Sentez ve Kromatografi için optimal sabit faz kantitatif seçimi dahil edilmesi Iodoaziridines saflaştırılması

Bu prosedürün genel amacı, bir son toal ito iyot hazırlamak ve saflaştırmaktır. Bu, önce düşük sıcaklıkta dito metanın protondan arındırılması ve bir bağışıklık ile reaksiyona sokulmasıyla dito metil lityum üretilerek gerçekleştirilir. İkinci adım, di iyodür ara maddesinin istenen I oto üridin ürününe siklizasyonunu teşvik etmek için reaksiyon karışımını hızlı bir şekilde ısıtmaktır.

Daha sonra, I oto Uridine ürününün kromatografi için kullanılan çeşitli sabit fazlara stabilitesi, saflaştırma için en uygun olanı belirlemek için değerlendirilir. Son adım, bir iyotu saflaştırmak ve proton NMR analizi yapmaktır. Sonuç olarak, kromatografi için bu sabit faz ekranı, dördüncü aktiviteye modifiye edilmiş temel Illumina'nın IDO odinin saflaştırılması için en uygun olduğunu göstermek için kullanılır.

Bu yöntem fikrine ilk olarak, yeni IDO iyot ürünlerinin silika jel kromatografisine karşı kararsız olduğunu ve alternatif bir saflaştırmaya ihtiyaç duyduğumuzu bulduğumuzda sahip olduk. Buradan, diğer potansiyel olarak hassas bileşiklere de uygulanabilen kromatografi için sabit fazların düzenlenmesi için IO odinin stabilitesini değerlendirmek için bir prosedür tasarladık. Bu prosedürü göstermek, Tom ve Dom'un her ikisi de araştırma grubumdaki doktora öğrencileri olacaktır.

İlk önce alev kuru, bir karıştırma çubuğu içeren ve bir argon akışı altında bir septum ile donatılmış 100 mililitrelik yuvarlak tabanlı bir şişe. Şişenin oda sıcaklığını soğutmasına izin verdikten sonra, şırınga yoluyla 5,7 mililitre susuz tetrahedran ve 2,7 mililitre susuz etil eter ve bir mikro şırınga aracılığıyla 315 mikrolitre taze damıtılmış hekza etil dilan ekleyin. Şişeyi, iyice suya daldırılmasını sağlayacak uygun büyüklükte bir çözücüye yerleştirin.

Karıştırma başladıktan sonra, çözeltiyi eksi 78 santigrat dereceye kadar soğutmak için dozlayıcıya kuru buz ve aseton ekleyin. Ardından, reaksiyon kabının maruz kalmasını en aza indirmek için doer'ı alüminyum folyo ile örtün. Bunu takiben aydınlatmak için, iki ila üç dakika boyunca şırınga yoluyla damla damla heksanlara 0,6 mililitre 2,5 molar ve bütil lityum ekleyin.

Karışımın eksi 78 derecede 30 dakika karışmasına izin verdikten sonra. Lityum hekza etil dilan çözeltisini oluşturmak için, şırınga ile alevle kurutulmuş 10 mililitrelik yuvarlak tabanlı bir şişeye bir mililitre susuz terah hidro ferran ekleyin. Daha sonra bir mikro şırınga ile 135 mikrolitre di ITOM metan ekleyin ve çözeltinin iyice karıştığından emin olmak için şişeyi hafifçe döndürün.

Daha sonra, di ITOM metan çözeltisini eksi 78 santigrat derecede lityum hekza etil dilan çözeltisine iki dakika boyunca damla damla ekleyin ve çözeltinin 20 dakika karışmasına izin verin. 135 miligram amin'i başka bir alevle kurutulmuş 10 mililitrelik yuvarlak tabanlı şişeye tartın ve iki mililitre susuz tetra hidro ferran içinde çözün. 20 dakikalık protondan arındırma süresinden sonra, bağışıklık çözeltisini eksi 78 santigrat derecede beş dakikadan fazla bir süre boyunca diito metil lityum çözeltisine damla damla ekleyin.

Damla baskı tamamlandıktan hemen sonra, reaksiyon kabını kuru buz banyosundan kaldırın. Şişeyi alüminyum folyo ile geri kazanın ve sıfır santigrat derecede bir buzlu su banyosuna aktarın. Çözeltiyi sıfır santigrat derecede 15 dakika karıştırın.

Bunu takiben, 30 mililitre doymuş sulu sodyum bikarbonat çözeltisi ekleyerek reaksiyonu söndürün. Karışımı bir ayırma hunisine aktarın ve 30 mililitre di kloro metan ekleyin. Karışımı çalkalayın, huniyi havalandırın ve alt organik tabakayı çıkarın.

Ekstraksiyonu iki kez tekrarladıktan sonra, çözeltide bulunan suyu uzaklaştırmak için birleşik organik katmanlara sodyum sülfat ekleyin. Daha sonra, pamuklu tapalı bir cam huni kullanarak sodyum sülfatı vakum filtrasyonu altında süzün, süzüntüyü 250 mililitrelik yuvarlak tabanlı bir şişede toplayın, çözücüyü döner bir buharlaştırıcı üzerinde düşük basınç altında çıkarın. İstenen ITO üridin ürününün saf olmayan bir örneğini elde etmek için.

Ham dine dahili standart olarak 1 3 5 TRIMETH oksi benzen ekleyin ve ham dine numunesini di kloro metan içinde çözün. Bunun tamamen çözülmesini sağlamak. Bu karışımdan bir alikot alın, ardından çözücüyü düşük basınç altında çıkarın.

Bitirdiğinizde, numuneyi proton NMR spektroskopisi ile analiz edin. NMR analizinin ardından, mast nova gibi standart NMR işleme yazılımını kullanarak kaydedilen proton NMR spektrumunu açın. Spektruma sağ tıklayın ve entegrasyonu seçin.

Ardından, entegrasyon aracını sağlamak için manuel'i seçin. Dahili standardın sinyallerini ve aine CHI sinyalini entegre etmek için sırasıyla 6.08 PP m ve 4.87 PP M'deki tepe noktalarının genişliğini kaplamak için tıklayın ve sürükleyin. 6.08 PP m'deki tepe için integrale sağ tıklayın, integrali düzenle'yi seçin ve normalleştirilmiş değeri 3.0 olarak değiştirin.

Ardından, I OTO iyotun verimini belirlemek için iyot CHI sinyali için güncellenmiş integral değerini kullanın. NMR analizi tamamlandıktan sonra, aşağıdaki sabit fazların 25 gramını 50 mililitre% 5 etil asetat hekzan ile konik şişede karıştırma çubukları içeren altı ayrı 250 mililitrelik erlelerde karıştırın. Kontrol olarak kullanılmak üzere 50 mililitrelik bir çözelti, %5'lik bir etil asetat yığını hazırlayın.

Daha sonra bulamaçları manyetik bir karıştırma plakası üzerinde karıştırın. Konik şişenin ayarlanan oda sıcaklığının her birine I OTO Azarin iç standart çözeltisinden iki mililitre alikot ekleyin. Daha sonra bulamaç karışımlarını 30 dakika karıştırın.

30 dakika sonra, bulamaç karışımlarının her birini ortalanmış bir huni kullanarak vakum altında süzün ve her bir süzüntüyü 250 mililitrelik yuvarlak tabanlı bir şişede toplayın. Ortalanmış hunideki kalıntıyı 30 mililitre di kloro metan ile iki kez yıkayın. Döner bir buharlaştırıcı kullanarak elde edilen numunelerden çözücüyü çıkarın.

Bunu takiben, her durumda geri kazanılan iyota odin miktarını hesaplamak için numuneleri proton NMR spektroskopisi ile analiz edin. Daha önce açıklandığı gibi, verimleri laboratuvar not defterine kaydedin. En yüksek verimi veren numuneyi belirlemek için test edilen her bir sabit fazdan elde edilen I OTO Aine verimlerini daha önce elde edilenlerle karşılaştırın.

Daha sonra, temel Illumina aktivitesi oluşturmak için ham IO iyot karışımını oluşturmak için daha önce açıklanan sentezi tekrarlayın. Dördüncüsü, 100 gram temel Illumina aktivitesi, biri 500 mililitrelik yuvarlak tabanlı bir şişeye ekleyin ve ardından şişeye 10 mililitre su ekleyin. Şişeyi bir cam tıpa ile taktıktan sonra, hiçbir topak görünmeyene kadar kuvvetlice çalkalayın, bu da suyun Illumina boyunca eşit şekilde yayıldığını gösterir.

Illumina oda sıcaklığına soğuduktan sonra, temel Illumina aktivitesi dörtünü kullanarak ham IO iyotu sütun kromatografisi ile saflaştırın. Sabit faz olarak,% 5 YL asetat taksanına hekzan derecelendirmesi ile elüte. Fraksiyonlar içeren ürünü yuvarlak tabanlı bir şişede birleştirin ve saf I oto iyot elde etmek için döner bir buharlaştırıcı kullanarak çözücüyü çıkarın.

Saflaştırmadan önce, proton NMR ile %59'luk bir I oto iyot verimi hesaplandı. Bununla birlikte, bu bir iyotun saflaştırılması zordu ve bazik Illumina üzerinde silika saflaştırmasında önemli ölçüde ayrışmaya uğradı. Dördüncü aktivite, ürüne %48 verim sağladı.

Proton NMR analizi, dahili standart temel Illumina aktivitesine göre durağan fazlar için bir dizi verim verdi, dördü NMR verimine en yakın olan %53'lük en yüksek verimi sağladı. Bu nedenle, son için temel Illumina aktivitesi dört seçildi. Toal iota, IR itfa saflaştırmasıydı.

Yüksek verimle çok çeşitli ITO ainelerine erişilebilir. Hem al alkol hem de aromatik ve toal aminler, histerik olarak zorlu turt ve orto dahil olmak üzere reaksiyonla uyumludur. Örneklere göre, reaksiyonun deprotonasyon ve ardından Nükleofilik baskı ile meydana geldiği önerilmektedir.

Amino gem di iyodür ara ürünü vermek için, müteakip ısınma, cis iyotu destekleyen yüksek DIA'lı bir stereo seçici siklizasyona neden olur. Reaksiyon optimizasyonu sırasında siklizasyon geçiş durumundaki ince sterik etkileşimler nedeniyle, sıcaklık kontrolü ve zamanlama reaksiyon sonucu için gerekliydi. Reaksiyonun ısınmadan söndürülmesi, son toal IO iyot ve amge di iyodür sağladı.

Bununla birlikte, ürünler reaksiyon koşulları altında bozunmaya uğrar, bu da reaksiyonun ısıtılması ve reaksiyon sürelerinin azaltılmasıyla önlenir. Bu videoyu izledikten sonra, IO iridyum ürününün nasıl sentezleneceğini iyi anlamalı ve kromatografi ile saflaştırma için çok çeşitli sabit fazlara karşı stabilitesini değerlendirmelisiniz. Mbu lityum ile çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve somun atmosferi altında çalışmak ve erişimi güvenli bir şekilde söndürmek gibi önlemler alın.

Bu prosedür gerçekleştirilirken her zaman reaktif alınmalıdır.