Name: Kültürler Hücre Şok Dalga Uygulama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-04-08T18:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 39 s
Description: Öğrenin, hücre kültürlerinde şok dalga uygulama yöntemiyle tekrarlanabilir sonuçlar elde etmeyi. Isıtılmış su banyosu ve ultrason jeli kullanarak fiziksel etkileri en aza indirir, hücre analizi için güvenilir bir model sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar bu model için ilham için Reiner Schultheiss ve Wolfgang Schaden teşekkür ederim. Biz aynı zamanda araştırma desteklemek için onun her zaman muazzam çabaları için Hıristiyan Dorfmüller teşekkür ederim. Bizim fikirlerin dikkatli bir teknik gerçekleşmesi için Robert GÖSCHL ve Hans Hohenegger için çok teşekkürler!

Etik izni Hastaların Yazılı bilgilendirilmiş izinleri alındıktan sonra, göbek kordonu, insan göbek damarı endotelial hücrelerde (HUVECler) izolasyonu için Kadın Hastalıkları Bölümü&#39;nde sezeryan elde edilmiştir. İzin Innsbruck Tıp Üniversitesi (no. UN4435) etik komitesinden verildi. 1.. IVSWT Su banyosu hazırlayın <ol><li> Uygun bir tankta musluk suyu 3,5 L hazırlayın. Su (Protokolü: 6), 37 ° C&#39;ye kadar ısıtılması gerekir. </li><li> Su seviyesi yaklaşık 3 cm kenarının altına kadar su banyosu içine su doldurun. Tamamen su ile membran kapak Zihin. Bu, yaklaşık olarak hazırlanmış 3.5 L. gerektirir </li><li> Güç kaynağına sıcaklık sensörü bağlayın. </li><li> Su banyosunun arka duvarında amaçlanan montaj içine sensörünü koyun. </li><li> Sıcaklık sensörünün güç kaynağına ısıtma bağlayın. Olmadan bunu yapmayınısıtıcı olarak su banyosunda Pleksiglas eritmek olacaktır. </li><li> Su 37 ° C arasında sabit bir sıcaklığa ulaşana kadar bekleyin Su banyosu boyunca sabit sıcaklık garanti sopa çeşit düzenli su karıştırın. </li></ol> 2.. Hücreler ve Kültür şişeler hazırlayın <ol><li> Bunlar istenen kaynaşmaya kadar ulaştığı, doğrudan T25 kültür şişelerinde ya da kültür şişelerinde hücreler istenilen yoğunlukta gece boyunca tohum hücreleri. </li><li> Deneyden önce, dikey olarak şişeler hizalayın. </li><li> Sağ onların boyunlarına altına kadar kültür ortamı ile kültür şişeler doldurun. Kontamine alacağı boyun veya kapanış kapağa temas ortamı olarak şişeler içine çok fazla orta doldurmayın. </li><li> Su kirliliği önlemek için filtre olmadan katı kapaklar şişeler vida. Banyoda su ve banyo kendisi steril olmadığını akla. </li><li> Su banyosu içine sokulmadan önce Parafilm ile kapaklarını sıkıca kapatın. </li> &lt;li&gt; sağlanan standında mühürlü kültür şişeleri Fix. </li><li> Su banyosunun içine sabit şişesi yerleştirin. Hücre kültür şişesi orta şok dalgası aplikatör membranın merkezi olarak aynı yükseklikte olduğu dikkat edin. Banyo tarafında bir çizgi sizi yönlendirir. </li></ol> 3.. Tedavi Parametreler tanımlayın <ol><li> Şok dalgası kaynağı ve örnek arasındaki mesafe tanımlayın. Şekil 6&#39;da tarif edildiği gibi parametre bulgu Pilot deney ile mükemmel bir tedavi parametrelerini belirlemek. </li><li> Şok dalgası aygıtta doğru tedavi parametreleri (enerji akı yoğunluğu, sıklığı) seçin. Yine, Şekil 6&#39;ya bakınız. </li></ol> 4. Şok Dalga Uygulama <ol><li> Şok dalgası uygulayıcı yanı sıra, su banyosunun zarı üzerinde ticari olarak temin edilebilen ultrasonik iletim jel bol miktarda koyun. Bu kavrama temin etmektir. Resim hava ya da hava kabarcıkları gibi aplikatör ile membran arasında olmalıdırBu şok dalgaları absorbe eder. </li><li> Zara aplikatör bağlayın ve zarın merkezinde sabit tutun. Yatay hizalanmış olduğunu dikkat edin. </li><li> Su banyosu içine prob doğru dikey konumu gösterilen banyo kenarındaki işaretleme paralel olduğundan emin olun. </li><li> Yatay bir çizgi olarak uygulayıcının ve şişe istikrarlı merkezleri tutun. </li><li> Şok dalgası cihazı etkinleştirme ve bütün işlem sırasında sabit bir pozisyonda kültür şişesi gibi aplikatör tutarken darbeleri uygulanır. </li></ol> 5.. Sonra Tedavi <ol><li> Su banyosundan kültür şişesi al. </li><li> Ortak kağıt havlu ile kurulayın. </li><li> Dezenfekte edici ajanlar ile doğru şişeyi silin. </li><li> Parafilm sızdırmazlık ve kapağını çıkarın. </li><li> Santrifüj tüplerine matara içinde Orta Pipet. </li><li> Uygun santrifüj. Santrifüj parametreleri kullanılan hücre türüne bağlıdır, <em&gt; Örneğin. HUVECler için, oda sıcaklığında, 290 g kullanın. </li><li> Şişeye hücre kültür ortamının 5ml ekleyin. Hücre kültürü ortamı ile 2 ml santrifüjlenmiş hücre pelletini. Şişeye süspansiyonu pipetle. Böylece, tedavi sırasında müstakil olabilir hücre fragmanları ya da hücrelerin kaybolmak yok. </li></ol> Tuzaklar <ol><li> Preparasyon hem de muamele hücre kültürü kirlenmesini önlemek için laminar akış içinde steril koşullar altında gerçekleştirilmelidir. </li><li> İyi hücre kültürü uygulamaları prob kirlenmesini önlemek için tavsiye edilir. Özel olarak, şişe dış dezenfeksiyonu güçlü geri inkübatör yerleştirmeden önce önerilir. Su banyosu, hem de su içinde, steril değil! </li><li> Su banyosu banyo inşa pleksiglas zarar görmesini önlemek için su ile doldurulur sürece güç kaynağına ısıtıcı takmayın. </li><li> Şok dalgası İçi üzerinde ultrason jeli bol miktarda kullanınicator banyoya doğru kavrama ve dalga yayılımı garanti. Hava ve hatta küçük hava kabarcıkları şok dalgaları absorbe yapın! </li><li> Tüm büyüme alanı tedavisini sağlamak için bir aplikatör ile ilgili olarak su banyosu içindeki sondaların konumunu kontrol edin. </li><li> Kontaminasyonu önlemek için çok derin suya sondaları dunk etmeyin. </li></ol>

<ol><li>Haupt, G., Haupt, A., Ekkernkamp, A., Gerety, B., Chvapil, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+shock+waves+on+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Influence of shock waves on fracture healing.</a> Urology. 39, 529-532 (1992).</li>
<li>Schaden, W., Fischer, A., Sailler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+shock+wave+therapy+of+nonunion+or+delayed+osseous+union%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Orthop.+Relat.+Res%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal shock wave therapy of nonunion or delayed osseous union.</a> Clin. Orthop. Relat. Res. 387, 90-94 (2001).</li>
<li>Schaden, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shock+wave+therapy+for+acute+and+chronic+soft+tissue+wounds%3A+a+feasibility+study%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">Shock wave therapy for acute and chronic soft tissue wounds: a feasibility study.</a> J. Surg. Res. 143, 1-12 (2007).</li>
<li>Tepeköylü, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shock+wave+treatment+induces+angiogenesis+and+mobilizes+endogenous+CD31%2FCD34-positive+endothelial+cells+in+a+hindlimb+ischemia+model%3A+Implications+for+angiogenesis+and+vasculogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Thorac.+Cardiovasc.+Surg%22%5BJournal%5D)">Shock wave treatment induces angiogenesis and mobilizes endogenous CD31/CD34-positive endothelial cells in a hindlimb ischemia model: Implications for angiogenesis and vasculogenesis.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 146, 971-978 (2013).</li>
<li>Nishida, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+cardiac+shock+wave+therapy+markedly+ameliorates+ischemia-induced+myocardial+dysfunction+in+pigs+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal cardiac shock wave therapy markedly ameliorates ischemia-induced myocardial dysfunction in pigs in vivo.</a> Circulation. 110, 3055-3061 (2004).</li>
<li>Fukumoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+cardiac+shock+wave+therapy+ameliorates+myocardial+ischemia+in+patients+with+severe+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Coron.+Artery+Dis%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal cardiac shock wave therapy ameliorates myocardial ischemia in patients with severe coronary artery disease.</a> Coron. Artery Dis. 17, 63-70 (2006).</li>
<li>Gotte, G., Amelio, E., Russo, S., Marlinghaus, E., Musci, G., Suzuki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-time+non-enzymatic+nitric+oxide+synthesis+from+L-arginine+and+hydrogen+peroxide+induced+by+shock+waves+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Lett%22%5BJournal%5D)">Short-time non-enzymatic nitric oxide synthesis from L-arginine and hydrogen peroxide induced by shock waves treatment.</a> FEBS Lett. 520, 153-155 (2002).</li>
<li>Wang, F. S., Wang, C. J., Huang, H. J., Chung, H., Chen, R. F., Yang, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+shock+wave+mediates+membrane+hyperpolarization+and+Ras+activation+for+osteogenesis+in+human+bone+marrow+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+Biophys.+Res.+Commun%22%5BJournal%5D)">Physical shock wave mediates membrane hyperpolarization and Ras activation for osteogenesis in human bone marrow stromal cells.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 287, 648-655 (2001).</li>
<li>Mittermayr, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+shock+wave+therapy+%28ESWT%29+minimizes+ischemic+tissue+necrosis+irrespective+of+application+time+and+promotes+tissue+revascularization+by+stimulating+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Surg%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal shock wave therapy (ESWT) minimizes ischemic tissue necrosis irrespective of application time and promotes tissue revascularization by stimulating angiogenesis.</a> Ann. Surg. 253, 1024-1032 (2011).</li>
<li>Baker, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+mouse+aortic+ring+assay+to+study+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Use of the mouse aortic ring assay to study angiogenesis.</a> Nat. Protoc. 22, 89-104 (2011).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

In vitro şok dalgası tedavisi için önerilen modelin önemi dalgaları mevcut modelleri aksine, hücre kültürü geçtikten sonra, yayılan bir gerçektir. Böylece, gerilme kuvvetleri gibi rahatsız edici bir fiziksel etkileri önlenebilir. Bu model daha yakından diğerleri doğrudan hücre kültürü şişelerine dalgaları uygulayarak daha vivo koşullarda benzer. Diğer bir avantaj şok dalgası kaynağı ve hücreler arasındaki mesafe değişen olasılığıdır. Doğrudan bir kültür şişesi tedavi, bu mü...

Şok dalgaları enerji, örneğin ani bir sürümü kaynaklanan ses basınç dalgaları vardır. Gök gürültüsü gibi şimşek. Tıpta şok dalgaları böbrek taşlarının dağılması için Böbrek Taşı Kırma 30 yıldır kullanılmaktadır. 1980&#39;lerin başında Lithotripsy hastalarda iliyak kemik kalınlaşması rastlantısal yana, ilk çalışmalar 1 şifa kemik üzerinde şok dalga tedavisi (cc) etkisini değerlendirmek için yapılmıştır. Uzun kemik kaynamamalarının geliştirilmiş şifa etkileyici sonuçları 2 gözlenebilir. Daha sonra, endikasyonları yumuşak doku yaraları 3 genişletildi. Temel araştırma sonuçları şok dalgaları sonraki herhangi bir zarar vermeden, hedef dokuya biyolojik bir uyarıcı neden yok olduğunu gösterdi. Anjiyojenik büyüme faktörleri (örneğin, VEGF, PIGF, FGF) serbest kalır önemli anjiyogenez tarafından takip edilir. Bu işemik patolojiler yönelik endikasyonlar bir başka genişlemesine yol açtı. Bizim grup ve diğerleri pozitif eff gösterdivb hayvan modellerinde, iskemik kalp hastalığı ile ilgili SWT hem de klinik çalışmalarda 4-6. Ancak, SWT fiziksel uyaran bir biyolojik sinyali (mechanotransduction) çevrilir nasıl tam mekanizması büyük ölçüde bilinmemektedir. Sürekli tıp artar çeşitli alanlardan SWT faiz olarak, mekanizması için arayışı daha fazla ve daha yoğun oluyor. Bu nedenle, in vitro şok dalgası deneyler önem kazanmaktadır. Hayvan deneyleri ve maliyet-etkililik azaltmanın yanında, in vitro şok dalga tedavisi (IVSWT) en büyük avantajı belirli bir hücre tipi belirli davranış okuyan olasılık olabilir. Şok dalgası aracılı doku rejenerasyonu olarak en olası tedavi edilen doku tüm hücreler dahil, hatta sistemik etkileri tartışılmıştır. Bununla birlikte, her bir hücre tipi özel bir rol oynar ve kendi iç işlevi vardır. IVSWT Bu özel fonksiyon a algılamak için bize sağlarnd böylece bize karmaşık yatan süreçlerin daha iyi anlaşılmasını sağlar. Hücre kültürleri üzerinde şok dalgasının etkileri hakkında Bugünün bilgi çoğalması artış, hücre zarı reseptörlerinin değişiklik, artış ve hücre farklılaşmasının hızlanması, büyüme faktörleri ve kemo-cezbedici salınımını yanı sıra artmış hücre göçü 7-9 içerir. İn vitro model Hücre kültürleri üzerinde şok dalgaları uygulanması çeşitli yöntemler çoğu dikkat dağıtıcı fiziksel etkileri tarif edilmiştir. Bu durum, hücre uyarımı fiziksel koşullar, bu modeller arasında oldukça farklıdır gibi, sonuçları karşılaştırmak için son derece zordur soruna yol açar. Genel olarak, mevcut tüm modelleri en iyi hücreleri üzerine şok dalgaları uygulamak için nasıl odaklanmak. Ancak, bu bir soru kalır: Ne hücre kültürü geçtikten sonra dalgalar olur? Asıl sorun olduğunu akustik farkıHücre kültür ortamı ve ortam havasının empedans şok dalgalarının fazla% 99 Şekil 1 yansıyan olsun, bu yüksektir. Nedeniyle iki ortam akustik empedans farkından dolayı dalgalar yansıtılır değil, aynı hücreler, Şekil 2, 180 ° &#39;lik bir faz kayması güçlü gerilme kuvvetleri ile sonuçlanan oluşur. Akustik empedansı, bir malzemenin yoğunluğunun ürünü ve ses hızı Z = ρ x c olarak tanımlanır. Su için akustik empedans hava için sadece 420 Ns / m 3, ZWater = 1440000 Ns / m 3 &#39;tür. Bu iki değer arasında büyük bir fark şok dalgaların yansıma ve faz kayması ile sonuçlanır. Faz kayması bir gerilme dalgası içine bir pozitif basınç darbe döner. Bu germe gücü, hücre için zararlı değildir bile, in vitro, in vivo şok dalga etkileri taklit fikri ile müdahale. In vivo bugerilme kuvvetleri neredeyse nedeniyle büyük beden yapıları ortaya çıkar. Ayrıca, dalgalar çalıştıran bile geri gelen olanları rahatsız edebilir. Bu girişime neden olabilir. Girişim iki tip bilinmektedir. Yapıcı girişim hem dalgalar böylece ikiye genlik Şekil 3 neden eklenir demektir. Dalgalar zıt karşılamak durumunda yıkıcı girişim olur. Bu dalgaların kaldırılması (Şekil 3) neden olur. Bu nedenle, IVSWT hücre kültürü geçtikten sonra yaymak için şok dalgaları sağlayan bir model ihtiyacı vardır. IVSWT su banyosu Yukarıda belirtilen sorunlardan aşağıdaki noktalara dikkat anlatılan sorunlar Temel olarak, bu şok dalgası uygulayıcının her türlü bağlamak için bir zar ile inşa edilmiş bir pleksiglas bir kap oluşur. Şekil 4 önlemek için bir su banyosu tasarımı götürmektedir. Bu membran ve aplikatör ultrason iletim ge arasında bağlantı içinl kullanılmak zorundadır. Su banyosu gazı su içinde çözülerek ise ortaya çıkabilecek kavitasyon önlemek için gazı giderilmiş su ile doldurulur. Bir kontrol birimine bağlı olan bir sıcaklık sensörü ile altta bir ısıtıcı in vivo koşulları taklit için sıcaklığını düzenlemek için ve işlem sırasında soğutmak için hücre kültürlerinin önlemek sağlar. Bir kuluçka makinesi içinde yapıldığı gibi sıcaklık santigrat 37 derece stabil yapılabilir. Hücre numuneleri için bir tutucu kültür şişesi veya tüp herhangi bir çeker sağlar. Böylece, örnek kabının hava kabarcıkları şok dalgaları engellemek gibi tamamen kültür ortamı ile doldurulması gerekir! Hamamın arka duvarında bir kama şeklindeki susturucu amacıyla yansıyan ve girişimi önlemek için geri çalıştırmak almak için değil dalgalar ortadan kaldırmış. Diğer IVSWT modellere bir başka avantajı, aplikatör ile kültür şişelerine arasındaki mesafenin farklılaşması olasılığıdır. Bu modeli açıkça s kullanmak Grubumuzun Bulgular ve diğerleriHer hücre tipi farklı tedavi parametrelere çok özel nasıl tepki vereceğini söyledi. Bu şok dalgası uygulayıcının odak ile ilgili olarak belirli bir konumda olmak üzere kontrol hücreleri ile bize sağlar Dahası, dalgaları kaynağı ile örnek arasındaki mesafeyi tanımlayan çok önemlidir.

<table><tbody><tr><td>Orthogold şok dalgası cihazı</td><td>Doku Rejenerasyon Teknolojileri, Woodstock, GA &ndash; MTS-Europe GmbH, Konstanz, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>tarafından üretilmiştir IVSWT Su Banyosu V2.0</td><td>Johann Hohenegger - Teknik Ürünler</td><td></td><td></td></tr><tr><td>EBM-2 Bazal Orta 500 m +EGM-2 SingleQuot Suppl. & Büyüme Faktörleri</td><td>Lonza</td><td>CC-3156 & CC-4176</td><td>Bu besiyeri, hücre kültürü şişesini doldurmak için HUVEC'lerle gösterilen deneyler için kullanıldı. Diğer hücre türleri için önerilen ortamı kullanın.</td></tr><tr><td><a href="http://www.labplanet.com/pechiney-parafilm-m-pm996.html">Pechiney&nbsp; Parafilm M PM996</a></td><td>Pechiney Plastik Ambalaj</td><td>PH-LF-PM996-EA at labplanet.com şişelerin</td><td>sızdırmazlığı için</td></tr><tr><td>Falcon Serolojik pipetler 25 ml</td><td>Becton Dickinson Labware</td><td>357525</td><td></td></tr><tr><td>CellMate II Serolojik Pipet;</td><td>Matrix Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Skintact Ultrasonik Jel</td><td>Skintact</td><td>UL-01 250 ml</td><td></td></tr><tr><td>T25 Hücre kültürü şişeleri</td><td>COSTAR</td><td>3056</td><td></td></tr><tr><td>Mikrozid dezenfektan</td><td>Sch&uuml; lke</td><td></td><td></td></tr><tr><td>3,5 L Gazdan arındırılmış su</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kağıt havlu</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

kültürler hücre Şok dalga uygulama

Shock Wave Application to Cell Cultures

Şok dalgaları günümüzde de kendi rejeneratif etkileri bilinmektedir. Temel araştırma bulguları şok dalgaları sonraki herhangi bir zarar vermeden hücreleri ya da hedef dokuya biyolojik bir uyarıcı neden yok olduğunu gösterdi. Bu nedenle, in vitro deneyler, giderek artan ilgi çekmektedir. Hücre kültürleri üzerinde şok dalgaları uygulanması için çeşitli yöntemler tarif edilmiştir. Genel olarak, mevcut tüm modelleri en iyi hücreleri üzerine şok dalgaları uygulamak için nasıl odaklanmak. Ancak, bu bir soru kalır: Ne hücre kültürü geçtikten sonra dalgalar olur? Hücre kültür ortamının akustik empedans ve ortam havasının fark şok dalgalarının fazla% 99 yansıyan olsun, yüksek! Bu nedenle esas olarak dalgalar hücre kültürünün geçtikten sonra su içinde yayılmasına izin veren bir pleksiglas dahili kabın oluşan bir model geliştirmiştir. Bu kavitasyon etkileri yanı sıra aksi yaklaşan olanları rahatsız olur dalgaların yansımasını önler. WiBu modelde inci biz vivo koşulları taklit ve böylece şok dalgalarının fiziksel uyaran bir biyolojik hücre sinyalinin (&quot;mechanotransduction&quot;) tercüme alır nasıl hakkında daha fazla bilgi elde edebiliyoruz.

Kordon Biz önceden izole edilmiş, insan göbek bağı damarı endotel hücrelerine şok dalgaları uygulanan tarif edilen yöntem (HUVECler) kullanılması. Göbek kordonları elektif sezaryen bölümlerden elde edildi. HUVEC'ler bir elektrohidrolik şok dalga tedavisi sistemi ile bir T25 hücre kültürü şişesi içinde% 90 bir izdiham tedavi edildi. Tedavi parametreleri 0.1 mJ / mm 2 ve 5 Hz'lik bir frekansta bir enerji akı yoğunluğu idi. 300 darbeleri şok dalgası kaynağından 5 cm'lik bir mesafeden...

Şok dalgaları günümüzde de kendi rejeneratif etkileri bilinmektedir. Bu nedenle in vitro deneyler, giderek artan ilgi çekmektedir. Bu nedenle, böylece rahatsız edici fiziksel etkilerini önlemek vivo koşullarda taklit bize sağlayan in vitro şok dalgası çalışmalarda (IVSWT) için bir model geliştirmiştir.

Kültürler Hücre Şok Dalga Uygulama

Shock waves nowadays are well known for their regenerative effects. Basic research findings showed that shock waves do cause a biological stimulus to ...

Bu prosedürün genel amacı, tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için in vitro şok dalgası tedavisi sırasında dikkat dağıtıcı fiziksel etkilerden kaçınmaktır. Bu, öncelikle bir hücre kültür flaskının tamamen kültür medyumu ile doldurulması ve ardından flaskın ısıtılmış bir su banyosuna yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım, aplikatör su banyosuna kenetlendiğinde bol miktarda ultrason jeli kullanmaktır.Ardından, aplikatör su banyosunun membranına yatay bir şekilde yerleştirilir. Son adım, hücrelerin dalga odağına konumlandırılmasını sağlamak amacıyla şok dalga kaynağının hücre kültürü flaskının merkeziyle aynı hizaya getirilmesidir. Son olarak, ilgilenilen genlerdeki ve sitokinlerdeki değişimi göstermek için gerçek zamanlı PCR ve bir sitokin dizisi ile hücrelerinizin analizi örneğin şu şekilde gerçekleştirilebilir.Kısa dalgaları doğrudan hücre kültürlerine uygulama yöntemlerinin, kültür ortamından ortam havasına geçişteki dalga yansımasının etkisini dikkate almadığını fark ettiğimizde bu model fikri ilk kez ortaya çıktı. Prosedürü araştırma grubumdan doktora öğrencisi Dr. Chante uygulamalı olarak gösterecek. Başlamak için 3,5 litre musluk suyunu 37 °C'ye ısıtın.Ardından, ıs

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Bir roman dürtüsel hücre basınçlandırma deneme patlama-indüklenen travmatik beyin hasarının hücresel / moleküler mekanizmalarının araştırılması için bir Kolsky çubuğu aygıtı kullanılarak geliştirilmiştir.

Travmatik Beyin Hasarı Eğitim için Nöronal Hücre Dürtüsel Basınçlandırma

Bu videoda, kontrollü basınçlandırma yoluyla bir polimer diyaframı parçalayarak bir şok dalgası oluşturmak için bir şok tüpü cihazı kullanılmaktadır. Şok dalgası, güvenli bir torbada bulunan beyin dilimlerini etkiler ve beyin diliminde travmatik yaralanmaya neden olur.

Şok tüpü cihazı kullanarak beyin diliminde travmatik yaralanmaya neden olmak

Hücre Tek katmanlar mekanik uyarılması bağlı Kalsiyum Dalga Yayılım: Sığır Kornea Endotel Hücreleri Örneği

Biz mikro ölçekli hücre stimülasyonu deneyler için otomatik bir hücre kültürü ve sorgulama platformu geliştirdik. Platform yetiştirilmesi ve hücrelerin küçük nüfus uyarıcı ve moleküler analizler için lizatları kurtarma, basit, çok yönlü ve hassas kontrol sağlar. Platform de değerli hücreleri ve / veya reaktif kullanmak çalışmalar için uygundur.

Mikro ölçekli Hücre Stimülasyon deneyler için Çok Yönlü Otomatik Platformu

Bu mikron çaplı daralması bir düzeni sekansından geçerken hücre için gereken süreden daha ölçmek için mikroflüidik bazlı analiz göstermektedir.

Mikroakışkan Tekniği Hücre deformabilitesi Probe

Burada, yüksek verimli tek hücre izolasyonu ve uzun süreli klonal kültüre izin vermek için yeni bir mikro kuyu tasarım konseptini kullanan mikroakışkan bir platformla tek hücreleri izole etmek ve kültürlemek için bir protokol sunuyoruz.

Yüksek verim Tek hücreli İzolasyonu ve Kültür mikroakışkan Platformu

Nasıl hücreleri tarafından şok dalgalarıyla modüle anlama gelen patlama olayları tetikleyen yaralanmaları arkasında mekanizmaları belirlemenize yardımcı olabilir. Bu iletişim kuralı özel olarak oluşturulmuş şok tüpü ekipman hücre monolayers için şok dalgaları baskıların bir mesafeden uygulamak ve hücre canlılığı üzerinde sonraki etkileri tanımlamak için kullanır.

Değerlendirirken birincil patlama efektleri Vitro

Burada yörünge sallayarak ile hücresel toplamları kültürleri süspansiyon için özel gemiler, O şeklinde kullanmak için bir iletişim kuralı mevcut. Bu çantanın içinde yetiştirilen HEK293 hücreleri daha fazla form bu geleneksel kültür damarlarının yetiştirilen daha homojen toplamları.

Memeli hücre kültür Tekdüzen toplamları üretmek için O şeklindeki damarlarının sallayarak bir Orbital

Bu kağıt birincil patlama travmatik beyin hasarı roman modeli açıklar. Sıkıştırılmış hava tahrikli şok tüpü vitro fare hipokampal dilim kültürler için tek bir şok dalgası ortaya çıkarmak için kullanılır. Bu tekrarlanabilir beyin doku hasarı ile yüksek üretilen iş üreten bir basit ve hızlı bir protokoldür.

Patlama travmatik beyin hasarı roman Vitro modeli

Bu model sistem bir tahribatsız şekilde endojen kolajen (yeniden) organizasyonu gerçek zamanlı çalışma için kullanılabilecek bir miyofibroblast nüfuslu fibrin jel başlar. Bu model sistemi, farklı hücre kaynakları, orta katkı maddeleri ile birlikte kullanılabilir gibi çok ayarlanabilir, ve özel ihtiyaçlarına göre kolay bir şekilde adapte edilebilir.

Mühendislik Fibrin tabanlı Doku miyofibroblastlar ve Kısıtlar Uygulamasından Yapıları ve Hücre ve Kollajen (Re) Organizasyon tetikleyebilecek süzün

Öğrenin, hücre kültürlerinde şok dalga uygulama yöntemiyle tekrarlanabilir sonuçlar elde etmeyi. Isıtılmış su banyosu ve ultrason jeli kullanarak fiziksel etkileri en aza indirir, hücre analizi için güvenilir bir model sunar.

Kültürler Hücre Şok Dalga Uygulama

Daha fazla video keşfet