Name: İzolasyon ve Kemirgen Aort eksizyonu; Kardiyovasküler Hastalığı Çalışmasında Çok Yönlü Tekniği (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 25 s
Description: Öğrenin, fare aortunun izolasyonu ve eksizyonu için bu güvenilir yöntemi. Kardiyovasküler hastalıkların patolojisini anlamak ve deneysel analizler yapmak için temel bir teknik sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar herhangi bildirimleri var.

Tüm hayvan prosedürleri, Cincinnati Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi ve Ulusal Sağlık Enstitüleri Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu uyarınca onay (NIH Yayın No. 85-23 ile yapıldı ) 1996 Revize. 1. Fare Hazırlanması <ol><li> Anestezik bir tedavi üstü doz hayvan teşhir ederek Euthanize, izofluran etkisi inhale. Bir zararlı uyarıcı olarak ayak tutam yoluyla birincil ötenazi doğrulayın. Ötenazi, diyafram kesme İkincil yöntem, yaklaşan adım ortaya çıkar. Alternatif yöntemler kullanılmıştır verilen ötenazi elde edilir edilebilir. </li><li> Sanitizie nem alanına için% 70 etanol ile, ilk kesim yapılacaktır karın bölgesi boyunca kürk püskürterek fare dış yüzeyi, böylece kürk, etanol ile ıslatılmış ve herhangi bir serbest / kuru tüyleri girmezler bölge. </li><li> Bir sur üzerinde fare dışarı LayÜst ve alt uzantıları ile yatar pozisyonda rahi kurulu dışa genişletilmiş. </li><li> Cerrahi bandı kullanarak kuruluna Güvenli uzantıları. </li></ol> Kalp ve Aort 2. izolasyonu <ol><li> Farenin doğru konumlandırma sonra, bulmak ve sternum kılıç şeklinde sürecine sadece aşağı karın cildi izole etmek forseps kullanabilir. </li><li> Düz yukarı kaldırarak cilt gerginliği oluşturun ve periton ve göğüs boşluğunun alt kısmının üstün kısmını açığa yüzeysel cilt kaldırmak için makas kullanın. </li><li> Kılıç şeklinde sürecini kaldırma ve subkostal kenarları boyunca sürecine sadece aşağı yan kesiler yaparak periton boşluğuna girin. </li><li> Kalp veya herhangi bir büyük kan damarları lacerate emin olmak, diyafram geçiyor, göğüs boşluğuna kadar parçalara ayır. </li><li> Göğüs kafesi ön kısmını kaldırmak için adım 2.3 cranially yapılan yanal kesiler uzatın. EğerGerekli, künt diseksiyon ile göğüs ön duvarından kalp ücretsiz. </li><li> Malzeme emmek için steril gazlı bez kullanılarak gereksiz kan ve sıvı göğüs boşluğunu temizleyin. Alan daha görünür sonra, daha iyi kalp ve aorta maruz akciğerleri kaldırmak. </li></ol> Kalp ve Aort 3. Perfüzyon NOT: Bu adım çok hemen önce yapmak, kalp delinerek kan elde etmek için. <ol><li> Steril buz soğuk 1x Fosfat tampon çözeltisi (PBS), 10 ml bir 10 cc şırınga doldurun ve şırıngaya bir 25 gauge iğne takılır. </li><li> Yavaşça kalbin sol ventrikül içine iğne takın. </li><li> Perfüzyon basınç birikimini hafifletmek için sağ atrium kesin. 3 dakika - 2 üzerinde fare içine şırınga içeriğini serpmek. </li><li> Perfüzyon sıvıyı emmek için sağ atrium açılışında steril gazlı bez kullanın. </li></ol> Aort 4. İzolasyon ve eksizyonu <ol><li> PE tamamlanması üzerinerfusion, göğüs boşluğu içinde görüş alanını karıştırdığın kalan sıvıyı emmek için steril gazlı bez kullanın. </li><li> Suprapubik bölgeye kesi uzanan, karın duvarından kaudal keserek gastrointestinal içeriğini Açığa. Bilateral aşağı tuş veya eksize edilebilir cilt flep oluşturmak için alt ekstremitelerde yönünde daha fazla kesi uzatın. </li><li> Daha iyi aorta görselleştirmek için karaciğer, pankreas, mide, dalak, bağırsaklar ve lobları çıkarın. Aort renal arterlerin şubelerinde yüzeysel olarak, perirenal bölgesi yakınında diseksiyon dikkatli olun. NOT: kesin bu adımı gerçekleştirin ve gastrointestinal sistem kirlenme eğilimi artırır bakteri ile zengin olarak şekilde kaydolur. </li><li> 1x PBS ile bölgeyi durulayın ve bir steril gazlı bez ile emilim bütün sıvıyı çıkarın. </li><li> Steril Microscissors ve microforceps kullanarak, omurga dorsal ve ventral yemek borusu gelen aort ayırın.Bu künt diseksiyon ve bunun için bir diseksiyon mikroskobu kullanarak kullanmak en iyisidir. NOT: aort izole iliyak bifürkasyonunda kaudal başlayacak ve kaudal diseksiyon karotis ve brakiyosefalik arterlerde cranially cranially temizlik ve kavite dorsal yüzeyinden aort ayıran taşımak veya başlatın. Her iki yöntem uygun ve araştırmacılar konfor kadar. </li><li> Aort duvarının bir kısmını kaldırmak için emin olmak ince microscissors kullanarak perivasküler yağ dokusu çıkarın. Bu aortik düz kas hücrelerinin kültür sırasında fibroblast ve kirlenme ihtimalini en aza indirmek için önemlidir. </li></ol>

<ol><li>Go, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2014+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2014 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 129 (3), 28-292 (2014).</li>
<li>Ross, R., Harker, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperlipidemia+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Hyperlipidemia and atherosclerosis.</a> Science. 193 (4258), 1094-1100 (1976).</li>
<li>Clouse, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+aortic+dissection%3A+population-based+incidence+compared+with+degenerative+aortic+aneurysm+rupture%5BTitle%5D)+AND+%22Mayo+Clin+Proc%22%5BJournal%5D)">Acute aortic dissection: population-based incidence compared with degenerative aortic aneurysm rupture.</a> Mayo Clin Proc. 79 (2), 176-180 (2004).</li>
<li>Daugherty, A., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+abdominal+aortic+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Mouse models of abdominal aortic aneurysms.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 24 (3), 429-434 (2004).</li>
<li>Pleumeekers, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneurysms+of+the+abdominal+aorta+in+older+adults.+The+Rotterdam+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Aneurysms of the abdominal aorta in older adults. The Rotterdam Study.</a> Am J Epidemiol. 142 (12), 1291-1299 (1995).</li>
<li>Brophy, C. M., Reilly, J. M., Smit, G. J., Tilson, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+inflammation+in+nonspecific+abdominal+aortic+aneurysm+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">The role of inflammation in nonspecific abdominal aortic aneurysm disease.</a> Ann Vasc Surg. 5 (3), 229-233 (1991).</li>
<li>Ray, J. L., Leach, R., Herbert, J. M., Benson, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+vascular+smooth+muscle+cells+from+a+single+murine+aorta%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Isolation of vascular smooth muscle cells from a single murine aorta.</a> Methods Cell Sci. 23 (4), 185-188 (2001).</li>
<li>Weiss, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+the+murine+cardiovascular+system+with+magnetic+resonance%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Imaging the murine cardiovascular system with magnetic resonance.</a> Circ Res. 88 (6), 550-551 (2001).</li>
<li>Graham, E. L., Balla, C., Franchino, H., Melman, Y., del Monte, F., Das, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+culture%2C+and+functional+characterization+of+adult+mouse+cardiomyoctyes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation culture, and functional characterization of adult mouse cardiomyoctyes.</a> J Vis Exp. (79), 50289(2013).</li>
<li>Wassef, M., Upchurch, G. R. Jr, Kuivaniemi, H., Thompson, R. W., Tilson, M. D. 3rd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+opportunities+in+abdominal+aortic+aneurysm+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Challenges and opportunities in abdominal aortic aneurysm research.</a> J Vasc Surg. 45 (1), 192-198 (2007).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Aort hastalığı, ciddi vakalarda önemli sistemik patolojiye ve muhtemelen ölüme yol açabilir. Tedavi seçenekleri şu anda sınırlıdır, bu nedenle bu alanda sürekli araştırma yapılması gerekmektedir10. Murin modelleri, hastalığın ilerlemesini ve potansiyel olarak tedavi seçeneklerini daha fazla incelemek için idealdir4. Bu nedenle, bu yazıda açıklanan yöntemin başarıyla tamamlanması, araştırmacılara hastalığın ilerlemesini ve ilaç etkinliğini ölçmek için araçlar sağlayacaktır. 
<p class='jove_conten...

Aort oksijenli kan ve vücut burada da benzer kısımlar ile vücut temin kardiyovasküler fonksiyon çok önemli bir rol oynar, hastalığa karşı hassastır. Ortak aort hastalıkları diyet, sigara ve sedanter yaşam tarzı 1 olmak üzere genetik ve çevresel faktörlerin sonuçları ateroskleroz ve anevrizma içerir. Ateroskleroz, tipik olarak kronik hiperlipidemi 2 olan hastalarda bulunan aort duvarının bir kalsiyum ve lipit bazlı plak birikmesidir. Anevrizma sonuçta 3 yırtılmasına neden olabilecek bir artış çapı ardından aorta ve damar duvarının incelme yapısal elemanların bozulma ile karakterize edilir. Hayvan modelleri hastalık ve potansiyel tedavilerin etkinliğinin mekanizmasını incelemek için kullanılan önemli araçlardır. Kardiyovasküler araştırmalarda yaygın olarak kullanılan hayvan modelleri, özellikle vasküler ve metabolik bozuklukların araştırılması aratmakBöyle Apolipoprotein E gen nakavt ve düşük yoğunluklu lipoprotein reseptör gen nakavt fareler 4 olarak lipid düzeylerini değiştirmek için genetiği değiştirilmiş fareler vardır. hastalık ve tedavinin etkinliğinin mekanizmasının değerlendirilmesi için yöntemlerin çoğunluğu, aort izole edilmesini ve çıkarılmasını içerir. Aort lokalize ve izole edildikten sonra, morfometrik analizi, anevrizma varlığında, tipik olarak çap 5 daha büyük bir% 50 artış olarak tarif edildiği gibi belirlenebilir. Yerinde analiz gerekli işlemi tamamlandıktan sonra, aort, ileri analiz için çıkartılır. Bir eksize edilen aort örneğin protein ve / veya gen sentezleme tahlilleri ya da moleküler çalışmalar yapmak için dondurulmuş flaş olabilir% 4 paraformaldehid ile sabitlenmiş ve sonra sarılır, bölümlere ayrılır ve histopatolojik analiz için boyanmıştır. Aort histolojik analiz gibi yapısal bozulma, plak oluşumu ve lökositlerin sızması gibi aort hastalığı ortak özellikler göstermektedir &lt;sup&gt; 6,7. Buna ek olarak, bir eksize edilen orta damar alındı, in vitro çalışmalar 7 çok çeşitli kullanılabilir endotel ve düz kas hücreleri dahil olmak üzere birincil hücre hatları izole etmek için kullanılabilir. Şu anda, aort hastalığı bu derinlemesine karakterizasyonu sağlamak yanı sıra kardiyovasküler hastalık çalışma araçları ile araştırmacılara sunmak için başka yöntemler vardır. Manyetik rezonans görüntüleme, bilgisayarlı tomografi ve ultrasonografi gibi görüntüleme yöntemleri ancak bu küçük hayvanlarda zor ve yeterli teknolojisine sahip bir aygıtı elde 8 pahalı, morfolojik aorta değerlendirmek için yakın yöntemlerdir. Ölümsüzleşmiş hücre hatları, ancak bu hücrelerin yapay doğa hücre yaşam döngüsü ve apoptoz 9 üzerindeki etkileri araştırmakla sınırlayıcı hastalık ve tedavilerin etkinliğinin potansiyel mekanizmaları, araştırmak için satın alınabilir. genel amacıBu yazının kardiyovasküler hastalık soruşturma kemirgen aorta steril izolasyon ve eksizyonu göstermektir.

<table><tbody><tr><td>Isofluran</td><td>Med-Vet International</td><td>#RXISO-250</td><td></td></tr><tr><td>%70 etanol</td><td>Fisher</td><td>07-678-001</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu salin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P5368-10PAK</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi bant</td><td>3M</td><td>1527-1</td><td></td></tr><tr><td>Steril gazlı bez</td><td>Dukal Corporations</td><td>1312</td><td></td></tr><tr><td>25 gauge iğne</td><td>BD</td><td></td><td></td>305122</tr><tr><td>10 ml şırınga</td><td>BD</td><td>309604</td><td></td></tr></tbody></table>

İzolasyon ve kemirgen aort eksizyonu; kardiyovasküler hastalığı Çalışmasında Çok yönlü tekniği

Isolation and Excision of Murine Aorta; A Versatile Technique in the Study of Cardiovascular Disease

Kardiyovasküler hastalık, kalp ve/veya kan damarlarının hastalığını tanımlayan geniş bir terimdir. Vücuda oksijenli kan sağlayan ana kan damarı aorttur. Ateroskleroz ve anevrizma gibi hastalıklarda aort damarı etkilenebilir. Bu hastalıkları araştıran araştırmacılar, hastalığın ilerlemesini karakterize etmek ve potansiyel terapötiklerin etkinliğini değerlendirmek için aortun doğrudan gözlemlenmesinden faydalanacaktır. Bu protokolün amacı, kardiyovasküler hastalıkları araştıran araştırmacılara yardımcı olmak için aortun uygun izolasyonunu ve eksizyonunu tanımlamaktır. Aortun izolasyonu ve eksizyonu, araştırmacıların brüt morfometrik değişikliklere bakmalarına ve istenirse histolojik değişikliklere bakmak için dokuyu korumalarına ve boyamalarına izin verir. Aort, ilgilenilen hedefleri ve etki mekanizmalarını keşfetmek için protein ve gen ekspresyonunu değerlendirmek için moleküler çalışmalar için kullanılabilir. Bu teknik, teknoloji ve maliyet açısından doğal sınırlamaları olduğu için görüntüleme modalitelerinden üstündür. Ek olarak, yeni izole edilmiş ve eksize edilmiş bir aorttan birincil izole edilmiş hücreler, araştırmacıların in situ ve in vitro tahliller yapmasına izin verebilir. Aortun izolasyonu ve eksizyonu, hayvanı feda etmek zorunda kalma sınırlamasına sahiptir, ancak bu durumda, aort hastalığı çalışmasında en çok yönlü teknik olduğu için faydalar zarardan daha ağır basar.

Prosedürün tamamlanmasından sonra, hala (Şekil 1A) bağlı renal arter ile göğüs ve karın boşlukları içerisine inen kalp kaynaklı sağlam bir aort, orada olacak. Buradan, aort abdominal aort anevrizması (Şekil 1B ve 1C) çalışmalarında tanısal olan morfometrik değişiklikleri ölçmek için yerinde görüntülü olabilir. Daha sonra, aort, kaldırıldı sabit ve histolojik değişikliklere bakmak lekeli olabilir. Aort genel ve ortak leke hematoksilin ve eozin boyama (Şe...

Aort patolojisi ciddi morbidite ve mortaliteye yol açabilir, bu nedenle hastalığın ilerlemesi ve potansiyel tedavilerin araştırılması gereklidir. Burada, araştırmacılara kardiyovasküler hastalık araştırmalarında yardımcı olmak için murin aortunu izole etmek ve eksize etmek için bir protokol sunuyoruz.

İzolasyon ve Kemirgen Aort eksizyonu; Kardiyovasküler Hastalığı Çalışmasında Çok Yönlü Tekniği

Cardiovascular disease is a broad term describing disease of the heart and/or blood vessels. The main blood vessel supplying the body with oxygenated ...

Bu prosedürün genel amacı, murin aortunu steril bir şekilde izole etmek ve eksize etmektir. Bu, önce göğüs ve karın boşluğunu açığa çıkararak gerçekleştirilir. İkinci adım, soğuk, steril tuzlu su ile perfüze etmektir.Daha sonra, göğüs ve karın boşluklarının organları çıkarılır ve kalbi aorta bağlı bırakır. Son adım, perivasküler yağ dokusunu ve advent dokusunu aorttan çıkarmaktır. Sonuç olarak, çevredeki tüm dokunun çıkarıldığını doğrulamak için bir diseksiyon mikroskobu kullanılır ve aort çeşitli deneysel analizler için kullanılabilir.Dolayısıyla bu teknik, anevrizma gelişimi ve aterosklerotik plakların oluşumu gibi kardiyovasküler araştırma alanındaki temel soruları yanıtlamada yardımcı olur. Ve bunlara, gen ve protein ekspresyonu gibi moleküler biyolojideki değişikliklere bakarak bakabilirsiniz. Fareye ötenazi yaptıktan sonra, ötenazi durumunu bir ayak parmağı tutamıyla doğrulayın.Daha sonra, karın kürkünü% 70 etanol ile ıslatarak cildi sterilize edin. Ardından, fareyi cerrahi tahtaya sırtüstü yatırın, uzantılar uzanmış şekilde sabitleyin. Ameliyata, ksifoid sürecinden hemen daha düşük olan karın derisini bulmak ve izole etmek için forseps kullanarak başlayın.Ardından, cildi yukarı kaldırın ve makasla kesin. Bu, peritonun üst kısmını ve alt torasik boşluğu ortaya çıkarmalıdır. Daha sonra forseps ve makas kullanarak, ksifoid işlemini kaldırın ve subkostal kenarlar boyunca hemen daha düşük lateral insizyonlar yapın.Göğüs boşluğunu incelemek için, işlem sırasında kalbe veya herhangi bir büyük damara zarar vermemeye dikkat ederek diyaframdan girin. Şimdi kraniyal, lateral insizyonları subkostal kenarlar boyunca uzatır. Böylece göğüs kafesinin ön kısmını çıkarın.Bu kesilerin tamamlanması için kalbin göğüs ön duvarından çıkarılması için künt bir diseksiyon gerekebilir. Şimdi gazlı bez kullanarak, organlara erişimi kolaylaştırmak için fazla sıvıların göğüs boşluğunu temizleyin. Daha sonra forseps ve makas kullanarak akciğerleri lob lob çıkarın.Kalp ve aort daha sonra tamamen açığa çıkarılmalı ve kalp ponksiyonu yoluyla kan toplamak için kolayca erişilmelidir. Kalbi perfüze etmek için perfüzyona devam etmeden önce bunu şimdi yapın, 10 cc'lik bir şırıngayı 10 mililitre steril buz gibi soğuk bir XPBS ile doldurun. Ardından 25 gauge bir iğne takın.İğneyi dikkatlice sol ventriküle yerleştirin. Daha sonra sağ atriyumda bir kesi yapın, böylece bir sonraki adımda dolaşım sisteminde aşırı basınç oluşmaz. Şimdi, önümüzdeki iki ila üç dakika boyunca, PBS'yi şırıngadan yavaşça kalbe çıkarın.PBS ejeksiyonu sırasında, insizyondaki atriyumdan dökülecek sıvıyı emmek için steril gazlı bez kullanın. PERFUSE sekizinin tamamı dışarı atıldığında, kalan sıvıyı göğüs boşluğunun temiz bir görünümünü engelleyen gazlı bezle emdirin. GI içeriğini ortaya çıkarmak için, karın duvarından kıvrak bir şekilde kesin ve insizyonu supra kasık bölgesine kadar uzatın.Bir kez orada, sabitlenebilen veya eksize edilebilen bir deri flebi yapmak için alt ekstremitelere doğru iki taraflı olarak kesin. Devam etmek birkaç organı, karaciğerin loblarını, pankreas, dalak, bağırsakları ve alt yemek borusunu çıkarır. Bu, aortun görünümünü açar.Bu bölgede aorttan renal arterlere kadar yüzeysel dallar olduğu için perren bölgesini diseksiyon yaparken ekstra dikkatli olun. Bu diseksiyonu hassas ve dikkatli bir şekilde yapın, çünkü GI bakterileri diğer dokuları kontamine edebilir, temizlenen alanı bir XPBS ile durulayın ve fazla çözeltiyi gazlı bezle emin, aort kolayca erişilebilir olmalıdır. Bu yüzden makas ve forseps ile aortu omurgadan ayırın.Künt bir diseksiyon uygundur ve diseksiyon mikroskobunun kullanılması şiddetle tavsiye edilir. Aort, koddly veya kranly başlayarak çıkarılabilir. Önemli olan, dokuları temizlemek ve ayırmak için düzenli bir bitki işlemidir.Perivasküler yağ dokusunu diseke ederken, aort duvarına zarar vermemek için ince mikro makas kullanarak çıkarın. Bu, aort düz kas hücrelerini kültürlerken fibroblast kontaminasyonu olasılığını en aza indirir. Perivasküler, yağ dokusu ve adventitinin dikkatli eksizyonu çok önemlidir.Artık herhangi bir doku, hücre kültüründe kontaminasyona neden olabilir, ancak aynı zamanda moleküler tahlillerinizi de önyargılı hale getirebilir. Bu işlem kullanılarak kalpten çıkan sağlam bir aort damarı göğüs ve karın boşluklarına doğru inmektedir. Renal arterler hala bağlı olarak elde edildiğinde, abdominal aort anevrizmalarının çalışmasında tanısal olan morfometrik değişiklikleri ölçmek için aort in situ olarak görüntülenebilir.Daha sonra, hemat, toin ve eoin boyası gibi histolojik değişikliklere bakmak için aort çıkarılabilir, sabitlenebilir ve boyanabilir veya elastin bantlarına bakmak ve böylece aortun yapısal bütünlüğünü görmek için ver Hoff Van Geen boyaması ile boyanabilir. Aort hücreleri ayrıca birincil hücre izolasyonu ve canlılık çalışmaları ve protein lokalizasyonu gibi in vitro çalışmalar için de kullanılabilir. Prosedürü takiben, protein ekspresyonuna, enzim aktivitesine ve gen ekspresyonuna bakmak için protein ve RNA izolasyonu gibi diğer teknikleri kullanabilirsiniz.

isolation-excision-murine-aorta-versatile-technique-study

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bir fare abdominal aort bir bölüm sadece bir allojenik veya sinjenik alıcı olarak renal arterler aşağıda orthotopically transplante edildiği bir yöntem açıklanmaktadır. Bu teknik, birörnek büyük arter nakli avantajlı olarak kabul edilir olan çalışmalarda yararlı olabilir.

Damar Hastalığı Çalışmaları Farelerde Ortotopik Aort Nakli

Bu video, bir murin modelinde kalp yetmezliğine doğru ilerlemeyi sınırlamak için ters yeniden şekillenmeye yol açabilen aort bantlama tekniğini göstermektedir. Banttan çıkarma sonrası, ventriküler art yükün önemli ölçüde azalması, ventriküler hipertrofi ve fibrozisin gerilemesini tetikleyerek kardiyak fonksiyonda bir iyileşmeye neden olur.

Cerrahi Aort Bandajı: Aort Daralması Murin Modelinde Sol Ventrikül Ters Yeniden Şekillenmesini İncelemek İçin Bir Prosedür

Bu videoda, aortun minyatür domuzlardan cerrahi olarak çıkarılması için bir prosedür gösteriyoruz. Bu izole aortlardan toplanan endotel hücreleri, pıhtılaşma ve immün tepkileri incelemek için in vitro koşullarda daha fazla kültürlenebilir.

Domuz Aort İzolasyonu: Aşağı Akış Analizi için Minyatür Domuzlardan Torasik Aortu Eksize Etmek İçin Cerrahi Bir Prosedür

Vasküler endotel hücreleri birçok önemli kardiyovasküler hastalıkta önemli rol oynamaktadır. Bu makale, herhangi bir özel ekipman kullanmadan fare aortundan endotel hücrelerini izole etmek ve genişletmek için basit bir yöntemi açıklamaktadır. Protokolümüz, endotel hücre fizyopatolojisindeki mekanizmaları tanımlamak için etkili bir yol sağlar.

İzolasyon ve Fare aort endotel hücreleri İlköğretim Kültür

Bu protokolün amacı, koroner dolaşımdan fare primer vasküler düz kas hücrelerinin izolasyonu ve kültür teknikleri (VSMC) göstermektir. VSMC'Ier izole edildikten sonra, pek çok standart kültür teknikleri için kullanılabilir.

Murin Koroner Damar düz kas hücrelerinin izolasyonu

Kardiyovasküler prosedürleri takiben yapılan restenoz (baypas cerrahisi, anjiyoplasti veya stentleme) bu prosedürlerin dayanıklılığını azaltmakta önemli bir sorundur. İdeal bir terapi düz kas hücresi (VSMC) proliferasyonunu inhibe ederken endotelin rejenerasyonunu teşvik eder. VSMC çoğalması ve endotel fonksiyonunun in vivo olarak eşzamanlı olarak değerlendirilmesi için bir model tanımlıyoruz.

Murin Aort Kırma Yaralanması: Verimli<emIn vivo</em&gt; Düz Kas Hücresi çoğalması ve Endotel Fonksiyon Modeli

Vivo klonal analizi ve kader eşleme, aortik explants ve izole düz kas hücreleri ayrıntılı burada kullanarak embriyonik ve perinatal fare aort eğitim için kullanılan protokol. Bu farklı yaklaşımlar normal gelişim embriyonik ve perinatal aort ve hastalık patogenezinde morfogenez incelenmesi kolaylaştırmak.

Morfogenez ve embriyonik ve Perinatal aort patogenezi okumaya vivo içinde ve doku ve hücre Explant yaklaşımları kullanma

Burada servikal mürin modelinde sütür olmayan manşet tekniği ni kullanarak farelerde heterotopik aort transplantasyonu protokolünü salıyoruz. Bu model kronik allogreft vaskülopatinin (CAV) altta yatan patolojisini incelemek için kullanılabilir ve oluşumunu önlemek için yeni terapötik ajanların değerlendirilmesine yardımcı olabilir.

Modifiye Dikişsiz Manşet Tekniği Kullanılarak Murine Servikal Aort Transplantasyon Modeli

Bu protokol, yetişkin farelerden atriyal ve ventrikül miyositlerinin eşzamanlı izolasyonu için aort kanülasyonunun derinliğini de içeren Langendorff yönteminin modifikasyonlarını açıklar.

Yetişkin Farelerden Atriyal ve Ventrikül Miyositlerinin Eşzamanlı İzolasyonu için Langendorff Yönteminin Modifikasyonları

Bu protokol, kendi kendine yapılan bir retraktör kullanılarak minimal invaziv transvers aort daralması (TAC) prosedürü ile modifiye edilmiş ve basitleştirilmiş bir tekniği tanımlamaktadır. Bu prosedür ventilatör veya mikroskop olmadan yapılabilir ve sonunda kardiyak hipertrofi veya kalp yetmezliğine yol açan aşırı basınç yüküne neden olur.

Farelerde Transvers Aort Daralması için Modifiye Bir Teknik

Bu protokol, aterosklerozun mekanizmaları ve ilerlemesi hakkında daha derinlemesine araştırmaları kolaylaştırmak için aterosklerotik plakların kantitatif analizi için kapsamlı bir metodoloji sağlar.

Atrosklerotik Fare Modelinde Aort Ark ve Kök Lezyonlarının İzolasyonu ve Analizi

Öğrenin, fare aortunun izolasyonu ve eksizyonu için bu güvenilir yöntemi. Kardiyovasküler hastalıkların patolojisini anlamak ve deneysel analizler yapmak için temel bir teknik sunar.

İzolasyon ve Kemirgen Aort eksizyonu; Kardiyovasküler Hastalığı Çalışmasında Çok Yönlü Tekniği

Daha fazla video keşfet