Name: Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullanma: Kemirgenler Bir Nöroprotektiftir Tekniği (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-02T10:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 52 s
Description: Öğrenin, sıçan arka ekstremitesinde uzaktan iskemik önkoşullama ile retina gibi uzak dokuları ışık hasarına karşı nasıl koruyacağınızı. Bu minimal invaziv yöntem, endojen nöroprotektif mekanizmaları çalışmak için güvenilir bir model sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazar, Bayan Sharon Spana'nın (Sydney Üniversitesi) kemirgenlerin izlenmesi, ele alınması ve deney edilmesindeki yardımları için minnettardır. Yazar, bu makalenin hazırlanmasındaki yardımları için Prof. Jonathan Stone ve Dr. Dan Johnstone'a teşekkür eder. Doktora finansman desteği, Sydney Üniversitesi ve Avustralya Vizyon Mükemmeliyet Merkezi tarafından sağlanmıştır.

Etik deyimi: protokol 5657 # AEC University of Sydney hayvan bakım kurallarına izler. Anestezi hayvan etik kurul (University of Sydney, AEC # 5657) tarafından onaylanmıştır. 1. Ekipman Hazırlığı <ol><li> Gerçek zamanlı cilt ısısı izleme kullanın. Bilgisayarda açın ve veri toplama donanımı. </li><li> Açık sıcaklık kayıt yazılımı ve sıcaklık 30-35 arası C ayar ve her 100 msn örnekleme sıklığını ayarlayın. </li><li> İsteğe bağlı: çekirdek sıcaklığını sağlamak için Ekle rektal termometre 37.5 ° C&#39;de sabit kalır. </li></ol> Manuel tansiyon aleti 2. Kalibrasyon <ol><li> Bir 250-550 gr sıçan için bir boyut 2 manşet sphygmomanometer.Use yenidoğan kolluğu bağlayın. Bir adaptör tansiyon aleti için manşon tüpünü bağlamak gerekli olabilir. </li><li> Her iki hava tahliye vanasını gevşemesine veya uyarlamak gelen manşon tüpünü ayırarak manşeti Söndürya da. Hiçbir baskı emin olun tüp kalır ve manometre iğne oval / dikdörtgen içinde sıfır aittir. </li><li> Boru, manometre ve manşet arasındaki basıncını kontrol edin. Bu manometre 100 mmHg okuyana kadar enflasyon ampul yumuşak pompalarla şişirin. Basınç sabit kalır emin olun. Yavaş yavaş hava bırakma değeri açarak manşeti söndürün. </li></ol> 3. Hayvan Hazırlık Not: Koyu uyumu gerektiren hafif yaralanma geçmesi için uzaktan iskemi gece önce olan Hayvanlar. Işık hasarı geçiren Hayvanlar karanlık yetiştirme (12 saat ışık: karanlık döngüsü (5 lux)) gerektiren <ol><li> Uyanık veya anesteziye kemirgenlerde ya uzaktan iskemi gerçekleştirin. Hayvanlar sağlıklı bir kas tonusunu olduğundan emin olun. Yeterli kas mevcut olduğunu teyit etmek için üst arka uzuv kısma bu sağlayın. Hafif yaralanmalara karşı RIP kaynaklı koruma yaşı 6 aya kadar sedanter sıçanlarda test edilmiştir. </li><li> R anesteziye hazırlıkIP <ol><li> 60 mg / kg ketamin ve 5 mg / kg ksilazin ve intraperitoneal enjeksiyonu ile sıçanlarda enjekte edilir. Bacak uzatma ve ayak altındaki deriyi sıkıştırarak anestezi derinliğini kontrol edin. derinden Narkoz ise hayvan yok refleksi vardır. Anestezi altında iken kornea kuruluğu önlemek için yapay gözyaşı uygulayın. </li><li> Bir ısı pedi veya 37.5 ° C arasında sabit bir vücut sıcaklığını muhafaza etmek için su ısıtıcı boru dolaşım ya da üzerinde sıçanlar yerleştirin. Alt ekstremite &#39;ayak pedleri yukarı bakacak şekilde yüzüstü pozisyonda sıçan yerleştirin. Sağ ya da sol kol uzak iskemi uğrayabilir. </li></ol></li><li> RIP uyanık hazırlık Not: hayvan deneyleri iki kişi gerekir Uyanık. Bir kişi hayvanı kısıtlayan ve ikinci kişi manuel sfingomanometre çalışır. deneyci kısıtlama işleyicileri yaralanma riskini artırır olarak yordamı gerçekleştirmek için emin olmalıdır. Uzaktan iskemi uygulanan fareler t klimalı olmalıdıro manuel kısıtlama. Sezgisel kılavuzlar bağlı olarak el emniyet birkaç hafta içinde 5 dakikalık bir maksimum 30 saniye arasında ilerleme olmalıdır. Manuel kısıtlama acclimatise başarısız Çekingen hayvanlar uyanık deney dışında tutulmalıdır. Son olarak, manuel kısıtlama doğru RIP çalışma sonuçlarını yorumlamak için kullanılması gereken hayvanlara stres (ve potansiyel olarak çalışmaya boşa tanıtmak) ve sahte kohort (inflamasyon olmadan manşet yerleştirme) neden olabilir. <ol><li> 15 cm x 30-50 cm parçaya bir havlu kesin ve arka bacaklarda üstüne başını örten, sıçan omurga dik ve kısa kenarı yerleştirin. </li><li> Sıçan gövde altında kısa kenarı sıkıca sokmak ve havlu kalan uzun kenarı ile sıçan sarmak başlar. Bir yatar pozisyonda kol altında sarılı hayvan sabitleyin. Sıçan sol kolunun altında tutulursa, havlu gelen sıçan sağ ekstremite özgür. </li></ol></li></ol> 4. Uygulama of Cilt Sıcaklık Probu <ol><li> Iskemi geçmesi ve footpad cilt probu yerleştirmektir sıçan bacak uzatın. Sıcaklık probu ve deri arasındaki temasını maksimize etmek için cilt probunu yerleştirin. Sıkıca footpad soruşturmanın itin ve kağıt bant ile prob yapıştırmayın. </li><li> Sıcaklık kayıt yazılımı sıcaklığını takip ederek cilt prob yerleşimini kontrol edin. Cilt ısısı 30-34 ° C arasında ve sabit kalır emin olun. 1-2 dakika boyunca deri sıcaklığını takip edin. Sıcaklık kararsız veya 30 ° C&#39;nin altında ise deri probu ayarlayın. </li></ol> 5. Uzaktan İskemi <ol><li> Manşeti Deflate ve hava basınç valfi kapalı olduğundan emin olun. Bacak uzatmak ve gevşek üst arka bacak üzerinde Manşeti kuşatmak. Pozisyonda gevşek manşet tutmak için bacak ve alt basamak uzatmak için işaret parmağı ve başparmak kullanın. </li><li> Uyanık hayvanlar artışlarla 160 mmHg, ve anesteziye hayvanın manşet basıncı kaldırın180 mmHg kaf basıncı ase. Not: sıçanların anesteziye kan basıncı 120-140 mmHg arasında değişir ve zaman bilinçli 160 mmHg yükselir. Doğru basınca ulaşıldığında zamanlayıcı ve ayak sıcaklığı kayıtları başlar. Not: Ayak sıcaklığı sabit basınç 5 dakika sonra 2 ° C ile damla gerekir. </li><li> Iskemi boyunca hayvanın &quot;diz&quot; yukarıdaki manşet pozisyonunu koruyun. Manşet basıncı bir kaç dakika sonra düşmeye başlayacak, ya da sıçan uzuv hareket ediyorsa. </li><li> Art arda pompalama istenen kaf basıncı tekrarlayan kısa bir patlama korumak için öbekler halinde enflasyon ampul pompa </li><li> Uzaktan iskemi dk 5 ila 15 için sürekli olarak teslim edilebilir. iskemi reperfüzyon protokolü bir müdahale 5 dk reperfüzyon ile 5 dk iskemi 2 dönemlerini kapsamaktadır. </li><li> Hava basıncı valfini gevşeterek kaf basıncını söndürün. Iskemi pro boyunca sıcaklık değişimini kontroltokol. Manşeti bırakın. </li><li> Yaralanma deneme ile devam edin. Anestezi etkisi altında hayvanlar bir ısı pedi üzerine yerleştirilmesi gerekir. Ayaktan kadar hayvanları izlemeye devam edin. Hayvanlar yürüyüş kadar konut iade edilemez. </li></ol> 6. Işık Yaralanma - Retina Dejenerasyon Modeli <ol><li> Karanlık bir gecede hayvanları (12-15 saat) uyarlar. Hemen uzaktan iskemi klima veya sahte uzaktan iskemi (hayvan kısıtlama) yiyecek ve su ile Perspex konut yer hayvanları takip. </li><li> 24 saat 9&#39;da Perspex yuvasının altında bulunan floresan aydınlatma (1.000 lux) açın. Işığa maruz kalma sonrasında, 7 gün boyunca döngüsel aydınlatma loş hayvanların dönün. </li></ol> 7. Sonrası uzaktan İskemi İşlemleri <ol><li> Elektroretinogram (ERG) ile Vision değerlendirme: Not: ERG set-up ve flaş protokolü BRANDLI ve Stone 26 izledi. <ol><li> Koyu bir gecede hayvanları adapte (12-15 saat). AltındaBu ışıklandırma ketamin ve ksilazin intraperitoneal enjeksiyonu (60 mg / kg ve 5 mg / kg, sırası ile) ile hayvanların anestezisi dim. Midriyatik (atropin sülfat% 1.0), kornea anestetik (Proxymetacaine% 0,5). </li><li> Kornea hidrasyon uygulayın (Carbomer polimer) göz kornea hemen düşer. Kornea hidrasyon korumak için 20 dakika aralıklarla göz jeli uygulayın. </li><li> Istikrarlı ERG kayıtları yardım etmek için göz küresi etrafında gevşek bağlanmış iplik çizin. Bir rektal prob kullanarak sıcaklığı izlemek ve 37-37,5 ° C &#39;de, hayvanın vücut ısısını korumak. </li><li> Bir Ganzfeld entegre kürenin içinde başını yerleştirin. Not: Ganzfeld göze LED&#39;ler üniforma katiyen yanıp sunan tam programlanabilir ışık uyarıcıdır. </li><li> Hafifçe kornea dokunmadan ısmarlama 4 mm platin pozitif elektrot ve ağız içine yerleştirilen bir 2 mm çapında Ag / AgCl elektrot kullanılarak pelet elektroretinogram kaydedin. Paslanmaz çelik iğne her iki elektrotlar Referanskıç içine deri altından yerleştirilen. </li><li> 2 kHz edinme oranı ile 0.3-1,000 Hz (-3 dB) bant geçiren ayarıyla Tutanak sinyalleri (AD Instruments). Istikrarlı bir ERG kayıt kayıtları başlamadan önce konuyu 10 dk karanlık adaptasyonu hayvan kurulduktan sonra. </li><li> Daha önce BRANDLI ve Stone 26 tarafından açıklanan flaş protokolünü takip ediniz. <ol><li> Flaş süresini programlamak (biz yanıp söner süresi 1-2 msn kullanılır) ve -4.4 günlük scot cd.sm -2 2.0 onun yoğunluğunu ayarlayın. Retina fonksiyonu ölçmek için parlak yanıp söner (2.0 günlük scot cd.sm -2, 1 ms) kullanın. Bu çalışmada kontrol, ışık yaralanma ve RIP ile hafif yaralanma arasındaki karşılaştırma olduğunu. </li></ol></li></ol></li></ol> 8. TÜNEL tahlili <ol><li> Fenobarbital aşırı dozda (100 mg / kg) intraperitonal enjeksiyonu ile hayvanlar öldürülür. Gözleri enükleasyon ve% 4 paraformaldehid düzeltmek. </li><li> Cyroprotecting önce PBS içinde gözleri yıkayıngözler, gece boyunca sükroz% 30 (a / h). Ekim bileşik gözleri göm ve bir kriyostat kullanılarak 20 mikron sagital kesitler halinde kesilmiş. </li><li> Maslim ark protokolü takip DAPI boyama ile retina bölümlerde TÜNEL tahlil gerçekleştirin. 27 </li><li> Retina TÜNEL sayım için floresan mikroskobu kullanarak. TÜNEL hücreleri dış nükleer tabaka (onl) kaydedildi; fotoreseptör çekirdekleri içeren retinanın dış tabakası. Bu çalışmada, TÜNEL sayımı, her tedavi grubu için 5 gözlü, her bir göz için üç kopya halinde yapılmıştır. </li><li> Karşılaştırmak istatistiksel gruba tek yönlü ANOVA kullanın kontrolü, hafif yaralanma ve hafif yaralanma + RIP sıçan anlamına geliyor. </li></ol>

<ol><li>Meller, R., Simon, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tolerance+to+Ischemia-an+Increasingly+Complex+Biology%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">Tolerance to Ischemia-an Increasingly Complex Biology.</a> Translational Stroke Research. 4 (1), 40-50 (2013).</li>
<li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+delayed+remote+limb+ischemic+postconditioning%3A+role+of+mitochondrial+K-ATP+channels+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemic+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Protective effect of delayed remote limb ischemic postconditioning: role of mitochondrial K-ATP channels in a rat model of focal cerebral ischemic reperfusion injury.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 32 (5), 851-859 (2012).</li>
<li>Harkin, D. W., D'Sa, A., McCallion, K., Hoper, M., Campbell, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+before+lower+limb+ischemia-reperfusion+protects+against+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning before lower limb ischemia-reperfusion protects against acute lung injury.</a> Journal of Vascular Surgery. 35 (6), 1264-1273 (2002).</li>
<li>Murry, C. E., Jennings, R. B., Reimer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+with+ischemia+-A+delay+of+lethal+cell+injury+in+ischemic+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Preconditioning with ischemia -A delay of lethal cell injury in ischemic myocardium.</a> Circulation. 74 (5), 1124-1136 (1986).</li>
<li>Barone, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+and+brain+tolerance+-+Temporal+histological+and+functional+outcomes%2C+protein+synthesis+requirement%2C+and+interleukin-1+receptor+antagonist+and+early+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning and brain tolerance - Temporal histological and functional outcomes, protein synthesis requirement, and interleukin-1 receptor antagonist and early gene expression.</a> Stroke. 29 (9), 1937-1950 (1998).</li>
<li>Roth, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+provides+complete+protection+against+retinal+ischemic+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Preconditioning provides complete protection against retinal ischemic injury in rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 39 (5), 777-785 (1998).</li>
<li>Wegener, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+ischemic+attacks+before+ischemic+stroke%3A+Preconditioning+the+human+brain%3F+A+multicenter+magnetic+resonance+imaging+study%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Transient ischemic attacks before ischemic stroke: Preconditioning the human brain? A multicenter magnetic resonance imaging study.</a> Stroke. 35 (3), 616-621 (2004).</li>
<li>Weih, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuated+stroke+severity+after+prodromal+TIA+-+A+role+for+ischemic+tolerance+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Attenuated stroke severity after prodromal TIA - A role for ischemic tolerance in the brain.</a> Stroke. 30 (9), 1851-1854 (1999).</li>
<li>Casson, R. J., Wood, J. P. M., Melena, J., Chidlow, G., Osborne, N. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+ischemic+preconditioning+on+light-induced+photoreceptor+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The effect of ischemic preconditioning on light-induced photoreceptor injury.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44 (3), 1348-1354 (2003).</li>
<li>Ettaiche, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ATP-sensitive+potassium+channels+%28K-ATP%29+in+retina%3A+a+key+role+for+delayed+ischemic+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">ATP-sensitive potassium channels (K-ATP) in retina: a key role for delayed ischemic tolerance.</a> Brain Research. 890 (1), 118-129 (2001).</li>
<li>Gross, E. R., Gross, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligand+triggers+of+classical+preconditioning+and+postconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Ligand triggers of classical preconditioning and postconditioning.</a> Cardiovascular Research. 70 (2), 212-221 (2006).</li>
<li>Heurteaux, C., Lauritzen, I., Widmann, C., Lazdunski, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+of+adenosine%2C+adenosine-A1-receptors%2C+and+ATP-senstive+K%2B+channels+in+cerebral+ischemic+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Essential role of adenosine, adenosine-A1-receptors, and ATP-senstive K+ channels in cerebral ischemic preconditioning.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 92 (10), 4666-4670 (1995).</li>
<li>Dirnagl, U., Simon, R. P., Hallenbeck, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+tolerance+and+endogenous+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Neurosciences%22%5BJournal%5D)">Ischemic tolerance and endogenous neuroprotection.</a> Trends in Neurosciences. 26 (5), 248-254 (2003).</li>
<li>Ren, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+ischemic+post-conditioning+reduced+brain+damage+in+experimental+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Res%22%5BJournal%5D)">Remote ischemic post-conditioning reduced brain damage in experimental ischemia/reperfusion injury.</a> Neurol Res. 33 (5), 514-519 (2011).</li>
<li>Ren, C., Gao, X., Steinberg, G. K., Zhao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limb+remote-preconditioning+protects+against+focal+ischemia+in+rats+and+contradicts+the+dogma+of+therapeutic+time+windows+for+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Limb remote-preconditioning protects against focal ischemia in rats and contradicts the dogma of therapeutic time windows for preconditioning.</a> Neuroscience. 151 (4), 1099-1103 (2008).</li>
<li>Hu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+limb+remote+ischemic+preconditioning+contributes+neuroprotective+effects+via+activation+of+adenosine+A1+receptor+and+redox+status+after+transient+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Noninvasive limb remote ischemic preconditioning contributes neuroprotective effects via activation of adenosine A1 receptor and redox status after transient focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Research. 1459, 81-90 (2012).</li>
<li>Jensen, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+Ischemic+Preconditioning+Protects+the+Brain+Against+Injury+After+Hypothermic+Circulatory+Arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Remote Ischemic Preconditioning Protects the Brain Against Injury After Hypothermic Circulatory Arrest.</a> Circulation. 123 (7), 714-721 (2011).</li>
<li>Kuntscher, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+by+brief+extremity+ischemia+before+flap+ischemia+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning by brief extremity ischemia before flap ischemia in a rat model.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 109 (7), 2398-2404 (2002).</li>
<li>Kharbanda, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+limb+ischemia+induces+remote+ischemic+preconditioning+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Transient limb ischemia induces remote ischemic preconditioning in vivo.</a> Circulation. 106 (23), 2881-2883 (2002).</li>
<li>Perl, W., Cucinell, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LOCAL+BLOOD+FLOW+IN+HUMAN+LEG+MUSCLE+MEASURED+BY+A+TRANSIENT+RESPONSE+THERMOELECTRIC+METHOD%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">LOCAL BLOOD FLOW IN HUMAN LEG MUSCLE MEASURED BY A TRANSIENT RESPONSE THERMOELECTRIC METHOD.</a> Biophysical Journal. 5 (2), 211-230 (1965).</li>
<li>Vuksanovic, V., Sheppard, L. W., Stefanovska, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+relationship+between+level+of+blood+flow+and+skin+temperature+for+different+dynamics+of+temperature+change%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Nonlinear relationship between level of blood flow and skin temperature for different dynamics of temperature change.</a> Biophysical Journal. 94 (10), L78-L80 (2008).</li>
<li>Meng, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Upper+limb+ischemic+preconditioning+prevents+recurrent+stroke+in+intracranial+arterial+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Upper limb ischemic preconditioning prevents recurrent stroke in intracranial arterial stenosis.</a> Neurology. 79 (18), 1853-1861 (2012).</li>
<li>Souza, M. V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hind+limb+ischemic+preconditioning+induces+an+anti-inflammatory+response+by+remote+organs+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Medical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">Hind limb ischemic preconditioning induces an anti-inflammatory response by remote organs in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 42 (10), 921-929 (2009).</li>
<li>Hixson, F. P., Shafiroff, B. B., Werner, F. W., Palmer, A. K. DIGITAL TOURNIQUETS - A PRESSURE STUDY WITH CLINICAL RELEVANCE. Journal of Hand Surgery-American. 11A (6), 865-868 (1986).</li>
<li>Hamer, P. W., McGeachie, J. M., Davies, M. J., Grounds, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evans+Blue+Dye+as+an+in+vivo+marker+of+myofibre+damage%3A+optimising+parameters+for+detecting+initial+myofibre+membrane+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Evans Blue Dye as an in vivo marker of myofibre damage: optimising parameters for detecting initial myofibre membrane permeability.</a> Journal of Anatomy. 200 (1), 69-79 (2002).</li>
<li>Brandli, A., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+ischemia+influences+the+responsiveness+of+the+retina%3A+observations+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthal+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Remote ischemia influences the responsiveness of the retina: observations in the rat.</a> Invest Ophthal Vis Sci. 55 (4), (2014).</li>
<li>Maslim, J., Valter, K., Egensperger, R., Hollander, H., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+oxygen+during+a+critical+developmental+period+controls+the+death+and+survival+of+photoreceptors%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Tissue oxygen during a critical developmental period controls the death and survival of photoreceptors.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 38 (9), 1667-1677 (1997).</li>
<li>Grimm, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1-induced+erythropoietin+in+the+hypoxic+retina+protects+against+light-induced+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">HIF-1-induced erythropoietin in the hypoxic retina protects against light-induced retinal degeneration.</a> Nature Medicine. 8 (7), 718-724 (2002).</li>
<li>Vander Heide, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinically+Useful+Cardioprotection%3A+Ischemic+Preconditioning+Then+and+Now%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Pharmacology+and+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Clinically Useful Cardioprotection: Ischemic Preconditioning Then and Now.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 16 (3-4), 251-254 (2011).</li>
<li>Zhou, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+Limb+Ischemic+Postconditioning+Protects+Against+Neonatal+Hypoxic-Ischemic+Brain+Injury+in+Rat+Pups+by+the+Opioid+Receptor%2FAkt+Pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Remote Limb Ischemic Postconditioning Protects Against Neonatal Hypoxic-Ischemic Brain Injury in Rat Pups by the Opioid Receptor/Akt Pathway.</a> Stroke. 42 (2), 439-444 (2011).</li>
<li>Hasegawa, J., Obara, T., Tanaka, K., Tachibana, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-density+presynaptic+transporters+are+required+for+glutamate+removal+from+the+first+visual+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">High-density presynaptic transporters are required for glutamate removal from the first visual synapse.</a> Neuron. 50 (1), 63-74 (2006).</li>
<li>Kanoria, S., Jalan, R., Seifalian, A. M., Williams, R., Davidson, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocols+and+mechanisms+for+remote+ischemic+preconditioning%3A+A+novel+method+for+reducing+ischemia+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Protocols and mechanisms for remote ischemic preconditioning: A novel method for reducing ischemia reperfusion injury.</a> Transplantation. 84 (4), 445-458 (2007).</li>
<li>Maier, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+depth+and+duration+of+mild+hypothermia+in+a+focal+model+of+transient+cerebral+ischemia+-+Effects+on+neurologic+outcome%2C+infarct+size%2C+apoptosis%2C+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Optimal depth and duration of mild hypothermia in a focal model of transient cerebral ischemia - Effects on neurologic outcome, infarct size, apoptosis, and inflammation.</a> Stroke. 29 (10), 2171-2180 (1998).</li>
<li>Reith, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+temperature+in+acute+stroke%3A+Relation+to+stroke+severity%2C+infarct+size%2C+mortality%2C+and+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Body temperature in acute stroke: Relation to stroke severity, infarct size, mortality, and outcome.</a> Lancet. 347 (8999), 422-425 (1996).</li>
<li>Barbe, M. F., Tytell, M., Gower, D. J., Welch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HYPERTHERMIA+PROTECTS+AGAINST+LIGHT+DAMAGE+IN+THE+RAT+RETINA.+%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">HYPERTHERMIA PROTECTS AGAINST LIGHT DAMAGE IN THE RAT RETINA. </a> Science. 241 (4874), 1817-1820 (1988).</li>
<li>Wang, X. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+degradation+in+mouse+retina+after+a+transient+ischemia+and+protective+effect+of+hypothermia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Neuronal degradation in mouse retina after a transient ischemia and protective effect of hypothermia.</a> Neurological Research. 24 (7), 730-735 (2002).</li>
<li>Tonkovic-Capin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+cardioprotection+by+isoflurane%3A+role+of+K%28ATP%29+channels%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Delayed cardioprotection by isoflurane: role of K(ATP) channels.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 283 (1), H61-H68 (2002).</li>
<li>Pfenninger, E., Himmelseher, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effects+of+ketamine+on+a+cellular+level%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesist%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effects of ketamine on a cellular level.</a> Anaesthesist. 46, S47-S54 (1997).</li>
<li>Hirose, K., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BLOCKADE+OF+GLUTAMATE+EXCITOTOXICITY+AND+ITS+CLINICAL-APPLICATIONS%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochemical+Research%22%5BJournal%5D)">BLOCKADE OF GLUTAMATE EXCITOTOXICITY AND ITS CLINICAL-APPLICATIONS.</a> Neurochemical Research. 18 (4), 479-483 (1993).</li>
<li>Welberg, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychiatric+disorders%3A+Ketamine+modifies+mood+through+mTOR%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+reviews.+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Psychiatric disorders: Ketamine modifies mood through mTOR.</a> Nature reviews. Neuroscience. 11 (10), 666(2010).</li>
<li>Garcia, L. S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+administration+of+ketamine+induces+antidepressant-like+effects+in+the+forced+swimming+test+and+increases+BDNF+levels+in+the+rat+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+%26+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Acute administration of ketamine induces antidepressant-like effects in the forced swimming test and increases BDNF levels in the rat hippocampus.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology & Biological Psychiatry. 32 (1), 140-144 (2008).</li>
<li>Wassle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+processing+in+the+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Parallel processing in the mammalian retina.</a> Nature Reviews Neuroscience. 5 (10), 747-757 (2004).</li>
<li>Hertle, D. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+analgesics+and+sedatives+on+the+occurrence+of+spreading+depolarizations+accompanying+acute+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Effect of analgesics and sedatives on the occurrence of spreading depolarizations accompanying acute brain injury.</a> Brain. 135, 2390-2398 (2012).</li>
</ol>

Yazarın açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Kemirgen arka bacak iskemisi başarılı bir şekilde manuel tansiyon aleti ile uyarılan ve retina fotoreseptör için nöro teslim manşet oldu. Işık yaralanma 9,28 den fotoreseptör iskemik klima kaynaklı koruma ile tutarlı bir bulgu. Esas olarak, uzaktan iskemi dokulara kısa bir oksijen deprivasyonuna neden olur. Bu nedenle, uzak iskemik önkoşullamanın iskemik klima veya alternatif olarak adlandırılan iskemik hoşgörü, hipoksik önkoşullama ve bir dereceye kadar, anaerobik egzersiz için p...

En hayatta, belki de, metabolik stres karşısında dokuları subletal iskemi 1,2 bir süre ile önceden klima geliştirilebilir. Pratik açıdan İskemik önşartlama (IP) doku deneyimlerinden böyle bir sonraki iskemik hakaret olarak daha şiddetli stres, önce subletal iskemi doku maruz vardır. Hayvan modellerinde, IP beyin, retina, kalp ve akciğerler 3-6 çarpıcı bir koruma sağlar. Buna karşılık, inme hastalarında gözlemler önceki geçici iskemik atak ve daha iyi klinik sonuçlar 7,8 arasında bir bağlantı göstermiştir. IP ayrıca iskemik olmayan yaralanmalar 9 retina fotoreseptörleri korur. Farklı doku ve yaralanmalarda IP etkinliği tüm dokuda bulunan hücre canlılığının doğuştan gelen bir mekanizma aktive olduğunu göstermektedir. Miyokardın İskemik ön şartlama, yukarı doğru düzenleme aracılığıyla koruyucu etkileri olduğu ileri sürülmüştüradenozin serbest bırakılması yoluyla veya mitokondriyal ATP potasyum kanallarının 10,11 açıklıktan çok metabolik yolları düzenleyen bilinen hipoksi indüklenebilir faktör (HIF) &#39;nin. Adenozin bırakma ve ATP potasyum kanalları bugüne kadar iskemik klima nöroprotektif mekanizmalar içine araştırmalar, anti-eksitotoksisitesi, anti-apoptotik ve anti-inflamatuar yolların 12,13 modifikasyon odaklanmış olan, serebral iskemi karıştığı fakat. Genel olarak, nöronlar korumak için iskemik klima moleküler sürecin anlaşılması sınırlıdır. Uzaktan iskemik önkoşullama girişimleri daha az kritik dokularda iskemi oluşturarak uzak son derece önemli organları (kalp, beyin, akciğer) şart için. Arka bacak ile uzaktan iskemik ön şartlama (RIP) inme, 14-17 arasında, kemirgen modellerinde nöro-koruyucu olduğu gösterilmiştir. bizim tarafımızdan açıklanan yöntem, basit, güvenilir ve non-invazif Prot sağlarRIP uyarılması için ocol. RIP protokolleri büyük çoğunluğu üst arka bacak bulunan femoral arter kolayca tespit ve cerrahi sıkıştırma ve turnike uygulama için erişilebilir muhtemelen çünkü, arka uzuv içerir. Beyin ve cilt koruma çalışmaları için invazif ekstremite iskemik çalışmalarda, iskemi, kasık ligament femoral arter ayrılması ve femoral arter 2,15,18 sıkıştırarak endüklenir. ekstremite Kesilen ya da femoral arter ya da sıkıştırma kaynaklanan iskemi bir pals kaybı azalması oksijenlenme ve cilt sıcaklığında bir düşüş de dahil olmak üzere bacak değişiklikler ile teyit edilmiştir. Uzaktan iskemi lazer Doppler ultrason veya Doppler 17-19 kullanılarak nabız kaybı ile teyit edilebilir. Cilt sıcaklığı ilişkisi 20,21 doğrusal olmayan olmasına rağmen Doppler alternatif olarak kullanılabilir. Doğru sıcaklık kayıtları laboratuarlar ve can olağanKolayca uzak iskemik çalışmalar içine dahil edilebilir. Cerrahi sıkma femoral bir alternatif turnike kullanılarak iskemi indüksiyon olduğunu. Turnike uygulama kabı sıkma ile elde edilene karşılaştırılabilir iskemi üretir; Kutchner ve diğ. non-invaziv turnike için sıkma invaziv femoral arter karşılaştırıldı ve her iki yöntem flep iskemi 18 bir plastik cerrahi modelinde ekstremite kan akımını ve daha az cilt hasarı durduruldu bulundu. Bacağı veya kolu ya Kesilen ve sistolik kan basıncının üzerinde manşon basıncı yükselterek domuz ve insan 17,19,22 iskemik hasara karşı koruyucu olduğu bulunmuştur. Farklı turnike iskemik tansiyon ölçme veya elastik bant 17,22,23 kullanımını içerir uzak uyaran yaklaşımları. Ancak, iskemi ikna etmek için bir elastik bant kullanımı güvensiz bir yöntem basınç bir düzenlemesiz miktarda potansiyel veren yükselişi500 mmHg üzerinde basınç yükselir ile ekstremite, insanlarda 24 kaydedilmektedir. Bundan başka, bir elastik bant ile kol veya bacak iskemisi Evans mavi boya, myofiber geçirgenliği 25 in vivo bir işaretleyici ile değerlendirildiği gibi, bandın 23 çıkarılmasından sonra farelerde kas hasarına yol açar. Bunun aksine, turnike kontrollü bir basınç dağıtım tansiyon aleti 17,19,22,26 bağlı kan basıncı ölçümü kullanılarak elde edilebilir. Bu çalışmada, fotoreseptör dejenerasyonu hafif bir yaralanma modeli uzaktan iskemik ön koşullandırma ve nöro-koruyucu etkinliğini göstermek için kullanılmıştır. Uzaktan iskemi hafif yaralanma hemen önce uyarılan ve retina fonksiyon testleri ile teyit gibi sonraki fotoreseptör dejenerasyonu engellenmiştir. Ekteki video non-invaziv uzaktan iskemi uygulamasını gösterecektir.

<table><tbody><tr><td>Altın serisi DuraShock el aneroid tansiyon aleti</td><td>Welch Allyn</td><td>DS56</td><td>Manuel Tansiyon Aleti</td></tr><tr><td>Yenidoğan [boyut 2] 1 tüp, 10 paket</td><td>Welch Allyn</td><td>5082-102-1</td><td>Uzuv kan basıncı manşeti</td></tr><tr><td>Luer kilit adaptörü</td><td>Welch Allyn</td><td>5082-178</td><td>Yenidoğan manşeti için adaptör</td></tr><tr><td>Termistör bölmesi</td><td>AD Instruments</td><td>ML 309</td><td>cilt sıcaklığı ünitesi</td></tr><tr><td>Cilt sıcaklığı probu</td><td>AD Instruments</td><td>MLT 422/A</td><td></td></tr><tr><td>Powerlab, 4 kanallı satın alma donanımı</td><td>AD Instruments</td><td>PL 35044</td><td></td></tr><tr><td>Esnek problu homeotermik battaniye sistemi</td><td>Harvard Appartus</td><td>507222F</td><td></td></tr><tr><td>Havlu</td><td></td><td></td><td>isteğe bağlı: uyanık uzak iskemi</td></tr><tr><td>Isoflo - %100 İzofluran (250 ml)</td><td>Abbot Hayvan Sağlığı</td><td>05260-05</td><td>isteğe bağlı: inhalasyon anestezik uzak iskemi</td></tr><tr><td>Ketamil - ketamin 100 mg / ml (50 ml)</td> <td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>isteğe bağlı: enjekte edilebilir anestezik uzak iskemi</td></tr><tr><td>Xylium - Xylazine 100 mg / ml (50 ml)</td> <td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>isteğe bağlı: enjekte edilebilir anestezik uzak iskemi</td></tr></tbody></table>

uzaktan ekstremite İskemik Önkoşullanma: kemirgenler bir nöroprotektiftir tekniği

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

Öldürücü iskemi etkilenen dokuda endogen mekanizmalar yukan doğru düzenlenmesi vasıtasıyla daha sonra, daha ağır iskemiye karşı dokuları korur. Öldürücü iskemi uzaktan dokularda koruyucu mekanizmalar artırdığı gösterilmiştir. Memelilerin arka bacak iskemi (5-10 dk), kısa bir süre, beyin, akciğer, kalp ve retinada kendini koruma tepkileri indükler. etki uzak iskemik önkoşullamanın (RIP) olarak bilinir. Bu hayati organları korumak terapötik umut verici yoludur ve kalp ve beyin yaralanmaları için klinik çalışmalarda altında zaten. Bir sıçan, özellikle arka uzuv - - iskemik Bu yayın bir uzuv yapma kontrollü, minimal invaziv yöntem gösterilmektedir. İnsan yenidoğanlarda kullanılmak üzere geliştirilen bir kan basıncı manşet manuel tansiyon aleti bağlı ve arka bacak üst kısmı 160 mmHg basınç uygulamak için kullanılır. Cilt sıcaklığını tespit etmek için tasarlanmış bir sonda ischemi doğrulamak için kullanılırBir bacak arterlerinin basınç kaynaklı tıkanıklığı nedeniyle cilt sıcaklığında düşüş, ve manşet bırakılmasını takip sıcaklık artışını kaydederek. RIP Bu yöntem parlak ışık kaynaklı hasar ve dejenerasyona karşı sıçan retinaya koruma sağlamaktadır.

160 mmHg üzerinde yükselmiş bir kan basıncı manşet Şekil 1B açıkça görüldüğü gibi arka bacak kan akışını durdurur. doku oksijenasyonu eksikliği bir iskemi-reperfüzyon protokolü (Şekil 2) için hayvanın ayak sıcaklığını düşürerek bir sonuçlandı. Ayak sıcaklığı (33 ° C) manşet (32 ° C) sönük iken yükselen kaf basıncı yüksekliği (31 ° C) sırasında çekirdek sıcaklığından daha düşük ve güvenilir azaltılmış oldu. Tek bir 1000 lux ışık yaralanma veya uzak iskemik ön olmadan albino sıçanlar kald...

Uzaktan iskemik önkoşullama (RIP) zarar strese karşı koşullandırma dokuların bir yöntemdir. Biz 5-10 dakika bir tansiyon aleti manşet şişirilerek, arka bacak uzaktan iskemi bir yöntem kurduk. RIP nöroprotektif yetenekleri kemirgenlerde retina dejenerasyonu modelinde gösterilmiştir.

Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullanma: Kemirgenler Bir Nöroprotektiftir Tekniği

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

Bu prosedürün genel amacı, uzak dokuları sonraki strese karşı koşullandıran arka bacakta iskemi sağlamaktır. Örneğin, ışık yaralanmasına karşı retina. Bu, önce manuel Ingle anne manometresinin kalibre edilmesiyle gerçekleştirilir.Daha sonra, hayvan uyuşturulur ve bir ısıtma yastığına yerleştirilir. Daha sonra hayvanın arka bacağı uzatılır ve manşet yerine yerleştirilir. Son olarak, uzak iskemi, manşetin pompa ile şişirilmesi, manşetin söndürülmesi ve işlemin ikinci kez tekrarlanmasıyla gerçekleştirilir.Sonuç olarak, ışık yaralanmasından önce uygulandığında, retina fonksiyonunda ve apoptoz geçiren fotoreseptör sayısında bir iyileşme göstermek için uzak iskemi kullanılır. Bu yöntem, gerçek zamanlı cilt sıcaklığı takibi yapmak için uzaktan iskemik ön koşullandırma ile kendini korumanın nasıl indüklendiği gibi sinirbilim alanındaki temel soruları yanıtlayabilir. Sıcaklık kayıt yazılımını açın, sıcaklık ayarını 30 ila 35 santigrat derece arasında ayarlayın ve 250 ila 550 gramlık bir sıçan için iki numara yenidoğan kol manşeti kullanarak örnekleme sıklığını her 100 milisaniyede bir ayarlayın, gerekirse bir adaptör kullanarak manşeti fome manometresine bağlayın.Ardından, hava tahliye valfini gevşeterek veya manşet borusunu adaptörden çıkararak manşeti söndürün. Boruda basınç kalmadığından ve manometre iğnesinin oval dikdörtgenin içinde sıfırda durduğundan emin olun. Ardından boru, manometre ve öksürük arasındaki basıncı kontrol etmek için.Manometre 100 miligram cıva okuyana kadar manşeti şişirmek için şişirme ampulünün yumuşak pompalarını kullanın. Basıncın sabit kaldığından emin olduktan sonra, hava karardıktan sonra hava tahliye valfini yavaşça açarak manşeti söndürün ve hayvanı metin protokolüne göre uyarlayın. Yeterli kas olduğunu doğrulamak için üst arka uzuvu sıkıştırarak iyi bir kas tonusuna sahip olduğunu onaylayın.Hayvanı metin protokolüne göre sakinleştirdikten sonra, bacağı uzatarak ve ayağın alt tarafındaki cildi sıkıştırarak anestezi derinliğini kontrol edin. Sonra suni gözyaşı uygulayın. Fareyi, alt ekstremitelerin ayak pedleri yukarı bakacak şekilde yüzüstü pozisyonda bir ısıtma yastığı veya sirkülasyonlu su ısıtıcı borusu üzerine yerleştirin.Deri sıcaklık probunu uygulamak için, iskemiye uğrayacak sıçanın bacağını uzatın ve cilt probunu, sıcaklık probu ile cilt arasındaki teması en üst düzeye çıkaracak şekilde konumlandırarak ayak pedine sıkıca yerleştirin. Ardından probu yapıştırmak için kağıt bant kullanın. Sıcaklık kayıt yazılımındaki sıcaklığı bir ila iki dakika boyunca takip ederek cilt probu yerleşimini kontrol edin.Cilt sıcaklığının 30 ila 34 santigrat derece arasında olduğundan ve sabit kaldığından emin olun. Aksi takdirde, uzak iskemi gerçekleştirmek için probu ayarlayın. Sönük bir manşetle başlayın ve hava basınç valfinin kapalı olduğundan emin olun.Bacağınızı uzatın ve manşeti üst arka bacakta gevşek bir şekilde sarın. Bacağınızı uzatmak için işaret parmağınızı ve başparmağınızı kullanın ve gevşemiş manşeti yerinde tutmak için alt rakamları kullanın. Şimdi, manşet basıncını 160 milimetre cıvaya yükseltin.Doğru basınca ulaşıldığında, zamanlayıcı ve ayak sıcaklığı kayıtlarını başlatın. Beş dakikalık sabit basınçtan sonra ayak sıcaklığı iki santigrat derece düşmeli, istenen manşet basıncını korumak ve iskemi boyunca manşetin hayvanın dizinin üzerindeki konumunu korumak için şişirme ampulünü kısa aralıklarla tekrar tekrar pompalamalıdır. Beş dakika boyunca sürekli olarak uzak iskemi verin.Ardından, uzak iskemiyi tekrarlamadan önce hava basınç valfini beş dakikalık bir reperfüzyon için serbest bırakın. Prosedür tamamlandığında, hava basınç valfini gevşeterek manşet basıncını söndürün. İskemi protokolü boyunca sıcaklık değişimini kontrol edin.Ardından manşeti serbest bırakın. Hayvanı bir ısıtma yastığına yerleştirin ve ambulatuvar olana kadar izlemeye devam edin. Hayvan yürürken, onu yuvaya geri koyun.Son olarak hafif yaralanma gerçekleştirin ve tünel tahlilini gerçekleştirin. Metin protokolüne göre, burada açıkça görüldüğü gibi, diz üzerine yerleştirilen ve 160 milimetre cıvanın üzerine çıkarılan bir kan basıncı manşonu, arka bacaklara giden kan akışını durdurur. Kan akışının olmaması, ayak sıcaklığında, hayvanın çekirdek sıcaklığından daha düşük bir azalmaya neden oldu ve bu, RIP için gerekli koşulla tutarlı olarak manşet söndürüldükten sonra yükseldi.Bu şekilde, normal loş yükseltilmiş bir sıçandan alınan karanlığa uyarlanmış elektroretinogram veya ERG, ışık yaralanmasından bir hafta sonra parlak bir flaşa büyük bir fotoreseptör ve iç retinal yanıt gösterdi. ERG kayıtları, fotoreseptörlerin kaybını yansıtan, kontrollere göre genlikte ciddi bir azalma gösterdi, ancak iskemi fotoreseptörleri ışık hasarından korumadan hemen önce iki ila beş dakikalık bir reperfüzyon protokolü kullanarak arka uzuvyu iskemi ile ön koşullandırdı. Bu panel, R-I-P-E-R-G genliklerinin, A dalgasında hafif bir azalma ile tek başına hafif yaralanmadan daha büyük olduğunu göstermektedir.Son olarak, dizin altına yerleştirilen bir manşet, fotoreseptörleri burada görülen azaltılmış ERG genliklerinde yansıtıldığı gibi ışık yaralanmalarından korumaz. Endojen nöroproteksiyon mekanizmaları nelerdir ve CNS hasarı ve dejenerasyonundan kaynaklanan fonksiyonu iyileştirmek için uzaktan iskemi nasıl uygulanabilir gibi ek soruları yanıtlamak için uzaktan iskemik ön koşullandırma gibi yöntemler uygulanabilir.

remote-limb-ischemic-preconditioning-neuroprotective-technique

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Lazer Doppler perfüzyon sintigrafisi ile iskemi onayı ile tek taraflı hindlimb iskemi indüksiyonu için cerrahi işlem olduğunu göstermiştir.

Murin Model Hindlimb İskemi

Kanıt yoktur birikmektedir, bu iskemik ön (PC) - beyne olmayan bir zarar iskemik meydan okuma - bir sonraki zarar iskemik hasara geçici bir koruma bahşeder. Biz C57Bl6 / J farelerde geçici fokal serebral iskemi (orta serebral arter tıkanıklığı, MCAO neden olduğu) için erken iskemik tolerans (IT) ikna etmek için bir ön hazırlık uyarıcı olarak ikili karotis arter tıkanıklığı (BCCAO) kurdu.

Odak Serebral İskemi Erken İskemik Tolerans tetikleyebilecek bir Yeterli Önkoşullama Uyarıcı olarak bilateral Ortak Karotis Arter Tıkanıklığı

Kaynak: Zheng, Y., et al. Serebral iskemiye karşı asidik son koşullandırmanın nöroproteksiyonunu incelemek için deneysel modeller. J. Vis. Uzm. (2017)Bu video, orta serebral arter tıkanıklığının (MCAO) bir fare modelinde iskemik hasara karşı nöroprotektif etkilerini değerlendirmek için asidik son koşullandırma (APC) uygulamasını göstermektedir. MCAO modelinde reperfüzyonda yer alan adımları ve eksitotoksisite, oksidatif stres ve nöronal ölümü azaltmak için reperfüzyon sırasında APC uygulamasını...

 Serebral İskeminin Bir Fare Modelinde Asidik Postkoşullandırmanın Nöroprotektif Etkilerinin Değerlendirilmesi

Kaynak: Poinsatte, K., et al., Farelerde Tekrarlayan Hipoksik Ön Koşullandırma ve Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyonu Sonrası Nörovasküler Korumanın Niceliklendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, iskemik inmeye neden olmadan önce bir fareyi kontrollü hipoksi döngülerine maruz bırakarak tekrarlayan hipoksik ön koşullandırma (RHP) yöntemini göstermektedir. Deney, kan-beyin bariyeri stabilitesi, nöronal adaptasyon ve iltihaplanma üzerindeki etkilerini değerlendirir.

Farelerde Tekrarlayan Hipoksik Ön Koşullandırmaya Nöronal Adaptasyon

Kaynak: Brandli, A. Uzaktan Ekstremite İskemik Ön Koşullandırma: Kemirgenlerde Nöroprotektif Bir Teknik. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, sistemik nöroproteksiyonu indüklemek için sıçanlarda non-invaziv bir ekstremite iskemik ön koşullandırma protokolünü göstermektedir. Prosedür, koruyucu faktörleri serbest bırakan hücresel stres yollarını tetikleyen kontrollü arteriyel oklüzyon ve reperfüzyonu içerir. Bu faktörler beyin ve retina gibi uzak organlarda iskemik ve metabolik yaralanmalara karşı...

Nöroproteksiyon için Bir Sıçan Modelinde Non-İnvaziv Ekstremite İskemik Ön Koşullandırma

Elektroretinogram (ERG), ışığa tepki olarak retina tarafından üretilen bir elektrik potansiyelidir. Bu yazıda, karanlığa adapte olmuş sıçanlarda retina fonksiyonunu değerlendirmek için ERG'nin nasıl kullanılacağı ve bu durumda uzaktan iskemik ön koşullandırma gibi nöroprotektif bir girişimin değerlendirilmesinde nasıl kullanılabileceği anlatılmaktadır.

Kemirgen Retina ve Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullamanın Koruyucu Etkileri Fonksiyonu Değerlendirmek Üzere elektroretinogram kullanma

Bu protokol, farelerde geçici orta serebral arter tıkanıklığını takiben enfarktüs hacimlerini ve kan-beyin bariyeri bozulmasını azaltan tekrarlayan hipoksik ön koşullandırmayı veya sistemik hipoksiye kısa süreli maruziyetleri tanımlar. Ayrıca, nörovasküler korumanın etkinliğini değerlendirmek için inme sonrası enfarktüs hacminin ve kan-beyin bariyeri bozulmasının ikili miktar tayinini detaylandırır.

Farelerde Tekrarlanan Hipoksik Önkoşullanma ve Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ardından Nörovasküler Koruma Kantitasyonu

İzole sıçan kalbi, iskemi reperfüzyon hasarı için kalıcı bir modeldir. Burada, yerinde aort kanülasyonu, kalbin Langendorff perfüzyonu, simüle edilmiş iskemi-reperfüzyon hasarı ve iskemik hakaretin derecesini doğrulamak için enfarktüs boyama yoluyla bir sıçandan atan kalbin çıkarılması sürecini açıklıyoruz.

Langendorff-perfüze sıçan Hearts indüksiyon ve İskemi-reperfüzyon Hasarı Değerlendirilmesi

Farede arka bacak iskemisinin cerrahi indüksiyonu, anjiyogenezi incelemek için yararlıdır, ancak bu, belirgin iskemiye bağlı doku nekrozu gösteren bazı akraba fare suşlarında tehlikeye girer. Kademeli arteriyel oklüzyonun indüksiyonu yoluyla bu sorunu aşmak için ameroid büzücüler kullanarak subakut ekstremite iskemisini indüklemek için yöntemler açıklanmaktadır.

Akut ve Subakut Fare Arka ayağın İskemi Yöntemleri

Asitik sonrası kondisyonlama serebral işemiye karşı korur. Burada, APC'yi yürütmek için iki model sunuyoruz. Bu in vitro olarak oksijen glikoz yoksunluğu sonra asidik tampon Kortikostriatal dilimleri aktarılarak ve in vivo olarak orta serebral arter oklüzyonundan sonra% 20 CO2 solunması ile sırasıyla gerçekleştirilir.

Serebral İskemiye Karşı Asitik Sonrası Sonrasyonun Sinir Korumasını Çalıştırmak için Deney Modelleri

Bu protokol, farelerde diz altı amputasyonun nasıl yapılacağını ve amputasyonla ilişkili ağrıyı tedavi etmek ve önlemek stratejilerini araştırmak ve amputasyonla ilişkili ağrı mekanizmalarını daha iyi anlamak için hemen hedefli kas reinnervasyonu (iTMR) yapılmasını gösterir.

Fare Arka Diz Altı Amputasyon Modeli ve Hemen Hedeflenmiş Kas Reinnervasyonu

Öğrenin, sıçan arka ekstremitesinde uzaktan iskemik önkoşullama ile retina gibi uzak dokuları ışık hasarına karşı nasıl koruyacağınızı. Bu minimal invaziv yöntem, endojen nöroprotektif mekanizmaları çalışmak için güvenilir bir model sunar.

Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullanma: Kemirgenler Bir Nöroprotektiftir Tekniği

Daha fazla video keşfet