Yaban Hayatından Helmint Toplama ve Tanımlama

Bu prosedürün genel amacı, yaban hayatından helmintleri toplamak, korumak ve tanımlamaktır. Bu işlem, öncelikle yabani bir hayvana nekropsi yapılarak gerçekleştirilir. Ardından, farklı organlardan helmintler toplanır ve daha sonra tanımlanmak üzere çeşitli teknikler kullanılarak korunur.

Son olarak, kasklar şeffaflaştırılır, boyanır, monte edilir ve tür teşhisi yapılır. Nihayetinde, şeffaflaştırma ve/veya boyama teknikleri aracılığıyla, tür tanımlamaya büyük ölçüde yardımcı olabilecek spesifik kask yapılarını gösteren sonuçlar elde edilebilir. Bu yöntem memeliler, kuşlar, sürüngenler ve amfibilerin kasklarının tanımlanması için de uygulanabilir.

Bu yöntem balıklar gibi diğer organizmalar için de uygulanabilir. Başlamak için hayvanı düz bir yüzeye yerleştirin ve kulaklar, ağız boşluğu ve gözler dahil olmak üzere tüm dış açıklıkları nematodlar, CSE'ler, parmaklar ve trematodların varlığı açısından büyüteç kullanarak inceleyin. Keskin bir bıçak ve bir çift diseksiyon pensi kullanın.

Herhangi bir organı yırtmamaya dikkat ederek abdominal boşluk üzerinde bir insizyon yapın. Ardından kemik kesicilerle veya gerekirse küçük bir el testeresiyle torasik boşluğu açın. Her iki boşluğu da fat, yuvarlak solucan ve büyük trematodlar açısından inceleyin.

Ardından, inceleme için özofagusun başlangıcına yakın bir yere ve kalın bağırsağın sonuna birer ip bağlayın. Bir stereo mikroskop altında kalp ve ana kan damarlarını, trakeayı ve akciğerleri ayrı Petri kaplarına ayırın. Karaciğeri, safra kesesini ve pankreas kanalını, dalağı, böbrekleri ve idrar torbasını çıkarın ve bunları stereo mikroskop altında inceleyin.

Ardından tüm sindirim sistemini çıkarın ve her bir bölümü cam bir kaba yerleştirin. Organlar çıkarıldıktan sonra, vücut boşluğunu yıkamak için %0,9'luk saline ile doldurulmuş bir hortum veya sprey şişesi kullanın ve yıkanan sıvının 106 µm'lik bir ağ süzgeçten geçmesini sağlayın. Süzgecin içeriğini bir Petri kabına geri yıkayın ve içeriği, Fal solucanları veya kan trematodları açısından bir stereo mikroskop altında inceleyin. Makas kullanarak her bir sindirim kanalı bölümünü açın.

Mukozayı sıyırın ve büyük parazitlerin varlığı açısından dikkatlice inceleyin. Encanto cephas'ın psci'leri genellikle bağırsak duvarına derinlemesine gömülüdür. Bu nedenle, gerekirse, onları dokudan dikkatlice ayırmak için pens ve/veya küçük makaslar kullanın.

Her bir açık bölümü akan suyun altına tutun ve içeriği 106 µm'lik bir eleğe yıkayın. Ardından kalbi, ana kan damarlarını, trakeyi, idrar torbasını ve safra kesesini açarak içerikleri inceleyin. Benzer şekilde, karaciğer, akciğerler, böbrek, dalak ve pankreas gibi katı organları dilimlemek ve ayırmak için keskin bir bıçak ve pens kullanın, ardından içerikleri yıkayıp inceleyin. Parazit türlerini kaydedin.

Her bir türün sayısını ve bulundukları organları belirleyin. Kaskların daha sonraki genetik çalışmalar için korunmasını sağlamak amacıyla, tüpleri veya kavanozları içerisine kurşun kalemle etiketlenmiş küçük bir düz indeks kartı parçası yerleştirerek etiketleyin. İlk olarak onları doğrudan etanola yerleştirin.

Numuneyi bir ila birkaç gün boyunca sabitledikten sonra, uzun süreli saklama için 70% etanol ile doldurulmuş beş mililitrelik bir cam şişeye aktarın. Trematodları korumak için, canlı örnekleri bir damla salyen içeren cam mikroskop lamı üzerine yerleştirin, bir lam kapatıcı kapatın ve salyeni kaynatmadan lamı alev üzerinden geçirin. Ardından lamı alkol, formalin asetik asit veya FA içeren bir Petri kabına bırakın ve kapatıcının kendiliğinden ayrılıp yüzeye çıkmasını bekleyin.

Ölü trematodları, uzun süreli saklama için %70 etanol dolu bir kavanoza aktarmadan önce 48 saat boyunca FA veya %10 tamponlu forminde sabitleyin. Bunları sabitlemek için, canlı hayvanların üzerine kaynama noktasına yakın su dökerek bir Petri kabında gevşetin ve ardından uzun süreli saklama için %70 etanol dolu bir kavanoza aktarın. Canlı encanto cephas'ları, proboscis tamamen geri çekilene kadar bir ila birkaç saat boyunca buzdolabındaki musluk suyu içeren bir Petri kabına yerleştirerek gevşetin.

Uzun süreli saklama için onları %70 etanol veya FA ile doldurulmuş bir kavanoza aktarın. Küçük veya hassas nematodları sıcak %70 etanol ile öldürün ve öldürmek için %5 gliserin içeren %70 etanol ile doldurulmuş bir kavanozda muhafaza edin. Orta ve büyük boy nematodlar.

Bunları soğuk glasiyal asetik asit içerisine yerleştirin ve 15 dakika sonra %70 etanol ve %5 gliserin ile doldurulmuş bir kavanoza aktarın. Hematin ve alkolü çözerek ve amonyum alüminyum sülfatı sıcak suda çözerek Harris Hematin'ini hazırlayın. Her iki çözeltiyi karıştırın ve kaynama noktasına getirin.

Ardından sodyum iyodat ekleyin ve iki ila üç dakika kaynatın. Çözelti soğuduğunda, Trematod yumurtalarını boyamak için çözeltiyi 5 41 filtre kağıdı ile süzün ve çökeltiyi dekante edin. Numuneleri sabitlemek için gece boyunca Harris Hematin veya semicon Carmine içinde bekletin. Organlar görünür hale gelene kadar %70'lik asetik etanol içinde tutun.

Boyama işlemini durdurmak için numuneleri en az 30 dakika boyunca %70'lik temel etanolle işleyin. Numuneleri etanol serisi ileydehidre edin ve bir mikroskop lamına monte etmek için ksilen veya metil salisilat kullanarak şeffaflaştırın; bir damla Canada Balsam ve bir lameli ekleyin. Küçük ve orta boy nematodlar ile encanto cephas'ları, bir mikroskop lamında laktofenol içinde monte ederek ve üzerine bir lamel kapatarak 15 ila 30 dakika boyunca kurumaya bırakın. Büyük nematodlar ve encanto Cephas'lar için.

60 dakikaya kadar %80 fenol içine yerleştirin. Culex atos'un incelenmesi için daha küçük yapıların şeffaflaştığını doğrulamak amacıyla ışık mikroskobu altında inceleyin. Kesip çıkarın ve bir miktar laktofenol üzerine yerleştirin.

Bir mikroskop lamı üzerinde. Roz stellar kancaların ölçülmesini ve sayılmasını sağlamak için Culex'i ezmek amacıyla bir lameli kullanın. Ön ucu kesin ve bir mikroskopta Foss üzerine monte edin.

Lam üzerine birkaç damla laktofenol damlatın veya kalıcı montaj için gliserin jölesi kullanın. Ağız parçalarını ışık mikroskobu altında inceleyin. Büyük nematodların kuyruklarını kestikten ve laktofenol ile monte ettikten sonra, bu videoda açıklanan yöntemleri kullanarak erkeklerin ventral papilla ve spikula morfolojisini ışık mikroskobu altında gözlemleyin.

Montana'nın Missoula County bölgesinde, maske farelenin kasklarının Sox senaryoları üzerine bir inceleme gerçekleştirilmiştir. 2007 ve 2011 yılları arasında, düşen tuzaklarla toplam 56 farelen toplandı ve ölümden sonraki iki saat içinde incelendi.

Genel enfeksiyon prevalansı %96 idi. Sadece iki peltek fare parazitlerden arındırılmıştı. Dokuz esto türü ve altı nematod türü dahil olmak üzere 15 helminth türü tanımlandı. Esto cinsine ait bir staphylo türü daha önce tanımlanmamıştı.

Enfeksiyon saptanan organlar arasında ince bağırsak, mide, akciğerler ve idrar kesesi yer almaktaydı. Enfeksiyonun toplam yoğunluğu, enfekte konak başına yedi ile 234 solucan arasında değişirken; enfekte konak başına düşen tür çeşitliliği veya kask türü sayısı bir ile sekiz arasında değişmiş ve ortalaması 4,1 olarak belirlenmiştir. Bu teknikte uzmanlaşıldığında, işlem sincap gibi küçük bir memelide bir ila iki tekrarda, rakun gibi daha büyük bir memelide ise dört ila beş tekrarda gerçekleştirilebilir.

Bu videoyu izledikten sonra, yabani hayvanlardan kaskların nasıl toplanacağı, korunacağı ve tanımlanacağı konusunda oldukça iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.