Modifiye Bergström Tekniği İnsan İskelet Kası Biyopsi Prosedürleri

Bu prosedürün genel amacı, bir insan gönüllünün vastus laterallerinden bir iskelet kası biyopsisi örneği yapmak için modifiye edilmiş Bergstrom tekniğini kullanmaktır. Bu, ilk olarak biyopsi bölgesinde cilt ve deri altı dokusunun uyuşturulmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adımda, iskelet kasını kaplayan deri, cilt altı dokusu ve fasya yoluyla bir kesi yapılır.

Daha sonra biyopsi iğnesi kesilerden iskelet kasına ilerletilir ve son aşamada biyopsi örneği alınır. Biyopsi iğnesi dikkatli bir şekilde çıkarılır ve kesi cerrahi yapıştırıcı ile kapatılır. Sonuç olarak, iskelet kası biyopsi örnekleri histolojik analizler için hazırlanabilir ve çeşitli egzersiz koşulları altında biyokimyasal değişiklikler ve spesifik proteinlerin ve genlerin ekspresyonu için analiz edilebilir.

Bu yöntem, yorucu egzersize biyokimyasal, moleküler ve hücresel tepkilerin neler olduğu gibi iskelet kası fizyolojisi alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Prosedürü göstermek için yerel hastanemizden bir doktor olan Dr.Gerald Ferris ve laboratuvarımızdan bir teknisyen olan Maschi Tanaka olacak. Bilgilendirilmiş onam alındıktan sonra, deneğe uyluk açıkta kalacak şekilde yastıklı bir masaya sırtüstü yatmasını söyleyin, bacağı rahat bir şekilde konumlandırın, böylece diz tamamen uzatılacak ve yaklaşık bir santimetre yükseltilecek şekilde topuğun altına küçük bir havlu rulosu koyun.

Daha sonra, deneğe açıkta kalan uyluk kasını anlık olarak kasması talimatını verin, böylece geniş lateralis biyopsi bölgesi fasyanın hemen önünde görselleştirilebilir. Lata, patellanın üst kısmı ile daha büyük trokanter arasındaki mesafenin yaklaşık üçte biri. Daha sonra, biyopsi bölgesinin etrafındaki yaklaşık 15 ila 15 santimetrelik bir bölgeden saçları çıkarmak için makas kullanın ve uygun KKD ve septik bir teknik kullanarak biyopsiyi toplamak için alanı topikal bir antiseptik içine batırılmış swablarla sterilize edin.

İlk olarak, cilt ağarıyor gibi görünene kadar kesi bölgesine etil klorür püskürtün. Daha sonra, dermise yatay olarak 25 gauge bir iğne yerleştirin, iğneyi aspire edin ve cilt yüzeyinin altında iki ila dört milimetre çapında bir kabarcık oluşturmak için yaklaşık 100 mikrolitre lidokain dağıtın. Daha sonra iğneyi deri altı dokusuna ilerletin, tekrar aspire edin ve başka bir kabarcık oluşturmak için yaklaşık bir mililitre lidokain dağıtın.

İkinci kabarcık yatıştıktan sonra, iğneyi insizyon bölgesine sokun, yüzeysel olarak fasyaya durdurun, iğneyi son bir kez aspire edin ve ardından iğneyi uyluktan çekerken kalan dört mililitre lidokaini yavaşça enjekte edin. İki ila üç dakika sonra, anesteziyi doğrulamak için steril bir neşterin ucuyla biyopsi bölgesini hafifçe inceleyin. Bölge hazır olduğunda, uyluk kemiğine göre 45 derecelik bir açıyla deri ve deri altı dokulardan bir santimetrelik düz bir kesi yapın.

Daha sonra her yönde bir kez, neşteri fasyadan kas içine bir kesi yapacak kadar derine sokun. Genel olarak, bu yönteme yeni başlayan kişiler, lokal anestezik uygularken ve cildi, deri altı dokusunu ve fasyayı keserken deri altı dokusu ile fasya arasındaki direnç değişikliğini hissetmeyi öğrendikleri için sabırlı olmalıdır. Şimdi biyopsi iğnesini, uç fasyaya girene kadar insizyonun yapıldığı açıyla dokuya sokun.

İğneyi, kasın içine doğru ilerlerken fasyanın hemen yanından aşağı doğru bir açıyla ilerletin. İğne ilerletilirken deneğe rahat kalmasını ve uyluk kasını kasmamasını söyleyin. Daha sonra biyopsi iğnesi yerine oturduktan sonra, biyopsi iğnesi içinde emme oluşturmak için tek kullanımlık 60 mililitrelik bir şırıngayı 40 ila 50 mililitre işaretine kadar açın.

Dış kanülün kas içindeki konumunu korurken dış kanülün penceresini açmak için iç trokarı yaklaşık bir santimetre dışarı çekin. Daha sonra kas örneğini kesmek ve toplamak için iç trokarı hızla kapatın. Ardından, emişi serbest bırakmak için durdurma musluğunu açın ve biyopsi iğnesini 90 derece döndürün, işlemi toplam dört klips için üç defaya kadar tekrarlayın.

Daha sonra iğne çıkarıldıktan sonra biyopsi iğnesini uyluktan çıkarın. İç trokarı bir santimetre geriye çekin ve yeterli miktarda doku toplanıp toplanmadığını tahmin etmek için dış kanülün lümenini görsel olarak inceleyin. Biyopsi bölgesine steril gazlı bez ve buz torbası ile 10 ila 15 dakika boyunca doğrudan baskı uygulayın.

Bu süre zarfında, dokuyu biyopsi iğnesinden çıkarın Buzlandıktan sonra, bir elinizle kesiyi kapalı olarak çekerken, diğer elinizle kuru kesiğin üstüne tek kat cerrahi yapıştırıcı uygulayın. Yapıştırıcı yaklaşık 90 saniye sertleştikten sonra, insizyona dik olarak bant kapakları uygulayın, ardından insizyon bölgesine üç ila dört adet ikişer x iki inç steril olmayan gazlı bez pedleri yerleştirin ve dokuya doğrudan baskı uygulamak için bunları kendinden yapışan yapışkan sargı ile sabitleyin. Son olarak, deneğe bir ila dört gün boyunca uygun yara bakımı, normal ve anormal reaksiyonlar ve aktivite yönergeleri hakkında sözlü ve yazılı talimatlar verin.

Randomize plasebo kontrollü bir geçiş çalışmasında, erkek dayanıklılık sporcuları koşu bandında üç saat boyunca% 70 VO O2 maksimumunda koştular ve saatte bir litre oranında% 6 karbonhidrat veya plasebo içeceği tükettiler. Egzersiz öncesi ve sonrası iskelet kası dokusu biyopsileri alınmış, üç saatlik koşu sonrası deneyimli dayanıklılık sporcularından elde edilen iskelet kası dokusunda çeşitli sitokinlerin gen ekspresyonunun arttığı gözlenmiş, ilginç bir şekilde iskelet kası üzerinde hiçbir etkisi olmamasına rağmen, glikojen tükenmesi, karbonhidrat alımının IL altı ve IL sekiz mRNA düzeylerini zayıflattığı gözlenmiştir. Bu teknik, kas fizyolojisi alanındaki araştırmacıların, farklı egzersiz yoğunlukları sırasında yakıt substratı kullanımı, egzersize bağlı kas hasarı ve diğerleri arasında hücreler arası sinyalleşme gibi ilkeleri keşfetmelerinin yolunu açtı.