Name: Farelerde Nöropatik Ağrı Siyatik Sinir cuffing Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-16T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 9 s
Description: Öğrenin farelerde siyatik sinir etrafına polietilen kılıf yerleştirerek nöropatik ağrı modeli oluşturmayı. Von Frey filament testiyle mekanik allodini değerlendirin ve ağrı tedavilerinin etkinliğini araştırın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma (IY için) Beyin ve Davranış Araştırma Vakfı Centre National de la Recherche Scientifique (sözleşme UPR3212), Strasbourg Üniversitesi ve bir NARSAD Genç Araştırmacı Grant tarafından desteklenmiştir. Yayın masrafları Neurex ağ (Program İnterreg IV Yukarı Ren) tarafından desteklenmektedir.

Protokoller &quot;Comité d&#39;éthique en matière d&#39;deney animale de Strasbourg&quot; (CREMEAS) tarafından onaylanmıştır. Paw Çekilme eşiklerinin 1.. Baseline Ölçme <ol><li> Fareler, test prosedürleri başlatmadan önce 2 hafta, en az 10 gün boyunca hayvan tesislere ortama alışmalarına izin verin. </li><li> Von Frey test set-up ve 4. bölümünde açıklanan von Frey prosedüre fareler alıştırmak. </li><li> Ameliyattan önce, bölüm 4.3 &#39;de tarif edildiği gibi von Frey filamentleri ile mekanik pençe çekme eşikleri değerlendirir. Not: En az üç istikrarlı ardışık değerleri pençe çekme eşikleri elde edilinceye kadar ayrı günlerde işlemi tekrarlayın. </li><li> Bu gruplar, ilk olarak pençe geri çekme eşikleri arasında farklılık yok ki, farklı deney grupları için fareler atama. </li></ol> Manşet İMPLANTASYONU 2. Cerrahi Prosedürüzerinde <ol><li> Hayvan tartılır. Not: fare vücut ağırlığı aşağıda tarif manşon yerleştirme işlemi için 20 g üzerinde olması gerekir. </li><li> Ketamin (17 mg / ml) ve anestezi yaklaşık 45 dakika içerir% 0.9 NaCl, ksilazin (2.5 mg / ml) içeren bir karışım, 4 ml / kg &#39;lık bir intraperitoneal enjeksiyon ile hayvan anestezisi. </li><li> Cımbız ile bir arka pençe sıkarak pençe reflekslerinin olmadığını kontrol ediniz ve hayvan tam anestezi olduğundan emin olmak için göz reflekslerinin olmadığını kontrol ediniz. </li><li> Bir elektrik makinesini kullanarak, kalça diz sağ bacak tıraş. </li><li> Bir pamuk uçlu çubuk ile gözlere koruyucu göz sıvı jeli uygulayın. </li><li> Onun sol tarafında hayvan koyun ve küçük bir yastık üzerinde sağ arka bacağı yerleştirin ve yapışkan bant ile yastık sağ arka bacağını korumak. </li><li> Gazlı bez veya pamuk uçlu çubuk kullanarak klorheksidin ve% 70 etanol ile ameliyat alanında dezenfekte. </li><li> Işaret parmağı femur bulmak ve yapmak bir, yaklaşık 0.5 cm&#39;lik bir kesi, femur femur ve yaklaşık 1.5 mm anterior paraleldir. </li><li> İki Otoklavlanmış sopalarla femur yakın kasları ayrı. Notlar: kas kesmeyin. Normalde, kas tabakaları, herhangi bir kanama olmadan kolayca ayırmak ve siyatik sinir sonra görülebilir. Kanama durumunda, kan emmek için steril pamuk uçlu bezi kullanın. </li><li> Ana dalı ortaya çıkarmak için, siyatik sinirin altında iki otoklava çubukları yerleştirin ve steril fizyolojik solüsyon (% 0.9 NaCl) ile sinir hidrat. </li><li> Bölünmüş PE-20 polietilen boru (manşet) sivri uçlu bir çelik sopa yardımıyla ve bulldog kelepçe ile, 0.38 mm ID / 1.09 mm OD, ve önceden hazırlanmış steril 2 mm bölümünü tutun. <ol><li> Hafifçe açılacaktır, manşet içine sivri çelik çubuk yerleştirin. </li><li> Manşon yanal açıklığa kullanarak, manşet bir ucunda Bulldog yerleştirin ve manşet paraleldir. O tarafından manşet yapacak, böylece bulldog (180 °) döndürünyan açıklığa terstir tarafı. Bulldog kapatın ve sivri çelik sopa kaldırın. Not: rotasyon tutan-on manşet yerleştirilmesi için optimize edilmiş bir pozisyonda, bulldog kelepçe de kısmen açık manşet korumak için yardımcı oluyor izin vermek için yapılır. Bu model ile Bulldog kelepçenin büyüklüğü prosedürün Bu aşama için kritik öneme sahiptir. </li></ol></li><li> Ikinci bir deneyci sinir altında iki sopa tutun ve yavaşça yaklaşık 4 mm uzunluğunda siyatik sinirin bir bölümüne erişimini kolaylaştırmak için sopa ayrı var. </li><li> Kalça proksimal sinirin parçası etrafında bulldog uzak olan manşet kısmını takarak başlayarak, siyatik sinirin ana dal etrafında 2 mm manşeti takın. </li><li> Tüpün sıkma şeklinde veya değiştirmeden, pense ile iki uzak tarafta basınç uygulayarak yavaşça manşeti kapatın. Doğru kapalı olduğundan emin olmak için manşet çevirin. </li><li> Tıraşlı cilt tabakası zekâ dikinh cerrahi knot. </li><li> Temiz bir evde kafes içinde sol tarafta fare yerleştirin. Fare uyanık kadar ısı lambası altında tutun. </li><li> Ilave su ve ev kafes doğrudan biraz yemek yer. </li></ol> Sham Kontrolleri için 3. Cerrahi Prosedür <ol><li> Adımları 2,15-2,17 ile izleyin, 2.9 adım adım 2.1, yukarıda tarif edildiği gibi aynı ameliyat prosedürü uygulayın. Sahte kontroller için 2.14 sadece endişe manşet ekleme adımlarını 2.10 atlarsanız. </li></ol> 4.. Von Frey testi <ol><li> Düz paslanmaz çelik (1 mx 50 cm, perforasyon sınırları arasında 2.5 mm ile 5 mm daire delikler) arasında yüksek bir delikli plaka, açık delikli bireysel kutuları (7 cm x 9 cm x 7 cm) &#39;de farelerin yerleştirin. Not: En fazla 12 farenin eşzamanlı Bu set-up test edilebilir. Operated hayvanlar ameliyattan bir gün sonra test edilebilir. Ancak, kurtarma 3 gün gözlenen cerrahi sonrası aşırı duyarlılık azaltmak için tavsiye edilirsahte kontrolleri. </li><li> Hayvanlar testten önce 15 dakika boyunca ortama alışmalarına izin verin. </li><li> Artan kuvvetleri bir dizi, her bir arka pençenin plantar yüzeyine von Frey filamentleri uygulanır. Notlar: von Frey filamanları kalibre çaplarda plastik kıllar bulunmaktadır. Bunlar, 5 cm uzunluğunda ve elle tutulan aplikatörler sabitlenir. Filament uygulamanın hızı, bükme ve uygulama süresi derecesi bu test 3 ile elde edilen eşik değerleri etkileyebilir. Farelerde, bu prosedür ile, en sık kullanılan filamanlar 0.16, 0.4, 0.6, 1, 1.4, 2, 4, 6, 8, ve 10 gr arasındadır. <ol><li> Filaman sadece eğilir kadar sol pençenin plantar yüzeyine seçilen filament uygulanır. Yordam 3-5 kez arka arkaya tekrarlayın ve sonra sağ ayağının için aynı şeyi. Filaman her iki ayak üzerinde test edilmiştir, bir sonraki hayvan test edin. Notlar: daha duyarlı olabilir pençe yanal sınırları kaçının. Beklenen yanıt bir pençeçekilme, ani kaçınma veya yalama. En az üç beklenen tepkiler beş çalışmaların dışında dikkat edilmesi halinde olumlu yanıtı düşünün. Belirli bir pençe her zaman üç kez test edilmiş, ancak dördüncü ve beşinci denemeler yapılır sadece 1 veya 2 yanıt (lar) ilk üç testler sırasında gözlemlenen () idi edilir. C57BL/6J fareler olarak, 1.4 g filament ile, operasyon öncesi testleri başlar. Ameliyattan sonra, 0.4 g filament ile testler başlar. Olumlu bir yanıt ilk test filament ile gözlenir, adım 4.3.2 (yerine, daha yüksek) daha düşük güç bir filaman test edin. </li><li> 4.3.1 prosedüre göre sonraki hayvanlara aynı filament uygulanır. Tüm hayvanlar test edildikten sonra, daha fazla kuvvet sonraki filament ile ilk hayvan yeniden başlar. Tüm fareler olumlu bir yanıt vermek kadar işlemi tekrarlayın. Notlar: Test Her hayvan iki ardışık filamentler olumlu bir yanıt vermek kadar. Pençe zekâ gibi olumlu yanıt verdi alt filamanın gram değerini düşününBu hayvan için hdrawal eşik. </li></ol></li></ol>

Yazarlar, hiçbir rakip mali çıkarlarını olmadığını beyan ederim.

&quot;Ağzı&quot; modeli, ilk olarak siyatik sinir çevresine birden çok 6 ağızlarının implantasyonu ile standart ve tekrarlanabilir kronik sıkışma yaralanması elde etmek için farelerde geliştirilmiştir. Daha sonra bazı araştırma grupları yine birden manşet ekleme 19-22 kullanmak bile, tek bir manşet 7,8 implant için güncellenmiştir. Daha sonra transgenik hayvanlar kullanma imkanı açılmış farelere 9,23, uyarlanmıştır. Manşet, genellikle 2 mm uzunluğunda, ancak diğer uzunlukları aynı zamanda sıçanlarda 22 kullanılmıştır. Polietilen boru türlere bağlıdır: farelerde 9 PE-20, ve farelerde PE-60, 24,25 ya da PE-90 7,8,26,27. Mekanik alodinia von Frey saçları ile ölçülür. Bu testte, pençe çekme eşikleri için mutlak değerler, hayvanın ya da 3, 28, bükme filamanın süresi üzerine üzerinde durduğu yüzeye bağlı olabilir, ancak bu faktörlerin yoknöropatik alodinia algılama etkiler. &quot;Manşet&quot; model nöropatik ağrı mekanizmalarının çalışması için ilgi. Bu miyelinli ve miyelinsiz lifler 6,29, ve duyusal nöronlar, birincil afferentlerinden ve spinal nöronların 19,21,22,30-35 fonksiyonel değişiklikler morfolojik değişiklikleri incelemek için kullanılmıştır. Bu glial aktivasyon ve nöronal anyon degrade merkezi bir kayma aktivite ve spinal nosiseptif nöronların yanıtları ve nöropatik alodinya 24,36-38 değişikliklere katılmak gösteri izin verdi. Opioid reseptörlerinin 16,42-45 ve nikotinik reseptörlerin 46 glutamat reseptörlerinin 7,39-41 gibi bir etkisi de, bu modelde incelenmiştir. Modelin bir diğer ilgi nöropatik ağrı, yani., Gabapentinoids ve antidepresanlar mevcut tedavilere olan yanıttır. Benzer klinik gözlemler: gabapentinoids a hem de gösterilecekn, yüksek dozda akut kısa süreli analjezik işlemi ve uygun bir dozda inhibitörleri akut ağrı kesici etkisi muamele, trisiklik antidepresanlar, seçici serotonin ve noradrenalin geri alım birkaç gün sonra gözlemlenmiştir ama giderici gecikmeli sürekli göstermek bir gecikmeli sürekli hareket giderici 1-2 hafta tedavi ve seçici serotonin geri alım inhibitörü olan fluoksetin gerektirir hareket 16 etkisizdir. Model hastalar 48-51 sınamak için yeni tedavi hedefleri ortaya çıkarabilir, bu bakımlarla 16-18,44,45,47 altında yatan moleküler mekanizmayı incelemek uygun olur. Son olarak, model aynı zamanda, nöropatik ağrının anxiodepressive sonuçlarından çalışma sağlar. Klinik olarak, bu sonuçların nöropatik ağrı hastalarının yaklaşık üçte etkileyebilir ancak klinik öncesi daha az ağrı duyusal açıdan daha incelenmiştir. Bu modelde, anksiyete ve depresyon gibi bir zamana bağlı gelişimisive gibi fenotipleri mevcut 52 ve ilgili mekanizma böylece ele alınabilir. Nöropatik ağrı, bu fare modelinde standart manşet ve işlemleri mekanik alodini için düşük bir değişkenlik neden olur. Genetik olarak tadil edilmiş hayvanlar 17,18,44-47,52, uzun süreli allodini kullanımı olasılığı, klinik olarak kullanılan tedavilere yanıt ve anxiodepressive semptomların zamana bağlı gelişimi, çeşitli yönlerini çalışma için bu model daha uygun hale getirmek ve Zaten araştırma bu alanda değerli bilgiler getirdi nöropatik ağrı ve tedavileri sonuçları.

Nöropatik ağrı genellikle kroniktir ve bir yara ya da somatosensory sistemini etkileyen bir hastalığın bir sonucu olarak ortaya çıkar. Merkezi sinir sistemi içinde yaralı duyu nöronlarında ve tüm yol boyunca nosiseptif uyumsuz değişiklikler bu kompleks sendromu katılabilir. Çeşitli modelleri, nöropatik ağrı ve tedavileri 1-3 okuyan kemirgenler geliştirilmiştir. Diyabette gözlenen polinöropati, periferik sinirler, merkezi yaralanmalar, trigeminal nevralji, kemoterapi, post-herpetik nevralji, vb ardışık nöropatilere için yaralanmaları taklit bilinen etiyolojilerin, nöropatik ağrı amaç modellere dayalı Farklı modeller kemirgenlerde periferik sinir yaralanması siyatik sinir odaklanın. Bu modeller, bir sıkıştırma ve / veya bu sinirin bir bölüm bağlıdır. Nitekim, siyatik sinir göreli kolay ameliyat tanıyor ve pençe çekme refleksleri dayalı testler için izin verir. Mokronik sinir sıkışmasının dels örneğin şunlardır: kronik sıkışma yaralanması (CCI) 4,5, 6-9 okşuyorlardı siyatik siniri, kısmi siyatik sinir ligasyonu (PSL) 10, spinal sinir ligasyon (SNL) 11, ya da ortak peroneal sinir ligasyonu 12. &quot;Kurtulmuş sinir hasarı&quot; (SNI) olarak adlandırılan modeller de yaygın olarak kullanılmaktadır. Üçüncü şube 13-15 bozulmadan Onlar, sıkı ligasyonu ve siyatik sinirin üç terminal dalların üzerinden iki axotomy oluşmaktadır. Siyatik siniri hedef nöropatik ağrı çeşitli modelleri, yaralı arka pençe üzerinde kronik mekanik alodinya (normal olmayan nosiseptif uyaran bir nosiseptif yanıt) sonuçlanabilir. Burada, farelerde nöropatik ağrı &quot;ağzı model&quot; için ayrıntılı bir cerrahi prosedür tarif edilmektedir. Bu siyatik sinir 6-9 ana dalı etrafına bir polietilen manşetin implantasyon oluşur. Thvon Frey filaman e kullanımı da tarif edilmektedir. Bu filamanlar, bu modelde mevcut olan bir uzun süreli bir nosiseptif belirtisidir mekanik alodinia değerlendirmesi izin verir.

<table><tbody><tr><td>PE-20 polietilen boru</td><td>Harvard Aparatı</td><td>PY2-59-8323</td><td>Ameliyattan önce bölünmüş</td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Centravet</td><td>IMA004</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine HCl</td><td>Sigma</td><td>X1251</td><td>Ameliyattan önce taze hazırlanmış</td></tr><tr><td>Opry-jel</td><td>Centravet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pense</td><td>FST</td><td>11003-12</td><td>52,5 mm düz</td></tr><tr><td>Bulldog kelepçesi</td><td>FST</td><td>p130 18038-45</td><td></td></tr><tr><td>Delikli plaka</td><td>CTTM</td><td></td><td></td></tr><tr><td>von Frey filamentleri</td><td>Bioseb</td><td>NC-12775</td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde nöropatik ağrı siyatik sinir cuffing modeli

The Sciatic Nerve Cuffing Model of Neuropathic Pain in Mice

Nöropatik ağrı, bir yara ya da somatosensory sistemini etkileyen bir hastalığın bir sonucu olarak ortaya çıkar. Yaralı duyu nöronlarının ve merkezi sinir sistemi içinde, tüm yol boyunca nosiseptif uyumsuz değişiklikler bu sendrom ile sonuçlanır. Genellikle kronik ve tedavi etmek zordur. Nöropatik ağrı ve tedavileri incelemek için, farklı model kemirgenlerde geliştirilmiştir. Bu modeller dolayısıyla periferik sinir yaralanmaları, merkezi yaralanmaları, ve metabolik-enfeksiyöz veya kemoterapi-ilişkili nöropatiler üreten, bilinen etiyolojilerden türetmek. Periferik sinir yaralanması kemirgen modelleri genellikle kolay erişim ve arka pençe nosiseptif testleri verir siyatik siniri hedef. Bu modeller, bir sıkıştırma ve / veya bir bölümüne dayanır. Burada, farelerde nöropatik ağrı &quot;ağzı model&quot; için ayrıntılı bir cerrahi prosedür tarif edilmektedir. Bu modelde, standart uzunlukta (2 mm) bir PE-20 polietilen bir boru ağzı tek taraflı isiyatik sinirin ana dal etrafında mplanted. Bu, uzun süreli mekanik allodini indükler, yani., Von Frey filamentleri kullanılarak değerlendirilebilir bir normal olarak nosiseptif uyarıcı bir nosiseptif tepki. Ayrıntılı cerrahi ve test prosedürleri yanı sıra, nöropatik ağrının duyusal ve anxiodepressive yönleri çalışma için nöropatik ağrı mekanizmasının, çalışma ve nöropatik ağrı tedavisi için, bu çalışma modelin ilgi de tartışılmıştır.

± SEM olarak veriler ifade edilir. İstatistiksel analizler varyans çok faktörlü analizi (ANOVA) veya deney tasarımına uygun olarak çiftlenmemiş t-testi kullanılarak yapıldı. Bu analizler için, Sham ve Manşet cerrahi grupları yanı sıra ilaç tedavileri vs tuzlu arası grup faktörler olarak kabul edildi. Uygun olduğunda, tekrar ölçmek analizler zaman süreci verileri için kullanılmıştır. Post-hoc karşılaştırmalar Duncan testi kullanılarak yapıldı. İstatistiksel anlamlılık p &lt;0.05 olarak kabul edildi. , Yukarıda tarif edilen prosedürler kullanılarak zaman, bir ipsilateral alodinya olarak manşon implantasyon sonuçları Şekil 1 &#39;de gösterildiği gibi. Fare test prosedürüne alışmış sonra, von Frey testi pençe çekme eşikleri için değerler, zaman içinde stabil olan ve Sham hayvanlarda gösterildiği gibi, tek başına cerrahi prosedürün etkilenmez. Ancak olmalıdırbir geçiş ameliyat sonrası alodinia genellikle Sham farelerde gözlenebilir kaydetti. Örneğin allodini mevcut olduğunda, pençe geri çekme tepkisi bir kaç gün sonra, ameliyat sonrası başlangıç ​​değerine geri döner. Manşet farelerde, ipsilateral alodini ilk gün sonrası cerrahi zaten mevcut ve fazla 2 ay süreyle muhafaza edilir (bkz. 9 ve Şekil 1; F8, 344 = 29.5, p &lt;0.001). Yukarıda tarif edildiği gibi bu von Frey testi ile ölçüldüğünde, manşet kaynaklı alodinia C57BL/6J fareler ipsilateral kalır, ancak diğer durumlarda karşı taraftaki pençe allodini bir varlığı da 8 gözlenebilir. Taban için mutlak değerler, C57BL/6J fareler, 4 ve 6 g arasında, genellikle, ancak test protokolü bu değerleri etkileyebilir. Trisiklik antidepresanlar, nöropatik ağrı için klinik birinci basamak tedaviler arasındadır. Bu modelde, trisiklik antidepresan ilaç nortriptilin (5 mg / kg, karın içinden, günde iki kez) rŞekil 2&#39;de gösterildiği gibi, tedavi yaklaşık 2 hafta sonra nöropatik allodini elieves (F7, 91 = 15.3, p &lt;0.001, post-hoc (CuffNor = Sham)&gt; CuffSal p &lt;0.001 gün 29-34). Bu dozda, antidepresan akut analjezik hareket 16,17 görülmektedir. Bu tür ilaçları kullanan hastalarda mevcut süreli ağrı kesici taklit etmek, fareler sonrasında değil sabah ilaç verilmesinden önce test edilebilir. Böyle bir prosedür tedavi, önceki gün ile astarlanmalıdır uzun süreli etkisinin değerlendirilmesini sağlar. Bu durumda, bu nöropatik alodinia bir uzun süreli rahatlama gözlemlemek için tedavi 1-2 hafta gereklidir. Tedavi kesildiğinde, bir nüks genellikle 3-4 gün 18 içinde görülmektedir. Bazı antidepresanlar yanında, gabapentinoids nöropatik ağrı için diğer ilk tercih tedaviler vardır. Gabapentin Bu modelde 16 bir akut ve geçici bir analjezik etkiye sahip, ama aynı zamanda bir gecikmeli ve lon görüntüler<html> g-süreli (Şekil 3, p &lt;0.001), ilacın verilmesinden önce her gün hayvan test ederken antialodinik eylemi. Bu eylem antidepresan ilaçlar ile daha hızlıdır. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51608/51608fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51608/51608fig1.jpg" /> Istikrarlı bir temel (baz grafik üzerinde alanına 0 temsil edilir) ürün elde edilene kadar, farelerde nöropatik ağrı manşet modelinde Şekil 1. Mekanik pençe çekme eşikleri. Yetişkin erkek C57BL/6J fareler, von Frey prosedüre alıştırılmıştır. Her iki pençeleri test edilmiştir. Alçaltılmış pençe çekme eşikleri (grup başına n = 10) ile gösteriyordu Cuff farenin ipsilateral mekanik allodini görüntüler. tp_upload/51608/51608fig2.jpg &quot;/&gt; Bir trisiklik antidepresan Şekil 2.. Gecikmeli antialodinik etki. Iki hafta ameliyat sonrası sonra, farenin grup başına% 0.9 NaCI ya da 5 mg / kg nortriptilin hidroklorür (n = 5 ya da 6 ya da birlikte günde iki kez (sabah ve akşam) intraperitoneal tedavi .) Von Frey testi sabah tedavi öncesi yapıldı. Bu işlem ile, nortriptilin gecikmiş bir antialodinik etki tedavi yaklaşık 12 günü gerektirir, görülmektedir. <img alt="Şekil 3," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51608/51608fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51608/51608fig3.jpg" /> Bir gabapentinoid Şekil 3. Antiallodinik action. Üç hafta ameliyat sonrası sonra, farenin% 0.9 NaCI ya da 10 mg / kg gabapentin (grup başına n = 5) ya da günde iki kez (sabah ve akşam) intraperitoneal tedavi. Von Frey testi sabah tedavi önce yapıldıment. Bu işlem ile, gabapentinin bir geciktirilmiş ve kalıcı bir antialodinik etki görülmektedir. Veri tedavi başlamadan önce ve tedavi 6. gününde sunulmaktadır.

Nöropatik ağrı somatosensory sistemini etkileyen bir yara ya da hastalık, bir sonucudur. Farelerde nöropatik ağrı &quot;ağzı model&quot; siyatik sinirin ana dal etrafında bir polietilen manşetin implantasyon oluşur. Mekanik alodinia von Frey filamentleri kullanılarak test edilir.

Farelerde Nöropatik Ağrı Siyatik Sinir cuffing Modeli

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in ...

Bu prosedürün genel amacı, periferik sinir sıkışması sonrası nöropatik ağrının fare modelini oluşturmaktır. Hayvan cerrahiye hazırlandıktan sonra, siyatik sinirin ana dalı açığa çıkarılır ve sinirin etrafına polietilen bir manşet yerleştirilir. Ardından yara kapatılır.Pati hassasiyetini test etmek için fareler, delikli bir çelik plaka üzerindeki şeffaf kutulara yerleştirilir. Ardından, hayvan basınca tutarlı bir tepki verene kadar, giderek büyüyen bir dizi Von Fray filamenti patiye uygulanır. Sonuç olarak, Von Fray testinden elde edilen mekanik eşiklerin zaman içindeki seyri grafiğe dökülerek, ameliyat edilen patinin ipsilateral tarafında meydana gelen ve uzun süre devam eden mekanik allodini varlığı gözlemlenebilir.Bu model, nöropatik ağrının altında yatan mekanizmalar gibi ağrı alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Ayrıca, mevcut tedavileri incelemek, yeni terapötik ajanları test etmek veya nöropatik ağrının anksiyete ve depresyon üzerindeki etkilerini araştırmak için de kullanılabilir. Bununla birlikte, manşet implantasyonu görsel destek olmadan açıklanması zor bir adım olduğu için bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritik öneme sahiptir.Mekanik pati çekilme eşiğini değerlendirmek için, öncelikle fareleri alışma amacıyla delikli bir çelik plaka üzerindeki şeffaf bireysel kutulara yerleştirin; test sırasında 12 hayvana kadar paralel olarak test yapılabilir. von Frey filamentleri kullanın. Kalibre edilmiş çaplardaki bu plastik kıllar, el tipi bir aplikatöre takılıdır.Bükülme sırasında, her bir filament çapıyla orantılı bir basınç uygular. Farelerde en sık kullanılan filamentler 16 ile 10 gram arası değerlerdedir. En düşük basınçla başlayın.Fareleri test etmek için eşik değerleri ölçerken, filamentler bükülmeye başlayana kadar filamenti sol arka patiye uygulayın. Patinin daha hassas olabilen yan kenarlarından kaçının. Hayvan, filament uygulamasına tepki verir.Pati irkilirse veya geri çekilirse, uygulamayı iki kez daha tekrarlayın ve hayvan üç uygulamanın tamamına tepki verirse diğer patiyi test edin. Aksi takdirde, diğer patiyi test etmeden önce filamentleri toplam beş kez uygulayın. Her fareyi seçilen von Frey filamenti ile ardışık olarak test edin ve ardından işlemi bir sonraki filament ile tekrarlayın.Bir hayvan aynı filamanta üç kez tepki verirse, bu durum pozitif bir sonuç olarak kabul edilir. Üst üste iki filaman pozitif puan aldığında, o patideki testleme işlemi durdurulur. Pati çekilme eşiği, belirli bir fare için elde edilen iki gram değerinden düşük olanıdır.Bu değerler iki pençe arasında farklılık gösterebilir. En az üç ardışık eşik değeri stabilize olana kadar bu prosedürü her gün tekrarlayın. Ardından cerrahi işleme geçin.Hayvanın ağırlığını kaydedin (20 gramın üzerinde olmalıdır) ve hayvanı ketamin ve ksilazin ile anestezi altına alın. Herhangi bir pati veya göz refleksinin bulunmadığını kontrol edin. Bir pamuklu çubuk yardımıyla gözlere koruyucu jel uygulayın.Ardından sağ bacağın dizinden kalçasına kadar olan kısmını tıraş edin. Sonra hayvanı, sağ arka bacağı küçük bir yastık üzerinde yukarıda kalacak şekilde konumlandırın ve bu bacağı bantla sabitleyin. Açığa çıkan cildi klorheksidin ve %70 etanol ile dezenfekte edin.Femuru bulmak için palpasyonla başlayın. Ardından, femurun yaklaşık 1,5 mm posteriorundan, femura paralel 0,5 santimetrelik bir insizyon yapın. Şimdi otoklav çubuklarını kullanarak, femur yakınındaki kasları ayırın ancak onları kesmeyin.Siyatik sinirin ana dalı görünür hale getirilmelidir. Kanama olması durumunda, sham kontrolleri için kanın bir pamuklu çubukla temizlendiğinden emin olun. Bu işlem, manşet takılacak farelerin cerrahi prosedürünü tamamlar.Sinirin ana dalını açığa çıkarmak için siyatik sinirin altına iki çubuk yerleştirin. Siniri nemlendirmek için bir miktar fizyolojik salin ekleyin. Şimdi, sivri uçlu çelik bir çubuk ve bir bulldog klempi ile yarık manşeti kavrayın.Ardından bulldog klempi yerleştirin ve manşetin lateral açıklığının karşı tarafını tutacak şekilde 180 derece döndürün. Şimdi bulldog klempi kapatın ve sivri çubuğu çıkarın. Sonrasında, bir asistana sinirin altındaki iki çubuğu tutmasını ve bunları nazikçe ayırmasını sağlayın.Sinire erişim sağlamak için, iki milimetrelik manşeti siyatik sinirin ana dalının etrafına yerleştirin. Manşetin bulldog klipsine distal olan kısmını, sinirin kalçeye proksimal olan kısmının etrafına yerleştirerek başlayın. Ardından, manşetin doğru şekilde kapandığından emin olmak için manşeti pense ile nazikçe kapatın.Ters çevirin. Şimdi, çubukları çıkarın ve cildi sütürle kapatın. Cerrahi düğümler kullanarak, fareyi sol yanına yatıracak şekilde temiz ev kafesine transfer edin.Uyanana kadar ısıtıcı lamba ile sıcak tutun. Farenin kendini besleyebilmesi için kafese ek yem ve su ekleyin. Hayvanlar, cerrahi işlemden bir gün sonra düşük geri çekilme eşikleri açısından test edilebilir, ancak bu prosedürle cerrahi sonrası aşırı duyarlılığı azaltmak için üç gün beklemek daha iyidir.Kaf tekniği uygulanan fareler, sham kontrol grubuna kıyasla iki aydan fazla süre boyunca ipsilateral allodini sergilemektedir. Farelerin günde iki kez kilogram başına beş miligram nortriptilin (trisiklik bir antidepresan) ile tedavi edilmesi, yaklaşık iki haftalık tedavinin ardından nöropatik allodiniyi gidermektedir.Tedavi kesilirse, fareler genellikle üç ila dört gün içinde nüksetmektedir. Bu model, nöropatik ağrının bir diğer tedavisi olan Gabapentinoidlere karşı da duyarlıdır. Bu videoyu izledikten sonra, anestezi altındaki farelerde siyatik sinirinin ana dalının nasıl bulunacağı ve etrafına nasıl bir kılıf yerleştirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.Nöropatik ağrının bu modelinde, tek tel testi mekanik eşiklerin değerlendirilmesine ve ilaç yanıtlarının incelenmesine olanak tanır.

the-sciatic-nerve-cuffing-model-of-neuropathic-pain-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Ayrılan Sinir Sakatlık hayvan modeli kalan sural sinir zedelemeden, siyatik sinirin kısmi denervasyon aşağıdaki tibial ve peroneal sinir dallarının lezyon periferik nöropatik ağrı bir fare modeli olarak burada açıklanmıştır. Mekanik allodini kaynaklanan davranış değişikliği von Frey filamentler miktarı.

Fare İndüklenmiş Mekanik allodini ayrılan sinir hasarı (SNI) Model

Cerrahi basitlik ve sağlam davranışsal sonuçları nedeniyle, siyatik sinirin kronik daralma nöropatik ağrı seçkin hayvan modelleri biridir. Ameliyat sonrası 24 saat içinde, ağrı aşırı duyarlılık kurulan ve kantitatif bir von Frey aesthesiometer (mekanik test) ve plantar analjezi metre (termal testi) kullanılarak ölçülebilir.

Siyatik Sinir Sıçanlarda Ağrı aşırı duyarlılık Test Kronik daraltma

Bu videoda, pankreas kanseri hücrelerini siyatik sinire enjekte ederek perinöral invazyon için in vivo bir fare modeli geliştiriyoruz. Bu model, invazyonun derecesini ölçmeye ve kanser hücreleri ile sinirler arasındaki etkileşimleri incelemeye yardımcı olur.

Murin Perineural İnvazyon Modeli: Fare Siyatik Sinirinde Perinöral İnvazyonu Simüle Etmek için İn Vivo Model Oluşturma

Tibial sinir kesisi modeli iskelet kas atrofi bir, iyi tolere doğrulanmış ve tekrarlanabilir bir model. Model cerrahi protokol C57Black6 farelerde açıklanan ve gösterilmiştir.

Tibial Sinir transeksiyonu - Farelerde denervasyon bağlı İskelet Kas Atrofi için bir Standart Model

Modifiye cerrahi, hem ortak peroneal hem de sural sinirleri yaralamak için sadece bir ligasyon ve bir kesi gerektiren fare veya sıçan korunmuş sinir yaralanması modeli için basitleştirilmiş bir yöntemdir.

Farelerde Nöropatik Ağrının Modifiye Edilmiş Korunmuş Sinir Yaralanması Cerrahisi Modeli

Mekanik çatışmadan kaçınma testi, farelerde ağrı duyarlılığının refleksif olmayan bir okuması olarak kullanılır ve çeşitli fare ağrısı modellerinde duygusal-motivasyonel tepkileri daha iyi anlamak için kullanılabilir.

Farelerde Ağrı Davranışını Ölçmek için Mekanik Çatışmadan Kaçınma Testi

Parsiyel siyatik sinir ligasyonu, termal ve mekanik uyaranlara abartılı tepkilerle karakterize uzun süreli kronik nöropatik ağrıya neden olur. Nöropatik ağrının bu fare modeli, ağrı yönetimi için yenilikçi terapileri incelemek için yaygın olarak kullanılır. Bu makalede, standardizasyonu ve tekrarlanabilirliği artırmak için cerrahi prosedür ayrıntılı olarak anlatılmaktadır.

Kısmi Siyatik Sinir Ligasyonu: Yeni Tedavilerin Antinosiseptif Etkisini İncelemek için Kronik Nöropatik Ağrının Bir Fare Modeli

Sıçanlarda siyatik sinir ağrısını indüklemek için kronik bir daralma yaralanması modelinde Fu'nun deri altı iğnelemesini kullanmak için bir protokol sunuyoruz.

Fu'nun Deri Altı İğnelemesinin Siyatik Sinir Ağrısı Üzerindeki Etkinliği: Kronik Konstriksiyon Yaralanmalı Sıçan Modelinde Davranışsal ve Elektrofizyolojik Değişiklikler

Farelerde distal infraorbital sinirin kronik daralma yaralanması, devam eden ağrı ve allodinin belirtileri olan dokunsal stimülasyona (von Frey saç stimülasyonuna aşırı duyarlılık) yanıt olarak spontan davranışta (artmış yüz bakım aktivitesi) ve nosifensif davranışta değişikliklere neden olur ve trigeminal nöropatik ağrı için bir model görevi görür.

Trigeminal Nöropatik Ağrıyı İncelemek İçin Farelerde Distal İnfraorbital Sinirin (DIoN-CCI) Kronik Daralma Hasarı

Bu protokol, insan nöroma ağrısını taklit etmek ve cerrahi tedavileri değerlendirmek için duyu sinirlerini kullanan tekrarlanabilir bir sıçan modeli sunar ve translasyonel nöroma araştırmaları için değerli bir araç sunar.

Safen Sinir Yoluyla Hedeflenen Kas Reinnervasyonunu Kullanarak Nöroma Ağrısı Tedavi Seçeneklerini İncelemek için Yeni Cerrahi Kemirgen Modeli

Öğrenin farelerde siyatik sinir etrafına polietilen kılıf yerleştirerek nöropatik ağrı modeli oluşturmayı. Von Frey filament testiyle mekanik allodini değerlendirin ve ağrı tedavilerinin etkinliğini araştırın.

Farelerde Nöropatik Ağrı Siyatik Sinir cuffing Modeli

Daha fazla video keşfet