Bir Şok Grid Kullanımı olmadan Kemirgen Egzersiz Endurance Değerlendirilmesi: Zorla Egzersiz Alternatif Bir

Bu prosedürün genel amacı, istemli egzersiz dayanıklılığını belirlemektir. Laboratuvar farelerinde bu, önce farenin bir ila iki saat boyunca ev kafesindeki prosedür odasına alışmasına izin verilerek gerçekleştirilir. Daha sonra farenin koşu bandına ve motorun sesine alışmasına izin verilir.

Ardından, koşu bandı hızı, fare maksimum sürekli hızında rahatça çalışana kadar kademeli olarak artırılır. Son adım, farenin ne zaman tükendiğini belirlemektir. Sonuç olarak, farenin tükenmek için koştuğu süre, bir şok ızgarasının kullanımından kaynaklanan stresin kafa karıştırıcı etkileri olmadan bir egzersiz dayanıklılığı ölçüsünü ortaya koymaktadır.

Bu tekniğin temel avantajı, egzersiz dayanıklılığını ve fareleri belirlemek için mevcut yöntemlerin iyileştirilmesidir, çünkü öncelikle fareleri koşmaya teşvik etmek için bir atış ızgarası kullanmaz, böylece hem hayvan hem de deney için stresin kafa karıştırıcı etkilerini azaltır. Fareler için deney gruplarına ve egzersiz sonrası prosedürlere önceden karar verin. Koşu bandını bu prosedüre ayrılmış sessiz bir odada sağlam bir araba veya masa üzerine yerleştirin.

Koşu denemeleri sırasında, koşu bandını fare boyutundaki şeritler için ve protokole uygun bir eğimde ayarlayın. Pozitif beş derecelik eğim burada, yokuş aşağı koşu sırasında meydana gelen eksantrik egzersize bağlı kas hasarını önlemek için kullanılır. Dışkıyı yakalamak için koşu bandı zilinin altına emici bir ped yerleştirin.

Farenin, kafes arkadaşlarıyla birlikte taşınan ev kafesinde prosedür odasına bir ila iki saat alışmasına izin verin. Tek bir fare seçin ve etiket numarasını kaydedin. Ayrıca fareyi tartın ve ağırlığını kaydedin.

Yaklaşık beş dakika alışmak için fareyi motor açık olmadan koşu bandına yerleştirin. Koşu bandı kayışı çalışmadan gücü açın ve farenin beş dakika daha makine gürültüsüne alışmasına izin verin. Bu noktada hareketsiz gruplardaki fareleri koşu bandından çıkarın ve kafeslerine geri koyun veya deney tasarımına göre egzersiz sonrası prosedürleri uygulayın.

İklimlendirmeden sonra kayışı düşük hıza çevirin. Hayvan platformda değil de kemeri keşfederken, isteksiz hayvanları koşu bandında kalmaya ve koşmaya teşvik etmek için farenin arka kısmına bir dil bastırıcı ile bir ila üç kez hafifçe vurun veya kaldırın. Bir laboratuvar zamanlayıcısı başlatın Fare dakikada 10 metrelik başlangıç hızında çalışmaya başladığında, hızı yavaşça artırın.

Fare, yaklaşık her iki dakikada bir dakikada bir metrelik artışlarla kayışın tepesindeyken, hızı önceki ayara düşürün. Fare sabit bir hızda değil de tekrar tekrar kısa aralıklarla çalışırsa, çoğu fare kolayca koşar, ancak bazen kısa süreler için dururlar. Koşmaya devam etmesini teşvik etmek için hayvanın arkasına hafifçe vurmak veya kaldırmak için dil bastırıcıyı kullanın.

Çoğu zaman, dil bastırıcının kendilerine doğru geldiği eli fark etmek, farelerin biraz daha koşmasına neden olur. Çalışmadaki geçici kesintiler için zamanlayıcıyı durdurmayın. Hızı ayarlayarak ve farenin bu hızı kaydetmesini izleyerek her farenin maksimum sürekli çalışma hızını belirleyin.

Bazı fareler koşmayı tamamen reddeder. Bu tür fareler kısa aralıklarla çalışacaktır. Daha sonra tımar etmek veya pedal çevirmek için durun, bu platforma oturun ve ön ayaklarını kemer üzerinde kullanın.

Reddeden bir farenin klasik duruşu, dil bastırıcı tarafından koşu bandına geri itilmemek için dört ayağı da hayvanın altına dikilerek kamburdur. Bazen bir fare, koşmak istemediğinde, dili, depresörü ısırdığında veya bir kaçış yolu olarak tırmandığında dil bastırıcıya karşı agresif hale gelir. Denemenin ilk beş dakikasında farenin çalışıp çalışmayacağı açıktır.

Analizden kaçmayı reddeden fareleri çıkarın ve tanımlayın, ancak onları hareketsiz fareler olarak saymayın. Deneysel tasarımınıza bağlı olarak, reddeden fareler farklı bir günde tekrar test edilebilir. Yorgunluk, art arda üç duraklama ve nazik teşvike rağmen koşmaya devam etmeyi reddetme ile tanımlanır.

Ayrıca zor nefes alma ve yayvan duruş gibi fiziksel yorgunluk belirtileri. Yorgun fareleri tanımlayın ve zamanlayıcıyı durdurun. Tüm hızlarda koşmak için harcanan toplam süreyi kaydedin.

Deneysel tasarıma bağlı olarak, fareyi kafesine geri koyun veya kan veya doku toplama gibi egzersiz sonrası hemen prosedürler uygulayın. Kurumsal yönergelere göre, her bir fareyi test ettikten sonra, önceki farenin kokusunun bir sonraki fareyi test eden sonraki farelerin davranışını etkilememesi için kemeri antiseptik bir havluyla silerek temizleyin. Her fare için yeni bir dil bastırıcı kullanın.

Aynı kafeste bulunan fareler, prosedür odasına ek bir alışma olmadan aynı gün sırayla test edilebilir. Egzersiz dayanıklılığı, kas kaynaklı sitokin IL 15 ekspresyonunda farklılık gösteren C 57 siyah altı farenin farklı suşlarının moleküler ve metabolik profilini doğru bir şekilde yansıtır; IL 15'i aşırı eksprese eden transgenik fareler, yemek kontrollerine kıyasla önemli ölçüde daha fazla tükenme süresi sergilerken, IL 15'ten yoksun fareler, tükenme vahşi tip kontrollere ulaşmadan önce önemli ölçüde azaltılmış çalışma süreleri sergiler. Bakın, iki farklı kaynaktan gelen 57 siyah altı fare, önemli ölçüde farklı çalışma süreleri sergilemez.

Maksimum sürekli koşu hızı yalnızca IL 15 nakavt farelerinde farklılık gösterdi. Bu tekniğin kaçınılmaz bir sınırlaması, bazı farelerin gönüllü olarak koşmayı reddetmesidir. Koşmayı reddeden genç yabani tip kontrol farelerinin yüzdesi %10 civarındadırDört aylıkken, reddetme yüzdesi sekiz aylıkken %20'ye çıkar ve 16 aylıkken %60'ın üzerine çıkar.

Bununla birlikte, daha büyük yaş grubundaki reddetme yüzdesi, IL 15 transgenik farelerde önemli ölçüde daha düşüktür. Bu prosedürü denerken, sakin ve rahat kalmayı unutmamak ve farenin davranışına dikkat etmek önemlidir. Bu videoyu izledikten sonra, egzersiz dayanıklılığını belirlemek için bir koşu bandının nasıl kullanılacağını ve e çakra kullanmadan farelerin nasıl kullanılacağını iyi anlamış olmalısınız.