindeki mekanistik belirsizliğin azaltılması.
- Operasyonel Değer: Ayarlanabilir sandviç tasarımı ve korunan floem bütünlüğü aracılığıyla standardizasyon, tekrarlanabilirlik ve ölçeklenebilirlik.
- Stratejik Değer: Haşere kontrolü ve vektör yönetimi programlarında daha iyi devam/durdur kararları, sermaye verimliliği ve azaltılmış geç evre biyolojik risk.
- Portföy Etkisi: Nicelleştirilmiş organizma davranışları ve tedavi yanıtlarına dayalı, riske göre ayarlanmış önceliklendirme ve ilerletme kararları.
Uygulama Hususları
- Uygun organizma seçimi ve gözlemi için entomoloji, mikrobiyoloji ve orman ekolojisi alanlarında bilimsel uzmanlık gereklidir.
- Enstrümantasyon ve analitik altyapı ihtiyaçları arasında pleksiglas plakalar, parafilm veya epoksi sızdırmazlık malzemeleri, kıskaçlar ve floem koruması için vakumlu sızdırmazlık sistemleri yer almaktadır.
- Ekipler arası standardizasyon gereksinimleri, laboratuvarlar genelinde tutarlı floem ekstraksiyon tekniklerini ve sızdırmaz ortam bakımını kapsamaktadır.
- Model sistemler arası adaptasyon hususları, organizma boyutuna ve çalışma süresine bağlı olarak sandviç boyutunun ve giriş noktası yoğunluğunun ayarlanmasını içerir.
- Pratik kısıtlamalar arasında, ağaç dokularını güvenli bir şekilde toplamak için deneyimli personele duyulan ihtiyaç ile ağaç türleri ve mevsimler arasında floem kalitesinde oluşabilecek potansiyel değişkenlikler bulunmaktadır.
