Name: Sinir Devresi Temelini Bellek Oluşumunda Diseksiyon için Yenidoğan Sıçanlarda bir Lateralize Koku Öğrenme Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-18T16:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 42 s
Description: Öğrenin, yenidoğan sıçanlarda tek tarafı burun tıkacı ile lateralize koku öğrenme modelini. Davranışsal ve biyolojik değerlendirmeleri aynı hayvanda yaparak değişkenliği azaltın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Q. Y.'ye bir CIHR işletme hibesi (MOP-102624) ile desteklenmiştir. Çalışma boyunca yararlı tartışmalar için Dr. Carolyn Harley'e, teknik destek için Dr. Qinlong Hou, Amin Shakhawat ve Andrea Darby-King'e teşekkür ederiz.

Her iki cinsiyette Sprague Dawley sıçan (Charles River) yavrular kullanılır. Litters (doğum PD0 olmak) PD1'in 12 on itlaf edilir. Baraj gıda ve suya ad libitum giriş ile, 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde tutulur. Deneysel prosedürler Memorial Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylanmıştır. 1. Burun Tak İnşaatı NOT:. Bu prosedür adapte Cummings ve ark modifiye edildi (1997) 35. <ol><li> Kazandırılacak polietilen-20 tüp ve 3-0 ipek sütür konu. </li><li> Yaklaşık olarak 0.8 mm olan polietilen boru 20 küçük bir parça kesin. </li><li> Iplik boru bölümünün her iki yanı üzerinde olduğu bir şekilde hazırlanan boru içinden Konu ipek dikiş ipliği. </li><li> Tıpanın dış ipliğin bir ucunda, ipliğin bir düğüm. </li><li> Iplik düğüm üzerinde aşağı tüp bölümünü çekin. Düğüm boru içine başvurusunda gerekir.</li><li> Ipliğin yaklaşık 2 mm hortumunun bir ucundan dışarı çıkıntı yapan şekilde, ipliğin her iki ucuna da trimerler (Şekil 1A bakınız). </li></ol> Eğitim öncesi 2. Naris Tıkanıklığı <ol><li> Düzenli yatak ile kaplı güvenli bir çanak baraj ve yerden yavru çıkarın. </li><li> Naris üzerine, lokal anestezik jöle,% 2 lidokain kurulamak için bir pamuk uçlu uygulamayı kullanmak tıkanacak. </li><li> Yavru ~ 3 dakika boyunca çanak dinlenmeye bırakın. </li><li> Baskın olmayan elle yavaşça ama güvenli yavru tutun. </li><li> Dominant eli kullanarak, burun fiş almak ve iplik çıkıntı değil hangi ucu etrafında aynı lokal anestezik jel hafifçe sürün. Bu fiş ekleme ile ilgili herhangi bir minör ağrıları için hem bir anestezik olarak hareket edecek ve naris içinde bir yağlayıcı olarak hareket edecektir. NOT: Xylocaine etkisi birkaç dakika içinde başlar ve 20-30 dakika sürer. Xylocaine jöle uygulamadan sonra fiş yerleştirilmesi için genel göstermek iyi tolerans yavrular (myayilan mücadele ve seslendirme). </li><li> Yavaşça sıkıca yavru tutan ve Fişin tamamen takıldığını ve sadece 2 mm diş naris çıkıntı kadar yavaş yavaş çok nazik itişlerle fişi çevirerek burun fişini takın (Şekil 1B bakınız). Bu işlem sırasında ya da herhangi bir kanama naris olmalıdır. Burun fiş yerleştirilmesi sırasında kanama ile yavrular hariç ve barajlar iade edilir </li><li> Hayvan tıpa alıştırmak amacıyla 5 dakika için bu çanak dinlenmeye bırakın. </li><li> Alışma çanak yavru çıkarın ve klima paradigmayı 24 başlar. </li></ol><img alt="Şekil 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51808/51808fig1highres.jpg" width="500"> Bir burun fiş Şekil 1. İnşaat. A) Şemalar bir burun fişi yapma aşamalarını gösteren. Bir iş parçacığı polietilen boru ile çekilir; Bir düğüm yapılan ve pul edilirBunu engellemek için, borunun ortasına içine bırakılır; iki ucu) boru. b üzerinden bir ucunda 2 mm'lik bir tortu ile ön ve bir naris bir burun fişi ile bir sıçan lateral bir görünüşünü kesilir. 3. Kokulu Yatak Hazırlama <ol><li> Yeni eldiven giyen ve koku bulaşmayı önlemek bir plastik torba içine woodchip yatak 500 ml yerleştirmek için bir davlumbaz. </li><li> 0.3 ml nane özü hazırlamak için bir şırınga kullanın ve plastik torba içinde yatak üzerinde bu sprey. </li><li> , Çanta kapalı kravat şiddetle çanta sallayın ve yatak 5 dakika boyunca torbaya dinlenmeye bırakın. </li><li> Kullanmadan önce, 5 dakika boyunca bir çeker ocak içinde ortaya çıkarılan bir net, sığ, akrilik eğitim kutusu (20 x 20 x 5 cm 3, Şekil 2A) olarak kokulu yatak yerleştirin. Yatak hazırlandıktan sonra, bu eldiven atmak ve bu eldivenler hayvanlarla temas etmesine izin vermeyin. </li><li> Özdeş bir şeffaf plastik kutu içinde kokusuz yatak yerleştirin, ve eno kokulu yatak veya kullanılan eldiven ile temas etmediğinden emin olun. </li></ol> 4. Koku Klima Paradigma (Şekil 2A resmi görmek) Yavrular PH 6, ya da birden çok deneme seansları (günde bir seans, PD 3-6) üzerinde, ya tek bir klima oturumu tabi. <ol><li> Kokulu yatak üzerinde habitüe yavru yerleştirin. Koku kontrolü sadece (O / S -) için yavrular, daha sonra 4,5 adıma atlayın, 10 dakika boyunca yatak üzerinde bu yavrular bırakın. Deneysel koku + inme (O / S +) yavrular, bu bölümde aşağıdaki adımlarla devam ediyor. </li><li> İnme 30 saniye boyunca yavru küçük bir fırça kullanarak. Öncelikle yavru arka bölgenin çevresinde hızlı dairesel hareketlerle kullanın. </li><li> Yavru 30 saniye boyunca dinlenmeye bırakın. </li><li> Tekrar 4.2 ve 10 dakika olmak üzere toplam 4,3 (okşayarak + koku yani 10 eşleşmeleri) adım. </li><li> , Klima kutusundan yavru çıkarın burun fişini çıkarın ve baraj yavru dönmek. </li></ol> &lt;p class = "jove_title"&gt; 5. Lateralize Koku Tercih Test (Şekil 2B resmi görmek) Test, son antrenman sonra çeşitli zaman noktalarında (örneğin, 24 ya da 48 saat) oluşur. Test 2 cm nötr bölge ile ayrılmış iki eğitim kasası (eğitim kutu 3,4 tarif edilmiştir), üst üste yerleştirilir, paslanmaz çelik bir test bölmesinin (30 x 20 x 18 cm3) içinde gerçekleştirilir. Diğer kutusu temiz, kokusuz yatak içerir iken bir eğitim kutu nane kokulu yataklar içerir. Test bölmesinin tabanı daha sonra plastik örgü çıkarılabilir bir levha (Şekil 2B) ile kaplanmış olan bir metal ızgara vardır. <ol><li> Bir nane ve Bölüm 3 başına bir kokusuz yatak hazırlayın ve 2 cm aralıklarla test odasının, ters taraflarında altında her bir kutu yerleştirin. Test odasının metal ızgaralı zemin üzerine plastik örgü yerleştirin. </li><li> Baraj yavru çıkarın ve naris üzerinde kokusuz silikon gres bir firma dab koyunBu eğitim sırasında tıkanmaktadır. Yeniden başvuruda gerektiği gibi ilk test boyunca gres. NOT: eğitim ve test sırasında Rastgele naris tıkanıklığı önyargı önlemek için kabul edilebilir. </li><li> Test bölmesinin nötr bölgedeki yavru yerleştirin. </li><li> Yavru odasının iki tarafın üzerinden geçirdim ne kadar süre kayıt, yavru 1 dakika odasını keşfetmek için izin (yani nane veya tarafsız kokulu yatak üzerinde). </li><li> Yavru bir kapalı plastik tutma odasının 1 dakika dinlenmeye bırakın. </li><li> Tekrar 10 dakika toplam 5,2 ve 5,3 adım (5 ile kalan denemeleri ile ayrılan 5 testi denemeleri) yönünde tercihlerini kontrol etmek amacıyla oda içindeki yavru bir başlangıç ​​yönlenmesini anahtarlama. </li><li> Testin hemen ardından, naris gelen yağı silin. </li><li> Bölüm 2'deki gibi ters naris, bir polietilen noseplug yerleştirin ve hayvan 10 dakika boyunca dinlenmeye bırakın. </li><li> Olarak bir kez daha test yavru 5.3 -5.6, kapağı çıkarıp, baraja yavru dönmek. Çıkarın ve% 95 etanol ile test odasının plastik örgü temizlemek ve sıvı buharlaşmasına izin verin. Sonraki yavru test etmeden önce geri örgü yerleştirin. NOT: test sırasında ilk naris oklüzyon silikon gres uygulanması, kanama ve burun fiş ekleme ile ilişkili stres şansını engeller. </li></ol><img alt="Şekil 2" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51808/51808fig2highres.jpg" width="500"> Şekil 2. Erken koku tercihi eğitim ve test. Paradigma okşayarak + koku kullanarak A) Erken koku tercih çalışması. B) bir tarafta nane yatak ile iki seçenek koku tercihini test, karşı tarafta yatak kokusuz kontrol eder. 2 cm nötr bölge arasına yerleştirilir. 6. Tek Naris Oklüzyonu Etkinliğinin Test nt "&gt; Bu deney, tek naris tıkanma koku alma sisteminin lateralizan aktivasyonuna neden olup olmadığını belirlemek için yapılır. <ol><li> Bölüm 2'de tarif edildiği gibi 6 veya PH 7 yavruların tek taraflı naris oklüzyonlarını gerçekleştirin. </li><li> ~ 5 dk alışma sonra, bir kapalı plastik kapta yavru koyun ve 10 dakika boyunca doku bir parça batırılmış 30 ul saf nane yağı maruz kalmaktadır. </li><li> Hemen nane kokusu maruz kaldıktan sonra, periton boşluğu içine (ip) dozunda genel anestezik olarak hidrat (400 mg / kg) ya da pentobarbitolün (150 mg / kg) ile yavru enjekte edilir. </li><li> Tam (baştan kuyruğa veya ayak tutam yanıt vermedikleri) anestezi sonra, transkardiyal 0.1 M fosfat tampon çözeltisi, PBS içinde çözüldü paraformaldehid (% 4, ardından ~ 1 dakika boyunca tuzlu su (% 0.9) içinde buz soğukluğunda çözümlerle yavru, serpmek ). </li><li> Daha sonra, trans, paraformaldehid perfüzyon 10 dakika sonra beyin toplamak ve 4 ° C'de bir gece paraformaldehid koyunEk bir 24 saat boyunca, bir sakaroz çözeltisi (PBS içinde% 20) ile beyin fer. </li><li> Bir kriostat ile 30 mikron kalınlığında koronal beyin dilimleri kesin. OB ve PC dilimleri toplayın ve pCREB antikor 21,25,30 standart immünhistokimya boyama izledi jelatin kaplı slaytlar, üzerine monte. </li></ol> 7. Tek Naris Oklüzyonu reversibilite testi Bloke edici etkisi burun tıkacın çıkarılmasının ardından 24 saat sonra geri olup bu deney testleri. <ol><li> Bölüm 2'de tarif edildiği gibi 6 veya PH 7 yavruların tek taraflı naris oklüzyonlarını gerçekleştirin. </li><li> (Eğitim sırasında tıkanıklığı naris süresine eşdeğer - 5 dk alışma + 10 dk eğitim) 15 dakika sonra, burun kapağı çıkarıp, baraja yavru dönmek. </li><li> 6.2 de tarif edildiği gibi 24 saat sonra, 10 dakika süre ile kapalı bir plastik kap içine nane kokusuna maruz yavru. </li><li> Mezhep aynı adımları izleyin6,3-6,6 iyonlar bulunmaktadır. </li></ol>

<ol><li>Gregory, E. H., Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+olfactory-guided+behavior+in+infant+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Development of olfactory-guided behavior in infant rats.</a> Physiol Behav. 6, 573-576 (1971).</li>
<li>Alberts, J. R., May, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonnutritive%2C+thermotactile+induction+of+filial+huddling+in+rat+pups%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Nonnutritive, thermotactile induction of filial huddling in rat pups.</a> Dev Psychobiol. 17, 161-181 (1984).</li>
<li>Galef, B. G., Kaner, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+maintenance+of+preference+for+natural+and+artificial+olfactory+stimuli+in+juvenile+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Physiol+Psychol%22%5BJournal%5D)">Establishment and maintenance of preference for natural and artificial olfactory stimuli in juvenile rats.</a> J Comp Physiol Psychol. 94, 588-595 (1980).</li>
<li>Johanson, I. B., Hall, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetitive+learning+in+1-day-old+rat+pups%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Appetitive learning in 1-day-old rat pups.</a> Science. 205, 419-421 (1979).</li>
<li>Johanson, I. B., Hall, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetitive+conditioning+in+neonatal+rats%3A+conditioned+orientation+to+a+novel+odor%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Appetitive conditioning in neonatal rats: conditioned orientation to a novel odor.</a> Dev Psychobiol. 15, 379-397 (1982).</li>
<li>Johanson, I. B., Teicher, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classical+conditioning+of+an+odor+preference+in+3-day-old+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neural+Biol%22%5BJournal%5D)">Classical conditioning of an odor preference in 3-day-old rats.</a> Behav Neural Biol. 29, 132-136 (1980).</li>
<li>McLean, J. H., Darby-King, A., Sullivan, R. M., King, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonergic+influence+on+olfactory+learning+in+the+neonate+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neural+Biol%22%5BJournal%5D)">Serotonergic influence on olfactory learning in the neonate rat.</a> Behav Neural Biol. 60, 152-162 (1993).</li>
<li>Moore, C. L., Power, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variation+in+maternal+care+and+individual+differences+in+play%2C+exploration%2C+and+grooming+of+juvenile+Norway+rat+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Variation in maternal care and individual differences in play, exploration, and grooming of juvenile Norway rat offspring.</a> Dev Psychobiol. 25, 165-182 (1992).</li>
<li>Pedersen, P. E., Williams, C. L., Blass, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+and+odor+conditioning+of+suckling+behavior+in+3-day-old+albino+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Psychol+Anim+Behav+Process%22%5BJournal%5D)">Activation and odor conditioning of suckling behavior in 3-day-old albino rats.</a> J Exp Psychol Anim Behav Process. 8, 329-341 (1982).</li>
<li>Sullivan, R. M., Hall, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinforcers+in+infancy%3A+classical+conditioning+using+stroking+or+intra-oral+infusions+of+milk+as+UCS%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Reinforcers in infancy: classical conditioning using stroking or intra-oral infusions of milk as UCS.</a> Dev Psychobiol. 21, 215-223 (1988).</li>
<li>Sullivan, R. M., Leon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+olfactory+learning+induces+an+enhanced+olfactory+bulb+response+in+young+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Early olfactory learning induces an enhanced olfactory bulb response in young rats.</a> Brain Res. 392, 278-282 (1986).</li>
<li>Weldon, D. A., Travis, M. L., Kennedy, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Posttraining+D1+receptor+blockade+impairs+odor+conditioning+in+neonatal+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Posttraining D1 receptor blockade impairs odor conditioning in neonatal rats.</a> Behav Neurosci. 105, 450-458 (1991).</li>
<li>Sullivan, R. M., Hofer, M. A., Brake, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory-guided+orientation+in+neonatal+rats+is+enhanced+by+a+conditioned+change+in+behavioral+state%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Olfactory-guided orientation in neonatal rats is enhanced by a conditioned change in behavioral state.</a> Dev Psychobiol. 19, 615-623 (1986).</li>
<li>Camp, L. L., Rudy, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+the+categorization+of+appetitive+and+aversive+events+during+postnatal+development+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Changes in the categorization of appetitive and aversive events during postnatal development of the rat.</a> Dev Psychobiol. 21, 25-42 (1988).</li>
<li>Moriceau, S., Wilson, D. A., Levine, S., Sullivan, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+circuitry+for+odor-shock+conditioning+during+infancy%3A+corticosterone+switches+between+fear+and+attraction+via+amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Dual circuitry for odor-shock conditioning during infancy: corticosterone switches between fear and attraction via amygdala.</a> J Neurosci. 26, 6737-6748 (2006).</li>
<li>Roth, T. L., Sullivan, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endogenous+opioids+and+their+role+in+odor+preference+acquisition+and+consolidation+following+odor-shock+conditioning+in+infant+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Endogenous opioids and their role in odor preference acquisition and consolidation following odor-shock conditioning in infant rats.</a> Dev Psychobiol. 39, 188-198 (2001).</li>
<li>Roth, T. L., Sullivan, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consolidation+and+expression+of+a+shock-induced+odor+preference+in+rat+pups+is+facilitated+by+opioids%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Consolidation and expression of a shock-induced odor preference in rat pups is facilitated by opioids.</a> Physiol Behav. 78, 135-142 (2003).</li>
<li>Sullivan, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developing+a+sense+of+safety%3A+the+neurobiology+of+neonatal+attachment%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Developing a sense of safety: the neurobiology of neonatal attachment.</a> Ann N Y Acad Sci. 1008, 122-131 (2003).</li>
<li>Wilson, D. A., Sullivan, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+associative+conditioning+in+infant+rats+with+brain+stimulation+as+reward.+I.+Neurobehavioral+consequences%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Dev+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Olfactory associative conditioning in infant rats with brain stimulation as reward. I. Neurobehavioral consequences.</a> Brain Res Dev Brain Res. 53, 215-221 (1990).</li>
<li>Sullivan, R. M., Wilson, D. A., Leon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+Processes+in+Early+Olfactory+Preference+Acquisition%3A+Neural+and+Behavioral+Consequences%5BTitle%5D)+AND+%22Psychobiology%22%5BJournal%5D)">Associative Processes in Early Olfactory Preference Acquisition: Neural and Behavioral Consequences.</a> Psychobiology. , 29-33 (1989).</li>
<li>McLean, J. H., Harley, C. W., Darby-King, A., Yuan, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((pCREB+in+the+neonate+rat+olfactory+bulb+is+selectively+and+transiently+increased+by+odor+preference-conditioned+training%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">pCREB in the neonate rat olfactory bulb is selectively and transiently increased by odor preference-conditioned training.</a> Learn Mem. 6, 608-618 (1999).</li>
<li>Sullivan, R. M., Stackenwalt, G., Nasr, F., Lemon, C., Wilson, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+an+odor+with+activation+of+olfactory+bulb+noradrenergic+beta-receptors+or+locus+coeruleus+stimulation+is+sufficient+to+produce+learned+approach+responses+to+that+odor+in+neonatal+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Association of an odor with activation of olfactory bulb noradrenergic beta-receptors or locus coeruleus stimulation is sufficient to produce learned approach responses to that odor in neonatal rats.</a> Behav Neurosci. 114, 957-962 (2000).</li>
<li>Yuan, Q., Harley, C. W., McLean, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitral+cell+beta1+and+5-HT2A+receptor+colocalization+and+cAMP+coregulation%3A+a+new+model+of+norepinephrine-induced+learning+in+the+olfactory+bulb%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Mitral cell beta1 and 5-HT2A receptor colocalization and cAMP coregulation: a new model of norepinephrine-induced learning in the olfactory bulb.</a> Learn Mem. 10, 5-15 (2003).</li>
<li>Fontaine, C. J., Harley, C. W., Yuan, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateralized+odor+preference+training+in+rat+pups+reveals+an+enhanced+network+response+in+anterior+piriform+cortex+to+olfactory+input+that+parallels+extended+memory%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Lateralized odor preference training in rat pups reveals an enhanced network response in anterior piriform cortex to olfactory input that parallels extended memory.</a> J Neurosci. 33, 15126-15131 (2013).</li>
<li>Morrison, G. L., Fontaine, C. J., Harley, C. W., Yuan, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+the+anterior+piriform+cortex+in+early+odor+preference+learning%3A+evidence+for+multiple+olfactory+learning+structures+in+the+rat+pup%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">A role for the anterior piriform cortex in early odor preference learning: evidence for multiple olfactory learning structures in the rat pup.</a> J Neurophysiol. 110, 141-152 (2013).</li>
<li>Nakamura, S., Kimura, F., Sakaguchi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+development+of+electrical+activity+in+the+locus+ceruleus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Postnatal development of electrical activity in the locus ceruleus.</a> J Neurophysiol. 58, 510-524 (1987).</li>
<li>Harley, C. W., Darby-King, A., McCann, J., McLean, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta1-adrenoceptor+or+alpha1-adrenoceptor+activation+initiates+early+odor+preference+learning+in+rat+pups%3A+support+for+the+mitral+cell%2FcAMP+model+of+odor+preference+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Beta1-adrenoceptor or alpha1-adrenoceptor activation initiates early odor preference learning in rat pups: support for the mitral cell/cAMP model of odor preference learning.</a> Learn Mem. 13, 8-13 (2006).</li>
<li>Shakhawat, A. M., Harley, C. W., Yuan, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+bulb+alpha2-adrenoceptor+activation+promotes+rat+pup+odor-preference+learning+via+a+cAMP-independent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Olfactory bulb alpha2-adrenoceptor activation promotes rat pup odor-preference learning via a cAMP-independent mechanism.</a> Learn Mem. 19, 499-502 (2012).</li>
<li>Isaacson, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor+representations+in+mammalian+cortical+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Odor representations in mammalian cortical circuits.</a> Curr Opin Neurobiol. 20, 328-331 (2010).</li>
<li>Lethbridge, R., Hou, Q., Harley, C. W., Yuan, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+bulb+glomerular+NMDA+receptors+mediate+olfactory+nerve+potentiation+and+odor+preference+learning+in+the+neonate+rat%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Olfactory bulb glomerular NMDA receptors mediate olfactory nerve potentiation and odor preference learning in the neonate rat.</a> PLoS One. 7, e35024 (2012).</li>
<li>Yuan, Q., Harley, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+a+nostril+knows%3A+olfactory+nerve-evoked+AMPA+responses+increase+while+NMDA+responses+decrease+at+24-h+post-training+for+lateralized+odor+preference+memory+in+neonate+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">What a nostril knows: olfactory nerve-evoked AMPA responses increase while NMDA responses decrease at 24-h post-training for lateralized odor preference memory in neonate rat.</a> Learn Mem. 19, 50-53 (2012).</li>
<li>Schwob, J. E., Price, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+axonal+connections+in+the+central+olfactory+system+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">The development of axonal connections in the central olfactory system of rats.</a> J Comp Neurol. 223, 177-202 (1984).</li>
<li>Kucharski, D., Hall, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+routes+to+early+memories%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">New routes to early memories.</a> Science. 238, 786-788 (1987).</li>
<li>Kucharski, D., Johanson, I. B., Hall, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unilateral+olfactory+conditioning+in+6-day-old+rat+pups%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neural+Biol%22%5BJournal%5D)">Unilateral olfactory conditioning in 6-day-old rat pups.</a> Behav Neural Biol. 46, 472-490 (1986).</li>
<li>Cummings, D. M., Henning, H. E., Brunjes, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+bulb+recovery+after+early+sensory+deprivation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Olfactory bulb recovery after early sensory deprivation.</a> J Neurosci. 17, 7433-7440 (1997).</li>
<li>Kucharski, D., Hall, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+change+in+the+access+to+olfactory+memories%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Developmental change in the access to olfactory memories.</a> Behav Neurosci. 102, 340-348 (1988).</li>
<li>Brunjes, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unilateral+odor+deprivation%3A+time+course+of+changes+in+laminar+volume%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Unilateral odor deprivation: time course of changes in laminar volume.</a> Brain Res Bull. 14, 233-237 (1985).</li>
<li>Kass, M. D., Pottackal, J., Turkel, D. J., McGann, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+the+neural+representation+of+odorants+after+olfactory+deprivation+in+the+adult+mouse+olfactory+bulb%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">Changes in the neural representation of odorants after olfactory deprivation in the adult mouse olfactory bulb.</a> Chem Senses. 38, 77-89 (2013).</li>
<li>Kim, H. H., Puche, A. C., Margolis, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant+deprivation+reversibly+modulates+transsynaptic+changes+in+the+NR2B-mediated+CREB+pathway+in+mouse+piriform+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Odorant deprivation reversibly modulates transsynaptic changes in the NR2B-mediated CREB pathway in mouse piriform cortex.</a> J Neurosci. 26, 9548-9559 (2006).</li>
<li>Korol, D. L., Brunjes, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+changes+in+2-deoxyglucose+uptake+and+amino+acid+incorporation+following+unilateral+odor+deprivation%3A+a+laminar+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Dev+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Rapid changes in 2-deoxyglucose uptake and amino acid incorporation following unilateral odor deprivation: a laminar analysis.</a> Brain Res Dev Brain Res. 52, 75-84 (1990).</li>
<li>Leung, C. H., Wilson, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trans-neuronal+regulation+of+cortical+apoptosis+in+the+adult+rat+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Trans-neuronal regulation of cortical apoptosis in the adult rat olfactory system.</a> Brain Res. 984, 182-188 (2003).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Kritik bir zaman penceresi içinde sıçan yavrularında lateralizan koku, öğrenme ve bellek modeli ilk Hall ve arkadaşları tarafından kurulmuştur. Çalışmaların 33,34,36 bir dizi, onlar bir koku tercih bellek sıçan yavrularının PH 6 az bir naris için koku + süt eşleşmeleri tarafından lateralize olabileceğini gösterdi. Tercih bellek aynı naris eğitim ve test sırasında açık olduğunda sağlam, ancak tıkalı naris bloke edilmemiş ve kontrol edilmiş olduğu zaman gözlemlenmemiştir. Artık oldu böylece Ancak, ön koku korte...

Olfaction başarıyla gezinmek veya kendi ortamında hayatta kalmak için mümkün olmaz onsuz kemirgenlerde primer duyu yöntemidir. Bu 1 beslemek için annelerini bulmak için koku alma duyusunu kullanmak için, ilk doğum sonrası hafta boyunca görmeniz ne duymak ne yenidoğan yavrular, için özellikle önemlidir. Sonuç olarak, yenidoğan sıçan yavrular basit deneysel manipülasyonlar ile kokuları tercih klimalı edilebilir. Uyaranların çeşitli iç içe geçme çevre 2,3, süt emzirme 4-6, okşayarak ve dokunma uyarısına 7 de dahil olmak üzere yeni yenidoğanlarda kokulara koşullandırılmış tepkileri (Koşullu uyarı, TH), indükleme koşulsuz uyarıcı (UCS) olarak kullanılmaktadır 12, kuyruk tutam 13, anne tükürük 13, hafif bir ayak şok 14-18, ve intrakranial beyin stimülasyonu 19. Bu çalışmada köklü bir erken koku tercihi paradigma istihdam edildiği bu durumda nane bir koku, bennane, 24 saat sonra 10,11,20 için bir tercih üretilmesi amacıyla dokunma uyarısına birlikte s. Bu kokular hafızası esas olarak koku ampuller (OB) 21-23 ve ön piriform korteks (APC), 24,25 de dahil olmak üzere, sağlam koku devresi bağlıdır. Erken koku tercihi öğrenme Deneysel araştırmalar derinleşti ve bir memeli hafıza moleküler ve fizyolojik temellerinin anlayışımızı genişlettik. Bu memeli model, bellek mekanizmaları okuyan birçok avantajı vardır. İlk olarak, UCS sinyalinin nöral kaynakları tespit edilmiştir. Yukarıda belirtildiği gibi, çeşitli uyarıcılar sırayla 22,27,28 öğrenmeyi desteklemek hücresel ve fizyolojik etkilere neden OB ve aPC&#39;ye birden adrenoreseptörler aktive odağı coeruleus norepinefrin salınımını 26 uyarırlar. İkincisi, bellek destek mekanizmaları iyi tanımlanmış laminer sinir yapıları yer almaktadır.yenidoğan sıçanlarda koku devrenin basitlik sinaptik plastisite ile ilgili karmaşık süreçleri ortaya çıkarmak için birlikte ideal bir çerçeve ile araştırmacılar sağlar. Diğer yapılar 29 arasında OB ve ipsilateral lateral koku yolu (LOT) ile piriform korteks (PC) dönüş projesi çerçevesinde bu mitral / sorguçlu hücrelerin mitral / tüylü hücreler üzerine koku epiteli projede koku alma duyu nöronları (OSN). OSN OB 30,31 sinapsların ve LOT aPC&#39;ye içinde 24,25 sinapsların sinaptik öğrenme destekleyen değişiklikler ve bellek için kritik loci olarak tespit edilmiştir. Üçüncü olarak, sıçanlarda erken yaşta, koku girişler kolayca lateralize edilebilir. Her aPC&#39;ye bu kez beyaz cevher tam post-natal gün 12 (PD12) 32&#39;de oluşturulan ön komissura&#39;da aracılığıyla ikili koku bilgilere erişimi vardır. PD 12 önce, koku girişli tek tıkanıklığı naris 24,25,31,33,34 &lt;aracılığıyla OB ve aPC&#39;nin ipisilateral izole edilebilir/ Sup&gt;. Tek naris tıkanıklığı açık naris gelen koku hafıza oluşumuna olanak ve 12 33 pd önce tıkalı naris aynı bellek önler. Koku hafızası hem OB ve aPC&#39;ye dahil ipsilateral hemisferde izole edilir. Bu nedenle, her sıçan yavru öğrenme ve fizyolojisini destekleyen için kendi kontrol edilebilir. Bu çalışmada, lateralize ilk koku tercih öğrenme protokol verilmektedir. Bu yöntem, böylece gerekli hayvan sayısını ve genel varyasyonu de azaltarak, intra-hayvan kontrolü 24,25,31 sağlayarak koku öğrenmenin temelini nöral mekanizmaları çalışmak için güçlü bir araç olarak hizmet vermektedir. Tıkanıklığı naris gres ya da burun tıkacın uygulanan ve en az stres veya hayvana zarar çıkarılabilir olması ile tersine çevrilebilir. Burada öncelikle, erken koku tercihi eğitim ve test prosedürleri ayrıntılı bir nos tek naris tıkanıklığı kullanarak lateralizan protokolü odaklanarak, tarif edilmektedire fiş. Sonra sonuçlar koku girişini izole ve lateralizan koku belleği üreten tek tıkanıklığı naris etkinliğini göstermek için sunulmaktadır. Son olarak, hem öğrenim hem de destek bellek ifade oluşturmak koku sistemi fizyolojik değişiklikleri incelemek için bu lateralizan öğrenme modelini kullanarak potansiyelleri tartışılmıştır.

<table><tbody><tr><td>Polietilen 20 boru</td><td>Intramedic</td><td>427406</td><td>Radyoopak olmayan, toksik olmayan</td></tr><tr><td>3-0 İpek sütür ipliği</td><td>Syneture</td><td>Sofsilk</td><td>Emici Olmayan</td></tr><tr><td>Silikon gres</td><td>Warner Instrument</td><td>64-0378</td><td>Kokusuz</td></tr><tr><td>%2 Ksilokain jeli</td><td>AstraZeneca</td><td>Prod. No 061</td><td>Lidokain hidroklorür jöle, yerel eczaneden satın alındı</td></tr><tr><td>Boya fırçası</td><td>Dynasty</td><td>206R</td><td>Benzer boyut/diğer markalar da işe yarıyor</td></tr><tr><td>Nane özü</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>W284807</td><td>Diğer markalar da iyi olmalı</td></tr><tr><td>Eğitim kutusu</td><td>Özel yapım</td><td>N/A</td><td>Akrilik kutu (20 x 20 x 5 cm3), bkz. Şekil 2A. Kutu için parametreler ve malzeme kritik değildir ve değiştirilebilir. Kullanılan malzeme kokusuz olmalı ve kokuları emmemelidir</td></tr><tr><td>Test odası</td><td>Özel yapım</td><td>N/A</td><td>Paslanmaz çelik (30 x 20 x 18 cm3), bkz. Şekil 2B. Oda için parametreler ve malzeme kritik değildir ve değiştirilebilir. Örneğin, paslanmaz çelik yerine akrilik bir oda kullanılabilir</td></tr><tr><td>pCREB antikoru</td><td>Hücre Sinyalizasyonu</td><td>9198</td><td>Ser 133 (87G3) Tavşan mAb</td></tr><tr><td>Kloral hidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C8383</td><td>Yok</td></tr><tr><td>Paraformaldehipe</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6148</td><td>Yok</td></tr><tr><td>Sükroz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9378</td><td>Yok</td></tr></tbody></table>

sinir devresi temelini bellek oluşumunda diseksiyon için yenidoğan sıçanlarda bir lateralize koku Öğrenme modeli

A Lateralized Odor Learning Model in Neonatal Rats for Dissecting Neural Circuitry Underpinning Memory Formation

Kritik bir doğum sonrası dönemde (≤ 10 gün) sıçan yavruları, anne bakımını taklit eden uyaranlarla ilişkili bir koku için kolayca bir tercih oluşturur. Böyle bir tercih hafızası, eğitim parametrelerine bağlı olarak saatlerden günlere, hatta ömür boyu sürebilir. Erken koku tercihi öğrenimi bize, doğal bir öğrenme biçimi için kritik değişikliklerin koku alma devresinde meydana geldiği bir model sağlar. Onu hafıza süreçlerinin analizi için güçlü bir araç haline getiren ek bir özellik de, erken koku tercihi öğrenmesinin kritik dönem içinde tek bir naris tıkanıklığı yoluyla lateralize edilebilmesidir. Bunun nedeni, bu erken yaşta koku alma hemisferlerinin olgun anterior komiseral bağlantılarının olmamasıdır. Bu çalışma, burun tıkaçları kullanarak yanal koku öğrenimi için davranışsal protokolleri özetlemektedir. Akut, geri dönüşümlü naris tıkanıklığı, uzun süreli oklüzyon ve koterizasyon gibi daha agresif yöntemlerle ilişkili doku ve nöronal hasarları en aza indirir. Yanallaştırılmış koku öğrenme modeli, hayvan içi karşılaştırmaya izin verir, bu nedenle hayvanlar arası tasarımlara kıyasla varyansı büyük ölçüde azaltır. Bu yöntem, eğitim tarafından üretilen koku alma sistemindeki devre değişikliklerini araştırmak için başarıyla kullanılmıştır. Gelecekteki yönergeler arasında, bu yanallaştırılmış öğrenme modelini kullanarak koku hafızasının moleküler temellerini keşfetmek; ve fizyolojik değişimi hafıza gücü ve süreleri ile ilişkilendirmek.

Burada koku girişini izole ve bir yarımkürede öğrenme tıkanıklığı naris etkinliğini ve bu yöntemin reverzibilitesini göstermek için daha önce kurulmuş sonuçlarının 24 bazı gözden. Erken koku tercihi eğitim sırasında tek naris tıkanıklık lateralizan koku hafızasına 24 yol açar. Bellek korunmuş naris (Şekil 3) ile sınırlıdır. Yavrular eğitimi sırasında olduğu gibi tıkanır aynı naris ile koku tercihi için test edildiğinde, klimalı koku (örneğin, n...

Bu protokol, akut tek naris oklüzyonu kullanan sıçanlarda lateralize erken koku tercihi öğrenimini tanıtır. Yanallaştırılmış öğrenme, aynı hayvanlardaki davranışsal sonuçların incelenmesine ve biyolojik mekanizmaların desteklenmesine izin vererek, hayvanlar arasındaki tasarımların neden olduğu varyansı azaltır. Bu protokol, erken koku öğrenimini destekleyen moleküler mekanizmaları araştırmak için kullanılabilir.

Sinir Devresi Temelini Bellek Oluşumunda Diseksiyon için Yenidoğan Sıçanlarda bir Lateralize Koku Öğrenme Modeli

Rat pups during a critical postnatal period (&#8804; 10 days) readily form a preference for an odor that is associated with stimuli mimicking maternal ...

Bu protokol, akut tek nary oklüzyonları kullanan sıçanlarda lateralize erken koku tercihi öğrenimini tanıtır. Bu, önce çıkarılabilir polietilen burun tıkaçları inşa edilerek gerçekleştirilir. İkinci adım, davranışsal eğitimden önce istenen Koç'u tıkamaktır.Daha sonra, kokulu yatak takımını hazırlayın ve ardından hayvanı bir boya fırçası ile okşayarak kokulu yatak takımında eğitin. Son adım, iki seçenekli bir test cihazı kullanarak yanal koku tercihini test etmektir. Sonuç olarak, fosforile C amp yanıt elemanı bağlayıcı protein veya P beşikinin immünohistokimyası, tek nary inzilüsyona bağlı nöronal aktivitenin tek taraflı susturulmasını ve yöntemin geri dönüşümlülüğünü göstermek için kullanılır.Hayvan kontrol yöntemleri arasında var olan bu tekniğin en büyük avantajı, doğum sonrası katman 11'den önce intra hayvan kontrol deney tasarımımızın doğası gereği, iki koku alma hemisferinin birbirine bağlı olmadığı MA matür anterior commes projeksiyonlarının olmaması nedeniyle değişkenliği ve hayvan sayılarını azaltabilmemizdir. Bu, tek besleyici oklüzyon yoluyla bir yarım küreyi diğerinden bağımsız olarak manipüle etmemizi sağlar. Tıkalı hemisferler, hayvan içi kontrol görevi görür.Bu teknik, yenidoğan sıçanlarda koku alma öğrenimine odaklansa da, çıkarımlar, sinaptik plastisite, metaplastik ve bunların temelini oluşturan moleküler mekanizmalar gibi öğrenme ve hafıza sırasındaki nöral süreçlerle ilgili temel soruları yanıtlamamıza izin verecektir. Bu yöntemi kullanan çalışmalardan elde edilen sonuçlar, özellikle doğum sonrası kritik dönemlerde, öğrenme ve hafızanın temel ilkelerine ve memelilere genelleştirilebilir. Bu, patofizyolojik durumlarla ilişkili hafıza kaybı için potansiyel terapötikler için umut verici bir arka plan oluşturmamıza yardımcı olacaktır.Bu yöntem aynı zamanda koku algılama ve koku kaplama gibi koku alma ile ilgili diğer işlemler için de oldukça uygundur. Burun tıkacı polietilen 20 boru ve üç adet sıfır ipek dikiş ipliğinden yapılmıştır. İlk olarak, 22 ila yaklaşık 0,8 santimetre arasında küçük bir polietilen parçası kesin.Daha sonra ipek sütürü, boru bölümünün her iki tarafında da iplik olacak şekilde hazırlanan borudan geçirin. Tapanın dışındaki ipliğin bir ucuna bir düğüm atın. Boru bölümünü iplikteki düğümün üzerinden aşağı doğru çekin.Düğüm borunun içine yerleşmelidir. İpliğin her iki ucunu, borunun bir ucundan yaklaşık iki milimetre iplik çıkacak şekilde kesin. Bu işleme başlamak için, yavruyu barajdan çıkarın ve normal yataklarla kaplı güvenli bir tabağa koyun.Pamuk uçlu bir aplikatör kullanarak, tıkanacak Koç'un üzerine lokal anestezik jöle, %2'lik Ksilokain sürün. Yavrunun tabakta yaklaşık üç dakika dinlenmesine izin verin. Yavrudaki Lucin, bu prosedürdeki en kritik adımdır.Kanama ve doku hasarını önlemek için burun tıkacı takılması sırasında kür alınmalıdır. Daha sonra, yavruyu alın ve baskın el ile baskın olmayan elde nazikçe ama güvenli bir şekilde tutun, bir burun alın, aynı lokal anestezik jöleyi ipliğin çıkıntı yapmadığı ucun etrafına tıkayın ve sürün. Bu, hem tıkaç takılmasıyla ilişkili herhangi bir küçük ağrı için anestezik hem de nes'in içinde bir kayganlaştırıcı görevi görecektir.Yavruyu sıkıca tutarak ve tıkaç tamamen takılana ve Koç'tan sadece iki milimetrelik iplik çıkıntı yapana kadar çok hafif itmelerle tapayı yavaşça döndürerek burun tıkacını nazikçe takın. Bu süreçte her iki koç burcundan da kanama olmaması gerekir. Burun tıkacı takılması sırasında kanaması olan yavrular deney için kullanılamaz.Fişe alışması için hayvanın tabakta beş dakika dinlenmesine izin verin Koku kontaminasyonunu önlemek için eğitime başlamadan önce, kokulu yatak takımlarını bir davlumbazda hazırlayın ve yeni eldivenler giyerken 500 mililitre talaş yatak takımını plastik bir torbaya koyun. 0,3 mililitre nane özü almak için bir şırınga kullanın ve bunu plastik torbadaki yatakların üzerine püskürtün. Torbayı bağlayın, torbayı kuvvetlice sallayın ve yatak takımlarının torbada beş dakika dinlenmesine izin verin, kokulu yatak takımını kullanmadan önce beş dakika boyunca çeker ocakta açıkta bulunan 20 x 20 x beş santimetre akrilik eğitim kutusuna yerleştirin.Yatak takımları hazırlandıktan sonra kullanılmış eldivenleri atın. Eldivenlerin hayvanlarla temas etmesine izin vermeyin. 500 mililitre kokusuz yatak takımını başka bir temiz akrilik eğitim kutusuna koyun ve kokulu yatak takımı veya kullanılmış eldiven ile temas etmediğinden emin olun.Deneysel koku için alışılmış yavruyu kokulu yatakların üzerine yerleştirerek koku koşullandırma paradigmasına başlayın. Ayrıca inme OS pozitif yavrular. Yavruyu 30 saniye boyunca okşayın.Küçük bir boya fırçası kullanarak, öncelikle yavrunun arka bölgesi çevresinde hızlı dairesel hareketler kullanın. Okşama, koku soğancığı ve koku alma korteksine norepinefrin salınımına neden olur. Bu, koşulsuz bir uyaran görevi görür.Yavrunun 30 saniye dinlenmesine izin verin. 30 saniye okşayarak tekrarlayın, ardından toplam 10 dakika boyunca 30 saniye dinlenin. 10 okşama artı koku eşleştirmesi tamamlandığında, yavruyu bakım kutusundan çıkarın.Burun tıkacını çıkarın ve yavruyu kontrol için baraja geri koyun. Koku sadece işletim sistemi negatif yavrular. Alışılmış yavruyu herhangi bir okşama olmadan 10 dakika boyunca kokulu yatağın üzerine yerleştirin.10 dakika sonra yavruyu bakım kutusundan çıkarın. Burun tıkacını çıkarın ve yavruyu baraja geri koyun. Yanal koku tercihi testi, son eğitim seansını takiben çeşitli zaman noktalarında gerçekleştirilir.Test, iki santimetre nötr bölge ile ayrılmış iki akrilik eğitim kutusunun üzerine yerleştirilen 30 x 20 x 18 santimetre paslanmaz çelik test odasında gerçekleştirilir. Bir eğitim kutusunda kokulu yatak takımları, diğer kutuda ise temiz kokusuz yatak takımları bulunur. Daha önce gösterildiği gibi bir nane kokulu yatak takımı ve bir kokusuz yatak takımı hazırlayın ve her kutuyu test odasının karşı taraflarının altına yerleştirin.İki santimetre aralıkla. Plastik ağı test odasının metal ızgara zeminine yerleştirin. P'yi barajdan çıkarın ve tıkanmış olan Koç'un üzerine sert bir şekilde kokusuz silikon yağı sürün.Eğitim sırasında, gres ilk test prosedürü boyunca gerektiği gibi yeniden uygulanabilir. Yavruyu test odasının nötr bölgesine yerleştirin. Yavrunun bir dakika boyunca odayı keşfetmesine izin verin, yavrunun odanın iki tarafında, yani nane veya nötr kokulu yatak takımları üzerinde ne kadar zaman geçirdiğini kaydedin.Yavruyu kapalı bir plastik tutma haznesine aktarın ve bir dakika dinlenmeye bırakın. Yön tercihlerini kontrol etmek için yavrunun odadaki ilk yönünü değiştirerek test denemelerini toplam 10 dakika tekrarlayın. Testten hemen sonra, Koç'taki yağı silin.Daha önce gösterilen aynı RY tecrit prosedürünü izleyerek karşı Aries'e bir polietilen burun tıkacı yerleştirin ve hayvanın 10 dakika dinlenmesine izin verin. Daha sonra yavru üzerinde yanal koku tercih testi yapılır. Yine. Test bittiğinde, fişi çıkarın ve yavruyu baraja geri koyun.Koku ve okşama eğitimi sırasında tek dar inziva, korunan NRI'lerle sınırlı yanal bir koku hafızasına yol açar. Yavrular, eğitim sırasında olduğu gibi aynı yerde tenha bir koku tercihi için test edildiğinde, şartlandırılmış koku için bir tercih gösterirler. Bu, karşı nary tenha ile test yapıldığında gözlenmedi.Buna karşılık, sadece koku kontrol grupları, hangi hastalığın tıkandığına bakılmaksızın koku tercihi göstermez. Test sırasında, lateralize koku eğitimi, koku maruziyeti sırasında koku alma sisteminin lateralize aktivasyonu ile sonuçlanır, koku soğancığının veya OB'nin immünohistokimyası ve anterior piriform korteks veya bir PC, koku maruziyetini takiben tıkalı hemisferde kontralateral korunmuş hemisfere kıyasla önemli ölçüde daha az fosforile Creb gösterdi. Nissel boyama, OB'nin mitral hücre tabakasında ve her iki hemisferin PC'sinin piramidal hücre tabakasında karşılaştırılabilir hücre gövdelerini gösterir.Burun tıkacının çıkarılmasını takiben bezelye yengeç ekspresyonu OB'nin mitral hücrelerinde koku maruziyetini takiben ve PC'deki piramidal hücreler, tıkalı ve korunmuş hemisferler arasında karşılaştırılabilir. Bu, tek bir deneme nary inzivasının etkisinin geçici ve geri dönüşümlü olduğunu ve test sırasında koku algısını ve kokulara nöronal aktivasyonu etkileyebilecek görünür uzun vadeli nöronal hasara yol açmadığını gösterir. Bir kez ustalaştıktan sonra, uygun şekilde yapılırsa NA oklüzyonu beş dakikadan daha kısa sürede yapılabilir.Bu prosedürü denerken, burun deliğini tıkarken son derece dikkatli olmak önemlidir. Herhangi bir aşırı kuvvet veya yanlış teknik, kanamaya ve dolayısıyla burun deliğine zarar verebilir Bu prosedürü takiben. Sinaptik plastisite ile ilgili ek soruları yanıtlamak için ex vivo elektrofizyoloji ve moleküler teknikler gibi diğer yöntemler kullanılabilir.Bu videoyu izledikten sonra, koku öğrenmeyi lateralize etmek ve hafıza oluşumunu destekleyen nöral devreyi incelemek için geçici tek taraflı dar oklüzyonların nasıl kullanılacağını iyi anlamış olmalısınız.

a-lateralized-odor-learning-model-neonatal-rats-for-dissecting-neural

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Drosophila larvaları tat ödül ile koku uyaranlara ilişkilendirmek edebiliyoruz. Burada iştahlı çağrışımlı koku öğrenme analizine olanak sağlayan bir basit davranışsal paradigma tarif.

In iştahlı İlişkilendirilebilir Olfaktör Öğrenme<em&gt; Drosophila</em&gt; Larva

Bu protokolün amacı kemirgenlerde uzamsal bilişi araştırmaktır. Çift H su labirenti, öğrenme, pekiştirme ve hafızanın farklı bileşenlerinin yanı sıra hafıza sistemlerinin etkileşimini aydınlatmak için özellikle yararlı olan yeni bir testtir.

Çift H Maze: Kemirgenler A Sağlam Davranış Öğrenme için test ve Hafıza

Bu protokol, fareler öğrenme ve hafıza görevleriyle meşgulken ayrı beyin bölgelerindeki nöronal aktivitenin geçici olarak ve uzaktan nasıl susturulacağını açıklar. Yaklaşım, farmakogenetiği (Tasarımcı-Reseptörler-Özel-Tasarımcı-Tarafından-Aktive Edilen-İlaçlar), öğrenmenin farklı bileşenlerini ayırt etmek için tasarlanmış davranışsal bir paradigma (duyusal ön koşullandırma) ile birleştirir.

Öğrenmenin Ayrık Aşama sırasında Kemirgenler uzaktan suskunluğu Sinir Aktivitesi Bir Yöntem

Burada, fareler üzerinde koku ayrımcılık test etmek için bir ilişkisel öğrenme görev eğitim. Bu iletişim kuralı öğrenme kaynaklı beyin yapısal değişimler üzerine çalışmalar için de sağlar.

Koku öğrenme ve ayrımcılık farelerde bir objektif ve tekrarlanabilir testi

Burada drosophila öğrenme ve bellek bağlamında pre-ve/ veya postsinaptik kalsiyum görselleştirilebilen bir protokol sayılmaktadır. Sinapti lokalize kalsiyum sensörleri kullanılarak yapılan in vivo kalsiyum görüntüleme, bu tür bir assosiyatif öğrenmenin altında yatan sinaptik plastisitenin belirlenebileceği klasik koku alma koşullandırma paradigması ile birleştirilir.

Drosophila melanogaster Öğrenme Kaynaklı Sinaptik Plastisite Vivo Optik Kalsiyum Görüntüleme

Daha önce Caenorhabditis elegans'ın sırasıyla kitlesel ve aralıklı eğitim yoluyla kısa ve uzun vadeli ilişkisel anılar oluşturması için protokoller geliştirdik. Burada, C. elegans'ın koşullandırılması için, 1-propanol ve hidroklorik asidi, sırasıyla koşullu ve koşulsuz uyaranlar olarak eşleştirerek, engelleyici ilişkisel hafıza oluşturmak için ayrıntılı protokoller açıklanmaktadır.

Caenorhabditis elegans'ta İki Kimyasalın Eşleştirilmesiyle Engelleyici İlişkisel Öğrenme ve Hafıza Oluşumu

Burada, Drosophila juvenil beynindeki anten lobu sinaptik glomerüllerinin koku alma deneyimine bağlı yeniden şekillenmesini indükleme ve analiz etme yöntemlerini açıklıyoruz.

Erken Yaşamın Kritik Bir Döneminde Juvenil Beyin Koku Alma Duyusal Nöron Sinaptik Bağlantısının Deneyime Bağlı Yeniden Modellenmesi

Bu protokol, ol/gitme koku alma davranışı deneyleri için bir olfaktometrenin yapımını açıklar. Olfaktometrenin başarılı bir şekilde oluşturulmasını sağlamak için resimlerle birlikte adım adım talimatlar sağlanmıştır. İşlem sırasında karşılaşılan sorunların giderilmesine yönelik bilgiler de dahil edilmiştir.

Kemirgen Koku Alma Davranışı Çalışmaları için Bir Olfaktometre Oluşturma

Öğrenme ve hafıza gibi bilişsel süreçler sırasında hücresel aktiviteyi incelemenin önündeki önemli bir engel, in vivo görüntüleme hazırlığı için anesteziklerin kullanılmasıdır. Anestezi, Drosophila  da dahil olmak üzere birçok modelde kısa süreli hafızayı ve bilişi bozar.Bu çalışma, yetişkin Drosophila'yı anestezi olmadan in vivo görüntüleme için hazırlamak için benzersiz bir yöntem sunmaktadır.

In vivo (İn canlı) Anestezi Uygulanmamış Drosophila Yetişkin Sineklerde Nöral Aktivitenin Görüntülenmesi

Burada yöntemleri C. elegans ilişkisel öğrenme ve kısa ve uzun vadeli çağrışımlı hafıza test etmek için açıklayın. Bu nüfus Testler uçucu koku doğru chemotax solucanlar yetenekleri istihdam ve kemoatraktan bütanon gıda eşleştirme üzerine olumlu dernek kurma. Klima dönemlerinin sayısının artırılması uzun vadeli bellek neden olur.

C. elegans Pozitif bütanon Öğrenme, Kısa vadeli ve uzun vadeli ilişkilendirilebilir Bellek Tahliller

Öğrenin, yenidoğan sıçanlarda tek tarafı burun tıkacı ile lateralize koku öğrenme modelini. Davranışsal ve biyolojik değerlendirmeleri aynı hayvanda yaparak değişkenliği azaltın.

Sinir Devresi Temelini Bellek Oluşumunda Diseksiyon için Yenidoğan Sıçanlarda bir Lateralize Koku Öğrenme Modeli

Daha fazla video keşfet