Name: Bir kullanma Pnömokok Kolonizasyon üzerinde Probiyotiklerin Etkileri incelenmesi In Vitro Yapışma Deneyi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-04-28T13:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 20 s
Description: Keşfedin probiyotik Streptococcus salivarius'un Streptococcus pneumoniae'nin epitel hücrelere yapışmasını in vitro yöntemle nasıl inhibe ettiğini. Bu teknik, pnömokokal kolonizasyonu önleme stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma Murdoch Çocuk Araştırma Enstitüsü ve Victoria Hükümeti&#39;nin Operasyonel Altyapı Destek Programı tarafından finanse edilerek desteklenmiştir.

<ol><li>O'Brien, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Burden+of+disease+caused+by+Streptococcus+pneumoniae+in+children+younger+than+5+years%3A+global+estimates%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Burden of disease caused by Streptococcus pneumoniae in children younger than 5 years: global estimates.</a> Lancet. 374, 893-902 (2009).</li>
<li>Bogaert, D., de Groot, R., Hermans, P. W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptococcus+pneumoniae+colonisation%3A+the+key+to+pneumococcal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Streptococcus pneumoniae colonisation: the key to pneumococcal disease.</a> Lancet Infect. Dis. 4 (04), 144-154 (2004).</li>
<li>Weinberger, D. M., Malley, R., Lipsitch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotype+replacement+in+disease+after+pneumococcal+vaccination%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Serotype replacement in disease after pneumococcal vaccination.</a> Lancet. 378 (10), 1962-1973 (2011).</li>
<li>Jacoby, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modelling+the+co-occurrence+of+Streptococcus+pneumoniae+with+other+bacterial+and+viral+pathogens+in+the+upper+respiratory+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Modelling the co-occurrence of Streptococcus pneumoniae with other bacterial and viral pathogens in the upper respiratory tract.</a> Vaccine. 25, 2458-2464 (2007).</li>
<li>Kwambana, B., Barer, M., Bottomley, C., Adegbola, R., Antonio, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+acquisition+and+high+nasopharyngeal+co-colonisation+by+Streptococcus+pneumoniae+and+three+respiratory+pathogens+amongst+Gambian+new-borns+and+infants%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Early acquisition and high nasopharyngeal co-colonisation by Streptococcus pneumoniae and three respiratory pathogens amongst Gambian new-borns and infants.</a> BMC Infect. Dis. 11, (2011).</li>
<li>Licciardi, P. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protecting+against+pneumococcal+disease%3A+critical+interactions+between+probiotics+and+the+airway+microbiome%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Protecting against pneumococcal disease: critical interactions between probiotics and the airway microbiome.</a> PLoS Pathog. 8, (2012).</li>
<li>Popova, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beneficial+effects+of+probiotics+in+upper+respiratory+tract+infections+and+their+mechanical+actions+to+antagonize+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Beneficial effects of probiotics in upper respiratory tract infections and their mechanical actions to antagonize pathogens.</a> J. Appl. Microbiol. 113 (6), 1305-1318 (2012).</li>
<li>Pracht, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PavA+of+Streptococcus+pneumoniae+modulates+adherence%2C+invasion%2C+and+meningeal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">PavA of Streptococcus pneumoniae modulates adherence, invasion, and meningeal inflammation.</a> Infect. Immun. 73, 2680-2689 (2005).</li>
<li>Adamou, J. E., Wizemann, T. M., Barren, P., Langermann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adherence+of+Streptococcus+pneumoniae+to+human+bronchial+epithelial+cells+%28BEAS-2B%29%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Adherence of Streptococcus pneumoniae to human bronchial epithelial cells (BEAS-2B).</a> Infect. Immun. 66, 820-822 (1998).</li>
<li>Wong, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+Streptococcus+pneumoniae+adherence+to+human+epithelial+cells+in+vitro+by+the+probiotic+Lactobacillus+rhamnosus+GG%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Res.+Notes%22%5BJournal%5D)">Inhibition of Streptococcus pneumoniae adherence to human epithelial cells in vitro by the probiotic Lactobacillus rhamnosus GG.</a> BMC Res. Notes. 6 (1), 135(2013).</li>
<li>Wescombe, P. A., Heng, N. C. K., Burton, J. P., Chilcott, C. N., Tagg, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptococcal+bacteriocins+and+the+case+for+Streptococcus+salivarius+as+model+oral+probiotics%5BTitle%5D)+AND+%22Future+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Streptococcal bacteriocins and the case for Streptococcus salivarius as model oral probiotics.</a> Future Microbiol. 4, 819-835 (2009).</li>
<li>Di Pierro, F., Adami, T., Rapacioli, G., Giardini, N., Streitberger, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+evaluation+of+the+oral+probiotic+Streptococcus+salivarius+K12+in+the+prevention+of+recurrent+pharyngitis+and%2For+tonsillitis+caused+by+Streptococcus+pyogenes+in+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Expert.+Opin.+Biol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Clinical evaluation of the oral probiotic Streptococcus salivarius K12 in the prevention of recurrent pharyngitis and/or tonsillitis caused by Streptococcus pyogenes in adults.</a> Expert. Opin. Biol. Ther. 13 (3), 339-343 (2013).</li>
<li>Fiedler, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+mechanisms+of+respiratory+tract+streptococci+against+Streptococcus+pyogenes+biofilm+formation+and+epithelial+cell+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Protective mechanisms of respiratory tract streptococci against Streptococcus pyogenes biofilm formation and epithelial cell infection.</a> Appl. Environ. Microbiol. 79, 1265-1276 (2013).</li>
<li>Slotved, H. C., Satzke, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+growth+of+pneumococcal+isolates+representing+23+different+serotypes%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Res.+Notes%22%5BJournal%5D)">In vitro growth of pneumococcal isolates representing 23 different serotypes.</a> BMC Res. Notes. 6, 10-1186 (2013).</li>
<li>Carvalho, M. dG. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+and+improvement+of+real-time+PCR+assays+targeting+lytA%2C+ply%2C+and+psaA+genes+for+detection+of+pneumococcal+DNA%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Evaluation and improvement of real-time PCR assays targeting lytA, ply, and psaA genes for detection of pneumococcal DNA.</a> J. Clin. Microbiol. 45, 2460-2466 (2007).</li>
<li>Tonnaer, E. L. G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+glycosaminoglycans+in+the+attachment+of+pneumococci+to+nasopharyngeal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Microbes+Infect%22%5BJournal%5D)">Involvement of glycosaminoglycans in the attachment of pneumococci to nasopharyngeal epithelial cells.</a> Microbes Infect. 8, 316-322 (2006).</li>
<li>Smith-Vaughan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+nasal+bacterial+load+and+its+association+with+otitis+media%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Ear+Nose+Throat+Disord%22%5BJournal%5D)">Measuring nasal bacterial load and its association with otitis media.</a> BMC Ear Nose Throat Disord. 6, (2006).</li>
<li>Letourneau, J., Levesque, C., Berthiaume, F., Jacques, M., Mourez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+assay+of+bacterial+adhesion+onto+mammalian+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">In vitro assay of bacterial adhesion onto mammalian epithelial cells.</a> J. Vis. Exp. , (2011).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Bu tahlilde önemli bir kısmının S. uygun konsantrasyonları katmaktadır bölümlerde 3.1.7 ve 3.1.12 de salivarius ve pneumococci&#39;ye. Konsantrasyonlar OD okumaları kullanılarak tahmin edilir, ancak bir sonraki gün plakalar sayılmıştır kadar tam olarak uygulanması gibi tespit edilmez. Bu nedenle, orta log fazı belirlemek ve OD ile konsantrasyonunun tahmin yardımcı olmak için tahlilde kullanılan tüm bakteriyel suşlar için zamanla OD ve uygun bir sayıları (CFU / ml) ölçmek için büyüme eğrileri gerçekleşt...

Streptococcus pneumoniae (pnömokok) pnömoni, otitis media ve menenjit gibi enfeksiyonlara neden olabilen bir Gram pozitif bir bakteridir. Düşük gelirli ülkelerdeki çocukların ve yıllık 1 beş yaşın altındaki çocukların yaklaşık 800.000 kişinin ölümünden sorumlu hastalığın önemli bir nedenidir. Pnömokok sıklıkla genç çocukların nazofarenks yapılmaktadır. Bu kolonileşme genellikle asemptomatik kabul edilir olsa da, bu pnömokok kökenli enfeksiyon takip eder ve insan popülasyonlarında 2&#39;deki bakteriler için bir rezervuar olarak hizmet vermektedir. Pnömokok kökenli konjügat aşısı etkili aşı içinde bulunan serotiplerin taşıma azaltır. Ancak, 90 pnömokok serotipleri üzerinde olan ve aşı serotiplerinin ortadan kaldırılması nonvaccine serotip 3 kaynaklanan taşıyıcı ve hastalık bir artış takip etmektedir, burada serotip değiştirilmesi, yol açabilir. Ayrıca, bazı yüksek riskli popülasyonlarda, pnömokokkolonizasyon genellikle önce ilk aşı dozu 4,5 tatbikatından, çok erken yaşta ortaya çıkar. Son zamanlarda, probiyotiklerin kullanımı pnömokok kolonizasyon 6,7 inhibe etmek için ilave bir strateji olarak teklif edilmiştir. In vitro deneyler, yapışma pnömokokkal yapışmayı 8,9 incelemek için kullanılmıştır. Bu deneyler pnömokok bağlılık 10 probiyotik Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) etkisini araştırmak için adapte edilmiştir. LGG ve diğer laktik asit bakterileri ek olarak, Streptococcus salivarius, ağız boşluğu, ortak yerleşik nedeniyle potansiyeli ve in vitro 11 pnömokok ve diğer solunum yolu patojenleri inhibe etme yeteneği ile kolonizasyon için solunum yolu için potansiyel bir probiyotik olarak incelenmiştir - 13. Burada sunulan protokol S. etkilerini araştırmak için kullanılan bir bağlılık tahlili tarif Pnömokok bağlılık üzerine salivarius K12insan epitel hücre hattı CCL-23. Büyümesi ve yapışma özellikleri izolatların 10,14 arasında önemli ölçüde değişebilir olarak deneyde kullanılmadan önce, pnömokok izolatı, yapışma özellikleri için değerlendirilmiştir. Pneumococci ve S. büyüme eğrileri salivarius (OD, Şekil 1) optik yoğunluk ile orta log fazı ve tahmini konsantrasyon (koloni oluşturan birim veya CFU / ml) tespit etmek için yapılmıştır. Her deneyde kullanılmadan önce izole edilmesi için uygun bir sayısı ve OD ile büyümesini incelemek için tavsiye edilir. Bu deney, standart doku kültürü tesisleri ve ekipmanları ile herhangi bir laboratuvarda yapılabilir. Bu protokol, S. üç doz etkisi salivarius önce S. uyumda pnömokok ilavesinden 1 saat uygulanmıştır pneumoniae PMP843, bir nazofarenks sürüntü türetilmiş bir serotip 19F taşıma izole incelenmiştir. Yapışık pnömokok ölçmek için iki farklı yol sunulmuştur: caydırmak için kan agar üzerine kaplamamaden canlı sayımları ve DNA ekstraksiyon ve qPCR 15 tarafından pnömokok lytA geninin tespiti. Temel yapışma tahlili protokolü kolay farklı dozlarda ve probiyotik tatbikat süresi test etmek için modifiye edilebilir ve aynı zamanda, diğer bakteri türleri ya da türleri ile kullanılabilir.

<table><tbody><tr><td>Minimum Esansiyel Medya (MEM)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>SH30244.01</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu (FBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>SH30084.03</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>T-75 Matara</td><td>Nunc</td><td>156472</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>CCL-23 hücreleri</td><td>ATCC</td><td>CCL-23</td> <td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Tripsin</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>15090046</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>24 oyuklu Hücre kültürü plakası</td><td>Nunc</td><td>142475</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>At kanı agar (HBA) plakaları</td><td>Oxoid</td><td>PP2001</td><td>Koyun kanı agar plakaları da kabul edilebilir</td></tr><tr><td>Todd-Hewitt Et Suyu</td><td>Oksoit</td><td>CM0189</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Maya Özü</td><td>Beckton Dickinson</td><td>212750</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Digitonin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D141-100MG</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Tek kullanımlık küvetler</td><td>Kartell</td><td>1938</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Pfizer</td><td>2112105,</td><td>5.000 IU / 5m/&nbsp'de steril ampullerde gelir;</td></tr><tr><td>Steril yayıcı</td><td>Technoplas</td><td>S10805050</td><td>alternatif olarak, bir cam yayıcı %96 etanole batırılabilir ve her kullanımdan önce alevle sterilize edilebilir</td></tr><tr><td>Lysozyme</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L6876</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Mutanolizin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M9901</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Proteinaz K</td><td>Qiagen</td><td>19133</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>SDS% 20 çözüm</td><td>Ambion</td><td>AM9820</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>RNase A</td><td>Qiagen</td><td>19101</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>QIAamp DNA mini kiti (250)</td><td>Qiagen</td><td>51306</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>LytA F astar</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Özel yapılmış</td><td>5 '-> 3' dizi ACGCAATCTAGCAGATGAAGCA</td></tr><tr><td>LytA R astar</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Özel yapılmış</td><td>5 '-> 3' dizi&nbsp; TCGTGCGTTTTAATTCCAGCT</td></tr><tr><td>LytA probu</td><td>Eurogentec</td><td>Özel yapım</td><td>5 '-> 3' dizi Cy5-TGCCGAAAACGCTTGATACAGGGAG-BHQ3, alternatif floroforlar kullanılabilir</td></tr><tr><td>Nükleaz içermeyen su</td><td>Ambion</td><td>AM9906</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Brilliant III Ultra Hızlı QPCR mastermix</td><td>Agilent Technologies</td><td>600880</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Termo-Hızlı 96 Algılama plakası &nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AB-1100</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Ultraclear qPCR kapak şeritleri</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AB-0866</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Mx3005 QPCR Sistemi</td><td>Agilent Teknolojileri</td><td>401449</td><td>&nbsp;</td></tr><tr>*Listelenen <td></td><td></td><td>ürünlerin çoğu/tümü için alternatif kaynaklar mevcuttur</td><td>&nbsp;</td></tr></tbody></table>

bir kullanma pnömokok kolonizasyon üzerinde probiyotiklerin etkileri incelenmesi<em&gt; in vitro</em&gt; yapışma deneyi

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Nazofarenks epitel astar Streptococcus pneumoniae (pnömokok) yapışması kolonizasyonu neden olabilir ve. In vitro deneyler, hücre yapışma epitel pnömokokkinin eki incelemek için kullanılabilir zatürre ve orta kulak iltihabı gibi pnömokok kökenli enfeksiyonları için bir ön koşul olarak kabul edilir ve mono tabakaları, bu tür probiyotiklerin kullanımı potansiyel müdahaleler, araştırmak pnömokokkal kolonizasyonu inhibe. Burada açıklanan protokol (bazen HEp-2 hücreleri olarak da adlandırılır), insan epitel hücre hattı CCL-23, pnömokokkinin yapışması üzerinde, probiyotik Streptococcus salivarius etkilerini incelemek için kullanılır. Deney üç ana adımdan oluşur: epitel ve bakteri hücrelerinin 1) hazırlanması, hücre mono tabakaları epitel bakteri 2) ilavesi ve canlı sayısı (seri seyreltme ve kaplama) ya da kantitatif gerçek zamanlı PCR (qPCR yapışık pnömokokkinin 3) tespiti .) Bu technique nispeten basittir ve bir doku kültürü kurulum dışındaki özel ekipman gerektirmez. Deney, diğer probiyotik türler ve / veya kolonizasyon pnömokok potansiyel inhibitörlerini test etmek için kullanılabilir ve kolayca pnömokok yapışma ve yayılım ile ilgili diğer bilimsel soruları için modifiye edilebilir.

Temsili bir deneyden elde edilen sonuçlar, bu pnömokok in (S. pneumoniae PMP843, bir kolonize 19F izole edilmiş) 1 saat S. eklenmesinden sonra CCL-23 hücrelerine ilave edildi salivarius ve pnömokokkal yapışmayı canlı sayımı ve lytA qPCR her ikisi tarafından nicelleştirilmiştir Tablo 2 &#39;de gösterilmiştir. Sonuçlar sayısına normalize bakteri mutlak sayısı (CFU / ml olarak gösterilmiştir) ve% bağlılık, her ikisi için de, iki yöntem arasındaki uyumluydu yalnız pnömoko...

In vitro yapışma deneyleri, hücre mono tabakaları epitel ve bu pnömokokkal kolonizasyonu inhibe etmek için probiyotiklerin kullanımı potansiyel müdahaleler araştırmak için Streptococcus pneumoniae eki incelemek için kullanılabilir.

Bir kullanma Pnömokok Kolonizasyon üzerinde Probiyotiklerin Etkileri incelenmesi<em&gt; In Vitro</em&gt; Yapışma Deneyi

Adherence of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) to the epithelial lining of the nasopharynx can result in colonization and is considered a ...

Bu prosedürün genel amacı, probiyotik bir streptococcus cell levarius'un, pnömokokların bir epitelyal hücre hattına tutunmasını inhibe etme yeteneğini incelemektir. Bu işlem, öncelikle CCL 23 epitelyal hücre monotabakalarının hazırlanmasıyla gerçekleştirilir. 24 kuyucuklu bir plakada, slovar ve pnömokoklar sırasıyla monotabakaya eklenir ve hücreler inkübe edilir.Son adımda, yapışmayan bakterileri uzaklaştırmak için kuyucuklar yıkanır. CCL 23 epitel hücreleri lizize edilir ve kuyucuk içerikleri toplanır. Nihayetinde, salivarius'un pnömokok yapışması üzerindeki etkisi, hücreye ilişmiş pnömokok sayısı nicelendirilerek değerlendirilebilir.Bu yöntem, probiyotiklerin pnömokok gibi bakteriyel patojenlerin yapışmasını inhibe edip edemeyeceği gibi enfeksiyon hastalıkları alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olur. Bu yöntemle ilgili ilk fikri, laktobasillus hipnosis, GG ve diğer probiyotiklerin solunum yolundaki potansiyel kullanımını araştırmaya başladığımızda edindik. Bu prosedürü laboratuvarımızdan PhD öğrencileri Jane Manning ve Zen uygulamalı olarak göstereceklerdir. Deneyden bir gün önce, konflüans durumundaki CCL 23 epitel hücre kültürünü ayırın ve ardından steril 50 mL'

investigating-effects-probiotics-on-pneumococcal-colonization-using

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Bu protokol, kültür hücreleri üzerine yapıştırılır birimler oluşturan bakteri kolonisi sayısının sayma oluşan basit bir bakteriyel yapışma testtir. Testin sağlam, adhesin bağımsız olarak okudu ve çeşitli varyasyonlar bakteriyel patogenezi üzerinde çalışan çoğu laboratuvarlarda kullanılır.

Bakteriyel Yapışma Memeli Epitel Hücreleri üzerine In Vitro Testi

Kaynak: Jagau, H. ve diğerleri. Sabit akışta birincil insan endotel hücrelerinin pnömokok enfeksiyonu. J. Vis. Uzm. (2019)Bu video, sabit ortam akış koşulları altında endotel hücreleri üzerindeki Von Willebrand Faktörü (VWF) dizilerine pnömokok bağlanmasının gerçek zamanlı görselleştirilmesini göstermektedir. VWF salınımını uyarmak, dizileri etiketlemek ve bakteri bağlanmasını ölçmek için adımları özetlemektedir.

Sabit Medya Akışı Altında Primer İnsan Endotel Hücrelerine Pnömokok Bağlanmasının Değerlendirilmesi

Kaynak: Calatayud Arroyo, M. ve diğerleri. In vitro bağırsak konak-mikrob arayüzünde sentetik bakteriyel konsorsiyumunun uygulanabilirliğinin değerlendirilmesi. J. Vis. Exp. (2018).Bu video, bakteriyellerin canlılığını incelemek için in vitro bağırsak konakçı-mikrop modelini gösteriyor. Caco-2 ve HT29-MTX hücrelerinin ortak kültürü, simüle edilmiş sindirim koşullarında önceden işlenmiş bakterilerle kuluçka geçirilir. Epitel bariyer bütünlüğü transepitelyal elektriksel direnç kullanılarak...

Bakteriyel Yapışma ve İçselleştirmeyi Değerlendirmek İçeriği Değerlendirmek İçerik Bağırsak Modeli

Video, biyofilm oluşumunu değerlendirmek için bir katı faz yapışma testini göstermektedir. Çok kuyucuklu bir plakada, safra tuzu takviyeli ortamdaki bakteriler katı yüzeylere yapışarak biyofilmler oluşturur, bu da kristal viyole boyama ve etanol muamelesi yoluyla kolorimetri ile doğrulanır.

Biyofilm oluşumunu değerlendirmek için bir katı faz uyum testi

Murine nazofarenksin Streptococcus pneumoniae ile kolonizasyonu ve daha sonra yapışık veya işe alınan hücrelerin çıkarılması açıklanmaktadır. Bu teknik, nazofarenksin yıkanmasını ve sıvının nares yoluyla toplanmasını içerir ve diferansiyel hücre niceliği ve mRNA ekspresyonunun yerinde analizi dedahil olmak üzere çeşitli okumalar için uyarlanabilir.

Streptococcus pneumoniae ile İntranazal Kolonizasyon Sırasında İnflamatuar Yanıtların Karakterizasyonu

Streptococcus pneumoniae ciddi toplum kökenli pnömoni ve dünya çapında 2 milyondan fazla kişinin ölümünden sorumludur neden lider patojen olduğunu. Spor ya da virülans karıştığı bakteriyel faktörlerin etkisi biyolüminesens bakterileri kullanarak akut fare pnömoni veya bakteriyemi modelinde gerçek zamanlı olarak izlenebilir.

Biyoluminesen Bakteriler Kullanılarak Gerçek Zamanda Bir Akut Fare Pnömoni Modelinde Pnömokok virulans faktörlerinin etkisi aşağıdaki

Streptococcus pneumoniae'deki rekabete, pnömokok ve diğer ilgili türlere karşı inhibe edici aktiviteye sahip bakteriyosinler, küçük antimikrobiyal peptitler aracılık eder. Burada, bakteriyosin aktivitesinin ve inhibitör spektrumun karakterizasyonuna, bakteriyosine özgü bağışıklığa ve salgılanan çekirdek algılama peptitlerinin saptanmasına izin veren optimize edilmiş bir bakteri kaplama testini açıklıyoruz.

Kaplama Testi kullanarak niteliksel Pnömokok Bakteriyosinlerin Bakteriyel Üretim ve Hassasiyet Tedbir

Bu çalışmada yenidoğan fareler için Probiyotikler gavaging kesin miktarda işlem ayrıntıları. Deneysel ayarı içerecek şekilde optimize edildi ama dozaj, yönetim yöntemleri ve bakterilerin bağırsak quantification probiyotik sınırlı değildir.

Probiyotik çalışmalar yenidoğan farelerde sonda ile besleme kullanarak

Burada açıklanan in vitro toplu fermantasyon sistemleri kullanarak endobiyotikler ve insan bağırsak mikrobiyotları arasındaki etkileşimleri araştırmak için bir protokoldür.

In Vitro Bath Fermantasyon Sistemleri Kullanılarak Endobiyotikler ve İnsan Bağırsak Mikrobiyotları Arasındaki Etkileşimlerin Analizi

Otomatik istatistiksel analiz yöntemleri ile birlikte yüksek verimli floresan etiketleme görüntüleme kullanılarak fenotipik yapışma esas alınarak konak-bakteriyel patojen etkileşimlerinin tespiti, konak hücrelerle potansiyel bakteriyel etkileşimlerin hızlı bir şekilde değerlendirilmesini sağlar.

Konak Hücrelere Bakteriyel Yapışmanın Otomatik, Yüksek Verimli Tespiti

Bu protokol, pks+ Escherichia coli farelerinin inflamatuar olmayan koşullarda kolonileşmesi için gerekli adımları, ayrıca kolonizasyonun doğrulanması ve dışkıda pks+ E. coli genişlemesinin değerlendirilmesi için invaziv olmayan yöntemleri tanımlar.

Murine pks+ Escherichia coli ile İltihap Olmayan Koşullarda Kolonizasyon

Keşfedin probiyotik Streptococcus salivarius'un Streptococcus pneumoniae'nin epitel hücrelere yapışmasını in vitro yöntemle nasıl inhibe ettiğini. Bu teknik, pnömokokal kolonizasyonu önleme stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

Bir kullanma Pnömokok Kolonizasyon üzerinde Probiyotiklerin Etkileri incelenmesi

Daha fazla video keşfet