Name: Primer Ortotopik Glioma Xenografts Infiltratif Büyüme ve İsocitrat Dehidrogenaz I Mutasyonu Rekapitulate (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-14T13:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 43 s
Description: Öğrenin, primer ortotopik glioma ksenogreftleri oluşturarak immün yetmez farelerde tümör biyolojisini ve genetik değişiklikleri incelemeyi. Bu yöntem, malign glioma alt tiplerinin histopatolojik ve moleküler özelliklerini taklit eder.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Özellikle Vanderbilt Üniversitesi Tıp Merkezi'nde Moleküler Nöroşirürjik Doku Bankası için paha biçilmez araştırma materyalleri sağlayan hastalara borçluyuz. Doku Bankası'nı kuranlara, Reid C. Thompson MD'ye (baş araştırmacı), Cherryl Kinnard RN'ye (araştırma hemşiresi) ve Larry A. Pierce MS'e (yönetici) teşekkür ederiz. Histolojik hizmetler kısmen Vanderbilt Üniversitesi Tıp Merkezi (VUMC) Çeviri Patolojisi Paylaşılan Kaynağı (Vanderbilt-Ingram Kanser Merkezi'ne 5P30 CA068485 ödülü ile desteklenmektedir) tarafından gerçekleştirilmesiyle gerçeklenmiştir. Bu çalışma NINDS (1R21NS070139), Burroughs Wellcome Fonu ve VMC geliştirme fonlarından MKC'ye verilen hibelerle desteklenmiştir. MKC, Gazi İşleri Dairesi, Gaziler Sağlık İdaresi, Araştırma ve Geliştirme Ofisi, Biyomedikal Laboratuvarı Araştırma ve Geliştirme Bölümü tarafından 1 I01 BX000744-01 hibesi ile desteklenmektedir. İçerikler, Gazi İşleri Bakanlığı'nın veya Amerika Birleşik Devletleri Hükümeti'nin görüşlerini temsil etmez.

1. Tümör Hücre Süspansiyonunun Hazırlanması
Not: Primer ortotopik glioma ksinograftlarının kurulması ve sürdürülmesi için hasta materyali ve hayvanların kullanımı için uygun kurumsal onaylar gereklidir. Vanderbilt Üniversitesi Tıp Merkezi'nde, tanı amaçlı gerekli olandan daha fazla resected tümör materyali, bir araştırma dokusu deposu için hasta onayı ile toplanır. Örnekler randomize 5 haneli REDcap veritabanı numarası ile etiketlenir ve hastaya özgü tüm tanımlayıcılar kaldırılır. REDcap veritabanı, doku deposundaki her örnek için cinsiyet, yaş (yıl), ırk, sağkalım durumu, patoloji, kanser tedavileri, rezeksiyon yılı ve ilerleme süresini içeren düzenli klinik veriler içerir. Steriliteyi korumak ve birincil ksinograft yönteminin başarısını optimize etmek için, tüm reaktifler, buharla otoklavlanmış cerrahi aletler ve cerrahi bölge önceden monte edilmeli veya hazırlanmalıdır.
Not: Glioma örnekleri genellikle büyük miktarlarda miyelin ve döküntü içerir. Numune boyutuna bağlı olarak, miyelin ve döküntülerin yeterli şekilde giderilmesi için 4'ten fazla süreksiz gradyan tüpü kullanmak gerekebilir.
Not: İşlem, kalan veya çok az, açıkça görülebilen bir doku kalmadığında tamamlanır. Tritürasyon işlemi sırasında kabarcıkların tanıtılmasından kaçının.
Not: Ayrışmayı takiben hücre canlılığı tipik olarak %90 >. Daha düşük yükümlülükler, suboptimal doku elleçleme veya ameliyathaneden taşıma süresi, kriyoprezervasyon yöntemi veya papain ayrışma tekniği dahil olmak üzere birçok değişkeni yansıtabilir. Bununla birlikte, uygun hacimde yeterli sayıda canlı nakledilebileceği sürece, daha düşük hücresel canlılıklar hala yeterli olabilir. Her fare için 50.000-200.000 canlı hücre 2 μl hacimde implante edilir. Şırınga iğnesinin eğimli ucu nedeniyle, her enjeksiyon için şırıngaya yeterli malzemenin çekilebilmesini sağlamak için son hacme 5 μl hücre süspansiyonu eklenmelidir. Örneğin, 5 fare için 2 μl / fare enjekte etmek için son hacim 15 μl (15 μl = (5 x 2 μl) + 5 μl olmalıdır.
<ol><li>Laboratuvara taşınmak üzere buz üzerinde steril, kaplanmış bir kaba yeni resected, deidentified hasta materyali yerleştirin. Numuneyi doğrudan transplantasyon için işleyin veya sıvı nitrojende numuneyi sıvı nitrojende (aşağıya bakınız) sıvı nitrojende depolamak ve daha sonra kullanmak için kriyoprezite saklayın.</li>
	<li>Papain ayrıştırma çözeltilerini (papain çözeltisi, yıkama/proteaz inhibitör çözeltisi ve süreksiz gradyan çözeltisi) kit bileşenleri ve üretici tarafından sağlanan talimatlarla steril bir kaputta hazırlayın. Steril 15 ml polistiren konik tüpleri etiketleyin ve çözeltileri aşağıdaki gibi dağıtın:<ul>
<li>Tüp 1: 5 ml papain çözeltisi</li>
			<li>Tüp 2: 3 ml yıkama/proteaz inhibitörü çözeltisi</li>
			<li>Tüpler 3-6: Her biri süreksiz degrade çözeltisinin her biri 5 ml</li>
		</ul>
</li>
	<li>Glioma örneğini 5 ml papain çözeltisi ile tüp 1'e yerleştirin ve 10-20 dakikalık bir süre boyunca 5 ml pipetle tritüre edin.</li>
	<li>Malzemeyi 10 kez yukarı ve aşağı pipetlayın ve bir sonraki olgunlaşma döngüsünü başlatmadan önce malzemeyi oda sıcaklığında 2-3 dakika kuluçkaya yatırın.</li>
	<li>5 ml pipet ucunu konik tüpün altına yakın bir şekilde, her tritürasyon döngüsüyle birlikte, ucun son 2 döngü boyunca tüpün dibine değecek şekilde konumlandırın.</li>
	<li>Oda sıcaklığında 5 dakika boyunca 300 x g'da santrifüj. Süpernatantı çıkarın ve peletin 3 ml yıkama/ proteaz inhibitörü çözeltisinde 10x yukarı ve aşağı pipet.</li>
	<li>"Yerçekimi" dağıtım hızında ayarlanmış bir pipettör ile 5 ml süreksiz gradyan çözeltilerinin (tüpler 3-6) her biri üzerine eşit miktarda süspansiyonu dikkatlice katmanlayın.</li>
	<li>Tüpleri, hızlanma hızı en düşük ayara düşürülecek ve fren kapalı olacak şekilde sallanan kova rotorlu bir santrifüje yerleştirin. Oda sıcaklığında 12 dakika boyunca 76 x g'da santrifüj. Fren kapalıyken, santrifüjleme genellikle 20 dakika sonra tamamlanır.</li>
	<li>Süpernatant çıkarın, yeniden biriktirin ve her peleti 5 ml steril dengeli tuz çözeltisinde birleştirin ve hücreleri buza yerleştirin.</li>
	<li>Hücre süspansiyonunun bir kısmını (10-100 μl) çıkarın ve hemositometre ile trippan mavi dışlama ile canlı hücrelerin yoğunluğunu belirleyin.</li>
	<li>5 dakika boyunca 300 x g'da santrifüj. Süpernatant çıkarın ve hücre peletini μl başına 25.000-125.000 canlı hücre yoğunluğunda yeniden biriktirin.</li>
	<li>Hücre süspansiyonunun yeterli hacmini 200 μl mikrosantrifüj tüpüne (PCR tüpü) aktarın ve buza yerleştirin.</li>
</ol>2. Cerrahi Bölge ve Aletlerin Hazırlanması
Not: İşlem sırasında steril cerrahi eldivenler giyilir. Her kurumun gereksinimlerine bağlı olarak cerrahi önlük, kapak ve yüz koruyucu gerekebilir.
<ol><li>Hayvan hazırlama, çalışma alanı ve hayvan kurtarma için ayrılmış bitişik alanlarla kemirgen cerrahisi için dezenfekte edilmiş bir tezgah hazırlayın.</li>
	<li>Cerrahi aletleri buharlı otoklavda sterilize edin. Daha sonra, bir hayvandan diğerine geçerken aletleri flaş sterilize etmek için sıcak bir boncuk sterilizatörü kullanın.</li>
</ol>3. İndüksiyon, Anestezi ve Analjezi
Not: Farelerin uyuşturulmasından itibaren 15 dakikayı aşan ameliyatlar bir temas ısı kaynağı gerektirir. Hipotermiyi önlemek için, farelere ameliyat öncesi ve sonrası dönemlerde bir ısı kaynağı (dolaşımdaki sıcak su battaniyesi) sağlanır. 
<ol><li>Ketamin/ksilazine kokteylini indüksiyon anestezisi için hazırlayın, böylece her fare ketamin 100 mg / kg ve ksilazine 10 mg / kg, vücut ağırlığının gramı başına kokteylin 10 μl enjekte ederek.</li>
	<li>
Tablo 1. Anestezi kokteyli.
		<table><tbody>
<tr>
<td rowspan="2"></td>
					<td rowspan="2">Stok konsantrasyonu</td>
					<td colspan="3">Hazırlanacak birim </td>
				</tr>
<tr>
<td>bir fare</td>
					<td>beş fare</td>
					<td>on fare</td>
				</tr>
<tr>
<td>Ketamin</td>
					<td>100 mg/ml</td>
					<td>25 μl</td>
					<td>125 μl</td>
					<td>250 μl</td>
				</tr>
<tr>
<td>Xylazine</td>
					<td>100 mg/ml</td>
					<td>2,5 μl</td>
					<td>12,5 μl</td>
					<td>25 μl</td>
				</tr>
<tr>
<td>İsotonic salin</td>
					<td></td>
					<td>223 μl</td>
					<td>1.113 μl</td>
					<td>2.225 μl</td>
				</tr>
<tr>
<td colspan="2">toplam</td>
					<td>250 ul</td>
					<td>1.250 μl</td>
					<td>2.500 μl</td>
				</tr>
</tbody></table>
</li>
	<li>Stok çözeltisini (10 mg/ ml) 1:20 steril, pilojen içermeyen suda seyrelterek analjezi için ketoprofen çözeltisi hazırlayın, böylece her fare, çözeltinin gram vücut ağırlığı başına 10 μl enjekte ederek 5 mg / kg'lık bir doz alır.</li>
	<li>Presurgical ağırlığı tartın ve kaydedin. Bireysel fare ağırlıkları değişir, ancak genellikle 18-22 g arasında değişir.</li>
	<li>Bir insülin şırınnası ile intraperitoneal alana fare vücut ağırlığının gramı başına 10 μl ketamin / ksilazin kokteyli enjekte edin. Örneğin, 20 g fare için 200 μl enjekte edin.</li>
	<li>Farenin arka bacağın ayak parmağı çimdikle tamamen uyuşturulup uyuşturulmadığını belirleyin. Farenin artık kıstırıktan çekilmemeleri genellikle 3-5 dakika sürer.</li>
	<li>Bir insülin şırınnası ile kanadın gevşek cildine gram fare vücut ağırlığı başına 10 μl ketoprofen çözeltisi enjekte edin. Örneğin, 20 g fare için 200 μl enjekte edin.</li>
	<li>Saç kesme makası ile kafatasının üzerinde saç tıraşı yapın, açıkta kalan kafa derisini pamuk ucu aplikatörü kullanarak povidone-iyotla ovalayın ve ardından bir alkol pedini silin. Bu adımları tekrarlayın, povidone-iyot ovma ve alkol silme, iki kez daha.</li>
	<li>Farenin gözlerine oftalmik merhem uygulayın.</li>
	<li>Steril bir neşter bıçağı ile kulakların arkasından gözlerin hemen önüne uzanan 1 cm'lik bir orta çizgi kesiği yapın.</li>
	<li>Fareyi bir diseksiyon dürbününün altına yerleştirin ve dikiş çizgilerini tanımlamak için kafatasını ortaya çıkarın. Matkapla dairesel hareketler kullanarak, bregma'ya 2,5 mm yanal ve koronal dikişe 1 mm posterior bir çapak deliği ortala.</li>
</ol>4. intrakraniyal transplantasyon
Not: 2,5 μl'yi aşan enjeksiyon hacimleri fareler için ölümcül olabilir.
<ol><li>Üst kesici dişleri kesici diş çubuğunun üzerine bağlayarak ve burun kelepçesini uygulayarak fareyi stereotaktik bir çerçeveye yerleştirin, böylece kafatası nötr bir pozisyonda sıkıca tutulur.</li>
	<li>Süspansiyonu karıştırmak ve kabarcıkları ortadan kaldırmak için stereotaktik manipülatörün prob tutucusuna kenetlenmiş 10 μl Hamilton şırıngasına birkaç kez bir mikrosantrifüj tüpündeki hücrelerin 5-10 μl'lik kısmını yukarı ve aşağı çekin. Şırınnanın 2 μl (bir hayvana enjekte etmek için yeterli hacim) ile yüklenmesi için pistonu bastırın.</li>
	<li>Çapak deliğini açığa çıkarmak için cilt kesisinin yanal kenarını çekin ve mikromanipülatör ile iğneyi çapak deliğine sokun, böylece eğimli kısım kafatası yüzeyinin hemen altındadır.<ol>
<li>İğneyi 3 mm ilerletin ve enjeksiyon için bir alan oluşturmak için iğneyi 0,5 mm çekin.</li>
			<li>Pistonu yavaşça 30 sn'nin üzerinde ilerletin ve ardından iğnenin beyinde 2 dakika daha kalmasına izin verin. 0,5 mm yükselerek ve iğneyi beyinden çıkarmadan önce 30 saniye daha bekleyerek iğneyi yavaş yavaş çekin.</li>
		</ol>
</li>
	<li>Fareyi stereotaktik çerçeveden çıkarın ve yarayı bir otoklapla kapatın.</li>
	<li>Vücut sıcaklığını korumak ve mukoza zarlarının ve açıkta kalan dokuların (ayak tabanları) solunum düzenini ve rengini sürekli izlemek için fareyi bir ısıtma yastığına yerleştirin.</li>
	<li>Fareyi anesteziden (sternal ve ambülatör) tamamen iyileştikten sonra steril bir mikroisolatör kafesine yerleştirin ve hayvan barınma tesisine geri verin.</li>
</ol>5. İmplant sonrası Hayvan Bakımı ve Gözlemi
Not: Tümör engraftasyonunun ve infiltratif büyümenin en güvenilir göstergesi, kambur duruş ve pürüzlü saç önlüğü gelişimi eşliğinde kademeli, sürekli kilo kaybıdır. Nadir durumlarda, ataksi, parez ve nöbetleri içeren nörolojik eksiklikler not edilir. Ortotopik primer ksinograftlar oldukça invazivdir ve uzun bir süre boyunca gelişir. Fareler tipik olarak nakilden 3-6 ay sonra tümör büyümesi belirtileri gösterir.
<ol><li>Kesi yerinde yiyecek ve su alımı, davranış, tımar ve enfeksiyon belirtileri için her gün ortotopik ksinograftları olan fareleri gözlemleyin.</li>
	<li>Ameliyat sonrası ağrı veya sıkıntı görülürse ketoprofen (deri altından 5 mg/ kg, günde 1-2x) verin.</li>
	<li>Ameliyattan 8-10 gün sonra otoklapları çıkarın.</li>
	<li>Fareleri haftalık olarak tartın.</li>
	<li>Tümör engraftment belirti ve semptomlarını izleyin.</li>
</ol>6. Tümör Hasadı
Not: Bu yöntemle, ilk koronal dilim (#1) koku ampullerinin arka yönünü ve frontal lobların ön yönünü içerir. Engrafted tümör en çok sonraki 3 koronal dilimin sağ yarımküresinde (dilim #2, #3 ve #4) bol miktarda bulunur ve enjeksiyon görüşü rutin olarak koronal dilim #3 bulunur. Deneysel ihtiyaçlara bağlı olarak, malzeme tümör geçişi, donmuş doku bölümleri, formalin sabit parafin gömülü doku bölümleri, ayrışmış dokunun akış sitometrisi, hücre kültürü veya DNA, RNA veya protein analizi için lizatlar için kullanılabilir. Tümörün bazı bölümleri% 80-95 arasında değişen hücre canlılığı ile gelecekteki ihtiyaçlar için kriyopreziserved edilebilir.
<ol><li>Fareleri uzun süre karbondioksite maruz kalarak ötenazi ve ardından servikal çıkık.</li>
	<li>Beynin tabanındaki ötenazili farelerin kafasını daha büyük bir çift cerrahi makasla (foramen magnum seviyesi) çıkarın ve kafatasını tamamen ortaya çıkarmak için deriyi kesiden ileri çekin.</li>
	<li>Beyni çıkarın.<ol>
<li>Kafatasının sol tarafındaki oksipital kemiği kesmek için sol dış işitsel meatus seviyesine foramen magnum'un yanal yönüne bir çift ince cerrahi makas yerleştirin. Sağ tarafta aynı kesimi gerçekleştirin.</li>
			<li>Koronal düzlem boyunca oksipital kemiği bir dış işitsel meatustan diğerine kesin ve beyinciği ortaya çıkarmak için kemiği çıkarın.</li>
			<li>Burun kemik plakalarını gözlerin arasından kesin.</li>
			<li>Sagittal sütür boyunca burun kemik plakalarından bregmaya kadar arka arka kesim yaparak sagittal sütürünü kesin. Lambda'dan bregma'ya kadar ön kesim yaparak sagittal dikiş boyunca orta çizgi kesisini tamamlayın.</li>
			<li>Kafatasının beyne herhangi bir dural yapışıklıklarını yırtmak için her iki taraftaki sagittal açıklık boyunca ince bir çift tokanın ucunu dikkatlice yerleştirin ve ardından beyni ve koku ampullerini dorsally maruz bırakmak için iki kafatası yarısını yanal olarak soyun.</li>
			<li>Herhangi bir yapışıklık serbest için koku ampulleri ve kafatasının ventral yönü arasında tokaları kaydırın.</li>
			<li>Beynin geri çekilmesini sağlamak için kafatasını geriye doğru eğin, böylece optik ve diğer kraniyal sinirler açığa çıkar. Beyni steril PBS içeren bir tabağa salmak için kraniyal sinirleri koparın.</li>
		</ol>
</li>
	<li>Tartım spatulası olan beyni matris dilimleyiciye aktarın ve jiletlerle 2 mm koronal dilimler oluşturun.</li>
	<li>Koronal dilimleri daha fazla görsel inceleme ve daha fazla doku işleme için steril PBS içeren bir tabakta düzenleyin.</li>
</ol>7. Tümör Kriyoprezervasyonu
<ol><li>Kriyoprezervasyon ortamının bir stok çözeltisi hazırlayın.<ol>
<li>50 ml çoğalma takviyesi, 5 ml 100x penisilin ve streptomisin çözeltisi ve 450 ml bazal ortama% 0.2 heparin 450 μl ekleyin.</li>
			<li>Stok çözeltisi 4 °C'de ışıktan korunur.</li>
		</ol>
</li>
	<li>Kriyoprezervasyon ortamının çalışma çözümünü hazırlayın.<ol>
<li>47,5 ml kriyoprezervasyon ortamı ve 2,5 ml steril DMSO'yu 50 ml polipropilen konik tüpte birleştirin ve iyice karıştırın.</li>
			<li>Her bir cryovial için aliquot 1.0 ml çalışma çözeltisi ve ışıktan korunan 4 ° C'de saklayın.</li>
		</ol>
</li>
	<li>Xenografted beynin bir 2 mm'lik koronal dilimini buz üzerinde kriyoprezervasyon ortamı içeren bir cryovial içine yerleştirin.</li>
	<li>Şişeyi sıkıca kaplayın ve -80 °C'de bir dondurucu kaba yerleştirin. Ertesi gün cryovial'ı daha uzun depolama için sıvı bir azot tankına aktarın.</li>
</ol>

<ol><li>Johnson, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationships+between+drug+activity+in+NCI+preclinical+in+vitro+and+in+vivo+models+and+early+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J%22%5BJournal%5D)">Relationships between drug activity in NCI preclinical in vitro and in vivo models and early clinical trials.</a> Br. J. 84, 1424-1431 (2001).</li>
<li>Witt Hamer, D. e, C, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genomic+profile+of+human+malignant+glioma+is+altered+early+in+primary+cell+culture+and+preserved+in+spheroids%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">The genomic profile of human malignant glioma is altered early in primary cell culture and preserved in spheroids.</a> Oncogene. 27, 2091-2096 (2008).</li>
<li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+stem+cells+derived+from+glioblastomas+cultured+in+bFGF+and+EGF+more+closely+mirror+the+phenotype+and+genotype+of+primary+tumors+than+do+serum-cultured+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Tumor stem cells derived from glioblastomas cultured in bFGF and EGF more closely mirror the phenotype and genotype of primary tumors than do serum-cultured cell lines.</a> Cancer Cell. 9, 391-403 (2006).</li>
<li>Pandita, A., Aldape, K. D., Zadeh, G., Guha, A., James, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrasting+in+vivo+and+in+vitro+fates+of+glioblastoma+cell+subpopulations+with+amplified+EGFR%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Chromosomes+Cancer%22%5BJournal%5D)">Contrasting in vivo and in vitro fates of glioblastoma cell subpopulations with amplified EGFR.</a> Genes Chromosomes Cancer. 39, 29-36 (2004).</li>
<li>Daniel, V. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+primary+xenograft+model+of+small-cell+lung+cancer+reveals+irreversible+changes+in+gene+expression+imposed+by+culture+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">A primary xenograft model of small-cell lung cancer reveals irreversible changes in gene expression imposed by culture in vitro.</a> Cancer Res. 69, 3364-3373 (2009).</li>
<li>Piaskowski, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioma+cells+showing+IDH1+mutation+cannot+be+propagated+in+standard+cell+culture+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Cancer%22%5BJournal%5D)">Glioma cells showing IDH1 mutation cannot be propagated in standard cell culture conditions.</a> Br. J. Cancer. 104, 968-970 (2011).</li>
<li>Vescovi, A. L., Galli, R., Reynolds, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+tumour+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev%22%5BJournal%5D)">Brain tumour stem cells.</a> Nat. Rev. 6, 425-436 (2006).</li>
<li>Sasai, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shh+pathway+activity+is+down-regulated+in+cultured+medulloblastoma+cells%3A+implications+for+preclinical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Shh pathway activity is down-regulated in cultured medulloblastoma cells: implications for preclinical studies.</a> Cancer Res. 66, 4215-4222 (2006).</li>
<li>Shu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+orthotopic+transplantation+of+fresh+surgical+specimen+preserves+CD133%2B+tumor+cells+in+clinically+relevant+mouse+models+of+medulloblastoma+and+glioma%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Direct orthotopic transplantation of fresh surgical specimen preserves CD133+ tumor cells in clinically relevant mouse models of medulloblastoma and glioma.</a> Stem Cells. 26, 1414-1424 (2008).</li>
<li>Suggitt, M., Bibby, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((50+years+of+preclinical+anticancer+drug+screening%3A+empirical+to+target-driven+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">50 years of preclinical anticancer drug screening: empirical to target-driven approaches.</a> Clin. Cancer Res. 11, 971-981 (2005).</li>
<li>Kerbel, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+tumor+xenografts+as+predictive+preclinical+models+for+anticancer+drug+activity+in+humans%3A+better+than+commonly+perceived-but+they+can+be+improved%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Biol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved.</a> Cancer Biol. Ther. 2, 134-139 (2003).</li>
<li>Park, C. Y., Tseng, D., Weissman, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cell-directed+therapies%3A+recent+data+from+the+laboratory+and+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cell-directed therapies: recent data from the laboratory and clinic.</a> Mol. Ther. 17, 219-230 (2009).</li>
<li>Carlson, B. L., Pokorny, J. L., Schroeder, M. A., Sarkaria, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment%2C+maintenance+and+in+vitro+and+in+vivo+applications+of+primary+human+glioblastoma+multiforme+%28GBM%29+xenograft+models+for+translational+biology+studies+and+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Protoc.+Pharmacol.+Chapter%22%5BJournal%5D)">Establishment, maintenance and in vitro and in vivo applications of primary human glioblastoma multiforme (GBM) xenograft models for translational biology studies and drug discovery.</a> Curr. Protoc. Pharmacol. Chapter. 14, (2011).</li>
<li>Hambardzumyan, D., Parada, L. F., Holland, E. C., Charest, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+modeling+of+gliomas+in+mice%3A+new+tools+to+tackle+old+problems%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Genetic modeling of gliomas in mice: new tools to tackle old problems.</a> Glia. 59, 1155-1168 (2011).</li>
<li>Sarangi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+inhibition+of+the+Hedgehog+pathway+in+established+malignant+glioma+xenografts+enhances+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Targeted inhibition of the Hedgehog pathway in established malignant glioma xenografts enhances survival.</a> Oncogene. 28, 3468-3476 (2009).</li>
<li>Valadez, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+Hedgehog+pathway+responsive+glioblastomas+by+isocitrate+dehydrogenase+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Identification of Hedgehog pathway responsive glioblastomas by isocitrate dehydrogenase mutation.</a> Cancer Lett. 328, 297-306 (2013).</li>
<li>Bar, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclopamine-mediated+hedgehog+pathway+inhibition+depletes+stem-like+cancer+cells+in+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Cyclopamine-mediated hedgehog pathway inhibition depletes stem-like cancer cells in glioblastoma.</a> Stem Cells. 25, 2524-2533 (2007).</li>
<li>Ehtesham, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligand-dependent+activation+of+the+hedgehog+pathway+in+glioma+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Ligand-dependent activation of the hedgehog pathway in glioma progenitor cells.</a> Oncogene. 26, 5752-5761 (2007).</li>
<li>Kelly, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oligodendroglioma+cell+lines+containing+t%281%3B19%29%28q10%3Bp10%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro-oncology%22%5BJournal%5D)">Oligodendroglioma cell lines containing t(1;19)(q10;p10.</a> Neuro-oncology. 12, 745-755 (2010).</li>
<li>Quintana, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+tumour+formation+by+single+human+melanoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Efficient tumour formation by single human melanoma cells.</a> Nature. 456, 593-598 (2008).</li>
<li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD%2FLtSz-scid+IL2R+gamma+null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> J. Immunol. 174, 6477-6489 (2005).</li>
<li>Singh, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+human+brain+tumour+initiating+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Identification of human brain tumour initiating cells.</a> Nature. 432, 396-401 (2004).</li>
</ol>

Yazarlar rakip finansal çıkarları olmadığını beyan ederler.

Kültürlü hücre hatları, ksinograftlar ve genetik olarak tasarlanmış fareler gliomaları modellemek için en yaygın yöntemlerdir ve her model sistemi için farklı faydalar ve sınırlamalar vardır3,13,14. Primer ortotopik glioma ksinograftlarının ilgili faydaları arasında yaygın gliomaları tipleyen infiltratif büyüme ve genetik değişikliklerin tutulması ve kültürlü glioma hücrelerinde bakımı son derece zor olabilecek önemli sinyal mekanizmaları sayılabilir. Örneğin, isocitrate dehidrogenaz mutasyonları ve S...

Malign gliomalar, beyinde ve bazen omurilikte meydana gelen merkezi sinir sisteminin primer glial tümörleridir. Gliomalar Dünya Sağlık Örgütü (WHO) tarafından astrositlere, oligodendrositlere veya ependymal hücrelere histolojik benzerliğe göre sınıflandırılır ve daha sonra malignitenin patolojik özellikleri için sayısal olarak (I ila IV) derecelendirilir. En sık görülen histolojik alt tipler astrositomlar, oligodendrogliomalar ve karışık oligoastrositomlardır. WHO'nun II ila IV sınıflarını kapsayan malign gliomalar invaziv büyüme ve mevcut tedavilere yeniden hesaplama ile karakterizedir. Amerika Birleşik Devletleri'nde her yıl yaklaşık 15.750 kişiye malign glioma tanısı konulmaktadır ve tahmini 12.740 hasta bu hastalığa yenik düşmektedir. Bu istatistikler, malign gliomaların özellikle ölümcül doğasını ve gelişmiş terapötik etkinlik için önemli ihtiyacı vurgulamaktadır.
Kanser modelleri tümör biyolojisi ve tedavilerinin araştırılması için gereklidir. İnsan kanser hücre hatları in vitro manipülasyonlar ve in vivo ksinografting çalışmaları (ikincil ksinograftlar) için önemli bir ilk adımı temsil eder1. Bununla birlikte, standart kanser hücre kültürleri, ikincil ksinograftlarda geri yüklenemeyen fenotipik ve genotipik dönüşüm2-4'e tabidir5. Ayrıca kanser hücre kültürlerinde izoitrat dehidrogenaz(IDH)mutasyonları6, farklı kök hücre popülasyonları7 ve anahtar sinyal yollarına bağımlılık8 gibi genetik değişiklikler kaybedilebilir. Genomik profiller kanser küre kültüründe daha iyi ölçüde korunabilir, ancak yine de primer tümörlerin genotipini tam olarak yansıtamaz2,3. Doğrudan ortotopik transplantasyon in vitro kültürün etkilerini olumsuzlar, uygun bir mikroçevrme sağlar ve tümör başlatan hücrelerin bütünlüğünü korur9,10. Bu nedenle, birincil ksinograftlar, gelecekteki klinik çalışmaların rasyonel tasarımına yardımcı olmak için hedeflenen ajanları titizlikle test etmek için güçlü ve ilgili bir preklinik modeli temsil eder5,11,12.

<table><tbody><tr><td>Fosfat tamponlu tuzlu</td><td>su Yaşam Teknolojileri</td><td>14040-133</td><td></td></tr><tr><td>Papain ayrışma sistemi</td><td>Worthington Biochemical Corp.</td><td></td><td></td>LK003150</tr><tr><td>Tripan mavisi çözeltisi %0,4Life</td> <td>Technologies</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin HCl</td><td>Kurumsal eczaneden veya yerel veterinerlik tedarik şirketi</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xylazine HCl'den</td><td></td><td></td><td></td></tr> elde edilmiştir <tr><td>Ketoprofen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Oftalmik merhem </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Povidon-iyot </td><td>Fisher Scientific</td><td>190061617</td><td> </td></tr><tr><td> Kriyoprezervasyon ortamı ve proliferasyon takviyesi </td><td>Kök Hücre Teknolojileri</td><td>05751</p</td><td>> </td></tr><tr><td> PBS'de 0.2% Heparin sodyum tuzu </td><td>StemCell Technologies</td><td>07980</td><td> </td></tr><tr><td> Penisilin-streptomisin </td><td>Life Technologies</td><td>15140-122</td><td> </td></tr><tr><td> Dimetil sülfoksit </td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D6250-5X10ML</td><td> </td></tr><tr><td> NOD. Cg-Prkdcscid I/2rgtm1Wjl/SzJ fareler </td><td>Jackson Laboratuvarı</td><td>005557</td><td> NSG fareleri </td></tr><tr><td> İnsan karşıtı vimentin antikoru </td><td>Dako</td><td>M7020</td><td> 1:200 ila 1:800 kullanın </td></tr><tr><td> Anti-insan IDH1 R132H antikoru </td><td>Dianova</td><td>DIA-H09</td><td> 1:100 ila 1:400 < </td></tr><tr><td> p>Sallanan kova rotorlu santrifüj </td><td></td><td></td><td> </tr><tr><td> > Dağıtım hızı kontrollü pipetleyici </td><td></td><td></td><td> </td></tr><tr><td> Tek kullanımlık hemositometre </td><td>Fisher Scientific</td><td>22-600-100</td><td> </td></tr><tr><td> Steril cerrahi eldivenler </td><td>Fisher Scientific</td><td>11-388128</td><td> </td></tr><tr><td> Tek kullanımlık önlük </td><td>Fisher Scientific</td><td>18-567</td><td> </td></tr><tr><td> Cerrahi maske </td><td>Fisher Scientific</td><td>19-120-1256</td><td> </td></tr><tr><td> Tüberkülin şırıngası </td><td>BD</td><<td>p>305620</td><td> </td></tr><tr><td> Alkol pedleri </td><td>Fisher Scientific</td><td>22-246-073</td><td> </td></tr><tr><td> Taşınabilir elektronik terazi </td><td>Balıkçı Bilimsel</td><td>01-919-33</s></td><td> </td></tr><tr><td> Zoom stereomikroskop </td><td></td><td></td><td> </td></tr><tr><td> Cerrahi kesme makinesi </td><td>Stoelting</td><td>51465</td><td> </td></tr><tr><td> Neşter sapı </td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td><s>10003-12</td><td> </td></tr><tr><td> Neşter bıçakları, #10 </td><td></td><td></td><td> </td></tr><tr><td> stereotaksik alet </td><td>Çalma</td><td><s>51730</td><td> </td></tr><tr><td> Yüksek hızlı matkap </td><td>Çalma</td><td><s>51449</td><td> </td></tr><tr><td>Matkap ucu, 0,6 mm</td><td>Çalınma</td><td>514552</td><td></td></tr><tr><td> Hamilton şırınga </td><td>Hamilton</td><td>80336</td><td> </td></tr><tr><td> Autoclip, 9 mm </td><td>BD</td><<td>p>427630</td><td> </td></tr><tr><td> Sirkülasyonlu su ısıtma pedi </td><td>Kent Scientific</td><td>TP-700 TP-1215EA </td><td> </td></tr><tr><td> Sıcak boncuk kuru sterilizatör </td><td>Kent Scientific</td><td>INS300850</td><td> </td></tr><tr><td> Cerrahi makas </td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>14101-14</td><td> </td></tr><tr><td> İnce makas </td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td><s>14094-11</s></td><td> </td></tr><tr><td> Yaylı makas </td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>15018-10</td><td> </td></tr><tr><td> Dumont forseps </td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>11251-30</td><td> </td></tr><tr><td> Semimicro spatulalar </td><td>Fisher Scientific</td><td>14374</td><td> </td></tr><tr><td> Fare beyin dilimleyici matrisi </td><td>Zivic Instruments</td><td>BSMAS002-1</td><td> </td></tr><tr><td> Kriyojenik saklama şişeleri </td><td>Fisher Scientific</td><td>12-567-501</td><td> </td></tr></tbody></table>

primer ortotopik glioma xenografts infiltratif büyüme ve İsocitrat dehidrogenaz i mutasyonu rekapitulate

Primary Orthotopic Glioma Xenografts Recapitulate Infiltrative Growth and Isocitrate Dehydrogenase I Mutation

Malign gliomalar, farklı klinik ve moleküler özelliklere sahip heterojen bir yüksek infiltive glial neoplazm grubunu oluşturur. Primer ortotopik ksinograftlar preklinik hayvan modellerinde malign glioma alt tiplerinin histopatolojik ve moleküler özelliklerini rekapitulate eder. Transplantasyon tahlillerinde WHO sınıf III ve IV malign gliomaları modellemek için, insan tümör hücreleri immün sistemi baskılanmış farelerin ortotopik bölgesine, yani beyne ksinografize edilir. Kültürlü tümör hücrelerini kullanan ikincil ksinograftların aksine, insan glioma hücreleri resected örneklerden ayrıştırılır ve birincil ksinograftlar oluşturmak için doku kültüründe önceden geçiş olmadan nakledilür. Bu rapordaki prosedür, tümör numunesi hazırlama, bağışıklık sistemi baskılanmış farelere intrakraniyal transplantasyon, tümör engraftmentinin izlenmesi ve alıcı hayvanlara veya analize sonraki geçiş için tümör hasadını detaylandırmamaktadır. Tümör hücre hazırlama 2 saat, cerrahi işlem ise 20 dk/hayvan gerektirir.

Dissosiyatif glioma hücreleri, primer ortotopik ksinograft çizgileri elde etmek için doğrudan bağışıklık sistemi baskılanmış farelerin beyinlerine nakledilir. Her tümör örneğine, korunan sağlık bilgilerini kaldırmak için deidentifikasyon sürecinin bir parçası olarak transplantasyondan önce randomize bir sayı atanır. Bu amaçla 5 haneli bir REDcap veritabanı numarası kullanıyoruz. Şekil 1' de, izosirat dehidrogenaz 1 (IDH1) mutasyon arginin 132'den histidin'e (R132H) sahip bir glioblastomadan (GBM 17182) k...

Malign gliomalar, farklı klinik ve moleküler özelliklere sahip heterojen bir yüksek infiltive glial neoplazm grubunu oluşturur. Primer ortotopik ksinograftlar preklinik hayvan modellerinde malign glioma alt tiplerinin histopatolojik ve moleküler özelliklerini rekapitulate eder.

Primer Ortotopik Glioma Xenografts Infiltratif Büyüme ve İsocitrat Dehidrogenaz I Mutasyonu Rekapitulate

Malignant gliomas constitute a heterogeneous group of highly infiltrative glial neoplasms with distinct clinical and molecular features. Primary ...

Bu prosedürün genel amacı, preklinik hayvan modellerinde primer ortotopik glioma, özetlemek için ksenogreftler, malign glioma alt tiplerinin histopatolojik ve moleküler özelliklerini oluşturmaktır. Bu, önce doğrudan transplantasyon için insan beyin tümörü örneklerinin alınmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım, numuneden bir hücre süspansiyonu hazırlamaktır.Daha sonra, tümör hücreleri, bağışıklığı baskılanmış bir farenin beynine nakledilir. Alıcı fare daha sonra tümör, aşılama ve büyüme belirtileri açısından izlenir ve daha sonra analiz veya seri transplantasyon için hasat edilir. Sonuç olarak, histoloji, DNA dizilimi ve diğer moleküler tahliller, infiltratif tümör büyümesini ve ISO sitrat dehidrojenaz mutasyonları gibi genetik değişikliklerin tutulmasını göstermek için kullanılır.Kanserin klinik öncesi hayvan modelleri, tümör biyolojisi ve tedavilerini araştırmak için gereklidir. Primer glioma ksenogreftlerinin sekonder GLI ksenogreftleri gibi mevcut yöntemlere göre ana avantajı, glioma hücrelerinin, kültür glioma hücreleri farelere nakledildiğinde restore edilemeyen kültürde genotipik ve fenotipik değişikliklere uğramasıdır. Prosedürün gösterilmesi.Bugün yanımda laboratuvarımın bi

primary-orthotopic-glioma-xenografts-recapitulate-infiltrative-growth

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Lusiferaz modifiye insan beyin tümörü xenografts atimik farelerde tümör büyümesi ve biyoparlaklık görüntüleme kullanarak tedaviye yanıt daha sonraki izleme ile intrakranyal kurulmuş olabilir. Sağkalım analizi ile birlikte, biyoparlaklık izleme, beyin tümörlerinin tedavisi için düşünülen tedavilerin klinik öncesi test için önemli bir araştırma aracı.

Biyoparlaklık Görüntüleme kullanarak Tümör Büyüme ve Terapi yanıt sonraki Analizi ile İntrakranial Beyin Tümörü Xenografts kurulması

Biz çıplak farelerin ve sonraki seri beyinlerine insan glioblastoma multiforme hücrelerinin hassas, stereotaktik implantasyon için tümleşik bir yöntem...

Stereotaktik intrakranial implantasyon ve<em&gt; In vivo</emGlioblastoma Multiforme bir Mouse Model Sistemde Tümör Xenografts arasında&gt; Bioluminescent Görüntüleme

Biz, tümörün büyüme sırasında oynayan normal biyo-fiziksel kısıtlamalar tekrarıdır intravital iki foton mikroskopi için farelerde kortikal glioblastoma ortotopik bir model oluşturduk. Tümörün yukarıdaki kafatasını yerine bir kronik cam pencere, iki-foton mikroskobu ile zamanla tümörün ilerlemesinin takibini sağlar.

Ortotopik Glioblastoma Fare Modeli Beyin parankim fiziksel kısıtlamaları bakımı ve Intravital İki foton Mikroskopi için uygundur

Floklanmış, koşullu onkojenik alellerle tasarlanmış ve viral Cre aracılı rekombinasyon yoluyla transforme edilmiş farelerden toplanan fenotipik vahşi tip astrositler ve nöral kök hücreler, astrositom patogenezini modellemek için kullanılabilir in vitro ve in vivo dönüştürülmüş hücrelerin sinjeneik, bağışıklığı yetkin yavruların beyinlerine ortotopik enjeksiyonu ile.

Modelleme Astrositom Patogenez İn Vitro Ve In Vivo Kortikal Astrositler veya Şartlı, Genetiği fareler ile Nöral Kök Hücreler kullanma

Beyin de in vitro veya ektopik analizler tarafından temsil edilmeyen nitelikleri ile benzersiz bir sitedir. Tekrarlanabilir bulunduğu yere ve büyüme özelliklerine sahip Ortotopik fare modelleri güvenilir bir stereotaksik tespit aracı ve bir düşük basınç şırınga pompası kullanılarak kafatası içine uygulanan enjeksiyonları ile oluşturulabilir.

Oluşturma Anatomik Doğru ve İnsan Beyin Tümörleri Reproducible İntrakraniyal Ksenograftlar

GL261 glioma hücreleri, glioblastomun yararlı bir immünokompetan hayvan modelini sağlar. Bu protokolün amaçları, in vivo biyolüminesans görüntüleme kullanarak intrakraniyal tümör büyümesini izlemek için uygun teknikleri göstermek ve glioblastom tedavisi için tümör immünolojisi ve immünoterapötik yaklaşımları incelemek için lusiferaz ile modifiye edilmiş GL261 hücrelerinin faydasını doğrulamaktır.

Glioblastoma&#39;nın için bir Immünkompetan Hayvan Modeli Biyoparlaklık Görüntüleme

3D kültürler yetiştirilen Neurospheres tümörü biyoloji eğitim için güçlü bir araç oluşturur. Burada parafin katıştırma üzerinden tümörü neurospheres 3D yapısını koruyarak immünhistokimya gerçekleştirmek için bir iletişim kuralı mevcut. Bu yöntem, tümörü neurosphere özellikleri stemness ve sinirsel farklılaşma gibi karakterizasyonu sağlar.

Biyolojik gliyom immünhistokimya parafin gömülü 3D tümörü Neurosphere kültürü üzerinde tarafından değerlendirilmesi

Burada, genetiği değiştirilmiş fare modeli tümörlerinden türetilen hücrelerin intrakraniyal enjeksiyonu ile kurulan GBM için klinik öncesi bir ortotopik fare modelini tarif ediyoruz. Bu model, insan GBM'sinin hastalık özelliklerini gösterir. Translasyonel çalışmalar için, fare beyin tümörü in vivo MRG ve histopatoloji ile izlenir.

Glioblastoma multiforme'un Translasyonel Ortotopik Modelleri

IDH1-mutant diffüz düşük dereceli gliomlar kültüre edilmesi zor olan nadir tümörlerdir. IDH1 mutant protein ekspresyonunu koruyan ve kültürleri aylarca sürdüren basit, enzimatik olmayan bir eksplant yöntemi sunuyoruz. Daha da önemlisi, bu teknik dondurularak saklanmış tümörlerle çalışır ve glioma araştırmaları için değerli bir kaynak sunar.

IDH1-mutant Diffüz Düşük Dereceli Gliomların Eksplant Kültürleri için Bir Protokol

Ortotopik pediatrik beyin tümörü modellerinin geliştirilmesi, kanser hücrelerini hassas bir şekilde implante etmek için stereotaksik bir cihaz kullanarak titiz bir hassasiyet gerektirir. Burada sunulan metodoloji, beyin tümörü hücrelerinin hazırlanması, intrakraniyal enjeksiyonların gerçekleştirilmesi ve beyin tümörü aşılanmasını değerlendirmek için ameliyat sonrası bir izleme sisteminin uygulanmasında yer alan adımları özetlemektedir.

Stereotaksik Cihaz Kullanılarak Beyin Tümörleri İçin Ortotopik Hasta Kaynaklı Ksenogreft Modellerinin Oluşturulması

Bu protokolün amacı, araştırmacılara intrakraniyal implantasyonlar için son derece tekrarlanabilir bir teknik sunmaktır.

Farelerde glioblastoma hasta kaynaklı ksenograft hücre hatlarının stereotaktik intrakranial implantasyonu

Öğrenin, primer ortotopik glioma ksenogreftleri oluşturarak immün yetmez farelerde tümör biyolojisini ve genetik değişiklikleri incelemeyi. Bu yöntem, malign glioma alt tiplerinin histopatolojik ve moleküler özelliklerini taklit eder.

Primer Ortotopik Glioma Xenografts Infiltratif Büyüme ve İsocitrat Dehidrogenaz I Mutasyonu Rekapitulate

Daha fazla video keşfet