Name: İnsan Tüm Kan gerçek zamanlı sitotoksisite deneyleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-07T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 27 s
Description: Öğrenin, insan tüm kanında lenfoma hücrelerinin sitotoksisitesini gerçek zamanlı görüntüleme ile ölçme yöntemini. Bu teknik, yüksek verimli hücre konumlandırma ve otomatik görüntü işleme kullanarak antikor etkinliğini kantitatif olarak değerlendirir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz bu işi [R33 CA174616-01A1] finansmanı için NIH Ulusal Kanser Enstitüsü IMAT programı teşekkür ederim.

1. Hedef hücrelerin hazırlanması <ol><li> 37 C &#39;de (% 10 ısı ile inaktive edilmiş fetal büyükbaş hayvan serumu (FBS), 4nM L-glutamin, 500 IU / ml penisilin / streptomisin ile RPMI 1640 kültür ortamı), büyüme ortamı içinde, hedef hücreler (örn., Raji lenfoma hücreleri) korumak % 5 CO2 inkübatörde kuluçkalaşmıştır. </li><li> 15 ml&#39;lik bir tüp içinde hedef hücrelerini pellet haline getirmek santrifüjleyin. Santrifüj, zaman farklı hücre tiplerine göre değişir; Raji hücreleri için 468 xg&#39;de 3 dakika boyunca santrifüj. </li><li> İlk olarak, süpernatan yüzeyinde oluşan kabarcıkları aspire ve tüm süpernatant kaldırmak. </li><li> Tüpe PBS, 10 ml ilave edilir. Hücre tutam kırmak için çözüm pipetleme ve birkaç kez aşağı hücreleri yeniden askıya. </li><li> Santrifüj 468 x g&#39;de 3 dakika boyunca numune. </li><li> Üstte kalan sıvı kısmın yüzeyi üzerinde oluşan kabarcıkları aspire ve tüm süpernatant kaldırmak. </li></ol> Hücre Mikroarray&#39;ler 2. hazırlanması <ol><li> Obtain hücre eki 96 plaka kitleri veya tek hücreli dizi 8 iyi odasının slaytlar (malzeme / reaktiflerin tabloya bakınız). </li><li> Kiti DNA reaktife Aktivatkörünün 1.2 ul uygulayın. , Şişeyi kap ters çevirin ve yavaşça çözüm karıştırmak için sallayın. </li><li> Çözelti oda sıcaklığında 20 dakika reaksiyona girmesine izin verilir. </li><li> (15 ml tüp içinde) hedef hücreler pelet karışık bir çözelti uygulanır. </li><li> 500 nM&#39;lik bir nihai konsantrasyonda yeşil floresan sitosolik boyalar ekleyin. </li><li> Orbital bir karıştırıcı üzerinde, oda sıcaklığında 30 dakika boyunca karıştırılmış çözeltisi ve boya ile hedef hücreler inkübe edin. </li><li> 5 ml PBS ile iki kez hücreler yıkanır ve 10 mi büyüme ortamı içinde tekrar süspansiyon hücreleri. </li><li> Her bir oyuğa adım 2.7 solüsyonundan 100 ul uygulayın. Hemasitometre ile hücre sayısı. Emin hücre sayıları kuyu başına 6 10 × 4-01 Ekim × 5 arasında hücreleri değişir olun. </li><li> Oda sıcaklığında kuluçkalama, 10-15 dakika sonra, yavaşça 200-30 ile iki kez örnekleri yıkayın0 ul büyüme ortamı herhangi bir bağlanmamış hücreleri çıkartmak için. Not: yaklaşık 5-10 ul büyüme ortamı yıkamadan sonra her bir kuyu kalır. </li></ol> 3. Tam Kan sitotoksisite deneyleri <ol><li> Her bir numune için, insan tüm kanının 180 ul ekleyin. </li><li> ML / 5 mg anti-CD20 antikoru bir çözüm elde edilir ve yapmak için bir seri seyreltme yerine 50, 20, 10, 5, 2, 1, 1.5 ml tüpler içinde anti-CD20 antikoru çözeltiden 0.5 ug / ml olmuştur. Her bir numune de triplicates hale getirmek için anti-CD20 antikorunun her konsantrasyonu 20 ul ekle. </li><li> Her bir oyuğa, 500 nM&#39;lik bir nihai konsantrasyonda propidyum iyodür ekleyin. </li><li> 16 saat boyunca% 5 CO2 ile 37 ° C &#39;de elde edilen plaka inkübe edin. </li><li> Görüntü slaytlar veya 8 x büyütme ile otomatik bir görüntüleme sistemi ile 96 yuvalı plakalar üzerinde hücreleri. </li><li> Sonuçlarını ölçmek için otomatik görüntüleme sisteminin hücre sayım programı kullanın. NOT: Otomatik görüntüleme sistemi yazılımı sağlayan basitadım adım hücre sayımı için işlemleri. Bu yazılımı kullanarak protokol sağlayıcının web sitesinde bulunabilir. </li><li> Yazılımın ana sayfasından [İnceleme Sonuçları] seçin. </li><li> [Örnekleri için kaydedilmiş Dosyası] seçin. </li><li> İlk kapı FITC yoğunluk&gt; 50, sonra kapı TxRed yoğunluk&gt; 20 ile ortalama. </li><li> [Plaka Genel Bakış] seçin. </li><li> [Export Tabloları] seçin. Not: Programın yüzdesi hücre öldürme formülü aşağıda gösterilmiştir: % Hedef hücre öldürme = (yeşil ve kırmızı lekeli hücrelerin # / hücrelerinin # yeşil lekeli) *% 100 </li></ol>

<ol><li>Hutchinson, L., Kirk, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+drug+attrition+rates--where+are+we+going+wrong%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">High drug attrition rates--where are we going wrong.</a> Nat Rev Clin Oncol. 8, 189-1890 (2011).</li>
<li>Moreno, L., Pearson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attrition+rates+be+reduced+in+cancer+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Informa+healthcare%22%5BJournal%5D)">Attrition rates be reduced in cancer drug discovery.</a> Informa healthcare. 8, 363-368 (2013).</li>
<li>Seok, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+and+Host+Response+to+Injury%2C+Large+Scale+Collaborative+Research+Program.+Genomic+responses+in+mouse+models+poorly+mimic+human+inflammatory+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Inflammation and Host Response to Injury, Large Scale Collaborative Research Program. Genomic responses in mouse models poorly mimic human inflammatory diseases.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110, 3507-3512 (2013).</li>
<li>Suntharalingam, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+storm+in+a+phase+1+trial+of+the+anti-CD28+monoclonal+antibody+TGN1412%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Cytokine storm in a phase 1 trial of the anti-CD28 monoclonal antibody TGN1412.</a> N Engl J Med. 355, 1018-1028 (2006).</li>
<li>Eastwood, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monoclonal+antibody+TGN1412+trial+failure+explained+by+species+differences+in+CD28+expression+on+CD4%2B+effector+memory+T-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Monoclonal antibody TGN1412 trial failure explained by species differences in CD28 expression on CD4+ effector memory T-cells.</a> Br J Pharmacol. 161, 512-526 (2010).</li>
<li>Hsiao, S. C., Liu, H., Holstlaw, T. A., Liu, C., Francis, C. Y., Francis, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real+time+assays+for+quantifying+cytotoxicity+with+single+cell+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Real time assays for quantifying cytotoxicity with single cell resolution.</a> PLoS One. 8, 10-1371 (2013).</li>
<li>Wang, S. Y., Weiner, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rituximab%3A+a+review+of+its+use+in+non-Hodgkin%E2%80%99s+lymphoma+and+chronic+lymphocytic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Biol+Ther%22%5BJournal%5D)">Rituximab: a review of its use in non-Hodgkin’s lymphoma and chronic lymphocytic leukemia.</a> Expert Opin Biol Ther. 8, (2008).</li>
<li>Dalle, S., Thieblemont, C., Thomas, L., Dumontet, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monoclonal+antibodies+in+clinical+oncology%5BTitle%5D)+AND+%22Anticancer+Agents+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Monoclonal antibodies in clinical oncology.</a> Anticancer Agents Med Chem. 8, 523-532 (2008).</li>
<li>Brunner, K. T., Mauel, J., Cerottini, J. C., Chapuis, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assay+of+the+lytic+action+of+immune+lymphoid+cells+on+51-Cr-labelled+allogeneic+target+cells+in+vitro%3B+inhibition+by+isoantibody+and+by+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Quantitative assay of the lytic action of immune lymphoid cells on 51-Cr-labelled allogeneic target cells in vitro; inhibition by isoantibody and by drugs.</a> Immunology. 14, 181-196 (1968).</li>
<li>Korzeniewski, C., Callewaert, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+enzyme-release+assay+for+natural+cytotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">An enzyme-release assay for natural cytotoxicity.</a> J Immunol Methods. 64, (1983).</li>
<li>Gerlier, D., Thomasset, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+MTT+colorimetric+assay+to+measure+cell+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Use of MTT colorimetric assay to measure cell activation.</a> Immunol Methods. 94, 57-63 (1986).</li>
<li>Toriello, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+microfluidic+bioprocessor+for+single-cell+gene+expression+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Integrated microfluidic bioprocessor for single-cell gene expression analysis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105, (2008).</li>
<li>Douglas, E. S., Hsiao, S. C., Onoe, H., Bertozzi, C. R., Francis, M. B., Mathies, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA-barcode+directed+capture+and+electrochemical+metabolic+analysis+of+single+mammalian+cells+on+a+microelectrode+array%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">DNA-barcode directed capture and electrochemical metabolic analysis of single mammalian cells on a microelectrode array.</a> Lab on a Chip. 9, 2010-2015 (2008).</li>
<li>Mayr, L. M., Bojanic, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+trends+in+high-throughput+screening%5BTitle%5D)+AND+%22Current+opinion+in+pharmacology%22%5BJournal%5D)">Novel trends in high-throughput screening.</a> Current opinion in pharmacology. 9, 580(2009).</li>
<li>Zanella, F., Lorens, J. B., Link, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+content+screening%3A+seeing+is+believing%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">High content screening: seeing is believing.</a> Trends in Biotechnology. 28, 237-245 (2010).</li>
<li>Coelho, J., P, L., Quinn, S., Murphy, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+image+analysis+for+high-content+screening+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomol+Screen%22%5BJournal%5D)">Automated image analysis for high-content screening and analysis.</a> J Biomol Screen. 15, 726-734 (2010).</li>
<li>Sundberg, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+and+ultra-high-throughput+screening%3A+solution-+and+cell-based+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">High-throughput and ultra-high-throughput screening: solution- and cell-based approaches.</a> Current Opinion in Biotechnology. 11, 47(2000).</li>
<li>Simmons, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Personalized+medicine+is+more+than+genomic+medicine%3A+confusion+over+terminology+impedes+progress+towards+personalized+healthcare%5BTitle%5D)+AND+%22PERS+MED%22%5BJournal%5D)">Personalized medicine is more than genomic medicine: confusion over terminology impedes progress towards personalized healthcare.</a> PERS MED. 9, 85(2012).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarları var.

WCA ideal CDC ve ADCC deneylerinde 9-11 olarak ve klinik öncesi hayvan deneylerinden önce geleneksel hedef gösterimleri sonrasında kullanılan tek hücreli çözünürlükte 12-16, in vitro anti-kanser tarama aracında bir önem taşımaktadır. Şu anda, CDC veya ADCC deneylerinde birincil hedef tarama deneyleri, tüm basitleştirilmiş bir medya ya da bir tampon sisteminde yapılmaktadır. Bununla birlikte, bu basitleştirilmiş tampon sisteminde bir etkinlik ortaya koymaktadır ilaç adayları, her z...

Ilaç sektöründe son gelişmeler tümör hücre antikorları ve kişiselleştirilmiş kanser tedavilerinin özel kimlik hayata artan bir ilginin yol açmıştır; Bununla birlikte, çeşitli engeller işleminde karşılaşılan. Klinik öncesi gelişim antikanser aktiviteye sahip maddelerin sadece% 5 faz II-III test 1,2 yeterince etkinlik gösteren sonra lisanslı. Birçok örnek nedeniyle, farklı kan bileşiklerinin 3-5 bu antitümör ilaçlar insan ve esas olarak, laboratuar hayvanlarında farklı davranır gösterildiği gibi klinik öncesi stratejileri (in vitro ve hem de in vivo) istenen düzeyde değildir. Bir anti-tümör ilaç tarama platformun gerekliliği karşılamak amacıyla ve pahalı hayvan deneylerinde ve klinik deneylerde, daha önce bir kontrol noktası sağlamak için, bir insan tam kan sitotoksisite deneyi (WCA) daha ilişkili bir biyolojik ortam içinde bir antitümör madde etkinliğini değerlendirmek için önerilmiştir.Tam kan sitotoksisite tahlili antikorlar ve insan tam kan içindeki diğer ilaç adayları tek tek hücrelerinin tepkisini değerlendirmek için de kullanılabilir. WCA yüksek verimli ve yüksek içerik görüntüleme 6 yüksek verimli hücre konumlandırma teknolojisini içeren tarafından geliştirilmiştir. Otomatik bir görüntüleme sistemi kullanarak, hem de canlı ve ölü hücrelerin sayısı, hassas, yüksek bir derecesi ile tespit edilebilir. Nedeniyle hedef hücreler aynı odak düzlemi üzerine sabit bir şekilde nedeniyle, WCA, kırmızı kan hücrelerinin çıkartılmadan gerçek zamanlı kantitatif sitotoksisite analizi verebilmektedir. Ayrıca, otomatik görüntüleme sistemi, öyle ki, belirli kriterleri ulaşmış, sadece hedef hücreler (örn., Flüoresan etiketli hücreler ve hücre morfolojisi) gibi birçok avantaj kapı ve işlenir içerir. Ayrıca, gün başına 144 plakaların üretilmesine izin verir. Sonuç olarak, bu görüntüleme yeteneği ve verimlilik, yüksek c çalışmasını sağlarontent ve aynı zamanda yüksek verim deneyleri. WCA ve otomatik görüntüleme sistemi birleştirerek, yüksek miktarda niceliksel hücre sitotoksisite analizi, bir çok biyolojik uygun bir ortam içinde elde edilebilir.

<table><tbody><tr><td>Hücre bağlantısı 96 kuyulu plaka kitleri&nbsp;</td><td>Adheren</td><td>AP9601</td><td></td></tr><tr><td>Süspansiyon Tek hücre dizisi 8 kuyulu oda sürgüsü</td><td>Adheren</td><td>SS0801</td><td></td></tr><tr><td>Yapışkan Tek hücre dizisi 8 kuyulu oda sürgüsü</td><td>Adheren</td><td>SS0802</td><td></td></tr><tr><td>Lenfoma hücre hattı CD20 +</td> <td>ATCC</td><td>CCL-86</td><td>Raji hücreleri</td></tr><tr><td>Lenfoma hücre hattı CD20-ATCC</td><td></td> <td>CRL-8083</td><td>MC / CAR</td></tr><tr><td>RPMI 1640 L-glutamin ile</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>11875-119</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>Termo</td><td>SH30070.01HI</td><td></td></tr><tr><td>Peni/Strep</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>15070063</td><td></td></tr><tr><td>Sitozolik boya</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>C7025</td><td>Hücre İzleyici Yeşil</td></tr><tr><td>Rituxan (Biyobenzer)&nbsp;</td><td>Eureka Therapeutics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>İnsan tam kanı</td><td>Allcells</td><td>WB001</td><td></td></tr><tr><td>Propidium İyodür</td><td>Sigma</td><td>P4170-10MG</td><td></td></tr><tr><td>Otomatik görüntüleme sistemi</td><td>Moleküler Cihazlar</td><td>Satıcıyla İletişime Geçin</td><td>Hücre Raportörü</td></tr><tr><td>Hücre sayma programı</td><td>Moleküler Cihazlar</td><td>Satıcıyla İletişime Geçin</td><td>Hücre Raportörü</td></tr></tbody></table>

İnsan tüm kan gerçek zamanlı sitotoksisite deneyleri

Real-time Cytotoxicity Assays in Human Whole Blood

Genel hücre sitotoksisite zamansal bilgilere erişim sağlayan bir canlı hücre tabanlı tüm kan sitotoksisite deneyi (WCA) yüksek verimli hücre konumlandırma teknolojisi ile geliştirilmiştir. Hedef, tümör hücresi popülasyonu bir dizi formatında halinde immobilizasyon için önceden programlandığı ve yeşil flüoresan sitosolik boya ile etiketlenir. Hücre dizisi kurulmasından sonra, antikor, ilaç insan tam kan ile kombinasyon halinde ilave edilir. Propidyum iyodür (PI) hücre ölümünün değerlendirmek için ilave edilir. Hücre dizisi otomatik bir görüntüleme sistemi ile analiz edilir. Sitozolik boya hedeflenen tümör hücre popülasyonlarının etiket iken, PI ölü tümör hücre popülasyonları etiketler. Bu nedenle, hedef kanserli hücre öldürme oranı ölü hedef hücrelerin sayısı hedefleyen yaşamda kalan hücrelerin sayısının hesaplanması ile belirlenebilir. Bu yöntemle, araştırmacılar, zamana bağlı ve doza bağımlı hücre sitotoksisitesi bilgileri için erişebilir. Dikkate değer, hiçbir zararlı radyokimyasallar kullanılmaktadır. Burada sunulan WCA lenfoma, lösemi ve katı tümör hücre çizgileri ile test edilmiştir. Bu nedenle, WCA araştırmacılar son derece alakalı ex vivo durumda ilaç etkinliğini değerlendirmek için izin verir.

Anti-CD20 antikorları ve lenfoma hücreleri (Raji hücreleri ve MC / ARAÇ) bütün kan sitotoksite deneyi (WCA) 7,8 göstermek için bir model sistem olarak seçilmiştir. MC / ARAÇ hücreler zar üzerinde CD20 düşük kopya sayısı vardı Raji hücreleri, hücre yüzeyi üzerinde CD20 yüksek kopya sayısı vardı. Hedeflenen hücreler, ilk olarak yeşil floresan sitosolik boyalarla yeşil boyandı ve 96 oyuklu bir plaka üzerinde düzenlendi. 10,000 - 50,000 hedef lenfoma hücreler her immobilize edildi. Taze çekilmiş insan tüm kanının...

Tam kan sitotoksisite deneyi (WCA), flüoresans mikroskopisi ve otomatik görüntü işleme ile yüksek verimli hücre konumlandırma teknolojisini içeren tarafından geliştirilmiş bir sitotoksisite analizidir. Burada, bir anti-CD20 antikoru ile tedavi edilen lenfoma hücrelerinin enfekte hücre sitotoksisitesi analiz sağlamak için insan kanında gerçek zamanlı olarak analiz edilebilir açıklar.

İnsan Tüm Kan gerçek zamanlı sitotoksisite deneyleri

A live cell-based whole blood cytotoxicity assay (WCA) that allows access to temporal information of the overall cell cytotoxicity is developed with ...

Bu prosedürün amacı, insan tam kanındaki hedef kanser hücrelerinin sitotoksisitesini tek hücre çözünürlüğü ile ölçmektir İlk olarak, hedef kanser hücrelerinin tek bir hücre dizisi oluşturulur. İnsan tam kanı hücre dizisine eklenir ve antikor gibi ilaçlar uygulanır. Hücreler daha sonra propidium, iyodür gibi bir hücre canlılığı boyası ile inkübe edilir ve kırmızıya boyanmış ölü hedef kanser hücrelerinin sayısını ölçmek için yüksek verimli görüntüleme kullanılır ve sonuçta ilaç sitotoksisitesi etkinliği sağlanır.Bu teknolojinin LDH ve krom tahlili gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, görüntüleme yeteneği ile insan tam kanında kanser hücresi öldürme işleminin yapılabilmesidir. Bu yöntem, hayvan çalışmasından önce in vitro olarak antikor sitotoksisitesini değerlendirebilir Hücre eki 96 elde ederek başlayın. Kuyu plakası kitleri veya tek hücre hızı sekiz kuyulu oda kayar, burada 96 kuyulu plaka kullanılacaktır.Kitten DNA reaktifi içeren tüpe 1.2 mikrolitre aktivatör uygulayın, şişeyi kapatın, ters çevirin ve çözeltiyi karıştırmak için hafifçe sallayın. Çözeltinin 20 dakika oda sıcaklığında reaksiyona girmesine izin verin. Bu arada, hedef hücreleri hazırlayın.Bu gösteride, Raji

real-time-cytotoxicity-assays-in-human-whole-blood

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Krom salınım tahlili, sitotoksik T hücresi aktivitesini tespit etmek için ortak bir tahlil, bazı sınırlamalar vardır. Bu madde, antijen spesifik CD8 T hücreleri ve insan göğüs kanseri tümör hattı ile, SKBR3 kullanarak, bir empedans dayalı bir yaklaşım hücre öldürme saptama yeteneğine için incelenmiştir.

XCELLigence Sistemi Cr51 Yayın Assay Karşılaştırılması tarafından İnsan Her2neu Özgül CD8 T hücrelerinin Optimal Sitotoksik Aktivite Belirlenmesi

Bu video, sitokin kaynaklı öldürücü (CIK) hücrelerin kanser hücrelerine karşı sitotoksik yeteneğini ölçmek için kullanılan bir in vitro tekniği göstermektedir. Hedef kanser hücrelerinin CIK hücreleri ile birlikte kültürlenmesi üzerine, ölü kanser hücreleri bir floresan canlılık boyası kullanılarak tanımlanır ve CIK hücrelerinin sitotoksik etkisini tahmin ederek akış sitometrisi kullanılarak ölçülür.

Sitokin ile İndüklenen Öldürücü Hücrelerin Sitotoksik Yeteneğini İncelemek İçin Bir İn Vitro Test

Bu video, gerçek zamanlı elektriksel empedans ölçümleri aracılığıyla kanser hücrelerine karşı CAR T hücresi aktivitesini izlemek için bir yöntemi göstermektedir. İmpedanstaki değişikliklerin izlenmesi, CAR T hücrelerinin kanser hücresi sitolizini indüklemedeki etkinliğini değerlendirir ve sitotoksik yetenekleri hakkında bilgi sağlar.

CAR T Hücrelerinin Gücünü Değerlendirmek için Gerçek Zamanlı İn Vitro Sitoliz Testi

Bu tümör hedef hücreleri ile inkübe zaman T hücrelerinin sitotoksisiteye ölçmek için bir tek hücreli yüksek verim tahlil açıklanmaktadır. Bu yöntem, mekansal olarak tanımlanan oranlarda T hücreler ve hedef hücrelerin sınırlandırmak için alt nanolitre kuyular (~ 100.000 kuyu / dizi) ve bir yoğun, elastomerik dizisi kullanır ve efektör-hedef konjugasyon ve daha sonra apoptoz izlemek için flüoresan mikroskop ile birleştirilmiştir.

T Hücreleri İçin Kantitatif Yüksek throughput Tek hücreli Sitotoksisite Testi

Bu protokol, hassas, hücre bazlı bir sitotoksisite testini tanımlar. Artan sayıda efektör CD8 + T hücresinin varlığında canlı hedef CD4 + T hücrelerinin frekansındaki azalmayı numaralandırarak, bu test antijene özgü CD8 + T hücrelerinin sitolitik aktivitesinin doğrudan değerlendirilmesine izin verir.

Sitotoksik Aktiviteyi Ölçmek için Hücre Bazlı Akış Sitometrisi Testi

Bu çalışma, insan kan örneklerinde NK (Doğal Öldürücü) hücre sayısının ve NK hücre sitotoksisitesinin doğru ve hızlı bir şekilde belirlenmesi için gelişmiş bir iş akışını açıklar.

İnsan Tüm Kan Natural Killer Hücre Parçalayıcı Faaliyet Akışı Sitometrik Analizi

Kantitatif insan doğal katil hücrelerin sitotoksik etkinliğini belirlemek için Akış Sitometresi tabanlı yöntemi burada gösterilir.

Akış Sitometresi tabanlı sitotoksisite tahlil insan NK hücre etkinliği değerlendirilmesi için

Sıvı ve katı tümör hücrelerini hedefleyen kimerik antijen reseptör T hücrelerinin gücünü değerlendirmek için kantitatif gerçek zamanlı in vitro sitoz ispat sistemini tanımlıyoruz. Bu protokol diğer bağışıklık etki hücreleri değerlendirmek için uzatılabilir, yanı sıra kombinasyon tedavileri.

Katı ve Hematolojik Kanser Hücrelerini Hedefleyen İmhimik Antijen Reseptör T Hücreleri Için Gerçek Zamanlı Potens Tsay

Tam kan bazlı immünolojik testler, tanı ve araştırma amaçları için antijene özgü bağışıklığı analiz etmek için kolay ve kaynak açısından verimli bir araç sağlar. Bu makale, pediatrik hastalar ve küçük hayvanlar için düşük hacimli bir versiyon da dahil olmak üzere, mantar ve viral patojenlere karşı konak bağışıklığının kapsamlı analizi için ikili ko-stimülasyonlu optimize edilmiş bir tam kan bazlı protokol sağlar.

Fungal ve Viral Patojenlere Karşı Konak Bağışıklığının Antijene Özgü Analizi için İkili Ko-stimülasyonlu Tam Kan Testi

Burada, tek hücre düzeyinde hücre öldürmeyi incelemek için bir T hücresini ve bir kanser hedef hücresini kapsülleyen çift emülsiyon damlacıkları oluşturmak için bir yöntem açıklıyoruz. Bu yöntem, büyük bir T hücresi popülasyonu içinde hem sitotoksik moleküllerin hem de hedef hücre apoptozunun ikili miktar tayinine izin verir.

Kimerik Antijen Reseptörü T hücrelerini Tek Hücre Düzeyinde Değerlendirmek için Damlacık Bazlı Sitotoksisite Testi

Bu protokol, canlı hücre görüntüleme ve akış sitometrisi kullanılarak insan doğal katil hücrelerinin doğal, kimerik antijen reseptörü aracılı ve antikor bağımlı sitotoksisitesinin tutarlı ölçümü için standartlaştırılmış bir in vitro iş akışı sağlar.

Canlı hücre görüntüleme ve akış sitometrisi kullanarak kimerik antijen reseptörleri ve terapötik antikorlarla potantize edilen NK-hücre sitotoksisitesinin nicelendirilmesi

Öğrenin, insan tüm kanında lenfoma hücrelerinin sitotoksisitesini gerçek zamanlı görüntüleme ile ölçme yöntemini. Bu teknik, yüksek verimli hücre konumlandırma ve otomatik görüntü işleme kullanarak antikor etkinliğini kantitatif olarak değerlendirir.

İnsan Tüm Kan gerçek zamanlı sitotoksisite deneyleri

Daha fazla video keşfet