7 Şubat 2015
Bu makale, aterosklerozun farklı aşamalarını değerlendirmek için tıbbi araştırmalarda yaygın olarak kullanılan vasküler fonksiyon ve morfolojinin çeşitli invaziv olmayan değerlendirmeleri için metodolojik hususları açıklamaktadır.
Aşağıdaki deneyin genel amacı, farklı vasküler bölgelerdeki subklinik artrosklerozu incelemektir. İlk olarak, mikrovasküler endotel fonksiyonunu incelemek için vazodilatör ilaçların iontoforezi ile birlikte lazer doppler görüntüleme kullanılır. Ardından, büyük damar endotel fonksiyonunu incelemek için akış aracılı dilatasyon ve gliserin trinitrat aracılı dilatasyon kullanılır.
Son olarak, ileri morfolojik değişiklikler için karotis intima-media kalınlığı analiz edilir. Sonuçlar, stimülasyona yanıt olarak mikrovasküler ve büyük damar endotel fonksiyonlarındaki değişiklikleri göstermektedir. Ayrıca, karotis arterinin damar duvarı da karakterize edilir.
Bu yöntemler, farklı klinik popülasyonlarda müdahalelerin vasküler sağlık üzerindeki etkisinin belirlenmesi gibi kardiyovasküler fizyoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Öncelikle, lazer doppler görüntüleme cihazını hazırlayın. Cihazın yarım saat veya daha fazla süre boyunca ısınmasını bekleyin.
Cihazı kalibre edin ve yazılımı kullanıma hazır hale getirin. Ayrıca, perspeks odadaki çözeltileri hazırlayın. Ardından, çalışma katılımcısını görüntüleme koltuğuna getirin; katılımcı hafifçe arkaya yaslanmış durumda olmalı, sert bir yastık üzerindele bir dirseği 90 derece bükülmüş ve ön kolu siyah bir mat üzerine rahatça yerleştirilmiş şekilde konumlandırılmalıdır.
Ön kolun mat üzerinde sabit kalması için yastığa sabitlendiğinden emin olun. Ardından, perspeks bölmeleri hazırlayın. İlk olarak, bunların tıkaçlarını iontophoresis kontrol cihazına takın.
Ardından, asetilkolin içeren hazneyi Anodal bağlantıya ve sodyum nitroprusid içeren hazneyi kateter bağlantısına bağlayın. Daha sonra, iki hazneyi çift taraflı yapışkan pedler kullanarak sabitlenmiş ön kolun volar kısmına bağlayın. Ayrıca, hazneleri 32 milimetrelik örtü camlarıyla kapatın.
Şimdi tarayıcı yazılımında, ana ekranın sol üst köşesinde bulunan tarayıcı kurulum penceresini açın. Görüntü tarama sekmesini seçin ve pencerenin sağ alt köşesindeki işaretle düğmesine tıklayarak taranacak alanı belirleyin. Gerekirse, tarayıcı kafasını, ilgilenilen alanı doğru şekilde tarayacak şekilde dikkatle konumlandırın.
Pencerenin üst kısmındaki tarama alanı bölümüne tarama alanının boyutunu girerek ilgi alanını manuel olarak değiştirin. İlgi alanının, her bir iontophoresis kamaralarının çapını kapsadığından ve cilt kan akışındaki değişkenliği sınırlayacak kadar geniş olduğundan emin olun. Tarama tamamlandıktan sonra tarama işlemi başlatılabilir.
LDI görüntü analiz yazılımını kullanın. Veri dosyasını açmak için ana penceredeki görüntü inceleme seçeneğini seçin.
Şimdi her bir odacığın dış çapları etrafında bir ilgi alanı belirleyin. Ardından istatistik simgesine tıklayın; her bir odacığın 12 taramasının her birinden elde edilen, her odacık için medyan perfüzyon birimlerini içeren bir sütun görüntülenecektir. Bazal perfüzyon birimini ve en yüksek perfüzyon birimini not edin.
Doppler ultrason cihazının ve canlı görüntüleme vasküler görüntü analizi yazılımının kurulumuyla başlayın. Ardından katılımcıya düzeneği tanıtın ve katılımcının sandalyede rahatlamasını sağlayın. Test katılımcısından bileğindeki tüm takıları çıkarmasını isteyin ve kolunu rahatça yaslayabilmesi için bir yastık kullanın.
Ardından, katılımcının bileğine bir kan basıncı manşeti yerleştirin. Bilek mümkün olduğunca sabit tutulmalıdır. Sonrasında, cihazın lineer transdüser dizisini bir stereotaktik klempe sabitleyin.
Ardından transdüser üzerindeki klempi sıkın. Daha sonra, ultrason cihazındaki menüye erişin. Tarama frekansını beş megahertz olarak ve derinliği yaklaşık 3,5 santimetre olarak ayarlayın.
Şimdi probu kullanarak, boylamsal tarama ile brakiyal arteri bulun. Bu arter genellikle antekubital fossanın 2 ila 10 santimetre üzerindedir. Ardından, damarın yakın ve uzak duvarında simetrik bir parlaklık elde etmek için kazancı (gain) ayarlayın.
Renkli doppler, arterden geçen nabzılyla kan akışını göstererek onu toplardamarlardan ayıracaktır. Brakiyal arterin görünümünü, ekranda net bir şekilde görülecek ve yatay duracak şekilde ayarlayın. Yazılımda, iki çizgi arasında net bir alanla ayrılmış iki katı paralel çizgi şeklinde görünmelidir.
İlgilenilen bölgeyi işaretlemek için imleci kullanın; yazılım kaydı otomatik olarak gerçekleştirecektir. Alanın damar çapı ayarı, ana ekrandaki X ve Y düğmeleriyle yapılabilir. Şimdi, başlat düğmesine tıklayın ve arterin iki dakika boyunca görüntüsünü alın.
Ardından, kan basıncı manşonunu S sistolik basınçlarına kadar şişirirken beş dakika boyunca kayıt yapmak için inflate düğmesine basın. Manşon söndükten sonra ele giden kan akışı manşon tarafından engellenmiş olmalıdır. Kayda üç dakika daha devam edin.
Bu aşamada, nitrik oksit aracılı vazodilatasyonu uyaran hiperemi indüklenir. Ardından 10 dakikalık bir dinlenme süresi sağlanır. Sonrasında, brakiyalis arterin yeri değiştirilir ve arter çapı için iki dakika boyunca yeni bir bazal kayıt yapılır.
Şimdi, katılımcının 500 gram gliserol tritrat tabletini sublingual yolla almasını isteyin ve beş dakika boyunca kayda devam edin. Beş dakika sonra tablet çıkarılmalı ve katılımcı olası yan etkiler açısından izlenmelidir. Verileri analiz ederken, bazal bölgeyi artefaktlar açısından kontrol ettiğinizden emin olun; bazal çapı elde etmek için kalan değerlerin ortalamasını almadan önce tüm artefaktları hariç tutun.
Ayrıca, akış aracılı dilatasyon analizi sırasında, otomatik olarak tespit edilen pik dilatasyon bölgesini inceleyin. Eğer bölge yanlış tanımlanmışsa, piki içeren daha kısıtlı bir bölgeyi manuel olarak seçin. Bu ölçüm için katılımcının yastıklı bir yatakta rahatça uzanmasını sağlayın.
Ardından, temel bir izleme için EKG elektrotlarını yerleştirin. Elektrotları her iki kola ve sol ayak bileğine takın. Sonra, menüye giderek tarama frekansını 10 megahertz ve kayıt derinliğini üç ila dört santimetre olarak ayarlayın.
Ardından kazancı daha önce olduğu gibi ayarlayın. Şimdi katılımcıdan başını hafifçe sola çevirmesini isteyin ve sağ karotis arterini taramak için lineer dizi probu kullanın. Damarda bir çatallanma noktası arayın; çünkü burası, ortak karotis arterin internal ve eksternal karotis arterlere ayrıldığı noktayı gösterir.
Karotis arterini tüm bölümleri boyunca longitudinal düzlemde tarayın. Herhangi bir plak görülmesi durumunda ortak, internal ve eksternal arterleri tanımlayın. Görüntüleri şimdi kaydedin.
Plak içermeyen ve karotis bulbundan yaklaşık bir santimetre uzaklıkta olan bir kesitten en az üç görüntü alın. Katılımcının başını diğer tarafa çevirmesini sağlayın ve sol karotis arteri belgelemek için prosedürü tekrarlayın. Daha sonra, CIMT ve lümen çapı değerlerini toplarken görüntüler arteryel ölçüm yazılım paketi kullanılarak çevrimdışı olarak analiz edin.
Yakın duvardan doğru okumalar yapılamayacağının farkında olun, bu nedenle sadece uzak duvardan alınan okumaları analiz edin. İyontoforez ile lazer Doppler görüntüleme, kardiyovasküler hastalığı olmayan sağlıklı, orta yaşlı bir kadın üzerinde uygulanmıştır. Her iki stimülasyonda da medyan kan akışında belirgin bir artış gözlemlenmiştir.
Pik kan akışı, asetilkolin için 455 perfüzyon ünitesine ve sodyum nitroprusid için 446 perfüzyon ünitesine ulaştı. Kardiyovasküler hastalığı olmayan sağlıklı genç bir kadında hem akışla aracılı dilatasyon hem de gliseril trinitratla aracılı dilatasyon incelendi. Akışla aracılı dilatasyon testi arter çapını yaklaşık %10 artırırken, gliseril trinitratla aracılı dilatasyon arter çapını yaklaşık %30 artırdı. Sağlıklı bir bireyin sol karotis arterinde karotis intima-media kalınlığına bakıldı.
Uzak duvar için CIMT değeri 0,83 milimetre ve lümen çapı 7,71 milimetre idi. Sağ karotis arterindeki aynı ölçümler ise gelişimlerinden sonra 0,87 milimetre ve 7,8 milimetre olarak kaydedildi. Bu teknikler, kardiyovasküler fizyoloji alanındaki araştırmacıların, farklı klinik popülasyonlarda kardiyovasküler hastalık mekanizmalarını anlamalarının yolunu açtı.
Bu makale, özellikle ateroskleroz araştırmaları bağlamında, vasküler fonksiyon ve morfolojiyi değerlendirmek için kullanılan non-invaziv yöntemleri tartışmaktadır.
Lazer Doppler görüntüleme, akış aracılı dilatasyon ve karotis ultrasonu kullanılarak yapılan non-invaziv vasküler değerlendirmeler, endotelyal disfonksiyonun ve vasküler yeniden şekillenmenin erken teşhisi için kritik kantitatif sonlanım noktaları sağlar. Bu metodolojiler, translasyonel araştırma ekiplerinin vasküler sağlığı sorgulamasına, mekanistik hipotezlerdeki riskleri azaltmasına ve kardiyovasküler hedef doğrulamada öngörücü güveni desteklemesine olanak tanır. Bu tekniklerin keşif ve preklinik süreçlere entegre edilmesi, güçlü ve tekrarlanabilir vasküler fenotiplendirme sağlayarak portföy karar verme süreçlerini iyileştirir.
Bu non-invaziv değerlendirmeler, erken keşif aşamasından preklinik araştırmalara kadar sürece entegre edilerek vasküler fenotiplemede süreklilik ve mekanistik risklerin azaltılmasını sağlar.