RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/51898-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Bir prosedür, sıçanlarda alkol arama davranışının yenilenmesi açıklanan tetiklemek için, bir alkol ilişkili çevre koşullarından kapasitesini incelemek.
Bu prosedür, Pavlovian alkol arama davranışının yenilenmesini tetiklemek için alkolle ilişkili bir bağlamın kapasitesini inceler. Bu, ilk olarak etanol deneyimli sıçanların iki benzersiz bağlamda yapılandırılmış şartlandırma odalarına alıştırılmasıyla gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, iki farklı işitsel ipucunun alkol mevcudiyetini veya eksikliğini işaret ettiği bir bağlamda Pavlovian ayrımcılık eğitimi seansları yapmaktır.
Üçüncü adım, nesli tükenme eğitimi yapmaktır. Her iki işitsel ipucunun da alkolsüz sunulduğu ikinci bağlamda, son adım, fareleri orijinal eğitim bağlamına döndürmek ve her iki işitsel ipucunu da alkolsüz sunmaktır. Bu manipülasyon, daha önce alkolle ilişkilendirilen işitsel ipucu tarafından tetiklenen alkol arama davranışının yenilenmesine neden olur.
Bu tekniğin araçsal koşullandırma gibi mevcut prosedürlere göre en büyük avantajı, alkolü öngören Pavlovcu ipuçlarının ortaya çıkardığı bir hayvan alkol arama davranışı modeli sağlamasıdır. Bu yöntem, bağımlılık alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir, örneğin alkolle ilişkili bağlam nüksetmeye neden olur mu Eğitimden önce, fareleri test odasına ve deneyimleyecekleri iki çevresel bağlama alıştırın. Fareleri her zaman hayvan bakım tesisinden test odasına tutarlı bir şekilde taşıyın.
İlk oturumda, fareleri 24 saat sonra oda ışıkları yanmış ve ses azaltma kabinlerindeki fanlar açık olarak 20 dakika boyunca test odasında bırakın. İkinci alışkanlık seansını ilki gibi yapın, ancak şimdi her fareyi tartın ve tutun. Üçüncü oturumu 24 saat sonra gerçekleştirin.
Bunun için, her bir koşullandırma odasını görsel koku alma ve dokunma uyaranlarının iki farklı kombinasyonundan biriyle ayarlayın. Tutarlı bir bağlam sağlamak için, koku alma uyaranı her odaya eklenen son bağlamsal uyaran olmalıdır. Farklı koku alma uyaranlarının birbirine karışmasını en aza indirmek için, odaların kapılarını ve her odanın bulunduğu ses azaltma kabinini kapatın.
Üçüncü seans için koku alma uyaranını uyguladıktan hemen sonra, her bir fareyi tartın ve 20 dakika boyunca kondisyon odasına koyun. Sıçanların yarısı bağlamı deneyimlemeli, diğer yarısı ise bağlamı deneyimlemelidir. İkincisi, sıçanlar ve odaları arasındaki hayati tutarlılık ihtiyacının korunmasına yardımcı olmak için, sıçanları belirli bir odayı tanımlayan bir sayı ile işaretlemek yararlıdır.
Tüm sıçanlar odalarına yerleştirildikten bir dakika sonra, odalardaki ev ışığını aydınlatın 20 dakika boyunca, sıçanlar tarafından yapılan tüm sıvı portu girişlerini kaydedin. Sonra ışıkları kapatın, fareleri boşaltın ve onları bakım tesislerine geri koyun. Aynı günün ilerleyen saatlerinde, şartlandırma odalarının bağlamının tersine çevrildiği üçüncü seansla neredeyse aynı olan dördüncü bir alışkanlık seansı yapın.
Son olarak, her seanstan sonra, her zaman koku alma bağlamsal uyaranının uygulandığı şartlandırma odalarının atık tepsilerini ve zemin panellerini ve Petri kaplarını yıkayın. Haftalık olarak yalnızca kokusuz temizlik solüsyonları kullanın. Bu eğitim için odaları tamamen temizleyin.
Sıçanları, son iki etanol erişim seansında aynı ortalama etanol alımına sahip iki gruba ayırın. Bir grup birinci bağlamda, diğeri ise bağlam içinde eğitilir. İki. Bu oturumlar sırasında, sıçanlar, biri etanol ile eşleştirilmiş ve diğeri olmayan iki farklı işitsel ipucunu ayırt etmeyi öğrenirler.
Bu yüzden ilk adım, etanol ile 20 mililitre şırınga hazırlamaktır. Sıvı portları için, sıvı portunun arkasından gelen boruyu yüklü şırıngaya bağlayın. Kör bir iğne kullanarak, her bir şırıngayı ses azaltma kabininin dışındaki kendi pompasına yükleyin.
Ardından, pompayı manuel olarak ilerleterek boruyu doldurun ve sıvı portundaki fazla etanolü silin. Şimdi fareleri laboratuvar test odasına getirin. Alışkanlık sırasında olduğu gibi, her bir fareyi atanmış şartlandırma odasına yerleştirmeden önce tartın.
Her odadaki bağlam yapılandırmasını iki kez kontrol ettiğinizden ve doğru fareyi doğru odaya yüklediğinizden emin olun. Yanlış bağlama veya yanlış CS plus'a maruz kalmış bir farenin çalışmadan çıkarılması gerekebilir. Tüm fareler tartıldıktan ve yüklendikten sonra, eğitim oturumunun olaylarını kontrol eden bilgisayar programını başlatın.
Programın beş dakikasında, her oturumda her odadaki ev ışığı aydınlatılır, 16, on saniyelik beyaz gürültü patlamaları ve 16, on saniyelik tıklama gürültüsü patlamaları sunulur. Her sıçan için, etanol için bu işitsel uyaranlardan birini belirleyin ve C'lerin son altı saniyesi boyunca bu tanımlamaları iki koşullandırma bağlamında dengeleyin, ayrıca pompa, sıvı portuna 0.2 mililitre etanol verir. Bir saatlik bir seans yapmak için uyaranları değişken zamanlı 67 saniyelik bir programa ayarlayın.
C'lerden 10 saniye önce, C'ler sırasında ve C'lerden 10 saniye sonra başlayan tüm akışkan bağlantı noktası girişlerini kaydedin. Ayrıca, tüm Pavlovian ayrımcılık eğitimi oturumu için yapılan toplam sıvı portu girişlerinin sayısını kaydedin. Seans sona erdiğinde, evin ışıklarını kapatın ve fareleri şartlandırma odalarındaki hayvan bakım tesisine geri koyun.
Sıçanların seans sırasında verilen 3.2 mililitre etanolü tükettiğinden emin olmak için sıvı portlarını kontrol edin. Sıçanlar odalardan çıkarıldıktan sonra, etanol tükettiklerinden emin olmak için sıvı portlarını kontrol etmeyi unutmayın, etanol tüketmeyen ve aynı zamanda CS sırasında düşük seviyelerde port girişleri gösteren farelerin artı çalışmadan çıkarılması gerekebilir. Klima odalarını her zamanki gibi temizleyin.
Hortumu önce suyla yıkayarak ve ardından içinden hava geçirmek için boş bir 60 mililitre şırınga kullanarak temizleyin. Sıçanlar, port giriş yanıtları ile belirtildiği gibi iki işitsel uyaran arasında ayrım yapana kadar seansları günlük olarak tekrarlayın. CS plus'a port girişlerinde 16 ila 20 oturum içinde stabilize olan seçici bir artış beklenmektedir.
Yok olma seansları için. Her farenin kondisyon odası, Pavlovian ayrımcılık eğitimi sırasında kullanılandan farklı bir bağlamla kurulmalıdır. Yok olma işleminin gerçekleştirildiği bağlam, Bağlam B olarak adlandırılır. Yok olma oturumlarını tam olarak aynı bilgisayar programını kullanarak ayrımcılık oturumları gibi yürütün, ancak CS Plus sırasında herhangi bir etanol vermeyin.
Tutarlılık için, pompalara etanol içermeyen boru ile hazneye bağlanan boş 20 mililitrelik şırıngalar yüklenir. Sıçanlar CS artı ve eksi arasında ayrım yapmayı bırakana kadar yok olma seanslarını günlük olarak gerçekleştirin. Bu, her zaman olduğu gibi yaklaşık sekiz seans sürebilir, yenileme testine geçmeden önce ekipmanı gerektiği gibi temizleyin.
Yok olma eğitiminin sonunda CS plus sırasında liman girişlerinde başlangıca göre önemli bir azalma olması hayati önem taşımaktadır. Bağlam kaynaklı yenileme testi, yok olma eğitiminden farklı bir bağlam olan Pavlovian ayrımcılık eğitimi sırasında kullanılanla aynı oda bağlamı konfigürasyonunu kullanır. Bu tek seanslık test, etanol verilmemesi ve şırıngaların boş olması dışında, bir Pavlovian ayrımcılık eğitimi seansıyla aynı şekilde gerçekleştirilir.
İşitsel uyaranları sunmak için aynı bilgisayar programını kullanın. Beklenen sonuç, CS'ye seçici olan alkol arama davranışının yenilenmesi ve testin sonunda ekipmanın temizlenmesidir. Daha önce olduğu gibi, sıçanlara ev kafeslerinde etanole periyodik aralıklı erişim verildiğinde, etanol tüketimi ve etanol tercihi sekiz ila 12 eğitim seansından sonra stabil seviyelere yükseldi.
Pavlovian ayrımcılık eğitimi sırasında, CS'ye port giriş yanıtları artı eğitim oturumları arasında arttı, CS eksisine yanıt vermede hafif bir artış oldu, ancak sıçanlar yok olma eğitimi sırasında iki işitsel ipucu arasında ayrım yapmayı öğrendiler, CS plus'a port giriş yanıtları yavaş yavaş azalırken, CS eksisine verilen yanıtlar düşük kaldı. Sıçanlar, Pavlovian ayrımcılık eğitimi ile ilişkili bağlama geri döndürüldüğünde, CS plus sırasında nesli tükenme eğitiminden sonraki sonuçlara göre port girişlerinde seçici bir artış meydana geldi. Buna karşılık, CS eksisine verilen yanıtta herhangi bir değişiklik olmadı.
Bu sonuçlar, gizli bir ipucu tarafından ortaya çıkan alkol arama davranışının, çevresel bağlam tarafından güçlü bir şekilde modüle edilebileceğini göstermektedir. Bu prosedürü denerken, araştırmacının parfüm, kolonya veya diğer kokulu ürünleri kullanmaması önemlidir. Sıçanlar yüksek derecede koku alma canlılarıdır ve araştırmacıyla ilişkili koku alma ipuçları bu görevdeki davranışa zarar verebilir Bu yöntemi takiben, hangi beyin bölgelerinin dahil olduğu gibi ek soruları yanıtlamak için intrakraniyal mikro infüzyonlar gibi diğer prosedürler gerçekleştirilebilir.
Bağlam, Pavlovian şartlı alkol arayışının yenilenmesine neden oldu.
Related Videos
12:44
Related Videos
13.8K Views
10:35
Related Videos
11.7K Views
07:50
Related Videos
10.2K Views
06:57
Related Videos
11.5K Views
19:57
Related Videos
8.9K Views
08:05
Related Videos
10.3K Views
08:29
Related Videos
12.3K Views
04:11
Related Videos
17.8K Views
08:05
Related Videos
3.1K Views
08:45
Related Videos
1.4K Views