21 Nisan 2014
Bunların diagnostik ultrason görüntülemede insan ve hayvan deneklerde çeşitli solunum hastalıkları teşhis etkili olduğu kanıtlanmıştır. Biz özellikle fare modellerinde diyafram kinetik analiz Dr Zuo'nun laboratuvarı tarafından kullanılan kapsamlı bir ultrason protokol göstermektedir. Bu aynı zamanda fare solunum kas fonksiyonu üzerine nicel bilgi verebilir bir non-invaziv bir araştırma tekniğidir.
Bu prosedürün genel amacı, bir fare modelinde diyafram kasılmasının nasıl doğru bir şekilde değerlendirileceğini göstermektir. Ultrason görüntülemeyi kullanarak, ilk adımlar fareyi uyuşturmak ve karın kıllarını çıkarmaktır. Sonraki adımlar, ultrason jeli uygulamak ve ultrason problarını kullanarak diyafram görüntüsünü çözmektir.
Sonuç olarak, sonuçlar, yazılımın elektronik kumpaslarını kullanarak diyafram gezisini ve solunum hızını gösterebilir. Bu tekniğin invaziv miyografi gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, invaziv olmaması ve kurban edilen hayvan sayısını azaltmasıdır. Bu tekniğin etkileri, solunum kası disfonksiyonunun teşhisi ve potansiyel tedavisine kadar uzanır.
Bu yöntem, bir fare modelinde diyafram kasılması hakkında bilgi sağlayabilse de, hastalığın ilerlemesini ve tedavi etkinliğini değerlendirmek için klinik modeller gibi diğer sistemlere de uygulanabilir. Cerrahi bir havluya sarılmış ısıtılmış bir izotermal ped ile temiz bir prosedür masası oluşturun. Isıtılmış ped, hayvanın çekirdek sıcaklığını stabilize etmek ve aynı zamanda hayvan üzerindeki potansiyel stresi azaltmak için kullanılmalıdır.
Fare, dakikada 1,5 litreye ayarlanmış bir oksijen akış hızı ile anestezi indüksiyon odasına yerleştirilmelidir ve% 3,5 buharlaştırılmış flor ile Sedasyon genellikle iki dakika içinde sertleşir ve istemli motor fonksiyon kaybı ile not edilir. Daha sonra burun konisi gazı iletimi ile anestezi durumunu koruyun. Hayvanı uyuşturduktan sonra, anestezi sırasında göz kuruluğunu azaltmak için doğrudan kornealara az miktarda oftalmik merhem uygulayın.
Mouse asla pedal çekme refleksini göstermemelidir. Mukus zarları her zaman pembe bir renge sahip olmalı ve hayvan düzenli nefes almalıdır. Anestezi uygulanmış farenin her bir bacağını, cerrahi bant gibi çıkarılabilir bir yapıştırıcı ile ısıtılmış prosedür masası üzerinde tutun.
Elektrikli bir tıraş bıçağı kullanarak, karın ile göğüs boşluğunun yarısına kadar olan ventral vücut yüzeyindeki tüylerin çoğunu alın. Ardından kalan tüyleri almak için tüy dökücü krem uygulayın. İki ila üç dakika sonra kremayı nemli bir gazlı bezle silin.
Ayrıca, fazla tüyleri su ve gazlı bezle alın. Daha sonra, traş edilmiş bölgeyi% 70 alkol içeren dört ovma veya ultrason cihazında eşdeğer bir antiseptik dönüşle temizleyin. Bu problar, küçük ayak izi ve mükemmel eksenel çözünürlük nedeniyle bir mikro dışbükey dizi veya doğrusal fazlı dizi dönüştürücü idealdir.
Ultrason frekansını 6,5 ila 12 megahertz aralığına ayarlayın. Şimdi makinenin modunu, parlaklığını ve hareket modlarını birlikte ayarlayın, diyafram kasılmasının en iyi görüntülenmesini sağlayın. Daha sonra, üst karın bölgesine az miktarda ultrason jeli uygulayın ve jeli göğüs boşluğuna doğru masaj yapın.
Ultrason dönüştürücüsünü jelin üzerine yerleştirin ve kalbe doğru yukarı doğru açın. Görüntü çözünürlüğünü optimize etmek için probu ayarlayın. Bu zordur, ancak pratikle daha kolay hale gelecektir.
Muayene sonuçlarının tehlikeye atılmadığından emin olmak için anestezi altındayken hayvanın solunumunu izlemeyi unutmamak çok önemlidir. Diyafram görüntülerini geçici olarak kaydetmek ve seçilen kasılmaları görüntülemek için dondurma düğmesine basın. Kaydı, diyafram gezisi ve solunum hızının daha sonra ölçülmesine izin veren bir silindir döngüsü olarak kaydedin.
Görüntülemeden sonra, fare 30 dakika içinde anesteziden tamamen kurtulmalıdır. Sternal yaslanmayı sürdürmek için yeterli bilinci yeniden kazanana kadar hayvanı gözetimsiz bırakmayın. Verileri M modunda analiz etmek için, ultrason yazılımının bir parçası olan elektronik kaliperleri kullanarak gevşemeden kasılmaya kadar diyafram hareketinin derinliğini ve hızını ölçün.
Alternatif olarak, B modunda, CINA döngü dosyasını bir MP four dosyasına dönüştürün ve kayıt süresi boyunca diyafram kasılmalarının sayısını sayarak solunum hızını belirleyin, diyafram hareketinin derinliğini belirlemek için elektronik kumpaslar B modunda da kullanılabilir. Bir farenin diyaframı, maksimum dikey yer değiştirme kaydedildi ve mesafe daha sonra elektronik kumpaslar kullanılarak protokol tarafından tarif edildiği gibi hesaplandı. Bu tür ölçümler üç farklı fare üzerinde yapıldı.
Örnek vermek gerekirse, CIL döngü dosyasını bir MP dört dosyasına dönüştürdükten sonra. Solunum hızı, altı saniyelik bir kayıt periyodu boyunca diyafragma kasılmalarının sayısı sayılarak belirlendi. Bu analiz B modu kullanılarak gerçekleştirilmiştir.
Alternatif olarak, M modu, diyaframın dikey hareketinin yanı sıra solunum hızının görselleştirilmiş bir resmini sağladı. Yankılanma gibi tanısal ultrason görüntülemesi yapılırken ortaya çıkabilecek bazı potansiyel görüntüleme artefaktları vardır. Karşılaşılabilecek bir diğer eser de kuyruklu yıldız hikayelerinin varlığıdır Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde uygulanırsa 20 ila 30 dakika sürebilir.
Bu videoyu izledikten sonra, tanısal bir ultrason görüntüleme tekniği kullanarak fare modelinde bir diyafram kasılmasının nasıl doğru bir şekilde değerlendirileceğini iyi anlamış olmalısınız.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, fare modellerinde diyafram kontraktilitesini değerlendirmek için non-invaziv bir ultrason protokolü sunmaktadır. Bu teknik, solunum yolu hastalıklarının teşhisi için kritik öneme sahip olan solunum kası fonksiyonuna ilişkin kantitatif veriler sağlar.
Fare diyafram fonksiyonunun non-invaziv ultrason görüntülemesi, terminal prosedürlere gerek kalmaksızın solunum kası kontraktilitesinin boylamsal izlenmesini sağlayarak solunum hastalıkları için terapötik geliştirmeleri destekler. Bu yaklaşım, diyafram ekskursiyonu ve solunum hızı hakkında kantitatif veriler sağlarken hayvan kullanımını azaltır; böylece 3R ilkeleriyle uyum sağlar ve preklinik modellerde hastalık progresyonunun takibine olanak tanır. Teknik, solunum kası disfonksiyonuna dair mekanistik içgörüler sunarak pulmoner terapötik boru hatlarında hedef doğrulamayı ve öncü bileşik tanımlamasını kolaylaştırır.
Bu yöntem, hedef etkileşiminden sonra ancak öncü bileşik optimizasyonundan önce fonksiyonel solunum okumaları sağlayarak keşif sürekliliğine entegre olur ve mekanizma tabanlı bileşik önceliklendirmesine olanak tanır.