Name: Travmatik Beyin Hasarı için Kontrollü Kortikal Etki Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-05T16:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 30 s
Description: Öğrenin, farelerde kontrollü kortikal etki modeliyle travmatik beyin hasarı oluşturma ve görüntüleme yöntemlerini. Bu teknik, tutarlı yaralanma oluşturarak nörolojik patolojiyi incelemeye olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Indiana Omurilik ve Beyin Hasarı Araştırma Hibeler (SCBI 200-12) fon tarafından desteklenen, Ralph W. ve Grace M. Showalter Araştırma Ödülü, Indiana Üniversitesi Biyolojik Araştırma Grant, NIH hibe RR025761 ve 1R21NS072631-01A.

Hayvan Bakımı Erkek C57 BL / 6 fareleri, grup yer alır ve yiyecek ve su ad libitum erişmek için serbest olan bir 12/12 saat ışık / karanlık döngüsünde tutuldu. Bu protokolde kullanılan hayvanlar 10-12 haftalık oldular. Tüm prosedürler Indiana Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanan protokoller altında yapıldı. 1.. Cerrahi Hazırlık <ol><li> Bir ketamin / ksilazin karışımı (87.7 mg / ml Ketamin ve 12.3 mg / ml Ksilazin) kullanılarak fare anestezisi ve IP enjeksiyon yoluyla (1 ml / kg) uygulanması. </li><li> Kulakları arasındaki fare başını tıraş. </li><li> Ameliyat sırasında kurumasını önlemek için fare gözlerine petrol bazlı bir jöle uygulanır. </li><li> % 10 iyot ile traşlı bölgeyi temizleyin. Sonra iyot temizlemek için% 70 etanol kullanımı. </li><li> Kulak çubukları ve lokma plaka kullanılarak stereotaktik çerçeve içinde fare kafasını düzeltin. Beyin kararlı olduğundan emin olun. </li></ol> 2. Kranyektomi </p&gt; <ol><li> Makas ile baş ortasında uzunlamasına bir kesi olun. Sol tarafında kapalı cilt tutmak için bir hemostat kullanın. </li><li> Kafatası açığa çıkarmak için kemik üzerindeki kan ve doku kaldırmak için bir pamuk uçlu bir aplikatör kullanın. Maruz kafatası 1 dakika kurumasını bekleyin. </li><li> Baskı uygulamak ve kafatası hareketsiz kalmasını sağlamak için forseps kullanın. Anatomik Simgesel Lambda (kaudal yönü) ve bregmaya (frontal yönü) belirleyin. 4 mm çapında ve uzak orta hat 0.5 mm ve Lambda bregma merkezinde bir daire çizin. </li><li> Işaretli daire boyunca kesmek için bir matkap kullanın. Nazikçe kemik tozları üflemek. Dura mater zarar görmesini önlemek için kemik yoluyla tamamen delmek yok. </li><li> Kemiği kaldırmak ve dura mater maruz forseps kullanın. </li></ol> 3. Impaction Darbe sistem etkisi parametrelerini ayarlamak için bir kontrol kutusu, çarpmasının gerçekleştirmek için bir çalıştırıcı ve hareket güvenli bir stereotaktik çerçeve içeriretki için uator ve fare kafası. <ol><li> Ameliyat öncesi 3 m / sn &#39;ye aktüatörün hızım önceden ayarlanmıştır. </li><li> Farklı bir yaralanma ciddiyetinin uyarılması için farklı deformasyon derinliği önceden ayarlanmıştır. 0,0-0,2 mm, 0.5-1.0 mm ve 1,2-2,0 mm deformasyon derinlikleri sırasıyla, hafif, orta ve ağır TBIs neden olacaktır. Bu protokol, 3 m / sn hızı ile 1 mm bir deformasyon derinliğe sahip bir orta şiddetli beyin hasarı ulaşmak için nasıl açıkladı. </li><li> Stereotaktik çerçeve içinde sahibine Aktuatörü takın ve açık kafatası alanının merkezinde aktüatör (3 mm çapında) yuvarlak, yassı ucu sabitlemek için hareket mikromanipülatörler kullanın. Daha sonra darbe yeri yüzeyine bir açı paralel ucu ayarlayın. </li><li> Ucu darbe sitenin yüzeyine değene kadar uzanan modelinde aktüatörünü aşağı hareket ettirerek sıfır noktası kurmak. Sonra sıfıra stereotaktik kontrol panelindeki Z kanalını ayarlayın. </li><li> Çarpma ucu geri çekinAynı anda 1 mm aşağı aktüatörünü hareket ederken. </li><li> Yara bölgesi vurur ve 1 mm&#39;lik bir deformasyon derinliği elde etmek için etki düğmesine basın. </li></ol> 4. Yaralanma Sitesi Kapanış <ol><li> Herhangi bir kan aşağıdaki etkisini kaldırmak için pamuk uçlu aplikatörler kullanın, ancak yaralanma alana dokunmayın. </li><li> Vücut ısısını korumak için sıcak bir pad üzerinde fare yerleştirin. </li><li> Kanama durduktan sonra, kapalı yara sütür. Temiz bir kafes içine geri hayvan koyun ve sıcak ped gecede ameliyat kurtarmak için izin verir. </li><li> Yönetme Buprenorfin 0.05-0.10 mg / kg SQ ameliyattan sonra 2 gün boyunca her 8-12 saat. </li></ol>

<ol><li>Menon, D. K., Schwab, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Position+statement%3A+definition+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Phys+Med+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Position statement: definition of traumatic brain injury.</a> Arch Phys Med Rehabil. 91 (11), 1637-1640 (2010).</li>
<li>Lighthall, J. W., Dixon, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Experimental models of brain injury.</a> J Neurotrauma. 6 (2), 83-97 (1989).</li>
<li>Dixon, C. E., Clfton, G. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+controlled+cortical+impact+model+of+traumatic+brain+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A controlled cortical impact model of traumatic brain injury in the rat.</a> J Neurosci Methods. 39 (3), 253-262 (1991).</li>
<li>Scheff, S. W., Baldwin, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morris+water+maze+deficits+in+rats+following+traumatic+brain+injury%3A+lateral+controlled+cortical+impact%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Morris water maze deficits in rats following traumatic brain injury: lateral controlled cortical impact.</a> J Neurotrauma. 14 (9), 615-627 (1997).</li>
<li>Smith, D. H., Soares, H. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+of+parasagittal+controlled+cortical+impact+in+the+mouse%3A+cognitive+and+histopathologic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A model of parasagittal controlled cortical impact in the mouse: cognitive and histopathologic effects.</a> J Neurotrauma. 12 (2), 169-178 (1995).</li>
<li>Hannay, H. J., Feldman, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+a+controlled+cortical+impact+model+of+head+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Validation of a controlled cortical impact model of head injury in mice.</a> J Neurotrauma. 16 (11), 1103-1114 (1999).</li>
<li>Natale, J. E., Ahmed, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+expression+profile+changes+are+commonly+modulated+across+models+and+species+after+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Gene expression profile changes are commonly modulated across models and species after traumatic brain injury.</a> J Neurotrauma. 20 (10), 907-927 (2003).</li>
<li>Anderson, R. W., Brown, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+mechanics+and+axonal+injury+in+a+sheep+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Impact mechanics and axonal injury in a sheep model.</a> J Neurotrauma. 20 (10), 961-974 (2003).</li>
<li>Lighthall, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+cortical+impact%3A+a+new+experimental+brain+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Controlled cortical impact: a new experimental brain injury model.</a> J Neurotrauma. 5 (1), 1-15 (1988).</li>
<li>Chen, S., Pickard, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+cellular+pathology+after+controlled+cortical+impact+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Time course of cellular pathology after controlled cortical impact injury.</a> Exp Neurol. 182 (1), 87-102 (2003).</li>
<li>Long, J. B., Bentley, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blast+overpressure+in+rats%3A+recreating+a+battlefield+injury+in+the+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Blast overpressure in rats: recreating a battlefield injury in the laboratory.</a> J Neurotrauma. 26 (6), 827-840 (2009).</li>
<li>Clark, R. S., Schiding, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+accumulation+after+traumatic+brain+injury+in+rats%3A+comparison+of+weight+drop+and+controlled+cortical+impact+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Neutrophil accumulation after traumatic brain injury in rats: comparison of weight drop and controlled cortical impact models.</a> J Neurotrauma. 11 (5), 499-506 (1994).</li>
<li>Werner, C., Engelhard, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of traumatic brain injury.</a> Br J Anaesth. 99 (1), 4-9 (2007).</li>
<li>Colicos, M. A., Dixon, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed%2C+selective+neuronal+death+following+experimental+cortical+impact+injury+in+rats%3A+possible+role+in+memory+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Delayed, selective neuronal death following experimental cortical impact injury in rats: possible role in memory deficits.</a> Brain Res. 739 (1-2), 111-119 (1996).</li>
<li>Raghavendra Rao, V. L., Dogan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury+leads+to+increased+expression+of+peripheral-type+benzodiazepine+receptors%2C+neuronal+death%2C+and+activation+of+astrocytes+and+microglia+in+rat+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury leads to increased expression of peripheral-type benzodiazepine receptors, neuronal death, and activation of astrocytes and microglia in rat thalamus.</a> Exp Neurol. 161 (1), 102-114 (2000).</li>
<li>Gao, X., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moderate+traumatic+brain+injury+promotes+neural+precursor+proliferation+without+increasing+neurogenesis+in+the+adult+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Moderate traumatic brain injury promotes neural precursor proliferation without increasing neurogenesis in the adult hippocampus.</a> Exp Neurol. 239, 38-48 (2013).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Başarılı bir CCI neden olmak için bir elektronik mıknatıs etki sistemi ile tutarlı TBIs üretilmesi için en önemli adımlar şunlardır: 1) sabit bir şekilde stereotaktik çerçeve içinde fare baş sabitlenmesi; 2) fareler arasında kemik penceresinin aynı boyut ve kraniektomi üretilmesi sırasında bunun altında dura zarar vermeden kemik çıkarılması; 3) doğru açık alanın merkezinde darbe ucu konumlandırılması ve çarpmadan önce sıfır noktasını tesis. Bir fare kafası çok sıkı çarpmadan önce stereotakti...

Travmatik beyin hasarı (TBI) bir beyin fonksiyonlarında değişiklik, ya da bir dış kuvvet 1 kaynaklanan beyin patoloji diğer delil olarak tanımlanır. TBIs özellikle Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde ve dünya çapında önemli bir sağlık sorunu olmaya devam etmektedir. Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezlerine göre, en az 1.7 milyon TBIs bütün yaralanmalı bağlı ölümlerin% 30.5 sonuçlanan Birleşik Devletleri&#39;nde yılda meydana gelir. 2000 yılında, doğrudan tıbbi maliyetleri ve TBIs dolaylı maliyetler tek başına ABD&#39;de tahmini 76500000000 $ olarak gerçekleşti. Önceki yıllarda teknolojik gelişmeler ve tedavi TBIs muzdarip olanlar için yaşam kalitesini ve uzunluğunu geliştirilmiş olmasına rağmen, etkili bir ilaç veya koruyucu tedaviler şu anda mevcut. Nedeniyle karmaşıklığı ve doku lezyonları, hücre ölümü ve akson dejenerasyon da dahil olmak üzere TBIs, geniş kapsamlı etkileri, herhangi bir iki yaralanma aynıdır; Böylece, hayvanlar için hiçbir geçerli TBI modeli doğru üretirTBI tüm yönleri olarak insanlarda görülen. Ancak, hayvan modelleri daha TBIs klinik belirtilerini anlamak umuduyla TBI çeşitli etkilerini araştırmak için gerekli hemen hemen aynı yaralanmaları üretme yeteneği sağlarlar. Kontrol kortikal darbe (CCI) modeli bir hayvanın maruz dura fiziksel etki sunmak için bir darbe sistemi kullanır. Bu hafif insanlar tarafından hissedilen şiddetli benzer değişen TBIs uyarmaktadır. Bu yaralanma ilk olarak gelincik 2 özelliği ve daha sonra 3,4-sıçan, fare 5-7 ve koyun 8 kullanılmak üzere uyarlanmıştır. İlk nitelenmesi, yaralanma site orta hat 2,9 ve lateral kortekse 10 üzerinden hem yerleştirildi. CCI TBIs için ve potansiyel etkisini araştıran tedavi kolay ve doğru bir metot sağlar. CCİ modeli, sıvı perküsyon ve ağırlık düşümüne ilave olarak modelleri işbirliği vardırmmonly TBIs üretmek için kullanılır. Ancak, bu modeller daha az yaralanma parametreleri üzerinde kontrol, insan TBIs görmedim eden histopatolojik değişiklikleri üreten, ve farelerde 3,5,10 kazayla ölüm insidans dahil mevcut sınırlamalar,. Patlama dalgası modeli aynı TBIs üretmek için kullanılır. Patlama dalgası modeli mekanik etkisi aşağıdaki görülmüştür eden histopatolojik değişiklikleri yeniden olmamasına rağmen, bu modeli doğru özellikle askeri personel 11 deneyimli TBIs üretiyor. Kontrollü kortikal etki modeli nedeniyle, zaman, hız ve etki 5 derinliği olarak deformasyon parametreleri üzerinde tam kontrolü için kontrol etmek kolaydır. Böyle bir doğruluk daha uygulanabilir bütün bir hayvan grubunun genelinde yaklaşık aynı yaralanmaları kopyalayan yapar. En önemlisi, CCI insan TBIs 12 görülen özelliklere sahip TBIs üretir. Ancak, patolojik chan tam spektrum üreyen tümüyle başarılı tek bir hayvan modeli vardırTBI sonrası gözlenen Ges. Daha fazla araştırma tamamen TBI sonra meydana akut ve kronik değişiklikleri ortaya çıkarmak için gereklidir. Birincil ve ikincil yaralanmalar: yaralanmaları iki tip bir TBI sonrasında görülmektedir. Birincil yaralanma çarpma anında meydana gelir ve terapötik tedaviler duyarlı değildir; Ancak, ilk hasardan sonra devam ikincil yaralanmalar tedavilere 13 tabidir. Kontrollü kortikal etki modeli böylece araştırmacılar ikincil yaralanma potansiyel uzun süreli etkileri için TBI etkilerini ve potansiyel terapötik tedavileri araştırmak için izin, birincil yaralanma üretir. CCI modelini kullanarak potansiyel araştırma alanları nöronal ölüm, serebral ödem, nöron, vasküler etkileri, eden histopatolojik değişiklikleri ve hafıza açıkları ve 3,13-16 daha fazlasını içerir.

<table><tbody><tr><td>Povidon-iyot% 7.5</td> <td>Purdue ürünü LP</td><td></td><td>Cerrahi önlük</td></tr><tr><td>Pamuk uçlu aplikatörler</td><td>Henry Schein</td><td>100-6015</td><td>Kan ve kalıntıları çıkarın</td></tr><tr><td>Makas</td><td>İnce Bilim Araçları</td><td>14084-08</td><td>Cerrahi</td></tr><tr><td>Forcept</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11293-00</td><td>Cerrahi</td></tr><tr><td>Hemostat</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>13021-12</td><td>Cerrahi</td></tr><tr><td>Şarj Edilebilir Akülü Mikro Matkap</td><td>Çalma</td><td>58610</td><td>Kemik penceresi oluşturmak için Çapaklarla birleştirin</td></tr><tr>Mikro Matkap <td>Güzel Bilim Araçları</td><td>için Çapaklar</td><td>19007-05</td><td></td></tr><tr><td>Sütür monofilament</td><td>Ethicon</td><td>G697</td><td>Sütür</td></tr><tr><td>tert-Amil alkol</td><td>Sigma</td><td>152463-250ML</td><td>%2.5 Avertin Yapımı</td></tr><tr><td>2,2,2-Tribromoetanol</td><td>Sigma</td><td>T48402-25G</td><td>%2.5 Avertin Yapma</td></tr></tbody></table>

travmatik beyin hasarı için kontrollü kortikal etki modeli

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Her yıl bir milyondan fazla Amerikalı travmatik beyin hasarı (TBI) geçiriyor. Dünya çapında TBH insidansı ile birleştiğinde, fiziksel, duygusal, sosyal ve ekonomik etkiler şaşırtıcıdır. Bu nedenle, TBH'nin etkileri ve etkili tedaviler hakkında daha fazla araştırma yapılması gerekmektedir. Kontrollü kortikal etki (CCI) modeli, hafif ila şiddetli arasında değişen travmatik beyin yaralanmalarına neden olur. Bu yöntem, bir kraniektomi sonrasında maruz kalan sağlam bir duraya mekanik enerji vermek için sert bir çarpma tertibatı kullanır. Çarpma, önceden belirlenmiş bir deformasyon derinliği elde etmek için belirli bir hızda kesin parametreler altında yapılır. Kilo kaybı ve sıvı perküsyonu gibi diğer TBI modelleri mevcut olsa da, CCI daha doğru, kontrol edilmesi daha kolaydır ve en önemlisi, insanlarda görülenlere benzer travmatik beyin yaralanmaları üretir. Bununla birlikte, şu anda hiçbir TBI modeli, insan hastalarda görülenlerle aynı patolojik değişiklikleri yeniden üretememektedir. CCI modeli, TBH'nin nöronal ölüm, hafıza açıkları ve serebral ödem gibi kısa ve uzun vadeli etkilerinin yanı sıra TBH için potansiyel terapötik tedavilerin araştırılmasına izin verir.

Kontrollü kortikal etki modeli hafif şiddetli şiddeti arasında değişen TBIs üretir. Post-darbe kafatası şişme miktarı, kanama, ve darbe yerinde kranial bozulma hızı ve deformasyon derinliği parametreleri kaynaklanan yaralanma şiddetinin ortaya çıkaracaktır. Hafif TBIs nedeniyle sınırlı dura ihlali darbe site ve hafif kanama da kranial şişmesine neden. Bir orta TBI kranial şişme sergiler nedeniyle impaksiyon üzerine dura ihlali (Şekil 1) artmış kanama. Orta ve şiddetli TBI arasındaki fark, bir mikroskop ...

Travmatik beyin yaralanmaları (TBH'ler) ciddi bir sağlık sorunu olmaya devam etmektedir. Kontrollü kortikal darbe cerrahisi modeli kullanılarak, TBH'nin etkileri ve olası tedavi yöntemleri üzerine araştırmalar yapılabilir.

Travmatik Beyin Hasarı için Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

Bu prosedürün genel amacı, kontrollü kortikal etki modelini kullanarak travmatik beyin yaralanmaları üretmektir. Bu, önce bir farenin uyuşturulması ve ameliyat için hazırlanmasıyla gerçekleştirilir. İşlemin ikinci adımı C kraniektomi yapmaktır.Üçüncü adım, darbe sistemini istenen parametrelerle kurmaktır. Son adım, açıkta kalan beyni etkilemektir. Sonuç olarak, sonuçlar, diseke edilen beynin görüntülenmesi ve immünohistokimya yoluyla kortikal yaralanma boşluğunu gösterebilir.Genel olarak, bu yönteme yeni olan kişiler, tutarlı beyin yaralanmaları oluşturmayı zor buldukları için mücadele edeceklerdir. Prosedürü göstermek, laboratuvarımızda bir araştırma görevlisi olan Dr.Shang Gao olacaktır. Anestezi uygulandıktan sonra, bir fare başını kulakların arasına tıraş eder, açıkta kalan cildi alternatif %10 iyot ve %70 etanol fırçalarıyla temizler.Ardından, kurumaması için gözleri yağladığınızdan emin olun. Ardından, kulak çubuklarını ve ısırma plakasını kullanarak fareyi stereotaktik çerçeveye sabitleyin. Baş çok stabil olmalıdır.Kraniektomiye makas kullanarak başın ortasında uzunlamasına bir kesi ile başlayın. Daha sonra pamuk uçlu bir aplikatör ile cildi yana tutmak için bir kanama durdurucu kullanın Kafatası kemiğini silin, temizleyin ve açığa çıkarın. Devam etmeden önce bir dakika kurumasını bekleyin.Kuruduktan sonra kafatasına baskı uygulamak için forseps kullanın. Preparatın hareketsiz kaldığından emin olun. Lambda ve breg ma yer işaretlerini tanımlayın.Daha sonra merkezlerine, orta çizgiden yarım milimetre uzakta olan dört milimetre çapında bir daire çizin. Daha sonra, kemiğin kırılmasını kolaylaştırmak için işaretli daire boyunca delin, ancak dura mater'e nüfuz etmeyin. Tozu gerektiği gibi temizleyin.Sonra kemik çemberini kırmak için forseps kullanın ve dura mater'i açığa çıkarın. C kraniektomi en kritik adımdır. Tutarlı kemik penceresi parametrelerinin üretilmesi, tutarlı yaralanma şiddetine izin verecektir.Uygun matkap boyutunun, hızının ve kuvvetinin iyi kullanıldığından emin olun. Delme Darbe sistemi, kafatasına darbeyi gerçekleştirmek için bir aktüatör kullanır ve ayarlanması gereken bazı parametrelere sahiptir. Aktüatörün hızını saniyede üç metreye ayarlayın.Ardından, aktüatörü stereotaktik çerçeveye sabitleyin. Mikro manipülatörleri kullanarak, üç milimetre genişliğindeki aktüatörü açık kafatası alanına yerleştirin. Ardından aktüatörün ucunu çarpma yüzeyine paralel olacak şekilde ayarlayın.Sıfır noktasını ayarlamak için aktüatörü uzatın ve uç çarpma yerine değene kadar indirin. Çerçevede karşılık gelen Z kanalını sıfıra ayarlayın. Şimdi bu durumda ucu bir milimetre geri çekin.Ardından, aktüatörü hareket ettirecek uygun travmatik beyin hasarı için deformasyon derinliğini ayarlayın. Ardından, darbeden sonra yaralanmayı yapmak için darbe düğmesine basın. Pamuk uçlu bir aplikatörle kanı temizleyin, ancak yaralanmaya dokunmayın.Fareyi ılık bir pede taşıyın ve yaralanmayı izleyin Kanama durduğunda, yarayı dikin, ardından fareyi ılık bir ped üzerinde temiz bir kafese geri koyun ve gece boyunca orada iyileşmesine izin verin. Darbeden sonra, şişlik, kanama ve kraniyal distorsiyon miktarı, yaralanmanın gerçek ciddiyetini ortaya çıkarır. Duranın sınırlı ila tam ihlali, kanama miktarında büyük bir fark yaratacak ve hafif ila orta derecede bir TBI yapacaktır.Dokuyu sabitlemek ve mikroskopi ile görüntülemek, orta ve şiddetli bir TBH'yi kolayca ayırt eder. İşte nis. L boyama, bir kontrolü, korteksin derinliklerine uzanan orta derecede bir TBIA boşluğu alan bir fareyle karşılaştırmak için kullanılır.Bu model, bu tür iftiraların yanı sıra beyin yaralanmalarının neden olduğu nöronal ölüm ve diğer histopatolojik değişiklikleri araştırmak için kullanılabilir Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde uygulanırsa 15 dakika içinde tamamlanabilir.

controlled-cortical-impact-model-for-traumatic-brain-injury

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu video, bir fare modelinde travmatik beyin hasarını (TBI) indükleme prosedürünü göstermektedir. Kafatasında bir açıklık oluşturmak için açıkta kalan bir kafatasına sahip anestezi uygulanmış bir fare alınır ve daha sonra bir darbe cihazı kullanılarak kontrollü bir kortikal yaralanma indüklenir. Yaralanma beyin dokusuna zarar vererek bilişsel işlev ve motor koordinasyonun bozulmasına neden olur.

Bir çarpma cihazı kullanarak travmatik beyin hasarının bir fare modelini oluşturma

Beyin sarsıntısı, travmatik beyin hasarının en yaygın tipini sunar. Bu nedenle, hastalarda bir yaralanmanın önemli özelliklerini çoğaltan tekrarlayan bir sarsıntılı hayvan modeli, sarsıntıyı titiz, kontrollü ve verimli bir şekilde incelemek için bir araç sağlayabilir.

Farelerde Bir Tekrarlanan Concussive Kafa Travması Modeli

Bu protokol, Açık kafatası travmatik beyin hasarı ve kültür insan kaynaklı pluripotent kök hücre türeyen hücrelerin transplantasyonu için bir fare modeli için metodolojileri yaralanma sitesine gösterir. Bu prosedürlerden gelen sonuçların davranışsal ve histolojik testleri de kısaca açıklanmıştır.

Insan kaynaklı pluripotent kök hücre türetilen nöral hücrelerin terapötik transplantasyonu ile fare beyin yaralanması kontrollü Kortiik darbe modeli

Burada açık kafa kontrollü kortikal darbe ile murine travmatik beyin hasarı indüksiyon için bir protokol açıklar.

Travmatik Beyin Hasarı İndüksiyonu için Kontrollü Kortikal Etki Murine Modeli

Serebral kontüzyonun eşlik ettiği intraparankimal kanama ve nöroinflamasyon ciddi ikincil beyin hasarını tetikleyebilir. Bu protokol, araştırmacıların kanama, kontüzyon ve travma sonrası bağışıklık tepkilerini incelemelerine ve potansiyel terapötikleri keşfetmelerine olanak tanıyan fare kontrollü bir kortikal etki (CCI) modelini detaylandırır.

Travmatik Kanama, Konkontüzyon ve Nöroinflamasyon için Preklinik Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Protokol, bir fare modelinde hafif travmatik beyin hasarını tanımlar. Özellikle, hafif bir orta hat kapalı kafa travmasını indüklemek için adım adım bir protokol ve hayvan modelinin karakterizasyonu tam olarak açıklanmaktadır.

Farelerde Hafif Travmatik Beyin Hasarının Elektromanyetik Kontrollü Kapalı Kafa Modeli

Burada, tekrarlanan hafif travmatik beyin hasarının (r-mTBI) hipokampustaki sinaptik plastisite üzerindeki etkilerini incelemek için uyanık bir kapalı kafa travması modelinin nasıl kullanılabileceği gösterilmiştir. Model, hastalarda r-mTBI'nın önemli özelliklerini çoğaltır ve in vitro elektrofizyoloji ile birlikte kullanılır.

Hafif Travmatik Beyin Hasarının Uyanık Kapalı Kafa Travması Modelini Kullanarak Sinaptik Plastisitedeki Değişikliklerin Değerlendirilmesi

Bu protokol, kapalı kafa travması (CHI) yöntemiyle indüklenen tekrarlayan hafif travmatik beyin hasarının (rmTBI) modifiye edilmiş bir fare modelini sunar. Yaklaşım, meninkslere maruz kalmanın yaygın olarak neden olduğu iltihabı azaltmak için inceltilmiş bir kafatası penceresi ve sıvı perküsyonunun yanı sıra kemirgenlerde rmTBI modellemesinde gelişmiş tekrarlanabilirlik ve doğruluk içerir.

İnceltilmiş kafatası penceresi ve sıvı perküsyonu içeren tekrarlayan hafif travmatik beyin hasarının modifiye edilmiş fare modeli

Burada, akut fazda korunmuş beyin yapısı ve uzun süreli beyin atrofisi ile komplike olmayan hafif travmatik beyin hasarının nörogörüntü sonucunu kopyalayan bir kapalı kafa travması hayvan modeli oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Boylamsal manyetik rezonans görüntüleme, kanıt için kullanılan birincil yöntemdir.

Kilo Düşürme Yöntemi ile Modifiye Edilmiş ve Manyetik Rezonans Görüntüleme ile Kanıtlanmış Komplike Olmayan Hafif Travmatik Beyin Hasarı Modelinin Geliştirilmesi

Ventilatöre bağlı akciğer hasarı için bir fare modeli akut akciğer hasarı incelemek için önemli bir...

Farelerde Akut Akciğer Hasarı tetikleyebilecek Basınç Kontrollü Havalandırma

Öğrenin, farelerde kontrollü kortikal etki modeliyle travmatik beyin hasarı oluşturma ve görüntüleme yöntemlerini. Bu teknik, tutarlı yaralanma oluşturarak nörolojik patolojiyi incelemeye olanak tanır.

Travmatik Beyin Hasarı için Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Daha fazla video keşfet