Name: Telafi Akciğer Büyüme Fare Pnömonektomi Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: Öğrenin fare pnömonektomi modeliyle telafi akciğer büyümesini incelemeyi. Bu yöntem sol akciğerin çıkarılması ve sağ akciğerin büyümesinin gözlemlenmesiyle akciğer rejenerasyon mekanizmalarını araştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, yardımları için Cincinnati Çocuk Hastanesi Veterinerlik Hizmetleri Bölümü'ne teşekkür eder. Bu el yazması Ulusal Sağlık Enstitüleri K12 HD028827 tarafından desteklenmiştir. Anna Perl, PhD, yazarlara bu cerrahi prosedürü öğretti.

NOT: Hayvan kullanım bildirimi: Bu çalışmada tüm işlemler onay ve Cincinnati Çocuk Hastanesi Kurumsal Hayvan Kullanımı ve Bakımı Komitesi (IACUC) yönergeleri takip gerçekleştirilmiştir. Sekiz hafta yaşında C57BL / 6J erkek fareleri, Jackson Laboratories&#39;den (Bar Harbor, ME) elde edilir ve kullanımdan önce bir hafta boyunca ortama alışmaları sağlandı. Cerrahi kadar, hayvanlar patojen madde içermeyen bir yere yerleştirilmesi ve otoklavlanmıştır yemi ve süzüldü suyu ad libdium sağlandı. Her fare kafesi özel hava ve su ile sağlanan ve odalar 12 saat gece-gündüz döngüsü tutuldu. Cerrahi işlemden sonra, fareler, süzüldü üstleri ile kafeslerde muhafaza otoklavlanmış yemi farelere istenildiği kadar mesafede, ve bir su şişesinden su süzüldü sağlandı. Araçların 1. Hazırlık <ol><li> Ataç ve işaretçilerine kullanılarak 6 cilt Ekartörleri olun. Büküm kağıt pim Shanks üzerine ataç doğruldu, lbir ucunda bir 5 cm&#39;lik tek bir çelik tel eave ve telin ucunda tek bir 0.5 cm&#39;lik bir &quot;U&quot; şekilli bir kancayı olun. </li><li> Plastik wrap kullanarak bazı 15 x 15 cm kare cerrahi perdeler olun. Fare başına bir pansuman hazırlayın. Her şal arasında bir kağıt kule koyun. </li><li> 12 x 12 inç mantar fayans, gazlı bez ve pamuklu çubuklar bir yığını ile birlikte tüm cerrahi aletler sterilize. </li></ol> 2. Fare Hazırlama <ol><li> % 2 izofluran ile anestezi neden olur. Hayvan tartılır. </li><li> Özel cerrahi hazırlık alanında elektrik tıraş sol toraks ve boyun alanı tıraş. </li><li> Farenin gözlerine yapay gözyaşı merhemi bir damla uygulayın. </li><li> Klorheksidin ve izopropil alkol ile boyun ve sol toraks arındırın. Iki kez daha tekrarlayın. </li></ol> 3. Fare Oro-trakeal entübasyon ve Mekanik Ventilasyon <ol><li> Steril olmayan bir cerrahi teknisyen yerde önceden ısıtılmış cerrahi alanında fare sırtüstü var.</li><li> Pençe tutam yanıt eksikliği belgeleyerek anestezi derinliği onaylayın. </li><li> Cerrahi kıyafetleri, maske, şapka ve ellerini yıkama ve donning sonra, steril cerrahi eldiven yok. </li><li> Dökümlü ve aseptik teknik kullanılarak sonra, gırtlak maruz ön orta boyun üzerinde 1 cm&#39;lik dikey kesi yapmak. Hafif kavisli, tırtıklı 10 cm forseps ile kayış kasları geri çekin ve düz makas ucu ile kayış kasları yayarak gırtlak ve trakea maruz. </li><li> Oral orta trakea (Şekil 1A) içine 22 G künt uçlu angiocatheter yerleştirin ve görsel yerleştirme (Şekil 1B) onaylayın. Anestezi koruyun ve kemirgen ventilatör ile (inme başına 225 ul; min başına 200 Stokes)% 1-3 izofluran kullanarak havalandırın. 15 cm H2O bir basınç sınırını ayrılmadan </li></ol> 4. Fare Pnömonektomi <ol><li> Farenin arka bakacak sağ lateral dekübit pozisyonunda fare LayOperatör (sol taraf yukarı). Steril örtü olarak kendi kendine kapanan plastik wrap kullanın. Drape ile kesme, 4. ve 5. interkostal aralıktan kaburga 2 cm uzunluğunda kesilmiş paralel hale getirmek için künt uçlu kavisli makas kullanın. Kör uç kavisli makas yerleştirin ve alttaki kaburga ve interkostal kasların uzak cildi teşrih. </li><li> Bir kare 1.5 x 1.5 cm cerrahi pencere (Şekil 2A) maruz dört toplayıcıları ile cildi geri çekin. Mantar kuruluna Ekartörleri sabitleyin. </li><li> Kavisli bir forseps kullanarak kaburga aşağı incelemek ve göğüs boşluğu girmek için kavisli bir forseps bir ucunu kullanın. </li><li> Künt ucu mikro-makas kullanarak, göğüs boşluğu girmek için alt bıçak kullanın. Ters yönde kaburga ve tekrarı arasında 0,5 cm&#39;lik kesi yapmak. </li><li> Kalan iki Ekartörleri kullanarak, ön-arka eksen ve mantar pano (Şekil 2B) Retraktörler güvenli olarak toraks açın. </li> &lt;Sol pulmoner arter ve bronş (Şekil 3A, B) maruz kadar sol elinde kavisli künt uçlu forseps kullanarak li&gt; torakotomi ile yanal ve inferior sol akciğer üst kısmını sol akciğer kavramak ve yerinden. </li><li> Avuç aplikatör ve avuç (Şekil 3C) uzak işaret kavisli ucu gövdesi ile sağ elinde yüklü titanyum vasküler mikroklip aplikatör Holding, sol arka yönü eğrilik boyunca toraks içine aplikatör ucu kaydırın Akciğer ve bronşları sol ve pulmoner arter (Şekil 3D) klip. </li><li> Aplikatör çıkarın ama geri sol akciğer tutun. Sağ eli ile künt ucu mikro-makas kavrayın ve klibe bronşları ve pulmoner arter distalinde kesilir ve sol akciğer (Şekil 3E) çıkarın. </li><li> Kaburga Ekartörleri çıkarın. </li><li> İncisi aşağı cilt 1 cm kadar çimdik kavisli künt forseps kullanındeğil, diyafram seviyesinden ve deri yoluyla ve sol göğüs boşluğunda (Şekil 4A, B) 24 G angiocatheter yerleştirin. </li><li> Göğüs boşluğu kapatmak için 4 th yaklaşık iki kesintiye sütür ve 5 inci kaburga yerleştirmek için 5-0 prolen sütür kullanın. </li><li> Cilt Ekartörleri çıkarın. Kesi uzunluğu boyunca cildi yaklaştığı ve cilt kapalı tutkal forseps iki takım kullanın. </li><li> Angiocatheter 3 ml&#39;lik luer-lock şırınga bağlayın ve nazik vakum uygulayarak ve angiocatheter çekerek artık havayı çıkartın. </li><li> Boyun kesi daha önce olduğu gibi forseps iki takım kullanılarak kapalı Tutkal. </li></ol> 5. Fare Sham Pnömonektomi <ol><li> &quot;Fare Pnömonektomi&quot; protokolde belirtildiği gibi sol akciğer Açığa. Sol göğüs boşluğuna hava girmesini sağlamak için kavisli künt forseps ile göğüs kafesini kaldırın (Şekil 5A, B). </li><li> Sol tho içine 24 G angiocatheter yerleştirinSol akciğerin kesmemeye özen yukarıdaki gibi Toraks boşluğu. </li><li> 5-0 prolen sütür kullanarak ve akciğer (Şekil 5C) delinme dikkatli olmak, 3. / 4 th içine dikiş materyali iki uzunlukları ve 5. / 6. kaburga aralar (Şekil 5D) yerleştirin. Sol akciğer herniasyonu risklerini azaltmak için ipe önce dikiş materyali her iki uzunlukları yerleştirin. İki kesintiye dikiş (Şekil 5E) yapmak için sütür materyali bağlayın. </li><li> Torasik kesi üzerindeki deriyi Tutkal, angiocatheter ile artık havayı kaldırmak ve yukarıdaki gibi boyun kesi tutkal. </li></ol> 6. Resüsitasyon, Analjezi ve Kurtarma <ol><li> Izofluran kapatın ve buprenorfın 0.1 mg / kg yönetmek ve serum fizyolojik subkutan 0.5 ml. </li><li> Spontan solunum frekanslarında devam zaman, endotrakeal tüp kaldırmak. </li><li> Tekrar ayaktan kadar fareyi gözlemleyin. Tipik resum YürüyüşEndotrakeal tüp çıkarılmasından sonra birkaç dakika es. </li><li> / N O kurtarmak için bir 27 ° C inkübatör (nemlendirilmiş,% 25 oksijen) fare yerleştirin. NOT: Biz ameliyat sonrası ilk 24 saat için kafes katta su ile ıslatılmış yem birkaç topakları yerleştirin. </li><li> Ameliyat sonrası, günde iki kez, üç gün boyunca intraperitonal enjeksiyon ile buprenorfin, 0.1 mg / kg uygulayın. Hayvanları tutarken cerrahi siteyi açmak için özen gösterin. </li></ol> 7. Fare İzleme <ol><li> Ameliyat sonrası 1, 3, 5 ve 7 gün sonra fareler tartılır. </li></ol>

<ol><li>Strueby, L., Thebaud, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+bronchopulmonary+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+review+of+respiratory+medicine%22%5BJournal%5D)">Advances in bronchopulmonary dysplasia.</a> Expert review of respiratory medicine. , (2014).</li>
<li>Donn, S. M., Sinha, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+understanding+and+management+of+bronchopulmonary+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+fetal+%26+neonatal+medicine%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the understanding and management of bronchopulmonary dysplasia.</a> Seminars in fetal & neonatal medicine. 14, 332(2009).</li>
<li>Molen, T., Miravitlles, M., Kocks, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((COPD+management%3A+role+of+symptom+assessment+in+routine+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+chronic+obstructive+pulmonary+disease%22%5BJournal%5D)">COPD management: role of symptom assessment in routine clinical practice.</a> International journal of chronic obstructive pulmonary disease. 8, 461-471 (2013).</li>
<li>Seifert, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin+shedding+and+tissue+regeneration+in+African+spiny+mice+%28Acomys%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Skin shedding and tissue regeneration in African spiny mice (Acomys).</a> Nature. 489, 561-565 (2012).</li>
<li>Vidal, P., Dickson, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+the+distal+phalanx.+A+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+hand+surgery%22%5BJournal%5D)">Regeneration of the distal phalanx. A case report.</a> Journal of hand surgery. 18, 230-233 (1993).</li>
<li>Potter, P. C., Levine, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+Regeneration+Following+Chronic+Suppurative+Osteitis+of+the+Distal+Phalanx%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+surgery%22%5BJournal%5D)">Bone Regeneration Following Chronic Suppurative Osteitis of the Distal Phalanx.</a> Annals of surgery. 80, 728-729 (1924).</li>
<li>McKim, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+the+Distal+Phalanx%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Medical+Association+journal%22%5BJournal%5D)">Regeneration of the Distal Phalanx.</a> Canadian Medical Association journal. 26, 549-550 (1932).</li>
<li>Brown, L. M., Rannels, S. R., Rannels, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implications+of+post-pneumonectomy+compensatory+lung+growth+in+pulmonary+physiology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Res%22%5BJournal%5D)">Implications of post-pneumonectomy compensatory lung growth in pulmonary physiology and disease.</a> Respir Res. 2, 340-347 (2001).</li>
<li>Holder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+and+compensatory+growth%5BTitle%5D)+AND+%22British+medical+bulletin%22%5BJournal%5D)">Regeneration and compensatory growth.</a> British medical bulletin. 37, 227-232 (1981).</li>
<li>Hsia, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+a+canine+model+of+compensatory+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Lessons from a canine model of compensatory lung growth.</a> Curr Top Dev Biol. 64, 17-32 (2004).</li>
<li>Butler, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+adult+lung+growth+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Evidence for adult lung growth in humans.</a> N Engl J Med. 367, 244-247 (2012).</li>
<li>Konerding, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+dependence+of+alveolar+angiogenesis+in+post-pneumonectomy+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Spatial dependence of alveolar angiogenesis in post-pneumonectomy lung growth.</a> Angiogenesis. 15, 23-32 (2012).</li>
<li>Kho, A. T., Liu, K., Visner, G., Martin, T., Boudreault, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+dedifferentiation+and+redevelopment+phases+during+postpneumonectomy+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Identification of dedifferentiation and redevelopment phases during postpneumonectomy lung growth.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, 542-554 (2013).</li>
<li>Wang, W., Nguyen, N. M., Guo, J., Longitudinal Woods, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+Monitoring+of+Compensatory+Lung+Growth+in+Mice+after+Pneumonectomy+via+%283%29He+and+%281%29H+Magnetic+Resonance+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Noninvasive Monitoring of Compensatory Lung Growth in Mice after Pneumonectomy via (3)He and (1)H Magnetic Resonance Imaging.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 49, 697-703 (2013).</li>
<li>Gibney, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+murine+post-pneumonectomy+lung+regeneration+by+18FDG+PET+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+research%22%5BJournal%5D)">Detection of murine post-pneumonectomy lung regeneration by 18FDG PET imaging.</a> EJNMMI research. 2, 48(2012).</li>
<li>Rawlins, E. L., Perl, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+a%27MAZE%27ing+world+of+lung-specific+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">The a'MAZE'ing world of lung-specific transgenic mice.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 46, 269-282 (2012).</li>
<li>Ochs, M., Muhlfeld, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+microscopy+of+the+lung%3A+a+problem-based+approach.+Part+1%3A+basic+principles+of+lung+stereology%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Quantitative microscopy of the lung: a problem-based approach. Part 1: basic principles of lung stereology.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, L15-22 (2013).</li>
<li>Ysasi, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+unilateral+diaphragmatic+paralysis+on+postpneumonectomy+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of unilateral diaphragmatic paralysis on postpneumonectomy lung growth.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, L439-445 (2013).</li>
<li>Dane, D. M., Yilmaz, C., Estrera, A. S., Hsia, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separating+in+vivo+mechanical+stimuli+for+postpneumonectomy+compensation%3A+physiological+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%22%5BJournal%5D)">Separating in vivo mechanical stimuli for postpneumonectomy compensation: physiological assessment.</a> Journal of applied physiology. 114, 99-106 (2013).</li>
<li>Mortola, J. P., Magnante, D., Saetta, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expiratory+pattern+of+newborn+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%22%5BJournal%5D)">Expiratory pattern of newborn mammals.</a> Journal of applied physiology. 58, 528-533 (1985).</li>
<li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%22%5BJournal%5D)">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> Journal of applied physiology. 106, 984-987 (2009).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Biz bugüne kadar bildirilen fare PNX ve fare sahte PNX prosedürleri en detaylı açıklamasını sağladı. Biz prosedürü öğrenme araştırmacılar sık ​​karşılaştıkları ortak tuzaklar birkaç okuyucu farkında yaptık, ve biz bu tuzaklar karşısında azaltmak için laboratuvar tarafından geliştirilen çeşitli teknikler belirttiğimiz. Bu modeli kullanan diğer laboratuvarlar diğer bir teknik değişiklikler geliştirilen veya farklı enstrümanlar kullanmak olabilir. Teknikleri farklılıkları değerlendirirken, bireysel araştırmacılar bu farklı...

akciğerin başlıca fonksiyonu, bir organizmaya ve atmosfer arasındaki oksijen ve karbon dioksit değişimi sağlamaktır. İnsanlarda, doğumsal ve edinsel koşulları bir dizi bozulmuş akciğer fonksiyonu ile sonuçlanan azalmış akciğer yüzey alanına yol açar. Yani, akciğer - örneğin inhale kortikosteroidler, bronkodilatör, ek oksijen, ve kronik mekanik ventilasyon gibi tedavilerin bir ev sahibi engelli akciğer fonksiyonu 1-3 sonuçlarını hafifletmek için kullanılmasına rağmen, bu koşullar için ideal bir tedavi fonksiyonel akciğer dokusunun yeniden büyümesini teşvik ediyorum yenilenmesi. Memeli doku rejenerasyonu iyi belgelenmiştir. Afrika Dikenli Fare skar oluşumu 4 olmaksızın cildin geniş alanlar yeniden yapabilirsiniz. İnsanlarda distal falanks yaralanma veya ampütasyon 5-7 aşağıdaki yeniden yapabilirsiniz. Aşağıdaki pnömonektomi (PNX), telafi akciğer büyümesi yapmak, 9 fare, sıçan 8 oluşurgs 10, ve 11 insanlarda. Tanım olarak, telafi akciğer büyümesi ilişkili mikrosirkülasyon 12 genişlemesi ile bu genişlemiş hava sahasındaki mevcut hava sahasındaki değil sadece genişleme, ancak yeniden bölümlenmenin içerir. Gen ifadesi analizi bu modeli akciğer gelişimi 13 sinyalizasyon olaylar birçok özetlediği olduğunu göstermiştir. Dört hafta, fare PNX sonra, alveol yüzey alanının ve sahte işlemden geçirilmiş hayvan 14 edilene eşdeğerdir. Bu yazıda, fare pNX ve sahte PNX prosedürlerini açıklar.

<table><tbody><tr><td>6 inç Vasküler klips aplikatörü</td><td>Teleflex Medical (WECK)</td><td>137062</td><td></td></tr><tr><td>Horizon küçük titanyum kırmızı klips</td><td>Teleflex Medical (WECK)</td><td>1201</td><td></td></tr><tr><td>Dar desen 12 cm kavisli forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>Kavisli tırtıklı 10 cm Graefe forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo iğne tutucu</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>Düz 9 cm Şaşılık makası (kör uç)</td><td>İnce Bilim Aletleri</td><td>14075-09</td><td></td></tr><tr><td>Düz 8,5 cm sertleştirilmiş ince makas</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>14090-09</td><td></td></tr><tr><td>Düz, künt uçlu Cohan-Vannas yaylı makas</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>15000-12</td><td></td></tr><tr><td>Cilt tutkalı</td><td>Tutkal</td><td>32046</td><td></td></tr><tr><td>22 G Anjiyokateter</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>24 G Anjiyokateter</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>3 ml Luer kilitli şırınga</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>4 Kısa ekartör</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>2 Uzun ekartör</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>5-0 Kavisli kesme iğnesi üzerinde Prolene</td><td>Ethicon</td><td>8698G</td><td></td></tr><tr><td>0.5 ml 27 G iğne</td><td></td><td></td><td></td> üzerinde şırınga</tr><tr><td>Normal tuzlu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Press-n-Seal wrap</td><td>Glad Products Company</td><td></td><td></td></tr><tr><td>12 x 12 inç Mantar pano yığını</td><td>Ofis Deposu</td><td></td><td></td></tr><tr><td>%70 Etanol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fare ventilatörü</td><td>Hugo Sachs Elektronnik</td><td>Minivent Type 845</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran buharlaştırıcı</td><td>OHMEDA</td><td>Excel 210 SE</td><td></td></tr><tr><td>Yapay gözyaşı merhemi</td><td>Puralube</td><td>NDC: 17033-211-38</td><td></td></tr></tbody></table>

telafi akciğer büyüme fare pnömonektomi modeli

Mouse Pneumonectomy Model of Compensatory Lung Growth

İnsanlarda, yaralı akciğerin bozulmuş onarımı ve yeniden şekillenmesi, sonuçta sakatlığa veya ölüme yol açabilecek bir dizi akut ve kronik akciğer bozukluğuna katkıda bulunur. Akciğer onarımı ve rejenerasyonu ile ilgili yaralanmaya dayalı hayvan modelleri, yaralanmaya özgü tepkilerle sınırlıdır, bu da yaralanma yanıtı ve yaralanma çözünürlüğü ile ilgili değişiklikleri akciğer onarımı ve akciğer rejenerasyonu ile ilgili değişikliklerden ayırt etmeyi zorlaştırır. Bununla birlikte, bu onarım ve rejenerasyon sinyal yolaklarını tanımlamak için hayvan modellerinin kullanılması, akciğer hasarını takiben pulmoner fonksiyonu iyileştirmeyi amaçlayan yeni tedavilerin geliştirilmesi için kritik öneme sahiptir. Fare pnömonektomi modeli, alveoler reseptasyon mekanizmalarını daha net bir şekilde tanımlamak için bu onarım ve rejenerasyon sinyallerini izole etmek için kompansatuar akciğer büyümesini kullanır. Burada, fare pnömonektomisi ve sahte pnömonektomi yapma tekniğimizi açıklıyoruz. Bu teknik, akciğer onarımı ve rejenerasyonunun moleküler ve hücresel mekanizmasını tanımlamak için soy izleme veya diğer transgenik fare modelleri ile birlikte kullanılabilir.

. Hem PNX ve sahte pnömonektomi için% 100 - pNX ve Sham fare ağırlıkları bir arsa Şekil 6&#39;da verilmiştir Bizim ellerde, hayatta sürekli 95. Sağ akciğer-yetişir yeniden bu model ve beklenen zaman ders, biz Gibney ark. 15 ve Wang ve ark yazmaları okuyucuyu bakın nasıl açıklamaları için. 14 Birkaç ortak tuzaklar başarıyla fare PNX ve fare sahte pnömonektomi prosedürleri gerçekleştirmek için kaçınılmalıdır. <p class="jove_...

Fare pnömonektomisi, kompansatuar akciğer büyümesinin yaygın olarak kullanılan bir modelidir. Bu prosedür, altta yatan mekanizmaları aydınlatmak için soy izleme veya transgenik fare modelleri ile birlikte kullanılabilir.

Telafi Akciğer Büyüme Fare Pnömonektomi Modeli

In humans, disrupted repair and remodeling of injured lung contributes to a host of acute and chronic lung disorders which may ultimately lead to ...

Bu prosedürün amacı, sağ akciğerde kompanse büyümeyi tetiklemek için sol pnömonektomi gerçekleştirmektir. Bu işlem, öncelikle sol torakotomi yapılarak sol hilumun açığa çıkarılmasıyla gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, sol hilumun ve sol pulmoner arterin ligasyonuyla tamamlanır.Üçüncü adım sol akciğerin çıkarılmasıdır. Son adım ise torakotominin kapatılmasıdır. Kompansatuar akciğer büyümesinin fare pnömonektomi modeli, alveoler büyüme ve rejenerasyon mekanizmalarını aydınlatmak için diğer biyometrik veya biyokimyasal tekniklerle birlikte kullanılabilir.Bu yöntem, akciğer gelişimi ve rejenerasyonu alanındaki; septasyonla ilişkili temel hücresel süreçlerin neler olduğu ve septasyonu yeniden başlatmak için gerekli olan kritik hücresel moleküler süreçlerin neler olduğu gibi bazı temel sorulara yanıt verebilir. Genel olarak, bu tekniği yeni deneyimleyen araştırmacılar, birkaç temel adımdan birinde zorluk yaşayabilirler. Trakeal kanülasyon aşamasında güçlük çekebilirler.Yeterli bir cerrahi pencere oluşturmakta zorlanabilirler. Hilumu tanımlamakta ve klipslemekte zorluk çekebilirler; ayrıca sham torakotomisi sırasında sol akciğere zarar vermekten kaçınmakta zorlanabilirler. Bu prosedürü, laboratuvarımın kıdemli laboratuvar asistanı Shang Lu gösterecektir. Başlangıç için, fareye %2 isofluran ile anestezi uyguladıktan sonra, sol göğüs ve boyun bölgesini elektrikli tıraş makinesiyle tıraş edin, farenin gözlerine yapay gözyaşı pomadı uygulayın ve bölgeyi sırasıyla üç kez klorheksidin, üç kez izopropil alkol ve ardından tekrar klorheksidin ile silerek dekontamine edin.Üç kez. Larinkse ulaşmak için ön orta boyun bölgesine bir santimetrelik dikey bir insizyon yaptıktan sonra, hafifçe çimdiklemeye yanıt alınmadığını belgeleyerek anestezi derinliğini onaylayın; strap kaslarını hafifçe geri çekmek için tırtıklı 10 santimetrelik forseps kullanın. Ardından, strap kaslarını ayırmak için düz bir makasın uçlarını kullanın.Ardından oral yolla, orta trakeaya 22 gauge küt uçlu bir anjiyo kateteri yerleştirin ve yerleşimi insizyon üzerinden görsel olarak doğrulayın. Fareyi bir kemirgen ventilatörüne bağlayın ve %2 isofluorine ile 15 centimeters.Water basınç sınırı ile anesteziyi sürdürün. Hâlâ anestezi altındaki fareyi, sırtının sol tarafı operatöre bakacak şekilde sağ lateral dekubitus pozisyonuna getirin.Steril bir örtü olarak farenin gövdesini kendi kendine yapışan plastik film ile kaplayın. Dördüncü ve beşinci interkostal boşlukta kaburgalara paralel, iki santimetre uzunluğunda bir kesi yapmak için küt uçlu eğri makas kullanın. Ardından makasın uçlarını yerleştirerek deriyi alttaki kaburgalardan ve interkostal kaslardan ayırın.1,5 by 1,5 santimetrelik bir cerrahi pencere oluşturmak için deriye dört adet ekartör yerleştirin. Her bir ekartörü mantar panoya sabitleyin. Kaburgalara kadar diseksiyon yapmak için kavisli pensler kullanın ve ardından interkostal bölgeyi künt diseksiyonla açın.Dördüncü ve beşinci kaburgaları açığa çıkarmak için, göğüs boşluğuna girmek amacıyla kavisli bir pensetin bir ucunu kullanarak bir delik açın. Şimdi, alt bıçak göğüs boşluğuna girene kadar, küt uçlu mikro makasın alt bıçağını insizyon boyunca bastırmak için kullanın. Kaburgalar arasında 0,5 santimetrelik bir insizyon yapın ve ardından işlemi ters yönde tekrarlayın.Ardından, iki retraktör yerleştirip bunları mantar panoya sabitleyerek toraksı anterior posterior aks boyunca açın. Şimdi mikro klips aplikatörünü doldurun. Daha sonra, baskın olmayan elde tutulan kavisli küt uçlu penslerle sol akciğeri kavrayın ve sol pulmoner arter ile bronş açığa çıkana kadar üst kısmı torakotomiden lateral ve inferior yönde kaydırın.Ardından, yüklü titanyum vasküler mikro klips replikatörünü, aplikatör gövdesi avuç içinde ve kavisli uç avuç içinden uzağa bakacak şekilde baskın elde tutun. Aplikatör ucunu, sol akciğerin posterior kısmının eğimi boyunca toraksın içine kaydırın ve sol bronş ile pulmoner arteri klipsleyin. Aplikatörü çıkarın ancak sol akciğeri retraksiyon durumunda tutmaya devam edin.Küt uçlu mikro makası sağ elle tutun, klipsin distalinden bronkusu ve pulmoner arteri kesin ve sol akciğeri çıkarın. Akciğeri çıkardıktan sonra kostal retraktörleri geri çekin. Ardından, kavisli küt pensi kullanarak insizyonun alt kısmında ancak diyafram seviyesinin üzerinde kalan bir santimetrelik deri bölgesini kıstırın ve deri üzerinden sol torasik kaviteye 24 gauge angiyo kateter yerleştirin.Ardından, dördüncü ve beşinci kaburgaların etrafına iki adet kesintili 5-0 prolen sütur yerleştirin. Torasik boşluğu kapatmak için deri retraktörlerini çıkarın, insizyon boyunca deriyi yaklaştırmak için iki set pens kullanın ve deriyi kapatmak için doku yapıştırıcısı uygulayın. Son olarak, anjiyo katetere 3 mL Luer-lock şırınga bağlayın, hafif bir vakum uygulayarak kalıntı havayı uzaklaştırın ve anjiyo kateterini geri çekin.Boyun yapıştırılarak işlem tamamlanır, insizyon iki set forseps kullanılarak torasik insizyonun kapatılmasında olduğu gibi kapatılır. Anestezi altındaki farenin sol akciğeri daha önce gösterildiği şekilde açığa çıkardıktan sonra, göğüs kafesini kaldırmak ve sol göğüs boşluğuna hava girmesini sağlamak için kavisli küt uçlu forsepsler kullanın. Sol torasik boşluğa, sol akciğere zarar vermemeye dikkat ederek, daha önce gösterildiği gibi 24 gauge anjiyo kateter yerleştirin. Beş sıfır prolen sütür kullanın ve akciğeri delmemeye dikkat edin.Sütür materyalinin iki uzunluğunu üçüncü ve dördüncü ile beşinci ve altıncı kaburga aralıklarına yerleştirin. Sol akciğer hernisi riskini azaltmak için, düğümlemeden önce her iki sütür uzunluğunu da yerleştirin. İki ayrı kesikli dikiş oluşturmak için sütür materyalini bağlayın.Torasik insizyon üzerindeki deriyi yapıştırın. Kalıntı havayı anjiyo kateter ile tahliye edin ve daha önce gösterildiği gibi boyun insizyonunu yapıştırın. İzofloranı kapatın ve deri altına kilogram başına 0.1 miligram buprenorfin ile 0.5 mililitre normal salin uygulayın.Spontan solunum tekrar başladığında, endotrakeal tüpü çıkarın. Fare hareket edebilene kadar gözlemleyin. Yürüme genellikle endotrakeal tüp çıkarıldıktan birkaç dakika sonra tekrar başlar.Ameliyattan sonra üç gün boyunca günde iki kez, kilogram başına 0.1 miligram buprenorphine intraperitonal enjeksiyon yoluyla uygulayın. Bu üç gün boyunca hayvanı dikkatle izleyin ve hayvanları taşırken cerrahi bölgeyi açmamaya özen gösterin. Bu görüntü, ameliyat sonrası kilo kaybını göstermektedir.Ameliyattan 24 saat sonra, pneumo somy fareleri ortalama 1,5 gram ve sham fareleri ortalama 1,1 gram kaybedecektir. Her iki grup da ameliyat sonrası üçüncü güne kadar ameliyat öncesi ağırlıklarına geri döner. Bu floresan görüntü, kontrol koşulları altındaki aksesuar lobun tropo elastin immünofloresan boyamasını göstermektedir.Burada, pnömotomi sonrası 72. saatte aksesuar lobun tropo elastin immunofloresansı gösterilmektedir; mevcut hava boşlukları artmıştır. Bu son TRO Elastin immunofloresans görüntüsü, pnömotomi sonrası dört haftadaki aksesuar lobu göstermektedir. Lob büyümesine ve rejenerasyona dikkat edin.Bu videoyu izledikten sonra, kompansatuar akciğer büyümesinin fare pnömonektomi modelinin nasıl gerçekleştirileceği ve bu prosedür için kontrol olarak kullanılan sham torakotominin nasıl uygulanacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

mouse-pneumonectomy-model-of-compensatory-lung-growth

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Obliteratif bronşiolit akciğer transplantasyonu uzun süreli yaşam için anahtar engel ve sağlam bir preklinik model eksikliği obliteratif bronşiolit immünopatogenezi inceleyerek engellemektedir. Diğer solid organ nakli aksine, vaskülarize fare akciğer transplantasyonu vardır ancak son zamanlarda geliştirilmiştir. Burada fare ortotopik tek-akciğer transplantasyonu sonrası bağımsız geliştirilen obliteratif bronşiolit modeli gösterilmektedir.

Ortotopik Akciğer Transplantasyonu bir Mürin Modelinde Obliteratif Bronşiolit Gelişimi

Burada, farelerde akciğer basınç-hacim eğrisini basit ve güvenilir bir şekilde ölçmek için bir protokol sunuyoruz ve bu, iki yaygın akciğer patolojisi olan pulmoner fibroz ve amfizemde fenotipik parankimal değişiklikleri tespit etmek için yeterince duyarlı olduğunu gösteriyor. Bu metrik, gelişen patoloji ile akciğerin yapısal değişikliklerini ölçmek için bir araç sağlar.

Fare Akciğerler Basınç-hacim Eğrisi Ölçümü

Bu çalışmada art arda fareler için ozon yüksek konsantrasyonda açarak yeni bir kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) hayvan modeli başarılı nesil açıklar.

Kronik obstrüktif akciğer hastalığı manken tekrarlanan ozon maruz farelerde nesil

Akciğer hastalıklarında ve yaralanmaya bağlı alveol rejenerasyonunda akciğer morfolojisi ve fizyolojisini değerlendirmek için iç akciğer yüzey alanı (ISA) kritik bir kriterdir. Burada hem akciğer pnömonektomisinde hem de protez implantasyon fare modellerinde ISA için önyargı önlemeyi en aza indirecek standart bir yöntem açıklanmaktadır.

Fare Pnömonektomi ve Protez İmplantasyonu ile İç Akciğer Yüzey Alanının Ölçümü için Standart Bir Yöntem

Kemirgen sol pneumonectomy pulmoner hipertansiyon araştırma değerli bir tekniktir. Burada, fare pneumonectomy yordam ve ameliyat sonrası bakım minimal morbidite ve mortalite sağlamak için açıklamak için bir iletişim kuralı mevcut.

Sıçanlarda pulmoner hipertansiyon bir Model olarak Monocrotaline ya da Sügen ile birlikte sol Pneumonectomy

Burada, sonuçları iyileştirmeye hizmet eden bir sıçan akciğer nakli modeline optimizasyonlar sunuyoruz. Vücut ağırlığına göre manşetler için bir boyut kılavuzu, 4. interkostal boşluğu belirlemek için bir ölçüm stratejisi ve yara kapatma ve BAL (bronkoalveoler lavaj) sıvı ve doku toplama yöntemleri sunuyoruz.

Sıcak iskemi / reperfüzyon hasarının bir sıçan akciğer transplantasyon modeli: sonuçları iyileştirmek için optimizasyonlar

Öğretim amaçlı pulmoner mekanik ve alveolar rehtum manevralarının gösterilmesi için bir ex vivo domuz akciğer modeli sunuyoruz. Akciğerler, pulmoner mekanik değişkenlerde minimum değişiklikle bir günden fazla (beş güne kadar) kullanılabilir.

Ex Vivo (Canlı Canlı) Akciğer Mekaniğini İncelemek ve Öğretmek için Domuz Deneysel Modeli

Bu protokol, bronkopulmoner displazinin moleküler tetikleyicilerinin anlaşılmasını kolaylaştırmak ve terapötik translasyonu geliştirmek için yetersiz yüzey aktif madde miktarı, hiperoksi, yüksek basınçlı ventilasyon ve inflamasyon dahil olmak üzere erken akciğerde meydana gelen erken patojenik olayları modelleyen akut akciğer hasarının yenidoğan domuz yavrusu modelinin geliştirilmesini açıklar.

Prematüre Bebek Akciğerlerinin Erken Ortamını Yeniden Yaratan Yenidoğan Domuz Yavrusu Akut Akciğer Hasarı Modelinin Geliştirilmesi

Bu yazıda akciğer fonksiyonu ölçümleri veya fareler kurtarmak için ve daha sonraki dönemlerde de incelenebilir sağlar pulmoner instilasyon için fare entübasyon bir striaghforward ve etkili bir yöntem açıklanır. Işlem doğrudan soluk borusu yanması pahalı olmayan bir fiber optik ışık kaynağı içerir.

Fare Akciğer Entübasyonun Basit Bir Yöntem

Bunların diagnostik ultrason görüntülemede insan ve hayvan deneklerde çeşitli solunum hastalıkları teşhis etkili olduğu kanıtlanmıştır. Biz özellikle fare modellerinde diyafram kinetik analiz Dr Zuo'nun laboratuvarı tarafından kullanılan kapsamlı bir ultrason protokol göstermektedir. Bu aynı zamanda fare solunum kas fonksiyonu üzerine nicel bilgi verebilir bir non-invaziv bir araştırma tekniğidir.

Fare Diyafram Fonksiyonu Diagnostik Ultrason Görüntüleme

Öğrenin fare pnömonektomi modeliyle telafi akciğer büyümesini incelemeyi. Bu yöntem sol akciğerin çıkarılması ve sağ akciğerin büyümesinin gözlemlenmesiyle akciğer rejenerasyon mekanizmalarını araştırır.

Telafi Akciğer Büyüme Fare Pnömonektomi Modeli

Daha fazla video keşfet