İskelet Kası Hastalıkları Açık Saha Aktivite İzleme Sisteminin Kullanılması Davranış ve Hareket Ölçümleri

Bu prosedürün genel amacı, açık alan ortamında farelerin hareket ve davranışsal aktivitesini ölçmektir. İlk adım, fareleri art arda dört gün boyunca açık alan odasına alıştırmaktır. İklimlendirmeyi takiben, davranışsal aktivite özel bir yazılım kullanılarak kaydedilir.

Veriler her gün dışa aktarılır ve kalite kontrol amacıyla gözden geçirilir. Testten sonra, veriler birden fazla davranışsal parametre için analiz edilir. Sonuç olarak, açık alan aktivitesi, kontrol ve test hayvanları arasındaki farkları invaziv olmayan bir şekilde göstermek için kullanılır.

Bu non-invaziv yöntemin avantajı, genel yaşam kalitesinin boylamsal bir şekilde genel bir değerlendirmesini sağlamasıdır. Bu, klinik sonuç ölçüsü olarak kullanılan altı dakikalık yürüme testini taklit eder ve en iyi sonuçlar için potansiyel hedef dışı ilaç etkileri hakkında bilgi sağlar. Tüm hayvanların uygun şekilde iklimlendirildiğinden ve testin her gün aynı saatte yapıldığından ve eşit şekilde aydınlatılan sessiz, sıcaklık ve nem kontrollü bir oda olduğundan emin olun.

Başlamak için fareleri test odasına getirin ve yaklaşık 10 dakika alışmalarına izin verin. Bu süre zarfında odadan çıkın. Ardından, odaya dönün ve aktivite odalarını açın.

Veriler şu anda toplanmıyor olsa da, bu test ortamını taklit edecektir. Bu protokolde kullanılan aktivite odası, odayı kadranlara bölen bir merkez bölücü içerir. Bölücünün haznenin içinde düzgün şekilde hizalandığından emin olun.

Ardından, her bir fareyi ev kafesinden nazikçe çıkarın ve hemen boş bir çeyreğe yerleştirin. Tüm hayvanlar yüklendikten sonra kapağı üstüne yerleştirin ve odadan çıkın. Alışma süresini takiben hayvanların 60 dakika boyunca test odasına alışmalarına izin verin.

Odaya dönün ve kapağı çıkarın. Her fareyi nazikçe ev kafesine geri koyun. Her seans arasında her hazneyi dezenfektan ve kağıt havlularla iyice temizleyin.

İlk veri toplamadan bir hafta önce bu adımları art arda dört gün boyunca tekrarlayın. Alışkanlıktan kaçınmak için hayvanları her seansta rastgele yeni bir kutuya atamaya özen gösterin ve çalışma süresi boyunca kutu atamalarını takip edin. Açık alan aktivitesini ölçmek için, fareleri 10 ila 30 dakika boyunca alışmaları için test odasına getirin.

Bu süre zarfında odadan çıkın. Bu süreden sonra odaya dönün ve aktivite odalarını açın. Ardından, hayvanın hareketini kaydedecek olan beraberindeki bilgisayar yazılımını açın.

Altı, 10 dakikalık veri bloklarını toplamak için bilgisayar yazılımındaki birincil veri toplama parametrelerini ayarlayın ve ardından uygun tarihi, dosya adını ve fare kimlik numaralarını girin. Tüm parametreler ayarlandıktan sonra, tüm kızılötesi ışınların düzgün çalıştığını doğrulamak için bir ön ışın kontrolü yapın. Hazne ön kiriş kontrolünü geçemezse, bunun nedeni büyük olasılıkla merkez bölücünün zayıf hizalanmasıdır.

Böyle bir durumda, sensörlerin engeli kaldırılana ve sistem hazır olana kadar bölücüyü yeniden hizalayın. Tüm test odaları hazır olduğunda, fareyi nazikçe ev kafesinden çıkarın ve test odasına yerleştirin. Veri toplama sırasında test odasına aynı anda iki hayvan yerleştirilebilir.

Örneğin, bir hayvan sol ön kadrana ve bir hayvan arka sağ kadrana yerleştirilebilir. Tüm hayvanlar yüklendikten sonra kapağı odaların üzerine yerleştirin ve ardından veri toplamaya başlamak için programı başlatın. Program, daha önce ayarlanan veri toplama parametrelerine göre aktivite seviyelerini kaydetmeye başlayacaktır.

Sınav süresi boyunca sınav salonunu terk edin. Veri toplama işlemi tamamlandığında odaya dönün. Verileri kaydedin ve ardından her hayvanı kendi ev kafesine geri koyun.

Başka bir hayvan grubunu test etmeden önce tüm üniteleri dezenfektan ve kağıt havluyla temizleyin. Test ettikten sonra, verileri bir elektronik tabloya aktarın. Bilgisayar yazılımı, veri toplama süresi boyunca birden fazla parametreyi hesaplar.

Her fare için, kalite kontrol amacıyla tüm verileri gözden geçirin. Bu adımları art arda dört gün boyunca tekrarlayın. Hayvanları her seansta rastgele yeni bir kutuya atamaya özen gösterin ve çalışma süresi boyunca kutu atamalarını takip edin.

Son olarak, ortalama yatay aktiviteyi hesaplayın. Dört günlük veri toplamadan dikey aktivite, kat edilen toplam mesafe, toplam hareket süresi ve toplam dinlenme süresi. Bu sonuçlar, erkek ve dişi ddy iki J laminat alfa iki eksik konjenital müsküler distrofi, fareler ve kontrol farelerinin tipik açık alan aktivite seviyelerini göstermektedir Zamanla, yatay aktivite, dikey aktivite ve kat edilen toplam mesafe gibi kontrol farelerinde daha yüksekti.

DY iki J faresi ayrıca 19 haftalıkken tam bir dikey aktivite kaybı gösterdi, bu da arka bacak felçlerini ve buna bağlı olarak pik nekrotik faz sırasında altı haftalıkken geri dönememeyi yansıtıyor. Duchenne kas distrofisinin hayvan modelinde, MDX fareleri daha düşük seviyelerde yatay aktivite, dikey aktivite ve kat edilen toplam mesafe gösterir. Farklı suşlardaki fareler arasında açık alan aktivitesindeki farklılıklar da gösterilmiştir.

BL 10 fareleri, L altı fareye kıyasla daha yüksek yatay aktiviteye, dikey aktiviteye ve kat edilen toplam mesafeye sahipti. Davranışsal aktivite büyük varyasyonlara eğilimli olduğundan, açık alan aktivitesi uygun bir birincil son nokta ölçüsü olmayabilir. Bununla birlikte, ek fonksiyonel histolojik ve moleküler tahlillerle yürütüldüğünde klinik öncesi çalışmalarda çok değerli bir ikincil sonuç ölçüsü olabilir.