Name: Deneysel Servikal Spinal Kord Yaralanmalarında Sinir Öncü Hücreler ve Öz-montaj Peptitler sinerjik Kullanımı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-02-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 57 s
Description: Öğrenin servikal omurilik yaralanmasında öz-montaj peptitler ve sinir öncü hücrelerin birleşik tedavisini. Bu yöntem sıçan modelinde rejenerasyonu ve fonksiyonel iyileşmeyi artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz Sağlık Araştırması (CIHR) Kanada Enstitüleri bu iş için finansman desteği kabul etmek istiyorum, katkı için Krembil Aile Vakfı, Nöral Onarım Halbert Başkanı ve Yenilenme, Phillip ve Peggy DeZwirek ve Gordon Yao Şekil 2&#39;ye . Klaus Zweckberger &quot;Deutsche Forschungsgesellschaft&quot; (DFG) bir hibe ile finanse edildi.

NOT: Aşağıdaki deneysel protokol Üniversitesi Sağlık Ağı (Toronto, Kanada) hayvan bakımı komitesi tarafından onaylanmış ve bakım ve hayvan bakım Kanadalı konseyi tarafından hazırlanan deney hayvanlarının kullanımı kılavuzda oluşturulan politikalar doğrultusunda dir . 1. Servikal Anevrizma Klip Kontüzyon / Sıkıştırma Modeli <ol><li> Cerrahi otoklav cihazları ve% 70 alkol banyosunda aletleri koyarak tüm surgcial prosedür sırasında steril koşullar tutun önce. </li><li> (1: 1) bir oksijen kombinasyonu (O 2), azot oksit (N2 O), Wistar sıçanları (250-270 g), uyuşturan ve 1.8-2.2% İzofluran ve bir gaz anestezi ekranı üzerinden spontan solunum desteği. Anestezinin indüksiyonu için 1 dakika için,% 5 İzofluran ile başlar ve daha sonra azaltır. Bir acı uyaran (örneğin. Pençeleri at) vererek cerrahi, anestezi derinliği kontrolü başlamadan önce. Yağlı merhemler Uygulagözlerde kuruluk önlemek için ve sonraki enfeksiyonları önlemek için. </li><li> Bir ısıtma yastık (37 ° C) üzerine sıçan koyun ve bir stereotaktik çerçevenin içine kafasını düzeltin. </li><li> Servikal omurga etrafında cerrahi bölgeyi Tıraş ve povidon iyot ve% 70 alkol ile dezenfekte edin. </li><li> Torasik vertebra gövde 2 (T2) belirgin processus ulaşan servikal vertebra (C2) den omurga üzerinde bir orta hat kesi yapmak. </li><li> Doğrudan orta hat üzerinde vertebra kasların dış tabakası kesti bir kranyokaudal yönde (kanamayı önlemek için) ve daha ileri processus spinosus ve laminalar ulaşana kadar dobra dobra derin kas katmanları incelemek. Ekartörleri yerleştirin. </li><li> Laminektomi için hedeflenen seviyelere gözlemlemek için vertebra gövdesi T2 belirgin prosesus spinosus yönlendirmek. Kimlik ve seçilen lamina mikro-cerrahi hazırlıktan sonra, laminalar ve processus spinosus gevşetmek için ligamenti flavae kesti. Son olarak, Comuriliğe bir kemik kesme yanal ile lamina ile ut ve omurilik kendisi herhangi bir sıkıştırma kaçınarak, yavaşça o çıkarın. NOT: En yaygın seviyeleri C5 / 6, C6 / 7 veya C7 / T1 vardır. perioperatif mortalite oranı yaralanma seviyesi rostral daha artar. Paravertebral venöz sinüs kanama yaygındır ve sünger ile dikkatli sıkıştırma ile ele alınabilir. </li><li> Kablosunu travmatize klibi takmadan önce, (özellikle seviye C5 / 6) kırpma onları yedek sinir köklerini ortaya çıkan tespit. </li><li> Pürüzsüz klip indüksiyon sağlamak amacıyla, bir kanca ile vertebralarda dorsal tarafına ventral dura gevşetin ve klip için bir koridor hazırlamak. </li><li> Son olarak, açık klibi eklemek ve bir kafa travması ulaşmak için kapattı (hızlı kapatma) ek verelim. Klip kapanma gücü ve klip kapatma süresi travmanın şiddetini ve sıkıştırma derecesini belirler. Yaygın olarak kullanılan 15-35 g ve clippi arasında klip kuvvetleri vardırörneğin 1 dakika ng süresi. (Şekil 1). </li><li> Klibin uzaklaştırılmasından sonra, 2 kat kasları adapte yarayı kapatmak. </li><li> Anestezi durdurun ve sternum yatma için yeterli bilince kavuşur kadar sürekli gözlem altında hayvan uyandırma izin. Son olarak, bir tek kafese koymak sıçan ve post-operatif tedavi yönergeleri izleyin. </li><li> Hayvanlar yaralanma bu tip şiddeti ile mücadele olduğundan, ameliyat sonrası tedavilere özel dikkat gerekir: <ol><li> (3 gün ve 5 gün, sırasıyla ve klinik semptomlara göre için Buprenorphine ve meloksikamın) ağrı kesiciler yönetme. </li><li> 3 gün için ek tuz çözeltisi deri altına vermek (günde 2 kez 5-10 mililitre (mi)). </li><li> 2 gün önce içme suyu antibiyotik sağlayın ve 7 gün sonrası ameliyat kadar (örn moksifloksasin) </li><li> Mesane fonksiyon kurtarma sabit oluncaya kadar Mesaneyi günde 2-3 kez sıkınly belirgin. </li><li> Bir günde en az bir kez nörolojik açıkları ve işletilen hayvanların fizyolojik durumunu gözlemlemek. </li></ol></li></ol> 2. (14 gün yaralanma sonrası) SAP&#39;larını ve NPC enjekte <ol><li> 1.1 açıklandığı gibi anestezi neden olur. 1.3, bir stereotaktik çerçeve içinde sıçan başını düzeltmek dikiş veya yara klipleri kaldırmak ve yara ve povidon iyot ve% 70 alkol ile cerrahi alan dezenfekte edin. </li><li> Dikkatle, Ekartörleri eklemek, paravertebral kaslar teşrih dura gelen mikroskobik skar dokusu kaldırmak ve lezyon sitesini yeniden maruz. </li><li> % 1 bir konsantrasyonda SAP&#39;larını hazırlanması (a / h) bir hücre dışı matris jel yapmak. QL6 SAP&#39;ler fizyolojik olarak uyumlu bir pH değerine sahip ve enjeksiyondan önce tamponlanmalıdır gerek yoktur. Omurilikte SAP&#39;lerin görselleştirme için, QL6 (QL6-FITC) bir floresan türevini kullanın. </li><li> 2 porsiyon, her dağıtılan lezyonun merkezine içine SAP (5 mikrolitre (ul) enjekteOrta hat 2.5 ul ikili. Bir mikro cam kapiller (100 mikrometre (mikron) dış çapı (OD)) ile stereotaktik çerçeve bağlı bir Hamilton şırınga kullanın. Keskin bir iğne ucu ile dikkatlice dura açın ve travmatize omuriliğe cam kılcal stereotaktik 2 milimetre (mm) takın. </li><li> Hacim 1/3 enjekte ettikten sonra, 1,5 mm derinliğe kadar iğne kaldırmak ve sonra daha 1/3 1 mm. Tüm hacminin enjekte edildikten sonra ve şırınga uzaklaştırılmasından önce, jel oluşumu stabilize etmek için 5 dakika bekleyin. </li><li> NPC oluşturmak için, yetişkin farelerin DsRed (ya da, yeşil YFP pozitif fareler) kullanın ve izole ve paraventrical bölge 4,18,21 onları yetiştirmek. </li><li> Hücre süspansiyonu 90% canlı hücrelerin ~ varlığını gösteren Tripan Mavi boyama ile NPC canlılığını değerlendirmek. Büyüme ortamı (50 x 103 canlı hücre / ul) hücreleri seyreltin ve daha sonra hücre nakli için bunları kullanın. </li><li> Dört 2 ul olun (8 ul toplam volume, 2 mm rostral ve yaralanma yerinde kaudal de bilateral 4 x 10 5 NPC) İntraspinal enjeksiyonları içeren. Dura açılışından sonra, Hamilton mikro cam kapiller omurilik dorsal yüzeyinin altında 1.5 mm eklemek ve hücre süspansiyonu 2 ul enjekte. Yaklaşık 0.5 ul / dk (dk) bir enjeksiyon hızı seçin. </li><li> Her bir enjeksiyonun ve kordon üzerinden kılcal uzaklaştırılmasından önce sonunda, yeni hücre hacmine uygun olarak uzanan en az 1 dakika sağlayan doku bekleyin. (Şekil 2) </li></ol> Subdural 3. implantasyonu Büyüme Faktörü Uygulama için pompalar <ol><li> Hücre yaşamını destekleyen bir büyüme faktörü olan beyin omurilik sıvısı (CSF) zenginleştirmek için, 0.5 ul / saat arasında bir seyreltme oranı, 0.04 kateter çapa sahip olan, 7-14 gün boyunca, alt-durally büyüme faktörleri seyreltilmesi mikro-ozmotik pompalar kullanımı cm OD, 100 ul bir hazne hacmi. </li><li> Tercih büyüme faktörleri seçin(Örneğin, beyin türevi büyüme faktörü (BDGF), epidermal büyüme faktörü (EGF), fibroblast büyüme faktörü (FGF)), pompa 6-10 saat önce implantasyonu dolgu ve 37 ° C sıcaklıkta bir su banyosu içinde pompalar dengeye getirin. </li><li> Hemen NPC enjeksiyondan sonra, pompayı yerleştirmek için bir deri altı girinti hazırlamak. Tercih yerleri pompa kendisinin neden büyük yerel rahatsızlık kaçınarak torakoskopik karın bölgesi lateral kenarlar vardır. </li><li> Büyüme faktörlerinin en yüksek konsantrasyonu elde etmek için, kateterin açık ucu lezyon yerinde yakın biter emin olun. Bu nedenle, komşu üst veya alt düzey bir konteyner-laminektomi gerçekleştirmek. SCI C7 / T1 ise, örneğin, C5 küçük bir laminektomi gerçekleştirmek. </li><li> , Deri altı oyuk içine pompayı koymak gerekli uzunlukta kateter kısaltmak, ve herhangi bir hareket-ilişkili çıkık kaçınarak paravertebral kaslar birkaç dikişlerle (6.0) ile sabitleyin. </li><li> Sivri uçlu (C5, örneğin) dura açtıktan sonraBir iğne, subdural uzaya kateter tanıtmak ve herhangi bir direnişle karşılaşmadan ve kablosunu zarar vermeden bir kuyruk yönde kayma sağlar. Örneğin C6 Atlanan lamina kateter tespit ve istikrar gibi ek noktasını vermektedir. </li><li> Kateter sorunsuz çalışır ve pas olmadığından emin olun. </li><li> Dikişler ya da klips ile yakın bir tabaka ile kas ve deri. (Şekil 3) </li><li> Anestezi durdurun ve sternum yatma için yeterli bilince kavuşur kadar sürekli gözlem altında hayvan uyandırma izin. Son olarak, bir tek kafese onları geri koydu ve post-operatif tedavi yönergeleri izleyin. </li><li> Olsa bile, hayvanlar bu zaman noktasında kısmen kurtarıldı olabilir, özel ameliyat sonrası tedavi sağlayın: <ol><li> (3 gün ve 5 gün, sırasıyla ve klinik semptomlara göre için Buprenorthine ve meloksikamın) ağrı kesiciler yönetme. </li><li> 2 gün önce kadar su şişeleri antibiyotik sağlayın7 gün ameliyat sonrası (örn moksifloksasin). </li><li> Gerekli eğer hala, mesane sıkma devam edin. </li><li> Sıçanlar susuz görünürse, ek deri altı sıvıları verin. </li><li> Bir günde en az bir kez çalıştırılan hayvanların nörolojik fonksiyonu ve fizyolojik durumunu gözlemleyerek tutun. </li><li> 2 gün önce NPC enjeksiyon immünosupresyon tedavisi yönetme ve 7 gün sonrası transplanation (minosiklin) ve kurban kadar (Sandimmune) kadar sırasıyla. </li></ol></li></ol> 4. Doku Değerlendirmesi <ol><li> Gözlem süresi sonunda (örn., Omurilik yaralanması sonrasında 4 hafta) derin anestezi (% 5 İzofluran 2-3 dakika için) olarak hayvanların kurban ve 4, soğuk ve 150 ml, 50 ml soğuk (4 ° C), tuzlu su ile transkardiyal bunları serpmek 0.1 M fosfat tamponlu salin (PBS) içinde% paraformaldehid. </li><li> Omurilik çıkarın ve 24 saat süre ile, 0.1 M fosfat tamponlu salin (PBS) içinde% 4 paraformaldehid içinde koydu. </li><li&gt; 48 saat boyunca donmaya karşı koruma sağlamak için,% 25 sükroz solüsyonunda omurilik koyun. </li><li> &lt;30 um bir kalınlığa sahip uzunlamasına cryosections sağlar. </li><li> Bir arka plan kullanım DAPI (: 1,000 1) sağlayan tüm hücre çekirdekleri immünohistokimyasal boyama için. DsRed pozitif NPC kırmızı görünür, QL-6 FITC yeşil görünür, hem de böylece özel lekeli olması gerekmez. (Şekil 4). </li><li> Tarama elektron mikroskopi (SEM) için örnekler, 2 saat süre ile 4 ° C &#39;de, glutaraldehid emmek 5 dakika boyunca etanol,% 10 artış adımda yavaş yavaş bunları kurutmak ve 1 saat boyunca basınçlı bir sıvı CO2 sifon koyun sağlar. Bir püskürtmeli kaplayıcı kullanılarak altın ile kaplayın iskelelerinin. Hitachi S-3400N taramalı elektron mikroskobu görüntüleri çekin. (Şekil 5) </li></ol>

<ol><li>Sekhon, L. H., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology%2C+demographics%2C+and+pathophysiology+of+acute+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Spine+%28Phila+Pa+1976%29%22%5BJournal%5D)">Epidemiology, demographics, and pathophysiology of acute spinal cord injury.</a> Spine (Phila Pa 1976). 26, S2-S12 (2001).</li>
<li>Fehlings, M. G., Tator, C. H., Linden, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationships+among+the+severity+of+spinal+cord+injury%2C+motor+and+somatosensory+evoked+potentials+and+spinal+cord+blood+flow%29%5BTitle%5D)+AND+%22Electroencephalogr+Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">The relationships among the severity of spinal cord injury, motor and somatosensory evoked potentials and spinal cord blood flow).</a> Electroencephalogr Clin Neurophysiol. 74, 241-259 (1989).</li>
<li>Thuret, S., Moon, L. D., Gage, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+interventions+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Therapeutic interventions after spinal cord injury.</a> Nat Rev Neurosci. 7, 628-643 (2006).</li>
<li>Iwasaki, M., Wilcox, J. T., Nishimura, Y., Zweckberger, K., Suzuki, H., Wang, J., Liu, Y., Karadimas, S. K., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+effects+of+self-assembling+peptide+and+neural+stem%2Fprogenitor+cells+to+promote+tissue+repair+and+forelimb+functional+recovery+in+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Synergistic effects of self-assembling peptide and neural stem/progenitor cells to promote tissue repair and forelimb functional recovery in cervical spinal cord injury.</a> Biomaterials. 35, 2617-2629 (2014).</li>
<li>Holmes, T. C., de Lacalle, S., Su, X., Liu, G., Rich, A., Zhang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extensive+neurite+outgrowth+and+active+synapse+formation+on+self-assembling+peptide+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Extensive neurite outgrowth and active synapse formation on self-assembling peptide scaffolds.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97, 6728-6733 (2000).</li>
<li>Dong, H., Paramonov, S. E., Aulisa, L., Bakota, E. L., Hartgerink, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-assembly+of+multidomain+peptides%3A+balancing+molecular+frustration+controls+conformation+and+nanostructure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Chem+Soc%22%5BJournal%5D)">Self-assembly of multidomain peptides: balancing molecular frustration controls conformation and nanostructure.</a> J Am Chem Soc. 129, 12468-12472 (2007).</li>
<li>Rivlin, A. S., Tator, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+duration+of+acute+spinal+cord+compression+in+a+new+acute+cord+injury+model+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Neurol%22%5BJournal%5D)">Effect of duration of acute spinal cord compression in a new acute cord injury model in the rat.</a> Surg Neurol. 10, 38-43 (1978).</li>
<li>Poon, P. C., Gupta, D., Shoichet, M. S., Tator, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clip+compression+model+is+useful+for+thoracic+spinal+cord+injuries%3A+histologic+and+functional+correlates%5BTitle%5D)+AND+%22Spine+%28Phila+Pa+1976%29%22%5BJournal%5D)">Clip compression model is useful for thoracic spinal cord injuries: histologic and functional correlates.</a> Spine (Phila Pa 1976). 32, 2853-2859 (2007).</li>
<li>Fehlings, M. G., Tator, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationships+among+the+severity+of+spinal+cord+injury%2C+residual+neurological+function%2C+axon+counts%2C+and+counts+of+retrogradely+labeled+neurons+after+experimental+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">The relationships among the severity of spinal cord injury, residual neurological function, axon counts, and counts of retrogradely labeled neurons after experimental spinal cord injury.</a> Exp Neurol. 132, 220-228 (1995).</li>
<li>Joshi, M., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+a+novel%2C+graded+model+of+clip+compressive+spinal+cord+injury+in+the+mouse%3A+Part+2.+Quantitative+neuroanatomical+assessment+and+analysis+of+the+relationships+between+axonal+tracts%2C+residual+tissue%2C+and+locomotor+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of a novel, graded model of clip compressive spinal cord injury in the mouse: Part 2. Quantitative neuroanatomical assessment and analysis of the relationships between axonal tracts, residual tissue, and locomotor recovery.</a> J Neurotrauma. 19, 191-203 (2002).</li>
<li>Joshi, M., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+a+novel%2C+graded+model+of+clip+compressive+spinal+cord+injury+in+the+mouse%3A+Part+1.+Clip+design%2C+behavioral+outcomes%2C+and+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of a novel, graded model of clip compressive spinal cord injury in the mouse: Part 1. Clip design, behavioral outcomes, and histopathology.</a> J Neurotrauma. 19, 175-190 (2002).</li>
<li>Cigognini, D., Satta, A., Colleoni, B., Silva, D., Donegà, M., Antonini, S., Gelain, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+early+and+late+effects+into+the+acute+spinal+cord+injury+of+an+injectable+functionalized+self-assembling+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Evaluation of early and late effects into the acute spinal cord injury of an injectable functionalized self-assembling scaffolds.</a> PLoS One. 6 (5), e19782(2011).</li>
<li>Hou, T., Wu, T., Wang, L., Liu, Y., Li, M., Long, Z., Chen, H., Li, Y., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+prostheses+fabricated+with+motor+neurons+seeded+in+self-assembling+peptides+promotes+partial+functional+recovery+afters+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+eng+Part+A%22%5BJournal%5D)">Cellular prostheses fabricated with motor neurons seeded in self-assembling peptides promotes partial functional recovery afters spinal cord injury in rats.</a> Tissue eng Part A. 18 (9-10), (2012).</li>
<li>Gelain, F., Cigognini, D., Caprini, A., Silva, D., Colleoni, B., Donegà, M., Antonini, S., Cohen, B. E., Vescovi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+bioactive+motifs+and+their+use+in+functionalized+self-assembling+peptides+for+NPC+differentiation+and+neural+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">New bioactive motifs and their use in functionalized self-assembling peptides for NPC differentiation and neural tissue engineering.</a> Nanoscale. 4 (9), 2946-2957 (2012).</li>
<li>Liu, Y., Ye, H., Satkunendrarajah, K., Yao, G. S., Bayon, Y., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+self-assembling+peptide+reduces+glial+scarring%2C+attenuates+post-traumatic+inflammation+and+promotes+neurological+recovery+following+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">A self-assembling peptide reduces glial scarring, attenuates post-traumatic inflammation and promotes neurological recovery following spinal cord injury.</a> Acta Biomater. 9, 8075-8088 (2013).</li>
<li>Rosner, J., Avalos, P., Axosta, F., Liu, J., Drazin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+for+cell+therapy+combined+with+growth+factors+in+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">The potential for cell therapy combined with growth factors in spinal cord injury.</a> Stem Cell Int. , 826754(2012).</li>
<li>Lu, P., Wang, Y., Graham, L., McHale, K., Gao, M., Wu, D., Brock, J., Blesch, A., Rosenzweig, E. S., Havton, L. A., Zheng, B., Conner, J. M., Marsala, M., Tuszynsky, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+distance+growth+and+connectivity+of+neural+stem+cells+after+severe+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Long distance growth and connectivity of neural stem cells after severe spinal cord injury.</a> Cell. 150, 1265-1273 (2012).</li>
<li>Karimi-Abdolrezaee, S., Schut, D., Wang, J., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrioitinase+and+grwoth+factors+enhance+activation+and+oligodendrocyte+differentiation+of+endogenous+neural+precursor+cells+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Chondrioitinase and grwoth factors enhance activation and oligodendrocyte differentiation of endogenous neural precursor cells after spinal cord injury.</a> PLoS One. 7 (5), e37589(2012).</li>
<li>Awad, B. I., Carmody, M. A., Steinmetz, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+role+of+growth+factors+in+the+management+of+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Potential role of growth factors in the management of spinal cord injury.</a> World Neurosurg. (13), 1875-8750 (2013).</li>
<li>Kojima, A., Tator, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrathecal+administration+of+epidermal+growth+factor+and+fibroblast+growth+factor+2+promotes+ependymal+proliferation+and+functional+recovery+after+spinal+cord+injury+in+adult+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Intrathecal administration of epidermal growth factor and fibroblast growth factor 2 promotes ependymal proliferation and functional recovery after spinal cord injury in adult rats.</a> J Neurotrauma. 19 (2), 223-238 (2002).</li>
<li>Karimi-Abdolrezaee, S., Eftekharpour, E., Wang, J., Cindi, M. M., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+trasplantation+of+adult+neural+presursor+cells+promotes+remyelination+and+functional+neurological+recovery+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Delayed trasplantation of adult neural presursor cells promotes remyelination and functional neurological recovery after spinal cord injury.</a> J Neurosci. 26 (13), 3377-3389 (2006).</li>
<li>Burdick, J. A., Ward, M., Liang, E., Young, M. J., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulation+of+neurite+outgrowth+by+neurotrophins+delivered+from+degradable+hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Stimulation of neurite outgrowth by neurotrophins delivered from degradable hydrogels.</a> Biomaterials. 27, 452-459 (2006).</li>
</ol>

Covidien bu çalışma için QL6 SAP'yi sağladı.

Bu protokol sıçanlarda bir servikal yaralanma modeli gerçekleştirmek için okuyucu sağlamak ve servikal SKY sonrası daha iyi iyileşme teşvik SAP&#39;lerin ve NPC ile kombine tedavi yaklaşımı kullanmak için geliştirilmiştir. Özellikle böyle (hemi) -transection modeli veya kilo düşüşü ve sarsıntı modelleri, klip kontüzyonu / sıkıştırma modeli büyük patofizyolojik travma mekanizmaları hem temsil gibi diğer servikal travma modelleri, göre - ezilme ve basınç ve dolayısıyla taklit en iyi klinik koş...

Spinal kord yaralanmalarının% 50&#39;den fazlası servikal omurga ile ilişkilidir. Klinik olarak iki ana patofizyolojik mekanizma tanımlanmıştır ayarı: initial omurilik ezilme ve kemik kırıkları, kanamalar veya doku şişmesi nedeniyle sürekli sıkıştırma. anevrizma klibi kontüzyonu / sıkıştırma modeli taklit hem patofizyolojik mekanizmalar: klibi yakalamaya Bir ezilme üretir ve kırpma süresi, kemik kırıkları, kanamalar veya doku neden olduğu klinik ortamlarda sıkıştırma son önemli uzun şişme olduğunu yemeden, sıkıştırma bileşeni temsil eder. kullanılan anevrizma klibi kesin ve tekrarlanabilir kırpma kuvveti garanti altına alan bir halka yay ile değiştirilir. Özellikle yarı-kesisi veya kontüzyon modeli, bu anevrizma klibi modeli taklit iyi klinik ortamlarda göre. Toraks yaralanması olan hastalar servikal inj ile parapleji, hastaların çoğunda muzdarip ikenuries tetraplejik ve tamamen bağımlıdır. servikal kord anatomik yapısı, ancak, göğüs veya lomber kıyasla önemli farklılıklar gösterir ve bu nedenle, bu protokolde özellikle ele almaktadır. intramedüller boşlukların ve doku skar gelişimi kurtarma ve rejenerasyon için engellerdir. Bu engelleri iskele malzemesinin kullanımını aşmak için umut verici bir yaklaşımdır. Kendi toplanan peptidler lezyon üssü doğrudan enjekte edilebilir. Orada boşluğu köprüleme nano-lif iskeleleri içine monte ve inflamasyon ve doku korkutuyorsun azaltarak inhibitör ortamını iyileştirmek. Katı maddeler, implantasyon esnasında omurilik önemli hasara neden olsa da, akışkan peptidler ve güvenli bir ek ağır zarar vermeden enjekte edilebilir. Kök hücre nakli öncesinde kendinden montaj peptitler ile inhibitör çevrenin iyileştirilmesi, dolayısıyla, hücre destek integration, servikal spinal kord yaralanması sonrası farklılaşma ve nihayet, fonksiyonel iyileşme.

<table><tbody><tr><td>Anevrizma klipsi</td><td>SharpTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi mikroskop</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroenjeksiyon sistemi</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Küçük hayvan stereotaksik cihazı</td><td>David Kopf Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hamilton şırıngası</td><td>Hamilton company</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Subdural pompalar</td><td><a href="http://www.alzet.com" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Alzet osmotic micro pump 1007D</a></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi alet</td><td>Fine Science tools</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane USP</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>%0.9 Sodyum Klorür enjeksiyonu USP</td><td>Baxter</td><td></td><td></td></tr><tr><td>%7.5 Povidon iyot</td><td>Purdue Pharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>%70 İzopropil alkol USP</td><td>GreenField Ethanol Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>QL6 SAP</td><td>Covidien</td><td></td><td></td></tr><tr><td>%0.4 Trypan blue</td><td>Gibco</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Platelet-Türevli Büyüme Faktörü (PDGF)</td><td>Sigma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Epidermal Büyüme Faktörü (EGF)</td><td>Sigma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fibroblast Büyüme Faktörü (FGF)</td><td>Sigma</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

deneysel servikal spinal kord yaralanmalarında sinir Öncü hücreler ve Öz-montaj peptitler sinerjik kullanımı

Synergetic Use of Neural Precursor Cells and Self-assembling Peptides in Experimental Cervical Spinal Cord Injury

Omurilik yaralanmaları (SKY) hastalar ve aileleri için ciddi nörolojik bozukluk ve, psikolojik, ekonomik, ve sosyal sonuçlara neden. Klinik, SCI fazla% 50 servikal omurga 1 etkiler. Birincil yaralanma sonucu olarak, enflamasyon, apoptoz, ve demiyelinasyon dahil olmak üzere ikincil mekanizmaların bir kademeli sonunda intramedüler kavite 2,3 doku yara ve gelişmesine yol meydana gelir. Her iki hücre nakli, entegrasyon ve yenilenme fiziksel ve kimyasal engelleri temsil eder. Bu nedenle, inhibitör ortamı şekillendirme ve hücre transplantasyonu ve yenilenme için bir destekleyici ortam yaratmak için boşluklar köprü umut verici bir tedavi hedefi 4. Burada, bir anevrizma klibi ile servikal SKY bir ezilme / sıkıştırma modeli tarif edilmektedir. Tam transeksiyonu veya kordonun yırtılmalar nadirdir çünkü bu model, daha klinik açıdan diğer deneysel modellere daha. Ayrıca compariso içindeÖzellikle hasar Sırt taraf sütunlar, omurilik çevresel sıkıştırma avantajlı görünen ağırlık damla modeli, n. Klip kapanma gücü ve süresi farklı yaralanma şiddetini elde etmek için ayarlanabilir. Bir halka yay hassas kalibrasyon ve klip kuvvet süreklilik kolaylaştırır. Fizyolojik koşullar altında, sentetik kendinden montaj peptitler (SAP) nanoliflerden halinde kendi kendine birleşebilen ve böylece, SCI 5 uygulama için hitap etmektedir. Onlar kord hasarı minimize lezyon içine doğrudan enjekte edilebilir. SAP intramedüller boşlukları köprü ve böylece, rejeneratif tedaviler için hasarlı kablosunu donatmak için iskele kurulması biyouyumlu yapılardır. K2 (QL) (QL6), diğer peptidler ile karşılaştırıldığında Dong et l. 6 tarafından tanıtılan yeni SAP olduğunu, QL6, 6 .14 gün SKY sonrası nötr pH β-tabakalar halinde 6K2 kendine araya akut evre, SAP&#39;lerin sonra lezyon ve nöral öncü hücreler (NPC) merkezine enjekte edilir Inje vardırbitişik sırt sütunlara cted. Hücre yaşamını desteklemek amacıyla, transplantasyon, 7 gün boyunca ozmotik mikro pompa, büyüme faktörlerinin sürekli subdural tatbikat ile bir araya getirilmektedir.

Yukarıda tarif edilen prosedür gerçekleştirirken,. SAP iskele boşluğu köprü ve önleyici bir ortamının iyileştirilmesi, daha az doku korkuturuz NPC sağkalımda bir artış sağlar elde Şekil 4 olacak elde edilen bir sıçan omurilik bir uzunlamasına kesitini göstermektedir yaralanma sitesi SKY sonrası 6 hafta ve QL6 SAP enjeksiyonu ve NPC transplantasyon sonrası 4 hafta. QL6 peptidler başarıyla merkez üssü toplu, kordon içine enjekte ve yarı gölge postero-kaudal dağınık edildi. Elektron mikroskobu Şeki...

Servikal omurilik yaralanmasını hem kendi kendine birleşen peptitler (SAP) hem de nöral öncü hücreler (NPC) ile tedavi etmek, büyüme faktörleri ile birlikte, rejenerasyon ve iyileşmeyi teşvik etmek için umut verici bir yaklaşımdır. Kontüzyon/kompresyon anevrizması klip sıçan servikal SKY modeli ve SAP enjeksiyonu ve NPC transplantasyonunu içeren kombine tedavi oluşturuldu.

Deneysel Servikal Spinal Kord Yaralanmalarında Sinir Öncü Hücreler ve Öz-montaj Peptitler sinerjik Kullanımı

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. ...

Bu prosedürün genel amacı, sıçanlarda servikal SCI'nin bir kontüzyon kompresyon klipsi modelini ve SAP enjeksiyonu ve NPC transplantasyonunu içeren kombine tedavi için bir protokol sunmaktır. İlk olarak, omuriliğin etrafına bir anevrizma klipsi yerleştirilir ve bir dakika boyunca yerinde tutulur. Bu, bilateral kontüzyon kompresyon yaralanması ile sonuçlanır.Daha sonra SAP'ler yaralanma merkez üssüne enjekte edilir, NPC'ler SAP enjeksiyonundan hemen sonra enjekte edilir. Büyüme faktörlerinin sürekli olarak verilmesi için subdural kateterli bir ozmotik pompa yerleştirilir. Bu prosedür, NPC'lerin yaralı omuriliğe verilmesiyle sonuçlanır.NPC'lerin sağkalımı ve aşılanması, SAP'ler ve büyüme faktörleri ile kombinatoryal tedavi ile desteklenir. Bu tekniğin etkileri, travmatik omurilik yaralanması için bir tedaviye kadar uzanır, çünkü omurilik rejenerasyonunu destekleyen hücre bazlı COMBINATOR tedavilerini incelemek için kullanılabilecek klinik olarak ilgili bir model sağlar. Aşağıdaki deneysel protokol, Toronto Kanada'daki Üniversite Sağlık Ağı'nın Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylanmıştır ve Kanada Hayvan Bakımı Konseyi tarafından hazırlanan deney hayvanlarının bakımı ve kullanımına ilişkin kılavuzda belirlenen politikalara uygundur.Tüm cerrahi prosedürler, steril ekipman ve solüsyonlar kullanılarak steril koşullar altında gerçekleştirilmelidir ve kurum ve hükümet yönergelerine göre, bu prosedürde işleme başlamadan önce 250 ila 270 gram ağırlığında bir sıçan kullanılır. İşlem günü hayvanlara iki gün boyunca içme suyunda antibiyotik verin. Sıçanı bir anestezi odasına yerleştirdikten ve bir dakika boyunca bire bir oksijen ve nitröz oksit içinde% 5 ISO flor ile anesteziyi indükledikten sonra, ISO florini% 1.8 ila% 2.2'ye düşürün Lambik merhemi gözlere uygulayın ve bir pençe tutamlama yaparak cerrahi anesteziyi onaylayın.Daha sonra fareyi ısıtılmış bir yastığın üzerine yerleştirin ve kafayı bir burun konisi ile stereotaksik bir çerçeveye sabitleyin. Servikal omurganın etrafındaki kürkü tıraş ettikten sonra, povidon iyot ile sürüntü alarak cildi dezenfekte edin, ardından C iki servikal omur bölgesinden T iki torasik vertebral gövdenin belirgin prosesisine orta hat kesisi yaptıktan sonra% 70 etanol uygulayın. Vertebra kaslarının dış tabakasını doğrudan orta hat üzerinde kranio coddle yönünde kesmek için cerrahi makas kullanın, proses, osis ve laminata ulaşılana kadar daha derin kas tabakalarını köreltmek için cerrahi makas kullanın.İletki yerleştirin ve tutun. Kas katmanlarını açın, ardından T iki omur gövdesinin belirgin prosesis pozisyonunu yönlendirin ve laminektomi için hedeflenen seviyeleri belirleyin. Daha sonra 15 numara neşter kullanarak ligament derisini keserek lamini ve processis posis'i gevşetin.Daha sonra, omuriliğe lateral laminusu kesmek için bir kemik makası kullanın ve omuriliği sıkıştırmadan laminusu nazikçe çıkarın. Şimdi, ortaya çıkan sinir köklerini kırpmaktan korumak için tanımlamak için bir dakikanızı ayırın. Daha sonra ventral durayı vertebral gövdelerin dorsal tarafından gevşetmek için bir kanca kullanın ve klips için bir koridor hazırlayın.Klipsin halka yayının istenen kuvveti sağlayacak şekilde ayarlandığından emin olun. Klips kuvveti, travma ve kompresyonun derecesini belirler. Açık klipsi omuriliğin etrafına yerleştirin ve kontüzyon yaralanmasına neden olmak için kapanmasına izin verin.15 ila 35 gram arasındaki klips kuvvetleri genellikle omurilik yaralanması gerçekleştirildikten sonra bir dakikalık bir kırpma süresi ile kullanılır. Klipsi çıkarın ve kasları iki kat halinde kapatın, ardından cildi kapatın. Yara düzgün bir şekilde kapatıldıktan sonra, anesteziyi durdurun ve fareyi uyanırken gözlemleyin.Hayvan sternal için yeterli bilinci yeniden kazandıktan sonra, yaslanmış olarak, fareyi temiz bir kafese yerleştirin. Bu tür yaralanmaların ciddiyeti nedeniyle, aşağıdaki ameliyat sonrası tedavilerin takip edilmesi zorunludur. İlk olarak, semptomlara bağlı olarak üç ila beş gün boyunca buprenorfin ve meloksikam gibi ağrı kesiciler uyguladığınızdan emin olun.Ayrıca deri altından dehidrasyonu önleyin. Üç gün boyunca günde iki kez beş ila 10 mililitre salin enjekte edin ve beş gün boyunca içme suyunda antibiyotik sağlamaya devam edin. Ameliyat sonrası. İdrar kesesini günde iki ila üç kez, hayvanlar iyileşmiş gibi göründükten sonra bile mesane fonksiyonunun tutarlı bir şekilde iyileşmesi görülene kadar sıkın.Ameliyat edilen hayvanları nörolojik eksiklikler ve fizyolojik durum açısından gözlemlediğinizden emin olun. Enjeksiyon, omurilik yaralanmasından 14 gün sonra yapılır. Ameliyata başlamadan önce, SAP'leri steril suda hacim başına% 1 ağırlıkta hazırlayın ve bir Hamilton şırıngasına bağlı 100 mikrometrelik bir cam kılcal doldurun.Çözelti ile Hamilton şırıngasını stereotaksik çerçeveye takın. Anestezi uygulandıktan sonra, sıçan kafayı stereotaksik çerçeveye yapıştırır ve ameliyat bölgesini povidon iyot ve% 70 alkol ile dezenfekte eder. Daha önce olduğu gibi, bir kez daha, cildi açtıktan sonra, vertebral kas çiftini dikkatlice inceleyin ve ekartörleri yerleştirin.Yara dokusunu duradan çıkarmak ve lezyon bölgesini yeniden ortaya çıkarmak için 15 numaralı bir neşter kullanın. Ardından durayı dikkatlice açmak için keskin bir iğnenin ucunu kullanın. Son olarak, stereotaktik olarak, cam kılcal damarı travmatize omuriliğe iki milimetre derinliğe yerleştirin ve SAP'leri enjekte edin.SAP'leri enjekte ettikten sonra, enjekte edilen çözeltiyi yerleştirmek için doku gerilmesine izin vermek için kılcal damarın çıkarılmadan önce bir dakika boyunca enjeksiyon bölgesinde kalmasına izin verin. Ardından enjeksiyonu bir sonraki bölgede tekrarlayın. Burada, NPC'ler, yetişkin bir DS kırmızı faresinin paraventriküler bölgesinden izole edildi ve daha önce yayınlanmış prosedürlere göre yetiştirildi.Mikro enjeksiyondan hemen önce, NPC'leri büyüme ortamında, hücre nakli için mikrolitre başına 50 kez 10 ila üçüncü canlı hücre konsantrasyonuna seyreltin ve bir Hamilton şırıngasındaki bir cam kılcal damara yükleyin. NPC'ler, SAP'lerin enjeksiyonundan hemen sonra enjekte edilir. Bunu yapmak için, Hamilton şırıngasının cam kılcal damarını yaralanma bölgesinin 0,2 milimetrelik bir rostraline ve omuriliğin sırt yüzeyinin 1,5 milimetre altına yerleştirin.Dakikada yaklaşık 0,5 mikrolitre oranında iki mikrolitre hücre süspansiyonu enjekte edin. İlk enjeksiyon tamamlandıktan sonra, kılcal damarın daha önce olduğu gibi bir dakika omurilikte kalmasına izin verin, ardından kılcal damarı geri çekin, bitişik bir bölgeye taşıyın ve enjeksiyon prosedürünü tekrarlayın. Bir dakika bekledikten sonra, daha önce olduğu gibi, kılcal damarı geri çekin ve iki milimetre boyunca yaralanma bölgesine doğru hareket ettirin.Bu konumda iki adet iki mikrolitrelik enjeksiyon yapın. Bu görüntü, omurilik yaralanmasına göre tüm enjeksiyon bölgelerini göstermektedir. Büyüme faktörü desteği için subdural mini ozmotik pompaların implantasyonu, NPC enjeksiyonlarından hemen sonra gerçekleştirilir.İlk önce bir implantasyon bölgesi seçin. Tercih edilen bölgeler, pompanın kendisinin neden olduğu rahatsızlığı önlemek için torakoabdominal bölgenin yan yanlarıdır. Bölgeyi dezenfekte ettikten sonra, daha önce olduğu gibi, pompa için deri altı bir girinti hazırlanır.Daha sonra, omurilik yaralanmasına bitişik üst veya alt omurların atlama laminektomisini gerçekleştirin. Burada, omurilik yaralanması C yedi T bir'de yapıldı ve bu nedenle laminektomi C beş'te yapıldı. Şimdi pompayı deri altı girintisine yerleştirin, ardından kateteri gerekli uzunlukta kesin ve son olarak omur kası çiftine sabitlemek için 6.0 dikiş kullanın.Herhangi bir hareketle ilişkili çıkıktan kaçınmak. Laminektominin altındaki durayı açmak için keskin bir iğnenin ucunu kullanın. Daha sonra kateteri subdural boşluğa yerleştirin ve direnç göstermeden ve kordonu yaralamadan bir coddle yönünde kaymasına izin verin.Şimdi, kateterin düzgün çalıştığını ve burada gösterildiği gibi herhangi bir bükülme veya kıvrım olmadığını kontrol edin. Daha sonra dikişler veya klipsler kullanarak kasları katman katman kapatın ve ardından cildi kapatın. Yara düzgün bir şekilde kapatıldıktan sonra, anesteziyi durdurun ve uyanırken hayvanı gözlemleyin.Hayvan sternal yaslanma için yeterli bilinci yeniden kazandıktan sonra, fareyi temiz bir kafese koyun. Hayvanın izlenmesi ve cerrahi sonrası analjezi dahil olmak üzere tüm ameliyat sonrası tedavi prosedürlerini uyguladığınızdan emin olun. İmmünsüpresyon tedavisini NPC enjeksiyonundan iki gün önce ve transplantasyondan yedi gün sonrasına kadar ve kurban edilene kadar uygulayın.Bu floresan mikroskobu görüntüsü, bir sıçanın travmatize edilmiş omuriliğinin uzunlamasına bir bölümünü göstermektedir. Boyama, QL altı ile etiketlenmiş DPI floresan SAP'lerdir. Fite yeşil görünür ve lezyonun merkez üssünde toplanmıştır.Enjekte edilen DS kırmızı pozitif NPC'ler, kırmızı floresan ile gösterilen rostral ve coddle yönlerinde yayılmıştır. Ölçek çubuğu beş milimetreyi temsil eder. Burada bir taramalı elektron mikroskobu görüntüsü, birleştirilmiş SAP'lerin nanofiber iskele oluşumunu göstermektedir.Ölçek çubuğu bir mikrometreyi temsil eder. Bu videoyu izledikten sonra, klip sıkıştırma, SCI ile ilgili cerrahi prosedürleri ve SAP'ler ve NPC'lerle kombine tedavinin umut verici yaklaşımının bu modelde nasıl incelenebileceğini iyi anlamalısınız.

synergetic-use-neural-precursor-cells-self-assembling-peptides

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Spinal kord travması sonucu beyin ile iletişimi bozar. Kayıp bağlantısı geri yüklemek için uzun mesafe büyümeyi teşvik etmek için inhibitör molekülleri kaldırmak için nörotrofik faktörler ve matris-modüle enzimler ile kombinasyon halinde rejenere lifler için altyapısını sağlamak üzere bir periferik sinir grefti kullanmaktadır.

Periferik Sinir Aşılama ve Matrix Modülasyon birleştiren Yaralı Rat Spinal Kord Onarım

Sinir habercisi nakli, korunması ve / veya spinal kord yaralanması (SCI) ve motor nöron bozukluğu, amiyotrofik lateraller skleroz (ALS) kaybettim / işlevsiz servikal frenik motor nöronların yerini gelecek vaat eden bir strateji. Biz, ALS ve SKY kemirgen modellerinde servikal omurilik ventral boynuz hücre teslimat için bir protokol sağlar.

Amyotrophic Lateral Sclerosis ve Travmatik Spinal Kord Yaralanması Servikal Ventral Horn Hedefleme intraspinal Hücre Transplantasyonu

Burada kendi kendine montaj 3-boyutlu iskele kültür insan nöral progenitör hücrelerin kullanımını tanımlamak. Biz flow sitometri ile analiz edilecek daha sonra örneğin iskeleleri hücreleri serbest bırakmak için bir protokol mevcut. Bu protokol detaylı mekanistik çalışmalar gerçekleştirmek için diğer hücre türlerine adapte olabilir.

3 boyutlu montaj Self-Peptid Hidrojel İnsan Sinir Progenitör Hücreler Yetiştiriciliği

Kaynak: Zweckberger, K., et al. Deneysel Servikal Omurilik Yaralanmasında Nöral Öncü Hücrelerin ve Kendi Kendine Birleşen Peptitlerin Sinerjik Kullanımı.  J. Vis. Uzm. (2015).Bu protokol, bir sıçan modelinde omurilik yaralanması onarımı için hedefe yönelik bir enjeksiyon yaklaşımını göstermektedir. Destekleyici bir iskele oluşturmak için lezyon çekirdeğine kendiliğinden birleşen peptitlerin (SAP'ler) verilmesini ve ardından dokuyu yeniden şekillendirmek için lezyonun etrafına nöral öncü hücre...

Bir sıçan modelinde omurilik onarımı için kendi kendine birleşen peptitlerin ve nöral öncü hücrelerin enjekte edilmesi

Büyüme faktörlerini içeren fibrin matrisi tam omurilik kesisi sitelerine aşılı nöral kök hücrelerini korumak için kullanılmıştır. Aşılı hücreler tamamen lezyon boşluğu doldurdu ve uzun mesafelerde konak omuriliğe aksonlarını uzatıldı nöronlar da dahil olmak üzere birden fazla nöral hücre tipleri, ayrışmıştır.

Şiddetli Spinal Kord Yaralanması sonra fibrin ve Büyüme Faktörü kokteyller ile Nöral Kök Hücre Survival ve Farklılaşma Tanıtım

Omurilik yaralanması ciddi morbidite ve mortalitesi yüksek bir neden travmatik bir durumdur. Bu çalışmada detaylı olarak nöral kök hücrelerin bir nakli ardından farelerde omurilik yaralanması bir kontüzyon modelini tarif.

Omurilik Yaralanması Deneysel Kontuzif Modelinde Sinir Kök Hücre Nakli

Ciddi omurilik yaralanmaları sıklıkla doku defektlerine neden olur. Akut yaralanmadan sonra ve tam omurilik transeksiyonundan beş hafta sonra mekanik bir mikrokonektör sisteminin implantasyonu yoluyla sıçanlarda doku adaptasyonunu, rejeneratif yanıtları ve fonksiyonel iyileşmeyi teşvik etmek için bu tür boşlukları başarılı bir şekilde kapatmak için iki olasılık tanımlanmıştır.

Deneysel Stratejileri Akut ve Kronik Lezyon sonra Yaralı Omurilik Büyük Doku boşlukları doldurmak için

Bu el yazması, mikro-doku ile tasarlanmış sinir ağlarının imalatını ayrıntılarıyla anlatmaktadır: boru biçiminde bir hidrojel içine konan agrega nöronal popülasyon (lar) yı kapsayan uzunlamasına hizalanmış aksonal yollardan oluşan üç boyutlu mikron boyutlu yapılar. Bu canlı iskele, sinirsel devreleri yeniden yapılandırmak veya modüle etmek için fonksiyonel röleler veya gri-beyaz madde nöroanatomisini taklit eden biyofiziksel test yatakları olarak işlev görebilir.

Sinir Sistemi Yeniden Yapılanma, Modülasyon ve Modelleme için Anatomik olarak İlham Almış Üç Boyutlu Mikro-Dokulu Mühendisli Sinir Ağları

Bu makalenin tam transeksiyon sonra spinal kord kütükleri ve dolgu Schwann hücreleri (SCs) ve köprü ve akson rejenerasyon arasında boşluk teşvik için enjekte edilebilir membran matris ile arasında içi boş bir kanal eklemek için bir teknik anlatılmaktadır.

Nakli Schwann hücreleri kopuk sıçan Spinal Kord kütükleri arasında boşluk Axon rejenerasyon teşvik için köprü için PVDF-TrFE borular içinde

Bu yazıda, hücresel replasman tedavilerini test etmek için ex vivo bir model olarak nöral kök hücrelerle nakledilen uzun süreli omurilik organotipik dilimleri oluşturmak ve sürdürmek için tekrarlanabilir bir yöntem sunuyoruz.

Omurilik Yaralanmasında Hücre Transplantasyonunu Doğrulamak için Bir Platform Olarak Uzun Süreli Fare Omurilik Organotipik Dilim Kültürü

Bu çalışmada, omurilik yaralanması onarımı için adipoz kaynaklı kök hücrelerin pro-rejeneratif davranışını araştırmak ve bunlardan yararlanmak için kullanılabilecek sinir-mimetik kompozit hidrojeller geliştirilmiş ve karakterize edilmiştir.

Kök Hücre Dağıtımı Kullanılarak Omurilik Yaralanması için Kombinatoryal Terapötiklerin Geliştirilmesi

Öğrenin servikal omurilik yaralanmasında öz-montaj peptitler ve sinir öncü hücrelerin birleşik tedavisini. Bu yöntem sıçan modelinde rejenerasyonu ve fonksiyonel iyileşmeyi artırır.

Deneysel Servikal Spinal Kord Yaralanmalarında Sinir Öncü Hücreler ve Öz-montaj Peptitler sinerjik Kullanımı

Daha fazla video keşfet