Name: Farelerde Mesane Ağrı için bir model olarak Mesane Distansiyonunun Uyarılmış Visceromotor Cevapları (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-04-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 46 s
Description: Öğrenin farelerde mesane distansiyonu ile viscero-motor yanıtları ölçerek mesane ağrısı için fizyolojik bir model nasıl kurulur. Bu yöntem, interstisyel sistit ve mesane ağrısı sendromunun sinir sistemi mekanizmalarını araştırmaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Biz Dr kabul etmek istiyorum. Bu sistemi kurarken onların yararlı yardım Robert Gereau, Henry Lai, ve Lara güveç. Biz de bu iş için finansman kaynaklarını kabul etmek istiyorum (BJK - Scan tarafından Ağrı Erken Kariyer Araştırma Grant Çalışmaları Uluslararası Birliği | INGER &amp; JENS BRUUN ve Duquesne University Hunkele korkunç Hastalık Fonu Tasarım Vakfı).

Aşağıdaki protokol Duquesne Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve Sağlık Ulusal Enstitüleri kurallar ile tutarlı olmuştur. Steril Teknikleri Kullanarak Tel Elektrotlar ve Mesane Kateterinin 1. Cerrahi İmplantasyonu (toplam süresi 5-10 dk) <ol><li> Aşağıdaki öğeler öncesinde başlayan ameliyat hazırlıklı olmalıdır: <ol><li> Aktif (Malzeme Listesi) vücut ısısının ek kontrol için düşük voltajlı ısı lambası otomatik sistem bağlayın izlemek ve bir pil ile çalışan ısıtma pedi ve hayvan vücut ısı probu ile sıcaklık izleme sistemi kullanılarak 37.5 ± 0.5 ° C vücut sıcaklığını ayarlamak. </li><li> Izofluran anestezi için gerekli donatım basınçlı hava (ilk demonte için) (örneğin% 100 O 2), izofluran buharlaştırıcı, izofluran, izofluran indüksiyon odası, burun konisi, ve egzoz sistemi içerir. </li><li> Inci birleştirine uygun cerrahi aletler, IV kateter ve elektrotlar (Malzeme Listesi) </li></ol></li><li> % 2-3 izofluran da indüksiyon odasında anestezi devlet teşvik. Doğrulma refleks (0-1 dk) kaybolduğunda odasından fareyi çıkarın. </li><li> % 2-2.5 izofluran ile burun konisi fare yerleştirin. Tam anestezi kontrol etmek için ayak çimdik. Hayvandan bir tepki olmamalıdır. Sayacı başlatmak. </li><li> Farenin her gözün üzerine Oftalmik merhem 1 damla yerleştirin. </li><li> Böylece dorsal yüzü aşağı bakacak üzerinde fareyi çevirin. </li><li> Üretra yoluyla ve mesane içine kateter yerleştirin. </li><li> Kateter yağlamak için cerrahi lube olarak kateter batırın. <ol><li> Yavaşça hayvanın vücuduna dik sivri forseps ile üretral açılış tutun. Forseps 2. kateter seti ile tutarak, yavaşça hayvanın vücuduna dik bir açı ile üretra içine kateter ucunu. </li><li> Sonda üretra ~ 1-2 mm gitti zaman Hemen gövdeye paralel olacak şekilde hafifçe kateter ayarlamakkafasına doğru nişan. Bu hareket, kasık kemiği önlemek için gereklidir. </li><li> Yavaşça fare vücut doğru kateter itin. Kateter düzgün ve direnç olmadan vücut boşluğuna kaymalıdır. Kateteri zorlamayın. Kateter sorunsuz girmezse, dik kateter pozisyonuna dönün ve tekrar başlatın. </li><li> Kateter tamamen mesane takılı ile hafifçe mesane içindekileri çıkartmak için fare karın aşağı doğru itin. Kateter ağzına kağıt havlu, küçük bir parça iterek kateter tüm idrar çıkarın. Kağıt havlu idrar ile ıslatılır olduğunda, değiştirin. (Aşağıdaki Protokol 3 bakınız.) Mesane distansiyon deneyler sırasında da dahil olmak üzere geri kalan protokol boyunca sürekli idrar çıkarmak </li></ol></li><li> (Bir zemin olarak.) Sol karın kasları ve göğüs içine bir gümüş tel, iki gümüş tellerinin <ol><li> Kateter sağındaki bölge yanal dezenfekte etmek için, alkol veya iyot için (vücut hayvanın sol tarafı). </li><li> Sol abdominal kas Açığa. <ol><li> Forseps ile sol karın kaslarının yakın cilt tutun. Orta cerrahi makas ile küçük 1-2 cm kesi olun. </li><li> Kesi içine makas ucunu yerleştirin ve yavaşça 2 cm kesi genişletin. </li><li> Üstün oblik karın kas maruz örten fasya taşımak için forseps kullanın. Bu bölgede bulunan ana kan damarlarının herhangi bir rip / kesmek için dikkatli olun. </li></ol></li><li> Yarısında üç gümüş teller bükün. Kas küçük bir ısırık almak için keskin 21 G iğne kullanın. Sonra, kas yoluyla iğne itin. Kas takarken herhangi bir iç organ delinme veya kas gereksiz zarar ikna etmek için değil dikkatli olun. </li><li> 21 G iğne delikleri içine bir gümüş tel bir serbest uca sopa. Yavaşça kas ısırması yoluyla gümüş tel çekmek için kas yoluyla geri iğneyi çekin. Iğne kas serbest olduğunda tel döngü ile aynı hizaya gelene kadar yavaşça kas yoluyla gümüş tel çekmekas ısırık. </li><li> Adımları tekrarlayın 1.7.3-1.7.4 ikinci kas tel için. Bu tel ilk kas telden ~ 0.5 cm yerleştirilmelidir. Bu iki tel yerleştirildikten sonra dokunmayın önemlidir. </li><li> Kalp aşağı göğüs üçüncü gümüş tel (toprak) takın. <ol><li> Cildin küçük bir ısırık almak (bir kesi yapmak veya cildi tıraş için gerekli değildir) ve deri yoluyla iğne itmek için keskin 21 G iğne kullanın. </li><li> Yukarıda açıklandığı gibi gümüş teli yerleştirin ve deri yoluyla çekin. </li></ol></li></ol></li><li> Nemli tutmak ve mümkün olduğunca maruz kası üzerinde deri çekmeye maruz kalan kaslar üzerinde 37.5 ° C steril mineral yağ küçük bir miktar koyun. </li><li> Sonraki adımları sırasında sıvı seviyelerini korumaya yardımcı olmak için tuzlu su deri altına 0.5 ml enjekte edilir. </li><li> Vücut sıcaklığı kolayca korunabilir, böylece hafifçe tarafına hayvan rulo. </li></ol> 2.. Kısmi Anestezi Step-down Prosedürü (Total zaman ~ 75 dk) Aşağıdaki anestezi protokol Duquesne Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve Sağlık Ulusal Enstitüleri kurallar ile tutarlı olmuştur. <ol><li> Bölüm hemen sonra (yukarıda),% 1.5 daha düşük izofluran tamamlanır. 15 dakika boyunca bu seviyede tutun. </li><li> Alt izofluran anestezi hayvan kısmen şekildedir. <ol><li> % 0.125 ile alt izofluran her 15 dk hayvan sergileyen bir esneme ayak tutam yanıt ancak seslendirmek ya da başka türlü hareket etmiyor kadar. </li><li> Bu, anestezi maddelerinin seviyeleri kurulumları farklılıklara değişebilir ancak tipik olarak,% 0.8-1.0 izofluran seviyesi, en uygunudur. Anestezi uygun düzeyde olduğu zaman Seslendirme ve / veya ambulasyon oldukça nadirdir. </li></ol></li></ol> . 3. Elektromiyogram (EMG) Dereceli Basınçlar (15-75 mmHg) ile mesane distansiyonu (toplam süresi - değişken deney bağlı) sırasında kayıt <ol&gt; <li> Kurulum EMG kayıt ve mesane şişkinliği için aşağıdaki öğeleri: <ol><li> Kur, bir amplifikatör, bir sayisallastirici ve kayıt yazılımı. Bu kurulumda, sayısallaştırıcı (Bölüm 3.1.2 aşağıda basınç ve uyarıcı işaret girişler) amplifikatör için bir giriş ve basınç regülatörü için iki girişi vardır. Tam donanım ve yazılım kurulumu (özel talimatlar için malzemeler listesi) özelleştirilebilir. </li><li> Kur hayvana hava basıncı belirli patlamaları sunmak için bir sistem. Bu sistem, aşağıdaki protokolde &quot;zamana basınç regülatörü&quot; olarak adlandırılır. Bu hava basıncı sayısallaştırma, deneme uzunluğunun kontrolü, inter-deneme aralığı otomasyon, deneme sayısının kontrol dahil olmak üzere otomatik bir basınç sağlamaya imkan verir, ve başlangıç ​​dijital sinyal (zamana bağlı bir basınç regülatörü şematik için Anderson ve ark. 14) uyarıcı. </li></ol></li><li> Amplifikatör fare (2 karın tel + 1 zemin tel) tüm kurşun teller bağlayın vesayısallaştırıcı ve dijitalleştirici yazılım kayıt EMG sinyali başlar. Dijitalleştirici yazılımı seçilen ne zaman &quot;Yazma&quot; Not. </li><li> Mesane kateteri kağıt havlu çıkarın. (Zamanlanmış basınç regülatörü.) Hava borusu sonda bağlayın </li><li> 60 mmHg distansiyon basınçta tek bir 20 saniye deneme sunun. <ol><li> 60 mmHg akış regülatörü ayarlayın (analog sfigmomanometrenin kullanarak kontrol basıncı.) </li><li> 20 saniye basınç şişkinliği darbesi ardından 20 saniye prepressure aralığını (bu dijitalleştirici yazılım kaydedilen 2V uyarıcı sinyal olacaktır) teslim Zamanlı basınç regülatörü ayarlayın. </li><li> Deneme (prepressure aralık + basınç şişkinliği deneme) başlatın. Gerçek basınç deneme başladığında, sisteme bağlı 3 Sphygmomanometers kullanarak basıncını kontrol çift. </li><li> Basınç şişkinlik Duruşma sırasında, güçlü bir EMG sinyali (&gt; 0.5 V) 20 saniye şişliği sırasında ve muhtemelen sonrasında dikkat edilmelidir. Hayvan abdominal sergileyebilirnal hareket ama hayvansal seslendirmek ya da hareket edilmemelidir. Nadiren de olsa, anormal hareketler veya sesler görülür ise, izofluran düzeyini artırmak. </li></ol></li><li> 1 st 60 mmHg şişliği 1-2 dakika bir intertrial aralıklarla uygun bir EMG sinyali, tekrar adımı 3.4 iki kez daha çikarsa. </li><li> Üç 60 mmHg çalışmalarda güçlü sinyaller aldıktan sonra, deneysel distentions gerçekleştirin. <ol><li> Birçok çalışma, düşük basınçta (10-15 mmHg) başlayan ve 10-15 mmHg artışlarla zararlı basınçları (75-80 mmHg) kadar çalışma kademeli distensions kullanın. Farklı basınçlarda örnek izleri için aşağıdaki temsilcisi sonuçlara bakın. </li><li> Tipik çalışmalarda 20 saniye prepressure aralığını, bir 20 saniye basınç şişkinlik deneme ve 1-2 dk intertrial aralığını kapsamalıdır. </li><li> Her basınçta üç distentions yapın ve daha sonra (her bir basınç için tek visceromotor tepki elde etmek için) üç deneme karşısında ortalama. Alternatif bir yöntem, p, her bir basınçta, beş distensions erform, yüksek ve düşük denemeler atmak ve daha sonra geri kalan üç yanıtları ortalama. </li></ol></li><li> Bir kez deneysel distensions Kaydı durdurmak deney dosyayı kaydedin ve onaylanmış yöntemler kullanarak hayvan kurban, tamamlandı. </li></ol> Ham EMG İzler 4. Analizi <ol><li> Visceromotor tepkiler (yani EMG kayıtları) analizi kolayca on-board tablası yazılımını kullanarak veya bir üçüncü taraf program (Malzeme Listesi) aracılığıyla yapılır Aşağıdaki talimatlar birden çok program kullanarak veya manuel analizini kullanarak bu verileri analiz etmek için kullanılabilecek genel talimatlar vardır . </li><li> EMG, basınç ihracat, ve dijitalleştirici yazılım uyarıcı sinyal veri aşağıdakileri yapın: <ol><li> Deneysel dosyasını açın. </li><li> &quot;Dosya&quot; &quot;İhracat olarak tıklatın.&quot; </li><li> Dosyayı adlandırın ve tıkırtı &quot;, elektronik tablo metin (. Txt)&quot; dosya türünü değiştirin &quot;Kaydet.&quot; </li><li> Pop-up penceresi, çıktı örnek hızını değiştirmek &quot;1000,&quot; başladığı an veri toplama için başlangıç ​​saatini değiştirmek ve bitiş saatini değiştirmek &quot;MAXTIME&#39;ı ().&quot; &quot;zaman kaydırma çıktı işaretleme kutusunu seçin ilk satır olan 0.0 sn, OK &quot;ve&quot;. &quot; </li><li> Veriler artık çeşitli programlar açılabilir bir metin dosyası olarak ihraç edilecektir. Dosya dört sütun (Zamanlayıcı, VMR (EMG), Basınç, Uyaran) içermelidir. </li></ol></li><li> Test edilen her bir deneysel hayvan için, aşağıdaki matematiksel işlemler. <ol><li> Her zaman noktasında mutlak değeri hesaplanarak tüm veri EMG sinyali giderin. </li><li> Deneyin arka bölümü boyunca ortalama EMG yanıtı belirler. </li><li> Arka plan düzeltilmiş veri seti elde etmek için her bir deneyde doğrultulmuş bir veri noktasından bu ortalama arka EMG yanıtı çıkarın. </li><li> Her biri 20 saniye için ön, eğri (AUC) altındaki alanı belirlemekArka plan düzeltilmiş veri setinde basınç aralığı. </li><li> Plan düzeltilmiş veri setinde her 20 sn basınç distansiyonu deneme için AUC belirleyin. </li><li> Bütün deneyde düşük prepressure aralığı AUC tarafından (adım 4.3.5 &#39;te elde edilen) her bir basınç distansiyonu deneme AUC bölün (adım 4.3.4 elde.). Bu, her tam basınç şişliği deneme için normalize ve arka plan düzeltilmiş AUC olduğunu. </li></ol></li><li> Her bir deneysel hayvan için tek bir basınç ortalama birden fazla normalleştirilmiş denemeler Volt normalleştirilen VMR * sn (Vsec) elde edilmiştir. </li><li> Deneysel tasarım bağlı verilere uygun istatistik gerçekleştirin. </li></ol>

<ol><li>Merskey, H., Bogduk, N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMerskey%2C+H+%22Classification+of+Chronic+Pain%22">Classification of Chronic Pain</a>. , IASP Press. (1994).</li>
<li>Gureje, O., Korff, M. V., Simon, G. E., Gater, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peristent+pain+and+well-being.+A+World+Health+Organization+study+in+primary+care%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Med.+Assoc%22%5BJournal%5D)">Peristent pain and well-being. A World Health Organization study in primary care.</a> J. Am. Med. Assoc. 280, 147-151 (1998).</li>
<li>Gaskin, D. J., Richard, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+economic+costs+of+pain+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pain%22%5BJournal%5D)">The economic costs of pain in the United States.</a> J. Pain. 13, 715-754 (2012).</li>
<li>Berry, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Symptoms+of+Bladder+Pain+Syndrome%2FInterstitial+Cystitis+Among+Adult+Females+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Symptoms of Bladder Pain Syndrome/Interstitial Cystitis Among Adult Females in the United States.</a> J. Urol. 186, 540-544 (2011).</li>
<li>Tunitsky, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bladder+Pain+Syndrome%2FInterstitial+Cystitis+in+twin+sisters%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Bladder Pain Syndrome/Interstitial Cystitis in twin sisters.</a> J. Urol. 187, 148-152 (2012).</li>
<li>Tettamanti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+smoking%2C+coffee%2C+and+tea+consumption+on+Bladder+Pain+Syndrome+in+female+twins%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Influence of smoking, coffee, and tea consumption on Bladder Pain Syndrome in female twins.</a> Urology. 77, 1313-1317 (2011).</li>
<li>Warren, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWarren%2C+JW+%22Harrison%27s+Principles+of+Internal+Medicine%22">Harrison's Principles of Internal Medicine</a>. Longo, D. L., et al. , McGraw-Hill. New York. (2012).</li>
<li>Baldoni, F., Ercolani, M., Baldaro, B., Trombini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stressful+events+and+psychological+symptoms+in+patients+with+functional+urinary+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Perceptual+Motor+Skills%22%5BJournal%5D)">Stressful events and psychological symptoms in patients with functional urinary disorders.</a> Perceptual Motor Skills. 80, 605-606 (1995).</li>
<li>Tannenbaum, C., Gray, M., Hoffstetter, S., Cardozo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comorbidities+associated+with+bladder+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Clin.+Practice%22%5BJournal%5D)">Comorbidities associated with bladder dysfunction.</a> Int. J. Clin. Practice. 67, 105-113 (2013).</li>
<li>Ness, T. J., Elhefni, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliable+visceromotor+responses+are+evoked+by+noxious+bladder+distention+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Reliable visceromotor responses are evoked by noxious bladder distention in mice.</a> J. Urol. 171, 1704-1708 (2004).</li>
<li>Ness, T. J., Richter, H. E., Varner, R. E., Fillingim, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+psychophysical+study+of+discomfort+produced+by+repeated+filling+of+the+urinary+bladder%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A psychophysical study of discomfort produced by repeated filling of the urinary bladder.</a> Pain. 76, 61-69 (1998).</li>
<li>Ness, T. J., Gebhart, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visceral+pain%3A+a+review+of+experimental+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Visceral pain: a review of experimental studies.</a> Pain. 41, 167-234 (1990).</li>
<li>Crock, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+amygdala+metabotropic+glutamate+receptor+5+in+the+modulation+of+visceral+pain%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Central amygdala metabotropic glutamate receptor 5 in the modulation of visceral pain.</a> J. Neurosci. 32, 14217-14226 (2012).</li>
<li>Anderson, R. H., Ness, T. J., Gebhart, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+distension+control+device+useful+for+quantitative+studies+of+hollow+organ+sensation%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">A distension control device useful for quantitative studies of hollow organ sensation.</a> Physiol. Behav. 41, 635-638 (1987).</li>
<li>Dimitrakov, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacologic+Management+of+Painful+Bladder+Syndrome%2FInterstitial+Cystitis%3A+A+Systematic+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Intern.+Med%22%5BJournal%5D)">Pharmacologic Management of Painful Bladder Syndrome/Interstitial Cystitis: A Systematic Review.</a> Arch. Intern. Med. 167, 1922-1929 (2007).</li>
<li>Qin, C., Van Meerveld, B. G. reenwood-, Foreman, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+neuronal+responses+to+urinary+bladder+stimulation+in+rats+with+corticosterone+or+aldosterone+onto+the+amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Spinal neuronal responses to urinary bladder stimulation in rats with corticosterone or aldosterone onto the amygdala.</a> J. Neurophysiol. 90, 2180-2189 (2003).</li>
<li>Randich, A., Mebane, H., DeBerry, J. J., Ness, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rostral+ventral+medulla+modulation+of+the+visceromotor+reflex+evoked+by+urinary+bladder+distension+in+female+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pain%22%5BJournal%5D)">Rostral ventral medulla modulation of the visceromotor reflex evoked by urinary bladder distension in female rats.</a> J. Pain. 9, 920-926 (2008).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Hastalar genellikle düzenli ağrı tedavisi 15 yanıt vermeyen ağrı zayıflatıcı çünkü insanlarda, interstisyel sistit / ağrılı mesane sendromu (IC / BPS) önemli bir klinik problem teşkil etmektedir. Anlayış ve sonuçta kronik mesane ağrısı tedavisinde önemli sorunlardan biri, zararlı mesane şişliği yanıt katılan normal nöral süreçleri anlamak için. Bu sorunun üstesinden gelebilmek için ise, mesane ağrının bir hayvan modeli gereklidir. Bu model, yeniden üretilebilir, stabil ve kolaylıkla ölçülebilir olmalıdır. Ney...

Kronik ağrı resmi olarak yaklaşık üç ay boyunca ya da normal doku iyileşme süresi 1 dakikadan daha uzun süre devam ağrı olarak tanımlanır. Ağrısı Bu tür insanların tıbbi yardım aramak için 2 sürülür ana nedenlerinden biri olan ve yılda 3 635.000.000.000 $ dolara kadar mal olabilir. Mevcut kronik ağrı başa çıkma stratejileri arkaik olarak kabul edilir; tıbbi gelişmeler, NSAID (steroid olmayan anti-enflamatuar ilaçlar) ve opioid yıl sonra doktorlar tarafından reçete birincil tedaviler hala. Ancak bu tedaviler tüm özellikle tam o acı olayın nedenine odaklanan karşı vücut üzerinde analjezik etkileri sağlayan, aynı şekilde ağrı tüm farklı hedef. Daha kronik ağrı muzdarip olanlara yardım etmek için, araştırma dikkat kronik ağrı en sık görülen nedenleri ile ilişkili etiyolojisinde ve olası ağrı spesifik tedaviler doğru kaymıştır edilmelidir. Bu manuscri hedefipt iyi İnterstisyel Sistit / ağrılı mesane sendromu (IC / BPS) olarak bilinen bir durumu anlamak için kullanılan bir model tanımlamaktır. IC / BPS insanlar, 40 4 yaşın üzerinde öncelikle kadınlar milyonlarca etkileyen bir zayıflatıcı bir durumdur. IC / BPS kesin nedenleri ancak yaygınlık genetik 5, özel diyetler ve yüksek stres seviyesi 6 ile bağlantılı olmuştur, bilinmemektedir . IC / BPS belirtileri bunlarla sınırlı değildir: idrara Artan aciliyet, idrar sıklığında artış, ağrıyan, delici veya mesane dolumu ve işeme sırasında ağrı yanma ve noktüri 7. Bu koşulları yaşayan hastalar, yüksek stres düzeyine sahip ve 8 daha endişeli. Bu özgün stres seviyelerini artırmaktadır artan ağrı, stres sonuçlarını artırmıştır. Araştırmalar, depresyon ve anksiyete düzeyleri idrar ağrıyı aşağıdaki tedaviler, böylece etkili bu pozitif-geri döngüsünü kıran azalttığını göstermiştir <sup&gt; 9. IC / BPS için yeni tedaviler keşfetmek zorluklardan biri mesane ağrı temel bir bilim anlayış azlığı olmuştur. Duruma sinir sistemi katkılarını araştırmak amacıyla, bir çok hayvan model IC / BPS ile ilişkili ağrı ve diğer belirtileri taklit etmek için geliştirilmiştir. Geleneksel olarak, sistit gibi hardal yağı, aseton, lipopolisakarit, hidroklorik asit ve mesane içine siklofosfamid gibi çeşitli kimyasal maddelerin tanıtımı ile hayvanlarda yeniden olmuştur. Ancak hiçbir yabancı maddeler bu nedenle bu modellerin geçerliliğini sorgulayan, IC / BPS hasta steril idrarda bulunur. Ürolojik ağrısı başka bir murin modeli mesane gerilme (UBD) 10. Bu modelde, belirli bir basınç sıkıştırılmış hava zaman bir süre boyunca uyanık veya hafifçe anestezi hayvanın mesane teslim edilir. Prosedür boyunca, üstün oblik karın kasları rekor elektrik activ teller(Bir elektromiyogramın (EMG) ile) kas Sığ. Bu aktivite visceromotor yanıt (VMR) olarak bilinen ve nosisepsiyon 10 arasında, güvenilir ve tekrarlanabilir bir ölçüsüdür. Sağlıklı gönüllülerde benzer içi boş organ şişme (örneğin mesane, rektum) rahatsızlık hissi ve ağrı rapor 11,12 önemli artışlar, genellikle IC / BPS teşhis etmek için kullanılır özellikleri üretir. Bu durumda, uyarılması ya da engellenmesi, elektrik farmakolojik ve optogenetic yöntemleri ile bağlantılı olarak, UBD mesane nosisepsiyon ve ağrı hem çevresel hem de merkezi sinir sistemi bileşenlerinin anlaşılması için kullanışlı ve geçerli bir modeldir. Şu anda ortak fare suşu, C57Bl/6J kadın üyeleri içinde bizim laboratuvarda kullanıldığı gibi burada, biz UBD için prosedürü açıklar. Nedeniyle erkeklerin kateterizasyon sürecinde zorluklara, bu işlem esas olarak dişi farelerde gerçekleştirilir. Bu protokol Ness &lt;tarafından geliştirilen adapte edilmiştirem&gt; vd. 10. ve önceden laboratuarımızda 13 yayınladı. (1) mesane kateteri ve kayıt elektrot cerrahi (2) kısmi anestezi indüksiyon (3) mesane distansiyon ve VMR kayıt ve ham VMR / EMG izleri (4) Veri analizi: Aşağıdaki protokol anestezi altındaki hayvanlarda bu modelin dört temel bileşenlerini açıklar . Nedeniyle organizmanın seçimi, anestezi derinliği ve indüksiyon ve vücut sıcaklığına UBD-VMR prosedürde ince farkları aşağıda açıklanmıştır.

<table><tbody><tr><td>Kızılötesi ısıtma battaniyesi ve izleme sistemi</td><td>Kent Scientific</td><td>Right-Temp System&nbsp;</td><td>Bu sistem iki ayrı sıcaklığı izleyecek şekilde ayarlanmıştır. Bu, hayvanı ve ısıtma battaniyesini içermelidir. Ek olarak, sistem ayarlanan bir sıcaklığı korumak için sıcaklığı otomatik olarak ayarlayabilir. Ancak bu otomatik işlev, EMG kaydı sırasında elektriksel parazite neden olur ve kapatılması gerekir. Kent, deneyin riEMG kayıt kısmı sırasında kullanılmak üzere ısıtma yastığı için bir pil takımı sağlayabilir.</td></tr><tr><td>İzofluran buharlaştırıcı</td><td>Draeger</td><td>Vapor 19.1</td><td>Herhangi bir izofluran buharlaştırıcı çalışacaktır, ancak %0-2 izofluran arasında birden fazla çentik içeren bir taneye sahip olmak yararlıdır.</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>çoklu kaynaklar</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>%100 Oksijen hava tankı</td><td>çoklu kaynaklar</td><td>n/a</td><td>Hayvanın ventilasyonu için</td></tr><tr><td>Hava solunum sınıfı</td><td>çoklu kaynaklar</td><td>n/a</td><td>Mesane distansiyonu için</td></tr><tr><td>24 G 0.56 in IV kateter</td><td>BD Biosciences&nbsp;</td><td>381411</td><td>Mesane kateterizasyonu için</td></tr><tr><td>Surgilube (steril)</td><td>Savage Laboratories</td><td>0281-0205-02</td><td>Herhangi bir cerrahi sınıf yağlama iyi çalışır.</td></tr><tr><td>Mineral yağ (steril)</td><td>çoklu kaynaklar</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Tuzlu (steril)</td><td>çoklu kaynaklar</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>AG8W Gümüş Tel, 2 m, 0,20 mm (0,008 inç) D, L, İzolasyon Yok&nbsp;</td><td>Warner Instruments</td><td>W4 64-1318&nbsp;</td><td>Bu özelliklere sahip herhangi bir gümüş tel işe yarayacaktır. Telin "klorlanmasına" gerek yoktur."</td></tr><tr><td>Oftalmik merhem</td><td>çoklu kaynaklar</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Küçük cerrahi makas</td><td>çoklu kaynak</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Keskin forseps</td><td>çoklu kaynak</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>21 G İğne</td><td>çoklu kaynak</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Çim amplifikatörü P511, 3 uçlu giriş kablosu ile</td><td>Çim Aletleri</td><td>P511 ( F-P5IC3/REV1)</td><td>Bu, protokolde kullanılan "amplifikatör"dür.&nbsp; Aşağıdaki ayarlara sahip amplifikatör: Kalibratör = 1 mV; Düşük frekans = 300 Hz; Amplifikasyon = 20; Yüksek frekans = 10 kHz; Satır filtresi = içinde.</td></tr><tr><td>Cambridge Electronic Design (CED) 1401 Plus (veya eşdeğeri)</td><td>Cambridge Electronic Design</td><td>1401 Plus</td><td>Bu, protokolde kullanılan "sayısallaştırıcı"dır. WINDAQ veya diğer şirketlerin diğer sayısallaştırıcı sistemleri iyi çalışır; Basınç sinyali, EMG ve uyaran sinyali için girişlere ihtiyacınız var.</td></tr><tr><td>CED Spike2 yazılımı</td><td>Cambridge Elektronik Tasarım</td><td>Spike 2</td><td>Bu, protokolde kullanılan "sayısallaştırıcı yazılım"dır. Sayısallaştırıcı ile aynı üreticiden olmalıdır. Program, basınç (0-100 mmHg ölçek), EMG sinyali (tipik olarak -5 ila +5 V aralığında) ve uyaran işaretleyici (0-2 V) aralığı için 3 kanal ile ayarlanmalıdır.</td></tr><tr><td>Hava tankından mesane kateterine akış şeması</td><td>n/a</td><td>n/a Basınçlı</td><td>hava tankından hayvan mesanesine bağlantı sırası:&nbsp; Gilmont akış ölçere boruda 1/4'e kadar hava tankı y konektörüne. Tansiyon aletine y konektörünün 1. dalı.&nbsp; Branşman 2'den 4 gang vanaya 4 vana çıkışından zamanlanmış basınç regülatörüne 3/32 boruya, zamanlamalı basınç regülatöründen 2. y konektörüne (branşman 1'den tansiyon aletine) branşman 2 ila 3/32 boru ile tek bir giriş&nbsp; 3. Y konektörüne.&nbsp; Y'nin 1. dalı 3. tansiyon aletine ve 2. dalı hayvan mesane kateterine bağlanır.</td></tr><tr><td>Gilmont Akış Ölçer&nbsp;</td><td>Gilmont</td><td>GF8321-1401</td><td>Birden fazla marka akış ölçer çalışacaktır. Mesane şişme havası için, akış ölçer yüksek basınçları kaldırabilmelidir (bu Gilmont ölçer gibi).&nbsp; Solunabilir hava için akış hızı 100 ml/dk'ya kadar ayarlanabilir olmalıdır (tipik fare hızı 500-1.000 ml/dk'dır).</td></tr><tr><td>4 Gang vana</td><td>Elite</td><td></td><td>Bu özel bir ekipman parçasıdır. Elite gang valfi, düşük hava basınçlarındaki balık tankları için tasarlanmıştır. Mesane distansiyon kurulumunda, bu valf basıncın yükselmesi durumunda bir emniyet valfi görevi görür. Tankın ilk açılması sırasında çok yüksek basınç, Zaman Ayarlı basınç regülatöründeki ve/veya bıyıklardaki basınç dönüştürücüsünü bozacaktır. Ayrıca bu vana sistemde az miktarda kaçak sağlayarak 10-80 mmHg arasındaki basıncın ayarlanmasını kolaylaştırır. &nbsp;</td></tr><tr><td>1/4 inç Boru</td><td>çoklu kaynak</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>3/32 inç Boru</td><td>çoklu kaynak</td><td>yok</td><td></td></tr> <tr><td>"Y" konektörler (1/4 ve 3/32 inç)</td> <td>çoklu kaynak</td><td>yok</td><td></td></tr><tr><td>Tansiyon aleti</td><td>CVS</td><td></td><td>Bir eczaneden alınan herhangi bir analog tansiyon aleti bu uygulama için çalışacaktır.&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Zamanlanmış Basınç Regülatörü</td><td>özel</td><td></td><td>Bu, hava basıncının sayısallaştırılması, deneme uzunluğunun kontrolü, denemeler arası aralık otomasyonu, deneme numarasının kontrolü ve uyaran başlangıçlı dijital sinyal dahil olmak üzere otomatik basınç dağıtımına izin veren özel yapım bir makinedir (St. Louis Makine atölyesindeki Washington Üniversitesi). Bununla birlikte, sistemin temel bileşenleri (belirli bir deneme süresi için basınç açma ve kapama) basit bir açma/kapama hat içi anahtarla kontrol edilebilir. &nbsp; Bir denemenin bu tür bir analog kontrolü, ek analiz parametreleri gerektirecektir (bakınız Protokol 4).&nbsp; Ek olarak, veri analizi sırasında analog tansiyon aletine dayalı olarak basıncın manuel olarak atanması gerekecektir.&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr>EMG sinyalinin analizi için <td>IGOR Pro</td><td>Wavemetrics</td><td>n/a</td><td>. Bu deneylerde veri analizi için birçok farklı türde yazılım kullanılabilir.</td></tr></tbody></table>

farelerde mesane ağrı için bir model olarak mesane distansiyonunun uyarılmış visceromotor cevapları

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde yaklaşık 3-8000000 kişi interstisyel sistit / ağrılı mesane sendromu muzdarip (IC / BPS), özellikle mesane dolumu ya da üzerine artan aciliyet ve frekans idrar yanı sıra, noktüri ve genel pelvik ağrı ile karakterize bir zayıflatıcı bir durumdur işeme. Yıllardır yapılan araştırmalara rağmen, IC / BPS nedeni belirsiz kalır ve tedavi stratejileri hastalara tam bir rahatlama sağlamak mümkün değildir. Duruma sinir sistemi katkılarını araştırmak amacıyla, bir çok hayvan model IC / BPS ile ilişkili ağrı ve diğer belirtileri taklit etmek için geliştirilmiştir. Böyle bir fare modeli mesane gerilme (UBD) &#39;dir. Bu modelde, belirli bir basınç sıkıştırılmış hava zaman bir süre boyunca hafifçe anestezi hayvanın mesane teslim edilir. Prosedür boyunca, üstün oblik karın kaslarında teller kas elektriksel aktiviteyi kaydetmek. Bu aktivite visceromotor yanıt (VMR) olarak ve i bilinirnosisepsiyon sa, güvenilir ve tekrarlanabilir bir ölçüsüdür. Burada, cerrahi müdahaleler, fizyolojik kayıt ve veri analizi gibi farelerde bu tekniği gerçekleştirmek için gerekli adımları açıklar. Bu modelin kullanımı ile, birincil duyu nöronları, omurilik ikinci afferent ve mesane ağrı dahil merkezi sinir sisteminin daha yüksek alanlar arasındaki koordinasyon sökülmüş edilebilir. Bu temel fen bilgisi sonra klinik IC / BPS muzdarip hastaları tedavi etmek için tercüme edilebilir.

Genel UBD-VMR kurulumunun bir örnek, Şekil 1A &#39;da görülebilir. Artan basınç adım ham VMR (yani EMG) (Şekil 1B). Sayısallaştırıcı yazılımı kullanılarak kayıt esnasında dikkat edilmesi gereken, ham VMR, basınç ve uyarıcı işaret sinyali Şekil 2&#39;de görülebilir bir artışa neden olur. Görülen en büyük kanal Şekil 2, (V olarak) EMG izidir. EMG iz arka sinyal istikrarlı ve düşük genlikli (&lt;0.2 V) olmalıdır. Arka plan, yüksek veya sporadik bü...

Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde yaklaşık 3-8000000 insan interstisyel sistit / mesane ağrı sendromu (IC / BPS), pelvik ağrı ile kısmen özelliği, bir zayıflatıcı durum muzdarip. Duruma sinir sistemi katkılarını araştırmak amacıyla, idrar kesesi ağrı fizyolojik modeli fareler ve sıçanlar kullanılır.

Farelerde Mesane Ağrı için bir model olarak Mesane Distansiyonunun Uyarılmış Visceromotor Cevapları

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Bu prosedürün genel amacı, tüm işlem boyunca farelerde zararlı mesane ağrısının fizyolojik bir modelini oluşturmaktır. Vücut sıcaklığı, bir ısıtma pedi ve baş üstü radyant ısıtıcı ile korunur. Cerrahi işlemin ilk adımı, anestezi altındaki farenin üretrasına bir kateter yerleştirmektir.İkinci adım, sol karın kasını açığa çıkarmak için bir insizyon yapmaktır. Üçüncü adım, 21 gauge bir iğne kullanarak kastan bir parça almaktır. Ardından, iğnenin içine bükülmüş gümüş bir tel elektrot yerleştirilir.Ardından iğne, teli kas içerisinde bırakacak şekilde kastan geri çekilir. Bu işlem ikinci bir gümüş tel elektrot için tekrarlanır. Dördüncü adım, farenin göğsüne bir topraklama teli yerleştirmektir.Cerrahi işlem tamamlandıktan sonraki beşinci adım, mesaneyi genişletmek ve EMG yanıtlarını kaydetmektir. Bu işlem, öncelikle üç gümüş tel elektrodun, visseral motor yanıtı veya VMR'yi kaydetmek amacıyla bir amplifikatöre ve dijitalleştiriciye bağlanmasıyla gerçekleştirilir. Ardından, mesane kateteri, mesaneyi 15 mmHg'lik farklı basınçlarla genişletecek spesifik uyaranları iletmek için bir zaman basınç regülatörüne ve hava tankına bağlanır.Herhangi bir VMR kaydedilmemiştir. Ancak 30, 45 ve 60 mmHg b

urinary-bladder-distention-evoked-visceromotor-responses-as-model-for

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Sistometriler küçük hayvanların mesane fonksiyonu ölçmek için etkili bir...

Küçük Kemirgenler sistometri ve Kullanımı: Mesane Chemosensation Çalışması

Mesane büyütme cerrahi aşamaları fare ve sıçan modellerinde 3-D iskeleler kullanılarak anlatılmıştır. Mesane büyütme kullanım için biyomalzemenin konfigürasyonlarda etkinliği test etmek için, her iki uyanık ve anestetize sistometri teknikleri yer almaktadır.

Çeşitli Kemirgen Modeller sistometrik Analizleri kullanarak Mesane Büyütme için Biyomalzeme Değerlendirilmesi

Prostat enfeksiyonu kronik prostatit pelvik ağrı arabuluculuk katkıda bulunan bir faktör olabilir. Biz standardize edilmiş bakteriyel inokulum, zamanla farelerde dokunsal allodini ölçmek için erkek farelerde ve metodoloji üretra içine bakteri instilasyon hazırlama prosedürü açıklanmaktadır.

Bakteriyel Prostatit bir fare modelinde Dokunsal allodini Ölçümü

Kronik prostatit / kronik pelvik ağrı sendromu bir klinik öncesi modelini teşvik etmek amacıyla yenidoğan anne ayrılık, - Biz bir erken yaşam stresi paradigmasını uygulanan erkek C57BL / 6 farelerin prostat perigenital mekanik duyarlılık ve mast hücre aktivasyonunu ölçüyorlar.

Yenidoğan Anneden Ayrılma Fare Modelinde perigenital Duyarlılık ve Prostat Mast Hücre aktivasyonu Değerlendirilmesi

Bu çalışma serbestçe hareket eden bir fare içinde uyanık sistometri gerçekleştirmek için cerrahi prosedürleri ve deneysel teknikleri tanımlamaktadır. Buna ek olarak, optimizasyonunu ve standardizasyonunu destekleyen deneysel kanıtlar sağlar.

Bir Fare Modelinde Seyrek Sistometri Uygulamasının Değerlendirilmesi

Transüretral korumak zor bir işlemdir ve de literatürde açıklanmayan. Bu yazının amacı transüretral mesane ve/veya yetişkin erkek farelerde prostat içine aktif maddeler ile sıvı İntravezikal teslim etmek için bir kateter yerleştirilmesi için bir tekniği tarif etmektir.

Yetişkin erkek fare yordamda transüretral korumak

Detrusor içermeyen mesane modeli, idrarın depolanması ve boşaltılmasını sırasında suburothelium/lamina propria'da biyolojik olarak aktif mediatör bulunabilirliğinin düzenlenmesi için yerel mekanizmaları incelemek için suburothelium'a doğrudan erişim sağlar. Hazırlık, bozulmamış bir mesanenin doldurulmasını çok benzer şekilde andırır ve basınç hacmi çalışmalarının sistemik etkiler olmadan yapılmasını sağlar.

Mesane Dolgusu Sırasında Suburothelium Doğrudan Erişim için Kaldırılan Detrusor Kas ile Ademi Merkeziyet (Ex Vivo) Murine Mesane Modeli

Farelerde sırt ağrısı modelinin basit, hızlı indüksiyonu için yöntemler burada idrar plazminojen aktivatörünün intraligament enjeksiyonu kullanılarak sağlanmaktadır.

Ürokinaz tipi Plazminojen Aktivatörü ile İndüklenen Fare Sırt Ağrısı Modeli

Bu protokol, anestezi uygulanan bir kemirgende mesanenin lümenindeki ATP konsantrasyonlarını ölçme prosedürünü açıklar.

İn Vivo Kemirgenlerde Distansiyon Uyarılmış Ürotelyal ATP Salınımının Luminal Ölçümü

Bu makalede, geleneksel boşluk noktası testine video izlemeyi dahil ederek fare işeme davranışını incelemek için yeni bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yaklaşım, günün aydınlık ve karanlık evrelerinde işeme olayları ve fare davranışının ayrıntıları hakkında zamansal, uzamsal ve hacimsel bilgiler sağlar.

Gerçek Zamanlı Boşluk Noktası Testi

Bu protokol, kürk ve cilt tarafından idrar emilimini önlemek için cildin siyanoakrilat ile su geçirmez hale getirilmesi için bir kılavuz sağlar. Yapıştırıcının cilde uygulanması, bir mesane kateterinin implante edilmesi ve uyanık farelerde sistometri ve dış üretral sfinkter elektromiyografi kayıtları için elektrotlar için talimatlar içerir.

Gelişmiş Doğruluk için Fare Ürodinamik Tekniklerini Optimize Etme 

Öğrenin farelerde mesane distansiyonu ile viscero-motor yanıtları ölçerek mesane ağrısı için fizyolojik bir model nasıl kurulur. Bu yöntem, interstisyel sistit ve mesane ağrısı sendromunun sinir sistemi mekanizmalarını araştırmaya yardımcı olur.

Farelerde Mesane Ağrı için bir model olarak Mesane Distansiyonunun Uyarılmış Visceromotor Cevapları

Daha fazla video keşfet