Fareler ve Reeves 'munçağı Deer için Süt Toplama Yöntemleri

Bu prosedürün genel amacı, çeşitli bilimsel deneylerde kullanılmak üzere bir fareden veya Reeve's mutt jack geyiğinden nasıl süt toplanacağını göstermektir. Bu işlem, öncelikle sütün salınımını uyarmak için hayvana oksitosin uygulanarak, ardından hayvanın anestezi altına alınmasıyla gerçekleştirilir. Sonrasında, bir araştırmacı sütü manuel olarak sağarken ikinci bir araştırmacı sütü toplar.

Son adım, hayvanın anesteziden çıkış sürecinde güvenliğini sağlamaktır. Nihayetinde, seans başına yaklaşık beş ila 30 mililitre mutt jack sütü veya 450 mikrolitreye kadar fare sütü toplanabilir. Bu tekniğin, özel ekipman gerektirenler gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, nispeten düşük maliyetli ve öğrenilmesinin kolay olmasıdır.

Bu yöntem, bir patojenin süt yoluyla anneden yavruya geçip geçemeyeceği gibi çeşitli bilimsel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu yöntemi ilk kez uygulayan kişiler, sütün doğru şekilde sağılması için pratik gerektirdiğinden genelliklele hevesleri kırılabilir. Laktasyon dönemindeki bir farede süt salınımını uyarmak için gerçekleştireceğimiz bu prosedürde bana laboratuvar teknisyenimiz Stephanie full away yardımcı olacaktır.

Sütü toplamanın hemen öncesinde, kilogram başına iki uluslararası ünite oksitosini intraperitonal olarak uygulayın, fareyi anestezi altına alın ve anestezinin etkisini göstermesini beklerken farenin gözlerinin kurumasını önlemek için her göze az miktarda göz kaydırıcı sürün. Bazı steril alkollü temizleme pedleri, bir P 200 pipetman, steril pipet uçları ve sütü tutmak için 1,5 mililitrelik bir eppendorf tüpü veya 1,2 mililitrelik bir kryo şişesi gibi bir kap hazırlayın. Sağım işlemi iki araştırmacı gerektirir.

Bir kişi, hayvanı sabitler ve sütü sağar; diğeri ise toplama kabının kontamine olmamasına dikkat ederek sütü toplar. Süt sağan kişi, sağım öncesinde steril bir alkollü temizleme pedi kullanarak meme bölgesini nazikçe temizler.

Oksitosin enjeksiyonundan bir veya iki dakika sonra, farenin meme bölgesinde sütün indiği görülür. Başparmak ve işaret parmağını kullanarak, meme dokusunu yukarı doğru nazikçe masaj yaparak ve sıkarak, meme ucunun tabanında görünür bir süt damlası oluşana kadar sütü manuel olarak sağın. Süt toplayıcısı, pipet ucundaki havayı tahliye etmek ve süt toplama işlemine hazırlanmak için P 200 pipetinin pistonunu birinci durağına kadar bastırır.

Ardından süt toplayıcısı, pipet ucunu süt damlasının üst kısmına konumlandırır. Ucun meme ucuna veya cilde çok yakın olmamasına dikkat ederek, sütü pipet ucuna çekmek için piston üzerindeki basıncı yavaşça serbest bırakır ve herhangi bir sıvı kaybı yaşanmaması için pipet ucunu toplama tüpünün kenarına yaslar. Süt toplayıcısı, pistonu ilk durağın ötesine itmek için başparmağını kullanarak sütü kaba boşaltır.

Saat yönünde veya tersi yönde ilerleyerek her bir meme ucundan manuel olarak süt sağmaya devam edin. Özellikle diğer meme uçlarından daha fazla süt veren bir meme ucundan daha fazla süt sağmak için önceki meme ucuna geri dönmek uygundur. Süt toplama işlemi tamamlandığında, fareyle anestezi etkisinin geçmesini bekleyin.

Anne hayvan kafes içinde rahatça hareket etmeye başladığında, sütün inmesini uyarmak için onu yavrularıyla birlikte orijinal kafesine geri yerleştirin. Laktasyondaki Reeve's mutt jack geyiklerine, kilogram başına 10 uluslararası ünite oksitosini intramüsküler olarak uygulayın ve ardından mutt jack'ı hemen anesteziye alın. Kulaklara dokunulduğunda sadece hafif reflekslerin görülmesi ve sütü sağan kişinin mutt jack'ı mücadele etmeden tutabilmesi durumunda anestezi seviyesi yeterli kabul edilir.

Ardından, mut jack'in gözlerinin kurumasını önlemek için her göze az miktarda kaydırıcı uygulayın. Süt dışavurucuyu ve süt toplayıcıyı, etanolle ıslatılmış gazlı bezler ve sütü tutmak için birkaç adet 15 mililitre konik polipropilen tüp ile donatın. Oksitosin etkisini göstermeye başladığında, mutt jack'in meme bölgesinde süt salınımı görülmeye başlar.

Hem süt sağan hem de süt toplayan kişi eldiven giymeli ve ellerini etanolle ıslatılmış gazlı bezle sterilize etmelidir. Ayrıca, hayvanın başını rahatça nefes alabileceği ve rumen regürjitasyonunu önleyecek rahat bir pozisyonda tutarak, tüm memeyi ve her bir meme ucunu sterilize etmek için etanolle ıslatılmış gazlı bez kullanın. Süt toplayan kişi, toplama tüpünü sağım yapılan meme ucuna, cilde temas ettirmeden yakın bir şekilde yerleştirir.

Süt sağımcısı, meme dokusunu başparmak ve işaret parmağıyla yukarı doğru nazikçe sıkarak meme ucu sütle dolana kadar işlem yapar ve ardından sütü nazikçe meme ucundan dışarıya, süt toplayıcısının tuttuğu tüpe doğru yönlendirir. Süt bir akış şeklinde çıktığı için, çok az miktarda süt israf edilecek şekilde toplama tüpünün konumlandırılması önemlidir. Mt Jack'in memesi kadranlara ayrılmıştır.

Süt sağım cihazı, süt artık kolayca akmayana kadar her kadrandan süt sağmaya devam eder. Eğer bir memeden süt sağılamazsa, ilk memeye dönmeden önce diğer tüm memelerden sağım yapılır; süt toplama işlemi tamamlandığında, bam anestezisinin hızlıca geri çevrilmesi için deri altına aamaz uygulanır ve son olarak hayvan kendi başına yürüyebilene, yemek yiyebilene ve su içebilene kadar gözlemlenir. Bu şekil, laktasyon dönemindeki bir fareden 100 ila 450 µL süt elde edilebileceğini göstermektedir.

Maksimum süt hacimleri, kilogram başına iki uluslararası birim oksitosin kullanılarak doğumdan sekiz ila 12 gün sonra hasat edilmiştir. Burada, reeve's mut jack geyiğindeki batın boyutuna göre çizilmiş, laktasyon halindeki bir farenin yaklaşık süt verimi gösterilmektedir. Seans başına toplanan süt hacmi, kullanılan anesteziğe ve doğum sonrası süt toplama işlemlerinin başlangıç ve bitiş tarihlerine bağlı olarak beş ila 30 mililitre arasında değişmiştir; mut, Jack dişileri için süt toplama tarihleri bu tabloda gösterilmektedir.

Süt, 18 ile 150 gün arasında değişen bir aralıkta, ortalama 80 gün boyunca toplanmıştır. Bu teknikte uzmanlaşıldığında, bir oturumda kaç hayvandan örnek toplamak istediğinize bağlı olarak işlem yaklaşık bir saatte tamamlanabilir. Bu prosedür uygulanırken, hayvanların güvenliğinin her zaman öncelikli olduğunu hatırlamak önemlidir. Bu prosedürün ardından, sütün işlenmesi ve ardından sütün içindeki bileşenler hakkında ek soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilecek in vitro testlerin veya biyolojik analizlerin yapılması gerekebilir.