4 Mart 2014
Kalıcı uygulama koordine hareketlerin hassasiyetini artırır. Burada farelerde öğrenme ve hafıza ön ayakları beceri değerlendirmek için tasarlanmış bir tek tablet ulaşan görevi tanıtmak.
Bu prosedürün genel amacı, fareleri dört M'ye özgü motor beceriye sahip olarak eğitmektir. Bu, motor öğrenmeyi ve hafızayı değerlendirmek için iyi bir davranış modeli sağlar. Farelerde ilk adım, farelerin eğitim odasına ve yiyecek peletlerine aşina olmalarını sağlamaktır.
Daha sonra yiyecek peletleri şekillendirme yarığının ulaşabileceği bir yere konur ve geri alma için kullanılan uzuv tercihi, şekillendirme süresinden sonra belirlenir. Fareler, tek pelet ulaşma görevi ile eğitilir ve tercih edilen pençe ile doğru ulaşma sayısı kaydedilir. Sonuç olarak, bu protokol, motor öğrenme ve hafıza oluşumu sırasında birçok düzeyde beyin değişikliklerini incelemek için davranışsal bir paradigma sağlar.
Bu yöntem, motor öğrenmenin fare beynindeki yapısal plastisite ve moleküler değişikliklerle nasıl ilişkili olduğu ve çeşitli nörolojik hastalıkların ince motor becerileri nasıl bozduğu gibi sinirbilim alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir En iyi sonuçlar için. Bu görevi herhangi bir gürültü veya dikkat dağıtıcı unsurdan uzak, sessiz bir yerde gerçekleştirin. Şekillendirme ve eğitim için üç dikey yarık içeren özel yapım şeffaf pleksiglas eğitim odası kullanılır.
Şekillendirme seansları sırasında darı tohumlarını yerinde tutmak için bir yarık şekillendirme kenarında ve iki yarık karşı eğitim kenarındadır, üç cam slayttan eğimli bir tepsi inşa edilmiştir. Eğitim seansları sırasında bir yemek platformu kullanılır. Platformun sol ve sağ taraflarındaki divotlar darı tohumunu yerinde tutar.
Bu divotlar, fare eğitim odasındaki sol ve sağ yarığa karşılık gelir ve lims için baskın eğitimi için kullanılır. İşlem sırasında elinizin altında bulunması yararlı olan diğer öğeler forseps, tartı ve kronometredir. Şekillendirme prosedürüne başlamadan iki gün önce, yiyecekler, hayvanların birinci gün taban çizgisinin yaklaşık% 90'ı kadar azaltılmış vücut ağırlığını korumalarını kısıtlar.
İki fareyi aynı anda eğitim odasına yerleştirin ve alışmalarına izin verin. Odanın içine fare başına yaklaşık 20 mil tohum yerleştirin ve farelerin 20 dakika boyunca keşfetmesine izin verin. Ertesi gün, hayvanları ayrı ayrı odalara koyun ve ertesi gün her birine yaklaşık 20 mil tohum verin.
Şekillendirme kenarı, uzuv baskınlığını belirlemek için kullanılır. Haznenin tek yarık tarafını aşağı bakacak şekilde yerleştirin. Ardından, darı tohumlarıyla dolu yemek tepsisini eğitim odasının ön duvarına doğru bastırın.
Hazır olduğunuzda, hazneye tek bir fare yerleştirin. Hayvanın eğitim yarığından tohum almasına izin verin ve geri alma için kullanılanları kaydedin. Şekillendirme süresi, iki kriter karşılandığında bitmiş olarak kabul edilir.
İlk olarak, fare 20 dakika içinde 20 ulaşma denemesi gerçekleştirir. İkincisi, bu erişimlerin %70'inden fazlası dört uzuvlu bir uzuv ile gerçekleştirilir. Fare, tohumları hazneye sokmak için dilini kullanıyorsa, dört uzuvun ulaşmasını teşvik etmek için tepsiyi hafifçe geriye doğru hareket ettirin.
Fare şekillendirmeyi bir hafta içinde tamamlayamazsa, deneyden bırakın Eğitim seansına başlamak için, eğitim odasını çift yarık aşağı bakacak şekilde yapılandırın. Hazır olduğunda, fareleri ayrı ayrı kafese yerleştirin. Şekillendirme süresi boyunca belirlenen tercih edilen pençeye karşılık gelen divotta besin platformuna tek tek tohumlar koyun.
Tohum yerleştirildikten sonra, farenin ulaşma davranışını gözlemleyin ve sonuçları puanlayın. Fare tercih edilen pençe ile ulaştığında, tohumu alıp yediğinde bir başarı elde edilir. Fare tercih edilen pençe ile ulaştığında, tohumu kavradığında, ancak ağzına koymadan önce düşürdüğünde bir damla atın.
Fare tercih edilen pençe ile tohuma ulaşırsa, ancak onu ıskalarsa veya tutma plakasından düşürürse, başarısız olarak puanlanır. Bir fare, yiyecek platformuna yerleştirilmiş bir tohum olmadığında bile ulaşabilir. Bunlar boşuna ulaşılmış olarak kabul edilir ve sayılmaz.
Boşuna cesaretini kırmaya yönelik girişimlerin toplam sayısı, bir sonraki tohumu yerleştirmeden önce eğitim odasının diğer ucuna geri yürümek için fareleri eğitir. Bir fare tercih edilmeyen pençe ile uzanırsa, bu erişimler kontralateral erişim olarak kabul edilir ve toplam erişim sayısına dahil edilmez. Fareleri, hangisi önce gelirse, tercih edilen uzuv üzerinde 30 ulaşma denemesi veya 20 dakika boyunca günlük olarak eğitin.
Günlük egzersiz seansından sonra fareleri ev kafeslerine geri koyun. Farelerin vücut ağırlıkları deneyler boyunca yakından izlenmelidir. Yiyecek yoksunluğu, şekillendirme ve eğitim sırasında tek bir fare için vücut ağırlığı kaybı burada gösterilmiştir.
Bu sonuçlar, ortalama başarı hızının yanı sıra ortalama başarı oranının da eğitim süresi boyunca geliştiğini göstermektedir. Aşırı şekillendirilmiş ve öğrenmeyen bir fare için başarı oranları burada çizilmiştir. Bu grafik, dört günlük bir yeniden eğitim süresi boyunca önceden eğitilmiş ve saf yetişkin farelerin motor performansını karşılaştırır.
Bu prosedürü denerken, hayvanlar üzerinde test koşullarını standartlaştırmayı unutmamak önemlidir. Bu, çevresel bozulmaları en aza indirerek, aynı eğiticiye sahip olarak, aynı fareyi kullanarak ve deneyler boyunca gün içinde aynı saatlerde eğitim alarak yapılabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu çalışma, farelerde ön uzuv beceri öğrenimini ve hafızasını değerlendirmek için tasarlanmış tek pelet ulaşma görevini tanıtmaktadır. Görev, sürekli uygulama yoluyla koordineli hareketlerin hassasiyetini değerlendirir.
Tek pelet uzanma görevi gibi nicel davranışsal paradigmalar, preklinik modellerde motor öğrenme ve belleğin titizlikle değerlendirilmesine olanak tanıyarak nörobiyoloji süreçlerinde hedef doğrulamasını ve mekanistik risk azaltmayı destekler. Bu yaklaşım, motor fonksiyonlar ve nörolojik hastalıklar üzerine erken keşif ve translasyonel araştırmalara temel oluşturan tekrarlanabilir, ölçülebilir çıktılar sağlar. Standardize edilmiş davranışsal analizler, portföy önceliklendirmesi ve MSS ilaç keşfinde öngörü güvenilirliği için kritik öneme sahiptir.
Bu davranışsal paradigma, moleküler hedef belirleme ile in vivo fonksiyonel doğrulama arasında bir köprü kurarak, erken keşiften preklinik aşamaya uzanan sürekliliğe uyum sağlar.