Polizom profilleme Stres Durumlardaki Çeviri başlatılması Analizi

Bu prosedürün genel amacı, stres koşullarının memeli hücrelerinin ve dokularının translasyonu, başlatılması üzerindeki etkilerini polizom profillemesi ile ölçmektir. Bu, önce memeli kanser hücrelerinin bir anti-kanser ilacı ile tedavi edilmesi ve ardından hücre ekstraktlarının hazırlanmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım, sakaroz, gradyanlar yapmaktır.

Daha sonra, hücre ekstraktları sakaroz, gradyanlar üzerine yüklenir ve ribozomal fraksiyonları ayırmak için ultra santrifüjlenir. Sonuç olarak, test edilen proteinlerin polizom ile ilişkisini değerlendirmek için spesifik antikorlar kullanılarak western blot analizi yapılır. Metabolik etiketleme gibi mevcut bir yöntemin bu tekniğinin temel avantajı, stres koşullarının translasyonun başlangıç adımı üzerindeki etkisini değerlendirmemize izin vermesidir.