Name: Zaman kurs Indocyanine Yeşil Anjiyografi ile Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonu Fare Modeli Koroid vaskülatürüne anormallikleri tespit (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-19T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: Öğrenin, yaşla ilişkili makula dejenerasyonu fare modellerinde koroid damarlarındaki anormallikleri Indocyanine Green anjiyografi ile zaman kursu görüntüleme yöntemiyle nasıl tespit edeceğinizi.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Körlük (RSB) Önlemek için NIH hibe 1R01EY022901, Research Kariyer Geliştirme Ödülü ile desteklenmiştir, CMReeves &amp; MA Reeves Vakfı, Körler E. Matilda Ziegler Vakfı, Tapınak Şövalyeleri Göz Vakfı ve Bölümü&#39;ne sınırsız hibe RSB Utah Üniversitesi Oftalmoloji. Biz el yazması üzerinde tartışmalar ve yorumlar için Spectralis Multi-Modality Görüntüleme Sistemi ve Tao Zhang teknik yardım için Balamurali Ambati teşekkür ederim.

1.. Araçların hazırlanması <ol><li> Prosedür, bir hayvan tesisinde bir prosedür odada gerçekleştirilir. </li><li> Deney başlamadan önce facemasks, saç bone, cerrahi önlük, steril ayak örtüleri, ve eldiven giyin. </li><li> Bir ocak üzerinde bir behere ~ 40 ° C ısı su. </li><li> Görüntüleme sırasında fare vücut ısısını korumak için daha sonra kullanılacak bir ısıtma yastığı üstüne steril bir mavi yastık yerleştirin. Isıtma pedi açın. </li><li> Görüntüleme Sistemi hazırlayın: <ol><li> Toz kapağını çıkartın ve lazer açın. </li><li> 55 ° lens dışarı atın ve makine üzerine monte. </li><li> Bilgisayar ve girdi yeni bir hastanın sayfanın altında görüntüleme için fare bilgiler (örn. genotip, yaş, vb.) Gelen görüntüleme yazılımını açın. &quot;Cihaz türü&quot; altında, Kızılötesi (IR) modunu seçin. </li></ol></li></ol> Not: Bu rapor edildiğini kullanım oBiz (temsilcisi sonuçlarını görmek, 1-4 Şekiller) harici lens kullanmadan IV-ISYA yüksek kaliteli görüntüler elde hiçbir sorun olmasına rağmen f Harici çift asferik lens görüntü kalitesini 17-20 artırabilir. 2. ISYA Kuyruk Ven Enjeksiyon <ol><li> 1% Tropikamid oftalmik solüsyonu ile fare gözleri dilate ve 5 dakika bekleyin. </li><li> Anestezi gerekli (Ketamin / Ksilazin / Acepromazine 65-100/10-20/1-3 mg / kg) miktarını belirlemek için, fare tartılır. </li><li> Bir 32 G iğne ile birlikte steril 1 ml şırınga al. Anestezi (13 mg / ml ketamin, 2.6 mg / ml Xylazine, steril PBS içinde 0.3 mg / ml Acepromazine) ile periton kesesi içine enjekte fare. Fare tamamen uyuşturulduktan kadar bekleyin (~ 5 dk). </li><li> Venin vazodilatasyona neden 40 ° C ılık suyun içine fare kuyruğu yerleştirin. </li><li> Bir 32 G iğne ile bir 1 ml şırınga al. IC istenilen miktarda geri çekG, tipik haliyle, bir 25 g fare (2 mg / kg) için, bir steril tüp içine, bir 0.2 uM şırınga filtresi ile filtre edilmiş, steril, 1 mg / ml ICG, 50 ul. Şırınga içine herhangi bir hava tanıtmak için dikkatli olun. </li><li> Enjekte edilecek bölgeyi sterilize etmek için bir alkollü bez ile silin kuyruk. </li><li> , Yanal kuyruk damarı yukarı doğru olacak şekilde, bir el ile kuyruk tutun. Yukarı bakacak şekilde iğnenin eğim ile, en az bir açı ile damar içine yaklaşık 2 mm iğne enjekte edilir. Ven delmek için dikkatli olun. Biraz şırınga geri çizin ve iğne başarıyla damar içine yerleştirilen olduğunu gösterir iğne hub, içine kan akımının izleri arayın. </li><li> Yavaş yavaş damar içine enjekte ICG. Enjekte ederken minimal direnç olmalıdır. İğneyi çıkarın ve herhangi bir kanamayı durdurmak için ~ 5-10 saniye enjeksiyon yerinde doğrudan bir alkol bez uygulayın. Fare görüntüleme için hazırdır. Erken faz (enjeksiyondan sonra 0-4 dakika) yakalamak amacıyla, bu esse olduğuhızlı görüntü fareyi ntial. </li></ol> Not: Fare gözler kolayca kuru alabilir ve anestezi altında katarakt gelişebilir. Bu işlem sırasında, steril PBS uygulayarak nemli göz tutmak önemlidir. ISYA Kayıttan önce steril pamuklu çubukla aşırı PBS silin. Diğer laboratuarları kornea 17-20 dehidratasyonu önlemek için bir kontakt lens kullandım. 3. ICG Anjiyografi <ol><li> Retina ve koroid tirajları maksimum parlaklık (0-4 dk) kadar görüntüleri koroid dolum erken faz yakalama izin verir ICG enjeksiyondan sonra 30-40 sn almaya başlar. Retinal damar iyi odak ~ 35-45 dioptri ve koroid damar 10-15 diyoptrilerinde görüntülenmiştir de görüntülenmiştir. Not: bir hayvan modelinin ilk inceleme sırasında, olası tüm abno tanımlamak için tüm açılardan (nazal, temporal, dorsal ve ventral) görüntüleri yakalamak için tavsiye edilirvaskülatürde rmalities. Erken dönemde, orta ve büyük koroid arterler ve venler hem de görüntülenmiştir. Bu protokolde kullanılan hayvan modelinde, koroid lezyonlar (örn. polipoidal dilatasyonlarında) erken fazına 1 dk görünmeye başlayabilir. </li><li> Damar üzerindeki görüntü odak ayarlayın. Parlaklık için Kontrol ve sırasıyla, kontrol modülü ve odak düğmesini kullanarak odaklanır. Bu değerler, ayarlanabilir sayısal olarak ve kolayca sabit tutulur. Aşağıdaki tekniği kullanılarak görüntü kalitesi tekrarlanabilir sağlamak için kamera lensi sabiti fare göz mesafe bırakın. Not: cihaz sadece görüntü, biz kamera lensi ve sürekli fare göz arasındaki odak, parlaklığı ve mesafe tutmak için posterior gözün bir kısmı deneyebilirsiniz beri görüntü farklı açılardan tüm posterior göz gibi. Bunun anahtarı vie alanı ile göz yoluyla ICG tarafından yayılan daire şeklindeki lüminesans hizalamak içinKameranın w. Tüm görüntü karanlık alanları vardır kadar bu, sol-sağ yaparak kamera pozisyonu yukarı ve aşağı, ve-ve-out ayarlamalar yapılır. Kameranın görüş alanında parlaklık ve dizilmiş zaman, lens için göz arasındaki mesafe kaliteli görüntüleme için optimal bir mesafede bir sonraki resim grubu hem de için tekrarlanabilir. </li><li> Damar odak sonra, satın alma modülü üzerinde yuvarlak siyah düğmeye basarak görüntü kareleri yakalamak. Yuvarlak siyah düğmesi de en iyi görüntü kalitesi için ICG sinyalini azaltmak veya artırmak için kullanılabilir. </li><li> Görüntü koroid lezyonların uygun görüş açısını ve odaklama derinliği belirler. Bu gözün konumunu, odaklama derinliği, ve tüm zaman-ders ISYA için sabit diğer cihaz ayarları tutmak için önemlidir. Görüntüler tespit modülüne dokunmatik ekran panelinde acquire düğmesine basarak kaydedilir. </li><li> 6-15 dk kıç orta fazda görüntüler eldeer enjeksiyon. Not: koroid ve retina damarları Hem daha az belirgin hale gelir. Koroid damar gibi yaygın floresan görünür. Hiperflöresansı sergileyen koroid lezyonlar normal bir arka plan floresan çevreleyen solma aksine ortaya. </li><li> Enjeksiyondan sonra 17-25 dk geç fazda görüntü kazanır. Not: hiperflöresansı kaybolur. Hem koroid ve retina damarları artık görünür. Optik sinir başı siyah olur. Hiperfloresan koroid lezyonlar solan arka plan ile maksimum kontrast var. </li><li> Görüntülerin satın bitirdikten sonra, fare gözleri açık bir yağ göz jeli uygulayın ve kurtarma için bir ısıtma pedi üzerinde fareyi bırakın. </li><li> Kafeslerinde tutarak alana fareler dönün. Daha fazla analiz için TIFF ya da JPEG dosyaları olarak dışa aktarın. </li></ol> Not: her bir faz zamanlaması kesin değildir. Bulduğumuz adet zamanlamasıch faz enjekte ICG miktarına bağlı olarak değişebilir. Daha ICG her aşamasını uzatmak için eğilimindedir. Bir faz tanımlamak için en iyi yol, yukarıda listelenen her fazın anahtar özelliklerine göre olduğunu.

<ol><li>Duane, T. D., Tasman, W., Jaeger, E. A. Chapter 4a, Indocyanine Green Angiography. Duane's clinical ophthalmology on CD-ROM. , Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. (2002).</li>
<li>Alfaro, D. V. Age-related macular degeneration : a comprehensive textbook. , Lippincott Williams & Wilkins. (2006).</li>
<li>Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indocyanine+green+angiography%3A+a+perspective+on+use+in+the+clinical+setting%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Indocyanine green angiography: a perspective on use in the clinical setting.</a> Am. J. Ophthalmol. 151, 745-751 (2011).</li>
<li>Destro, M., Puliafito, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indocyanine+green+videoangiography+of+choroidal+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Indocyanine green videoangiography of choroidal neovascularization.</a> Ophthalmology. 96, 846-853 (1989).</li>
<li>Scheider, A., Schroedel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+indocyanine+green+angiography+with+a+scanning+laser+ophthalmoscope%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">High resolution indocyanine green angiography with a scanning laser ophthalmoscope.</a> Am. J. Ophthalmol. 108, 458-459 (1989).</li>
<li>Guyer, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+indocyanine-green+angiography+in+chorioretinal+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Digital indocyanine-green angiography in chorioretinal disorders.</a> Ophthalmology. 99, 287-291 (1992).</li>
<li>Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J. A., Guyer, D. R., Orlock, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+indocyanine+green+videoangiography+and+choroidal+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Digital indocyanine green videoangiography and choroidal neovascularization.</a> Retina. 12, 191-223 (1992).</li>
<li>Regillo, C. D., Benson, W. E., Maguire, J. I., Annesley, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indocyanine+green+angiography+and+occult+choroidal+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Indocyanine green angiography and occult choroidal neovascularization.</a> Ophthalmology. 101, 280-288 (1994).</li>
<li>Scheider, A., Kaboth, A., Neuhauser, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+subretinal+neovascular+membranes+with+indocyanine+green+and+an+infrared+scanning+laser+ophthalmoscope%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Detection of subretinal neovascular membranes with indocyanine green and an infrared scanning laser ophthalmoscope.</a> Am. J. Ophthalmol. 113, 45-51 (1992).</li>
<li>Kuck, H., Inhoffen, W., Schneider, U., Kreissig, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+of+occult+subretinal+neovascularization+in+age-related+macular+degeneration+by+infrared+scanning+laser+videoangiography%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Diagnosis of occult subretinal neovascularization in age-related macular degeneration by infrared scanning laser videoangiography.</a> Retina. 13, 36-39 (1993).</li>
<li>Imamura, Y., Engelbert, M., Iida, T., Freund, K. B., Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polypoidal+choroidal+vasculopathy%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Surv.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Polypoidal choroidal vasculopathy: a review.</a> Surv. Ophthalmol. 55, 501-515 (2010).</li>
<li>Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polypoidal+choroidal+vasculopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol.+Clin.+N.+Am%22%5BJournal%5D)">Polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Ophthalmol. Clin. N. Am. 15, 537-554 (2002).</li>
<li>Spaide, R. F., Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J., Orlach, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indocyanine+green+videoangiography+of+idiopathic+polypoidal+choroidal+vasculopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Indocyanine green videoangiography of idiopathic polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Retina. 15, 100-110 (1995).</li>
<li>Coppens, G., Spielberg, L., Leys, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polypoidal+choroidal+vasculopathy%2C+diagnosis+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Bull.+Soc.+belge+d%27Ophtalmol.%22%5BJournal%5D)">Polypoidal choroidal vasculopathy, diagnosis and management.</a> Bull. Soc. belge d'Ophtalmol.. , 39-44 (2011).</li>
<li>Tsujikawa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pigment+epithelial+detachment+in+polypoidal+choroidal+vasculopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Pigment epithelial detachment in polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Am. J. Ophthalmol. 143, 102-111 (2007).</li>
<li>Jones, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+expression+of+multifunctional+serine+protease%2C+HTRA1%2C+in+retinal+pigment+epithelium+induces+polypoidal+choroidal+vasculopathy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Increased expression of multifunctional serine protease, HTRA1, in retinal pigment epithelium induces polypoidal choroidal vasculopathy in mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 14578-14583 (2011).</li>
<li>Alex, A. F., Heiduschka, P., Eter, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+fundus+imaging+in+mouse+models+of+retinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Retinal fundus imaging in mouse models of retinal diseases.</a> Methods Mol. Biol. 935, 41-67 (2013).</li>
<li>Seeliger, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+confocal+imaging+of+the+retina+in+animal+models+using+scanning+laser+ophthalmoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">In vivo confocal imaging of the retina in animal models using scanning laser ophthalmoscopy.</a> Vision Res. 45, 3512-3519 (2005).</li>
<li>Fischer, M. D., Zhour, A., Kernstock, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotyping+of+mouse+models+with+OCT%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Phenotyping of mouse models with OCT.</a> Methods Mol. Biol. 935, 79-85 (2013).</li>
<li>Jian, Y., Zawadzki, R. J., Sarunic, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+optics+optical+coherence+tomography+for+in+vivo+mouse+retinal+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Opt%22%5BJournal%5D)">Adaptive optics optical coherence tomography for in vivo mouse retinal imaging.</a> J. Biomed. Opt. 18, 56007 (2013).</li>
<li>Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Huang, S. J., Costa, D. L., Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polypoidal+choroidal+vasculopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Surv.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Surv. Ophthalmol. 49, 25-37 (2004).</li>
<li>Sasahara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polypoidal+choroidal+vasculopathy+with+choroidal+vascular+hyperpermeability%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Polypoidal choroidal vasculopathy with choroidal vascular hyperpermeability.</a> Am. J. Ophthalmol. 142, 601-607 (2006).</li>
<li>Silva, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polypoidal+choroidal+vasculopathy+and+photodynamic+therapy+with+verteporfin%5BTitle%5D)+AND+%22Graefes+Arch.+Clin.+Exp.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Polypoidal choroidal vasculopathy and photodynamic therapy with verteporfin.</a> Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 243, 973-979 (2005).</li>
<li>Yannuzzi, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polypoidal+choroidal+vasculopathy+masquerading+as+central+serous+chorioretinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Polypoidal choroidal vasculopathy masquerading as central serous chorioretinopathy.</a> Ophthalmology. 107, 767-777 (2000).</li>
<li>Janssen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+vessel+formation+in+the+choroid+of+mice+lacking+tissue+inhibitor+of+metalloprotease-3%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Abnormal vessel formation in the choroid of mice lacking tissue inhibitor of metalloprotease-3.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 2812-2822 (2008).</li>
<li>Ding, X., Patel, M., Chan, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+pathology+of+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Retin.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Molecular pathology of age-related macular degeneration.</a> Prog. Retin. Eye Res. 28, 1-18 (2009).</li>
<li>Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+choroidal+and+retinal+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Retin.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Animal models of choroidal and retinal neovascularization.</a> Prog. Retin. Eye Res. 29, 500-519 (2010).</li>
<li>Pennesi, M. E., Neuringer, M., Courtney, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+age+related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Aspects+Med%22%5BJournal%5D)">Animal models of age related macular degeneration.</a> Mol. Aspects Med. 33, 487-509 (2012).</li>
<li>Elizabeth Rakoczy, P., Yu, M. J., Nusinowitz, S., Chang, B., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse models of age-related macular degeneration.</a> Exp. Eye Res. 82, 741-752 (2006).</li>
</ol>

YF Bu çalışmada kullanılan AMD fare modeli ile ilgili iki patent bekleyen bir mucididir. SK, ZB, ve ADJ ifşa hiçbir şey yok.

Bu çalışmada, HTRA1 transgenik farelerde görüntü koroid lezyonlara ISYA kullanımını göstermiştir. Bizim fare modelinde erken, orta ve ISYA geç fazların özellikleri insan çalışmaları 1 &#39;de de zaman süreci neticesinde. Bu, AMD olarak koroid ile ilgili koşulların patofizyolojik mekanizmaları ve tedavi stratejileri ile ilgili araştırmalar için çok değerli olan insan patolojisi ve hayvan fenotipleri arasında daha iyi karşılaştırma yapmak önemlidir. İlk olarak IP enjeksiyonu ile far...

İndosiyanin yeşili anjiyografi (ISYA) gözün kan damarları ile ilgili görüntü sorunlarına bir tanı testidir. Emisyon spektrumu 770-880 nm ila 835 nm, 1 de tepe emisyon aralıkları sırasında ICG&#39;nin emilme tayfı 790-805 nm arasında değişir. Bu olan spektrum görünür aralığında yer alır, diğer popüler boya sodyum floresan, farklıdır. Kızılötesi spektrumu kolayca sodyum floresein tabanlı floresein anjiografi (FA) tarafından görselleştirme engelleyebilirsiniz bütün bunlar retina pigment epiteli (RPE), serosanguinöz sıvısı ve lipid eksuda yoluyla nüfuz ICG sağlar. ICG koroid damar ve koroid lezyonların 1,2 gelişmiş görüntüleme sağlayan,% 98 proteine ​​bağlı daha az ekstravazasyonu ile sonuçlanan damar bulunmaktadır. ISYA neredeyse RPE posterior koroid damarlarını görselleştirmek için tek seçenektir. Şekil 1 fare gözlerinde görüntüleme damarsal ISYA ve FA karşılaştırmasını gösterir. FA bGörüntünün retinal damar sistemi kuyu değil, koroid damar kullanılan e. Bunun aksine, ISYA retinal ve koroid damar hem de görüntü için kullanılabilir. ISYA birlikte bu çalışmada kullanacağı kızılötesi hassas video kameralar, yüksek çözünürlüklü dijital görüntüleme sistemleri veya tarayıcı laser oftalmoskobun (SLO) ile gerçekleştirilir. Klinikte, ISYA Polipoidal Koroid Vaskülopati (PCV), Retina Anjiomatöz Yayılmasının (RAP), angioid çizgiler, vitelliform maküler distrofi, SSK&#39;sı, hemanjiomun, kanamalar retina dahil koroidal vaskulatürünü kapsayan koriyoretinal bozukluklar bir dizi teşhis tavsiye edilmiştir Arteriyollerde makroanevrizmaları, koroid tümörleri, posterior ve belirli biçimleri 1,3 üveit. FA ve optik koherens tomografi (OCT) ile ISYA kombinasyonu eksudatif yaşa bağlı maküler tanı ve tedavisinde klinisyenler için güçlü araçlar sağlardejenerasyon (AMD) 4-10. ISYA koroid ilgili koşulların teşhis edilmesi için özellikle yararlıdır. Aslında, ISYA PCV, eksudatif AMD 11-13 bir varyantını teşhisi için altın standart olarak kabul edilir. PCV koroid damar 11-13 terminal polipoidal dilatasyon ile damarların dallanma bir ağ ile karakterizedir. PCV sık sık kaçak ve polipoidal bileşenlerinden 11,14,15 gelen kanama ile RPE ve retinanın tekrarlayan serosanguinöz müfrezeleri ile ilişkilidir. Yakın zamanda transgenik fare retinal pigment epitel (RPE) 16, insan HTRA1, çok fonksiyonlu bir serin proteazı ifade ile birinci PCV hayvan modelinin üretilmesini bildirdi. Bu artan HTRA1 PCV karakteristik özelliklerine sahip, örneğin polipoidal lezyonlar uyardığını göstermiştir. İşte bizim HTRA1 fare modeli kullanılarak AMD araştırma kuyruk damar enjeksiyonu zaman ders ISYA kullanımını gösterdi. Bizim verilerimiz öneririzIV-ISYA IP (ya da deri altına (SC)) güncel koroid lezyonları karakterize etmek için 17,18 alanında kullanılan-ISYA üstündür. Hayvan Araştırma Bildirimi Hayvan deneyleri Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmış protokollere göre yapılmıştır ve Oftalmik ve Vizyon Araştırma Hayvanların Kullanım ARVO Tablosuna uygun olarak yapıldı.

<table><tbody><tr><td>Spectralis Multi-Modality Görüntüleme Sistemi</td><td>Heidelberg Mühendislik, Almanya</td><td>SPECTRALIS HRA+OCT</td><td></td></tr><tr><td>Tropicamide oftalmik solüsyon (%1)</td><td>Bausch & Öğrencilerin</td><td>genişlemesi için</td>Lomb <td>NDC 24208-585-64</td></tr><tr><td>GenTeal Gel</td><td>Genteal</td><td>NDC 58768-791-15</td><td>&nbsp; berrak kayganlaştırıcı göz jeli&nbsp;</td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Vedco Inc</td><td>NDC 50989-996-06</td><td></td></tr><tr><td>Ksilazin</td><td>Lloyd Laboratuvarları</td><td>NADA 139-236</td><td></td></tr><tr><td>Asepromazin</td><td>Vedco Inc</td><td>NDC 50989-160-11</td><td></td></tr><tr><td>32-G İğne</td><td>Steriject</td><td>PRE-32013</td><td></td></tr><tr><td>1 ml şırınga</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>İndosiyanin Yeşil</td><td>Pfaltz & Bauer</td><td>I01250</td><td></td></tr></tbody></table>

zaman kurs indocyanine yeşil anjiyografi ile yaşa bağlı makula dejenerasyonu fare modeli koroid vaskülatürüne anormallikleri tespit

Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography

Indosiyanin Yeşil Anjiyografi (veya ISYA) koroid ve böyle yaşa bağlı makula dejenerasyonu (AMD) gibi çeşitli göz hastalıkları retina damar anormallikleri teşhis etmek için göz doktorları tarafından yapılan bir tekniktir. ISYA nedeniyle kızıl ötesi spektrum ile pigmentli tabakası içinden nüfuz kabiliyeti gözün posterior koroid damar görüntüye özellikle yararlıdır. ISYA zaman ders erken, orta ve geç evreye ayrılabilir. Üç aşama göz problemleri patoloji hakkında değerli bilgiler sunmaktadır. Intravenöz zaman ders ISYA (IV) enjeksiyonu yaygın koroid sorunlarının tanı ve tedavisi için klinikte kullanılan rağmen, ISYA intraperitoneal enjeksiyon (IP) tarafından genellikle hayvan araştırmalarda kullanılmaktadır. Burada kuyruk ven enjeksiyon ve konfokal tarayıcı laser oftalmoskopla farelerde yüksek çözünürlüklü ISYA zaman ders görüntüler elde etmek için teknik göstermiştir. Biz koroid le görüntü için bu tekniği kullanılıryaşa bağlı makula dejenerasyonu olan bir fare modelinde lezyonlar. IP tarafından fare damarsal ICG tanıtmak için çok daha kolay olmasına rağmen, bizim veriler IP-ISYA tarafından tekrarlanabilir ISYA zaman ders görüntüler elde etmek zor olduğunu göstermektedir. Buna karşılık, kuyruk ven enjeksiyon yoluyla ISYA insan çalışmalarında karşılaştırılabilir yüksek kaliteli ISYA zaman ders görüntü sağlar. Buna ek olarak, pigmentli ISYA fareler üzerinde gerçekleştirilen daha koroid damarlarının daha net resimler verir albino fareler üzerinde gerçekleştirilen gösterdi. Biz o zaman-ders IV-ISYA hayvan modellerinde dayalı AMD araştırma standart bir uygulama haline gelmelidir öneririz.

Biz, CD1 arka plan üzerinde, her ikisi de, HTRA1 transgenik fareler ve kontrol litermatlarında WT ISYA zaman süreci gerçekleştirildi. Albino CD1 plan indosiyanin yeşil anjiyografi (ISYA) görüntüleme (tartışma) kolaylaştırmak için seçildi. Dilatasyon gibi bazı anevrizma HTRA1 fare erken dönemde ortaya çıkmaya başladı (Şekil 2, kırmızı bir ok bir geminin ucunda dilatasyon gösteren ve kırmızı bir daire, bir küme tipi polipoidal lezyon gösterir). Koroid damarlarının sırasında WT ve HTRA1 farelerde hem de aç...

Kuyruk ven enjeksiyon yoluyla gerçekleştirilebilir Indocyanine Yeşil Anjiyografi (veya ISYA) fare koroidinde anormallikleri karakterize kaliteli ISYA zaman ders görüntüler sağlar.

Zaman kurs Indocyanine Yeşil Anjiyografi ile Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonu Fare Modeli Koroid vaskülatürüne anormallikleri tespit

Indocyanine Green&#160;Angiography (or ICGA) is a technique performed by ophthalmologists to diagnose abnormalities of the choroidal and retinal ...

Bu prosedürün genel amacı, zaman serisi uçsal yeşil ve coğrafya kullanarak yaşa bağlı makula dejenerasyonu fare modellerinde koroid vaskülaritesindeki anormallikleri tespit etmektir. Bu, öncelikle hayvanların ve enjeksiyon için kalıbın hazırlanmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım ise kuyruk venine incy yeşil enjeksiyonlarının yapılmasıdır.Gözün sonraki görüntüleri, yeşil anjiyografideki erken, orta ve geç fazlarda elde edilir, ardından dışa aktarılır ve analiz edilir. Nihayetinde, yeşil anjiyografideki zaman seyri, yaşa bağlı makula dejenerasyonunun koroidindeki çeşitli lezyon türlerini karakterize etmek için standart bir prosedür olarak kullanılabilir. Fare modelleri.Endo signin green'in intraperitonal enjeksiyonu gibi mevcut yöntemlerimize kıyasla bu tekniğin temel avantajı, insan çalışmalarıyla karşılaştırılabilir kalitede yüksek çözünürlüklü zaman serisi görüntüleri sağlamasıdır. Prosedüre başlamak için hayvanlarla çalışmaya uygun kıyafetleri giyin. Buna cerrahi önlüklerin, steril galoşların, bone, yüz maskesi ve eldivenlerin takılması dahildir. Ardından, sistemi açarak, sıcaklığı 37 °C'ye ayarlayarak ve üzerini steril mavi bir pedle kaplayarak görüntüleme sırasında kullanılacak ısıtma pedini hazırlayın.Ardından, bir ısıtıcıyı açın ve bir beherdeki suyu 40 °C'ye kadar ısıtın. Lazeri önceden ısıtarak ve cihaza 55 derecelik bir lens takarak kuyruk veni enjeksiyonu öncesinde görüntüleme sistemini hazırlayın. Daha sonra görüntüleme yazılımını açın ve farenin tanımlayıcı bilgilerini yeni bir hasta formu altında görüntüleme için girin.Cihaz tipi altından kızılötesi modu seçin. Görüntüleme sistemi kurulduktan sonra, farenin gözlerini %1'lik tropik IDE oftalmik solüsyon ile dilate edin ve beş dakika bekleyin. Bu süre zarfında, gerekli anestezi miktarını belirlemek için fareyi tartın.Ardından, beraberindeki metin protokolünde açıklandığı şekilde ketamin, ksilazin ve asepromazin karışımını intraperitonal olarak enjekte edin. Fare tamamen anestezi altına girene kadar yaklaşık beş dakika bekleyin. Anestezize edilen farenin gözlerini göz pomadıyla kapatmak yerine, kurumasını ve katarakt gelişmesini önlemek için gözlere her iki dakikada bir steril PBS uygulayın veya özel kontakt lensler yerleştirin.Anestezi uygulandıktan sonra, kuyruk venini genişletmek için farenin kuyruğunu 20 ila 30 saniye boyunca 40 °C suya yerleştirin. Ardından, 32 gauge iğne takılı bir mililitrelik şırınga kullanarak, vücut ağırlığı başına iki µL olacak şekilde 1 mg/mL indosiyanin yeşili çözeltisi çekin. Şırıngaya hava kabarcığı girmemesine dikkat edin.Ardından, kuyruğun yan toplardamarı yukarı gelecek şekilde kuyruğu bir elinizle tutun ve enjekte edilecek alanı sterilize etmek için kuyruğu alkollü bir pamukla silin. Daha sonra, iğnenin eğimli ucu yukarı bakacak şekilde, iğneyi minimum bir açıyla toplardamarın yaklaşık iki milimetre içine yerleştirin. Şırıngayı hafifçe geri çekin ve iğnenin toplardamara başarıyla yerleştirildiğini gösteren kan akışının iğne göbeğine gelip gelmediğini kontrol edin.Ardından, indosiyanin yeşili çözeltisini yavaşça enjekte edin. Enjeksiyon sonrası uygulama sırasında direnç minimum düzeyde olmalıdır. İğneyi çıkarın ve kanamayı durdurmak için enjeksiyon bölgesine beş ila 10 saniye boyunca doğrudan alkollü pamuk uygulayın.Fare, kuyruk veni enjeksiyonunun ardından görüntüleme için hazır hale gelir. Koroid dolumunun erken evresinde görüntüler almak için fareyi hızla önceden hazırlanmış görüntüleme sistemine aktarın. İlk olarak, görüntüyü ayarlayın ve ilgilenilen damar yapısına odaklanın.Retinal damar yapısı için 35 ile 45 diyoptre, koroidal damar yapısı için ise 10 ile 15 diyoptre arasında odaklama yapın. Ardından, kontrol modülünü kullanarak parlaklığı ayarlayın; odak ve parlaklık değerlerini dijital olarak düzenleyin ve bu değerler belirlendikten sonra ilgili çekim türü boyunca sabit tutun. Ayrıca, fare gözü ile kamera arasındaki mesafeyi sabit tutmaya özen gösterin.Tekrarlanabilir görüntü kalitesini sağlamak için; gözün tüm arka kısmını farklı açılardan görüntüleyerek başlangıç taramasını gerçekleştirin. İndosiyanin yeşili boyanın yaydığı daire şeklindeki lüminesansı kameranın görüş alanı ile hizalayarak başlayın.Bunu başarmak için sola-sağa, yukarı-aşağı ve içeri-dışarı hareketler yapın. Tüm görüntü netleşene ve karanlık alanlar kalmayana kadar kamera konumunu ayarlayın. Tekrarlanan prosedürler için optimal cihaz ayarlarını kaydedin.Damarsal yapı odaklandığında, veri toplama modülündeki yuvarlak siyah düğmeye basarak görüntü karelerini yakalayın. En iyi görüntü kalitesi için bu düğme, indoc ve yeşil sinyalleri azaltmak veya artırmak için de kullanılabilir. Önceki tarama sonuçlarına dayanarak belirli bir lezyon bölgesini incelemek için görüntüleme sistemini, daha önce belirlenmiş olan optimal açı ve cihaz ayarlarını kullanarak kurun.Göz bakış açısı konumunu, odak derinliğini ve diğer cihaz ayarlarını tüm süreç boyunca sabit tutun. Görüntüleme modülünün dokunmatik ekran panelindeki edinme (acquire) düğmesine basarak görüntüleri kaydedin. Retinal ve koroidal dolaşımlar maksimum parlaklığa ulaşana kadar erken fazda görüntü almaya devam edin.Bu işlem dört dakikaya kadar sürebilir. Ardından, enjeksiyondan sonraki altı ila 15. dakikalardaki orta fazda görüntü almaya devam edin. Burada görüldüğü üzere, koroid damarları bu fazda daha az belirgin hale gelir ve yaygın bir floresan şeklinde görünür.Ek olarak, hiperfloresans gösteren koroid lezyonları ortaya çıkar; ardından enjeksiyondan 17 ila 25 dakika sonraki geç evrede görüntüler alınır. Bu evrede, hiperfloresans solar ve damarlar artık görünür olmaz. Ayrıca, optik sinir başı siyahlaşır ve koroid lezyonları, solan arka planla maksimum kontrasta sahip olur.Görüntüleme işlemi tamamlandıktan sonra, farelerin gözlerine IGEL şeffaf kayganlaştırıcı uygulayın ve fareleri iyileşmeleri için bir ısıtma pedinin üzerinde bırakın. Hareketleri kısmen geri kazandıklarında, fareleri kafeslerine ve tutma alanına geri götürün. Son olarak, tüm görüntüleri daha sonraki analizler için görüntü veya video dosyaları olarak dışa aktarın.Burada, fare retinal ve koroidal damarlanmasının görüntülenmesinde sodyum floresein tabanlı floresein anjiyografi ile endosit yeşil anjiyografinin karşılaştırması gösterilmektedir. Retinal damarlar hem FA hem de ICGA kullanılarak görülebilirken, koroidal damarlar sadece ICGA ile görülebilmektedir. Burada, yabani tip fareye kuyruk veni yoluyla endosit yeşil enjeksiyonu sonrası koroidal damarlanmadan alınan görüntüler yer almaktadır.HT A one transgenik farede, hiçbir görüntüleme aşamasında dilatasyon veya lezyon saptanmamıştır. Ancak, kuyruk veni ve intraperitonal indosiyanin yeşili enjeksiyonlarının görüntüleme kalitesini karşılaştırmak amacıyla ek olarak görüntülenen HRA one transgenik farelerde, erken aşamada hem dilatasyonlar hem de küme tipi polipoidal lezyonlar saptanmış; orta fazda daha fazla lezyon ortaya çıkmış ve geç aşamada bunlar daha belirgin hale gelmiştir. Her iki fare için de enjeksiyondan beş dakika sonra koroidal vaskülatür çoğunlukla görünmez durumdadır ve fare için 12 dakikadan sonrası görünmezdir.Alt panellerde, pigment renginin yanı sıra enjeksiyon kökü de görüntü kalitesini etkilemektedir. Burada, pigmentli ve albino bir fare, yeşil renkteki zaman serisi IV incy kullanılarak bir coğrafya üzerinden karşılaştırılmıştır. Albino fare, erken ve orta fazlarda hem büyük hem de küçük koroid damarlarının çok daha keskin görüntülerine sahipti ve geliştirilmesinin ardından bu alandaki ileri çalışmalar için uygun bir üretim arka planı sağlayacaktır.Bu teknik, görme araştırmaları alanındaki araştırmacıların fare modellerinde koroid anomalilerini incelemelerinin önünü açmıştır.

detecting-abnormalities-choroidal-vasculature-mouse-model-age-related

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Mikroglia aktivasyonu ve mikroglioz kronik nörodejenerasyona önemli tepkilerdir. Burada, in vivo, konfokal oftalmoskopi retinal CX3CR1-GFP + mikroglial hücreleri uzun süreli görselleştirme için yöntemler sunmak ve eşik ve morfometrik için belirlemek ve aktivasyonunu ölçmek için analiz eder. Biz yaşa bağlı glokomun erken evrelerinde mikrogliyal değişiklikleri takip.

Fare Glokomda Konfokal Oftalmoskopik Görüntüleme ve Hücre morfometrisi: Nörodejenerasyonda sırasında Retina Mikroglial Aktivasyonu Vivo Dynamics

Bu protokolü nasıl yüksek çözünürlüklü spektral etki alanı optik Koherens tomografi gibi görüntüleme teknikleri açıklar ve lazer ophthalmoscopy tarama bir oftalmik görüntüleme platformu üzerinde bilgi edinme sistemiyle küçük Rodents yararlı olabilir dağıtım, hücre sırasıyla retina kalınlığı ve mikroglial.

Vivo Tayf alanlı optik Koherens tomografi ve lazer Ophthalmoscopy tarama Cx3cr1gfp/gfp muhabir farelerin görüntüleme

Burada, boyuna vivo içinde görüntüleme kullanışlılığı lazer kaynaklı choroidal neovaskülarizasyon farelerde morfolojik değişiklikler takip içinde mevcut.

Vivo Multimodal görüntüleme ve fare lazer kaynaklı Choroidal neovaskülarizasyon Model analizi

Burada, retinal dejenerasyon, glokom, diyabetik retinopati ve miyopi modellerinde retinal ve oküler yapıları in vivo olarak görselleştirmek için spektral-alan optik koherens tomografinin (SD-OCT) kullanımını açıklamaktayız.

Optik Koherens Tomografi Kullanılarak Kemirgen Modellerinde Oküler Hastalığın İn vivo Yapısal Değerlendirmeleri

Bu protokol, mikrovasküler proliferasyonun ex vivo modeli olan koroid filizlenme testini sunar. Bu tsay koroidal mikro damarlar çoğalan dahil yolları değerlendirmek ve yabani tip ve genetiği değiştirilmiş fare dokusu kullanarak ilaç tedavileri değerlendirmek için kullanılabilir.

Oküler Mikrovasküler Anjiyogenezin Ex Vivo Koroid Filizlenme Satomu

Bu protokol, farelerin retinal düz montajlarının hazırlanması ve immünofloresan boyanması ve analizi için ayrıntılı bir yöntemi açıklamaktadır. Floresein fundus anjiyografinin (FFA) fare yavruları ve görüntü işleme için kullanımı da ayrıntılı olarak açıklanmaktadır.

Oksijene Bağlı Retinopati Fare Modelinde Retina Damarlarının Dinamik Büyümesinin İzlenmesi

Burada, farelerde retinopatinin tanısını ve kantitatif ölçümünü kolaylaştırmak için optik koherens tomografi kullanan bir in vivo görüntüleme tekniğini tanımladık.

Optik Koherens Tomografinin Retinopatinin Bir Fare Modeline Uygulanması

Burada, Retinal Ven Tıkanıklığı (RVO) çalışmasında floresein anjiyografi (FA) ve optik koherens tomografi (OCT) görüntüleri için üç veri analizi protokolü sunulmuştur.

İn vivo Tekrarlanabilirliği Artırmak için Fare Retinasında Vasküler Yaralanma Okumaları

Şu anda, floresein anjiyografi (FA), koroidal neovaskülarizasyonun (KNV) hayvan modellerinde sızıntı paternlerini tanımlamak için tercih edilen yöntemdir. Bununla birlikte, FA vasküler morfoloji hakkında bilgi sağlamaz. Bu protokol, fare modellerinde lazerle indüklenen CNV'nin farklı lezyon tiplerini karakterize etmek için indosiyanin yeşili anjiyografinin (ICGA) kullanımını özetlemektedir.

Neovasküler Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonunun Vasküler Morfolojisinin İndosiyanin Yeşili Anjiyografi ile Karakterizasyonu

Etanol bağlı gelişimsel hasar moleküler mekanizmalarını anlayabilmek için, biz etanol maruz kalma zebrabalıkları modeli geliştirdik ve etanol maruz kaldıktan sonra meydana gelen fiziksel, hücresel ve genetik değişimler...

Fetal Alkol Pozlama bir Zebra balığı Modelinde teratojenik değişiklikler değerlendirilmesi

Öğrenin, yaşla ilişkili makula dejenerasyonu fare modellerinde koroid damarlarındaki anormallikleri Indocyanine Green anjiyografi ile zaman kursu görüntüleme yöntemiyle nasıl tespit edeceğinizi.

Zaman kurs Indocyanine Yeşil Anjiyografi ile Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonu Fare Modeli Koroid vaskülatürüne anormallikleri tespit (Video) | JoVE Journal

Zaman kurs Indocyanine Yeşil Anjiyografi ile Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonu Fare Modeli Koroid vaskülatürüne anormallikleri tespit

Daha fazla video keşfet