Name: Anti-Nükleer Antikor HEp-2 hücreleri kullanarak Eleme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-23T18:15:00.000+00:00
Duration: 13 min 1 s
Description: Öğrenin, HEp-2 hücreleri kullanarak dolaylı immünofloresan yöntemiyle antinükleer antikorları nasıl tespit edeceğinizi. Bu teknik, sistemik otoimmün romatizmal hastalıkların tanısına yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz onu uzman teknik inceleme için IIF deney ve Carol Büchner gerçekleştirmek için Cassandra Bryant teşekkür ederim.

1.. Hazırlama ve Yüzey seçkisini <ol><li> Ambalajından reaktifler çıkarın ve her bir madde, oda sıcaklığına gelmesine izin. Reaktifler hazırlayın ve yön insert göre hasta serumları sulandırmak. Not: NOVA Lite slaytlar barkodlu ve kolayca Laboratuvar Bilgi Sistemi LIS ile birlikte otomatik sistemlere entegre edilebilir. Bu işlem manuel slayt işleme göstermektedir; yüksek verimlilik laboratuvarları, ancak, otomatik slayt işleme ekipmanı için tercih edebilir. </li></ol> Kontrolleri ve Numune 2. Eklenmesi <ol><li> Pozitif kontrol ve uygun slayt oyuklara, negatif kontrol, 1 damla 1 damla dağıtın. Kalan gözlere seyreltilmiş hasta serumu Pipet 20-25 ul. Her seferinde bir slayt işleyin. </li><li> Alt nemli bir kağıt havlu ile bir boyama kapta slayt (ler) yerleştirin. Kapak kap ve 30 dakika için slayt (ler) inkübe edilir. Not: nemli koşullar olacakkurumasını tabakayı önlemek. Kuyuların Kurutma suni boyanması neden olabilir. Bu kuluçka süresi boyunca, hastanın serumunda anti-nükleer antikorlar da her biri üzerine sabit hücrelerin antijene bağlanacaktır. </li><li> Kuluçka döneminden sonra, yıkama tamponu hafif bir akışı kullanarak serum durulayın. Alt-tabakanın zarar görmesini önlemek ve çukurlar arasındaki örneklerin çapraz açısı, slayt önlemek amacıyla hafifçe kuyu üzerine doğrudan akımının yönlendirilmesi önlemek için. Aşırı yıkama tampon kapalı dokunun ve yaklaşık 5 dakika boyunca yıkama tamponu içeren bir Coplin kavanoza slayt yerleştirin. </li></ol> Floresan Konjugatının 3. Ilavesi <ol><li> Tek tek, yıkama tamponu gelen slaytları çıkarın ve yavaşça aşırı yıkama tampon kaldırmak için dokunun. Her bir üzerine (FITC anti-insan IgG etiketli) floresan konjügatın 1 damla uygulanır. Nemli bir kap içinde 30 dakika boyunca kuluçkaya bırakın ve boyama yerine edinizkonteyner kapağı. Not: ANA testi için, bir IgG Fc özel konjugatının kullanılması tavsiye edilir. Eşlenik duyarlı ışık ve kapak nemlendirilmiş bir ortam sağlamaya ek olarak ışığa maruz slaytları koruyacaktır. Bu kuluçka süresi boyunca, konjügat hücre antijenlerine bağlanmış olan hastanın anti-nükleer antikorlara bağlanan olacaktır. Bu birleşim kuyularda floresan mevcudiyetinde sonuçları bağlayıcı. </li><li> Durulama ve yukarıda tarif edildiği gibi slayt yıkayın. </li><li> Bir kağıt havlu üzerinde bir lamel ile lamel alt kenarına bir sürekli çizgi ile montaj ortamı uygulanır. </li><li> Yıkama tamponu her slaytı kaldırmak ve aşırı yıkama tamponu çıkarmak için hafifçe slayt dokunun. Lamel kenarına slayt alt kenarına dokunun. </li><li> Yavaşça lamel montaj ortam hava kabarcığı oluşmadan sürgünün üst kenarına akar bir şekilde lamel üzerine kayan alt. Not: Eş, montaj orta en uygun miktarda kullanılarak da dahil olmak üzere, verslipping mükemmel pratik ister bir tekniktir. </li></ol> Pozitif ve Negatif Sonuçları 4. Tanıtımı Manuel Yorumlama <ol><li> Görünüm karanlık bir odada bulunan bir floresan mikroskop ile slaytlar. Hücre dağılımı ve floresan tekdüzelik değerlendirmek için bir 20X ya da 25X objektif ile tüm kuyunun tarama yapın </li><li> Pozitifliği ve desen ilişkin nihai yorumunu yapmak için bir 40X amacı geçin. </li><li> Pozitif ve negatif kontroller de bakın. 1 + 4 + &#39;dan bir tepkime skalaya Sınıf pozitifliği. Not: Negatif kontrol tamamen karanlık görünmeyebilir, ancak genellikle düşük düzeyde spesifik olmayan floresan gösterecektir. Pozitif kontrol çekirdekte elma parlak yeşil floresan (Şekil 1) gösterir. </li></ol> Otomatik Yorumlama Not: Bununla damanuel yorumlanması, yük ve NOVA Görünüm Otomatik floresan mikroskop veya diğer otomatik dijital görüntüleme aracı ile tarama slaytlar için; hiçbir karanlık oda gereklidir. Uygun slayt türünü seçerek bir proje oluşturduktan sonra, enstrüman her iyi hücrelerin yüksek çözünürlüklü dijital görüntü kazanır ve saklar. Ayrıca NOVA Görünüm floresan ışık yoğunluğunu ölçer ve pozitif veya negatif olarak sonuçlarını sınıflandırır ve pozitif örnekler için örüntü tanıma sağlar. Görüntüler NOVA Görünüm sonucunun nihai yorumlanması, revizyon ve onay için izin veren, yüksek çözünürlüklü bir bilgisayar monitörü üzerinde operatör tarafından izlendi. Raporlar doğruladı sonuçlar elde edilebilir. Bu sonuçların yorumlanması yardımcı olmak için tasarlanmıştır gibi dijital mikroskopi deneyimli bir laboratuar teknisyeni ile birlikte kullanılmalıdır.

<ol><li>Meroni, P. L., Schur, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ANA+screening%3A+an+old+test+with+new+recommendations%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Rheum+Dis%22%5BJournal%5D)">ANA screening: an old test with new recommendations.</a> Ann Rheum Dis. 69 (8), 1420-1422 (2010).</li>
<li>Tan, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autoantibodies+to+nuclear+antigens+%28ANA%29%3A+Their+immunobiology+and+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+immunology%22%5BJournal%5D)">Autoantibodies to nuclear antigens (ANA): Their immunobiology and medicine.</a> Advances in immunology. 33, 167-240 (1982).</li>
<li>Sack, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autoantibody+detection+using+indirect+immunofluorescence+on+HEp-2+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+NY+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Autoantibody detection using indirect immunofluorescence on HEp-2 cells.</a> Ann NY Acad Sci. 1173, 166-173 (2009).</li>
<li>Watanabe, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-DFS70+antibodies+in+597+healthy+hospital+workers%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Anti-DFS70 antibodies in 597 healthy hospital workers.</a> Arthritis Rheum. 50 (3), 892-900 (2004).</li>
<li>Mahler, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Importance+of+the+dense+fine+speckled+pattern+on+HEp-2+cells+and+anti-DFS70+antibodies+for+the+diagnosis+of+systemic+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Autoimmun+Revi%22%5BJournal%5D)">Importance of the dense fine speckled pattern on HEp-2 cells and anti-DFS70 antibodies for the diagnosis of systemic autoimmune diseases.</a> Autoimmun Revi. 11 (9), 642-645 (2012).</li>
<li>Mahler, M., Fritzler, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+significance+of+the+dense+fine+speckled+immunofluorescence+pattern+on+HEp-2+cells+for+the+diagnosis+of+systemic+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Dev+Immunol%22%5BJournal%5D)">The clinical significance of the dense fine speckled immunofluorescence pattern on HEp-2 cells for the diagnosis of systemic autoimmune diseases.</a> Clin Dev Immunol. , (2012).</li>
<li>Miyara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+phenotypes+of+patients+with+anti-DFS70%2FLEDGF+antibodies+in+a+routine+ANA+referral+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Dev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Clinical phenotypes of patients with anti-DFS70/LEDGF antibodies in a routine ANA referral cohort.</a> Clin Dev Immunol. , (2013).</li>
<li>Mariz, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pattern+on+the+antinuclear+antibody-HEp-2+test+is+a+critical+parameter+for+discriminating+antinuclear+antibody+positive+healthy+individuals+and+patients+with+autoimmune+rheumatic+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Pattern on the antinuclear antibody-HEp-2 test is a critical parameter for discriminating antinuclear antibody positive healthy individuals and patients with autoimmune rheumatic diseases.</a> Arthritis Rheum. 63 (1), 191-200 (2011).</li>
<li>Muro, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+concomitance+of+disease+marker+autoantibodies+in+anti-DFS70%2FLEDGF+autoantibody-positive+patients+with+autoimmune+rheumatic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lupus%22%5BJournal%5D)">High concomitance of disease marker autoantibodies in anti-DFS70/LEDGF autoantibody-positive patients with autoimmune rheumatic disease.</a> Lupus. 17 (3), 171-176 (2008).</li>
<li>Agmon-Levin, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((International+recommendations+for+the+assessment+of+autoantibodies+to+cellular+antigens+referred+to+as+anti-nuclear+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Rheum+Dis%22%5BJournal%5D)">International recommendations for the assessment of autoantibodies to cellular antigens referred to as anti-nuclear antibodies.</a> Ann Rheum Dis. 73 (1), 17-23 (2014).</li>
<li>Craft, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+U2+small+nuclear+ribonucleoprotein+particle+as+an+autoantigen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">The U2 small nuclear ribonucleoprotein particle as an autoantigen.</a> J Clin Invest. 81 (6), 1716-1724 (1998).</li>
<li>Salomonsson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+serologic+marker+for+fetal+risk+of+congenital+heart+block%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">A serologic marker for fetal risk of congenital heart block.</a> Arthritis Rheum. 46 (5), 1233-1241 (2002).</li>
<li>Miyawaki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+and+serological+heterogeneity+in+patients+with+anticentromere+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Rheumatology%22%5BJournal%5D)">Clinical and serological heterogeneity in patients with anticentromere antibodies.</a> J Rheumatology. 32 (8), 1488-1494 (2005).</li>
<li>Raijamkers, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PM-Scl-75+is+the+main+autoantigen+in+patients+with+the+polymyositis%2Fscleroderma+overlap+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">PM-Scl-75 is the main autoantigen in patients with the polymyositis/scleroderma overlap syndrome.</a> Arthritis Rheum. 50 (2), 565-569 (2004).</li>
<li>Yang, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+scleroderma+sera+contain+autoantibodies+to+protein+components+specific+to+the+UC+small+nucleolar+RNP+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Human scleroderma sera contain autoantibodies to protein components specific to the UC small nucleolar RNP complex.</a> Arthritis Rheum. 48 (1), 210-217 (2003).</li>
<li>Granito, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antinuclear+antibodies+as+ancillary+markers+in+primary+biliary+cirrhosis%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Mol+Diagn%22%5BJournal%5D)">Antinuclear antibodies as ancillary markers in primary biliary cirrhosis.</a> Expert Rev Mol Diagn. 12 (1), 65-74 (2012).</li>
</ol>

Yazarlar Gabriella Lakos, Cassandra Bryant, Carol Büchner, ve Anna Eslami INOVA Diagnostics&#39;in çalışanlarıdır.

HEp-2 hücreleri ile tarama, SARD'lı hastaların tanısında kritik bir ilk adımdır. Bununla birlikte, IIF yöntemleri uyumlaştırmadan yoksundur. Değişkenlik kaynakları arasında slaytların hazırlanması, eşlenik özgüllük ve floresan mikroskobun verimliliği ve okuyucunun deneyimi yer alır. Bu endişelere rağmen IIF, ANA testi için "altın standart" olmaya devam ediyor. HEp-2 hücreleri çok çeşitli otoantijenler içerir ve bu otoantikorların tespiti için ideal substratı sağlar. Bazı laboratuvarlarda IIF, multipleks tahlil veya ELISA gibi katı faz tarama yöntemleriyle değiştirilmiştir. Bu tür testlerin eksikliği, yeterince duyarlı olmak için tüm antijen yelpazesini göstermemeleridir. Sonuç olarak, gerçek pozitif hastalar gözden kaçabilir ve bu da zararlı sonuçlara yol açabilir. Tedavi gecikmesi ve yanlış tanı konularına ek olarak, doğrulayıcı testlerin tekrarı veya gereksiz tanı araştırmaları nedeniyle ek sağlık maliyetleri ortaya çıkabilir. IIF'nin doğasında var olan zorluklar göz önüne alındığında, sonuçlarda öznellikten kaçınmak için bu tekniğin doğru şekilde uygulanması çok önemlidir.
ANA taraması sonuçlarının doğru yorumlanmasını ve raporlanmasını sağlamak için en yüksek kalitede alt tabakanın kullanılması hayati önem taşır. Bir HEp-2 substratı seçerken, hücrelerin klinik olarak ilgili epitopları doğal protein durumlarında eksprese edecek şekilde optimize edilmesi çok önemlidir. Transfekte edilmiş veya başka şekilde modifiye edilmiş HEp-2 hücre hatları, uygun antikor-antijen bağlanmasına izin vermeyebilir. Ek olarak, aynı anda birkaç farklı otoantikor mevcut olduğunda, rekombinant hücreler bir veya daha fazla paterni maskeleyebilir. Substratta yüksek sayıda mitotik hücre de bulunmalıdır. Yeterli sayıda mitotik hücre, kalıpların hızlı ve doğru bir şekilde tanımlanmasını sağlar. 
Substratın özelliklerine ek olarak, bu video protokolünün amacı, numune ekleme, slayt yıkama, eşlenik ekleme, kapak kayması ve pozitif ve negatif sonuçların belirlenmesi gibi kritik adımları göstererek IIF tekniğini tanımlamaktır. Bu adımların her biri için uygun teknik kullanılmazsa sonuçlar tehlikeye girebilir. Bağlanmamış tüm antikorları çıkarmak için uygun yıkama önemlidir. Bazı hastalarda çok yüksek miktarda otoantikor görülür ve bu durumlarda serumun kuyucuklardan yıkanması diğer kuyucukları kirletmeyecek şekilde önemlidir. 
IIF, geleneksel olarak çok emek yoğun ve öznel bir laboratuvar yöntemi olmasına rağmen, slayt işlemciler, barkodlu slaytlar ve otomatik dijital mikroskopi gibi yeni teknolojiler, iş akışını büyük ölçüde basitleştirebilir, tutarlılığı artırabilir ve yorumlama değişkenliği kaynaklarını azaltabilir.

Terimi, antinükleer antikor (ANA) DNA, proteinler ve Ribonucleoproteins 1, 2 de dahil olmak üzere hücre çekirdeklerinin bileşenleri ile reaksiyona giren antikorların bir türü tarif etmektedir. HEp-2 hücre, antijenler yüzlerce bir yerli protein dizisi, ana 1 tespiti için ideal bir alt-tabaka üretmektedir. Insan serumunda ANA tespiti bağ dokusu hastalıkları için önemli bir tarama aracı ve IIF ANA 1 test için referans yöntemdir. Son zamanlarda, HEp-2 hücreleri üzerinde IIF antijene özgü bağışıklık ve çok katlı yöntemleri ile bazı laboratuarlarda değiştirilmiştir. Nedeniyle yanlış negatif sonuçların kaygıları ve klinisyenler için şeffaflık eksikliği, Amerikan Romatoloji Koleji HEp-2 hücreleri kullanılarak IIF ANA 1 tarama için &quot;altın standart&quot; olması gerektiği sonucuna bir Görev Gücü oluşturdu. Due ANA taraması öznel doğası gereği, HEp-2 hücrelerinin kalitesi olansonuçlarının doğru ve güvenli raporlama sürmek entegre. Mitotik hücre sayısının yüksek olması, optimal hücre morfolojisi, yeterli confluency ve ilgili antijenlerin ekspresyonu özellikle önemlidir. IIF örüntü tanıma hasta tanısında yardımcı olmak için önemli bir araç olarak hizmet vermektedir. Çeşitli desen önemini anlama klinisyenlerin ve laboratuvar personeli tanıyı doğrulamak için uygun takip test gerçekleştirmenizi sağlar. Örneğin, homojen ANA model, anti-dsDNA antikorlarının veya kromatin varlığında ortaya çıkabilir, ve sistemik lupus eritematoz (SLE) 3 ile ilişkili olabilir. Diğer taraftan, son zamanlarda yaygın, rutin numune kadar% 12 görülür sözde yoğun ince benekli desen (DFS), daha çok anti-DFS70 antikorları ile ilişkili olduğu tarif edilmiştir. Bu antikorlar, (başka bir hastalığa özgü ANA) olmadan ayrı olarak bulunan zaman sistemik otoimmün romatizmal hastalıklar ile ilişkili değildir &lt;&gt; 4-9 sup. Anti-DFS70 antikorları için böylece doğrulayıcı testler, gereksiz refleks testini azaltmak önemli maliyet tasarrufu sunuyor ve hasta anksiyete azaltabilir. IIF otoantikor saptamak için ilk satırı tarama yöntemi olduğu göz önüne alındığında, bu kullanıcı reaktifler ve doku substratların seçim sonuçlarını nasıl etkilediğini anlaması önemlidir. IIF teknik doğal olarak kişisel olduğu için, kullanılan reaktif maddeler en kaliteli sonuçlar sağlamak önemlidir. Bu video protokolü bu hedefi IIF yöntemi, ANA ile ilişkili ortak desenleri gerçekleştirmek için gereken doğru adımları ile kullanıcıya tanıtmak, ve laboratuvar iş akışını düzene ve sonuçlarını standardize edebilirsiniz yeni gelişmeleri tanıtmaktır.

<table><tbody><tr><td>NOVA Lite HEp-2 IgG (DAPI eşleniği)</td><td>INOVA Diagnostics</td><td>708102</td><td></td></tr><tr><td>NOVA View Cihazı INOVA</td><td>Diagnostics</td><td>NV2000</td><td></td></tr><tr><td>QUANTA Link İş İstasyonu</td><td>INOVA Diagnostics</td><td>LINK010</td><td></td></tr><tr><td>QUANTA Link İş İstasyonu Lisansı</td><td>INOVA Diagnostics</td><td>LINK001</td> Barkod Tarayıcı INOVA Diagnostics LINK019 <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

anti-nükleer antikor hep-2 hücreleri kullanarak eleme

Anti-Nuclear Antibody Screening Using HEp-2 Cells

ANA testi Romatoloji pozisyon ifadesinin Amerikan Koleji ANA 1 taranması için altın standart yöntem olarak IIF kullanılmasını öngörmektedir. IIF uzman ellerde mükemmel bir tarama testi olmasına rağmen, işleme ve IIF okuma teknik zorluklar slaytlar - gibi emek yoğun slayt işleme, manuel okuma, deneyimli için ihtiyaç, eğitimli teknoloji ve karanlık oda kullanımı gibi - IIF yöntemi yapmak Modern, otomatik laboratuvarlarının iş akışında sığdırmak zor. Yüksek kaliteli ANA tarama yönelik ilk ve en önemli adımdır dikkatli slayt işliyor. Bu işlem emek yoğundur ve tam sürecin anlaşılması, yanı sıra, bilgi ve deneyim dikkat gerektirir. Slide okuma karanlık odalarda floresan mikroskobu ile gerçekleştirilir, ve hücre döngüsünün bağlamında, çeşitli desenler aşina eğitimli teknoloji ile yapılırve interfazın ve bölünen hücrelerin morfolojisi. IIF doğru bu tekniği gerçekleştirmek için adımları anlamak, Sard için ilk satırı tarama aracı olduğunu sağladı önemlidir. Son zamanlarda, dijital görüntüleme sistemleri IIF slaytların otomatik okunması için geliştirilmiştir. Böyle NOVA Görünüm Otomatik Floresan Mikroskop Bu sistemler, rutin IIF iş akışını hızlandırmak için tasarlanmıştır. NOVA Görünüm böylece yorumundan görüntü toplama ayıran, kuyuların yüksek çözünürlüklü dijital görüntü kazanır ve depolar; görüntüler yüksek çözünürlüklü bilgisayar monitörleri yorumlanır bir görülüyor. Bu ileride görüntüleri depolayan ve görüntülerde floresan ışık yoğunluğu verileri sağlayarak operatörün yorumu desteklemektedir. Ayrıca ön olumlu ya da olumsuz olarak sonuçları sınıflandırır ve pozitif örnekler için örüntü tanıma sağlar. Özetle, bu karanlık oda için ihtiyacını ortadan kaldırır, ve otomatikleştirir IIF readi akıcılıkng / yorumlama iş akışı. En önemlisi, okuyucular ve okuma arasındaki tutarlılığını artırır. Ayrıca, barkodlu slaytlar kullanımı ile, transkripsiyon hataları örnek izlenebilirlik ve pozitif hasta kimlik sağlayarak ortadan kalkar. Bu artan hasta veri bütünlüğü ve güvenliği ile sonuçlanır. Bu videonun genel amacı slayt işleme, ortak IIF desen belirlenmesi ve bu tekniği basitleştirmek ve uyumlaştırmak için yeni gelişmeler getirilmesi de dahil olmak üzere, IIF prosedürü göstermektir.

HEp-2 için hücre boyama sonuçları değerlendirirken, beş büyük nükleer desenler en sık bildirilen şunlardır: homojen, benekli, sentromer, nükleoler ve nükleer noktalar. Bu modeller otoantikor çekirdeğin bileşenlerinin özel bağlanma sonucudur. ANA test nükleer yapılara özel olmakla birlikte, sitoplazmik yapılara karşı otoantikorlar ile ilişkili sitoplazmik desen de gözlenebilir. Bazı durumlarda, çeşitli antikorlar bir numune içinde mevcut olabilir, ve görüntü karışık bir desen olarak görünebilir. , Daha az sık görülen ve IIF yöntemi ile tespit edilebilir, genellikle, hücre devre özel desenler vardır; En son olarak, özel bir klinik öneme sahip bir sözde ince yoğun bir model benekli ANA pozitif serumun &#39;de tarif edilmiştir. Homojen Desen Homojen bir model belirlemek, kuyu tarama ve mitotik veya bölünmesini belirlemekhücreleri. Mitotik hücre yoğunlaşmış kromatin (Şekil 2, Turuncu ok) çoğu zaman homojen bir desen, dinlenme hücreler sergi tekdüze, tüm çekirdeğin yaygın floresans (Şekil nuclei.In dinlenme hücreye göre daha belirgin bir katı, düzgün floresan sergileyen 2, beyaz ok). Bu özellik, model, genellikle, anti-dsDNA antikorlarının 10 sonucudur. Benekli Desen Kaba benekli deseninde, mitotik hücreler yoğunlaştırılmış kromozom bölgelerinin herhangi bir boyama (Şekil 3, portakal ok) gösterir. Dinlenme hücreler tüm çekirdeği boyunca granül floresan gösterirler. Nükleer speckling kaba veya ince olarak tanımlanabilir. Kaba speckling model, genellikle anti-Sm ve anti-RNP 11 sonucudur. Ince benekli desen olarak, istirahat hücreler tipik üniforma d, çekirdekleri boyunca ince veya yaygın speckling göstermekistribution (Şekil 4, beyaz ok). İnce benekli model, genellikle anti-SSAand anti-SSB 12 sonucudur. Yoğun Güzel Benekli Desen Şimdi yoğun ince benekli desen (DFS) rutin test yaygın olduğunu kabul ve numunelerin kadar 12 kadar% anti-DFS70 otoantikorlar için olumlu olmasıdır. Ancak, izolasyon bulunan bu otoantikorlar, sistemik otoimmün romatizmal hastalıklar 4 -6 ile ilişkili değildir. Bu antikorlar sağlıklı bireyler ve Sard 6 ilgisiz hastalıkları taşıyan hastalarda yaygındır. Anti-DFS70 antikorlar için doğrulayıcı testler, gereksiz refleks testini azaltmak önemli maliyet tasarrufu sunuyor ve hasta anksiyete azaltabilir. DFS desen belirlemek ve ANA pozitifliği hastalar hem de hekimler için kaygı neden olabilir zor olduğundan, son derece tanımladı sonra bir doğrulayıcı test yapılması tavsiye edilir<html> ANA klinik önemini açıklığa kavuşturmak için, anti-DFS70 antikorlarının düşündüren bir model fying 5,6 positivty. Hücre çekirdekleri (Şekil 5, beyaz ok) çekirdeğin boyunca sergi eşit dağılmış ince benekler istirahat ederken bu desende, mitotik hücreler (Şekil 5, turuncu ok), metafaz kromatin pozitif benekli boyanma gösterir. Centromere Desen , Sentromer desen tespit kuyuları tarama ve mitotik veya bölünen hücreleri belirlemek için. Mitotik hücreler (Şekil 6, turuncu ok), bu ayrık benekler yakından genellikle &quot;metafaz çubuğu&quot; olarak tarif ne ilişkili olur. Sentromer desen olarak, istirahat hücreleri (Şekil 6, beyaz ok) çekirdeklerinde boyunca dağıtılan yaklaşık 40-60 ayrı benekler göstermektedir. Sentromer model anti-CENP A sonucudur, B, C 13, antikor. adım &quot;&gt; Nükleolar Desen Diğer nucleolear desen kromozomlarla ilgili bölgenin boyanma ekran iken nucleolar desenler mitotik hücrelerde yaygın sitoplazmik lekeleme (Şekil 7, turuncu ok) ve negatif kromozom bölgesi ile ilişkilidir. Nucleolar model zayıf benekli veya çekirdek plazması homojen boyama ile birlikte, nukleoli homojen veya benekli lekeleme (Şekil 7, beyaz ok) ile ilişkilidir. Bu modeller, anti-RNA polimeraz III ile ilişkili olan, anti-fibrillarin, anti-Th/To ve anti-PM/Scl 14,15 antikor. Nükleer Dot Pattern Nükleer nokta deseni negatif metafaz mitotik hücreleri (Şekil 8, portakal ok) ve dinlenme hücre çekirdeğinde birkaç ayrı benekler (Şekil 8, beyaz ok) ile ilişkilidir. Bu özellik genellikle model sp-100, PML veya p80 Colin otoantikorlann sonucudur. Bu antikorlar gibidir<html> primer biliyer siroz ve otoimmün hepatit 16 den ayıran. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51211/51211fig1highres.jpg" width="500" /> . Şekil 1. Negatif kontrol (sol): Hücreler non-spesifik floresan düzeyi düşük, ancak spesifik nükleer boyanma görüntülemek Pozitif kontrol (sağ):. Hücreler yeşil elma nükleer floresan görüntüler. <img alt="Şekil 2," fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51211/51211fig2highres.jpg" width="500" /> Şekil 2.. Homojen desen. Mitoz hücreleri (orangearrow) katı floresan göstermektedir. Dinlenme hücreleri bile, diffüz boyanma (whitearrow) gösterebilir. &quot;Width =&quot; 500 &quot;/&gt; Şekil 3.. Iri benekli desen. Mitoz hücreleri (Turuncu ok) negatif boyanma gösterir. Dinlenme hücreler ayrı bir benekli leke (beyaz ok) göstermektedir. <img alt="Şekil 4," fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51211/51211fig4highres.jpg" width="500" /> Şekil 4. Güzel benekli desen. Mitoz hücreleri (Turuncu ok) negatif boyanma gösterir. Dinlenme hücreler ayrı bir ince benekli boyanma (beyaz ok) göstermektedir. <img alt="Şekil 5," fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51211/51211fig5highres.jpg" width="500" /> Şekil 5. Yoğun ince benekli desen. Mitoz hücreleri (Turuncu ok) ince taneli katı boyanma gösterir. İstirahat hücreleri (whitearrow) çok ince, yaygın benekli leke gösteriyor. Şekil 6.. Centromere desen. Mitoz hücreleri (orangearrow) gösterisi üniforma, ayrık benekler. Hücreler (whitearrow) istirahat hücre çekirdeği 40-60 ayrık benekler gösterir. <img alt="Şekil 7" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51211/51211fig7highres.jpg" width="500" /> Şekil 7. Nükleolar desen. Mitotik hücreler (orangearrow) granüler boyanma büyük kümeler olarak görünür. Çekirdekçiklerindeki dinlenme hücre nucleishows floresan (whitearrow). <img alt="Şekil 8," fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51211/51211fig8highres.jpg" width="500" /> Şekil 8.. Nükleer nokta desen. Mitoz hücreleri (orangearrow) negatif görünür. İstirahat hücreleri birkaç Discr göstermektedirnükleus (whitearrow) olarak ete benekleri. Ayrıca, nucelar nokta desen mitokondriyal antijenlerin (kırmızı ok) otoantikorlar ile ilişkili sitoplazmik boyanma ile bir arada bulunabilir.

Dolaylı immünofloresan (IIF) deneyleri, geleneksel olarak, insan serumunda antinükleer antikorlar (ANA) tespiti için kullanılmıştır. Bu antikorların varlığı, sistemik otoimmün romatizmal hastalıklar (SARD) teşhisinde yardımcı olabilir. Bu protokol etkili doğru bu otoantikor saptamak için IIF tekniği gerçekleştirmek için nasıl gösterir.

Anti-Nükleer Antikor HEp-2 hücreleri kullanarak Eleme

The American College of Rheumatology position statement on ANA testing stipulates the use of IIF as the gold standard method for ANA screening1. Although ...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, antinükleer antikorları taramak için dolaylı bir immünofloresan analiz yöntemi kullanmaktır. Bu işlem, hasta serumunun Hep-2 substrat lamları ile inkübe edilmesiyle gerçekleştirilir. Bağlanmamış hasta serumu yıkanarak uzaklaştırılır; ardından bağlanan otoantikorlar, floresein işaretli spesifik konjugat ile inkübe edilir ve bağlanmamış reaktif yıkanarak uzaklaştırılır.Floresan mikroskobuyla incelendiğinde, otoantikor pozitif örnekler, otoantikorun bağlandığı hücre veya çekirdek bölgelerinde, antijenin mevcut olduğunu belirten bir floresan paterni şeklinde elma yeşili floresan gösterecektir. Nihayetinde, ANA varlığı bağ dokusu hastalıklarının teşhisine yardımcı olmak için kullanılabilir. İndirekt immünofloresan yönteminin katı faz ELISA gibi diğer yöntemlere göre temel avantajı, Hep 2 hücre substratının doğal konfigürasyonlarında eksprese edilen 100'den fazla antijen içermesidir.Bu durum, indirekt immünofloresan yöntemi oldukça uzmanlık gerektiren bir teknik olduğu için katı faz teknikleriyle mümkün olmayan, klinik olarak ilgili neredeyse tüm O antikorlarının tanımlanmasına olanak tanır. Bu yöntemde yeni olan bireylerin, lam işleme prosedüründe yetkinleşmek için zamana ve pratiğe ihtiyacı vardır. Mikroskop görüntülerinin yorumlanması ve ilgili paternleri tanımlamayı öğrenmek de ustalaşılması zaman alan bir beceridir.Doğru reaktifler ve araçlar kullanıldığında, sonuçlar daha tutarlı olur ve yorumlanması daha kolaylaşır. Prosedürü, İmmünofloresan Analiz Geliştirme Laboratuvarı'ndan teknolog Cassandra Bryant uygulamalı olarak gösterecektir. Reaktifleri ambalajlarından çıkarın ve her bir maddenin oda sıcaklığına gelmesini bekleyin, reaktifleri hazırlayın ve hasta serumunu prospektüsteki talimatlara göre seyreltin; lamlar barkodludur ve otomatik sistemlere kolayca entegre edilebilir.Bu prosedür, manuel lam işlemeyi göstermektedir. Bununla birlikte, yüksek kapasiteli laboratuvarlar, barkod tarama özelliklerine sahip otomatik lam işleme ekipmanlarını tercih edebilirler. Inova cihazları, iş akışı sonuçları ve raporlama üzerinde kontrol sağlayan merkezi bir akıllı ağ üzerinden birbirine bağlanmıştır.IFA için. Bu durum, işlem sırasında pozitif hasta tanımlanmasını sağlar; transkripsiyon ve ilgili hataları önler. Uygun lama bir damla pozitif kontrol ve bir damla negatif kontrol damlatın.Kalan kuyucuklara 20 ila 25 µL seyreltilmiş hasta serumu pipetleyin. Her seferinde tek bir lam işleyin. Lamı, tabanında nemli bir kağıt havlu bulunan bir boyama kabına yerleştirin, kabın kapağını kapatın ve lamı 30 dakika boyunca inkübe edin.Nemli koşullar, substratın kurumasını önleyerek artefakt boyanmaların oluşmasını engelleyecektir. Bu inkübasyon süresi boyunca, hastanın serumundaki anti-nükleer antikorlar, her bir kuyucuğa fikse edilmiş hücrelerin antijenlerine bağlanacaktır. İnkübasyon süresinin ardından, substrata zarar vermemek için serumu yumuşak bir yıkama tamponu akımıyla durulayın.Akışın doğrudan substrat üzerine gelmemesi için lamı hafifçe eğik tutun. Lamların bu şekilde konumlandırılması, kuyucuklar arasındaki numunelerin birbirine karışmasını önlemeye de yardımcı olacaktır. Fazla yıkama tamponunu hafifçe vurarak uzaklaştırın ve lamı yıkama tamponu içeren bir Copeland kavanozuna yerleştirin.Yıkama adımı için inkübasyon süresi yaklaşık beş dakika olmalıdır. Lamları yıkama tamponundan çıkarın ve hafifçe vurun. Fazla yıkama tamponunu uzaklaştırmak için her bir kuyucuğa bir damla floresan konjugat uygulayın.NA testi için, IgG FC spesifik bir konjuge kullanımı önerilir. Lamları nemlendirilmiş kap içerisinde 30 dakika boyunca inkübe edin ve boyama kapağını yeniden kapattığınızdan emin olun. Konjuge ışığa duyarlıdır ve kapak, lamları ışığa maruz kalmaktan koruyacaktır.Bu inkübasyon süresi boyunca konjuge, hücre antijenlerine bağlanmış olan hastanın anti-nükleer antikorlarına bağlanacaktır. Konjugenin bu bağlanması, inkübasyonun ardından kuyucuklarda floresan oluşumuyla sonuçlanır. Lamı yıkama tamponu ile yıkayın.Daha önce yapıldığı gibi, bir lamelini kağıt havlu üzerine yerleştirin ve lamelin alt kenarına kesintisiz bir hat şeklinde montaj medyumu uygulayın. Her bir lamı yıkama tamponundan çıkarın ve lamı hafifçe vurun. Fazla yıkama tamponunu uzaklaştırmak için, lamın alt kenarını lamelin kenarına değdirin.Slaytı, üzerindeki kapatma camının üzerindeki bağlama ortamı, hava kabarcığı oluşmadan slaytın üst kenarına kadar yayılacak şekilde yavaşça indirin; optimal bağlama ortamı miktarını elde etmek, mükemmelleştirilmesi için pratik gerektiren bir tekniktir. Karanlık bir odada bulunan floresan mikroskobunda slaytlar incelenirken, tüm kuyucuğun taraması 20x veya 25x objektif ile gerçekleştirilmelidir. Hücre dağılımını ve floresan üniformitesini değerlendirmek için 40x objektife geçiş yapın.Pozitiflik ve paternle ilgili nihai yorumu yapmak için pozitif ve negatif kontrollere bakın. Negatif kontrol tamamen karanlık görünmeyebilir ancak genellikle düşük düzeyde non-spesifik floresan gösterecektir. Pozitif kontrol, çekirdekte parlak elma yeşili floresan gösterecektir.Pozitiflik, bir artıdan dört artıya kadar olan bir reaktivite derecelendirme ölçeği kullanılarak sınıflandırılabilir. Manuel yorumlamanın yanı sıra lamlar, otomatik floresan mikroskobuna yüklenebilir ve taranabilir. Karanlık oda gerekmemektedir.Uygun slayt tipi seçilerek bir proje oluşturulduktan sonra, cihaz her bir kuyucuktaki hücrelerin yüksek çözünürlüklü dijital görüntülerini elde eder ve depolar. Ayrıca Nova view, floresan ışık yoğunluğunu ölçerek sonuçları pozitif veya negatif olarak kategorize eder ve pozitif örnekler için patern tanıma sağlar. Görüntüler, operatör tarafından yüksek çözünürlüklü bir bilgisayar monitöründe görüntülenerek Nova View'un nihai yorumlanmasına, revize edilmesine ve onaylanmasına olanak tanır.Onaylanmış sonuçlar üzerinden sonuç raporları oluşturulabilir. Çekirdek içindeki bileşen protein yapılarına oto-antikor bağlanması; homojen, benekli, sentromer, nükleoler ve nükleer nokta dahil olmak üzere beş ana nükleer paternle sonuçlanır. Burada gösterildiği gibi homojen bir paterni tanımlamak için, mitotik veya bölünen hücreleri belirleyin.Mitotik hücreler, genellikle dinlenme halindeki hücrelere göre daha belirgin olan, katı ve tekdüze bir floresans gösterir. Dinlenme halindeki hücre çekirdekleri, yaygın boyanma ile tekdüze görünmelidir. Bu karakteristik patern, büyük olasılıkla çift sarmallı DNA'ya karşı gelişen otoantikorların sonucudur.Benekli paternin temel bir özelliği, metafaz mitotik hücrelerin bozuk para yuvası görünümüdür. Bu hücrelerin kromozomal bölgesi negatiftir. Dinlenme halindeki hücreler ise çekirdeklerin tamamında benekli bir patern sergiler.Beneklenme, kaba veya ince olarak tanımlanabilir. Kaba beneklenme, SM ve RNP'ye karşı gelişen otoantikorların sonucudur. İnce beneklenme ise RNA polimerazın yanı sıra S-S-A-S-S-B'ye karşı gelişen otoantikorlardan kaynaklanabilir.DFS paterni, yoğun ince benekli (dense, fine speckled) olarak adlandırılır ve DFS 70'e karşı gelişen otoantikoreların göstergesidir. Mitotik hücreler benekli boyanma sergilerken, dinlenme halindeki hücrelerin çekirdeği boyunca tekdüze dağılmış ince benekler görülür. Bu vakalarda, DFS 70 otoantikorlarının bağ dokusu hastalığı olan hastalara kıyasla sağlıklı bireylerde yaygın olması nedeniyle konfirmasyon testleri yapılmalıdır.Sentromer paternini belirlemek için kuyucukları tarayın ve mitotik veya bölünen hücreleri tespit edin. Bölünen hücreler, genellikle metafaz barı olarak adlandırılan, birbirleriyle yakın ilişkili çok sayıda ayrı benekçi içerir. Dinlenme halindeki hücreler ise çekirdek boyunca dağılmış yaklaşık 40 ila 60 adet ayrı benekçi gösterir.Sentromer paterni, nükleoler patern ile birlikte sentromer proteinlerine karşı gelişen otoantikorlarla ilişkilidir. Mitotik hücrelerdeki kromozomal bölgenin boyanması değişkendir. Nükleoler patern, dinlenme halindeki hücre çekirdeklerinin nükleoplazmasında görülen zayıf, benekli veya homojen boyanmanın yanı sıra, çekirdeklerin homojen veya benekli boyanmasıyla ilişkilidir.Bu patern, RNA polimeraz üç fibrillin ve PM SCL antikorlarına karşı gelişen otoantikorlar ile ilişkilidir. Nükleer nokta paterni; negatif metafaz, mitotik hücreler ve dinlenme halindeki hücre çekirdeklerinde birkaç ayrı nokta ile ilişkilidir. Bu karakteristik patern sıklıkla SP 100 PML veya P 80 colan'a karşı gelişen otoantikorların bir sonucudur.Bu antikorlar primer biliyer siroz ve otoimmün hepatit ile ilişkilidir. Gösterilen görüntüde, nükleer nokta paterni, mitokondriyal antijenlere karşı gelişen otoantikorlar nedeniyle sitoplazmik boyanma sergilemektedir. Anti-nükleer antikor tespiti ve patern tanıma, hasta tanısına yardımcı olmak için önemli bir araç görevi görür.Çeşitli paternlerin önemini anlamak, klinisyenlerin ve laboratuvar personelinin uygun takip testlerini gerçekleştirmesine olanak tanır. Antinükleer antikor paternlerini doğru bir şekilde tanımlamak için en önemli faktörler, yüksek kaliteli bir hücre substratı seçmek ve lamları tutarlı ve iyi bir teknikle işlemektir. Lam okuma işlemi geleneksel olarak karanlık odalarda floresan mikroskobu ile yapılır ve hücre döngüsü ile hücre morfolojisi bağlamındaki çeşitli paternlere aşina, eğitimli teknologlar tarafından gerçekleştirilir.Son birkaç yılda, lamların otomatik okunması için dijital görüntüleme sistemleri geliştirilmiştir; bu tür cihazlar iş akışını otomatikleştirir, okuma ve yorumlama tutarlılığını artırır. Ayrıca, barkodlu lamların kullanımı sayesinde, süreç boyunca numune izlenebilirliği sağlanarak potansiyel transkripsiyon hataları ortadan kaldırılır, veri bütünlüğü ve hasta güvenliği artırılır. Bu videoyu izledikten sonra, indirekt immünofloresan prosedürünün her bir adımının nasıl uygulanacağı ve klinik olarak anlamlı antinükleer antikor paternlerinin nasıl tanımlanacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

anti-nuclear-antibody-screening-using-hep-2-cells

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Source: Ren, S., et al. A Protocol for Analyzing Hepatitis C Virus Replication. J. Vis. Exp. (2014).This video demonstrates an immunofluorescence-based method to detect Hepatitis C virus replication in infected hepatoma cells. The protocol involves cell fixation, antibody staining for viral protein and double-stranded RNA, and visualization using fluorophore-tagged secondary antibodies. Dual signal detection under a fluorescence microscope confirms active viral replication within the host cells.

Immunofluorescence Assay to Detect Hepatitis C Virus Replication Complexes in Infected Cells

DFS70 otoantikorlar doğru yorumu geleneksel HEp-2 yüzeylerde kullanırken zorlu yapma ortak enerjiye antikor hastalık ilişkili kalıpları taklit. Protokol üzerinden geleneksel HEp-2 eleme ve hem monospecific hem de karma ANA olumlu durumlarda yüksek güven ile DFS70 desenleri ayırt ANA'roman mühendislik HEp-2 substrat avantajları açıklar.

Monospecific ve karışık DFS70 desen bir roman hepatit-2 ELITE/DFS70 nakavt substrat ile birlikte ANA tarama sırasında eşzamanlı ayrım

Burada nötralize antikorlar veya enzim replasman terapiler beyin omurilik sıvısı (BOS) veya insan serumu gibi insan bir matris hücresel alımını müdahale diğer faktörler tespit etmek için bir hücre tabanlı akış sitometresi Yöntem mevcut.

Enzim replasman terapileri ile hücre tabanlı tahlil hücresel alımını nötralize antikorların tespiti

3-b "karaciğer-on-a-chip" enfeksiyon hepatit B virüs ile deneyler gerçekleştirmek için adım adım bir kılavuz sağlamak için bu protokolü hedefidir.

"Karaciğer-on-a-Chip" kültürleri birincil tetkikine ve Kupffer hücreleri için Hepatit B virüs enfeksiyonu

BSelex yöntemi tanımlamak ve insan periferik kan mononükleer hücrelerden bireysel antijen özgü antikorlar kurtarmak için tek hücreli PCR ve klonlama ile akış sitometri birleştirir.

Zenginleştirilmiş İnsan Hafızası B Hücre Popülasyonlarından İstenilen Özgülliklerle Antikorların Seçimi ve Geri Kazanımı İçin Tek Hücreli Tarama Yöntemi

Akış sitometrisi gerektirmeyen sabit/kriyokorunmuş doku örneklerinde hepatosit numarası ve nükleer ploidideki değişiklikleri ölçmek için sağlam, uygun maliyetli ve esnek bir yöntem saseril. Yaklaşımımız karaciğer hasarı ve hastalığın ilerlemesini izlemek için ideal karaciğer sitolojisi güçlü bir örnek çapında imza sağlar.

Farelerde Hepatosit Nükleer Ploidi Tahmini için Yerinde Yüksek Throughput Yöntemi

Bu el yazması, insan NTCP, HNF4α, RXRα ve PPARα'yı ifade eden 293T-NE-3NR' ler ve geleneksel hepatik hücreler (HepG2-NE, insan NTCP'yi ifade eden) yeni mühendislik temalı 293T hücreleri (293T-NE-3NR) enfeksiyonu için ayrıntılı bir protokol açıklar.

Hepatik Olmayan 293T-NE-3NR Hücrelerinde Hepatit B Virüs Enfeksiyonunun Modelilmesi

Konakçı sodyum taurokolat birlikte taşınan polipeptit ile bağlanma afinitesini (KD) ölçmek için izotermal titrasyon kalorimetrisini kullanarak, viral giriş öncesi ve sonrası yaşam döngüsü aşamalarını hedefleyen anti-hepatit B virüsü (HBV) bileşiklerini taramak için bir protokol sunuyoruz. Antiviral etkinlik, viral yaşam döngüsü belirteçlerinin (cccDNA oluşumu, transkripsiyon ve viral montaj) baskılanması yoluyla belirlendi.

Terapötik Hedef Olarak Polipeptitin Sodyum Taurokolat Kotransportasyonu Yoluyla Hepatit B Virüsü Girişini İnceleyen Yetkin Bir Hepatosit Modeli

Bu protokol, terapötik bir anti-HER-2 antikoru varlığında doğal öldürücü hücre aracılı meme kanseri hücresi öldürmeyi modüle eden bileşikleri tanımlamak için otomatik, görüntü tabanlı yüksek verimli bir teknik sunar.

Antikor Bağımlı Hücresel Sitotoksisiteyi Modifiye Eden Bileşiklerin Tanımlanması için Yüksek İçerikli Tarama Testi

Pluripotent kök hücrelerden türetilen hepatositler, mitokondriyal ve aktive edilmiş lökosit hücre adezyon molekülünün (CD166 olarak da bilinen ALCAM) bir kombinasyonu kullanılarak hücre sıralama yoluyla saflaştırılabilir.

İnsan Kaynaklı Pluripotent Kök Hücrelerden Türetilen Hepatositleri Saflaştırmak İçin Hücre Sıralamasında Canlı Mitokondri Boyamanın Uygulanması

Hepatit E Virüsü (HEV) için standart bir virüs nötralizasyon testi bulunmamaktadır; bu virüsün sitopatik olmayan pozitif iplikli RNA virüsü vardır. Burada, anti-HEV antikorlarının etkinliğini değerlendirmek için floresan etiketli viral kapsid proteininin nicelendirilmesine dayalı bir floresan azaltma nötrasyonasyon testi (FRNT) tanımlanmıştır.

Nötralize Antikor Titrlerini Ölçmek İçin Hepatit E Virüsü Flüoresans Azaltma Nötralizasyon Testi

Öğrenin, HEp-2 hücreleri kullanarak dolaylı immünofloresan yöntemiyle antinükleer antikorları nasıl tespit edeceğinizi. Bu teknik, sistemik otoimmün romatizmal hastalıkların tanısına yardımcı olur.

Anti-Nükleer Antikor HEp-2 hücreleri kullanarak Eleme

Daha fazla video keşfet