Karboksilik Asitler, Boronik Asitler ve Aminler nitel Kimlik haç fluorophores kullanarak

Bu prosedürün genel amacı, analitleri çeşitli bileşik sınıflarından analiz etmek ve kalitatif olarak ayırt etmek için haç biçimli geometriye dayanan küçük moleküllü flora dörtlüsünü kullanmaktır. Bu, önce bu haç biçimli sensörlerin çözeltilerinin birkaç farklı çözücüde hazırlanması ve böylece yüksek çözücüye bağımlı emisyonlarından yararlanılmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım, bu çözeltileri, katı olarak veya çözelti içinde eklenebilen karboksilik asitler, onik asitler veya organik aminler dahil olmak üzere ilgili analitlere maruz bırakmaktır.

Daha sonra, birleşik sensör analit çözeltileri 365 nanometre ultraviyole ışık altında ışınlanır ve görünür bölgede ışık yaymalarına neden olur. Bu emisyon renkleri, standart bir dijital fotoğrafçılık kurulumu kullanılarak fotoğraflanır. Son adım, farklı analit çözeltilerinin emisyonundaki kalitatif farklılıkları tespit etmek için kullanılan emisyon renk panellerinin oluşturulmasıdır.

Sonuç olarak, bu floresan yöntemi, ilaç ve gıda endüstrilerinde yaygın analitlerin hızlı bir şekilde tanımlanması için faydalı olacaktır. Bu tekniğin kromatografi gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, yüksek polar analitleri türev bir karara ihtiyaç duymadan doğrudan analiz edebilmesidir. Bu yöntem, iyi tanımlanmış bir bileşimin gerçek olup olmadığını veya tehlikeye atılıp atılmadığını hızlı bir şekilde belirlemek için kullanılabileceği rutin bir kalite kontrol alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir.

Bu yöntemin görsel gösterimi, yöntemin kendisi optik algılama kullandığından ve nihai uygulaması nedeniyle uzman olmayan operatörleri içereceğinden kritik öneme sahiptir. Prosedürü göstermek, Heidelberg'deki Buns Laboratuvarı'ndan Abel ve Houston Üniversitesi'ndeki laboratuvarımdan Rio Color Lire olacak. Her iki yüksek lisans öğrencisi de Önce 10 mililitrede 50 miligram, di kloro metan konsantrasyonunda Haç formlarının bir ila üç arasında taze stok çözeltileri hazırlar ve bir kenara koyun.

Altı adet 16 mililitrelik DR şişesinde 500 miligram karboksilik asit analitini tartın ve 16 mililitre di kloro, metan, etil asetat, asetonitril, nn, dimetilformamid, izopropil alkol veya metanol ekleyin. Daha sonra, her şişeye 20 mikrolitre haç biçimli stok çözeltisi ekleyin ve heterojen ise şişeyi sallayın, karşılık gelen çözeltinin çökmesine izin verin. Kapaksız şişeleri, kamera merceği ile numune şişeleri arasında 60 santimetre mesafe olacak şekilde UV lambasının altındaki bir cam plaka üzerine yerleştirin.

UV lambasını açın ve oda ışığını kapatın. Remisyon rengini yansıtan görüntüler üretmek için her çözelti için pozlama sürelerini 0,25 ila 15 saniye arasında değişen fotoğraflar çekin. Bunu takiben, di Kloro metan içinde haç biçimli dörtlünün negatif dördüncü azı dişi çözeltisine 1.0 çarpı 10 hazırlayın ve bir kenara koyun.

Daha sonra, 50 miligram analiti her biri üç mililitre Asetonitril içinde çözerek her bir onik asit analiti için beş ayrı çözelti hazırlayın. 1, 2, 4, tri kloro, benzin, di kloro, metan, siklo heine ve kloro benzin. Analit çözeltilerinin her birinin 1.8 mililitresini beş ayrı 10 x 10 milimetre kuvars küvetine aktarın.

Daha sonra, beş küvetin her birine önceden hazırlanmış haç biçimli çözeltiden 20 mikrolitre ekleyin ve homojen hale getirmek için iki çözeltiyi karıştırın. Herhangi bir yağış gözlenirse, ilgili çözeltinin çökelmesine izin verin. Beş Q veterinerini de bir cam tabağa yerleştirin ve üstten ışınlayın.

Elde taşınan bir 365 nanometre UV lambası kullanarak, odanın karanlık olduğundan emin olun ve kamera merceği ile küvetler arasında 45 santimetre mesafe ve 0,5 saniyelik bir deklanşör hızı ile çözeltilerin emisyon renklerinin dijital bir fotoğrafını hemen çekin. Daha sonra, Asetonitril 1 2 4'te haç biçimli dördün negatif altı molar çözeltisine 1.0 çarpı 10'dan en az 80 mililitre hazırlayın, tri kloro benzen sikloheksan di kloro metan ve kloroform, 152.6 miligram iki altı DI klorofil onik asidi her birinin 40 mililitresinde çözer. 97.6 miligram fenil onik asidi, haç biçimindeki çözeltilerin her birinin 40 mililitresinde ayrı ayrı çözün.

Daha sonra istenen amin analitinin 40 miligramını her bir onik asit haç formu çözeltisinin iki mililitresinde çözün. Her Amin analiti için, katkı maddesi olarak iki altı di klorofil onik asit içeren beş çözelti ve fenil onik asit içeren beş çözelti hazırlayın. Hazırlanan 10 çözeltinin alikotlarını 10 ayrı kuvars küvete aktarın.

İki beş vete setini bir cam plaka üzerine yerleştirin, elde taşınan bir UV ile 365 nanometrede ışınlayın ve bir görüntü işleme programı kullanarak daha önce açıklanan ayarları kullanarak hemen fotoğraf çekin. Fotoğraflanan her şişenin emisyon renklerinin dijital fotoğraflarından temsili bir kare segment kesin. Ardından bu kesikleri burada gösterilenlere benzer paneller halinde düzenleyin.

Emisyon rengindeki farklılıkların nicelleştirilmesi isteniyorsa, panellerden kırmızı yeşil mavi değerleri çıkarın ve ardından bir analitin diğerine göre emisyon renklerinin nispi standart sapmalarını elde etmek için bunları istatistiksel olarak işleyin. Aşağıdaki denklemi kullanın. Son olarak, bilinmeyen karboksilik asit analitlerini tanımlamak için denklemi kullanın ve bilinmeyen analit ile kalibrasyon veri setinin tüm maddeleri arasındaki sapmayı belirlemek için, altı farklı çözücüde haç biçimli Fluor bir ila üç kullanarak, floresan tepkilerin konsantrasyona bağlı olduğu bulundu ve resimde gösterilen bir karboksilik asidin yapısal kimliği.

İşte tüm flora dört çözücü karboksilik asit kombinasyonunun dijital olarak kaydedilen emisyon rengi. Bu dizi, analit başına 18 karakteristik emisyon rengi sergiler ve bu, emisyon renginin kırmızı yeşil mavi değerlerini kullanarak benzersiz bir şekilde karakterize etmek ve analit yapmak için kullanılabilir. Tüm analitler, birden 10'a kadar olan karboksilik asitlere göre ayırt edilebilir ve burada tamamen benzer bir prosedür kullanılarak otomatik korelasyon grafiğinde gösterildiği gibi tanımlanabilir.

B bir ila B dokuz arasındaki onik asitler, emisyon renk paneli ve burada gösterilen korelasyon grafiği ile kanıtlandığı gibi, haç biçimli dört kullanılarak birbirinden kolayca ayırt edilir. Aminlerin analizi, büyük miktarda onik asit katkı maddesi, iki altı di klorofil onik asit ve fenil onik asit içeren iki formda haç biçimli dört kompleks kullanılarak gerçekleştirilir. Emisyon renkleri saf haç formunkinden farklı olan bu kompleksler, amin analitlerine iki şekilde yanıt verebilir.

Pürinden daha bazik bir araç, haç biçimli dördü onik asit katkı maddeleri ile komplekslerinden uzaklaştırır, böylece saf karmaşık olmayan haç biçimli dördünün emisyon renklerini yeniden oluşturur. Öte yandan, daha az bazik türlerin, haç biçimli onik asit kompleksine onu yok etmeden bağlandığı görülmektedir ve bu olay, komplekslerin floresan emisyonunun modülasyonu ile sonuçlanır. Bu nedenle, dolaylı algılama metodolojisi, belirli bir eşiğin üzerindeki analitlerin artık birbirinden ayırt edilemediği bir seviyelendirme etkisi ile karakterize edilir. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde gerçekleştirilirse birkaç saat içinde yapılabilir.

Bu videoyu izledikten sonra, karboksilik asitleri, baroni asitlerini ve birkaç farklı çözücüden oluşan bir sette haç biçimli grip kuvveti kullanan basit bir kurulum kullanarak araçları nasıl analiz edeceğinizi iyi anlamış olmalısınız. Organik çözücüler ve UV lambaları ile çalışmanın tehlikeli olabileceğini ve iyi havalandırılan odaların ve gözlüklerin kullanılması gibi önlemlerin her zaman bu prosedür uygulanarak alınması gerektiğini unutmayın.