Name: Fare Manyetik Rezonans Görüntüleme Mikroskopi tarafından Deneysel Otoimmün Miyokardit Kardiyak anormallikler noninvaziv değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 24 s
Description: Öğrenin farelerde otoimmün miyokardit kaynaklı kardiyak anormallikleri manyetik rezonans mikroskopi görüntüleme ile noninvaziv değerlendirmeyi. Bu yöntem hastalık ilerlemesini canlı hayvanlarda izlemeyi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri (HL114669) tarafından desteklenmiştir. CM, Miyokardit Vakfı, NJ tarafından verilen doktora sonrası araştırma bursu hibesinin bir alıcısıdır.

ETİK BEYANI: Bütün hayvan prosedürleri Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı kurallarına uygun olarak yapılmıştır ve Nebraska-Lincoln, Lincoln, NE Üniversitesi tarafından onaylanmıştır. Deneysel Otoimmün Miyokardit 1. İndüksiyon <ol><li> 2 mg/1.5 ml &#39;lik bir nihai konsantrasyona kadar 1x fosfat tamponlu tuzlu su içinde Myhc-α 334-352 eritilerek peptid çözeltisi hazırlayın. </li><li> 50 ng / ul &#39;lik bir stok konsantrasyonu elde etmek üzere liyofilize PT, 50 ug içeren bir şişeye steril 1x PBS içinde 1 ml ekleyerek pertussis toksin (PT) hazırlayın. Steril bir 1.5 ml tüp içine 20 ul stok almak ve 1 ng / ul çalışan bir konsantrasyon elde etmek için steril PBS içinde 1 x 980 ul ekleyin. </li><li> Mycobacterium tuberculosis H37Rv, 40 mg eklenerek, tam Freund adjuvanı (CFA) hazırlayın (MTB) bir nihai konsantrasyon elde etmek için CFA 10 ml ayıklamak5 mg / ml &#39;lik. </li><li> Peptid-CFA emülsiyonu hazırlayın. NOT: EAM indüksiyonu için, peptid-CFA emülsiyon Myhc-α hayvan başına 334-352, 100 ug ihtiva eden 150 ul içinde tatbik edilmiştir. Örneğin, on farenin Myhc-α 334-352 arasında, 1 mg peptid-CFA emülsiyonun 1.5 ml aşı kullanımı için. <ol><li> Emülsiyonun 1.5 ml hazırlamak için, 750 kısım bir 1.5 ml bir tüp içinde 334-352 peptit çözeltisi Myhc-α ul ve CFA bir 1.5 ml tüp içine MTB ile takviye edilmiştir. 3 ml luer-lok şırınga kullanarak, CFA / MTB ekstresi ardından ilk olarak peptid solüsyonu, çizin. </li><li> 3-yollu bir musluğa şırınga takın ve boş bir 3 ml şırınga musluğu diğer çıkışını bağlayın. Böylece peptid-CFA karışımı, oldukça iyi bir direnç ile diğer bir şırınga akar vana açıklığını ayarlar. </li><li> ~ 1 dakika boyunca tekrar tekrar diğer bir şırınga içeriğini itme ve daha sonra ~ 3 dakika boyunca buz üzerinde tüm montaj yeri ile karıştırın. Bu tekrarlayın10x prosedürü az. </li><li> Dikkatli bir şekilde 100 ml&#39;lik bir cam çanak içinde hala su üzerinde küçük bir damlacık yerleştirerek emülsiyonun kıvamını belirler. Damlacık su içinde dağıtmak için beklenmemektedir. Eğer, istenilen kıvam elde edilinceye kadar karıştırma devam eder. </li><li> 1 ml&#39;lik şırınga ile vana bağlanmış iki 3 ml&#39;lik şırınga birini değiştirerek 1 ml şırınga luer-lok içine 3 mi gelen emülsiyon şırınga içeriğini aktarın ve 1 ml şırınga ile bir ½ 27 G iğne takılır. </li></ol></li><li> Altı ila sekiz haftalık dişi A / J fareleri (~ 75 ul her biri) iki kasık bölgesinde bölünmüş dozlarda subkutan olarak peptid-CFA emülsiyonun 150 ul enjekte edilir. </li><li> Gün 0 ve gün 2, immünizasyon sonrası, her hayvana karın içinden PT süspansiyonuna (100 ng), 100 ul uygulayın. </li><li> Deri altına t her iki tarafına bölünmüş dozlarda peptide CFA emülsiyonun 150 ul tatbik edilmesiyle 7. günde aşılama prosedürü tekrarlayıno sternum (~ 75 ul her biri). Taze olarak yukarıdaki bu emülsiyon hazırlamak. Daha sonra, 21. günde, MRM görüntüleme hayvanların maruz 3. adıma bakın. </li></ol> 2.. Hayvan Taşıma <ol><li> Sıcaklığını korumak için altına yerleştirilmiş bir ısıtma yastığı ile% 2 izofluran-hava karışımını ihtiva eden bir indüksiyon bölmesi, her fare yerleştirin ve özel olarak tasarlanmış bir hayvan sahibinin (Şekil 1) için hayvan aktarın. </li><li> Hayvan sahibinin üzerinde yüzükoyun pozisyonda hayvanın hareketsiz böylece onun burun anestezi (Şekil 1) korumak için burun konisi sığar. Fare ön dişlerine bağlı bir lokma-çubuğu ile fare baş elde edin. </li><li> Deney sırasında hayvanın vücut ısısını korumak için tarayıcının dikey deliğine sokulan çıkış hortumu ile hava üfleme ısıtıcı açın. </li><li> Tüm görüntüleme oturumu boyunca 2 ml / dk &#39;lık bir akış oranı ile% 0,5-2 izofluran ile anestezi koruyun. Onaylamakayak tutam yöntemi kullanılarak anestezi, hiçbir hareket bekleniyor. </li><li> Bir pnömatik yastık sensörü, fare kuyruğu / ayak bileği fiber optik nabız oksimetre sensörü, sırasıyla solunum, kalp hızı ve vücut ısısı, (Şekil 1) izlemek için rektal ısı probu kurmak. Not: Kalp yolluk arteriyel kan oksijen doygunluğu noninvaziv izlenmesine olanak sağlar Pulsoksimetre aracılığıyla gerçekleştirilir. Nabız oksimetre sensörü sol ayak bileğine takılı olmalı ve ayak bir iplik döngü ile güvenli ve sensör de ayak bileği korumak için bantlanmış olmalıdır. MRM görüntüleme kontrast maddelerin kullanımı olmadan solunum ve kalp sinyallerini yolluk ile elde edilir. </li></ol> 3.. Image Acquisition <ol><li> Hayvanın (Şekil 1) hazırlandıktan sonra, manyetik alan homojenlik maksimum görüş alanı (FOV) merkezinde konumlandırılmış kalp ile MRM tarayıcı merkezinde fare. NOT: A geniş çaplı(89 mm) üçlü 100 G / cm eksen geçişlerini ve 4 cm radyo frekansı (RF) görüntüleme bobin ile donatılmış 9.4 T-dikey delik mıknatıs yüksek çözünürlüklü üç boyutlu (3D) görüntü elde etmek için kullanılacak. Not: MRI tarayıcı kullanırken manyetik olmayan malzemeleri emin olun. </li><li> Görüntüleme arayüzünü çalıştırın ve &quot;Eğitim Seçenekleri&quot; menüsünden &quot;Yeni Çalışması&quot; seçeneğini seçin. Komut barda &quot;mtune&quot; yazın ve &quot;Dinle GUI&quot; yukarı çekmek için çalıştırın. Ardından &quot;Başlat Probe Melodisi&quot; seçin ve &quot;Otomatik Ölçeklendirme&quot; butonuna tıklayın. Dinle GUI RFsignal göstermek için değişecektir. Ayarlamak proton rezonans frekansına RF bobin (400 MHz), bobinin sonunda uzak ayar / maç düğmeleri kullanın. &quot;Başlat&quot; sekmesinde ilgili düğmeleri tıklayarak frekans ve güç kalibrasyonu çalıştırmak için &quot;Prescan&quot; sayfasına gidin. Layneri sayfasını yukarı çekin sekmesindeki &#39;çalışması Shim &quot;etiketinin&quot;&#39; üzerine XYZ (hızlı) tuşuna basın., Şim sayfasına gitmek yineleme tümünü seçin, ve oto shimming gerçekleştirmek için takoz düğmesine basın. </li><li> Fare kalbi lokalize görüntüleme arayüzünün &quot;Eğitim&quot; sekmesinden bir izci dizisini seçin. &quot;Edinme&quot; sekmesinde 35 mm 2 FOV değiştirmek ve makinenin varsayılan ayarları saklayın. Dizisi çalıştırmak için Başlat &#39;ı tıklatın; Kalp FOV merkezinde değilse, hayvan sahibinin konumunu ayarlamak RF bobini retune ve tekrar izci görüntüler elde. </li><li> &quot;Çalışma&quot; sekmesinde &quot;GEMS&quot; dizisi düğmesini tıklatın kısa ekseni ve kalbin 20,21 uzun ekseni boyunca iki dik uçakları almak için gelen &quot;Edinme&quot; sekmesinde toplama parametreleri girin. NOT: Bir gradyan eko taraması için tipik satın alma parametreleri şunlardır: kesit kalınlığı 1 mm; tekrarlama zamanı (TR), 200 msn; eko zamanı (TE), 2.67 msn (en az); çevirme açısı, 25 °; panellerin matris boyutu, 128 x 128; FOV, 22 mm2; satın alma sayısı, 4; ve 1 dakika ve 30 saniye yaklaşık bir satın alma süresi. </li><li> &quot;İlan&quot; sekmesinde LV anatomik ve fonksiyonel parametreleri ölçmek için nabız oksimetre kapılı kısa eksen sine MR görüntüleri toplamak için &quot;CINE&quot; dizisini seçin. Fare gezinip ve sürüklenmesi kalbin uzun eksen görünümü dayalı görüntüleme dilimlerin konumunu ve açısını ayarlayın. Gradyan eko cine dizisi elde etmek &quot;Edinme&quot; sekmesinde aşağıdaki görüntüleme parametreleri girin: TR, 500 msn; TE, 5 msn; FOV, 22 mm 2; edinimi matris, 256 x 256; kesit kalınlığı, 1 mm; satın alma sayısı, 8; kare sayısı, 6; 17 dk &#39;lık bir alma saati. Edinimi başlamak için start tıklayın. </li><li> Görüntüleme yazılımı &quot;I / O&quot; sekmesini kullanarak DICOM formatında alınan görüntüleri dönüştürme ve işleme için veri merkezine gelen dosya aktarımı. </li><li> Görüntüleme prosedürü sonunda, herow fareler filtre üst kafesleri içinde anestezi kurtarmak için. Onlar sternal yatma korumak ve gerektiğinde daha ileri çalışmalar için onları tutmak için yeterli bilince kazanmak kadar sahipsiz fareler bırakmayın. </li></ol> Kardiyak Manyetik Rezonans Görüntüleme Mikroskopi 4. Veri Analizi <ol><li> LV 19 anatomik ve fonksiyonel parametrelerini analiz etmek Segment yazılımı kullanın. &quot;Açık Image File (s)&quot; &quot;Dosya&quot; menüsünün alt kullanarak yazılımın içine DICOM formatındaki sinema görüntüleri yükleyerek. GUI görüntü türü ve görüntü görünüm düzlem olarak &#39;kısa eksen orta-ventriküler&#39; olarak görüntüleme tekniği, &#39;Sine&#39; olarak &#39;MRGE&#39; seçiniz. </li><li> Vasıtası ile uç-diastolik ve end-sistolün için kullanılacak zaman dilimlerini belirleyin &quot;Diyastolü End güncel zaman dilimi ayarlayın&quot; ve sırasıyla &quot;Edit&quot; menüsünden menüler &quot;Sistolün End güncel zaman dilimi ayarlayın&quot;. </li><li>İlk &quot;LV&quot; komut düğmesini tıklatın ve sonra &quot;ENDO&quot; ve sağ alt panelde &quot;EPI&quot; komut düğmeleri elle sırasıyla sol ventrikül endokardı ve epikardiyumu çizmek için. Hesaplamaların doğruluğunu artırmak amacıyla gelen komut düğmesine basarak papiller kas çıkarın. </li><li> Böyle diyastolik hacim, sistolik hacim, strok hacmi ve sağ üst panelde ejeksiyon fraksiyonu gibi sayısallaştırılmış LV parametreleri okuyun. Bu duvar kalınlığı ve ventrikül çapı 22 olarak LV parametreleri ölçmek için &quot;Çeşitli&quot; komut düğmesini ve ardından &quot;Ölçme Kumpas&quot; komut düğmesini tıklatın. </li><li> Gerektiği gibi görüntüleri reprocess &#39;. Mat&#39; biçiminde Ise dahil görüntüleri kaydetmek için &quot;Dosya&quot; menüsünden &quot;Resim Yığınlar ve segmentasyonu Hem Kaydet&quot; alt menüsünü tıklayınız. </li></ol>

<ol><li>Heidenreich, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forecasting+the+future+of+cardiovascular+disease+in+the+United+States%3A+a+policy+statement+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Forecasting the future of cardiovascular disease in the United States: a policy statement from the American Heart Association.</a> Circulation. 123 (8), 933-944 (2011).</li>
<li>Fujinami, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mimicry%2C+bystander+activation%2C+or+viral+persistence%3A+infections+and+autoimmune+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Microbiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Molecular mimicry, bystander activation, or viral persistence: infections and autoimmune disease.</a> Clin Microbiol Rev. 19 (1), 80-94 (2006).</li>
<li>Cihakova, D., Rose, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+myocarditis+and+dilated+cardiomyopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Immunol%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of myocarditis and dilated cardiomyopathy.</a> Adv Immunol. 99, 95-114 (2008).</li>
<li>Donermeyer, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocarditis-inducing+epitope+of+myosin+binds+constitutively+and+stably+to+I-Ak+on+antigen-presenting+cells+in+the+heart%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Myocarditis-inducing epitope of myosin binds constitutively and stably to I-Ak on antigen-presenting cells in the heart.</a> J Exp Med. 182 (5), 1291-1300 (1995).</li>
<li>Gangaplara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coxsackievirus+B3+infection+leads+to+the+generation+of+cardiac+myosin+heavy+chain-alpha-reactive+CD4+T+cells+in+A%2FJ+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Coxsackievirus B3 infection leads to the generation of cardiac myosin heavy chain-alpha-reactive CD4 T cells in A/J mice.</a> Clin Immunol. 144 (3), 237-249 (2012).</li>
<li>Huber, S. A., Lodge, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coxsackievirus+B-3+myocarditis+in+Balb%2Fc+mice.+Evidence+for+autoimmunity+to+myocyte+antigens%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Coxsackievirus B-3 myocarditis in Balb/c mice. Evidence for autoimmunity to myocyte antigens.</a> Am J Pathol. 116 (1), 21-29 (1984).</li>
<li>Massilamany, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+novel+mimicry+epitopes+for+cardiac+myosin+heavy+chain-alpha+that+induce+autoimmune+myocarditis+in+A%2FJ+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Immunol%22%5BJournal%5D)">Identification of novel mimicry epitopes for cardiac myosin heavy chain-alpha that induce autoimmune myocarditis in A/J mice.</a> Cell Immunol. 271, 438-449 (2011).</li>
<li>Pummerer, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+cardiac+myosin+peptides+capable+of+inducing+autoimmune+myocarditis+in+BALB%2Fc+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Identification of cardiac myosin peptides capable of inducing autoimmune myocarditis in BALB/c mice.</a> J Clin Invest. 97 (9), 2057-2062 (1996).</li>
<li>Rose, N. R., Hill, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathogenesis+of+postinfectious+myocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Immunol+Immunopathol%22%5BJournal%5D)">The pathogenesis of postinfectious myocarditis.</a> Clin Immunol Immunopathol. 80, (1996).</li>
<li>Saraste, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+flow+reserve+and+heart+failure+in+experimental+coxsackievirus+myocarditis.+A+transthoracic+Doppler+echocardiography+study%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Coronary flow reserve and heart failure in experimental coxsackievirus myocarditis. A transthoracic Doppler echocardiography study.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, (2006).</li>
<li>Altes, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperpolarized+3He+MR+lung+ventilation+imaging+in+asthmatics%3A+preliminary+findings%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Hyperpolarized 3He MR lung ventilation imaging in asthmatics: preliminary findings.</a> J Magn Reson Imaging. 13 (3), 378-384 (2001).</li>
<li>Driehuys, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+imaging+with+magnetic+resonance+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Small animal imaging with magnetic resonance microscopy.</a> ILAR J. 49 (1), 35-53 (2008).</li>
<li>Smith, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+microscopy+with+cardiovascular+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance microscopy with cardiovascular applications.</a> Trends Cardiovasc Med. 6 (8), 247-254 (1996).</li>
<li>Potter, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+microscopy+approaches+to+molecular+imaging%3A+sensitivity+vs+specificity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biochem+Suppl%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance microscopy approaches to molecular imaging: sensitivity vs specificity.</a> J Cell Biochem Suppl. 39, 147-153 (2002).</li>
<li>Benveniste, H., Blackband, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MR+microscopy+and+high+resolution+small+animal+MRI%3A+applications+in+neuroscience+research%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">MR microscopy and high resolution small animal MRI: applications in neuroscience research.</a> Prog Neurobiol. 67, 393-420 (2002).</li>
<li>Epstein, F. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MR+tagging+early+after+myocardial+infarction+in+mice+demonstrates+contractile+dysfunction+in+adjacent+and+remote+regions%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">MR tagging early after myocardial infarction in mice demonstrates contractile dysfunction in adjacent and remote regions.</a> Magn Reson Med. 48 (2), 399-403 (2002).</li>
<li>Gewalt, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MR+microscopy+of+the+rat+lung+using+projection+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">MR microscopy of the rat lung using projection reconstruction.</a> Magn Reson Med. 29 (1), 99-106 (1993).</li>
<li>Kern, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKern%2C+MJ+%22The+cardiac+catheterization+handbook.%2C+Edn+5th%22">The cardiac catheterization handbook., Edn 5th</a>. , (2011).</li>
<li>Heiberg, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+validation+of+Segment--freely+available+software+for+cardiovascular+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Med+Imaging%22%5BJournal%5D)">Design and validation of Segment--freely available software for cardiovascular image analysis.</a> BMC Med Imaging. 10, (2010).</li>
<li>Cranney, G. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+ventricular+volume+measurement+using+cardiac+axis+nuclear+magnetic+resonance+imaging.+Validation+by+calibrated+ventricular+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Left ventricular volume measurement using cardiac axis nuclear magnetic resonance imaging. Validation by calibrated ventricular angiography.</a> Circulation. 82 (1), 154-163 (1990).</li>
<li>Hiba, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+and+respiratory+double+self-gated+cine+MRI+in+the+mouse+at+7+T%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac and respiratory double self-gated cine MRI in the mouse at 7 T.</a> Magn Reson Med. 55 (3), 506-513 (2006).</li>
<li>Bryant, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+failure+in+transgenic+mice+with+myocardial+expression+of+tumor+necrosis+factor-alpha%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cardiac failure in transgenic mice with myocardial expression of tumor necrosis factor-alpha.</a> Circulation. 97 (14), 1375-1381 (1998).</li>
<li>Neu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+myosin-induced+myocarditis+as+a+model+of+postinfectious+autoimmunity%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Cardiac myosin-induced myocarditis as a model of postinfectious autoimmunity.</a> Eur Heart J. 12 Suppl D, 117-120 (1991).</li>
<li>Neumann, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+multiple+heart+autoantibodies+in+mice+with+coxsackievirus+B3-+and+cardiac+myosin-induced+autoimmune+myocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Induction of multiple heart autoantibodies in mice with coxsackievirus B3- and cardiac myosin-induced autoimmune myocarditis.</a> J Immunol. 152 (1), 343-350 (1994).</li>
<li>Rose, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postinfectious+autoimmunity%3A+two+distinct+phases+of+coxsackievirus+B3-induced+myocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Postinfectious autoimmunity: two distinct phases of coxsackievirus B3-induced myocarditis.</a> Ann N Y Acad Sci. 475, 146-156 (1986).</li>
<li>Farmer, J. B., Levy, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+for+recording+the+electrocardiogram+and+heart+rate+from+conscious+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol+Chemother%22%5BJournal%5D)">A simple method for recording the electrocardiogram and heart rate from conscious animals.</a> Br J Pharmacol Chemother. 32 (1), 193-200 (1968).</li>
</ol>

Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Bu çalışmada otoimmün miyokardit etkilenmiş farelerde kalp anormallikleri tespit etmek için bir non-invaziv bir araç olarak MRM prosedürü ve programı açıklanır. EAM histolojik özellikleri insanların postenfeksiyöz miyokardit benzediğinden, fare modelleri yaygın miyokard yaralanma 23-25 ​​bağışıklık mekanizmaları tanımlamak için kullanılır. Ancak, miyokardit ile etkilenen hayvanların klinik olarak normal görünür, ve tanı deneyler 7 bitiminde histoloji dayanarak yapılır. Hayvanlar genellikle günde 21...

Kalp yetmezliği ölümlerin önde gelen nedenidir ve miyokardit genç ergenler 1 kalp yetmezliğinin bir baskın nedenidir. Miyokardit ile etkilenen hastaların çoğu asemptomatik kalır ve hastalık kendiliğinden 2 çözümlenir. Ancak, etkilenen kişilerin% 10-20 dilate kardiyomiyopati (DKMP) 3 yol açan, kronik hastalığı gelişebilir. Çeşitli hayvan modelleri miyokardit bağışıklık hastalık oluşumunun incelenmesinde geliştirilmiştir. Hastalık kardiyak miyosin ağır zincir (Myhc)-α veya bunun immünolojik olarak peptid fragmanları ya da coxsackievirus B3 4-9 gibi patojenlerle enfekte ile immünize hayvanlar tarafından miyokardit-duyarlı A / J ve Balb / c farelerinde indüklenebilir. Bu çalışma, A / J farelerinde 334-352 kaynaklı miyokardit Myhc-α içerir. Miyokard sızmaları gösteren rağmen, miyokardit etkilenen hayvanların klinik olarak normal görünüyor; Tanı iltihap 7 a için kalplerin histolojik değerlendirilmesine dayanmaktadırnd ekokardiyografi 10. Manyetik rezonans mikroskobu (MRM) dakikalık kan damarlarının seviyesine (en fazla 10 mikron çapında) fonksiyonel detayların değerlendirilmesi izin, yüksek çözünürlüklü üç boyutlu düzlemlerde ile kardiyovasküler görüntüleme elde etmek için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir, ancak çözme gücü bu düzeyde , çözünürlük genellikle 1 mm 11-14 kadar elde edildiği rutin manyetik rezonans görüntüleme (MRI) tarama prosedürü ile elde değil. Bu hastalık sürecinin 14 erken zaman noktalarında performans parametrelerini elde etmek için de yüksek çözünürlüklü görüntüleri edinimine izin ve gibi MRM bir avantaj sunuyor. Klinik olarak, MRM görüntüleme yaygın hastalıklı kalp, akciğer veya beyin 15-17 işlevsel parametreleri çalışma uygulanmıştır. Bu çalışmada, otoimmün miyokardit etkilenen A / J farelerinde kalp anormallikleri tespit etmek için invazif olmayan bir araç olarak bir MRM tekniğinin kullanımı gösterilmektedir. Özellikle, tO MRM görüntüleme sağlar gibi makul doğruluk 18 ile sol ventrikül (LV) diyastol sonu hacmi ve ejeksiyon fraksiyonu (EF) gibi fonksiyonel parametrelerin ölçümü. Ilgili parametrelerin tanımları vardır: LV son diastolik hacim, diyastolik döngüsünün sonunda sol ventrikül kan hacmi ve ejeksiyon fraksiyonu, strok hacmi / diyastolik hacmi. Veri analizi manyetik rezonans tarayıcıları 19 tarafından alınan işlem DICOM uyumlu kardiyovasküler görüntüler için geliştirilen serbestçe kullanılabilir Segment yazılım kullanılarak gerçekleştirilir. Veriler, sağlıklı farelerde, bu fonksiyonel parametreler karşılaştırıldığında, LV diyastol sonu hacim, strok hacmi ve ejeksiyon fraksiyonunda bir azalmaya tekabül myocarditic hayvanlarda LV duvar kalınlığında bir artış saptandı.

<table><tbody><tr><td>Myhc-a 334-352 (DSAFDVLSFTAEEKAGVYK)</td><td>Neopeptid, Cambridge, MA</td><td></td><td>Mağazası 4 & # 176'da; C</td></tr><tr><td>CFA</td><td>Sigma Aldrich, St Louis, MO</td><td>5881</td><td>Mağaza 4 & # 176; C</td></tr><tr><td>MTB H37Rv özü</td><td>Difco Laboratories, Detroit, MI</td><td>231141</td><td>Mağazası 4 & # 176'da; C</td></tr><tr><td>PT</td><td>List Biologicals Laboratories, Campbell, CA</td><td>181</td><td>Mağaza 4 & # 176; C</td></tr><tr><td>1x PBS</td><td>Corning, Manassas, VA</td><td>21-040-CV</td><td>Mağazası 4 & # 176; C</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal Healthcare, Mumbai, Hindistan</td><td>NDC66794-013-25</td><td></td></tr><tr><td>Dişi A / J fareler</td><td>Jackson Laboratuvarları, Bar Harbor, ME</td><td>646</td><td></td></tr><tr><td>Luer-lok steril 1 ml şiringe</td><td>BD, Franklin Lakes, NJ</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>Luer-lok steril 3 ml şiringe</td><td>BD, Franklin Lakes, NJ</td><td>309657</td><td></td></tr><tr><td>Steril iğne, 18 G</td><td>BD, Franklin Lakes, NJ</td><td></td><td></td>305195</tr><tr><td>Steril iğne, 27 1/2 G</td><td>BD, Franklin Lakes, NJ</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>3 musluk</td><td>Smiths Medical ASD, Inc. Dublin, OH</td><td>MX5311L</td><td></td></tr><tr><td>Kerlix gazlı bez bandaj ruloları</td><td>Covidien, Mansfield, MA</td><td>6720</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimberly-Clark Professional, Roswell, GA</td><td>34155</td><td></td></tr><tr><td>Protouch Stockinette</td><td>Medline Endüstriler, Mundelein, IL</td><td>30-1001</td><td></td></tr><tr><td>Steril cerrahi makas ve forseps</td><td>INOX tool Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikro fırın</td><td>GE Healthcare,&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ThermiPAQ sıcak ve soğuk terapi sistemi&nbsp;</td><td>Theramics Corporation, Springfield, IL</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sürüngen ısıtma</td><td>lambası Energy Savers Unlimited, Inc. Carson, CA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>3M Transpore bantları</td><td>Target Corporation, MN</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yukarı ve Yukarı Polimiksin B sülfat / Basitrasin / Neomisin sülfat antibiyotik merhem</td><td>Hedef Corporation, MN</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kuzey Güvenlik DeciDamp-2PVC köpük kulak tıkaçları</td><td>Kuzey Güvenliği Ürünler, Smithfield, RI</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pamuk uçlu aplikatör, 6' &rsquo; ahşap gövde&nbsp;</td><td>Jorgensen Laboratories, Inc. Loveland, CO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anestezi indüksiyon odası&nbsp;</td><td>Summit Anesthesia Solutions, Ann Harbor, MI</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Summit Anestezi Anestezi Akışını düzenlemek için destek sistemi&nbsp;</td><td>Summit Anesthesia Solutions, Ann Harbor, MI</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Özel olarak tasarlanmış hayvan tutucu</td><td>Agilent Technologies, Santa Clara, CA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bickford&nbsp; Omnicon F/Air&nbsp; Anestezi Gaz Filtre Ünitesi&nbsp;</td><td>A.M. Bickford, Inc. Wales Center, NY</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nabız oksimetre modülü, MR uyumlu küçük hayvan izleme ve geçit sistemi&nbsp;</td><td>Küçük Hayvan Aletleri, Inc. Stony Brook, NY</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oksijen tüpü ve nbsp;</td><td>Matheson-Tri Gazı, Kuzey-Merkez Bölgesi, Lincoln, NE</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gaz regülatörü&nbsp;</td><td>Western Medica, West Lake, OH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sinyal kırma modülü, MR uyumlu küçük hayvan izleme ve geçit sistemi</td><td>Küçük Hayvan Aletleri A.Ş. Stony Brook, NY</td><td></td><td></td></tr><tr><td>9.4 T (400 MHz) 89 mm dikey çekirdek delikli MR tarayıcı</td><td>Agilent Teknolojileri, Santa Clara, CA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>4 cm kırkayak mikro görüntüleme RF bobini</td><td>Agilent Teknolojileri, Santa Clara, CA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SAM PC monitörü</td><td>Small Animal Instruments, Inc. Stony Brook, NY</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kantitatif Tıbbi Görüntü analiz yazılımı</td><td>http://segment.heiberg.se; &nbsp; Segment v1.8 R1430,&nbsp; Medviso, Oresunds bölgesi, İsveç</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Matlab yazılımı</td><td>The Mathworks, Inc.&nbsp; Natick, MA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bilgisayar-Unix işletim sistemi</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

fare manyetik rezonans görüntüleme mikroskopi tarafından deneysel otoimmün miyokardit kardiyak anormallikler noninvaziv değerlendirilmesi

Noninvasive Assessment of Cardiac Abnormalities in Experimental Autoimmune Myocarditis by Magnetic Resonance Microscopy Imaging in the Mouse

Miyokardit miyokardın iltihabıdır, ama hastalıktan etkilenen gösteri klinik belirtilerin sadece ~ 10%. Miyokard yaralanma bağışıklık olayları incelemek için, miyokardit çeşitli fare modelleri yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu çalışma, kardiyak miyosin ağır zincir (Myhc)-α A / J farelerinde 334-352 ile oluşturulan deneysel otoimmün miyokardit (EAM) dahil; etkilenen hayvanlar lenfositik miyokardit gelişebilir ama hiçbir belirgin klinik bulgular ile. Bu modelde, invazif olmayan bir yöntem olarak manyetik rezonans mikroskobu (MRM) en yarar gösterilmiştir Myhc-α 334-352 ile aşılanmış hayvanlarda kalp yapısal ve işlevsel değişiklikler tespit etmek. EAM ve sağlıklı fareler bir 9.4 T (400 MHz) 4 cm kırkayak radyo-frekans görüntüleme probu ve 100 G / cm üçlü eksen eğimleri ile donatılmış 89 mm dikey çekirdek delik tarayıcı kullanılarak görüntülendi. Kardiyak görüntüleri anima bir gradyan eko-tabanlı sine darbe dizisi kullanırken anestezi hayvanlardan elde ve edildils solunum ve pulse oksimetre ile takip edildi. Bu analiz, sağlıklı farelere göre ventriküllerin iç çapına karşılık gelen bir azalma ile, EAM farelerde ventriküler duvar kalınlığında bir artış saptandı. Veri iltihaplı kalplerinde morfolojik ve fonksiyonel değişiklikler, canlı hayvanlarda non-invaziv takip MRM ile olabileceğini düşündürmektedir. Sonuç olarak, MRM ilerlemesini ve regresyon bulaşıcı maddelerin neden olduğu hastalıklarda miyokardiyal yaralanmaların, hem de tedavilere cevap değerlendirmek bir avantaj sunar.

Bu raporda, EAM ile etkilenen hayvanların kalplerinde yapısal ve işlevsel değişiklikleri belirlemek için bir non-invaziv bir yöntem olarak MRM tekniğinin yarar gösterilir. Miyokardit CFA 7 Myhc-α 334-352 ile immünize hayvanlar ile A / J farelerinde indüklenmiştir ve hayvanlar 21 gün sonrası bağışıklık on MRM deneylere tabi tutulmuştur. MRM görüntüleme üçlü eksen eğimleri (maksimum gücü 100 G / cm) ile donatılmış bir 89 mm dikey delikli mıknatıs kullanarak 9.4 T (protonlar için 400 MHz) izofluran anestezi altı...

Bu çalışma, otoimmün miyokarditten etkilenen farelerde kardiyak anormallikleri değerlendirmek için invaziv olmayan bir araç olarak manyetik rezonans mikroskopi görüntülemenin başarılı bir şekilde kurulduğunu göstermektedir. Veriler, tekniğin canlı hayvanlarda hastalığın ilerlemesini izlemek için kullanılabileceğini göstermektedir.

Fare Manyetik Rezonans Görüntüleme Mikroskopi tarafından Deneysel Otoimmün Miyokardit Kardiyak anormallikler noninvaziv değerlendirilmesi

Myocarditis is an inflammation of the myocardium, but only ~10% of those affected show clinical manifestations of the disease. To study the immune events ...

Bu prosedürün genel amacı, inflamatuar kalp hastalığından etkilenen canlı hayvanların kalplerini görüntüleyerek kardiyak fonksiyonel anomalileri belirlemektir. Bu işlem, öncelikle örneğin miyokardit gibi bir hastalığın indüklenmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım ise hayvanın manyetik rezonans mikroskopi görüntülemesine hazırlanması ve hayvan tutucuya yerleştirilmesidir.Ardından, kardiyak görüntüleri elde etmek için fare mıknatısın içine yerleştirilir. Son adım, segment yazılımını kullanarak kardiyak fonksiyonel parametrelerin analiz edilmesidir. Nihayetinde bu teknik, otoimmün miyokardit etkilenmiş farelerde son diyastolik hacmin ve ejeksiyon fraksiyonunun hesaplanması için kullanılır.Bu tekniğin histopatoloji gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, non-invaziv olması ve kalbin üç boyutlu, yüksek çözünürlüklü bir görüntüsünü sağlamasıdır. Bu yöntem, kardiyoloji alanında inflamatuar kalp hastalıklarının teşhisini içeren temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Genel olarak, bu yönteme yeni başlayan kişiler, manyetik rezonans mikro görüntüleme alımı için hayvanların hazırlanması konusundaki deneyim eksikliği nedeniyle zorluk yaşayacaklardır.Bu nedenle, bu yöntemin görs

noninvasive-assessment-cardiac-abnormalities-experimental-autoimmune

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Yüksek frekans Doppler ultrason bölgesel miyokard fonksiyonunu değerlendirmek için yeni bir teknoloji. Bu çalışma, miyokard gerilme, iskemi-Reperfüze (IR) fare kalp dp / dt ve mitral yetersizliği tekrarlanan ölçümler için bu çok yönlü bir görüntüleme platformu uygulanabilirliği gösteren ilk kanıt sunmaktadır.

Yüksek frekanslı Yüksek çözünürlüklü Ekokardiyografi: İskemi-Reperfüze murin Kalp Miyokard Strain, kontraktilite ve Mitral Yetmezliğinde Non-invaziv Tekrarlanan Ölçüm İlk Kanıt

Kontrastlı kardiyak manyetik rezonans (CMR) görüntüleme kapsamlı...

Küçük Hayvan Bak-soyunma Ters Kurtarma (SALLI) Sıçanlarda MRI kullanarak Kalp Fonksiyonu ve Miyokard Morfoloji Değerlendirilmesi

Fare kalbinin MRG ve PET görüntülemesinin nasıl yapılacağını açıklıyoruz. Protokol, miyokard enfarktüsü ve kalp yetmezliği modellerinde tedavi etkinliğini değerlendirmek için uyarlanmıştır.

Miyokard Enfarktüsünün Fare Modellerinde MRG ve PET

Bu yöntem, deneysel olarak indüklenen miyokard iskemisi olan farelerde kardiyak morfolojiyi, fonksiyonu, perfüzyonu, metabolizmayı ve iyotlu kontrast madde ile canlılığı değerlendirmek için Kuantum Mikro Bilgisayarlı Tomografi (MikroBT) kullanımını ana hatlarıyla belirtir. Teknik, insan kalbi hastalığının çeşitli hayvan modellerinin tahribatsız, yüksek verimli uzunlamasına in vivo görüntülenmesi için uygulanabilir.

Miyokard Yapı, Fonksiyon Vivo Kantitatif Değerlendirilmesi yılında Perfüzyon ve Canlılık Kardiyak Mikro-bilgisayarlı Tomografi ile

Ekokardiyografik inceleme farelerde sık sık kullanılır. Bu amaç için pahalı yüksek çözünürlüklü ultrason cihazları geliştirilmiştir. Bu iletişim kuralı histolojik xarakteristikaları analizler ile kardiyak Morfoloji belirlemek için birlikte uygun fiyatlı bir Ekokardiyografik yordamı açıklar.

Kardiyak Morfoloji Ekokardiyografik ve histolojik muayene fare

Bu çalışmada, fare kalbinin sol ventrikül fonksiyonel parametrelerini ölçmek için kapsamlı bir kardiyovasküler manyetik rezonans görüntüleme (CMR) protokolü açıklanmaktadır. Protokol, CMR görüntülerinin alımını, işlenmesini ve analizini ve farklı kardiyak fonksiyonel parametrelerin değerlendirilmesini açıklar.

Kardiyovasküler Manyetik Rezonans Görüntüleme ile Fare Kalbi Sol Ventrikül fonksiyonu, Miyokard Zorlanması ve Hemodinamik Kuvvetlerin Nicelemesi

Doku transformasyonu ve boyamadaki yeni gelişmeleri eksenel olarak taranmış bir ışık tabakası mikroskobunun geliştirilmesiyle birleştirerek tüm fare kalbinin mezoskopik rekonstrüksiyonu için bir yöntem sunuyoruz.

Tüm Fare Kalbinin Mezoskopik Optik Görüntülenmesi

Burada, mikromanipülasyon yoluyla sol ön inen koroner arterin hassas ligasyonu ile farelerde miyokard enfarktüsü veya miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarını indükleyebilen basit ve tekrarlanabilir bir yöntem tanımlanmıştır.

Farelerde Miyokard Enfarktüsü ve Miyokard İskemi-Reperfüzyon Hasarının İndüksiyonu

Reperfüze akut miyokard enfarktüsünde (repAMI) kardiyak hasarın üç boyutlu (3D) rekonstrüksiyonu, ilişkili hastalığı etkileyen paternlerin aslına uygun olarak ölçülmesini ve birlikte lokalizasyonunu sağlar. Burada, kardiyak hasarın, risk altındaki alanın ve bağışıklık hücresi tepkisinin eşzamanlı ölçümü için otomatikleştirilebilir bir ışık tabakası kılavuzluğunda görüntüleme yaklaşımı sağlanmıştır.

Işık Tabakası Floresan Mikroskobu Kullanılarak Reperfüze Akut Miyokard Enfarktüsünde Kardiyak Hasar ve İmmün Yanıtın Eşzamanlı 3D Analizi

Miyokard dokusunda gerginlik gibi parametreleri ölçmek için doğru ve pratik bir yöntem gösterilmiştir beri, bu zorlanma, sık kullanılan parametre EF daha kontraktil disfonksiyon için daha duyarlı ve daha önceki bir belirteçtir, büyük klinik değeri.

Özellik Takibi Manyetik Rezonans Türetilmiş Miyokard Gerinim Değerlendirmesi

Öğrenin farelerde otoimmün miyokardit kaynaklı kardiyak anormallikleri manyetik rezonans mikroskopi görüntüleme ile noninvaziv değerlendirmeyi. Bu yöntem hastalık ilerlemesini canlı hayvanlarda izlemeyi sağlar.

Fare Manyetik Rezonans Görüntüleme Mikroskopi tarafından Deneysel Otoimmün Miyokardit Kardiyak anormallikler noninvaziv değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal

Fare Manyetik Rezonans Görüntüleme Mikroskopi tarafından Deneysel Otoimmün Miyokardit Kardiyak anormallikler noninvaziv değerlendirilmesi

Daha fazla video keşfet