A Çok Reproducible ve Kolay Yöntem gerçekleştir In Vivo Göz Enükleasyon

Bu prosedürün genel amacı, anestezi uygulanmış bir fareden bir gözü çok basit ve tekrarlanabilir bir şekilde başarılı bir şekilde çıkarmaktır. Bu, önce kavisli bir forseps ile kantusun üzerine hafifçe bastırarak göz küresinin yer değiştirmesiyle gerçekleştirilir. İşlemin ikinci adımı, optik siniri sıkıca kavramak için forsepsleri gözün arkasına yönlendirmektir.

Üçüncü adım dairesel hareketler yapmaktır. Forsepsleri tutan el ile fare gövdesi aynı yönde hareket edecektir. Son adım, göz küresinin ayrılmasına neden olan optik sinirin daralmasını sağlamak için hareketlerin hızını kademeli olarak artırmaktır.

Sonuç olarak, göz, örneğin farenin beynindeki farklı duyusal yoksunluk plastisite süreçlerini ortaya çıkararak, AFR görsel yolunu uzunlamasına incelemek için kullanılabilir. Bu tekniğin, sıklıkla dikiş atma ve künt diseksiyon kullanan mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, iasyon yöntemimizin basitçe optik sinirin daralmasına dayanması, bunun da minimum kanama ile sonuçlanan veya hiç kanama olmaması ve öğrenilmesinin çok kolay olmasıdır. Salin içinde ketamin ve meine karışımının intraperitoneal enjeksiyonu kullanılarak fareyi uyuşturmakla başlayın.

Farenin reflekslerini kontrol ederek sedasyonu onaylayın. Ayak parmaklarını forseps ile sıkıştırın ve refleks tepkisi olup olmadığını kontrol edin. Yanıt yoksa, göz kapaklarını ve göz çevresindeki alanı temizlemek için pamuk uçlu bir aplikatör ve% 70 etanol kullanın.

Göz kırpma yanıtı yoksa, göz çekirdeklenme ile devam edin. Fareyi sabit, düz, pürüzsüz ve kuru bir yüzeye koyun. Kavisli tırtıklı forsepslerin uçlarını bir cam boncuk sterilizatöründe sterilize edin.

Kullanılacak en iyi uç boyutu 0,5 x 0,4 milimetredir. Daha sonra, göz küresi yuvadan çıkana ve optik sinire ulaşılabilene kadar forseps ile kantusun üzerine hafifçe bastırın. Daha sonra forsepsleri gözün arkasına yönlendirin ve optik sinir kavranmış halde optik siniri sıkıca bastırın ve tutun Forsepsleri yavaşça en az direnç yönünde daireler çizerek hareket ettirmeye başlayın.

Fareyi ameliyat masasına karşı tutarak, fare sabitlenmelidir. Vücudu da hareket etmelidir. Yedi ila 15 dairesel hareketten sonra, optik sinir daralana ve göz küresi ayrılana kadar kademeli olarak hızlanın.

Rotasyonlar çok hızlıysa veya forseps çok sert çekilirse, sinir erken kırılır ve yalvarma takip eder. Anesteziyi tersine çevirmekle başlayın. Fareye tuzlu su içinde intraperitoneal aamaz tüm hidroklorür enjeksiyonu yapın.

Sonra intramüsküler olarak 0.05 uygulayın. Meloksikam ve analjezi gibi hazırlanmış ağrı kesicilerden mililitre her 24 saatte bir uygulanmalıdır. Şimdi, korneanın susuz kalmasını önlemek için kalan göze göz merhemi sürün.

Bu ameliyattan önce uygulanmış olsaydı, masaya bulaşacaktı. Fareyi bir tutma kafesine taşıyın, farenin vücut ısısını bir ısıtma plakası veya battaniye kullanarak kontrol edin, hayvan motor kontrolünü yeniden kazandığında iyileşirken onu ev kafesine geri aktarın. Gözün başarılı bir şekilde çıkarılması, kanama olmaması veya orbital dokuda veya göz yuvasında herhangi bir belirgin fiziksel hasar olmaması ile karakterize edilir.

Enükleasyonlu göz, pürüzsüz bir kornea ve koroid gibi sağlam bir küre özelliklerine sahip olmalıdır. Optik sinir, retinanın tabanında daraltılmalıdır. Hayvan üzerinde kalan sinir uzunluğu temiz bir kesim göstermeli ve çevresindeki beyin bölgesi zarar görmemelidir.

Bu teknikler kullanılarak bir deney yapıldı ve ardından serebral kortekste görsel olarak indüklenen nöronal aktiviteyi ortaya çıkarmak için C iki hibridizasyonda radyoaktif olarak Z 2 68 mRNA'nın tespiti yapıldı. Görsel olarak uyarılan kontrollerin aksine, hem gözlü hem de çekirdekli fareler, görsel girdi eksikliğine bağlı olarak sol ve sağ görsel kortekste bazal aktivite gösterdi. Bu nedenle, görsel ile görsel olmayan korteks arasındaki sınırlar ortaya çıkarıldı.

Monoküler enükleasyon, iki monoküler tahrikli bölgenin, çıkarılan boyanın kontralateralinde görsel kortekste hipoaktif olduğunu ortaya çıkardı. Bu bölgeler medial ve lateral olarak merkezi binoküler bölgeye yerleştirilir. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa bir dakikadan daha kısa sürede yapılabilir.

Bu nedenle, KBB görsel yolundaki aktiviteyi, plastisiteyi veya diğer fenomenleri incelemek için etkili bir yöntem sağlar.