Name: Sıçan Optik Sinir içine Enjeksiyon için minimal invaziv Tekniği (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 34 s
Description: Öğrenin, sıçan optik sinirine minimal invaziv enjeksiyon tekniğini. Bu yöntem, ilaç veya kök hücre enjeksiyonu için cerrahi komplikasyonları azaltır ve rejeneratif nöroloji araştırmalarında hızlı iyileşme sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma NeuralStem, Inc. ve Johns Hopkins Project RESTORE tarafından desteklenmiştir.

NOT: Bütün hayvan prosedürleri Johns Hopkins Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi. Anestezi makineleri gerektiği şekilde yıllık muayene ve kalibrasyonu gerektirir. 1. Anestezi ve Konumlandırma <ol><li> Anestezi. <ol><li> % 2-3 isofluorane ile anestezi altında tüm cerrahi prosedürleri gerçekleştirin. Ayak tutam ve solunum hızı ile anestezi uygun seviyede onaylayın. Sıçan, bir ayak tutam yanıt korkmak olmadığını kontrol edin. NOT: Bir &#39;deki kaçınma çok geç anestezi belirtir ve başlamadan önce uzun anestezi veya daha yüksek isofluorane konsantrasyon gerektirebilir. Her 2 sn anestezi gösteren çok yavaş 1 nefes az bir solunum hızı çok yüksek ve isofluorane konsantrasyon aydınlatma gerektirebilir. </li><li> İşlem sırasında baş hareketi önlemek için gerekli hayvan sabitleyin. Cerrahi göz lidokain bir damla yerleştirin. Anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için yapay gözyaşları her 10 dakikada kullanın. Vermek0.01 mg / kg SC Ameliyat öncesi ve daha sonra, her 6-8 saatte bir buprenorfin bir enjeksiyon gerektiği gibi. </li></ol></li><li> Konumlama. <ol><li> Bir stereotaksik çerçeveye fareleri yerleştirin ve bir ısıtma yastığı ile sıcak tutmak. Gözleri maruz kalmaktan kaçınmak için alkol alarak özenle kafa derisi kürk ıslatın. Post-operatif enfeksiyon riskini en aza indirmek için steril alet ve steril tekniği kullanın. </li></ol></li></ol> 2. Göz Kontrolü <ol><li> Lateral konjonktivada 4-0 dikiş yerleştirin ve nazik çekiş izin verecek yeterli sütür ile kravat. </li></ol> 3. Diseksiyon <ol><li> İlk Diseksiyon. <ol><li> . Şekil 1&#39;de gösterildiği gibi bir boyutu 10 neşter kullanılarak orbita sırt örten deride ~ 1 inç kesi yapmak cilt ve altta yatan fasya çekin ve dikkatlice fasya uzak teşrih. Cerrahi içine aşırı kanama önlemek için, fasya diseksiyon sırasında kan damarları kesme kaçının. Pl stratejik kullanınaced pamuk ipuçları hemostazı sağlamak. </li></ol></li><li> Derin Diseksiyon. NOT: Aşağı ve soketten göz çekerek konjonktiva nazik çekiş ile superior orbital kas görünümüne girecek. Optik sinir açığa çıkarmak amacıyla, bu kas kesilmiş ve retro-orbital yağ çıkarılmalıdır. yağ atılır ve enjeksiyondan sonra değiştirilmesi gerekir. Bu noktadan sonra, optik sinir kaplaması dura sarılmış kan damarları (Şekil 1) ile birlikte, optik sinir kendisi bir paket olarak görünür olmalıdır. <ol><li> Daha az travmatik piercing yapmak için neşter veya 31 göstergesi Eğimli iğne kullanılarak dura küçük bir kesi yapmak. </li></ol></li></ol> 4. Pipet Enjektör <ol><li> 50-100 um bir çapa, bir cam mikropipet çekin. Stabilite temin etmek için, bir mikromanipülatör mikropipet mount ve bir enfüzyon pompasına bağlı bir Hamilton şırınga ekleyin. </li><li> Boncuk yukarı çekin (veya kök hücreleri)önce ve sonra metil mavi çözelti, 0.5 ul hacim ile birlikte retrograd mikropipet bir 0.5-1.0 ul hacim içinde yeniden. NOT: min başına 0.5-2 ul ayarlanmış bir infüzyon hızı optik sinir travma engeller. </li></ol> 5. Enjeksiyon <ol><li> Sadece tırtıklı dura üstünde optik sinir üzerine mikropipet ucu düşürün. NOT: En az hasara optik sinir sonuçlarına cam ucu bir küçük, ama tempolu hareket. Infüzyon pompası başlarken, metil mavi boya enjekte optik sinir alanını vurgulamak gerekir. boya subaraknoid dışarı sızdıran olmadan optik sinir içinde lokalize kalmalıdır. </li><li> Kök hücre enjeksiyonu tamamlandığında belirlemek ve metil mavisi ikinci doz enjekte edilir olarak infüzyon pompası kapatmak için metil mavisi ikinci grup takip edin. Yüksek önlemek için enjekte her 1 ul hacmi için 2 dakika süreyle optik sinir içinde hala mikropipet tutunmikropipet geri çekilmesi üzerine basınç ejeksiyon. NOT: Alternatif bir yaklaşım elle manipüle edilebilir bir hava dolu şırınga pipet bağlamaktır. Her iki şekilde de, optik sinirlere zararı en aza indirmek için aşırı güç kaçının. Her optik sinir hacminin en fazla 2 ul enjekte öneririz. </li></ol> 6. Takip <ol><li> Hemen. <ol><li> Enjeksiyon tamamlandığında, hemostaz sağlamak için kullanılan herhangi bir pamuk ipuçları ile birlikte mikropipet çıkarın. 3-0 ipek ile cildi dikin ve konjonktiva dikiş çıkarın. </li><li> Anestezi ortaya kadar ısıtma yastığı sıcak sıçan tutun. Bu sternal yatma korumak için yeterli bilinci yerine kadar gözetimsiz bir hayvan bırakmayın. Tamamen iyileşene kadar diğer hayvanların şirkete ameliyat geçirmiş bir hayvan iade etmeyin. </li><li> Hayvan, aşırı uyuşukluk, ataksi, ya da yorucu nefes dahil ağrı belirtileri sergileyen iseg, günde üç kereye kadar kas içi buprenorfın (0.05 mg / kg) ile ilgili analjezi yönetmek. </li></ol></li><li> Uzun dönem. <ol><li> Gelecek 24-48 saat için, şişlik veya akıntı yara veya vokalli, kambur bir görünüm, sigara damat ya da yemek olarak değil ağrı diğer belirtileri de dahil olmak üzere cerrahi komplikasyonlar için sıçan gözlemleyin. Gerektiği gibi bir veteriner ya da etik ötanazi ile istişare düşünün. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Dahlmann-Noor, A., Vijay, S., Jayaram, H., Limb, A., Khaw, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+approaches+and+future+prospects+for+stem+cell+rescue+and+regeneration+of+the+retina+and+optic+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+journal+of+ophthalmology+Journal+canadien+d%27ophtalmologie%22%5BJournal%5D)">Current approaches and future prospects for stem cell rescue and regeneration of the retina and optic nerve.</a> Canadian journal of ophthalmology Journal canadien d'ophtalmologie. 45 (4), 333-341 (2010).</li>
<li>Quigley, H. A., Iglesia, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cells+to+replace+the+optic+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Eye%22%5BJournal%5D)">Stem cells to replace the optic nerve.</a> Eye. 18 (11), 1085-1088 (2004).</li>
<li>Ghaffarieh, A., Levin, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optic+nerve+disease+and+axon+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22International+review+of+neurobiology%22%5BJournal%5D)">Optic nerve disease and axon pathophysiology.</a> International review of neurobiology. 105, 1-17 (2012).</li>
<li>Fukui, Y., Hayasaka, S., Bedi, K. S., Ozaki, H. S., Takeuchi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+study+of+the+development+of+the+optic+nerve+in+rats+reared+in+the+dark+during+early+postnatal+life%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+anatomy%22%5BJournal%5D)">Quantitative study of the development of the optic nerve in rats reared in the dark during early postnatal life.</a> Journal of anatomy. 174, 37-47 (1991).</li>
<li>Celestre, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+approaches+to+the+cervical+spine%5BTitle%5D)+AND+%22The+Orthopedic+clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive approaches to the cervical spine.</a> The Orthopedic clinics of North America. 43 (1), 137-147 (2012).</li>
<li>Hallas, B. H., Wells, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Technique+for+Multiple+Injections+into+the+Mammalian+Optic+Nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Kopf+Carrier%22%5BJournal%5D)">A Novel Technique for Multiple Injections into the Mammalian Optic Nerve.</a> Kopf Carrier. 54, (2001).</li>
<li>Harvey, A. R., Hellstrom, M., Rodger, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+and+transplantation+in+the+retinofugal+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+brain+research%22%5BJournal%5D)">Gene therapy and transplantation in the retinofugal pathway.</a> Progress in brain research. 175, 151-161 (2009).</li>
<li>Adachi-Usami, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optic+neuritis--from+diagnosis+to+optic+nerve+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nippon+Ganka+Gakkai+zasshi%22%5BJournal%5D)">Optic neuritis--from diagnosis to optic nerve transplantation.</a> Nippon Ganka Gakkai zasshi. 104 (12), 841-857 (2000).</li>
<li>Slater, B. J., Vilson, F. L., Guo, Y., Weinreich, D., Hwang, S., Bernstein, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optic+nerve+inflammation+and+demyelination+in+a+rodent+model+of+nonarteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Optic nerve inflammation and demyelination in a rodent model of nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 54 (13), 7952-7961 (2013).</li>
<li>Zarbin, M. A., Arlow, T., Ritch, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+nanomedicine+for+vision+restoration%5BTitle%5D)+AND+%22Mayo+Clinic+proceedings%22%5BJournal%5D)">Regenerative nanomedicine for vision restoration.</a> Mayo Clinic proceedings. 88 (12), 1480-1490 (2013).</li>
</ol>

Yazarların bildirecek anlamlı bir açıklaması yoktur.

Kök hücrelerin optik sinire doğrudan enjeksiyonu veya rejenerasyonu kolaylaştırmayı amaçlayan diğer ürünler, CNS'ye yapılan diğer enjeksiyon yöntemlerine kıyasla uygun bir model sağlar. Bu teknik daha az zaman alır, daha az toplam anestezi gerektirir, kafatası veya kemik dokusunun delinmesini veya çıkarılmasını önler, komplikasyon oranlarını azaltır ve ameliyat sonrası daha hızlı iyileşme sağlar. 
Bu protokoldeki en kritik adımlar şunları içerir: 1. Optik sinir demetinin net bir şekilde görünt...

Optik sinir merkezi sinir sistemi (MSS) gibi optik nevrit, glokom ve travma olarak göz koşullar da dahil olmak üzere rejeneratif araştırma için ideal bir konum sağlar. Kök hücrelerin çeşitli enjeksiyonları ya aksonal sayısı artan ve / veya dejeneratif hastalıkların önlenmesi, etkinlik göstermiştir veya kayıp miyelin değiştirilmesi söz göstermiştir. 1,2 insan optik sinir yaklaşık 3.0-3.5 mm&#39;lik bir çapa sahip kiazmada retinadan seyahat eden yaklaşık 1.200.000, paralel aksonlar içerir. 3 Laboratuarda insan hastalıklarının modellemek için, sıçan sık kullanılmaktadır. yetişkin sıçan optik sinir yaklaşık 0,5 mm çapında içinde yaklaşık 100.000 aksonlar içerir. MSS önemli sınırlamalar 4 biri rejeneratif araştırma direkt kemiksiz erişimi olduğunu. Hayvan komplikasyonlar ve cerrahi riskler kafatası veya omurlar kaldırıldığında yüksektir. Faydaları Benzeromurgada minimal invazif yaklaşımlar, kafatası teklif azaltılmış komplikasyonları ve daha hızlı bir toparlanma açmadan 5 direk optik sinir enjeksiyonları. Bu teknik daha önceki çalışmalarda kullanılmıştır. 6 Bu yazıda ve beraberindeki video, sıçan optik sinir içine kök hücreler enjekte etmek için minimal invaziv prosedür göstermek.

<table><tbody><tr><td>Lewis sıçan</td><td>Charles Nehri</td><td>4</td><td>Herhangi bir sıçan türü işe yarayacaktır.</td></tr><tr><td>Anestezi makinesi</td><td>Surgivet</td><td>CDS9000</td><td>CDS 9000 Küçük Hayvan Anestezi Makinesi - Direk Montajlı</td></tr><tr><td>İnfüzyon pompası</td><td>Stoelting</td><td>53129</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon mikroskobu</td><td>Ulusal Optik</td><td>409-411-1105</td><td></td></tr><tr><td>Fiber optik ışık kaynağı</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-562-21</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon ve Stereotaksik Alet</td><td>Çalma</td><td>51400</td><td></td></tr><tr><td>Pipet Çektirme</td><td>Kopf</td><td>750</td><td></td></tr><tr><td>Pipetler</td><td>Dünya Hassas Aletleri</td><td>18150-6</td><td></td></tr><tr><td>Tek kullanımlık neşter bıçakları</td><td>Harvard Aparatı</td><td>810-15-021</td><td></td></tr><tr><td>İridektomi makası</td><td>Elektron Mikroskobu Bilimleri</td><td>Uniband LA-4XF</td><td></td></tr></tbody></table>

sıçan optik sinir içine enjeksiyon için minimal invaziv tekniği

Minimally-invasive Technique for Injection into Rat Optic Nerve

Sıçan optik siniri, kök hücre rejenerasyon araştırmaları için yararlı bir modeldir. Sıçan optik sinirine doğrudan enjeksiyon, kemik çıkarılması olmadan minimal invaziv bir ameliyatla merkezi sinir sistemine doğuma izin verir. Bu teknik, orbital sırttan minör fasyal diseksiyonu takiben, gözü nazikçe aşağı ve dışarı çekmek için konjonktival traksiyon sütürü kullanılarak optik sinirin görselleştirilmesi ve doğrudan enjeksiyonu için bir yaklaşımı tanımlar. Enjekte edilen bir optik sinirin temsili örnekleri, boyalı boncukların başarılı bir şekilde enjekte edildiğini göstermektedir.

Deneyin sonunda, sıçanlar kurban edilmiş ve% 4 paraformaldehit ile perfüze. Optik sinirler dikkatli bir şekilde kesilir ve kriyostat bölümlere ayırma için monte edilmiştir. 2 Evans mavisi sitesi görselleştirmek için enjekte edilmiş, düşük güçte bir fare, tüm optik sinirin bir örneğini göstermektedir. ok enjeksiyon kesin konumunu tanımlar. Sinirden boya sınırlı difüzyon ile gösterildiği gibi bu diseksiyon enjeksiyonu bir kaç dakika içinde yapıldı. Diğer enjeksiyon olarak, birkaç saatlik ...

Sıçan optik sinirine doğrudan enjeksiyon, rejeneratif araştırmalar için yararlıdır. Kafatasının açılmasını içermeyen bir sıçan optik sinirine doğrudan enjeksiyon için minimal invaziv bir teknik gösteriyoruz. Bu yöntem kullanılarak cerrahi komplikasyonlar en aza indirilir ve iyileşme daha hızlı olur.

Sıçan Optik Sinir içine Enjeksiyon için minimal invaziv Tekniği

The rat optic nerve is a useful model for stem cell regeneration research. Direct injection into the rat optic nerve allows delivery into the central ...

Bu prosedürün genel amacı, canlı bir sıçanın optik sinirine ilaç veya kök hücre enjekte etmek için minimal invaziv bir yaklaşım sağlamaktır. Bu işlem, öncelikle sıçanın anestezi altına alınması, diseksiyon standına yerleştirilmesi ve gözü manipüle edebilmek için konjonktivaya bir sütür yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir. Daha sonraki ikinci adım, optik siniri açığa çıkarmak için gözün arkasındaki orbital sırtın diseksiyonunun yapılmasıdır.Ardından, cam pipet optik sinire yerleştirilir ve cerrahi bölge kapatılıp sıçan anesteziden uyandırılmadan önce ilaç veya kök hücreler enjekte edilir. Son olarak, belirli bir süre sonra sıçan sakrifiye edilir, optik sinir diseke edilir ve cerrahi enjeksiyonun veya transplantasyonun etkileri mikroskopi ile görselleştirilebilir. Bu tekniğin mevcut yöntemlere göre temel avantajı, yaklaşımın minimal invaziv olması ve sıçanın ihtiyacınız olduğu süre boyunca hayatta kalmasına olanak tanımasıdır.Cerrahi enjeksiyonun veya transplantasyonun etkilerini inceleyin. Prosedürü, laboratuvarımdaki öğrenci teknisyen Kate Schwartz uygulamalı olarak gösterecektir. Tüm cerrahi işlemleri %2 ila %3 izofluran anestezisi altında gerçekleştirin.Uygun anestezi seviyesi, ayak parmağı sıkıştırma testi ve solunum hızı ile teyit edin. Sıçanların ayak parmağı sıkıştırılmasına karşı tepki vermediğinden emin olun. İşlem sırasında baş hareketini önlemek için hayvanı gerektiği şekilde sabitleyin.Ardından cerrahi işlem yapılacak göze bir damla lidokain damlatın. Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için her 10 dakikada bir suni gözyaşı kullanın. Preoperatif olarak 0.01 mg/kg buprenorfin deri altına enjekte edin ve ardından ihtiyaç duyuldukça her altı ila sekiz saatte bir uygulamaya devam edin.Isıtıcı ped kullanarak hayvanı sıcak tutun. Kafa derisindeki tüyleri alkolle ıslatın. Gözlere temas etmemesine dikkat edin.Postoperatif enfeksiyon riskini en aza indirmek için steril aletler ve steril teknik kullandığınızdan emin olun. Ardından, lateral konjonktivaya 4-0 bir sütür yerleştirin ve hafif traksiyon sağlamak için yeterli uzunlukta düğümleyin. Orbital ridge üzerindeki deride yaklaşık bir inçlik bir insizyon yapın.10 numara bir bistüri kullanarak deriyi ve altındaki fasyayı geri çekin ve fasyayı dikkatlice diseke edin. Cerrahi sahaya aşırı kanama olmasını önlemek amacıyla, üst orbital kesenin açığa çıkmasını sağlamak için geri çekilen deriye bir sütür atın.Fasyayı diseke ederken kan damarlarını kesmekten kaçının. Konjunktiva üzerinde nazik bir traksiyon uygulanarak göz aşağı ve soketten dışarı çekildiğinde, superior orbital kas görünür hale gelecektir. Optik siniri açığa çıkarmak için retroorbital yağ dokusu temizlenmeli ve bu kas kesilmelidir.Yağ dokusu atılabilir ve enjeksiyondan sonra yerine konulmamalıdır. Bu noktadan itibaren optik sinir fasyası, dura ile sarılmış kan damarlarıyla birlikte, optik sinirin kendisinden oluşan bir demet olarak görülmelidir. Daha derin diseksiyonu gerçekleştirmek için, bistüri kullanarak veya delme işleminin daha az travmatik olması için 31 gauge eğimli bir iğne kullanarak DRA'da küçük bir insizyon yapın; stabilite sağlamak amacıyla çapı 50 ile 100 mikron arasında olan, önceden hazırlanmış çekme cam mikro pipet kullanın.Mikropipeti bir mikromanipülatöre monte edin ve 20 cc'lik plastik bir şırıngaya bağlayın. Cam pipete boya doldurulmadan önce ve sonra, 0,5 µL metil mavisi çözeltisi ile birlikte, 0,5 ile 1 µL arasında rekonstitüe edilmiş boncukları veya kök hücrelerini mikropipete retrograd olarak çekin. Bir cc'lik şırınga ve 30 gauge iğne kullanarak, mikropipetin ucunu çentikli duranın hemen üzerindeki optik sinirin üzerine indirin.Piston üzerine yavaş ve sabit basınç uygulanırken, cam ucun optik sinire yapılan küçük ancak hızlı bir hareketi, en az hasarla sonuçlanır. Evans mavisi boyası, enjekte edilen optik sinir bölgesini belirginleştirmelidir. Boya, subaraknoid boşluğa sızmadan optik sinir içinde lokalize kalmalıdır.Kök hücre enjeksiyonunun tamamlandığını belirlemek için Evan's Blue Boyasının ikinci bandını takip edin. Gerekli hacim optik sinire enjekte edildiğinde pistonu bırakın. Enjeksiyon tamamlandığında mikropipetin geri çekilmesi sırasında oluşabilecek yüksek basınçlı geri akışı önlemek için mikropipeti beş dakika boyunca optik sinirin içinde sabit tutun.Hemostaz sağlamak için kullanılan pamuklu uçlar ile birlikte mikro pipeti çıkarın. Cildi 3.0 ipek sütür ile dikin ve konjonktival sütürü çıkarın. Sıçanlar anesteziden çıkana kadar ısıtıcı ped üzerinde sıcak tutun.Hayvan, sternal recumbent pozisyonunu koruyabilecek düzeyde yeterli bilince kavuşana kadar gözetimsiz bırakılmamalıdır. Hayvan; aşırı letarji, ataksi veya solunum güçlüğü dahil olmak üzere ağrı belirtileri gösteriyorsa, günde üç kez kadar intramüsküler buprenorphine ile uygun analjezi uygulayın. Deneyin ardından sıçanlar sakrifiye edilmiş ve paraldehit ile perfüze edilmiştir.Optik sinirler dikkatle diseke edildi ve kriyostat kesitleri için monte edildi; burada Evan's blue boyasının enjekte edildiği bir sıçan optik sinirinin düşük büyütmedeki bir örneği gösterilmektedir. Enjeksiyon bölgesini görselleştirmek için, ok enjeksiyonun tam konumunu belirtmektedir. Boyanın sinir boyunca kısıtlı difüzyonundan anlaşıldığı üzere, bu diseksiyon enjeksiyondan birkaç gün sonra gerçekleştirilmiştir.Bu teknik, rejeneratif nöroloji alanındaki araştırmacıların, demiyelinizan hastalıkların bu sıçan modelinde optik siniri yeniden oluşturmak ve potansiyel olarak kaybolan görme yetisini geri kazandırmak için yeni yollar keşfetmelerine zemin hazırlamıştır.

minimally-invasive-technique-for-injection-into-rat-optic-nerve

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Intravitreal enjeksiyon, göz hastalıkları veya lokal tedavi doğrudan uygulama olarak görsel bilimler araştırma yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. Bu video cam pipet yardımıyla 1 ml şırınga kullanarak intravitreal enjeksiyon için bir protokol gösterdi. Masif kanama ve lens hasarı önlemek konusunda yararlı ipuçları verilmiştir.

Oküler Hastalıkları Model kurulması için intravitreal enjeksiyon

Optik Sinir transeksiyonu yetişkin MSS yaralanma yaygın olarak kullanılan bir model. Bu model, küresel retina hedef ya da doğrudan hedef, retina ganglion hücrelerinin yaralı nöronal nüfus bir dizi deneysel manipülasyon yapmak için idealdir.

Memeli MSS Optik Sinir transeksiyonu sonra Deneysel İşlemler Yöntemleri

Bu video, anestezi uygulanmış bir hayvanda optik sinire cerrahi olarak erişme ve fokal demiyelinizasyonu indüklemek için hassas bir şekilde lizolesitin verme prosedürünü göstererek daha fazla çalışma için nöropatolojik koşullar yaratır.

Lisolesitin kullanılarak optik sinirde lokal demiyelinizasyonun indüklenmesi

Subretinal enjeksiyonlar, proteinler ve viral vektörler gibi büyük terapötik ajanları fotoreseptörlere ve retina pigment epiteline iletmek için en yaygın tekniktir. Farelerde, minimum ikincil hasar ve hızlı iyileşme süreleri ile subretinal boşluğu başarılı bir şekilde hedefleyen alternatif bir yöntem burada açıklanmaktadır.

Subretinal Space erişim için bir alternatif ve Onaylı Enjeksiyon Yöntemi<i&gt; yoluyla</i&gt; Bir transkleral Posterior Yaklaşım

Bu protokol, yenidoğan dönemi boyunca sıçanlarda ve farelerde kullanılabilecek tekrarlanabilir bir venöz uygulama yolunu göstermeyi amaçlamaktadır. Bu prosedür, öncelikle intravenöz uygulama kullanarak yenidoğan bakım ünitelerinde ilaç uygulamasını yansıtmak isteyen klinik öncesi kemirgen çalışmaları için önemlidir.

Retroorbital Ven Enjeksiyonunun Yenidoğan Kemirgen Modeli

Bu protokol, merkezi bir kornea insizyonu ve ön kamaraya uzun bir tünel kullanılarak sıçanlarda intrakameral enjeksiyon için bir tekniği tanımlar. Bu enjeksiyon yöntemi, yanlışlıkla doku hasarına neden olma riskini en aza indirir ve böylece hassasiyeti ve tekrarlanabilirliği artırır.

Yan Etki Riski Düşük Olan Sıçanlarda İntrakameral Enjeksiyon

Sıçanlarda doğrudan vagus siniri enjeksiyonu için bir protokol sunuyoruz ve enjeksiyon sonrası komplikasyonlar olmadan doğrudan sinir içine ilaç verilmesini sağlıyoruz. Bu yöntem, otonom sinir sistemi manipülasyonunu içeren klinik öncesi nörolojik çalışmalar için geçerlidir. Sıçanlarda ve diğer türlerde diğer sinirler için gerekli modifikasyonlarla doğrudan sinir enjeksiyonu için kullanılabilir.

Sıçanlar İçin Doğrudan Vagus Sinir Enjeksiyon Protokolü

Bu protokol, enjeksiyonlar için sıçan optik sinirine erişmek için transkonjonktival bir yaklaşım kullanan benzersiz bir tekniği tanımlar.

Sıçan Optik Sinirine Enjeksiyon için Transkonjonktival Yaklaşım

Bu çalışma, terapötiklerin yetişkin sıçanın retina ve optik sinirlerine verilmesi için bir metodoloji sunmaktadır. Ek olarak, yetişkin bir sıçanda optik sinir ve retinanın yukarıdan aşağıya blok koleksiyonu için benzersiz bir doku elde etme yöntemi tanıtılmıştır.

Erişkin Sıçanlarda Oküler Terapötik Uygulama ve İleri Doku Alımı

Subretinal enjeksiyonlar, fotoreseptör ve RPE hastalıkları için terapötiklerin klinik öncesi gelişimi için vazgeçilmez bir tekniktir. Farelerde intraoperatif başarı oranlarını artıran ve retina hasarını en aza indiren optimize edilmiş bir transskleral subretinal enjeksiyon tekniğini tanımladık.

Farede Optimize Edilmiş Minimal İnvaziv Transskleral Subretinal Enjeksiyon Tekniği

Öğrenin, sıçan optik sinirine minimal invaziv enjeksiyon tekniğini. Bu yöntem, ilaç veya kök hücre enjeksiyonu için cerrahi komplikasyonları azaltır ve rejeneratif nöroloji araştırmalarında hızlı iyileşme sağlar.

Sıçan Optik Sinir içine Enjeksiyon için minimal invaziv Tekniği

Daha fazla video keşfet