11 Ekim 2014
Bilinen bir modeli olsa da, kobay şu anda deneysel hayvan bilimleri bir niş temsil eder ve sınırlı veri çoğu prosedürlerin yürütülmesi mevcuttur. Burada bilinçli ya da anestezi kobay ya vivo kan örnekleme teknikleri terminal olmayan dört farklı yaklaşımlar sunuyoruz.
Bu videonun genel amacı, Gine domuzlarında dört farklı kan örnekleme tekniğinin metodolojisini göstermektir. Numune hacimleri veya numune sayısı kan alma yönergelerini aşmadığı sürece gösterilen prosedürler terminal değildir. Laboratuvar hayvanlarında, burada lateral ous ven ve tarsal venin nedenini görüyoruz.
Ous ven, tarsal eklem üzerinde dorsal ve lateral olarak uzanır. Her bir arka bacaktan en fazla üç örnek alınmalıdır ve örnek başına yaklaşık 100 ila 400 mikrolitre kan toplanabilir. Gerekli ekipman arasında elektrikli tıraş makinesi, ılık su banyosu, temiz bir havlu, biraz pamuk yünü,% 70 alkol gibi bir dezenfektan, steril iğneler, 21 geçit veya daha küçük toplama tüpleri bulunur.
Amaç kan şekeri ölçümü ve AccuCheck örnekleyici ise, kobaylarda anestezi olmadan cepheus veya tarsal venden kan örneklemesi yapılabilir. Gine domuzu eğitimli bir asistan tarafından zapt edilir ve septik bir teknik kullanılmalıdır. Tarsal bölgeyi kaplayan saçlar elektrikli tıraş makinesi ile tıraş edilir ve arka bacak ılık su banyosunda yıkanır ve ısıtılır.
Bu, bacağı temizlemenin yanı sıra damarların genişlemesini ve daha görünür hale gelmesini sağlar. Arka bacak uzatılır ve dizin hemen üzerine aşağı doğru hafif bir basınç uygulanarak stazis elde edilir, bu da damarın örneklemeden hemen önce görünür hale gelmesine izin verir. Traş edilen bölge dezenfektan ile silinir.
Damar bir iğne veya neşter ile delinir ve kan bir kılcal veya mikrot tüpe toplanabilir. Kan toplandığında, staz hafifletilir ve bir parça pamuk yünü ile hafif basınç uygulanır Hemostazı kolaylaştırmak için, kobay kulağının sırt yüzeyindeki yüzeysel arterler ve damarlar burada görülebilir. Bu damarlar, sadece çok küçük bir hacmin gerekli olduğu durumlarda kan örneklemesi için kullanılabilir.
Bir örnek kan şekeri ölçümleri için olabilir. Gine domuzu, kulağı erişilebilir bırakırken nazikçe zaptedilir. Delinme bölgesi, numune almadan önce septik olarak hazırlanmalıdır, ancak tıraş gerekli değildir.
Damarları daha görünür hale getirmek için kulak tabanına hafif bir baskı uygulanabilir. Damar bir iğne veya neşter ile delinir ve kan bir kılcal tüpte toplanır veya AccuCheck numune sistemi kullanılarak hemen kan şekeri seviyeleri için analiz edilir. Kan toplandığında, hemostazı kolaylaştırmak için delinme bölgesine hafif bir basınç uygulanmalıdır.
Bu resim, Gine domuzunun juguler kan örneklemesi için konumunu ve juguler venin nedenini göstermektedir. İşlem sadece anestezi uygulanmış bir hayvan üzerinde gerçekleştirilir. Gerekli ekipman arasında anestezi ilaçları ve elektrikli tıraş makinesi pamuk yünü, %70 alkol stetoskopu gibi bir dezenfektan, nötr göz merhemi, bir mililitre şırınga, genellikle 23 veya 25 steril iğneler bulunur.
Gorge, Heparin ve EDTA, pıhtılaşmayı önlemek için numune almadan önce şırıngaları yıkamak için kullanılabilir. Gine domuzları için çeşitli anestezik protokoller mevcuttur. Bu durumda, hayvanlar dengeli anestezi ile solit tile sinüs karışımı ile uyuşturulur ve butif boyunda deri altına enjekte edilir.
Bu karışım, dozlamayı daha doğru hale getirmek için tuzlu su ile seyreltilebilir. Enjeksiyondan sonra kobay kafesine geri dönmeli ve sessizce bırakılmalıdır. Çevre etkisi genellikle yaklaşık 10 dakika sonra görülür ve örneklemeden önce 30 ila 40 dakika sürer.
Anestezi derinliği refleksler kontrol edilerek değerlendirilir ve gözleri korumak için nötr göz merhemi verilir. Şah damarı, sırt üstü konulan kobay ile yaklaştırılır ve ön bacaklar üç ayda bir geri çekilir. Alan traş edilir ve aseptik olarak hazırlanır, klavikula palpe edilir ve bir mililitrelik bir şırıngaya monte edilmiş 23 boğazlı bir iğne, orta hatta yaklaşık bir santimetre yanal, klavikulaya sadece kraniyo dorsal olarak yerleştirilir.
Şırınga hafif yukarı ve medial açıda tutulmalıdır. Cilde nüfuz eder etmez, juguler oldukça yüzeysel olarak yerleştirildiğinden ve yaklaşık üç ila dört milimetrelik yerleştirme derinliği yeterli olduğundan, şırıngaya hafif bir negatif basınç uygulanır. Numune toplandığında, ön bacakların gerginliğini serbest bırakın ve delinme tarafına hafif bir baskı uygulayın.
Hayvan daha sonra bir kurtarma kafesine geri gönderilebilir, ancak hemostaz ve anesteziden iyileşmeyi sağlamak için izlenmelidir. Gine domuzu anesteziden tamamen kurtulduğunda kalemine geri dönebilir. Gine domuzunun anatomik özellikleri, diğer kemirgen modellerinden biraz farklıdır ve türe özgü farklılıklara uyum sağlamak ve mümkün olan en kısa sürede yeterli kalitede numune elde etmek için numune alma tekniklerinin modülasyonu gereklidir.
Hem uzun hem de kısa vadede. İn vivo, çalışmalar genellikle tekrarlanan kan örneklemesi gerektirir. Stres ve rahatsızlığı azaltmak ve hayatta kalmayı sağlamak ve ayrıca numune büyüklüğü ve erişilebilirlik gerekliliklerine uyumu sağlamak için teknik seçimi dikkatlice düşünülmelidir.
Açıklanan tüm yöntemler kapsamlı bir şekilde test edilmiş ve tekrarlanan in vivo kan örneklemesi için başarıyla uygulanmıştır. Araştırma tesisimizdeki çalışmalarda, Gine domuzu deneysel hayvan bilimlerinde bir nişi temsil etmektedir, ancak temel prosedürlerin yürütülmesi hakkında sınırlı veri mevcuttur. Bu video raporunda, numune hacimlerinin ve numune sayısının laboratuvar hayvanlarında kan alma yönergelerini aşmaması koşuluyla, bilinçli veya anestezi uygulanmış hayvanlarda terminal olmayan in vivo kan örneklemesine yönelik dört farklı yaklaşım sunduk.
Bu prosedürler, tekrarlanan kan örneklemesinin gerekli olduğu durumlarda Gine domuzlarında kullanım için önerilir. Çalışma protokolünüzde.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu video, hem uyanık hem de anestezi altındaki kobaylarda uygulanan dört farklı non-terminal kan örnekleme tekniğini göstermektedir. Bu yöntemler, prosedürel verilerin sınırlı olduğu bu model organizma ile çalışan araştırmacılar için kritik öneme sahiptir.
Guinea piglerde terminal olmayan kan örneklemesi, hayvan refahını korurken tekrarlanan ve yüksek kaliteli örnek toplamaya olanak tanıyarak boylamsal in vivo çalışmaları destekler. Bu yetenek, seri örneklemenin hedef etkileşimi ve mekanistik risk azaltmayı bilgilendirdiği preklinik farmakokinetik ve farmakodinamik değerlendirmeler için kritik öneme sahiptir. Bu teknikler, niş ancak translasyonel açıdan ilgili bir modeldeki metodolojik boşluğu doldurarak erken keşif iş akışları için veri güvenilirliğini artırır.
Bu örnekleme yöntemleri, hedef yolak analizi ve öncü bileşik değerlendirmesi için güvenilir biyolojik matrisler sağlayarak keşif biyolojisi iş akışlarına entegre olur.