Name: Olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi Drosophila melanogaster (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-04-10T16:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 6 s
Description: Öğrenin Drosophila melanogaster'da spontan lokomotor aktiviteyi kızılötesi ışın monitörleri ve veri analizi yazılımı kullanarak nicelendirmeyi. Bu yöntem davranış ve genetik araştırmalarında güvenilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri (BR AG023088) bir hibe ile desteklenmiştir.

Not: Canton-S suşu Bloomington Stok Merkezinden elde standart vahşi-tip arka hattıdır. 1.. Yiyecek Hazırlama ve Gıda 1.000 ml tarifi Not: Bu bölüm, gıda hazırlanması için bir protokol açıklamaktadır. Büyük metal kaplar aynı anda gıda yaklaşık 18 L hazırlamak için kullanılır. Burada açıklanan protokol küçültüldü ve 1,000 ml H 2 O. kullanır Gıda iki kez otoklav edildi. <ol><li> 643 ml su içinde 113 g sükroz ve 28 g bira mayası karıştırın. 15 dakika boyunca karıştırmak için bir karıştırma çubuğuna sahip olan 25 ° C&#39;de bir sıcak plaka dizi maddeler bırakın. </li><li> 20 dakika için otoklav gıda çözüm. </li><li> 268 ml su içinde 49 g mısır unu ve 8.1 g agar karıştırılır ve aşama 1.2 &#39;de tarif edilen otoklava gıda karışıma ekleyin. Büyük bir kaşıkla veya bir çırpma teli ile iyice karıştırın. </li><li> 20 dakika için otoklav gıda karışımı ile gerçekleştirilmektedir. </li><li> Bir tabakta yiyecek koyun ve bir karıştırma çubuğu ile sabit karıştırma ile soğumaya bırakın. Benf ilave çözümleri 60 ° C&#39;de kurmak sıcak bir plaka üzerinde gıda tutmak ve gıda gerekli sıcaklığa ulaştığında çözümü eklemek, böyle mifepristonu (RU486) olarak, gıda ilave edilmelidir. </li><li> 10.7 ml% 100 EtOH içerisinde 2.4 g tegosept çözülür ve tamamen çözülür ve yaklaşık 15 dakika boyunca karıştırmak için bir karıştırıcı ile soğuk plaka üzerinde tutun. </li><li> Gıda sıcaklığı 60 ° C olduğunda, gıda tegosept solüsyonu ekleyin ve iyice karıştırın. </li><li> Geniş bir şişe içine gıda yaklaşık 10 ml dökmek için bir pompa ya da bir gıda maddesi dağıtıcısında kullanın. Bir seferde 100 geniş, plastik şişeler (1 tepsi) içine aynı anda yemek dökmek bir yiyecek otomatı kullanarak. </li><li> Kimwipes ve peynir bezle şişeleri örtün ve soğumasını 12-24 saat oda sıcaklığında yiyecek bırakın. 4 ° C&#39;de tutun gıda ve 3-4 hafta içinde kullanın. Sinek iş için kullanımdan önce oda sıcaklığına kadar yiyecek kadar ısıtın. </li></ol> Cam Şişeler 2. Hazırlanması <ol><li> Adım 1 &#39;de belirtilen protokole göre yemek hazırlama. </li&gt; <li> Nüfus monitörler için doğru boyutu her bir dar, cam şişenin içine gıda kısım 5 ml. Gıda Bu miktar nüfus monitörün en halka altında olduğu kadar düşük olmalıdır. </li><li> Gıda, oda sıcaklığına kadar soğuduktan sonra sünger fişleri ile şişeleri kapak ve 2 haftaya kadar 4 ° C&#39;de saklayın. Bir şişede gıda miktarı oldukça düşük olduğu için, herhangi bir kurumasını önlemek için bir ya da iki hafta içinde gıda kullanmak en iyisidir. </li><li> Kullanmadan önce oda sıcaklığına şişeleri ısıtın. </li></ol> Ebeveyn Sineklerin 3. Bakım <ol><li> Standart laboratuvar gıda ile geniş plastik şişelere sinekler büyümek ve 12 saat ışık / karanlık döngüsünde 25 ° C&#39;de, nemlendirilmiş, sıcaklık kontrollü bir çevre odasında şişeleri tutun. Gündüz süresi bu laboratuvarda 06:00 başlar. </li><li> Sabah açık yetişkin ebeveyn sinekler tahsil edilecektir hangi flakon uçar. </li><li> Yeni eclosed Flie toplayıns ve eclosion dişi sinekler bakireler olduğundan emin olmak için sonra 8 saat içinde bir CO 2 pad üzerinde cinsiyete göre ayırın. Sinekler eclosion sonra 8 saat çiftleşmeye başlar. </li><li> Bakire erkek ve dişi sinekler yaş 5 ile 10 gün arasında olduğu zaman, standart gıda ve üstte aktif maya taneler ile bir şişe içinde 10 erkek ve 10 dişi sinekler koydu. Not: sinekler aynı sayıda kullanan ve iki gün boyunca bir şişe içerisinde tutarak larvaların yoğunluğunu kontrol edin. Aktif maya ilavesi yumurta üretimini teşvik. </li><li> Eş ve 2 gün boyunca, 12 saat aydınlık / karanlık döngüsü ile 25 ° C&#39;de sıcaklık kontrollü bir çevre odasında yumurta bırakmaya sinekler tutun. Ebeveyn sinekler 5-10 şişeleri kurmak. </li><li> Her gün yeni bir plastik şişeye sinekler geçmek ve 25 ° C&#39;de bir inkübatör içinde yumurta şişeler tutmak </li></ol> Deneysel Sineklerin 4. Koleksiyonu <ol><li> 9 gün sonra sinekler flakonlarından eclose başlayacak nerede Ebeveyl sinekler (adım 3.6 açıklanmıştır.) yumurta koydu. Açık ve ilk gün boyunca eclosed sinekler atmak ve inkübatör şişeleri dönün. 1. günde eclosed sinekler çoğu kadın vardır. Sinekler bir daha senkronize nüfus günde 2 eclose olacaktır. </li><li> CO 2 balataları 24 saat yerde yeni eclosed sinekler içinde ve bir fırça veya metal kaşık ile 25 erkek ve flakon başına 25 dişi sinekler toplamak. CO 2 herhangi bir etkisini en aza indirmek için kısa bir süre için CO 2 yastıkları üzerinde sinekler tutun. Şişenin üzerine eclosion gününü yazın. Deney ve kontrol grupları için en az 5 suret şişeleri birleştirin. </li><li> , 12 saat aydınlık / karanlık döngüsü ile 25 ° C&#39;de sıcaklığı kontrol edilen çevre odalarına şişeleri tutun. </li><li> Bir huni kullanarak her gün yeni bir plastik şişeye sinekler geçmek. </li><li> Deney için istenen yaşına kadar sinekler yaş. </li></ol> 5.. Hareketlilik Monitörler Kurma <ol><li> Yerleştirinnüfus sıcaklık kontrollü bir inkübatör izler. </li><li> PSIU bir açılış için 5 ayrı monitöre bağlayabilirsiniz 5-yönlü bölücülerin (multi-line) aracılığıyla Güç Kaynağı Interface Birimi (PSIU) için 4-telli telefon kablosu ile her monitör bağlayın. Şekiller 1A ve 2B bakınız. </li><li> Bir hat elektrik prizine (100-240 V) PSIU bağlayın. 2 çiftleşme PSIU krikolar birine güç kaynağı çıkış konektörü takın. Düzgün bir şekilde bağlı olduğunda bitişik yeşil ışık yeşil yanar. </li><li> Universal Serial Bus (USB) donanım için PSIU bağlayın. Veri kayıt için bir Macintosh ya da bir Windows PC ile USB donanım arasındaki USB kablosunu bağlayın. Bu koleksiyon bir anda gün çalışır beri sadece veri toplama için adanmış bir bilgisayar olması iyi olurdu. </li><li> USB yazılımı (PSIUdrivers.zip) indirin. USB sürücü yazılımı Güç Kaynağı arayüzü tarafından kullanılan ve sadece bir kez indirilebilir gerekiyor. Bu sentezlerbilgisayar programı ve PSIU / etkinlik monitörler arasındaki veri bağlantısı. PC kullanımı bir COM portu ve Macintosh için basit bir seri bağlantı noktası kullanın. </li><li> Üreticiler Notlar 308.pdf tarafından verilen talimatları izleyerek Macintosh OSX (Intel) için veya Windows PC (XP/Vista/7) programları için bilgisayar programı indirin. </li><li> Bilgisayar programı başlatın ve Tercihler, Işıklar veya Monitörler tıklayarak programı kurmak. Kullanıcı programını durdurmak için &quot;çıkın&quot; seçer kadar programı çalışacaktır. Bilgisayar programı ya da bilgisayar kapatıldığında ise monitörler kiriş kesintileri saymaya devam edecektir, ancak program yeniden başlattı kadar sayıları kayıt olmayacaktır. Bu durumda ilk okuma PSIU bilgisayara veri gönderilen son kez bu yana tüm sayımları içerecektir. </li><li> Tercihler sekmesini seçin ve Seri Port, PC için Macintosh ve COM için PSIU seçin. </li><li> Okuma saniye aralıkları aralığı, dakika veya bir saat seçin. </li> &lt;li&gt; monitörleri seçin: Her monitör üreticisi tarafından verilen eşsiz bir numarası vardır. Üretici tarafından monitörlere verilen numaralara karşılık Monitör Aralığı seçin. </li><li> Işıklar kutusu: yazılım monitör numaraya yanındaki yeşil ışık tarafından işaretlenmiş olduğu, tüm monitörler düzgün bağlandığından emin olun. Bir kırmızı ışık bağlantısı kesilirse olduğunu gösterir, ve bir kara kutu sistemi kapalı veya yanlış kurulmuş olduğunu gösterir. </li></ol> 6.. Deneme Oluşturma <ol><li> 4 ° C gıda içeren cam şişeler çıkarın ve oda sıcaklığına kadar ısınmaya bırakıldı. </li><li> CO 2 pad üzerinde aynı yaştaki ayrı erkek ve dişi sinekler. Yaşlanma çalışmaları için o kadar erken yaşta 3 gün gibi hareketlilik çalışmalarına başlamak mümkündür. </li><li> Gıda içeren her bir cam şişenin içine 10 erkek veya 10 dişi sinekler koydu. Sinek oluşturduğu her bir deney ve kontrol hattı ve her bir cinsiyet için en az üç şişe kullanın. </li><li> Vi tutunsinekler sinekler sağlamak için CO 2 kurtarmak kadar kendi tarafında als gıda sıkışmış alamadım. Yaklaşık 08:00 de ve CO 2 kurtarmak için oda sıcaklığında yaklaşık 2 saat boyunca onları terk ayrı sinekler. </li><li> Kuluçka muhafaza nüfus monitörler içindeki şişeleri yerleştirin. </li><li> Sinekler onları yeni ortama uyum sağlamak için kuvöz içine koymak sonra ilk 24 saat içerisinde toplanan verileri atın. </li><li> Gıda kurumasını önlemek için yeni şişelere 3 ya da 4 gün sonra sinekler geçirin. Sinekleri ölüme eğilimli ya da yaş 40 gün veya daha yaşlı iseniz, 2 gün boyunca toplanan 2 gün ve kullanımı verilerinin sonra sinekler geçer. Ayrıca, yeterli çoğaltır sağlamak için grup başına en fazla üç şişe kullanın. Ölü sinekler ile şişelere Veri gözardı ve analize dahil edilmelidir. </li></ol> 7. Faaliyet Ölçerler ve Toplam Spontan Aktivitesi Hesaplanması <ol><li> Tercihlerini seçmek - veri toplama aralığı &lt;.br /&gt; Not: bilgisayar programı sayesinde 1 saniye ile 60 dakika arasında değişen aralıklarla verilerin toplanması. 10 ve 30 dakikalık zaman noktalarında süreleri ezici sayıda kalmadan hareket hakkında yeterli bilgi temin ettiği bulunmuştur. Seçilen süre, program bilgisayara her monitör için mevcut toplam sayısını göndermek ve sıfırdan tekrar saymaya başlayacak. Bilgisayar programı bilgisayar veri sistemi tarafından oluşturulan yeni bir klasöre depolar. Her monitör toplanan veriler ayrı ayrı saklanır ve bireysel metin belgeleri, her flakon için oluşturulur. Verileri sürekli olarak uzun program çalışır olarak toplanır. </li><li> Deneyin sonunda, Windows PC (XP/Vista/7) program için Macintosh OS X için FileScan110X (Intel) veya SystemMB108 kullanarak veri tarama. Not: Tarama programı yinelenen okumaları ortadan kaldırır ve kayıtları tam olduğundan emin kılar. </li><li> Belirli bir zaman ve p içinde toplanan verileri kaydetmekgün yatış süresi. Deneysel bir isim seçin ve analizi için bilgisayar veri klasöründen dosyaları kopyalayın. Not: Bu zamanda, etkinlik aralıkları değiştirilebilir ve farklı olanlar dönüştürülür. Orijinal veriler bilgisayar veri klasöründe saklanır kalacak ve sürece onlar silinmez olarak alınabilir. </li></ol> 8. Veri Analizi <ol><li> Veri analizi için Excel tabloları sütun içine metin dosyaları toplanan verileri kopyalayın. Bu yazılım tarafından toplanan veriler araştırmacı tarafından seçilen bir süre boyunca tek bir monitörde bulunan toplam faaliyeti temsil eden sayılar içeren sütunlar, vardır. Not: Her bir monitör için toplanan veriler ayrı metin dosyaları bulunmaktadır. Her monitör için 32 sütun vardır. İlk altı sütunlar boş ve sadece 0 içerirler; Sonraki üç ortasında alt halka toplanan verileri içeren ve üst halkada. Herhangi bir veri içermeyen bu yana kanallarının kalanı silinebilir. Her halka bir çıktılarzaman başına tek bir değer. Şekil 2&#39;de ham verilerin ekran görüntüsünü bakın. </li><li> Kızıl ötesi ışınları üç farklı yüksekliklerde toplanan aktivitesinin toplamını temsil eder, her monitör için istenen bir zaman süresi içinde, toplam aktivitesi hesaplayın. Not: süre birkaç saat, 24 saat ya da birkaç gün arasında değişir. </li><li> Ortalama lokomotor aktivite ve 3 biyolojik çoğaltır temsil 3. monitörler arasındaki standart sapmayı belirleyin. Not: Veri bir dizi test kullanılarak istatistiksel anlamlılık için analiz edilebilir. İki kuyruklu Öğrenci t-testi, varyans bir tek-yönlü analizi (ANOVA) ve Tukey HSD post-hoc testi spontan lokomotor aktivite 16 24 saat çeşitli çevresel veya genetik manipülasyon etkilerini belirlemek için kullanılan olabilir. Kullanılabilir ve daha önce 17 yayınlanmış diğer programlar vardır. </li></ol>

<ol><li>Ali, Y. O., Escala, W. E., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assaying+Locomotor%2C+Learning%2C+and+Memory+Deficits+in+Drosophila+Models+of+Neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration.</a> J. Vis. Exp. 49, 2504(2011).</li>
<li>Jones, M. A., Grotewiel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+as+a+model+for+age-related+impairment+in+locomotor+and+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Drosophila as a model for age-related impairment in locomotor and behaviors.</a> Exp. Gerontol. 46 (5), 320-325 (2011).</li>
<li>Grotewiel, M. S., Martin, I., Bhandari, p, Cook-Wiends, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+senescence+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Functional senescence in Drosophila melanogaster.</a> Aging Res. Rev. 4 (3), 372-397 (2005).</li>
<li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+Iterative+Negative+Geotaxis+%28RING%29%3A+a+New+Method+for+Assessing+Age-related+Locomotor+Decline+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Rapid Iterative Negative Geotaxis (RING): a New Method for Assessing Age-related Locomotor Decline in Drosophila.</a> Exp. Gerontol. 40 (5), 386-395 (2005).</li>
<li>Nichols, C. D., Bechnel, J., Pandey, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+assay+Drosophila+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Methods to assay Drosophila behavior.</a> J. Vis. Exp. 61, 3791 (2012).</li>
<li>Long, T. A., Rice, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+locomotor+activity+mediates+Intralocus+sexual+conflict+in+a+laboratory-adapted+population+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Biol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Adult locomotor activity mediates Intralocus sexual conflict in a laboratory-adapted population of Drosophila melanogaster.</a> Proc. Biol. Sci. 274 (1629), 3105-3112 (2007).</li>
<li>Slawson, J. B., Kim, E. Z., Griffith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+video+tracking+of+locomotor+in+adult+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">High-resolution video tracking of locomotor in adult Drosophila melanogaster.</a> J. Vis. Exp. 24 (24), 1096 (2009).</li>
<li>Marden, J. H., Rogina, B., Montooth, K. L., Helfand, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditional+tradeoff+between+aging+and+organismal+performance+of+Indy+long-lived+mutant+flies%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Conditional tradeoff between aging and organismal performance of Indy long-lived mutant flies.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 100 (6), 3369-3372 (2003).</li>
<li>Grover, D., Yang, J., Tavaré, S., Tower, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+tracking+of+fly+movement+and+gene+expression+using+GFP%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Simultaneous tracking of fly movement and gene expression using GFP.</a> BMC Biotechnol. 8, 93(2008).</li>
<li>Grover, D., Yang, J., Tavaré, S., Tower, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+tracking+of+movement+and+gene+expression+in+multiple+Drosophila+melanogaster+flies+using+GFP+and+DsRED+fluorescent+reporter+transgenes%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Res+Notes%22%5BJournal%5D)">Simultaneous tracking of movement and gene expression in multiple Drosophila melanogaster flies using GFP and DsRED fluorescent reporter transgenes.</a> BMC Res Notes. 2 (58), 1-11 (2009).</li>
<li>Ardekani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+tracking+and+behaviour+monitoring+of+multiple+fruit+flies%5BTitle%5D)+AND+%22J.+R.+Soc.+Interface%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional tracking and behaviour monitoring of multiple fruit flies.</a> J. R. Soc. Interface. 10 (78), (2013).</li>
<li>Branson, K. A., Robie, A. A., Bender, J., Perona, P., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+ethomics+in+large+groups+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">High-throughput ethomics in large groups of Drosophila.</a> Nat Methods. 6 (6), 451-457 (2009).</li>
<li>Zou, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recording+Lifetime+Behavior+and+Movement+in+an+Invertebrate+Model%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+One%22%5BJournal%5D)">Recording Lifetime Behavior and Movement in an Invertebrate Model.</a> PLOS One. 6 (4), (2011).</li>
<li>Valente, D., Golani, I., Mitra, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+trajectory+of+Drosophila+melanogaster+in+a+circular+open+field+arena%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Analysis of the trajectory of Drosophila melanogaster in a circular open field arena.</a> PLoS One. 2 (10), 1083(2007).</li>
<li>Inan, O. T., Marcu, O., Sanchez, M. E., Bhattacharya, S., Kovacs, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+portable+system+for+monitoring+the+behavioral+activity+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A portable system for monitoring the behavioral activity of Drosophila.</a> J Neurosci. Methods. 202 (1), 45-52 (2011).</li>
<li>Parashar, V., Rogina, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((dSir2+mediates+the+increased+spontaneous+physical+activity+in+flies+on+calorie+restriction%5BTitle%5D)+AND+%22Aging%22%5BJournal%5D)">dSir2 mediates the increased spontaneous physical activity in flies on calorie restriction.</a> Aging. 1 (6), 529-541 (2009).</li>
<li>Kaneuchi, T., Togawa, T., Matsuo, T., Fuyama, Y., Aigaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+measurement+of+H2O2+resistance+in+Drosophila+using+an+activity+monitor%5BTitle%5D)+AND+%22Biogerontology%22%5BJournal%5D)">Efficient measurement of H2O2 resistance in Drosophila using an activity monitor.</a> Biogerontology. 4 (3), 157-165 (2003).</li>
<li>Carey, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-specific+and+lifetime+behavior+patterns+in+Drosophila+melanogaster+and+the+Mediterranean+fruit+fly%2C+Ceratitis+capitata%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Age-specific and lifetime behavior patterns in Drosophila melanogaster and the Mediterranean fruit fly, Ceratitis capitata.</a> Exp. Gerontol. 41 (1), 93-97 (2006).</li>
<li>Rhodenizer, D., Martin, I., Bhandari, P., Pletcher, S. D., Grotewiel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+and+environmental+factors+impact+age-related+impairment+of+negative+geotaxis+in+Drosophila+by+altering+age-dependent+climbing+speed%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Genetic and environmental factors impact age-related impairment of negative geotaxis in Drosophila by altering age-dependent climbing speed.</a> Exp. Gerontol. 43 (8), 739-749 (2008).</li>
<li>Osterwalder, T., Yoon, K. S., White, B. H., Keshishian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+conditional+tissue-specific+transgene+expression+system+using+inducible+GAL4%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">A conditional tissue-specific transgene expression system using inducible GAL4.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98 (22), 12596-12601 (2001).</li>
<li>Dietzl, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genome-wide+transgenic+RNAi+library+for+conditional+gene+inactivation+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A genome-wide transgenic RNAi library for conditional gene inactivation in Drosophila.</a> Nature. 448 (7150), 151-156 (2007).</li>
<li>Chiu, J. C., Low, K. H., Pike, D. H., Yildirim, E., Edery, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assaying+locomotor+activity+to+study+circadian+rhythms+and+sleep+parameters+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Assaying locomotor activity to study circadian rhythms and sleep parameters in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. 43, 2157(2010).</li>
<li>Pfeiffenberger, C., Lear, B. C., Keegan, K. P., Allada, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Locomotor+activity+level+monitoring+using+the+Drosophila+Activity+Monitoring+%28DAM%29+System%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Protoc%22%5BJournal%5D)">Locomotor activity level monitoring using the Drosophila Activity Monitoring (DAM) System.</a> Cold Spring Harbor Protoc. 11, (2010).</li>
<li>Pfeiffenberger, C., Lear, B. C., Keegan, K. P., Allada, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPfeiffenberger%2C+C+%22Processing+circadian+data+collected+from+the+Drosophila+Activity+Monitoring+%28DAM%29+System.+Protoc%22">Processing circadian data collected from the Drosophila Activity Monitoring (DAM) System. Protoc</a>. 11, Cold Spring Harbor. (2010).</li>
<li>Ardekani, R., Tavaré, S., Tower, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+senescence+in+Drosophila+using+video+tracking%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Assessing senescence in Drosophila using video tracking.</a> Methods Mol. Biol. 965, 501-516 (2013).</li>
</ol>

Biz ifşa hiçbir şey yok.

Sineklerin spontan lokomotor aktivite, yaş, genetik arka plan, cinsiyet ve 2,13,18,19 gibi pek çok faktör tarafından etkilenir. Buna ek olarak, gıda, ortamın sıcaklığı, farklı ilaçların eklenmesi ve gece / gündüz, ışık çevriminin kalori içeriği gibi çevresel faktörler sinek aktivitesini etkileyebilir. Örneğin, aynı yaştaki kadınlarda erkek sinekler (Şekil 1) ile karşılaştırıldığında daha yüksek bir kendiliğinden fiziksel aktiviteye sahiptir. Bu nedenle, aynı yaş ve cinsiyet sinekler birbirine...

Meyve sinekleri, Drosophila melanogaster, bu tür öğrenme ve bellek, sosyal etkileşim, saldırganlık, uyuşturucu, uyku, duyusal fonksiyon, kur, ve 1,2 çiftleşme gibi karmaşık davranışlar, altında yatan mekanizmaları incelemek için değerli bir model organizma olarak kullanılmaktadır. Birden protokoller aracılığıyla çalışılmıştır tek davranış spontan lokomotor faaliyettir. Negatif geotaxis Drosophila aktivitesini ölçmek için geliştirilen ilk yöntemlerden biri, ve bu protokol sinekler kap 1,3 dibine çalkalanmıştır sonra şişe belli bir yüksekliğe ulaşmak sinekler yüzdesini ölçmek içerir. Bu yöntem, basit ucuz olma avantajları vardır, ve o herhangi bir laboratuvarda yapılabilir herhangi bir özel ekipman gerektirmez beri. Bu sinek hareketlilik 3 farklı genetik manipülasyonlar etkilerini incelemek için değerli bir tarama aracı olarak kullanılmıştır. Ancak, zaman ve emek yoğun bir olduğunund nedeniyle şişelere ve insan kayıtların değişken sarsılmaya önyargı imkanına sahiptir. Negatif geotaxis yöntem altına sineklerin sallayarak izleyen sinek şişeleri fotoğraflarını alır Rapid Iterative Negatif Geotaxis (HALKA) yönteminin 4,5, gelişimi ile üzerine geliştirildi. Bu protokolün avantajı duyarlılık ve aynı zamanda uçucu şişelerin, çok sayıda test olasılığıdır. Ancak, bu protokol hala insan hatası için potansiyele sahip ve sadece negatif Geotaxis ölçer. Diğer laboratuarlar lokomotor aktivitesini 6 belirlemek için kültür şişeleri basit gözlem kullandık. En son sinek lokomotor etkinliği ölçmek için birçok video kayıt sistemleri geliştirilmiştir. Bir video izleme protokol 7 kaydetmeden önce ayarlama için zaman sağlar. Slawson ve arkadaşları tarafından tarif edildiği gibi bir yöntem. Da movemen durdurmak için bir hava sinyali kullanırpotansiyel olarak hayvanlara 7&#39;ye stres olabilir kaydın başlamasından kadar t. Bu yöntem, ortalama hız, maksimum hız, hareket zamanı harcama, vb başka bir üç boyutlu izleme sistemi ücretsiz bir uçuş kalkış 8 ~ 0,2 saniye süresince bireysel sineklerin maksimal hızını ölçen hakkında bilgi sağlar. Üç boyutlu bir video izleme protokol GFP ve uçucu hareket 9 belirlemek için flüoresans saptanması için izin filtreler ile donatılmış birden fazla kamera ifade sinekler kullanır. Bu protokolde sinekler bağlı Drosophila kültür şekline potansiyel olarak silindirik bir uçuş desenler, sergileme eğilimindedirler 10 şişeler. Bu yöntem iki sinek 11 spontan hareketinin ölçülmesi sağlayan bir kubbe ile geliştirildi. Otomatik olarak izlemek ve Drosophila bireysel ve toplumsal davranışlarını ölçmek için bir kamera kullanır yüksek verimli yöntem de 12 tarif olmuştur. Zou etark. içme, yeme, uçan, hareketli, ömür boyu davranışını ve dinlenme gibi hareketleri kaydetmek için iki bilgisayar destekli kameralar kullanır, ya da bireysel tephritid meyve ölümleri 13 uçar bir davranış monitör sistemi (BMS) geliştirdi. Birkaç diğer video sistemleri sinek davranış etkinliğini 14,15 izlemek için geliştirilmiştir. Burada nüfus monitörleri kullanan Drosophila aktivitesinin saptanmasına yönelik bir metodu tarif etmektedir. Bu monitörler 12 saatlik bir gündüz-gece ışık döngüsü 25 ° C sıcaklık ve nem kontrollü kuluçka yerleştirilmiştir. Her nüfus monitör üç farklı kademeye yüzük yerleştirilen kızılötesi ışınlar vardır. Bir sinek halkaları üzerinde hareket eder, her zaman bağımsız kayıtları bir mikroişlemci tarafından kaydedilen ve şişenin içindeki sineklerin aktivitesini sayar kızılötesi ışınını keser. Bir işlemci, kullanıcı tanımlı interva de bilgisayara şişe içinde toplam aktivitesi yüklermı bu 1 saniye ile 60 dakika değişebilir. Burada anlatılan yöntemi, sinekler yeni ortama uyum için yeterli zaman sağlar ve sinekler 120 kadar nüfus spontan lokomotor aktivitenin aynı anda ölçülmesini sağlar. Buna ek olarak, biz, gıda hazırlanmasını tarif bakım sinek, hareketlilik nüfus sıcaklık kontrollü kuluçka monitör ve sonuçlarını etkileyebilecek potansiyel faktörler kurma. Bu yöntem, farklı çevresel veya genetik değişiklikler sineklerin spontan lokomotor aktivitesini nasıl etkilediğini incelemek için kullanılabilir.

<table><tbody><tr><td>Sükroz FCC Gıda Sınıfı 100 LB,</td> <td>Fisher Scientific MP Biyomedikal ICN90471380</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Brewer' s Maya</td><td>Fisher Scientific MP Biyomedikaller</td><td>ICN90331280</td><td></td></tr><tr><td>Drosophila Agar Fine</td><td>SciMart</td><td>DR-820-25F</td><td></td></tr><tr><td>Mısır</td><td>unu Fisher Scientific MP Biyomedikaller</td><td>ICN90141125</td><td></td></tr><tr><td>Metil4-hidroksibenzoat, tegosept</td><td>Sigma</td><td>H5501-5KG</td><td></td></tr><tr><td>EtOH</td><td>Pharmco-AAPER</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>Aktif Kuru Maya</td><td>Fisher Scientific ICN10140001</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fly CO2 pedi</td><td>LabScientific</td><td>BGSU-7</td><td></td></tr><tr><td>Stereo Mikroskop</td><td>Olympus</td><td>SZ40</td><td></td></tr><tr><td>Drosophila karbondioksit (CO2) tankı</td><td>Airgas</td><td>UN1013</td><td></td></tr><tr><td>Sinekleri</td><td></td><td></td><td></td> itmek için küçük boya fırçası</tr><tr><td>Kabuk flakon geniş</td><td>Fischer Scientific</td><td>AS519</td><td></td></tr><tr><td>Geniş plastik şişeler için Buzzplugs</td><td>Fischer Scientific</td><td>AS275</td><td></td></tr><tr><td>Cam şişeler (25 x 95 mm)</td><td>Fischer Scientific Kimble 60931-8</td><td>AS-574</td><td></td></tr><tr><td>Cam şişeler için sünger tapalar</td><td>SciMart</td><td>DR-750</td><td></td></tr><tr><td>Drosophila Gıda Dispenseri</td><td>Uygulamalı Bilimsel (Fischer Bilimsel)</td><td>AS780Q</td><td></td></tr><tr><td>DPM Drosophila Nüfus Monitörü</td><td>Trikinetik A.Ş.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hat kablosu ile DC Güç Kaynağı</td><td>Trikinetik A.Ş.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PSIU9 Güç Kaynağı Arabirim Birimi</td><td>Trikinetics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Telefon kabloları ve 5 ayırıcılar</td><td>Trikinetik A.Ş.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Evrensel Seri Veri Yolu (USB) donanımı</td><td>Trikinetics, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>UCB bağlantı noktasına</td><td></td><td></td><td></td>sahip Macintosh veya Windows PC</tr><tr><td>Macintoch OSX (Intel) için DAMSystem308X Veri Toplama Yazılımı</td> <td>www.trikinetics.com</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Windows PC için DAMSystem308 Veri Toplama Yazılımı (XP/Vista/7)</td><td>www.trikinetics.com<</td><td></td><td></td></tr><tr>td colspan="4">[header]</td></tr><tr><td>Macintosh için DAMFileScan108X yazılımı</td><td></td><td></td><td></td>www.trikinetics.com</tr><tr><td>Windows PC için DAMFileScan108X yazılımı (XP/Vista/7)</td><td>www.trikinetics.com</td><td></td><td></td></tr><tr><td>USB yazılımı (PSIUdrivers.zip)</td><td>www.trikinetics.com</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DAMSystem Notes 308</td><td><a href="http://www.trikinetics.com/Downloads/DAMSystem%20Notes%20308.pdf">(http://www.trikinetics.com/Downloads/DAMSystem%20Notes%20308.pdf</a></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi<em&gt; drosophila melanogaster</em

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster davranışını etkileyen çevresel ve genetik manipülasyonlar incelemek için mükemmel bir model organizma olarak kullanılmaktadır. Böyle bir davranış, spontan lokomotor faaliyettir. Burada Drosophila nüfus monitör ve bir anda birkaç gün sineklerin spontan lokomotor aktivitesinin sürekli izlenmesini sağlayan bir izleme sistemi kullanır bizim protokol açıklar. Bu yöntem, basit, güvenilir ve objektif ve yaşlanma, cinsiyet, gıda kalori içeriği değişim, ilaç eklenmesi, ya da insan hastalıkları taklit genetik manipülasyonlar etkilerini incelemek için kullanılabilir.

<html> Drosophila spontan lokomotor aktivite sinek cinsiyet (Şekil 3A), gıda (Şekil 3B) kalori içeriği ve aydınlık / karanlık döngüsü bağlıdır. Işık kapatıldıktan sonra sinek aktivite önemli ölçüde azalır. Şekil 3A erkek ve dişi sinek lokomotor aktivite kayıtları 24 saat göstermektedir. X-ekseni üzerindeki yıldız ışığı kapatıldığı zaman işaretleri ve karanlık döngüsüne geçiş. Şekil 3B mısır gıda üzerine 3 gün yaş uçar Erkek için üç nüfus monitör...

Drosophila melanogaster gibi spontan lokomotor aktivite gibi davranışları etkileyen genetik veya çevresel manipülasyonlar okuyan yararlıdır. Burada kızılötesi ışınları ve spontan lokomotor aktivitesini ölçmek için veri analiz yazılımı ile monitör kullanan bir protokol açıklar.

Olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Bu prosedürün genel amacı, meyve sineklerinin spontan lokomotor aktivitesini nicelendirmektir. Bu işlem, öncelikle deney sineklerinin toplanması ve yaşlandırılmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım ise, sıcaklık kontrollü bir inkübatörde popülasyon monitörlerinin kurulması ve uygun yazılımın indirilmesidir.Ardından, sinekler cam viallere aktarılır ve ardından aktivite monitörlerinin çalıştırıldığı popülasyon monitörlerinin içine yerleştirilir. Son adım verilerin analiz edilmesidir. Sonuç olarak, popülasyon monitörleri sineklerin spontan fiziksel aktivitelerindeki farkları göstermek için kullanılır.Bu tekniğin negatif geo ekseni gibi mevcut yöntemlere karşı temel avantajı, birden fazla sinek popülasyonunun spontane fiziksel aktivitelerinin basit, güvenilir ve objektif bir şekilde sürekli olarak kaydedilmesine olanak tanımasıdır. Bu yöntem, farklı manipülasyonların sinekleri nasıl etkilediğini belirlememize yardımcı olabilir. Prosedürü gösteren spontane fiziksel aktivite, bir laboratuvardan laboratuvar asistanı Suzanne Kowski tarafından gerçekleştirilecektir. Başlamak için, beraberindeki metin protokolünde listelenen adımlara göre yemi hazırlayın ve bir ısıtıcı tabla üzerinde sürekli

determination-spontaneous-locomotor-activity-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Yetişkin Drosophila melanogaster Locomotion Yüksek Çözünürlüklü Video Takip

Biz günlük lokomotor aktivite ritimleri kayıt için prosedürler...

Sirkadiyen Rhythms Eğitim ve Parametreler Uyku Lokomotor Aktivitesi Assaying Drosophila</em

Bu video, sinek hareketini ölçmek için basit bir yöntemi açıklar ve gerçekleştirilen tırmanma testini gösterir. Sinek tırmanma testi, negatif bir jeotaksi tepkisine dayanan genel bir motor fonksiyon testidir.

Sinek Tırmanma Deneyi: Drosophila melanogaster'de Genel Hareketi Test Etmek İçin Bir Yöntem

Bu videoda, genel hareket kabiliyetlerini değerlendirmek için serbestçe yürüyen sineklerin nasıl izleneceği açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, video izleme yazılımı kullanarak tahlilin kurulumunu ve veri analizini gösterir.

Serbestçe Yürüyen Sineklerin İzini Sürmek: Drosophila'da Hareketi Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

Bu videoda, lokomotor aktiviteyi izlemek için kullanılan Drosophila aktivite monitörü (DAM) sistemi açıklanmaktadır. Araştırmacılar, meyve sineklerinde sirkadiyen ritimleri incelemek için DAM'dan toplanan aktivite verilerini kullanıyorlar. Öne çıkan protokol klibi, cihaza sineklerin nasıl yükleneceğini ve sirkadiyen deneyler için etkinlik verilerinin nasıl kaydedileceğini gösterir.

Drosophila Aktivite monitörü (DAM): Sineklerde lokomotor aktiviteyi ölçmek için bir yöntem

Özgür ve ucuz yazılım programları bir web kamerası ve bir arada kullanarak, Drosophila melanogaster lokomotif desenler hız, mesafe, ve çeşitli motor etkinlikler zamanında farklılıkları tespit etmek için analiz edilebilir.

Nöbet gibi Aktivite Analizi ve Hareket için A Düşük maliyetli Yöntemi<em&gt; Drosophila</em

Parkinson hastalığı hareket yeteneği etkilere neden, merkezi sinir sistemindeki dopaminerjik nöronların dejenerasyonu ile sonuçlanan bir nörodejeneratif hastalıktır. Rotenon modelleri Drosophila Parkinson hastalığı bulunmaktadır. Bu kağıt rotenone neden spontan ve irkilme-kaynaklı hem lokomosyon eksiklikleri niteleyen iki deneyleri özetliyor.

Yöntem Spontan Karakterizasyonu Ürkütme kaynaklı hareket yeteneği bir Rotenon ile uyarılan Parkinson Hastalığı Modeli için<em&gt; Drosophila</em

Bu rapor, TriKinetics Drosophila Activity Monitor kullanılarak Drosophila larva aktivitesini ölçmek için bir yöntemi açıklar. Cihaz, 16 adede kadar bireysel hayvanın hareketlerini algılamak için kızılötesi ışınlar kullanır. Veriler, oranlar ve hayvanların tahlil odaları içindeki konumları dahil olmak üzere hareket parametrelerini temsil etmek için analiz edilebilir.

Larvaların Faaliyet Ölçümü<em&gt; Drosophila</em&gt; Activity Monitor

Mevcut protokol, Drosophila'nın lokomotor aktivitesini, hız, mesafe vb. parametreleri hesaplamak için yüksek tanımlı video kaydına dayalı olarak her karenin piksellerini segmentlere ayırmak için eklentilerle uyumlu açık kaynaklı yazılım Fiji'yi kullanarak el yapımı bir arenada sineklerin hareketini izleyerek ve analiz ederek değerlendirir.

Drosophila'da Lokomotor Aktiviteyi Test Etmek İçin Basit Bir Teknik

Protokol, geleneksel memeli modellerine bir alternatif olarak lokomotor disfonksiyonun nicelleştirilmesi yoluyla meyve sineğindeki nörotoksisiteyi değerlendirmek için yüksek verimli, uygun maliyetli bir yöntem sunar. Farmasötik bileşiklerin, çevresel ajanların veya genetik modifikasyonların nörotoksik etkilerini hassas, tekrarlanabilir ve etik açıdan uygun bir model kullanarak değerlendirmeyi amaçlar.

Drosophila melanogaster'de Lokomotor Disfonksiyonun Nörotoksisite için Bir Okuma Olarak Davranışsal Analizi

Bu protokol, Drosophila melanogaster'de stres kaynaklı davranış değişikliklerini değerlendirmek için bir çerçeve sağlar. Tamamlayıcı testlerin birleştirilmesi, bireysel sinekler için aktivite, keşif ve karar verme süreçlerinin nicelendirilmesini sağlar. Yaklaşım esnektir ve stres biyolojisi, metabolizması ve nörodavranışsal fonksiyonları inceleyen geniş bir çalışma yelpazesine uyarlanabilir.

Drosophila melanogaster'de Stres Kaynaklı Depresyona Benzer Durumların Çok Modlu Davranışsal Fenotiplenmesi

Öğrenin Drosophila melanogaster'da spontan lokomotor aktiviteyi kızılötesi ışın monitörleri ve veri analizi yazılımı kullanarak nicelendirmeyi. Bu yöntem davranış ve genetik araştırmalarında güvenilir sonuçlar sağlar.

Olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi

Daha fazla video keşfet