RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/51496-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Onların yırtıcı balıkçıl balık poliklorlanmış bifenil (PCB) Petkim'de net trofik transfer verimi laboratuar tahmini için bir tekniği sunulmuştur. Alanına laboratuvar sonuçlarının uygulanabilirliğini en üst düzeye çıkarmak için, balıkçıl balık tipik alanda yenir av balık beslenen edilmelidir.
Aşağıdaki deneyin genel amacı, PCB türdeşlerinin avından göl alabalığına net trofik transfer verimliliklerini tahmin etmek ve daha sonra PCB Türdeşinin klorlama derecesinin veya lipit çözünürlük derecesinin net trofik transfer verimliliği üzerinde bir etkisi olup olmadığını belirlemektir. Bu, ilk önce göl alabalıklarının en az dört aylık bir süre boyunca blo gibi doğal bir besinle beslendiği bir laboratuvar deneyi yapılarak elde edilir. İkinci adım olarak, PCB'leri göl alabalığı ve blo dokularından çıkarmak ve ekstraktları miktar belirleme prosedürü için hazırlamak için ekstraksiyon ve temizleme kullanılır.
Daha sonra, balık dokularındaki PCB türdeş konsantrasyonlarını belirlemek için negatif kimyasal iyonizasyon kullanan gaz kromatografisi kütle spektrometresi kullanılır. Sonuçlar, PCB türdeşlerinin avından göl alabalığına net trofik transfer verimliliklerinin, PCB türdeşlerinin klorlama derecesinden önemli ölçüde etkilenmediğini göstermektedir. Sonuçlar ayrıca göl alabalığı aktivitesinin net trofik transfer verimliliği üzerinde önemli bir etkiye sahip olmadığını göstermektedir.
Bu tekniğin, kirleticinin doğrudan SIV balığına veya SIV balığının yemine enjekte edilmesi gibi mevcut yöntemlere göre ana avantajı, SS balığının kirletici maddeyi, doğal ortamında vahşi balıklarda kirletici madde biriktirme sürecini en iyi şekilde taklit edecek şekilde biriktirmesidir. Konsantrasyon ve ekstraksiyon adımlarının doğru bir şekilde gerçekleştirilmesi için büyük özen gerektirdiğinden, bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritik öneme sahiptir. Bu adımlar en iyi görsel gözlem yoluyla öğrenilir.
Bu prosedürü göstermek, laboratuvarımdan bir kimyager olan Jim O'Keefe olacak. İlk olarak, daha önce eksi 30 santigrat derece dondurucuda saklanan uygun miktarda av balığını çözdürün. Çözülmüş av balığını bir şef bıçağı kullanarak yaklaşık bir ila beş gram ağırlığında parçalar halinde kesin.
Bunu takiben, tankların her birine yerleştirilecek av balığı miktarını tartın ve parçaları her tanka bırakın. Yırtıcı balığın yaklaşık bir saat beslenmesine izin verdikten sonra, yediği yiyeceği çıkarın ve yaklaşık 20 dakika kurumaya bırakın. Une yiyecek tartıldıktan sonra, her bir tanka yerleştirilen yiyecek miktarını ve tankların her biri için yenen yiyecek miktarını kaydedin.
Yırtıcı balığı feda ettikten ve dondurduktan sonra, çözdürmek için bir dizi yırtıcı, balık ve/veya av balığı kompoziti seçin ve uygun boyutta homojenizasyon kullanarak kompozitlerin kısmen çözülmesine izin verin. Kompozitlerin her biri. Her kompozit için 50 ila 100 gramlık bir homojenat numunesini temizlenmiş, asetonlu, durulanmış ve etiketlenmiş bir kavanoza koyun.
Kavanozu kapattıktan sonra, ekstraksiyon için işlem zamanına kadar eksi 30 santigrat derecede saklayın. 200 mililitrelik bir beherde 20 gram çözülmüş homojenize balık dokusunu, ardından yaklaşık 40 gram sodyum sülfatta tartın ve bir spatula ile iyice karıştırın. Mililitre başına 20 nanogramlık bir nihai konsantrasyon veren bir konsantrasyonda CONGENERS 30, 61, 161 ve 166 içeren bir vekil spike çözeltisi ekleyin.
Özünde. Karıştırırken numunenin oda sıcaklığında kurumasını bekleyin Numune kuru kum kıvamına geldikten sonra her 20 dakikada bir. Teflon kaynatma cipsleri, bir çorap, sl ve bir kondansatör içeren 500 mililitrelik bir şişe ile bir soli ekstraksiyon aparatı kurun.
Daha sonra kurutulmuş balık karışımını kaba bir fritlenmiş disk tabanı olan bir cam yüksüğe ekleyin. Numune için kullanılan behere 150 mililitre önceden karıştırılmış %50 heksan ve %50 kloro metan çözeltisi ekleyin ve beherin duvarlarını kazıyarak karıştırın. Bir spatula ile çözücüyü solitin üst kısmına aktarın ve solit boyunca şişeye girmesine izin verin.
Önceki adımı tekrarladıktan sonra, takılı matara ile yanan çorabı bir ısıtma elemanına yerleştirin ve bir kondansatör takın. Daha sonra, çözücüyü hafifçe kaynatarak ısıtma elemanını açın. Daha sonra çözücüyü en az 16 saat boyunca çıkarın ve kondansatörlere soğuk su verildiğinden emin olun.
Çözücü soğuduktan sonra, numune şişelerinden herhangi birinin su içerip içermediğini kontrol edin. Su içeren şişeler için sodyum sülfat ekleyin ve su emilene kadar döndürün. Bunu takiben, numuneyi bir nitrojen numune yoğunlaştırıcı kullanarak konsantre edin.
Numune iki mililitreden daha az bir hacme sahip olduktan sonra, numuneyi beş mililitrelik hacimsel bir şişeye aktarın. Ardından, kalan numuneyi önceki cam eşyadan hacimsel şişeye aktarmak için beş ila yedi küçük heksan yıkaması kullanarak son hacmi beş mililitreye getirin. Bu noktada, numuneyi 10 mililitrelik bir şişeye aktarın ve numune bilgileriyle etiketleyin.
100 gram aktif silika jele 44 gram konsantre sülfürik asit ekleyerek asitleştirilmiş silika jel hazırlayın. Daha sonra, altta küçük bir cam yünü tapası içeren küçük bir kromatografi kolonuna 10 gram asitleştirilmiş silika jel ekleyin. Sütunu 10 mililitre hekzan ile önceden temizledikten sonra, üzerine bir mililitre numune özü ekleyin, sütunu 20 mililitre heksan ile elüte edin ve numuneyi konik 20 mililitrelik bir cam tüpte toplayın.
Ardından, cam tüpü bir nitrojen akışı altında bir nitrojen buharlaştırıcısına veya NVAP aparatına yerleştirin ve sıcak suya batırın. Numune bir mililitreden daha az konsantre edildikten sonra, onu bir mililitrelik hacimsel şişeye aktarın. Ardından, kalan numuneyi tüpten hacimsel şişeye aktarmak için iki ila üç küçük heksan yıkaması kullanarak nihai hacmi bir mililitreye getirin.
Bunu takiben, numuneyi, numune bilgileriyle etiketlenmiş 1.8 mililitrelik bir otomatik numune alma şişesine aktarın. Şişeye deka kloro rezene olan uygun iç standarttan dört mikrolitre ekleyin. Cihazı kalibre etmek için uygun standartları kullanırsınız.
Daha sonra kromatografi kütle spektrometresi sistemini, dakikada bir mililitre taşıyıcı gaz olarak hidrojen ve reaktif gazı olarak metan ile negatif kimyasal iyonizasyon modunda kurun. 0.25'te DB XLB ile kaplanmış erimiş bir silika kılcal kolon kullanın. Ayırma için mikrometre film kalınlığı.
Bölünmüş enjeksiyon modunu kullanarak numuneden bir ila iki mikrolitre enjekte edin. Bu noktada, tüm standartları ve numuneleri, DECA kloro b rezene etiketli karbon 13 kullanarak dahili standart yöntemle analiz edin. İkinci bir kaynak standardı ve ok Klor 1242 ve 1260'ı çalıştırarak ilk kalibrasyonda bir kontrol gerçekleştirin ve ardından ok klor türdeşleri için tahmin edilen değerleri bu kontrol prosedüründen gözlemlenen miktarlarla karşılaştırın.
İlk kalibrasyon prosedürü başarıyla tamamlandıktan sonra, tüm numunelerin analizini tamamlayın. İlk kalibrasyondaki kalibrasyon karışımlarından herhangi birini kullanarak her 10 numunede bir kalibrasyon kontrolü yapın. Tre Gölü alabalığı, ilk göl alabalığı olarak önemli bir büyüme gösterdi.
Ortalama ağırlıklar 694 ila 907 gram arasında değişirken, son göl alabalığı ortalama ağırlıkları 853 ila 1.566 gram arasında değişmektedir. Göl alabalığındaki ortalama PCB türdeşleri konsantrasyonları, tüm PCB türdeşleri için deney sırasında artmıştır. Aktif göl alabalığı için ortalama net trofik transfer verimliliği, aktif olmayan göl alabalığından önemli ölçüde farklı değildi.
Aktif göl alabalığı, 75 PCB türdeşinin 66'sı için aktif olmayan göl alabalığı ile neredeyse aynı verimlilikle tükettikleri yiyeceklerden PCB türdeşlerini korudu. Net trofik transfer verimliliğinin ortalama tahmini ile ilgili standart hata, diğer dokuz PCB türdeşinden altısı için küçüktü. Net trofik transfer verimliliğinin ortalama tahmini ile ilgili standart hatalar, klorlama derecesi arttıkça oldukça düşüktü, net trofik transfer verimliliğinin tahminleri hafif bir düşüş gösterdi.
Bununla birlikte, net trofik transfer verimliliği, PCB türdeşlerinin klorlama derecesi ile önemli ölçüde değişmedi, log KOW arttıkça, net trofik transfer verimliliği katlanarak azaldı. Bu düşüş oranı sıfırdan önemli ölçüde farklıydı, ancak log KOW birimi başına %7'ye eşitti. Bu videoyu izledikten sonra, öz balığın doğal bir yemle beslendiği bir laboratuvar deneyi kullanarak, CB türdeşlerinin avlarından ous balıklarına net trofik transfer verimliliklerinin nasıl tahmin edileceğini iyi anlamış olmalısınız.
Hekzan ve di kloro metan gibi organik çözücülerle çalışmanın tehlikeli olabileceğini ve bu prosedürü gerçekleştirirken her zaman uygun havalandırma gibi önlemlerin alınması gerektiğini unutmayın.
Related Videos
16:03
Related Videos
9.6K Views
10:20
Related Videos
16.2K Views
09:49
Related Videos
14.3K Views
09:43
Related Videos
7.7K Views
07:57
Related Videos
17.6K Views
09:35
Related Videos
7.2K Views
03:50
Related Videos
8K Views
14:59
Related Videos
4.9K Views
16:21
Related Videos
11.3K Views
10:17
Related Videos
9.1K Views