Name: Yarı Tüm vücut pletismografisi kullanılarak Farelerde Solunum Fonksiyon Ölçme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 51 s
Description: Öğrenin farelerde solunum fonksiyonlarını ölçmek için kısıtlama gerektirmeyen tüm vücut pletismografisi yöntemini. Bu invaziv olmayan teknik, bilinçli kemirgenlerde tekrarlanabilir solunum parametreleri değerlendirmesi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu tekniğin geliştirilmesinde teknik tavsiyeleri ve ekipman temini için Prof. David Walker'a teşekkür ederiz. Bu çalışma, Victoria Hükümeti'nin Operasyonel Altyapı Destek Programı tarafından desteklenmektedir. Bu çalışma kısmen Victoria Hükümeti'nin Operasyonel Altyapı Destek Programı tarafından desteklenmiştir.

NOT: Aşağıdaki deneysel prosedür Monash Üniversitesi Hayvan Etik Komitesi tarafından onaylanmış ve Bilimsel Amaçlarla Hayvan Bakımı ve Kullanımı (2006) Uygulama Avustralyalı Kanunu uyarınca yapılmaktadır. Temsili sonuçlar üretmek için kullanılan Yetişkin dişi C57BL / 6 fareleri, Monash Hayvan Hizmetleri elde edilmiştir. Fareler, 12 saat aydınlık-karanlık döngüsü ile belirli patojensiz, sıcaklık ve nem kontrollü bir odada barındırıldı. Bu fareler, yiyecek ve suya istedikleri kadar ulaşabilirler. 1. İlk Kurulum <ol><li> Bir USB kablosu ile kayıt için veri toplama makinesine dizüstü / masaüstü bağlayın. </li><li> BNC kablo ile veri toplama makinesinin &#39;girişine 1&#39; ile &#39;çıkışı 1&#39; den Köprüsü Amplifikatör bağlayın. </li><li> Sekizli Köprüsü Amp &#39;Kanal 1&#39; içine basınç dönüştürücü takın. Üzerinde veri toplama makineyi açın ve analiz yazılımı açın. Yazılım otomatik olmalıotomatik (malzeme ve ekipman tabloya bakınız) ekipman kurulumu algılar. </li><li> Yazılımın kurulum araç çubuğunda bulunan Açık Kanal ayarları. Değiştirme kanallarının sayısı 1 olarak kaydedilmiştir. </li><li> Oda basıncı ve Köprü Amplifikatör kalibre su kolonu cihazı ölçmek için barometre ayarlayın. Su kolonu cihazı plastik boru ile bağlı iki adet 5 ml&#39;lik şırınga serolojik pipetler içerir. </li><li> Su ile sütunları doldurun ve su seviyeleri bir cetvel ile dengeli olmasını sağlamak. . Her bir pipet üstüne plastik hortumun bir parçasını, Şekil 2 geç su kolonu düzeneği;. </li></ol> 2. Köprü Amplifikatör Kalibrasyon Not: su sütuna köprü yükseltecine hava enjeksiyonu kalibre etmek için 1 cm H 2 O saptırma oluşturmak için gereklidir. Bu koşullar altında meydana gelen tek bir set ve kullanıcının cihazın bağlıdır olacaktır. Açıklık getirmek için bu adımları dBu laboratuvar kalibrasyon gerçekleştirmek nasıl emonstrate. <ol><li> 300 ul bir 1 ml şırınga çekme; su sütununun sağ tarafındaki boru sonunda vana için şırınga ekleyin. NOT: musluk şırınga ve su sütununa açık olduğundan emin olun, ve oda havasına kapalı. Su seviyeleri bu noktada dengeli değilseniz oda havasına ve su sütunu açık olduğunu, bu suyu dengelemek böylece, stopcock çevirin. Su sütununun sol taraftaki boru şırınga daldırma ile oluşturulan basınç değişikliğini ölçmek için basınç transdüktörüne bağlı olmalıdır. </li><li> Basınç dönüştürücü (transduser üst halkası) üzerine konnektörüne sol taraftaki su sütunundan boru takın. </li><li> Yazılımın sağ taraftaki ana ekranında kanal 1 ve &quot;Köprü amp&quot; (malzeme ve ekipman tabloya bakın) seçmek için yanında bulunan kaydırma aşağı menüsünü seçin. </li><li> Enter5 mV, 20 Hz düşük geçiş, için ayarlar &#39;invert&#39; kutusunu işaretleyin ve &#39;sıfır&#39; düğmesine tıklayın. ~ 0 mV&#39;de izini ayarlamak için &#39;sıfır&#39; tıklayın. Kolay görüntüleme için 1: 4 pencere boyutunu azaltın. </li><li> Kurmak, her şeyi ile 3 sn bırakarak, 1 ml şırınga bastırın. Basınç değişti çünkü bu yazılım üzerinde ani bir başak gösterecektir. 300 ul basıldığında basınç 1 cm su kolonu suyu hareket edecek. Bu bilinen değer Köprüsü Amplifikatör kalibre yardımcı olacaktır. Not: nedeniyle 300 ul depresyona odasındaki basınç artışı sonraki hesaplamalar için kullanılan P K değerine karşılık gelir. </li><li> Köprü Amp penceresinin sol alt köşesinde bulunan &#39;giriş birimleri&#39; seçin. </li><li> Önce aksi &#39;Sıfır Bölgesi&#39; olarak bilinen başak &quot;arka plan iz&quot; vurgulayın. <ol><li> Bir sonraki &#39;noktası 1&#39; için oku tıklatın ve bu bac üretecek-0,002 mV-0.002 mV aralığında kground sinyali (tam değer 0 mV olması asla). </li><li> Tipi &#39;0&#39; penceresinde arka plan sinyal pencereye bitişik. </li></ol></li><li> Şırınga basıldığında gelen &quot;grafiğinin artan basınç bölgesi&quot; vurgulayın. 2 işaret yanındaki oka tıklayın ve değeri 0.9-1.2 mV aralığında olmalıdır. <ol><li> Tür &#39;1&#39; sonraki &quot;artan basınç&quot; penceresine penceresinde. Adımları 2.7 ve 2.8 üzerine bir görsel açıklama için Sekizli Köprüsü Amp zarar gösterebilir belirtilen aralıkların dışında bulunan 3. Değerleri Şekil bakın. </li></ol></li><li> Pencerenin sağ üst köşesinde bulunan &#39;birimleri tanımlamak&#39; seçeneğini ve &quot;cmH2O&quot; gidin. Bu seçenek mevcut değilse, elle girilmiş olabilir. Ok tıklayın. </li><li> &#39;Köprü Amp&#39; menüsüne dönmek (2.1 bakınız). &#39;Sıfır&#39; ile 1 mV ve set amplifikatör seçin;. Bu kalibrasyonu tamamlamak ve su kolonu güvenle kaldırılabilir. </li></ol> 3. Kayıt Akciğer Fonksiyon <ol><li> Fareyi (g) tartılır. NOT: önce fizyolojik değerlendirmesine Bir hafta pletismografi odası çevreye fareyi tanıtmak. Bu alışma yardım ve daha sonraki bir tarihte bu işlemi yaparken stresi azaltacaktır. UWBP kurulumu gösteren genel bir şemadan için Şekil 4&#39;e bakınız. </li><li> Bir rektal termometre ile vücut ısısını ölçün. Yerleştirilmeden önce vazelin ile kayganlaştır. Sıcaklık okuma kaydetme ve% 80 (h / h) etanol ile yağlayıcı temizleyin. Bu tür bebek sıçan yavrularından gibi çok küçük hayvanlar kullanıldığında, ortalama vücut ısısı değer yerine, bir kızıl ötesi termometre ile belirlenebilir. </li><li> Pletismografi odasının bir delikli ucunda sıcaklık / bağıl nem probu yerleştirin. Sıcaklık, nem ve barometr kaydediniçinde fare koyarak önce pletismografi odasının içine ic basıncı. </li><li> , Pletismografi odasında fare yerleştirin hafifçe açık ucunu kapsar. Bu, fare alışmasına izin verir. Bölmesini kapatın. </li><li> Tek delikli pletismografi odasının tarafında takılı sıcaklık / nem probu ile, artık iki delik diğer tarafında dönüştürücü ve şırınga takın. </li><li> Yaklaşık 15-45 saniye boyunca yazılım programına ve kayda Basın &#39;Start&#39;. Hayvan hareket olmayan veriler rekor 5-10 sn. Hareket hayvanın bazal solunum fizyolojisi değiştirebilir ve kötü sonuçlar verecektir. Solunum programı doğrusal bir yolda salınım gerekir. Bunlar kullanılabilir veri bulunmaktadır. Not: idrar veya dışkıya pletismografi bölmesi içindeki bir sıcaklık artışı ve nem yol açabilir. Bu analiz sırasında sonuçları bozar. Idrara çıkma ya da dışkılama durumunda, pl kaydını hemen durdurmak ve temiz% 80 (h / h) etanol ile oda ethysmography. Veri reddedilmesi gerektiğini Suboptimal sonuçları, görsel temsili için Şekil 6&#39;ya bakınız. </li><li> Yazılım üzerinde 45 sn basın &#39;Dur&#39; için kaydettikten sonra programı (malzeme ve ekipman tabloya bakın). Pletismografi odasından fareyi çıkarın ve hemen odasının sıcaklık ve nem kaydedin. Bu hayvanı stres olabilir sürekli fazla 45 saniye boyunca kayıt yapmayın. </li><li> Kafesi, sprey ile fare dönün ve% 80 (h / h) etanol ile bölmesini silin. </li><li> Odası kurulayın ve bir sonraki fare üzerinde geçmeden önce temel sıcaklık ve nem dönmek için izin verin. Tekrar 3.1 müteakip hayvanlar için 3.9 için yineleyin. Not: Birden fazla hayvan üzerinde çalışılmış yapılıyorsa, her yeni önce hayvana yakın bazal değerlere odası sıcaklığı ve nem dönüş odasında koymak emin olun. </li></ol> 4. Pletismografi Analizi Hayırte: Böyle tidal hacim (V T) ve aşağıdaki değişkenleri ölçülmesi gerekir dakika hacmi gibi solunum parametreleri hesaplamak için: solunum hızı (solunum / dk), toplam solunum döngü süresi (sn), ilham / sona erme zamanı (Ti / Te, nedeniyle her Tidal hacim (P T). saniye) ve basınç değişimi 1 izlemesi ölçülebilir değişkenleri göstermektedir Şekil. Aşağıdaki adımlar, bu değişkenleri ölçmek için bir yazılım (bkz malzeme ve donanım tablosunu) kullanın. Analiz ederken, koklama veya hareket içeren iz bölgeleri kaçının. Tekrarlanabilir sonuçlar için, iyi nefes iz en az 5 saniye gereklidir. Farklı solunum izleri bir Örneğin 5 ve Şekil 6&#39;ya bakınız. <ol><li> 1 ve kullanılabilir verilerin 5 sn seçmek: 1 tam ekran ekran, set görünümünü açın. Bu temsili bir anlık Şekil 5&#39;te gösterilmektedir. </li><li> Yanlısı üst kısmında bulunan mini veri ped penceresini açındatapad&#39;i sekmesinde gram. Kanal 1 seçin ve sağ sütunda sol sütunda &#39;döngüsü ölçümleri&#39; ve &#39;ortalama döngüsel yüksekliği&#39; seçeneğini seçin. <ol><li> &#39;Birini seçin ve 1 (msn) için minimum pik tespiti için ölçeğini ayarlayın. Bu, her zirve değerinin tespitine olanak ve küçük salınımlar üreten küçük hayvanları kullanırken son derece önemli hale olacaktır. </li><li> &#39;Tamam&#39; ı tıklatın. Bu (P T) ölçümü &#39;nedeniyle her tidal hacme Basınç sapmasını&#39; sunacak. </li></ol></li><li> Mini veri pad, &#39;olay sayımı&#39; ve ardından seçin &#39;döngüsü ölçümleri&#39; Tamam &#39;ı tıklatın. Bu &#39;frekansı&#39; (f) ölçüm sunacak. <ol><li> Frekans nefes / dak dönüştürülmesi gerekmektedir. Bu 60 sn değerini çarparak ve (min) kayıt genel zaman cevabını bölünmesiyle yapılır. </li></ol></li><li> Mini veri pad, seçin &#39;cycle ölçümleri dönemde &#39;takip&#39; ve &#39;&#39; Tamam. Bu toplam nefes alma döngüsü zamanı &#39;(T tot, sn) ölçüm sunacak. </li><li> Sonraki adımlar tepe inspirasyon ve ekspirasyon zaman değerlerini oluşturmak için bir macroinstruction oluşturmak için kullanılır. Imleç tepe / çukur maksimum üzerinden doğrudan olun ve 9 sıralı zirveler ve dipler bir yorum ekleyin. Şekil 5&#39;te gösterildiği gibi salınım zirve ile başlayın. </li><li> Ardından, pencere seç: veri ped ve sağ sütunda sol sütunda, &#39;süre&#39; içinde &#39;seçim bilgilerini&#39; tıklayın ve &#39;Tamam&#39; düğmesine tıklayın Açılan pencerede sütun 1.. </li><li> Programın üst kısmında bulunan makro seçin ve ardından kaydetmeye başlayın. Şimdi seçin komutları: &#39;Dosya Başlat&#39;, &#39;Git&#39;, &#39;Bul&#39; ve &#39;Bul&#39; tıklayın. </li><li> Seçin komutları: &#39;yorumları bul&#39; Bul &#39;ve. Sağlanan &#39;içeren&#39; kutusuna açıklama kutusuna yazdığınız aynı cümleyi yazın. &#39;Seç Önceki Point&#39; sekmesini seçin ve &#39;Bul&#39;. </li><li> Seçin komutları: &#39;veri pad Ekle&#39;. Ardından, makro seçin: makro komutları ve tekrarı başlar. Görünen yineleme sayısı penceresi 9 ayarlanmış olmalıdır. </li><li> Komutunu seçin: &#39;Gelecek bul. Seç komutu: &#39;veri pad Ekle&#39;. Nihayet makro komutları ve bitiş tekrarlayın seçin. <ol><li> Şimdi makro seçin ve kaydı durdurmak. Kaydet ve hayvan sayısından sonra makro adı. NOT: Her hayvan için makro ayarlama makro uzunlamasına çalışmalar için kullanılan ve zaman tasarrufu sağlar. </li></ol></li><li> Şimdi makro her yorumun arasındaki İlham (T i) ve Sona Erme (T e) zamanı elde etmek çalıştırılabilir. Veri datapad&#39;i kanalında 1 altında görünecektir. Son Kullanma ve ilham ardışık oluşur ve veriler bu sırayla görünecektir. <ol><li> Veri elle inspirasyon ve ekspirasyon değerlere bölünmüş gerekir. Ortalama T i ve T e elde etmek için her parametrenin dört veri değerleri ortalama. </li></ol></li><li> Birincil değerleri tidal hacmi (VT, mi) elde edilmiştir sonra hesaplanabilir. Drorbaugh ve Fenn 8 denklemi kullanılan gelgit hacmi elde etmek için: V T (ml) = (P T / P K) x (V K) x ((T CORE (P B - P C)) / (T CORE (P B - P C) - T C (P B - P CORE))) Nerede V T: Tidal Hacim P k: 1 ml her enjeksiyonundan dolayı Basınç saptırma (2.5 adıma bakınız) T çekirdek: Her hayvanın Çekirdek sıcaklığı P C: cha kamara sıcaklığı X Bağıl nem Su buharı basıncımber T C: Hayvan odasındaki sıcaklık P çekirdek: vücut sıcaklığında Basınç (vücut sıcaklığında su buharı basıncı x 1.0) P t: her tidal hacmi nedeniyle Basınç saptırma V k: Kalibrasyon için Hacim enjeksiyon P B: barometrik basınç </li><li> Tidal hacmi hesaplanmıştır sonra aşağıdaki parametreler de belirlenebilir: <ul><li> Dakika Hacmi (ml / dak) = V T xf </li><li> Dakika Hacmi (ml / dak / kg) = (V T xf) / Vücut ağırlığı (kg) </li><li> V T (ml / kg) = V T (ml) / Vücut ağırlığı (kg) </li><li> İnspiratuar Duty Cycle (%) T i / T tot = </li><li> İnspiratuar Akış Hızı (ml / sn) = V T / T i </li><li> Erme zaman ilham zaman Oranı = T i / T E </li><li> Toplam döngü süresi (lerec) = İlham süresi (sn) + erme süresi (sn) </li></ul></li></ol>

<ol><li>World Health Organization, World Health Statistics. , WHO, Geneva, Switzerland. (2008).</li>
<li>Jones, C. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((M2+macrophage+polarization+is+associated+with+alveolar+formation+during+postnatal+lung+development%5BTitle%5D)+AND+%22Respir.+Res%22%5BJournal%5D)">M2 macrophage polarization is associated with alveolar formation during postnatal lung development.</a> Respir. Res. 14 (41), 14-41 (2013).</li>
<li>Campbell, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell+factor-induced+airway+hyperreactivity+in+allergic+and+normal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Stem cell factor-induced airway hyperreactivity in allergic and normal mice.</a> Am. J. Pathol. 154 (4), 1259-1265 (1999).</li>
<li>Card, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclooxygenase-2+deficiency+exacerbates+bleomycin-induced+lung+dysfunction+but+not+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Respir.+Cell.+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cyclooxygenase-2 deficiency exacerbates bleomycin-induced lung dysfunction but not fibrosis.</a> Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 37 (3), 300-308 (2007).</li>
<li>Berndt, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+unrestrained+plethysmography+and+forced+oscillation+for+identifying+genetic+variability+of+airway+responsiveness+in+inbred+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Comparison of unrestrained plethysmography and forced oscillation for identifying genetic variability of airway responsiveness in inbred mice.</a> Physiol. Genomics. 43 (1), 1-11 (2011).</li>
<li>Flandre, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+somatic+growth%2C+strain%2C+and+sex+on+double-chamber+plethysmographic+respiratory+function+values+in+healthy+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of somatic growth, strain, and sex on double-chamber plethysmographic respiratory function values in healthy mice.</a> J. Appl. Physiol. 94 (3), 1129-1136 (2003).</li>
<li>Petak, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperoxia-induced+changes+in+mouse+lung+mechanics%3A+forced+oscillations+vs.+barometric+plethysmography%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Hyperoxia-induced changes in mouse lung mechanics: forced oscillations vs. barometric plethysmography.</a> J. Appl. Physiol. 90 (6), 2221-2230 (2001).</li>
<li>Drorbaugh, J. E., Fenn, W. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+barometric+method+for+measuring+ventilation+in+newborn+infants%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">A barometric method for measuring ventilation in newborn infants.</a> Pediatrics. 16 (1), 81-87 (1955).</li>
<li>Milton, P. L., Dickinson, H., Jenkin, G., Lim, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+respiratory+physiology+of+C57BL%2F6+mice+following+bleomycin+administration+using+barometric+plethysmography%5BTitle%5D)+AND+%22Respiration%22%5BJournal%5D)">Assessment of respiratory physiology of C57BL/6 mice following bleomycin administration using barometric plethysmography.</a> Respiration. 83 (3), 253-266 (2012).</li>
<li>Gargiulo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+anesthesia%2C+analgesia%2C+and+care%2C+part+I%3A+anesthetic+considerations+in+preclinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Mice anesthesia, analgesia, and care, part I: anesthetic considerations in preclinical research.</a> ILAR J. 53 (1), 55-69 (2012).</li>
<li>Hildebrandt, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+and+other+considerations+for+in+vivo+imaging+of+small+animals%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Anesthesia and other considerations for in vivo imaging of small animals.</a> ILAR J. 49 (1), 17-26 (2008).</li>
<li>Meijer, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+restraint+and+injection+methods+on+heart+rate+and+body+temperature+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Effect of restraint and injection methods on heart rate and body temperature in mice.</a> Lab Anim. 40, 382-391 (2006).</li>
<li>Hamelmann, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+measurement+of+airway+responsiveness+in+allergic+mice+using+barometric+plethysmography%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Respir.+Crit.+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Noninvasive measurement of airway responsiveness in allergic mice using barometric plethysmography.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 156 (3), 766-775 (1997).</li>
<li>Lim, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+mesenchymal+stem+cells+reduce+lung+injury+in+immunocompromised+mice+but+not+in+immunocompetent+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Respiration%22%5BJournal%5D)">Human mesenchymal stem cells reduce lung injury in immunocompromised mice but not in immunocompetent mice.</a> Respiration. 85 (4), 332-341 (2013).</li>
<li>Murphy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+amnion+epithelial+cells+prevent+Bleomycin-induced+lung+injury+and+preserve+lung+function%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Human amnion epithelial cells prevent Bleomycin-induced lung injury and preserve lung function.</a> Cell Transplant. 20, 909-923 (2011).</li>
<li>Murphy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+amnion+epithelial+cells+do+not+abrogate+pulmonary+fibrosis+in+mice+with+impaired+macrophage+function%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Human amnion epithelial cells do not abrogate pulmonary fibrosis in mice with impaired macrophage function.</a> Cell Transplant. 21 (7), 1477-1492 (2012).</li>
<li>Wichers, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+exposing+rodents+to+resuspended+particles+using+whole-body+plethysmography%5BTitle%5D)+AND+%22Part.+Fibre+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A method for exposing rodents to resuspended particles using whole-body plethysmography.</a> Part. Fibre Toxicol. 13 (12), (2006).</li>
<li>Chong, B. T. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+bronchoconstriction+using+whole-body+plethysmograph%3A+comparison+of+freely+moving+versus+restrained+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Measurement of bronchoconstriction using whole-body plethysmograph: comparison of freely moving versus restrained guinea pigs.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 39 (3), 163-168 (1998).</li>
<li>Lizuka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+respiratory+function+using+whole-body+plethysmography+in+unanesthetized+and+unrestrained+nonhuman+primates%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Toxicol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Measurement of respiratory function using whole-body plethysmography in unanesthetized and unrestrained nonhuman primates.</a> J. Toxicol. Sci. 35 (6), 863-870 (2010).</li>
<li>McGregor, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+prenatal+exposure+to+carbon+monoxide+on+breathing+and+growth+of+the+newborn+guinea+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr.+Res%22%5BJournal%5D)">The effect of prenatal exposure to carbon monoxide on breathing and growth of the newborn guinea pig.</a> Pediatr. Res. 43, 126-131 (1998).</li>
<li>Lundblad, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reevaluation+of+the+validity+of+unrestrained+plethysmography+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A reevaluation of the validity of unrestrained plethysmography in mice.</a> J. Appl. Physiol. 93, 1198-1207 (2002).</li>
<li>Bartlett, D., Tenney, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+breathing+in+experimental+anemia%5BTitle%5D)+AND+%22Respir.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Control of breathing in experimental anemia.</a> Respir. Physiol. 10 (3), 384-395 (1970).</li>
<li>Malan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventilation+measured+by+body+plethysmography+in+hibernating+mammals+and+in+poiiulotherms%5BTitle%5D)+AND+%22Respir.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ventilation measured by body plethysmography in hibernating mammals and in poiiulotherms.</a> Respir. Physiol. 17 (1), 32-44 (1973).</li>
<li>Seifert, E. L., Mortola, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+circadian+pattern+of+breathing+in+conscious+adult+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Respir.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The circadian pattern of breathing in conscious adult rats.</a> Respir. Physiol. 129 (3), 297-305 (2002).</li>
<li>DuBois, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+for+measuring+airway+resistance+in+man+using+a+body+plethysmograph%3A+Values+in+normal+subject+and+in+patients+with+respiratory+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">A new method for measuring airway resistance in man using a body plethysmograph: Values in normal subject and in patients with respiratory disease.</a> J. Clin. Invest. 35 (3), 327-335 (1956).</li>
<li>Enhorning, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+plethysmography%2C+does+it+measure+tidal+volume+of+small+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+Physiol.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Whole-body plethysmography, does it measure tidal volume of small animals.</a> Can. J. Physiol. Pharmacol. 76 (10-11), 945-951 (1998).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+unrestrained+single-chamber+plethysmography+provide+a+valid+assessment+of+airway+responsiveness+in+allergic+BALB%2Fc+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Respir.+Res%22%5BJournal%5D)">Does unrestrained single-chamber plethysmography provide a valid assessment of airway responsiveness in allergic BALB/c mice.</a> Respir. Res. 10 (61), (2009).</li>
</ol>

Yazarlar, herhangi bir çıkar çatışması olmadığını beyan ederler. Yazarların açıklayacak herhangi bir çelişkisi yoktur.

Burada açıklanan tekniği pervasız ve anestezisiz farelerde solunum parametrelerinin değerlendirilmesi için invaziv olmayan bir yöntemdir. Bu protokolün güçlü minimal eserler ile uzunlamasına akciğer fonksiyonu ölçmek için sadeliği ve hassasiyet bulunur. Ancak, bazı sınırlamalar ve kritik adımlar prosedürü hakkında dikkat edilmesi vardır. Birincisi ve en önemlisi, fare beş saniye en az odasının içinde sakin kalmak gerekir. Fare solunum şeklini bozmak ve dolayısıyla değişken sonuçlar (Şekil 6a) sağlayacak...

Akciğer fonksiyon bozukluğu dünyada morbidite ve mortalitenin önde gelen nedenlerinden biridir. Durum öksürme, göğüs ağrıları ve nefes darlığı ile eşanlamlı yetersiz oksijen alışverişi ile karakterizedir. Ölüm, dünya çapında 1 ~% 10 solunum yolu hastalığı hesaplar. Dünya Sağlık Örgütü&#39;ne göre, ölüm oranları kalıcı sigara, çevre kirliliği ve mesleki irritanlara nedeniyle artmaya ayarlanır. UWBP güçlü geleneksel biyokimyasal övgü ve histolojik 2 analizleri akciğer fizyolojisi, çalışmaları için yararlı bir ektir. Akciğer değerlendirilmesi için kullanılan diğer prosedürler UWBP ile aynı avantajları sağlamamaktadır. İnvazif pletismografi hayvan 3,4 anesteziye edilmesi ve böylece elde edilen solunum ölçümleri mutlaka doğal bir duruma yansıtmayan gerektiren yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. Ayrıca, mekanik ventilasyon ve kimyasal sorunlar için gereksinim gelecek ölçümleri 3,4 engellemektedir.Solunum veri toplama için bir başka yöntem UWBP 5 ile karşılaştırıldığında solunum parametrelerinde değişiklik daha ince daha duyarlı zorla salınım, gereğidir. Zorla salınım, ancak, invaziv bir tekniktir ve veri toplama 5-7 hayvan sonlandırılmasını gerektirir. UWBP özel bir bölme içinde bir hayvana yerleştirilmesini kapsar. Inspirasyon sırasında, gelgit hava ısıtılır ve su buharı basıncı artırarak akciğerlerde nemlendirilmiş ve gaz 8 termal genleşmeye neden olur. Bu etki, pletismograf 8 odacığı içinde basıncında bir artışa neden hava hacmi net bir değişime yol açar. Tersi hayvandan bir solunum dalga oluşturarak ekspirasyon sırasında oluşur. Dalga formu analizi, daha sonra solunum iz ölçmek için kullanılır: solunum hızı (solunum / dk), toplam solunum döngü süresi (sn), inspirasyon / ekspirasyon zamanı (Ti / Te, sn) nedeniyle her tidal hacme basınç değişiklikleri (P T). <strong&gt; Şekil 1 solunum iz her ölçümler kökeni göstermektedir. Bu ölçümler hesaplamak için basit ve birden fazla solunum parametreleri, bu ölçümlerden elde edilebilir. Bu parametreler şunlardır: Gelgit hacmi (hava hacmi, normal nefes alma ve verme arasında taşınmış), dakika hacmi (dakika başına akciğerlere inhale gaz hacmi), inspiratuar görev döngüsü (toplam solunum döngüsü süresi ilham zamanın yüzdesi) ve Akış hızı (belli bir süre içinde solunan havadaki miktarı). UWBP hayvan modellerinde solunum fizyolojisi hassas, invazif olmayan, saptanması, ve solunum yolu hastalıkları ve akciğer fonksiyon 6,9 ilerlemesini ölçmek için kullanılabilir. Diğer teknikler, pletismografi aksine UWBP anestezi, sınırlama ve eserleri ve deneysel değişkenliği 6,9 üreten invaziv manipülasyon kullanımını önler. Anestezi, solunum baskılayabilirkalp hızını değiştirebilir ve 10 düzenlemek için zor olabilir. Corticosterone ve epinefrin 11,13 bırakın yoluyla kısıtlamaya nedeniyle ek stres solunum bir artış neden olur. UWBP en önemli özelliği uzunlamasına çalışmalar bu mükellef hale fizyolojik değerlendirme tekrarlanır. UWBP kuvvetle akciğer fizyolojisinin boyuna değerlendirilmesi için tavsiye ve gelecekteki solunum ilaç değerlendirilmesi için değerli bir beceri sunmaktadır. Bleomisin, ovalbümin, ve hipoksi çeşitli çalışmalarda solunum tehditlerine uyarılması için kullanılmıştır ve UWBP başarılı bir şekilde doğru bir değerlendirme akciğer fizyolojik 7,9,13-16 ölçmüştür. Açıklanan protokol standardı yetişkin fareler laboratuvar için tasarlanmıştır. Bununla birlikte, bu tür UWBP sıçan, gine domuzu ve insan-olmayan primatlarda 17-20 gibi diğer hayvanlar için adapte edilmiştir. UWBP sadece pulmoner disfonksiyon değerlendirilmesi ile sınırlı değildir, ancak, aynı zamanda, akciğer olgunlaşma 3 değerlendirilmesi için kullanılmıştır.UWBP çok yönlülük, basitlik ve uyarlık hayvanlarda akciğer fonksiyonunu değerlendirmek için mükemmel bir tekniği kurduk. Çeşitli yazılım (malzeme ve ekipman tabloya bakınız), bu prosedürü takip için gerekli olacaktır. Tecrübeli bilim adamı, 1 saat içinde bir fare ile bu protokolü gerçekleştirmek mümkün olacaktır.

<table><tbody><tr><td>LabChart 7 yazılımı (Macintosh için)</td><td>ADINSTRUMENTS</td><td>MLU60/7</td><td>protokol adımı 4'te kullanılır</td></tr><tr><td>PowerLab 8/30 (model ML870)</td><td>ADINSTRUMENTS</td><td>PL3508</td><td></td></tr><tr><td>Sekizli Köprü Amp (model ML228)</td><td>ADINSTRUMENTS</td><td>FE228</td><td></td></tr><tr><td>Siyah BNC - BNC kablosu (1 m)</td><td>ADINSTRUMENTS</td><td>MLAC01</td><td></td></tr><tr><td>Macintosh OS</td><td>Apple Inc.</td><td></td><td>Mac OS X 10.4 veya üstü</td></tr><tr><td>Surgipack Dijital Rektal Termometre</td><td>Vega Technologies</td><td>MT-918</td><td></td></tr><tr><td>Çim hacimsel basınç dönüştürücü PT5A</td><td>Çim Aletleri A.Ş.</td><td>Model numarası PT5A; seri No. L302P4.</td><td></td></tr><tr><td>1 ml Şırınga</td><td>Becton Dickinson (BD)</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>5 ml Serolojik şırınga pipetleri</td><td>Greiner Bio One</td><td>606160</td><td>Plastik boru ile bağlanır</td></tr><tr><td>Terazi/Tartılar</td><td>VWR International, Pty Ltd</td><td>SHIMAUW220D</td><td>0,1 gram çözünürlüğe sahip herhangi bir tartı terazisi</td></tr><tr><td>HM40 Nem ve sıcaklık ölçer</td><td>Vaisala</td><td>HM40A1AB</td><td></td></tr><tr><td>Barometre</td><td>Barometre Dünyası</td><td>1586</td><td></td></tr><tr><td>Laboratuvar hortumu</td><td>Dow Corning</td><td>508-101</td><td>Su kolonunu şırıngaya ve basınç dönüştürücüsüne bağlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>Silindirik Perspex Odası</td><td>Dynalab Corp.</td><td></td><td>İç boyutları aşağıdaki gibi olan özel yapım silindirik hazne: 50 mm (g) x 1.500 mm (u). Her iki taraf için 80 mm (u) x 80 mm (g) boyutlarında iki kapak vardır. Her kapağın ön yüzünde 50 mm derinliğinde 60 mm genişliğinde dairesel bir delik vardır. Bu, haznenin kapağa sığmasını sağlar. Haznenin sığacağı kapağın her deliğinin etrafına bir lastik halka takılmıştır. Şırınga ve basınç dönüştürücüsünün takılması için açıklıklar 5 mm çapındadır. Nem probunun takılması için açıklıklar 25 mm çapındadır.</td></tr><tr><td>%80 Etanol (4 L)</td><td>VWR International, Pty Ltd</td><td>BDH1162-4LP</td><td></td></tr></tbody></table>

yarı tüm vücut pletismografisi kullanılarak farelerde solunum fonksiyon Ölçme

Measuring Respiratory Function in Mice Using Unrestrained Whole-body Plethysmography

Solunum fonksiyon bozukluğu dünyanın önde gelen morbidite ve mortalite nedenleri ve mortalite oranları yükselmeye devam biridir. Kemirgen modellerinde akciğer fonksiyonunun kantitatif değerlendirilmesi gelecekteki tedavilerin geliştirilmesinde önemli bir araçtır. Yaygın invaziv pletismografisi ve zorla salınım dahil solunum fonksiyonunu değerlendirmek için kullanılan teknikler. Bu teknikler değerli bilgiler sağlarken, veri toplama nedeniyle anestezi ve / veya hayvanın invaziv enstrümantasyon için ihtiyacı eserler ve deneysel değişkenliği ile dolu olabilir. Buna karşılık, pervasız tüm vücut pletismografi (UWBP) solunum parametreleri analiz etmek ile kesin, non-invaziv, kantitatif bir yol sunar. Bu teknik, geleneksel teknikleri pletismografi yaygındır anestezi ve bağların kullanılmasını önler. Bu video donanımları kurmak, kalibrasyon ve akciğer fonksiyon kayıt dahil UWBP prosedürü gösterecektir. BuToplanan verileri analiz, aynı zamanda hayvan hareketten kaynaklanan deneysel aykırı ve eserleri tanımlamak için nasıl açıklayacağız. Bu tekniği kullanılarak elde solunumsal parametreler gelgit hacmi, dakika hacmi, inspiratuar görev döngüsü, inspiratuar akış hızı ve son kullanma zaman ilham zamanın oranı bulunmaktadır. UWBP özel becerileri güvenmek ve gerçekleştirmek için ucuz değildir. Potansiyel kullanıcılar için en çekici bir anahtar UWBP özelliği ise, aynı hayvan üzerinde akciğer fonksiyonunun tekrarlanan ölçümler gerçekleştirmek için yeteneğidir.

Bu prosedür doğru takip edildiğinde, tutarlı bir salınan iz veri analizi yazılımı oluşturulur. Prosedür basit bilgi işlem hesaplamalar ile kurulum. Listelenen solunum parametrelerini belirlemek 5 bir kontrol (sağlıklı) fare, uygun bir solunum iz temsil Şekil sonra birkaç dakika içinde bir solunum izini sağlar. Hayvan aktif hareket halinde değilken, uygun salınan veri üretilmektedir. UWBP kontrolü ve pulmoner fibrozis kohorttaki arasında akciğer fonksiyonunun...

Solunum fizyolojisinin değerlendirilmesi geleneksel hayvanın kısıtlama veya sedasyon gerektiren teknikleri, dayandığı etti. Yarı tüm vücut pletismografi Ancak, hayvan modellerinde solunum fizyolojisi hassas, non-invaziv, kantitatif analiz sağlar. Ayrıca, tekniği uzunlamasına çalışmalar için izin farelerde solunum değerlendirmesini tekrarlanan sağlar.

Yarı Tüm vücut pletismografisi kullanılarak Farelerde Solunum Fonksiyon Ölçme

Respiratory dysfunction is one of the leading causes of morbidity and mortality in the world and the rates of mortality continue to rise. Quantitative ...

Bu prosedürün genel amacı, kısıtlanmamış tüm vücut pletismografisi kullanarak bilinçli bir kemirgenden solunum parametrelerini ölçmektir. Bu işlem, öncelikle köprü amplifikatörünün kalibre edilmesiyle gerçekleştirilir. Kalibrasyon tamamlandıktan sonra, bir fare pletismografi haznesine yerleştirilir ve testten önce adapte olması sağlanır.Ardından, hazne içerisinde meydana gelen basınç değişiklikleri kaydedilir. Daha sonra, pletismografi sistemi kullanılırken elde edilen bilgilerden yola çıkarak birden fazla solunum parametresi hesaplanır. Sonuçlar, kısıtlanmamış tüm vücut pletismografisinin kemirgenlerde akciğer fonksiyonlarının değerlendirilmesi için güvenilir bir yöntem olduğunu göstermektedir.Bu tekniğin, invaziv pletismografi gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajları, hayvanların anesteziye alınmamasıdır; bu da anestezi kaynaklı artefaktlarla karşılaşılmadığı anlamına gelir. Ayrıca, bu protokolün non-invaziv doğası sayesinde boylamsal ölçümler yapılmasına olanak tanır. Genel olarak, bu tekniği ilk kez kullanan kişiler, hayvanların pletismografi haznesine alıştırılması için gereken süreyi olduğundan az tahmin etme eğilimindedirler.Başlamak için, veri toplama cihazı köprü ampl

measuring-respiratory-function-mice-using-unrestrained-whole-body

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Alerjik astım Deneysel fare modelleri hastalığı patogenezinde okuyan ve yeni ilaçlar geliştirmek için yeni olanaklar sunar. Bu modeller de alerjik immün yanıt, hava yolu inflamasyonu ve pulmoner patofizyolojisi yöneten ölçüm faktörleri için uygundur.

Alerjen Bağlı Astım murin Modeli

SCIREQ Inc, Montreal, Qc; İşbu Protokol solunum sistemi mekaniği ölçümleri yanı sıra zorla salınım tekniği kullanarak farelerde inhale metakoline hava yolu duyarlılığı değerlendirilmesi (flexiVent yürütmek için gerekli prosedürleri ayrıntılı bir adım adım açıklamasını sağlar , Kanada).

Zorla Salınım Tekniği kullanarak Fare Solunum Sistemi Mekanik Değerlendirilmesi

Bu çalışma, bir implante telemetri cihazı ile tüm vücut pletismografisi ve elektromiyografi ile hastalığın ilerlemesi boyunca serbestçe davranıyor amiyotrofık ​​lateral skleroz (ALS), fare modelinde havalandırma ve solunum kası etkinliği tekrarlanan ölçümler için bir yöntem sağlar.

Nöromusküler Hastalığının Fare Modelinde Solunum Kas Aktivitesi ve Havalandırma tekrarlanan ölçüm

Obezite sıklığı artıyor ve kronik akciğer hastalıkları riskini artırır. Temel mekanizmaları ve Önleme stratejileri, iyi tanımlanmış hayvan kurmak için modelleri ihtiyaç vardır. Burada, üç yöntem (glikoz tolerans testi, vücut pletismografisi ve akciğer fiksasyon) obezite etkisi farelerde akciğer sonuçlar üzerine eğitim sağlamak.

Mayi glikoz tolerans testi, akciğer işlev ölçümü ve akciğer fiksasyonu obezite ve pulmoner sonuçlar üzerine Engelli metabolizma etkisini incelemek için

Çift-odası pletismografisi tarafından bilinçli farelerde solunum işlevin sonucunu önerilen yordamları ayrıntılı bir açıklama sağlamak için mevcut makale hedefidir.

Solunum fonksiyon çift-odası pletismografisi tarafından bilinçli farelerde değerlendirilmesi

Unrestrained barometrik plethysmography uyanık farelerde solunum paterni ölçmek için kullanılır. Standart bir protokol altında 15 s segmentleri sessiz nefes uzun bir süre benzer değerleri görüntülemek olduğunu göstermektedir. Bu metodoloji aynı zamanda apne ve artırılmış nefeslerin haznedeki ilk saat boyunca ölçülmesine olanak sağlar.

Kontrolsüz Barometrik Plethysmography ile Senescent Farelerde Nefes Alma Şekli Elde Etme Yöntemi

Bu protokol, bakteriyel solunum yolu hastalığının ilerlemesini invaziv olmayan bir şekilde izlemek için Basitleştirilmiş Tüm Vücut Pletismografi aparatının yapımını ve kullanımını sunar.

Solunum Melioidozu Sırasında Akciğer Fonksiyonunu Karakterize Etmek için Basitleştirilmiş Tüm Vücut Pletismografisi

Vezikül serbest kinetiği ölçmek için yeteneği nörotransmisyon bazı temel içgörü sağlamak yardımcı olabilir. Burada kırmızı floresan boya FM 4-64 etiketli veziküller presinaptik hipokampal nöron kültürlerinde vezikül serbest hızını ölçmek için gerçek zamanlı görüntüleme kullanılır.

Nöronlar FM Etiketleme kullanarak ölçüm ekzositoz

CODA 8-Kanal High Throughput Non-Invasive Kan Basıncı sistem aynı anda 8 fareler ya da sıçanlar için kan basıncı ölçer. Bu kuyruk manşet sistemi, kuyruk kan hacminin belirlenmesinde kan basıncını ölçmek için Toplu Basınçlı Kayıt (VPR) kullanır.

Cilt Basınç Kaydı, Kuyruk manşet Yöntemi kullanarak Fare Tansiyon Ölçüm

Sitokrom c oksidaz / sodyum dehidrogenaz (COX / SDH) çift etiketleme yöntemi, doğrudan bir görünüm için taze dondurulmuş doku kesitlerinde mitokondriyal solunum enzim eksiklikleri sağlar. Bu basit bir histokimyasal teknik ve mitokondriyal hastalıklar, yaşlanma, yaşlanma ile ilişkili bozukluklar araştıran yararlıdır.

Sitokrom kullanarak Mitokondriyal Solunum Fonksiyon Görselleştirme C Oksidaz / Succinat Dehidrogenaz (COX / SDH) Çift-etiketleme Histokimya

Öğrenin farelerde solunum fonksiyonlarını ölçmek için kısıtlama gerektirmeyen tüm vücut pletismografisi yöntemini. Bu invaziv olmayan teknik, bilinçli kemirgenlerde tekrarlanabilir solunum parametreleri değerlendirmesi sağlar.

Yarı Tüm vücut pletismografisi kullanılarak Farelerde Solunum Fonksiyon Ölçme

Daha fazla video keşfet