Yerel ya da Sistemik Farmakolojik Müdahale sonrası Farelerin Uçucu Genel Anestezik Hassasiyet Değişiklikleri değerlendirilmesi

Bu prosedürün genel amacı, farmakolojik bir müdahaleden sonra anestezik duyarlılıktaki değişiklikleri değerlendirmektir. Bu, düzgün gaz akışı ve sıcaklığı sağlamak için önce maruz kalma odalarının dikkatlice kontrol edilmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım, hayvanları odalara alıştırmaktır.

Daha sonra, ilgilenilen farmakolojik müdahale gerçekleştirilir. Son adım, anestezik maruziyete yanıt olarak hayvanın yazma refleksini değerlendirerek anestezik duyarlılıktaki değişiklikleri değerlendirmektir. Sonuç olarak, yazma refleks testleri, uzun veya kısa etkili farmakolojik müdahalelerin neden olduğu anestezik duyarlılıktaki farklılıkları göstermek için kullanılır.

Bu sistem, farelerde anestezik duyarlılıktaki değişiklikler hakkında bilgi sağlayabilse de, solunan herhangi bir terapötiğin etkilerini incelemek için çeşitli türlerde de kullanılabilir. Test cihazı, 10 santimetre uzunluğunda ve beş santimetre çapında 24 şeffaf akrilik silindirik odadan oluşur. Bu boyut, tipik bir 25 gramlık yetişkin fare için uygundur.

Her odanın her iki ucunda gaz girişi ve çıkışı için bir bağlantı noktası vardır. Çıkış ucu, çıkarılmasını kolaylaştırmak için lastik contalarla kapatılmıştır. Hayvanın yerleştirilmesi için, her bir odayı bir su banyosunun içine oturan bir rafa monte edin.

Rafı, odaların yalnızca alt kısmı suya batırılacak şekilde yerleştirin. Haznenin arka ucundaki bir destek, stabilite sağlar ve hazneleri yatay tutarak, her haznenin banyo ile eşit temasını sağlar. Bir oksijen tankını polietilen borulu bir buharlaştırıcıya ve akış ölçere bağladıktan sonra, boruyu eşit uzunlukta 25 küçük çaplı dirence bölün.

Bu, bağlandığında her odaya eşit akış sağlanmasını sağlar. Ardından, gaz girişinin karşı ucundaki her odadan çıkan vakum hatlarını bağlayın. Vakum hatları, şirket içi bir emiş hattına bağlanmak için bir manifoldda birleşir.

Ana vakum hattı boyunca uzanan bir boşaltma valfi, her oda içinde atmosferik basınç koşullarını sağlar. Her şey bağlandıktan sonra, banyoyu her bir haznenin dibine tam olarak temas edecek kadar su ile doldurun. Suyu dolaştırmak ve 37 santigrat derece arasında sabit bir sıcaklığı korumak için pompayı açın.

Teste devam etmeden önce, odalar sızıntı ve uygun hava akışı açısından incelenir. İlk olarak, oksijeni dakikada beş litre hızına ayarlayın. Her odayı suya batırın ve her ikisi de sızıntı göstergesidir.

Deneye başlamadan önce sızıntı yapan odaları değiştirin. Her bölme için, akışların her hat boyunca dengelendiğinden emin olmak için odanın önüne dakikada 500 mililitrelik bir akış ölçer bağlayın. Beklenen akışı almayan herhangi bir oda, borularında tıkanıklıklar olup olmadığını kontrol ettirmelidir.

Son olarak, alışkanlıktan bir hafta önce %100 oksijen akarken %0.0 flor okuması sağlamak için ajan analizörünü kalibre edin. Test sırasında vücut ısısını izlemek için transponderler implante edilir. Uygun anestezi derinliğine ulaştıktan sonra, sırt boyun bölgesini Betadine ile sterilize edin.

Ardından, sıcaklık transponderlerini omuz bıçakları arasına deri altına enjekte etmek için steril bir iğne kullanın. Transponderin enfeksiyonu ve göçü için enjeksiyon bölgesini günlük olarak izleyin. İlk değerlendirmeden dört gün önce, tüm deney hayvanları, yeni bir ortamdan kaynaklanan stresin etkilerini azaltmak için odalara alıştırılır.

Bunu yapmak için, iki saat boyunca% 100 oksijen akan her odaya bir hayvan yerleştirin. Test edene kadar bu maruziyeti günlük olarak tekrarlayın. Dört günlük yerleşimden sonra, test günü, ilgilenilen farmakolojik müdahaleye maruz kalma ile başlar.

Bu müdahale, belirli bir beyin bölgesine stereotaksik enjeksiyon, intravenöz enjeksiyon veya intraperitoneal enjeksiyon olabilir Farmakolojik müdahaleler için. Uzun bir etki süresi ile, anestezik duyarlılığın kademeli olarak belirlenmesi gerçekleştirilir. Tüm hayvanlar yerine oturduktan sonra her bir hayvanı% 100 oksijen akışı olan ayrı odalara yerleştirerek teste başlayın.

Flor konsantrasyonunu 15 dakika boyunca% 0.4'e ayarlayın. Bu sürenin son iki dakikasında, fare sırt üstü yatırılana kadar hazneyi hafifçe yuvarlayarak her bir hayvanın yazma refleksini değerlendirin. Farenin tüm pençelerini odanın tabanına geri yükleyebilmesi durumunda, yazma refleksinin sağlam olduğu kabul edilir.

İki dakika içinde, her fare için yazma refleksi durumunu kaydedin ve her fareyi sıcaklık verileri için tarayın. Daha sonra, flor konsantrasyonunu 15 dakika boyunca yaklaşık% 0.05 oranında artırın ve daha önce gösterildiği gibi yazma refleksini değerlendirin. Tüm hayvanlar yazma reflekslerini kaybedene kadar anestezik konsantrasyonu artırmaya devam edin.

İsteğe bağlı olarak, anestezik konsantrasyon aşağı doğru titre edilirken kademeli yazma refleks değerlendirmesi tekrarlanarak anestezik çıkış ölçülebilir. Deneyi sonlandırmak için flor izini kapatın ve daha kısa süreli müdahaleler için tüm sistemi 15 dakika boyunca %100 oksijenle yıkayın. Ortaya çıkma süresi testi yapılır.

Her bir hayvanı %100 oksijen akışı olan ayrı odalara yerleştirdikten sonra, flor konsantrasyonunu %1.2'ye ayarlayınBirkaç dakika anestezik maruziyetten sonra, her fare sırt üstü kalana kadar her odayı nazikçe yuvarlayın. Yazma refleksi kaybını teyit ederek, akut müdahalenin beklenen etki süresine bağlı olarak 30 dakika ila bir saat boyunca% 1.2'de flor konsantrasyonunu koruyun. Flor akışını kapattıktan sonra% 100 oksijen ve her hayvan dört pençeyi de yere koyana kadar geçen süreyi ölçün.

Hayvan dört pençeyi de arka arkaya üç kez yere koyabildiğinde, yazma refleksi sağlam kabul edilir. Burada, yazma refleksi, ventral lateral preop çekirdeğine I botanik asit enjekte edildikten bir hafta sonra test edildi. Bu beyin bölgesindeki bir lezyonun anestezik duyarlılığı azaltacağı tahmin edildi.

Bununla birlikte, indüksiyon veya acil durum için kademeli anestezik duyarlılıkta anlamlı bir fark bulunmadı. Bu örnekte, bilateral I botanik asit mikroenjeksiyonunu takiben ortaya çıkma zamanı testi gerçekleştirilmiştir. VLPO'ya enjekte edildiğinde, yakındaki medial septum ve araç enjekte edilen kontrollerden bu yana enjeksiyonlara kıyasla belirgin şekilde uzun süreli bir hipnoz vardı.

Bu videoyu izledikten sonra, her hayvanın aynı gaz akışlarına ve sıcaklıklara maruz kalmasını sağlarken, kademeli indüksiyon testini veya ortaya çıkma zamanı testini kullanarak anestezik duyarlılığın nasıl değerlendirileceğini iyi anlamalısınız.