Name: Sosyal Kaçınma Niceleme için Basit Testi Drosophila melanogaster (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: Öğrenin Drosophila melanogaster'da sosyal kaçınma davranışını T labirenti kullanarak nicelendirmeyi. Bu yöntem stres sinyallerine yanıtları ölçerek davranışsal nörobilim araştırmalarına katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Rachelle Kanippayoor'a, yeni vahşi tip suşun melanogaster türünden olduğunu belirlemedeki yardımı için teşekkür ederiz. R.W.F, O.F. ve A.F.S. araştırma tasarımından sorumluydu; Deneyleri R.W.F, M.N. ve O.F. yaptı. R.W.F, M.N., O.F. ve A.F.S. verileri analiz etti; R.W.F., I.S.M. ve A.F.S. el yazmasını yazdı. 
Bu çalışma, The Professional Staff Congress ve The City University of New York tarafından AFS'ye ortaklaşa finanse edilen PSC-CUNY araştırma ödülleri tarafından desteklenmiştir; Western University'den AFS ve ISM'ye sağlanan iç finansmanla; National Alliance for Hispanic Health's Alliance / Merck Ciencia (Science) Hispanic Scholars Programından bir eğitim desteği ve Yale Fen Bilimleri Enstitüsü'nden RWF'ye bir Üniversite Bursu ile desteklenmiştir.

1. Ekipman ve In-house düzenlendi Reaktifler (Diğerleri için Malzeme Listesi) <ol><li> Sinek işi gerçekleştirmek için bir Drosophila soğuk anestezi cihazı hazırlayın. <ol><li> Küçük bir plastik kutu (10.2 cm genişliğinde, 12.7 cm uzunluğunda), bir pipet uçları kutusunun tipik üst kapağını (3.8 cm derinliğinde, 10.2 cm genişliğinde, 12.7 cm uzunluğunda) kapsayacak şekilde bir gözenekli polietilen levha kesti. </li><li> Ezilmiş buz ile doldurun kutu, gözenekli polietilen levha ile kaplayın. </li></ol></li><li> T-labirent aparatı hazırlayın; Daha önce ayrıntıları 28-31 açıklanan aparatların adapte olur. </li><li> 32 anlatıldığı gibi bir sinek aspiratör hazırlayın. </li><li> Ve deney şişeleri dışarı stres olmadan sinekler yerinden bir Phototaxis tepki cihazı hazırlayın: <ol><li> 29,33 tarafından tarif edildiği gibi, bir karşı cihazı kullanın. </li></ol></li></ol> NOT: 28 tarafından tarif edildiği gibi T-labirent da başka amaçlar için de kullanılabilir. <ol start="5"><li> Hom olunogeneous aydınlatma koşulları: beyaz tezgah örtüsü ile kaplı bir bankta deney gerçekleştirmek ve bir beyaz tahta önünde. NOT: Bu deneyler için kullanılan sinek suşları Drosophila vahşi türleri melanogaster vardı: Kanton-S, Oregon ve Semerkant laboratuvar stokları 34 uçar; Elwood sinekler Long Island, New York, ABD tarihinde, Huntington Elwood Mahallesi&#39;nde Güz 2011 yılında toplanmıştır. </li></ol> 2. Deney öncesi Sinekler hazırlanması Deney yapmadan önce 1-2 gün: <ol><li> 12 saat ışık / karanlık döngüsü 25 ° C&#39;de standart mısır unu-agar-pekmez-maya ortamda sinekler koruyun. </li><li> Deney yapmadan 1-2 gün önce soğuk anestezi altında cevap sinekler toplayın <ol><li> Bir huni kullanılarak, 50 ml Falcon tüpleri içine yükseltilmiş edildiği şişe sinekler aktarın. </li><li> Bir içine buz seviyesinin altında sinekler şahin tüp yerleştirinyalıtılmış buz kovası. </li><li> En -4 ° C soğuk ° ezilmiş buz ile soğuk anestezi cihazı yerleştirin. </li><li> Sinekler chill komaya girmek için 5 dakika bekleyin. </li><li> Soğuk anestezi cihazının gözenekli polietilen levha üzerine sinekler aktarın. </li><li> Soğuk anestezi cihazında cevap sinekleri toplayın. Oda sıcaklığında, bir stereo mikroskop altında, dişi sinekler 3-7 gün eski erkek ayırmak ve 40 kişilik gruplar halinde bu sinekler korumak. </li></ol></li><li> Deney yapmadan 1-2 gün önce yayıcı sinekleri toplayın. <ol><li> Yavaşça Kanton-S karma kendi numarasını kontrol, bir ağız aspiratörü kullanarak, kendi şişe uçar toplamak. </li><li> Bunlar yayıcılar olacak, 60-100 grubunda bu sinekler koruyun. </li><li> Veri noktaları gerektiği gibi yayıcılar gibi birçok örnekleri hazırlayın. </li></ol></li><li> Soğuk anestezi herhangi karıştırıcı etkisini en aza indirmek için, yanıt ve vericilerin toplandıktan sonra iyileşme en az bir gece izin verdavranış ve ağız aspiratörü koleksiyonu. </li><li> En az 1 gün önce deney, taze hava ile değiştirilmesi çanta bayat plastik kokulu hava sağlamak için, deney şişeleri çanta açın. </li></ol> Deney yapmadan önce 2 saat: <ol start="6"><li> Hatta hafif olan, deney yapıldığı odanın sıcaklığı yaklaşık 23-25 ​​° C olduğundan emin olun, ve% 30 üzerinde nem. </li><li> Bu sinekler hasret değil emin olmak için taze gıda şişeleri içine müdahale ve yayıcılar meyve sinekleri aktarın. </li><li> Meyve sinekleri deney yapılacaktır hangi bankta, 2 saat boyunca çevreye uyum edelim. </li></ol> 3. Sosyal Kaçınma Deneme Sahne <ol><li> Zeitgeber zaman ZT5 ve ZT9 arasında öğleden sonra 3-4 saatlik bir aralıkta, günün aynı zamanda her bir deney yapın. </li><li> Vurma pedi T-labirent yerleştirin ve t böylece vida klibi sıkınO asansör kararlı. </li><li> Taze bir test şişenin içine cevap sinekler aktarın. T-labirent üst kısmına cevap sinekleri içeren bu şişeyi çekin. </li><li> T-labirent aparatı eğik ve meyve sinekleri asansörde düşmek böylece vurma mat üzerine dokunun. </li><li> Sinekler T-labirent üst ve alt kısmı arasında bu yüzden aşağı asansörün üst kısmını taşımak, ancak seçim noktasının üzerinde asansör tutmak için dikkat - kaçmasını sinekleri önlemek için. </li><li> DSO (önceden sinekler tarafından işgal edildi DSO-serbest şişeleri üretmek için bakınız Bölüm 5) ile şişeleri alın. <ol><li> Cevap sinekler bu yeni ortama uyum iken, bir test flakon yayıcı sinekler yerleştirin. </li><li> Meyve sinekleri kaçış yok bu yüzden şişeyi kapatın pamuk bir parça yerleştirin. </li><li> 15 sn için vorteks 5 saniye vorteks gelen flakon kaldırmak: Mekanik aşağıdaki gibi bir mini girdap bu flakon çalkalayın. 55 saniyelik bir toplam 3 kez tekrarlayın. </li><li> RemBir gıda şişe içinde aktarılarak - - taze şişeden dışarı yayıcı sinekleri ove ve hızlı bir şekilde T-labirent tertibatının iki yüzünden birinin içine bu DSO dolu şişe yerleştirin. </li><li> Her yeni dönemde DSO dolu şişenin için yerleştirme tarafını alternatif. </li></ol></li><li> T-labirent diğer tarafında temiz bir test şişe yerleştirin. </li><li> Meyve sinekleri, taze bir test şişeye ve DSO test flakon arasındaki seçti, böylece tamamen asansör getir, ve Sayacı başlatmak. </li><li> Aksi belirtilmediği sürece, sinekler, 1 dakika boyunca, taze şişe DSO şişe arasında seçim olsun. </li><li> 1 dakika sonra, taze flakon, DSO flakon ve asansörde sıkışmış olanlar sinekler ayırmak için asansör yukarı taşımak. </li><li> Her flakon sinek sayısını ve asansörde. </li><li> Her genotip / koşul için bu işlemi tekrarlayın. </li></ol> 4. Sosyal Kaçınma Veri Analizi <ol><li> Her Genot için her flakon meyve sinekleri sayısınıype ve bir elektronik veri aktarmak. </li><li> Bir elektronik tablo programı kullanarak, sineklerin toplam sayısına bölünmesi ardından DSO-serbest şişe içinde sinekler sayısından DSO şişe içinde sinekler sayısını çıkartarak, ve her genotip için Performans Endeksi (PI) hesaplayın. </li><li> Sonuçların analizi için istatistiksel analiz yazılımı kullanılarak pis &#39;anlamına gelir karşılaştırın. <ol><li> İdeal olarak, her bir deney için, 2-3 iç tekrarlar ve 3 bağımsız tekrarlar hazırlamak, farklı şişe, farklı günlerde yapılan ya da 30 geçer. </li><li> Veriler normal dağılıma takip gibi, Gauss dağılımı istatistiksel testler kullanın. </li><li> Bir etkisi sınarken (yani, yoğunluk - Şekil 2), bir kontrol için her sonucu karşılaştırmak için (kolon sütun) çoklu karşılaştırma için post-testi, veya basit bir t-testi ile, bir tek-yönlü ANOVA kullanın. </li><li> Grup deneyleri yapıldığında, koşulları ve cinsiyetleri (boş şişeleri hem test vurguladı bird un-vurguladı sinekler; ve cinsiyet etkisi - Şekil 1), iki yönlü ANOVA kullanılmıştır. </li></ol></li></ol> 5. Daha önce gerilmemiş Sinekler tarafından işgal küçük şişeler oluşturun - yerine 3,5-3,6 arasında gerçekleştirin <ol><li> Bir kontrol olarak, stresli değil sinekler tarafından işgal şişeleri hazırlamak için phototaxis kullanın. </li><li> Ters konumda taze boş şişeleri ile, bir test flakon sinekler aktarın ve karşı akımlı aparatı oturtun. </li><li> Doğrudan 15 W floresan soğuk-beyaz ışığın önünde uzak şişeye yatay cihazı Lay ve siyah bir bezle örtün. </li><li> Sinekler hafifçe taze flakon hareket edelim. Bu işlem birkaç dakika sürebilir. Sineklerin en uzak flakon ışığa doğru yürüyorlar sonra, 1 dakika için Sayacı başlatmak. </li><li> Yavaşça, ışığın konumunu değiştirmek, siyah bez kaldırmak siyah bezle kurtarmak ve sinekler testi flakon bırakmak için izin. </li><li> O zaman, ben3,2-3,5 gibi seçim deneyi nitiate. 3.6 ve 3.7 yap. </li><li> Diğer taraftan deney şişesini boşalan sinekler ayırmak için, cihazın kaydırıcıyı hareket ettirin. </li><li> Hemen seçim deney için, 3.7 gibi T-labirent boşalan deney şişesini kullanın. </li></ol>

<ol><li>Fry, S. N., Rohrseitz, N., Straw, A. D., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TrackFly%3A+virtual+reality+for+a+behavioral+system+analysis+in+free-flying+fruit+flies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">TrackFly: virtual reality for a behavioral system analysis in free-flying fruit flies.</a> J Neurosci Methods. 171, 110-117 (2008).</li>
<li>Slawson, J. B., Kim, E. Z., Griffith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+video+tracking+of+locomotion+in+adult+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">High-resolution video tracking of locomotion in adult Drosophila melanogaster.</a> J Vis Exp. 24, 1096(2009).</li>
<li>Dankert, H., Wang, L., Hoopfer, E. D., Anderson, D. J., Perona, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+monitoring+and+analysis+of+social+behavior+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Automated monitoring and analysis of social behavior in Drosophila.</a> Nat Methods. 6, 297-303 (2009).</li>
<li>Branson, K., Robie, A. A., Bender, J., Perona, P., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+ethomics+in+large+groups+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">High-throughput ethomics in large groups of Drosophila.</a> Nat Methods. 6, 451-457 (2009).</li>
<li>Simon, J. C., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+chamber+for+studying+the+behavior+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A new chamber for studying the behavior of Drosophila.</a> PLoS One. 5, 8793(2010).</li>
<li>Wang, L., Dankert, H., Perona, P., Anderson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inaugural+Article%3A+A+common+genetic+target+for+environmental+and+heritable+influences+on+aggressiveness%5BTitle%5D)+AND+%22in+Drosophila.+Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Inaugural Article: A common genetic target for environmental and heritable influences on aggressiveness.</a> in Drosophila. Proceedings of the National Academy of Sciences. 105, 5657-5663 (2008).</li>
<li>Schneider, J., Dickinson, M. H., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+structures+depend+on+innate+determinants+and+chemosensory+processing+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Social structures depend on innate determinants and chemosensory processing in Drosophila.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 2, 17174-17179 (2012).</li>
<li>Miyamoto, T., Amrein, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+male+courtship+by+a+Drosophila+pheromone+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Suppression of male courtship by a Drosophila pheromone receptor.</a> Nat Neurosci. 11, 874-876 (2008).</li>
<li>Villella, A., Hall, J. C., Jeffrey, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+3+Neurogenetics+of+Courtship+and+Mating+in+Drosophila.+%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Genetics%22%5BJournal%5D)">Chapter 3 Neurogenetics of Courtship and Mating in Drosophila. </a> Advances in Genetics. 62, 67-184 (2008).</li>
<li>Ejima, A., Griffith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Courtship+Initiation+Is+Stimulated+by+Acoustic+Signals+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Courtship Initiation Is Stimulated by Acoustic Signals in Drosophila melanogaster.</a> PLoS ONE. 3, 3246(2008).</li>
<li>Mery, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Public+Versus+Personal+Information+for+Mate+Copying+in+an+Invertebrate%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Public Versus Personal Information for Mate Copying in an Invertebrate.</a> Current Biology. 19, 730-734 (2009).</li>
<li>Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+taste+of+the+Drosophila+gustatory+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">A taste of the Drosophila gustatory receptors.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 19, 345-353 (2009).</li>
<li>Billeter, J. -C., Atallah, J., Krupp, J. J., Millar, J. G., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specialized+cells+tag+sexual+and+species+identity+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Specialized cells tag sexual and species identity in Drosophila melanogaster.</a> Nature. 461, 987-991 (2009).</li>
<li>Krupp, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+experience+modifies+pheromone+expression+and+mating+behavior+in+male+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Social experience modifies pheromone expression and mating behavior in male Drosophila melanogaster.</a> Curr Biol. 18, 1373-1383 (2008).</li>
<li>Kent, C., Azanchi, R., Smith, B., Formosa, A., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+context+influences+chemical+communication+in+D.+melanogaster+males%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Social context influences chemical communication in D. melanogaster males.</a> Curr Biol. 18, 1384-1389 (2008).</li>
<li>Levine, J. D., Funes, P., Dowse, H. B., Hall, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resetting+the+Circadian+Clock+by+Social+Experience+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Resetting the Circadian Clock by Social Experience in Drosophila melanogaster.</a> Science. 298, 2010-2012 (2002).</li>
<li>Ganguly-Fitzgerald, I., Donlea, J., Shaw, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Waking+Experience+Affects+Sleep+Need+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Waking Experience Affects Sleep Need in Drosophila.</a> Science. 313, 1775-1781 (2006).</li>
<li>Billeter, J. -C., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Who+is+he+and+what+is+he+to+you%3F+Recognition+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Who is he and what is he to you? Recognition in Drosophila melanogaster.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 23, 17-23 (2013).</li>
<li>Suh, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+population+of+olfactory+sensory+neurons+mediates+an+innate+avoidance+behaviour+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A single population of olfactory sensory neurons mediates an innate avoidance behaviour in Drosophila.</a> Nature. 431, 854-859 (2004).</li>
<li>Bonini, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Tribute+to+Seymour+Benzer+1921-2007%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">A Tribute to Seymour Benzer 1921-2007.</a> 180, 1265-1273 (2008).</li>
<li>Castermans, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neurobeachin+gene+is+disrupted+by+a+translocation+in+a+patient+with+idiopathic+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Genetics%22%5BJournal%5D)">The neurobeachin gene is disrupted by a translocation in a patient with idiopathic autism.</a> Journal of Medical Genetics. 40, 352-356 (2003).</li>
<li>Medrihan, L., et al. Neurobeachin, a protein implicated in membrane protein traffic and autism, is required for the formation and functioning of central synapses. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMedrihan%2C+L+%22J+Physiol%22">J Physiol</a>. 587, 5095-5106 (2009).</li>
<li>Simon, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+assay+to+study+social+behavior+in+Drosophila%3A+measurement+of+social+space+within+a+group%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">A simple assay to study social behavior in Drosophila: measurement of social space within a group.</a> Genes Brain Behav. 11, 243-252 (2012).</li>
<li>Venkatesh, T., et al. Cold Spring Harbor Meeting: From Molecules to Circuit Behavior. , Cold Spring Harbor Laboratories. Cold Spring Harbor, NY. (2013).</li>
<li>Hamilton, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+mutation+in+the+dopamine+transporter+gene+associates+dopamine+dysfunction+with+autism+spectrum+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">De novo mutation in the dopamine transporter gene associates dopamine dysfunction with autism spectrum disorder.</a> Mol Psychiatry. 18, 1315-1323 (2013).</li>
<li>Gadow, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+dopamine+gene+variants%2C+emotion+dysregulation+and+ADHD+in+autism+spectrum+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Research+in+Developmental+Disabilities%22%5BJournal%5D)">Association of dopamine gene variants, emotion dysregulation and ADHD in autism spectrum disorder.</a> Research in Developmental Disabilities. 35, 1658-1665 (2014).</li>
<li>Fernandez, R. W., Akinleye, A. A., Nurilov, M., Rouzyi, Z., Simon, A. F. 54th Annual Drosophila Research Conference, , (2014).</li>
<li>Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assaying+Locomotor%2C+Learning%2C+and+Memory+Deficits+in+Drosophila+Models+of+Neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration.</a> J Vis Exp. , 2504(2011).</li>
<li>Connolly, J. B., Tully, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aConnolly%2C+JB+%22Drosophila%3A+A+Practical+Approach%22">Drosophila: A Practical Approach</a>. Roberts, D. B. 1, IRL. New York, NY. 265-317 (1998).</li>
<li>Tully, T., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classical-conditioning+and+retention+in+normal+and+mutant+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Physiol+%5BA%5D%22%5BJournal%5D)">Classical-conditioning and retention in normal and mutant Drosophila melanogaster.</a> J Comp Physiol [A]. 157, 263-277 (1985).</li>
<li>Krashes, M. J., Waddell, S. Drosophila Aversive Olfactory Conditioning. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKrashes%2C+MJ+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22">Cold Spring Harbor Protocols</a>. 2011, (2011).</li>
<li>Ejima, A., Griffith, L. C. Ch. 30. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aEjima%2C+A+%22Drosophila+Neurobiology%2C+A+Laboratory+Manual%22">Drosophila Neurobiology, A Laboratory Manual</a>. Zhang, B., Freeman, M. R., Waddell, S. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. Cold Spring, NY. 475-481 (2010).</li>
<li>Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+mutants+of+Drosophila+melanogaster+isolated+by+countercurrent+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22PNAS%22%5BJournal%5D)">Behavioral mutants of Drosophila melanogaster isolated by countercurrent distribution.</a> PNAS. 58, 1112-1119 (1967).</li>
<li>Simon, A. F., Shih, C., Mack, A., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Steroid+control+of+longevity+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Steroid control of longevity in Drosophila melanogaster.</a> Science. 299, 1407-1410 (2003).</li>
<li>Vaux, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+methods%3A+Know+when+your+numbers+are+significant%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Research methods: Know when your numbers are significant.</a> Nature. 492, 180-181 (2012).</li>
<li>Stowers, L., Logan, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+dimorphism+in+olfactory+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Sexual dimorphism in olfactory signaling.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 20, 770-775 (2010).</li>
<li>Simon, A. F., Liang, D. T., Krantz, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+decline+in+behavioral+performance+of+Drosophila+melanogaster+with+age%5BTitle%5D)+AND+%22Mechanisms+of+Ageing+and+Development%22%5BJournal%5D)">Differential decline in behavioral performance of Drosophila melanogaster with age.</a> Mechanisms of Ageing and Development. , 127-647 (2006).</li>
</ol>

Yazarlar, rekabet eden hiçbir finansal çıkarları olmadığını beyan ederler.

Bu protokol, sosyal kaçınma tahlil için ayrıntılı bir yordam açıklanır. Kanton-S sadece daha önce mekanik olmuştur vurguladı var uçar hangi bir şişe önlemek ve yanıt verenlerin seks ve sayı sosyal kaçınma performansı olduğunu etkilemez. Ancak, yanıt genetik arka önemli bir etkisi vardır. Bu denemeyi başarılı gerçekleştirmek için pek çok kritik adımlar şunlardır: 1) her zaman deneyden önce Sinekler 2 saat aktarmak ve çevrelerini rahatsız değil emin olun; 2) sirkadiyen ritim ve hareket ve akti...

Bu yöntemin amacı kolayca kur ve saldırganlık bağımsız Drosophila melanogaster basit sosyal davranış, yeni bir yönünü ölçmek için. Sosyal etkileşimler doğru gelişme ve sağlık bireylerin toplum içinde, hem de bir bütün olarak bir toplumsal grubun işlevselliğine önemlidir. Bu etkileşimlerin yüksek karmaşıklığı büyük örnek boyutları ve sosyal davranış genetik ve nöral temelleri hala tam olarak anlaşılamamıştır gibi davranış basitleştirilmesi sağlayan bir sistem gerektirir. Drosophila melanogaster genetik tanımlamak için kullanılabilecek güçlü bir genetik model ve Sosyal etkileşim nöral temelleri. Gerçekten de, D. melanogaster karmaşık sosyal davranışların bir repertuara sahiptir ve sosyalleşme bazı direkt ölçümler zaten 1-7 yapılmıştır. Ancak bu çabaların çoğu gibi saldırganlığı gibi oldukça karmaşık sosyal davranışlar üzerinde odaklanmıştırsive etkileşimler 3,6, kur 3,8-12 çeşitli yönleri ve nasıl sosyal bir deneyim gibi öğrenme, ya da sirkadiyen ritim 13-17 gibi diğer davranışları etkiler. Buna ek olarak, bu deneylerin çoğuna sineklerin gruplarının karmaşık etkileşimi örüntüye verilerin elde edilen bolluk analiz video izleme ve bilgisayar yazılımı kullanılarak dayanır. Bu tür analizler çok değerli ve bu gruplarda 7 sinek sinek etkileşimlerinin dinamik olarak önemli yeni anlayışlar yol. Bir sınırlama, ancak, geniş topluma bu analizlerin erişilememesi, ve diğerleri tanınmasını altında yatan mekanizmaların sınırlı bilgidir. Başka bir deyişle, bir birey ve bir başka tarafından tanınması bir sinyalin emisyon temeli hala tam olarak 18 anlaşılmaktadır. D.: Buna karşılık, aynı zamanda basit bir davranış, bireylerin stresli sinekler tarafından yayılan bir sinyal uzaklaşmaya sosyal kaçınma, sergiler sineklerin melanStres Odorant veya DSO 19 ogaster. Bir yüksek verimli bir deney, bu davranış, diğer sinekler veya kaçınma 19 tarafından yayılan bir gerilim sinyalinin önlenmesi olarak belirlenebilir. Sinekler T-labirent aparatı yerleştirilmiş ve DSO içeren bir şişe önlemek için seçim verilir. Bu deneme kullanılarak, CO2 2 19 kesitlere ayrılmıştır CO yanıt için gerekli nöral DSO bileşeni, ve bir parçası olduğu gösterilmiştir. Burada sunulan sosyal kaçınma tahlil karmaşık davranışları 20 incelemek için araştırmacıların nesiller etkin Seymour BENZER laboratuvarında geliştirilen basit davranış deneyleri kavramsal benzer. Kaçınma analizi maliyet etkin sosyal davranışlarının daha yaygın çalışma için izin T-labirent tahlili kullanılarak gerçekleştirilebilir. Örneğin, bu deneyde kullanılan son zamanlarda ortaya otizm, farklı genetik riski sosyal b zıt etkilere sahip olduğuehavior deneyler. 21,22 neurobeachin - - otizm için bir aday gen için mutantlar mevcut eksiklikler hem sosyal alanda (başka yerde 23 tarif) ve sosyal kaçınma 24. Anormal dopaminerjik sinyal de insanlarda 25,26 otizm etiyolojisinde rol oynadığı ileri sürülmektedir. Neurobeachin ile elde edilen sonuçların aksine, artmış ya da dopaminerjik hücrelerin Drosophila veziküler Monoamin Taşıyıcı (VMAT) düzeylerini azaltırken sosyal alanı ile doğrudan VMAT 27 bu seviyelere ilişkili, ancak kaçınma performansı, etkilenmemiş olduğunu ortaya koymuştur. neurobeachin ve VMAT ile elde edilen zıt sonuçlar böylece çeşitli asosyal davranış biçimlerini ve başkalarına yanıt modüle farklı altta yatan nöral devreler belirlenmesi olasılığını altını çiziyor.

<table><tbody><tr><td>Stereo Zoom Mikroskop&nbsp;</td><td>Nikon&nbsp; &nbsp;</td><td>SMZ-645</td><td>Sinek işleme için başka herhangi bir standart kapsam işe yarayacaktır</td></tr><tr><td>Küçük boya fırçaları&nbsp;</td><td></td><td></td><td>Sinekleri itmek için</td></tr><tr><td>Gözenekli Polietilen, 12" x 12" Levha</td><td>Flystuff - Genesee</td><td>46-100</td><td>http://www.flystuff.com/ProductInfo.php?productID=46-100 Soğuk anestezi kutusu için gözenekli plastik levha</td></tr><tr><td>Mini Alarm Zamanlayıcı / Kronometre</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sharpie kalemler</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yapışkan Bant</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mini girdap</td><td>Fisher</td><td>14-955-151&nbsp;</td><td>http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail Sineklerin mekanik çalkalanması için - herhangi bir girdap işe yarayacaktır.</td></tr><tr><td>Corning Yaşam Bilimleri DL No.:352017, Falcon test tüpü; yuvarlak alt; tek kullanımlık; kapanma yok, 14 ml; 17 x 100 mm</td><td>Fisher</td><td>14-959-8 &nbsp; &nbsp;</td><td>http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail?storeId=10652&langId=-1&catalogId=29104&productId=2771811&distype=0&highlightProductsItemsFlag=Y&fromSearch=1&searchType=PROD&hasPromo=0 Bunlar, deneyden sonra şişeleri kapatmak için şirket içi yapılan T-labirenti ve karşı akım aparatı (metne bakın)</td></tr> <tr><td>pamuk toplarında</td><td></td><td></td><td></td></tr> yerine oturur.<tr><td>Beyaz bir arka plan ve homojen bir ışık sağlamak için</td> <td>üç katlı tahta ve beyaz tezgah örtüsü</td><td></td><td></td>.</tr><tr><td>Beyaz Tezgah Örtüsü</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vurma Pedi</td><td></td><td></td><td>Herhangi Bir Mouse Pad Çalışır.</td></tr><tr><td>Fototaksi tepkisinde karşı akım aparatını örtmek için</td> <td>büyük siyah bez</td><td></td><td></td>.</tr><tr><td>soğuk beyaz ışık&nbsp;</td><td>Home Depot</td><td>1000516563</td><td>http://www.homedepot.ca/product/illume-26-fluorescent-plug-in-linear/911423 13-15 W'ta floresan ampul soğuk beyaz olan benzer herhangi bir doğrusal ışık işe yarayacaktır</td></tr></tbody></table>

sosyal kaçınma niceleme için basit testi drosophila melanogaster

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster, sosyal etkileşimlerin farklı yönlerini incelemek için ortaya çıkan bir modeldir. Örneğin, sinekler, Drosophila stres koku vericisi (dSO) olarak bilinen stres sırasında salınan bir koku maddesi nedeniyle daha önce stresli türdeşlerin işgal ettiği alanlardan kaçınır. T-labirent aparatının kullanılmasıyla, çok uygun fiyatlı ve sağlam bir tahlilde yanıtlayıcı sinekler tarafından dSO'dan kaçınma ölçülebilir. Güçlü bir performans elde etmek için gerekli koşullar burada sunulmuştur. Sineklerin dSO'yu yayması için stresli bir deneyimin yanı sıra, dSO'nun varlığına karşı sağlam bir kaçınma tepkisine neden olacak kadar yayıcı sinek gereklidir. Genetik arka plan, ancak grup büyüklükleri değil, yanıt veren sinekler tarafından dSO'dan kaçınmayı güçlü bir şekilde değiştirdi. Canton-S ve Elwood, dSO'dan kaçınmada Oregon ve Semerkant suşlarından daha yüksek bir performans sergiliyor. Bu davranışsal tahlil, bu sosyal davranışın altında yatan mekanizmaların tanımlanmasına ve genlerin ve çevresel koşulların dSO'nun hem emisyonu hem de önlenmesi üzerindeki etkisinin değerlendirilmesine izin verecektir. Böyle bir tahlil, mutantların sosyal eksikliklerini veya çevresel ilgi koşullarını tanımlamak için kullanılan basit tanı testlerinin pillerine dahil edilebilir.

sosyal kaçınma tahlil diğer sinekler tarafından yayılan bir stres sinyali tanımak için Drosophila melanogaster yeteneğini (DSO) ölçülmesi ve böylece sosyal etkileşimlerin bir yönünü değerlendiren sağlam bir testtir. Deney genellikle iki farklı seçenek arasında bir seçim ile sinekler mevcut T-labirent olarak bilinen çeşitli davranış deneylerinde kullanılan bir aygıt kullanılarak gerçekleştirilir - sola veya sağa 19,28-31. Bu durumda, sinekler DSO önlemek hangi verimlilik hesaplanması ve performans End...

Burada, stresli bireylerin kaçınma durumunu ölçmek için bir protokol sunuyoruz. Bu paradigma güçlü ancak kullanıcı dostudur ve Drosophila melanogaster'de genlerin ve çevrenin bir tür sosyal etkileşim üzerindeki etkisini değerlendirmek için kullanılabilir.

Sosyal Kaçınma Niceleme için Basit Testi Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

Bu prosedürün amacı, sineklerin stresli bireyler tarafından yayılan sosyal sinyale verdiği tepkiyi ölçmektir. Bu, deneyden en fazla iki gün önce ilk toplama, yanıtlayıcı ve yayıcı sinekler ile gerçekleştirilir. İkinci adım, hem yayıcı hem de yanıtlayıcı sinekleri deneyden iki saat önce taze şişelere aktarmak ve tahlilin yapılacağı çevre kontrollü odaya alışmalarına izin vermektir.Daha sonra, yanıtlayıcı sinekler TMA'lara yerleştirilir ve sineklerin daha önce vurgulandığı, böylece drosophila stres kokusunu içeren bir şişe ile taze bir şişe arasında seçim yapılır, son adım, DSO'ya yanıtlarını ölçmek için DSO şişesindeki ve asansördeki taze şişedeki yanıtlayıcı sineklerin sayısını saymaktır. Sonuç olarak, T labirenti, bir sosyal stres sinyalinin, özellikle de gilo stres koku vericisinin sineklerinden kaçınmayı ölçmek için kullanılır. Bu yöntem fikri ilk olarak Caltech'te doktora sonrası araştırmacı olduğumda aklıma geldi.O zamanlar, Greg Sue ve doktora sonrası danışmanı David Anderson, Phyla'da korku veya sosyal kaçınma üzerine çalışıyorlardı, ancak bunun için mevcut bir test yoktu. Bana yaklaştılar çünkü S brands'ın laboratuvarında çok fazla davranış tahlili yapıyordum ve fototaksi v

straightforward-assay-for-quantification-social-avoidance-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu video makalede, istikrarlı ve denetlenebilir geometrileri odorant degradelerin inşaat sağlayan yeni bir yöntem açıklanmaktadır. Biz kısaca bu gradyanlar koku alma kusurları (tam ve kısmi anosmi) ekrana nasıl kullanılabileceğini göstermek ve daha ince kemotaksis davranış özelliklerini incelemek için.

Yüksek çözünürlüklü Ölçüm Drosophila Larva Koku-Driven Davranış

Davranış testleri, lokomotor fonksiyonları ölçme öğrenme ve hafıza...

Assaying Lokomotor, Öğrenme ve Hafıza Açıkları. Drosophila Nörodejenerasyon, modeller

Drosophila melanogaster bir yüzyıl 1 aşkın süredir birçok önemli biyolojik işlemlerin moleküler ve hücresel temelini anlamak için kullanılan bir genetik ve davranışsal uysal modeli sistemidir. Drosophila iyi sinek davranışının genetik temeli içgörü kazanmak için istismar edilmiştir.

Test için Yöntemler Drosophila Davranış

Bu video, sinek hareketini ölçmek için basit bir yöntemi açıklar ve gerçekleştirilen tırmanma testini gösterir. Sinek tırmanma testi, negatif bir jeotaksi tepkisine dayanan genel bir motor fonksiyon testidir.

Sinek Tırmanma Deneyi: Drosophila melanogaster'de Genel Hareketi Test Etmek İçin Bir Yöntem

Bu video makalede, Drosophila melanogaster uçmak yetişkin meyve koku bağımlı gıda arama davranışı üzerine açlık veya tokluk etkisini ölçmek için otomatik bir deneyi açıklar.

Toplayıcılık Davranış için Tek-sinek Deneyi Drosophila

Genlerin ve çevrenin Drosophila melanogaster'in sosyal alanı üzerindeki etkisi, güçlü ama basit bir analitik paradigma ile ölçülebilir. Burada, bu sosyal alanı etkileyebilecek ve bu paradigmadaki deneyleri tasarlarken göz önünde bulundurulması gereken farklı faktörleri gösteriyoruz.

Sosyal Space Etkileyen Koşullar<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Bu protokol, Drosophila melanogaster'in yumurtlama tercihlerini tek hayvan çözünürlüğünde test etmek için yüksek verimli bir testi tanımlar.  Bu tahlil, basit bir karar verme sürecini kontrol eden genleri ve devre bileşenlerini tanımlamak için basit, verimli ve ölçeklenebilir bir platform sağlar.

Yüksek Verimli Testi Bireyin Yumurta Yumurtlayan Tercihler incelemek için<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Bu protokol, Drosophila larva fototaktik davranışını araştırmak için ışık noktası bir test sunar. Bu testte, ışık stimülasyonu olarak bir ışık noktası oluşturulur ve larva ışıktan kaçınma işlemi kızılötesi ışık tabanlı görüntüleme sistemi tarafından kaydedilir.

Drosophila Larva Fototaksisanalizi için Hafif Nokta Tabanlı Tahlil

Bu çalışma, yetişkin meyve sineklerinde aversif ilişkilendirilebilir öğrenmenin analizine izin veren basit bir davranış paradigmasını açıklar. Yöntem, belirli bir çevresel bağlam ile elektrik çarpması arasında oluşan ilişki nedeniyle doğuştan gelen negatif jeotaksi davranışını bastırmaya dayanır.

Drosophila İlişkisel Aversive Öğrenmeyi İncelemek İçin Yeni Bir Paradigma Olarak Pasif Kaçınma Davranışı

Mevcut protokol, Drosophila'nın lokomotor aktivitesini, hız, mesafe vb. parametreleri hesaplamak için yüksek tanımlı video kaydına dayalı olarak her karenin piksellerini segmentlere ayırmak için eklentilerle uyumlu açık kaynaklı yazılım Fiji'yi kullanarak el yapımı bir arenada sineklerin hareketini izleyerek ve analiz ederek değerlendirir.

Drosophila'da Lokomotor Aktiviteyi Test Etmek İçin Basit Bir Teknik

Otizm Spektrum Bozukluğu (OSB), bozulmuş sosyal ve iletişimsel davranış ve tekrarlayan davranışların ortaya çıkması ile ilişkilidir. Drosophila modelinde ASD genleri ve davranışsal eksiklikler arasındaki ilişkiyi incelemek için, bu yazıda sosyal boşluk, saldırganlık, kur yapma, tımar etme ve alışkanlık davranışını test etmek için beş davranışsal paradigma açıklanmaktadır.

Otizm Spektrum Bozukluğunun Drosophila Modelinde Davranışsal Değerlendirme Paradigmaları

Öğrenin Drosophila melanogaster'da sosyal kaçınma davranışını T labirenti kullanarak nicelendirmeyi. Bu yöntem stres sinyallerine yanıtları ölçerek davranışsal nörobilim araştırmalarına katkı sağlar.

Sosyal Kaçınma Niceleme için Basit Testi Drosophila melanogaster

Daha fazla video keşfet