Name: Immunotargeted sentezi Magneto-plasmonik nanoklastırlar (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-22T16:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 43 s
Description: Öğrenin, immuno-targeted magneto-plasmonik nanoklastırların sentez protokolünü; demir oksit çekirdek, altın kabuk ve monoklonal antikor konjugasyonu ile güçlü manyetik moment ve yakın kızılötesi absorbans elde edin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma NIH hibe R01 EB008101 ve R01 CA103830 tarafından kısmen desteklenmiştir.

1. Aletler ve Züccaciye Hazırlık <ol><li> Yani uygun koruyucu ekipman, laboratuvar önlüğü, atılabilir eldivenler ve göz koruması takın. </li><li> Kondansatöre, yuvarlak dipli bir balon içinde iletişime ve bir termometre ile bir sıcaklık denetimli bir silikon yağı banyosu içinde bırakın. Yağ banyosunda (Şekil 1) altında, bir ısı kaynağı (örneğin, sıcak plaka) koyun. Sıcaklığı daha yüksek 260 ° C ölçme yeteneğine sahip bir termometre kullanarak. </li></ol> İlköğretim Hibrid 2. sentezi Magneto-plasmonik Nanoparçacıklar <ol><li> Manyetik Çekirdek Nanopartiküller Yapımı <ol><li> Yuvarlak bir 353.2 mg (1 mmol), demir (III) asetilasetonat, 1 ml (2 mmol), oleik asit, 1 ml (2 mmol) oleilamin, 1.292 gr (5 mmol) 1,2-heksadekanediol ve 10 mi fenil eter ekleyin -Dip şişe. </li><li> Kuvvetli geri akış altında 1 saat boyunca 250-260 ° C&#39;ye kadar Manyetik bir karıştırma-çubuğu ve ısı ile karıştırın. Çözüm soğumasını Sonra, bekleyinKarışımın oda sıcaklığına. Sıcaklık fenil eter kaynamasını önlemek ve kondansatöre yuvarlak dipli bir reaksiyon kabına reaksiyon kanşımının bir ileri atılmasını önlemek için 260 ° C&#39;nin altındaki sıcaklıklarda olduğundan emin olun. DİKKAT: Reaksiyon karışımı son derece sıcak ve kimyasallar tahrişe neden olabilir. Davlumbaz altında faaliyet ve uygun kişisel koruyucu ekipman giymelidir. Yağ banyosu için yeterli havalandırmayı sağlayın. Not: Yağ banyosu manyetik nanopartiküllerin sentezi sırasında, 1 saat süre ile 250-260 ° C sıcaklıkta tutulur. Prensip olarak, bir Pyrex cam tabak, bu amaç için kullanılabilir. Ancak, Pyrex cam için maksimum sürekli sıcaklık satıcı bilgiye göre ºC ~ 260 olduğunu. Bu nedenle, metal kap, daha yüksek bir sıcaklığa dayanabilirler ve birden fazla çalışmalar sırasında uzun süre gibi reaksiyon için daha güvenli bir seçenek sağlar. </li></ol></li><li> Manyetik çekirdek nanopartiküller üzerine bir altın kabuk çökelmeden <ol><li> 411.5 mg (1.1 mmol) altın ace Ekleetilester, 0.25 mi (0.75 mmol) yağ asidi, 1,5 mi (3,0 mmol) oleilamin, yuvarlak dipli bir şişeye 775.3 mg (3 mmol) 1,2-heksadekanediol ve 15 ml fenil eter. </li><li> Adım 2.1 &#39;den manyetik nanopartiküller 5 ml süspansiyon ekleyin. 180 ° C&#39;ye ısıtılır ve reaksiyon karışımı, 1 saat boyunca geri akış altında tutun. Oda sıcaklığına kadar soğuması için çözüm bekleyin. </li><li> 15 dakika boyunca 3250 x g&#39;de santrifüj işlemi ile hibrid birincil nano-tanecikleri çökeltmek için 50 ml etanol ekleyin. </li><li> Banyo sonikatör kullanarak 25 ml heksan içinde süspanse çökelti. Birincil hibrid nano-tanecikleri çökeltmek için 25 ml etanol ile ekleyin. 15 dakika boyunca 3250 x g&#39;de santrifüj ve heksan içinde çökelti tekrar süspansiyon. Bu adımı üç kez tekrarlayın. </li><li> Bir vakum desikatör O / N çökelen primer karma nano-tanecikleri kurutunuz. Parçacıklar tamamen kuru olduğundan emin olun. </li></ol></li></ol> 3. Hibrid Magneto-plasmonik nanoklastırlar Sentezi ve Boyut Ayırma <ol><li&gt; Banyo sonikatör kullanılarak 1 mL kuru heksan içinde primer karma nanopartiküllerinin süspanse 5 mg arasındadır. Gözle görülen bir çökelti oluşana kadar nanoparçacık süspansiyon sonikasyon. </li><li> Bağlı kapaklı 20 ml&#39;lik bir cam şişe içerisinde 3,1-10 ML aşama sodyum dodesil sülfat (2,8 mg / ml) sulu bir çözelti solüsyonu ekleyin. Bir sonraki aşamada önce, iki fazın karıştırılması bilmek damla primer karma nanopartiküller damla süspansiyonu ekleyin. </li><li> 10 dakika boyunca 80 ° C&#39;de bir su banyosunda ısıtarak ve ardından, 2 saat boyunca bir banyo sonikatörü içinde, iki fazlı bir çözelti, sonikasyon. Oda sıcaklığına kadar soğuması için çözüm bekleyin. <ol><li> Sonikasyon banyo çalışma seviye çizgisine kadar su doldurun. Sonikasyon banyosunda cam şişeyi ortalayın. Hemen iki faz arasında bir emülsiyon oluşturur. Sonikasyon başlamasından sonra elle, iki fazlı bir çözelti çalkalayın; Bu primer karma nano-tanecikleri içeren bir faz ve alt, sulu faz arasındaki karıştırma kolaylaştırır. NOT: tha farkında olunsonikatöre t operasyonun 2 saat sonra ısınır. </li></ol></li><li> 30 dakika boyunca 100 x g&#39;de santrifüj melez nanocluster süspansiyonu. Çökelti ve süpernatan iki toplayın. 10 dakika sonikasyon altında 0.1 mM sodyum sitrat çökelti süspanse. Nanoklastırlaar beklenen boyutu çapı ~ 180 nm&#39;dir. </li><li> Yeni bir konik tüp adım 3,3 süpernatant aktarın. </li><li> 30 dakika boyunca 400 x g&#39;de adım 3.4 süspansiyon santrifüj. Çökelti ve süpernatan iki toplayın. 10 dakika sonikasyon altında 0.1 mM sodyum sitrat çökelti süspanse. Nanoklastırlaar beklenen boyutu çapı ~ 130 nm&#39;dir. </li><li> Yeni bir konik tüp adım 3.5 den süpernatant aktarın. </li><li> 30 dakika boyunca 1.500 xg&#39;de adım 3.6 den süspansiyon santrifüj. 10 dakika sonikasyon altında 0.1 mM sodyum sitratta çökelti ve tekrar süspansiyon toplayın. Nanoklastırlaar beklenen boyutu ~ çapı 90 nm&#39;dir. </li><li> Ekle 300 _6, bir UV Vis NIR absorbsiyon spektrumunu ölçme için bir 96-çukurlu mikro levha okuyucusu l nanocluster süspansiyonu. TEM görüntüleme için karbon kaplı bakır ızgara üzerine 10 ul nanocluster süspansiyon bırakın. </li></ol> Nanoklastırlar karşı monoklonal antikorların 4. Konjügasyon <ol><li> 100 uL monoklonal antikor çözeltisi (PBS içinde 1 mg / ml), pH 7.2, örneğin, bir anti-epidermal büyüme faktörü reseptörü 2 (HER2) antikorlar ya da anti-epidermal büyüme faktörü reseptörü 1 (EGFR) antikorları hazırlayın. </li><li> 3.9 ml 4 mM HEPES, pH 7.2 adım 4,1 antikor solüsyonu ekleyin. Santrifüj 8 ° C&#39;de 20 dakika boyunca 3250 x g&#39;de 10 K bir MWCO santrifüj filtre ile çözelti. 100 ul son hacim olması için, 4 mM HEPES, pH 7.2 içinde yeniden süspanse antikor. Not: Bu adım HEPES ile antikor çözeltisi içinde orijinal ortamı değiştirmek için gerçekleştirilir. </li><li> Antikor çözeltisi 100 mM NAIO 4-100 ul, 10 ul ekle. Bir al ile reaksiyon şişesine Kapakoda sıcaklığında uminum folyo ve orbital bir karıştırıcı kullanılarak 30 dakika boyunca karıştırın. </li><li> 1x PBS 500 ul ekleyerek reaksiyonu söndürün. </li><li> Adım 4,4 antikor çözeltisine 46,5 mM bağlayıcı çözeltisi, 2 ul (dithiolaromatic PEG6-CONHNH 2) ilave et ve oda sıcaklığında 1 saat boyunca çalkalanır. </li><li> 8 ° C&#39;de 20 dakika boyunca 3250 x g&#39;de 10 K bir MWCO filtre kullanılarak santrifüj solüsyonu filtre. , ~ 1 mg / ml &#39;lik bir antikor konsantrasyonuna yol açar 100 ul&#39;lik nihai bir hacme kadar 1x PBS içinde yeniden süspanse antikor. </li><li> Oda sıcaklığında 120 dakika boyunca aşama 4.6 (1 mg / mi) 1.0 1 ııl ~ OD 100 ul değiştirilmiş antikorları nanocluster süspansiyon karıştırın. </li><li> 10 3 M, 5 kDa tiol PEG 10 ul eklenir ve oda sıcaklığında 15 dakika boyunca sallayın. </li><li> 3 dakika boyunca 830 x g&#39;de santrifüje çözeltisi. Süpernatantı atın ve PBS, pH 7.2 / 5 h kDa PEG w 100 ul% 2 tortu tekrar süspansiyon. </li><li> Antikora konjuge nanoklastırlaar absorbans spektrumunun ölçmek ve karşılaştırmak to çıplak nanoklastırlaar spektrumu Absorbans. Birleştirmeden sonra nanometre kırmızı vardiya birkaç bekliyoruz. </li><li> Nanotanecikler, ve kırmızı-NIR&#39;de OD bir artış ile önemli bir değişiklik gösterdiği agrega halinde, 5 cm x 10 M. -3 tiol PEG konsantrasyonunu arttırmak Ayrıca, 30 dakika için tiol PEG ile inkübasyon süresi artar ve 200 x g santrifüj artışlarla hızını azaltır. </li><li> Kanser hücresi etiketleme testi için, ya da, orta veya 1x PBS (1 mi ~ 10 6 hücre) kanser hücre süspansiyonu aşama 4,9 Antikorun konjuge nano-tanecikleri ekleyin ve 60 dakika için karıştırın. </li></ol>

<ol><li>Bigall, N. C., Parak, W. J., Dorfs, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent%2C+magnetic+and+plasmonic%E2%80%94Hybrid+multifunctional+colloidal+nano+objects%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Today%22%5BJournal%5D)">Fluorescent, magnetic and plasmonic—Hybrid multifunctional colloidal nano objects.</a> Nano Today. 7, 282-296 (2012).</li>
<li>Gautier, J., Allard-Vannier, E., Herve-Aubert, K., Souce, M., Chourpa, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+strategies+of+hybrid+metallic+nanoparticles+for+theragnostic+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nanotechnology%22%5BJournal%5D)">Design strategies of hybrid metallic nanoparticles for theragnostic applications.</a> Nanotechnology. 24, 432002(2013).</li>
<li>Wei, Q., Wei, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+imaging+with+dynamic+contrast+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Chemistry%22%5BJournal%5D)">Optical imaging with dynamic contrast agents.</a> Chemistry. 17, 1080-1091 (2011).</li>
<li>Aaron, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+optical+contrast+in+imaging+of+epidermal+growth+factor+receptor+using+magnetically+actuated+hybrid+gold%2Firon+oxide+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Optics+express%22%5BJournal%5D)">Increased optical contrast in imaging of epidermal growth factor receptor using magnetically actuated hybrid gold/iron oxide nanoparticles.</a> Optics express. 14, 12930-12943 (2006).</li>
<li>Song, H. -M., Wei, Q., Ong, Q. K., Wei, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmon-resonant+nanoparticles+and+nanostars+with+magnetic+cores%3A+synthesis+and+magnetomotive+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+nano%22%5BJournal%5D)">Plasmon-resonant nanoparticles and nanostars with magnetic cores: synthesis and magnetomotive imaging.</a> ACS nano. 4, 5163-5173 (2010).</li>
<li>Qu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magneto-photo-acoustic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+optics+express%22%5BJournal%5D)">Magneto-photo-acoustic imaging.</a> Biomedical optics express. 2, 385-396 (2011).</li>
<li>Jin, Y., Jia, C., Huang, S. -W., Donnell O&39, M., Gao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifunctional+nanoparticles+as+coupled+contrast+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+communications%22%5BJournal%5D)">Multifunctional nanoparticles as coupled contrast agents.</a> Nature communications. 1, 41(2010).</li>
<li>Wu, C. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Versatile+Immunomagnetic+Nanocarrier+Platform+for+Capturing+Cancer+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22ACS%22%5BJournal%5D)">Versatile Immunomagnetic Nanocarrier Platform for Capturing Cancer Cells.</a> ACS. 7, 8816-8823 (2013).</li>
<li>Galanzha, E. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+magnetic+enrichment+and+multiplex+photoacoustic+detection+of+circulating+tumour+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+nanotechnology%22%5BJournal%5D)">In vivo magnetic enrichment and multiplex photoacoustic detection of circulating tumour cells.</a> Nature nanotechnology. 4, 855-860 (2009).</li>
<li>Larson, T. A., Bankson, J., Aaron, J., Sokolov, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybrid+plasmonic+magnetic+nanoparticles+as+molecular+specific+agents+for+MRI%2Foptical+imaging+and+photothermal+therapy+of+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nanotechnology%22%5BJournal%5D)">Hybrid plasmonic magnetic nanoparticles as molecular specific agents for MRI/optical imaging and photothermal therapy of cancer cells.</a> Nanotechnology. 18, 325101(2007).</li>
<li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dumbbell-like+bifunctional+Au-Fe3O4+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+letters%22%5BJournal%5D)">Dumbbell-like bifunctional Au-Fe3O4 nanoparticles.</a> Nano letters. 5, 379-382 (2005).</li>
<li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monodispersed+core-shell+Fe3O4%40Au+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22The+journal+of+physical+chemistry.+B%22%5BJournal%5D)">Monodispersed core-shell Fe3O4@Au nanoparticles.</a> The journal of physical chemistry. B. 109, 21593-21601 (2005).</li>
<li>Wang, H., Brandl, D. W., Le, F., Nordlander, P., Halas, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanorice%3A+a+hybrid+plasmonic+nanostructure%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+letters%22%5BJournal%5D)">Nanorice: a hybrid plasmonic nanostructure.</a> Nano letters. 6, 827-832 (2006).</li>
<li>Hu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trapping+and+Photoacoustic+Detection+of+CTCs+at+the+Single+Cell+per+Milliliter+Level+with+Magneto%E2%80%90Optical+Coupled+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Trapping and Photoacoustic Detection of CTCs at the Single Cell per Milliliter Level with Magneto‐Optical Coupled Nanoparticles.</a> Small. 9, 2046-2052 (2013).</li>
<li>Truby, R. L., Emelianov, S. Y., Homan, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligand-mediated+self-assembly+of+hybrid+plasmonic+and+superparamagnetic+nanostructures%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Ligand-mediated self-assembly of hybrid plasmonic and superparamagnetic nanostructures.</a> Langmuir. 29, 2465-2470 (2013).</li>
<li>Bai, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Versatile+Bottom%E2%80%90up+Assembly+Approach+to+Colloidal+Spheres+from+Nanocrystals%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition%22%5BJournal%5D)">A Versatile Bottom‐up Assembly Approach to Colloidal Spheres from Nanocrystals.</a> Angewandte Chemie International Edition. 46, 6650-6653 (2007).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarının olmadığını beyan ederim.

Manyeto-plasmonik nanoklastırlaar başarılı sentezde kritik adımlar çok tek tek dağılmış birincil altın kabuk / demir oksit nano-tanecikleri yapma ve çekirdek nanoklastırlar içine birincil partiküllerinin öz düzeneğini yönlendiren içerir. Birincil parçacıklar ve yüzey aktif maddeler arasında bir mol oranı nanoklastırlaar boyut dağılımına belirlenmesinde önemli bir rol oynar. Birincil nanopartiküllerinin muntazam olmayan boyut dağılımı manyeto-plasmonik nanoklastırlaar montajı sırasında büyük agrega oluşumu olabilir. Buna...

Farklı fizikokimyasal özelliklere sahip farklı malzemelerden oluşan hibrid nanopartiküller modlu moleküler görüntüleme, tedavi ve izlenmesinde, yeni tarama ve teşhis deneyleri de dahil olmak üzere 1-3 biyomedikal uygulamalarda yeni fırsatlar açabilir. Bir manyetik alana plazmon rezonans ve yanıt ile ilgili olarak çok güçlü bir ışık saçılması ve emme kesitler sağlar, çünkü tek bir nanopartikül içinde plasmonik ve manyetik özelliklerin kombinasyonu özellikle tercih edilir. Örneğin, manyeto-plasmonik nanopartiküller bir harici elektro 3-5 ile geçici bir sinyal modülasyon uygulanarak işaretli hücrelerin karanlık alan görüntüleme kontrastı arttırmak için kullanılmıştır. Manyeto-foto akustik görüntüleme, manyeto-plasmonik nanopartiküller kontrast ve sinyal-arka sıçan büyük gelişmeler sağlayacak - Daha yakın zamanlarda, benzer bir ilke bir yeni görüntüleme yönteminin geliştirilmesinde uygulanmıştırio 6,7. Ayrıca hibrid nanopartiküller eşzamanlı yakalama ve tam kan ve in vivo 8,9 dolaşan tümör hücrelerinin saptanması için kullanılabilir gösterilmiştir. Ayrıca, manyeto-plasmonik nanopartiküller kanser hücrelerinin 10 fototermal tedavi ile kombine moleküler spesifik optik ve MR görüntülemede kullanılabilir theranostic maddeleri umut vericidir. Çeşitli yaklaşımlar manyeto-plasmonik nanopartiküllerin sentezi için araştırılmıştır. Dambıl gibi çift fonksiyonlu Au-Fe 3 O 4 nanopartiküller 11 oluşturmak için altın nanopartiküller örneğin, Yu ve ark. Kullanılan ayrışma ve Fe (CO) oksidasyon için 5. Wang ve ark. Termal bozunma yöntemi 12 kullanılarak altın kaplı demir oksit nanopartikul sentezlediler. Diğer bazı yaklaşımlar ag birikimi, ardından manyetik çekirdek nanopartiküller üzerine kaplama polimeri ya da amin fonksiyonel moleküller güvenmekmelez oluşturmak için polimer yüzeyi üzerine eski kabuk parçacıkları 7,13. Buna ek olarak, demir oksit nanopartiküller, elektrostatik etkileşimler ve bir kimyasal reaksiyonun 14,15 ile altın nanoçubuklar bağlanmıştır. Bu yaklaşımlar, manyeto-plasmonik oluşturulan nano verim de, biyomedikal uygulamalar için çok tercih edilir ve bu da, yakın kızılötesi (NIR) pencerede optik abzorbans ya da güçlü bir manyetik an olarak manyetik-plasmonik kombinasyonunun bir ölçüde özellikleri tehlikeye düşürür. Örneğin, halter Au-Fe 3 O 4 nanopartiküller nedeniyle, bu tayf aralığında yüksek doku bulanıklığa in vivo kendi faydalarını sınırlandıran 520 nm &#39;de bir plazmon rezonans noktası vardır. Ayrıca, mevcut protokoller tarafından üretilen manyetik-plasmonik nanopartiküller ACH olabilir daha önemli ölçüde daha az olduğunu, sadece bir veya az sayıda 11 (10&#39;dan az) 14,15 süperparamanyetik kısımları (örneğin, demir oksit nanopartiküllerinin) ile sınırlıdıryoğun bir şekilde bir nano olarak hedeflenmektedir:. Örneğin, yoğun bir şekilde bir 60 nm çapında küresel nanopartikül bin 6 nm süperparamanyetik nanopartiküllerinin mertebesinde içerebilir. Dolayısıyla melez nanopartiküllerinin manyetik özellikleri geliştirmek için büyük bir yer vardır. Ayrıca, daha önce anlatılan bazı protokoller nispeten karmaşık ve sentez işlemleri sırasında tanecikler arasındaki 14,15 toplanmasını önlemek için dikkatli bir optimizasyon gerektirir. Burada, güçlü bir manyetik anda mevcut ve teknikte önemli sınırlamaları çözen güçlü NIR absorbans manyeto-plasmonik nanopartiküllerin sentezi için bir protokol açıklar. Sentez içinde yağ-su mikroemülsiyon yöntemi 16 kökeni vardır. Böylece, daha küçük birincil parçacıklar arzu edilen bir boyutta nanopartiküllerinin montaj dayanmaktadır. Bu yaklaşım, altın, demir oksit, ve yarı iletken PRI gibi tek bir malzemeden oluşturulan nano üretmek için kullanılmıştırMary 16 ihtiva etmektedir. Biz son küresel nano içine birincil hibrid parçacıkları montaj, sonra, 6 nm çapında altın kabuk / demir oksit parçacıkları çekirdekli yaparak, tarafından, ilk manyeto-plasmonik nanopartiküllerin sentezi için genişletilmiş ve. Nanoklastırlar sadece bu süperparamanyetik özelliklerini korurken yüksek bir manyetik anda gerçekleştirilmesi gibi kurucu nanopartiküllerinin özelliklerini iyileştirmek izin verir, aynı zamanda bu nedenle örneğin güçlü yeri gibi, kurucu nanopartiküllerden mevcut yeni özellikler, ayrı ayrı oluşturma nano-tanecikleri arasındaki etkileşimlerin yararlanır içine birincil parçacıklar Montaj NIR penceresinde optik absorbans. Bu protokol, manyetik ve plasmonik işlevleri bir yüksek yoğunluklu hibrid nano-tanecikleri elde edilir. Birincil parçacıklar sentezlendiği sonra, yöntem, esas olarak, basit bir tek-kaplı bir reaksiyondur. Genel plazmon rezonans gücü ve manyetik momenti birincil parçacıklar ve, Ther bir dizi belirlenirefore, kolay bir uygulamaya bağlı olarak optimize edilebilir. Ayrıca, moleküler özgü hedeflenmesini gerektiren çeşitli biyomedikal uygulamalar için hibrid antikor nanopartiküller olarak bağlanması için bir prosedür geliştirilmiştir. Antikorlar hedefleme için uygun antijen bağlanması için sorumlu olan Fab kısmındaki çıkış Fc parçası yoluyla bağlanır.

<table><tbody><tr><td>PYREX 50 ml kısa boyunlu ve 24/40 [ST] eklemli yuvarlak tabanlı kaynatma şişesi</td><td>Corning</td><td>4320A-50</td><td>Termal bozunma reaksiyonu</td></tr><tr><td>PYREX 41 x 300 mm 5 ampullü Allihn kondansatörü, 24/40 [ST] dış/iç eklemli</td><td>Corning</td><td>2480-300</td><td>Termal bozunma reaksiyonu</td></tr><tr><td>Silikon yağı</td><td>Fisher</td><td>S159-500</td><td>Yağ banyosu</td></tr><tr><td>Sıcak plaka karıştırıcı</td><td>Corning</td><td>PC-351</td><td>Karıştırma fonksiyonu ile reaktonu ısıtın</td></tr><tr><td>Termometre</td><td>ThermoWorks</td><td>221-092</td><td>Sıcaklığı ölçün</td></tr><tr><td>Demir (III) asetilasetonat</td><td>Fisher</td><td>AC11913-0250</td><td>Birincil hibrit nanopartikül sentezi için malzeme</td></tr><tr><td>Oleik asit% 99</td> <td>Fisher</td><td>A195-500</td><td>Birincil hibrit nanopartikül sentezi için malzeme</td></tr><tr><td>Altın (III) asetat</td><td>Fisher</td><td>AA3974206</td><td>Birincil hibrit nanopartikül sentezi için malzeme</td></tr><tr><td>Hekzan</td><td>Fisher</td><td>H292-1</td><td>Birincil hibrit nanopartikül sentezi için malzeme</td></tr><tr><td>Fenil eter% 99</td> <td>Fisher</td><td>AC13060-0025</td><td>Birincil hibrit nanopartikül sentezi için malzeme</td></tr><tr><td>1,2-Hekzadekanediol% 90</td> <td>Sigma</td><td>213748-50G</td><td>Birincil hibrit nanopartikül sentezi</td></tr> <tr><td>için malzemeOlelamin% 70</td> <td>Sigma</td><td>O7805-100G</td><td>Birincil hibrit nanopartikül sentezi için malzeme</td></tr><tr><td>Sodyum dodesil sülfat</td><td>Fisher</td><td>BP166-100</td><td>Küme sentezi</td></tr><tr><td>Sodyum sitrat dihidrat</td><td>Sigma</td><td>W302600</td><td>Küme sentezi</td></tr><tr><td>Monoklonal anti-EGF reseptör antikoru</td><td>Sigma</td><td>E2156</td><td>Hücre etiketleme özgüllük testi</td></tr><tr><td>Monoklonal anti-HER2 antikor</td><td>Sigma</td><td>AMAB90627</td><td>Hücre etiketleme özgüllük testi</td></tr><tr><td>Sodyum periodat</td><td>Sigma</td><td>311448</td><td>Antikorların Fc bölgesini</td></tr><tr><td>okside etmek Ditiolataromatik PEG6-CONHNH2</td><td>SensoPath Teknolojileri</td><td>SPT-0014B</td><td>Nanokümelere antikor konjugasyonu için heterofonksiyonel bağlayıcı</td></tr><tr><td>Metoksi-PEG-tiyol, 5 k</td><td>Yaratıcı PEGworks</td><td>PLS-604</td><td>Antikor konjugasyonundan sonra kalan altın yüzeyi pasifleştirin</td></tr><tr><td>Ultracel-10 membranlı Amicon Ultra-4 santrifüj filtre ünitesi</td><td>Millipore</td><td>UFC801008</td><td>Protein saflaştırması</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma</td><td>H3375</td><td>Tampon</td></tr><tr><td>PBS, 1x çözelti</td><td>Fisher</td><td>BP2438-20</td><td>Tampon</td></tr><tr><td>UV-Vis spektroskopisi</td><td>BioTek&nbsp;</td><td>Sinerji HT</td><td>Spektrum</td></tr><tr><td>Santrifüjü</td><td>Elde Edin Eppendorf</td><td>5810R</td><td>Ayırma</td></tr><tr><td>İletim Elektron Mikroskobu</td><td>FEI</td><td>TECNAI G2 F20 X-TWIN</td><td>Nanoyapıların morfolojisini elde</td></tr><tr><td>edin Dik mikroskop</td><td>Leica</td><td>DM6000</td><td>Karanlık alan görüntüleri elde</td></tr> edin <tr><td>Sonicator</td><td>Branson</td><td>1510</td><td>Sonication</td></tr><tr><td>Karbon film 300 mesh ızgara</td><td></td><td>EMS CF300-Cu</td><td>TEM görüntüleme</td></tr><tr><td>96 kuyulu plaka</td><td>Corning</td><td>09-761-145</td><td>UV-Vis okuma plakası</td></tr></tbody></table>

immunotargeted sentezi magneto-plasmonik nanoklastırlar

Synthesis of Immunotargeted Magneto-plasmonic Nanoclusters

Tek bir nanopartikül kombine manyetik özellikleri ve plasmonik kontrast yeni manyetomotif Görüntüleme yöntemleri iyileştirme, eşzamanlı yakalama ve (kapalı zaman eğrilerinin) dolaşan tümör hücrelerinin saptanması, ve bir foto termal tedavi ile birlikte çok modlu, moleküler görüntüleme de dahil olmak üzere biyomedikal uygulamalarda bir dizi avantaj sağlayan bir sinerji sağlar Kanser hücrelerinin. Bu uygulamalar yakın kızılötesi (NIR) bölgesinde optik absorbans ve güçlü bir manyetik moment ile manyeto-plasmonik nanopartiküllerin sentezi için protokollerin gelişmesinde önemli ilgi canlandırmıştır. Burada, bir yağ-içinde-su mikroemülsiyonu metoduna dayanır Bu tür melez nanopartiküllerin sentezi için yeni bir protokol mevcut. Bu tarifnamede tarif edilen protokol benzersiz özelliği de manyeto-plasmonik özelliklere sahip olan birincil blokları çeşitli boyutlarda manyeto plasmonik nanopartiküllerin sentezi. Bu yaklaşım, yüksek den olan nanopartiküller verireşit nanopartikül hacmi boyunca dağıtıldığı ve manyetik plasmonik işlevselliklerinin lu. Hibrid nanopartiküller kolayca hedefleme için uygun antijen bağlanması için sorumlu olan Fab kısmındaki çıkış Fc kısmı ile antikor bağlanması ile işlevselleştirilebilir.

Immunotargeted manyeto-plasmonik nanoklastırlaar sentezi için bir şema Şekil 2'de gösterilmiştir. İlk olarak, manyetik Fe 3 O 4 demir oksit nanopartiküller ısı ayrıştırma yöntemi yoluyla sentezlendiği. Daha sonra, ince yaklaşık 1 mil altın kabuk termal dekompozisyonu aracılığıyla demir oksit çekirdek partikülleri üzerine çökeltilir. Tohumlar bir yağ-içinde-su mikroemülsiyonu yaklaşımı kullanılarak manyeto-plasmonik nanoyığınlar oluşturmak için birincil yaklaşık 6 ...

Burada, biz güçlü bir manyetik an ve güçlü yakın kızılötesi (NIR) absorbanslı manyeto-plasmonik nanopartiküllerin sentezi için bir protokol açıklar. Protokol moleküler özgü hedeflenmesini gerektiren çeşitli biyomedikal uygulamalar için Fc kısmının yoluyla nanopartiküllere antikor konjugasyonu içerir.

Immunotargeted sentezi Magneto-plasmonik nanoklastırlar

Magnetic and plasmonic properties combined in a single nanoparticle provide a synergy that is advantageous in a number of biomedical applications ...

Bu prosedürün genel amacı, güçlü bir manyetik moment ve güçlü bir yakın kızılötesi absorbans ile immün hedefli manyeto plazmonik nano kümeleri sentezlemektir. Bu, önce demir oksit çekirdek nanopartiküllerinin sentezlenmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım, demir oksit çekirdek nanopartikülleri üzerine altın bir kabuk bırakmaktır.Daha sonra, nano kümeler bir yağ ve su mikroemülsiyonu yaklaşımı ile oluşturulur. Son adım, monoklonal antikorları nano kümelere konjuge etmektir. Sonuç olarak, karanlık alan görüntüleme, immüno-hedefli manyeto plazmonik Nano kümelerin moleküler özgüllüğünü göstermek için kullanılır, yaklaşım, süper paramanyetik özelliklerden ödün vermeden güçlü manyetik moment ile basit bir sentez nanopartiküllerinin kombinasyonunu sağlar ve önceki yöntemlerin tüm önemli sınırlamalarını ele alan güçlü, görünür diz kızılötesi emicileri sağlar ve prosedür Grady öğrencisi tarafından gösterilecektir, Laboratuvarımda prosedürü geliştiren Frank W. Nanopartiküllerin ilk olarak LabWare'i bir davlumbazda kurmasını sağlamak için, yuvarlak tabanlı bir şişeyi bir kondansatöre bağlayın ve sıcak bir plaka üzerindeki silikon yağ banyosuna daldırın.Banyoyu koruyucu giysiler giyerek yüz 60

synthesis-of-immunotargeted-magneto-plasmonic-nanoclusters

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Plasmonic cımbız ve fotonik kristal nanoyapıların optik yakalama mikro ve nano-parçacıklar verimlilik ve yönlendirme kontrolü yararlı geliştirmeler üretmek için gösterilmiştir.

Gelişmiş mikro ve Nanopartikül Manipülasyon Plasmonic ve Fotonik Kristal Nanoyapıların Kullanımı

Hedeflenen hücre iletimi, çeşitli biyomedikal uygulamalarda yararlıdır.  Bu protokolün amacı, hücreleri etiketlemek için süperparamanyetik demir oksit nanopartikülleri (SPION) kullanmak ve böylece hücre iletimi ve lokalizasyonu üzerinde yüksek derecede kontrol için manyetik hücre hedefleme yaklaşımlarını mümkün kılmaktır.

Hücre Etiketleme ve Süperparamanyetik Demir Oksit Nanopartiküller ile Hedefleme

CdS veya ZnS'nin yarı iletken kabukları ile kaplanmış tek tip altın nanoparçacıkların sentezi gerçekleştirilir. Yarı iletken kaplama, önce bir gümüş sülfür kabuğunun biriktirilmesi ve gümüş katyonlarının çinko veya kadmiyum katyonları ile değiştirilmesiyle gerçekleştirilir.

Sentezi, Karakterizasyonu ve Hibrid Au / CdS ve Au / ZnS Çekirdek / Shell Nanopartiküller işlevselleştirilmesi

Islak kimyasal yaklaşımla üretilen çok işlevli Fe2O3-Au nanopartiküllerinin sentezini ve özelliklerini tanımlıyoruz ve lazer ışınlaması kullanarak fototermal özelliklerini araştırıyoruz. Kompozit Fe2O3-Au nanopartikülleri, mükemmel manyetik ve plazmonik özelliklere sahip çok işlevli bir yapı oluşturarak her iki malzemenin özelliklerini korur.

Çok fonksiyonlu Hibrid Fe<sub&gt; 2</sub&gt; O<sub&gt; 3</sub&gt; Verimli plasmonik Isıtma -Au Nanoparçacıklar

Gümüş nanocubes ve alt 10 nm boşlukları ile plasmonik nano yama antenlerin imalat kolloidal sentezi için bir protokol sunulmuştur.

Plazmonik ve Nanofotonik for Applications Nanopatch Antenlerin Kolloidal Sentezi

Biz optik mikro-parçacıklar nanoplasmonic optik kafes tuzak açıklayınız.

Nanoplasmonic optik kafes içinde mikro parçacıkların bindirme

Biz kolloidal tekniğinde teknikleri kullanarak periyodik altın nanocup dizilerin imalatı göstermek ve nanoplasmonic Filmler önemini tartışıyorlar.

Kolloidal litografi kullanarak periyodik altın Nanocup dizilerin imalatı

Antijen spesifik T hücreleri ayırdetmek veya tedaviler nedeniyle onların son derece düşük frekanslı kullanmak zordur. Burada, bu hücreler zenginleştirmek için antijen spesifik T hücrelere bağlayabilirsiniz bir manyetik parçacık geliştirmek için bir protokol sağlar ve daha sonra bunları birkaç genişletmek için hundred-fold karakterizasyonu ve tedavisi için.

Zenginleştirmek ve nadir antijen spesifik T hücreleri Manyetik Nano tanecikleri ile genişletin

İşlevselleştirilebilir, yakın kızılötesi yayan fotolüminesan altın nanokümelerin hazırlanması ve bunların hela hücrelerinin içinde akış sitometrisi ve konfokal lazer tarama mikroskopisi ile doğrudan saptanması için güvenilir ve kolay tekrarlanabilir bir yöntem tanımlanmıştır.

Biyolojik Uygulamalar için Yakın Kızılötesi Yayan Altın Nanokümelerin Sentezi

Burada sunulan, manyetik hipertermi ve fototermal kombinasyon kanser tedavisi için bir nanoterapötik platformda kendi kendine montaj, sinerjik manyetik, akustik ve optik yanıt verme yoluyla demir oksit nanopartikül kabuklu mikrobubbles (NSM) imalatı için bir protokoldür.

Manyetik Hipertermi ve Pothototermal Kombinasyon Kanser Tedavisi için Manyetik, Akustik ve Optik-Üçlü Duyarlı Mikrobubbles

Bu çalışmada, manyetik nanomalzemeleri spesifik hücre hedeflemesi için antikorlarla biyofonksiyonelleştirmek için bir protokol sunuyoruz. Örnek olarak, kanser hücrelerini hedeflemek için demir nanoteller kullanıyoruz.

Manyetik Nanomalzemelerin Biyofonksiyonelleştirilmesi

Öğrenin, immuno-targeted magneto-plasmonik nanoklastırların sentez protokolünü; demir oksit çekirdek, altın kabuk ve monoklonal antikor konjugasyonu ile güçlü manyetik moment ve yakın kızılötesi absorbans elde edin.

Immunotargeted sentezi Magneto-plasmonik nanoklastırlar

Daha fazla video keşfet