Bir Modifiye Yağış Yöntemi İdrar eksozomlar yalıtmak için

Bu prosedürün genel amacı, eksozomların idrardan izolasyonu için hızlı, ölçeklenebilir ve etkili bir alternatif sunan modifiye edilmiş bir eksozom çökeltme yöntemi tasarlamaktır. Bu, önce idrar örneğinden büyük ölü hücrelerin ve hücre kalıntılarının santrifüjleme yoluyla uzaklaştırılmasıyla gerçekleştirilir ve idrar eksozomlarını içeren snat yeni bir tüpe aktarılır. İkinci adımda, pelet, TAM at düşme proteinini uzaklaştırmak için DTT içeren izolasyon çözeltisi içinde çözülür.

Daha sonra daha fazla santrifüjlemeden sonra, TP içermeyen süpernatant, ertesi gün eksozomları çökeltmek için gece boyunca ekzo hızlı TC reaktifi ile inkübe edilir. Exo quick TC reaktifi ile muamele edilen numuneler, eksozom peletini elde etmek için son bir kez santrifüjlenir. Sonuç olarak, ilgilenilen biyobelirteçleri tanımlamak için eksozomlar üzerinde Western blot ve gerçek zamanlı QPCR gibi aşağı akış işlemleri gerçekleştirilebilir.