Name: Fizyoloji Laboratuvarı Gösteri: Bir Sıçan Glomerüler Filtrasyon Hızı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 58 s
Description: Öğrenin sıçanlarda glomerüler filtrasyon hızı, idrar akış hızı ve sodyum-potasyum atılımı ölçüm tekniklerini. Bu fizyoloji laboratuvarı gösterisi böbrek fonksiyonlarını pratik olarak anlamanızı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

laboratuvar gösteri için fon kaynağı NIGMS hibe oldu: GM077119. Biz Bütünleştirici ve Organ Sistemleri Farmakoloji Kısa Couse onların desteği için Dr. Joseph R. Haywood ve Dr. Peter Cobbett teşekkür ederim. Biz de laboratuvar gösteri onu teknik destek için Sayın Hannah Garver teşekkür ederiz.

Önceden herhangi bir hayvan prosedürüne kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı komitesi (IACUC) protokolünü onaylaması gerekir. Bu protokol Michigan State Üniversitesi IACUC tarafından onaylanmıştır. FITC inulin Çözüm 1. Ön-lab Hazırlık <ol><li> Tüm inülin çözünene kadar yavaş yavaş ısınmaya 20 ila 70 ° C ml tuzlu su ve FITC inulin (5 mg / ml FITC-inülin) 100 mg ilave edin. </li><li> Soğuk, oda sıcaklığına kadar çözeltisi ve sığır serum albümini 800 mg ekleyin (40 mg / ml BSA, liyofilize toz, esas olarak, agaroz jel elektroforezi ile arındırılmış, endotoksin, ≥98% saflığa globulin). </li><li> Filtre kağıdı (grade 1) ile inulin-BSA çözüm Filtre. Bir şırınga ucu filtre (0,2 um) olan bir 20 ml şırınga içinde çözelti filtre koyun ve ışıktan korumak için folyo ile kapatın. </li></ol> 2. Anestezi ve Cerrahi <ol><li> Anestezi sağlamak üzere,% 5 izofluran ile dolu bir indüksiyon odasında sıçan yerleştirin. Kayıt body ağırlığı (250-350 g) ve deney boyunca 37 ° C vücut ısısını korumak için tasarlanmış bir ısıtılmış ameliyat işlemine sıçan yerleştirin. Yavaşça pençeleri üzerinde laboratuvar bant ile platforma sıçan sabitleyin. 0.8-1.0 L / dk hava akımı hızında tıbbi sınıf% 100 O 2 ile% 1-2 izofluran ile anestezi koruyun. </li><li> Kan basıncı ve kalp hızı izleme ve kan örneklemesi için femoral arter içine bir kateter konik (damar içi ucu OD, 2.7f) yerleştirin. </li><li> Inülin infüzyon için femoral damara bir kateter (PE-50) yerleştirin. 5-O örgülü ipek cerrahi sütür 6 çevreleyen doku kateter sabitleyin. </li><li> Bir gerinim ölçer basınç dönüştürücü arteriyel kateter takın. Tutanak kan basıncı ve gerçek zamanlı bir bilgisayar ekranında veri toplama yazılım ve ekranını kullanarak kalp hızı. Bu teknik, video, 6 ayrıntılı olarak gösterilmiştir. </li><li> Suprapubik insizyon yoluyla mesaneye Açığa. Küçük bir kesMesanenin ucu delik ve bir ısı ile bir kanül (PE-190) takın idrar toplama mesane içine ucu alevlendi. Bir çanta-string sütür ile mesane kanül sabitleyin. </li></ol> 3. İdrar ve Kan Alma <ol><li> (300 g ağırlığındaki bir sıçan için 3 ml / saat) vücut ağırlığının her 100 g başına 1 mi / saat ayarlanmış akış oranı ile, bir şırınga pompası FITC inülin şırınga yerleştirin. Femoral ven kateter için şırınga takın. Inülin infüzyon başlatın ve 1-2 saat dengeleme dönemi izin verir. Işıktan korumak için folyo ile kaplı şırınga tutun. </li><li> Idrar akışı oranı sabit ve 10 dakikalık bir süre için önceden tartılmış toplama şişe içinde, bir idrar örneği toplayarak örnek analizi (20 ul / dak) için yeterli olup olmadığını belirler. Dijital ölçek ile gravimetrik idrar hacmi belirlemek. 10 dakika toplama dönemi için yeterli bir idrar hacmi, 0.2 ml olmuştur. Iki ardışık koleksiyon 20 ul / m idrar akım hızını gösterir kadar idrar örnekleri toplamaya devamveya daha fazlası. </li><li> Ön İlaç Örnekleri <ol><li> 20 dakikalık bir süre boyunca idrar örneği toplamak. Idrar toplama dönemi orta noktasında arteriyel kateter kan örneği (0.5 ml) toplayın. 1 U heparin içeren bir koleksiyon şişede bir kan örneği toplama önce tuzlu tamamen açık arteriyel kateter dikkatli olun. Arteriyel kan 0.5 ml toplanmasını kolaylaştırmak için ses işaretleri ile toplama şişeleri kullanın. </li><li> Kan (yaklaşık. 0.1 mi) ve kateter temizlemek için heparin tuz çözeltisi (20 U / ml) ile arteriyel kateter yıkayın. temizlemek için gerekli olan heparin tuz hacmini sınırlamak için mümkün olduğu kadar arteriyel kateterin boyu kadar kısa olmalıdır. Not: Seyreltilmiş kan örnekleri GFR ve Na ve K fraksiyonel atılımının yanlış hesaplamalar üretmek </li><li> 10 dakika bekleyin ve ikinci ön ilaç idrar ve kan örneği toplanmasını tekrarlayın. </li></ol></li><li> İki ilaç öncesi numune alındıktan sonra, bir diüretik dru tatbikg, furosemid (10 mg / kg), arteriyel kateter vasıtasıyla. İlacın kateter temizlemek için heparinli serum fizyolojik ile arteriyel kateter yıkayın. Arteriyel kateter yoluyla hava enjeksiyonu önlemek için özen gösterin. Furosemid enjeksiyonu zamanını kaydedin. </li><li> Mesaj-ilaç örnekleri: Aşağıda 3 zaman noktalarının her birinde, 10 dakika toplama süresi boyunca idrar numunesi, ve idrar toplama süresi arasında orta nokta yakınında bir kan örneği (0.5 mi) toplanır. <ol><li> Post-İlaç Örnek 1 için - daha sonra furosemid beş dakika toplamak. </li><li> Post-İlaç Örnek 2 için - sonra furosemid on dakika toplamak. </li><li> Post-İlaç Örnek 3 - sonra furosemid onbeş dakika toplamak. </li></ol></li><li> Tüm numuneler toplanmıştır sonra, torakotomi ve kalp çıkarılmasıyla kurumsal prosedürlerine uygun olarak sıçan euthanize. Her iki böbreği çıkarın. Açarlar (çevreleyen membran kaldırmak) ve aşırı kan çıkarmak için böbrekleri kurulayın. Böbrekler tartılır. </li></ol><ol><li> Tüm gravimetrik bir dijital ölçekli idrar örneği hacimleri ve kayıt ağırlıkları ölçün. </li><li> Bir masa üstü santrifüj (1.800 xg) ile Santrifüj tam kan numuneleri plazma ayırmak için. Küçük etiketli şişelere plazma örnekleri aktarın. </li><li> Bir sodyum / potasyum analizörü ile idrar ve plazma örneklerinde Na ve K konsantrasyonları analiz edin. </li><li> Plazma ve idrar FITC inulin ölçümü <ol><li> Ilaç öncesi idrar ile seyreltilir ve HEPES tampon maddesi (500 mM, pH 7.4) ile birlikte, son ilaç idrar (1:10) (1: 400: 200-1). </li><li> 96 oyuklu bir plakanın (oyuk başına bir örnekte) &#39;de HEPES tamponu standart veya numune ve 60 ul 40 ul ekle ve alüminyum folyo ile kaplı ise, 10 dakika boyunca karıştırın izin verir. </li><li> Konsantrasyonlarda FITC-inulin bir standart eğri oluşturmak 6.25, 12.5, 25, 50, 100, 200, 400 ug / ml (Şekil 1). Ex bir mikroplaka okuyucu kullanılarak numuneler ve standartlar FITC-inülin floresan belirlemesırasıyla 485 ve 538 nm atıf ve emisyon dalga boylarında. </li><li> 4 menü noktası lojistik fonksiyon regresyon analizine standartlar için floresan değerleri takınız. regresyon işlev parametreleri plazma ve idrar örneklerinde (Tablo 1) FITC-inülin konsantrasyonunu hesaplamak için kullanılır. </li></ol></li></ol> Sonuçların 5. Post-lab Analizi: Hesaplamalar <ol><li> (UV; ml / dak) İdrar Akış Hızı hesaplayın: [idrar hacmi toplanan (ml)] ÷ [toplama süresi (dak)] </li><li> Glomerüler Filtrasyon Hızı hesaplayın (GFH; ml / dak): ÷ [Plazma inulin konsantre [İdrar inulin konsantrasyonu (ug / ml) UV (ml / dk) x]. (Ug / ml)] </li><li> Serum sodyum konsantrasyonu (umol / ml) x GFR (ml / dak): Filtrelenmiş sodyum Yük (umol / dakika) hesaplamak </li><li> Sodyum atılım hızı (U Na V; umol / dakika) hesaplayın: İdrar sodyum konsantrasyonu (umol / ml) (ml / dk) UV x </li><li> Hesaplayın Sodyum Fraksiyonel Atılım (FE Na;%): [U Na V (ľmol / dk)] ÷ [Filtreli Sodyum Yükü (ľmol / dk)] x 100 </li><li> Filtreli Potasyum Load (ľmol / dak) hesaplayın: Plazma potasyum konsantrasyonu (mol / ml) GFR x (ml / dak) </li><li> Potasyum atılım hızı (U K V, umol / dakika) hesaplayın: İdrar potasyum konsantrasyonu (umol / ml) (ml / dk) UV x </li><li> Hesaplayın Potasyum Fraksiyonel Atılım (FE K;%): [U K V (ľmol / dk)] ÷ [Filtreli Potasyum Yükü (ľmol / dk)] x 100 </li></ol>

<ol><li>Silverthorn, D. U. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSilverthorn%2C+DU+%22Human+Physiology%3A+An+integrated+approach%22">Human Physiology: An integrated approach</a>. , Pearson. (2012).</li>
<li>Hall, J. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHall%2C+JE+%22Guyton+and+Hall+Textbook+of+Medical+Physiology%22">Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology</a>. , 303-344 (2011).</li>
<li>Levey, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+renal+function+in+chronic+renal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Measurement of renal function in chronic renal disease.</a> Kidney International. 38 (1), 167-184 (1990).</li>
<li>Thurau, K., Valtin, H., Schnermann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Kidney.</a> Annual Review of Physiology. 30, 441-524 (1968).</li>
<li>Shannon, J. A., Smith, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+excretion+of+inulin%2C+xylose%2C+and+urea+by+normal+and+phoriziniaed+man%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">The excretion of inulin, xylose, and urea by normal and phoriziniaed man.</a> Journal of Clinical Investigation. 14, 393-401 (1935).</li>
<li>Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Femoral+arterial+and+venous+catheterization+for+blood+sampling%2C+drug+administration+and+conscious+blood+pressure+and+heart+rate+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements.</a> Journal of Visualized Experiments. (59), (2012).</li>
<li>Sterner, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+%27true%27+glomerular+filtration+rate+in+healthy+adults+using+infusion+of+inulin+and+comparing+it+with+values+obtained+using+other+clearance+techniques+or+predictive+equations%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Urology+and+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Determining 'true' glomerular filtration rate in healthy adults using infusion of inulin and comparing it with values obtained using other clearance techniques or predictive equations.</a> Scandinavian Journal of Urology and Nephrology. 42, 278-285 (2008).</li>
<li>Toto, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conventional+measurement+of+renal+function+utilizing+serum+creatinine%2C+creatinine+clearance%2C+inulin+and+para-aminohippuric+acid+clearance%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Nephrology+and+Hypertension%22%5BJournal%5D)">Conventional measurement of renal function utilizing serum creatinine, creatinine clearance, inulin and para-aminohippuric acid clearance.</a> Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 4 (6), 505-509 (1995).</li>
<li>Matavelli, L. C., Kadowitz, P. J., Navar, L. G., Majid, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+hemodynamic+and+excretory+responses+to+intra-arterial+infusion+of+peroxynitrite+in+anesthetized+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Americam+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Renal hemodynamic and excretory responses to intra-arterial infusion of peroxynitrite in anesthetized rats.</a> Americam Journal of Physiology. 296, F170-F176 (2009).</li>
<li>Davidson, W. D., Sackner, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplification+of+the+anthrone+method+for+the+determination+of+inulin+in+clearance+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Laboratory%2C+%26+Clinical+Medicine%22%5BJournal%5D)">Simplification of the anthrone method for the determination of inulin in clearance studies.</a> Journal of Laboratory, & Clinical Medicine. 62, 351-356 (1963).</li>
<li>Symes, A. L., Gault, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assay+of+inulin+in+tissues+using+anthrone%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Assay of inulin in tissues using anthrone.</a> Clinical Biochemistry. 8 (1), 67-70 (1975).</li>
<li>Shalmi, M., Lunau, H. E., Petersen, J. S., Bak, M., Christensen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suitability+of+tritiated+inulin+for+determination+of+glomerular+filtration+rate%5BTitle%5D)+AND+%22Americam+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Suitability of tritiated inulin for determination of glomerular filtration rate.</a> Americam Journal of Physiology. 260 (2 Pt 2), F283-F289 (1991).</li>
<li>Denton, K. M., Anderson, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glomerular+untrafiltration+in+rabbits+with+superficial+glomeruli%5BTitle%5D)+AND+%22EUropean+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Glomerular untrafiltration in rabbits with superficial glomeruli.</a> EUropean Journal of Physiology. 419 (3-4), 235-242 (1991).</li>
<li>Jobin, J., Bonjour, J. -P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+unrestrained+rats+with+inulin+infused+by+implanted+osmotic+pumps%5BTitle%5D)+AND+%22Americam+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Measurement of glomerular filtration rate in conscious unrestrained rats with inulin infused by implanted osmotic pumps.</a> Americam Journal of Physiology. 248 (5 Pt 2), F734-F738 (1985).</li>
<li>Lorenz, J. N., Gruenstein, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple%2C+nonradioactive+method+for+evaluating+single-nephron+filtration+rate+using+FITC-inulin%5BTitle%5D)+AND+%22Americam+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">A simple, nonradioactive method for evaluating single-nephron filtration rate using FITC-inulin.</a> Americam Journal of Physiology. 276 (1 Pt 2), F172-F177 (1999).</li>
<li>Qi, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serial+determination+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+mice+using+FITC-inulin+clearance%5BTitle%5D)+AND+%22Americam+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Serial determination of glomerular filtration rate in conscious mice using FITC-inulin clearance.</a> Americam Journal of Physiology. 286 (3), F590-F596 (2004).</li>
<li>Bivona, B. J., Park, S., Harrison-Bernard, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glomerular+filtration+rate+determinations+in+conscious+type+II+diabetic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Americam+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Glomerular filtration rate determinations in conscious type II diabetic mice.</a> Americam Journal of Physiology. 300 (3), F618-F625 (2011).</li>
<li>Rosen, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+anaesthesia+and+surgery+on+renal+hemodynamics%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Effects of anaesthesia and surgery on renal hemodynamics.</a> British Journal of Anesthesiology. 44, 252-258 (1972).</li>
<li>Cousins, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+and+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia+and+intensive+care%22%5BJournal%5D)">Anesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and intensive care. 11 (4), 292-320 (1983).</li>
<li>Walter, S. J., Zewde, T., Shirley, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+anaesthesia+and+standard+clearance+procedures+on+renal+function+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Quarterly+Journal+of+Experimental+Physiology%22%5BJournal%5D)">The effect of anaesthesia and standard clearance procedures on renal function in the rat.</a> Quarterly Journal of Experimental Physiology. 74, 805-812 (1989).</li>
<li>Rieg, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+method+for+measurement+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A high-throughput method for measurement of glomerular filtration rate in conscious mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (75), (2013).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarını olduğunu beyan ederim. görüş veya burada yer alan iddiaların yazarın özel görünümleri vardır ve resmi ya da Ordu Bölümü veya Savunma Bakanlığı görüşlerini yansıtan şeklinde olması değildir.

Dört kriterleri karşılaması gerekir GFH ölçümünde uygun bir işaretleyici: glomerülden serbestçe süzülür edilmesi, plazma proteinlerine bağlanmamış olması ve ne emilir ne nefron salgılandığı. İnülin bu ölçütlerini karşılayan bir fruktoz polimerdir. Sonuç olarak, inulin renal klirensi GFH 7 ölçmek için altın standart olarak kabul edilir. gösterdi tekniği inulin 8,9 sabit bir infüzyon sırasında Zamanlı idrar koleksiyonları kullanılarak inulin renal klerensini belirlenmesi geleneksel yaklaşımı temsil e...

Böbreğin en önemli işlevi hücre dışı su ve elektrolit içeriğinin homeostatik olarak düzenlenmesidir. Böbrekler, normal fizyolojik seviyeleri korumak için hücre dışı su, sodyum (Na) ve potasyumu (K) yakından düzenler. Böbrek fonksiyonlarındaki bozukluklar ölümcül olabilen ciddi metabolik bozukluklara neden olabilir. Temel böbrek süreci nefron içinde meydana gelir ve glomerulusta plazmanın süzülmesiyle başlar ve idrarın atılmasıyla sona erer. İdrardaki son su, Na ve K konsantrasyonunu belirleyen diğer süreçler, nefron içinde salgılanma ve yeniden emilimdir. Glomerüler filtrasyon hızı (GFR) ve Na ve K'nin fraksiyonel atılımı ölçümleri, sağlık ve hastalıkta böbrek fonksiyonunun değerlendirilmesinde kritik öneme sahiptir. Okuyucu, böbrek fonksiyonu1-4 hakkında daha kapsamlı bir tartışma için daha önce yayınlanmış derleme makalelerine ve ders kitaplarına yönlendirilir. 
GFR, glomerulusta süzülen, ancak nefron5 boyunca salgılanmayan veya yeniden emilmeyen inülinin kararlı durum renal klerensi olarak ölçülebilir. Bu teknik anestezi, cerrahi hazırlık ve terminal deney gerektirse de GFR ölçümünün altın standardı olarak kabul edilir. Floresein-izotiyosiyanat (FITC) ile etiketlenmiş inülin kullanılarak, FITC-inülinin plazma ve idrar konsantrasyonu küçük hacimlerde kolayca ölçülebilir ve bir deneyin birden fazla zaman noktasında GFR'yi hesaplamak için kullanılabilir. Na ve K'nin fraksiyonel atılımı, plazma ve idrardaki Na ve K konsantrasyonundan belirlenebilir. 
Böbrek fonksiyonunun nasıl ölçüleceğine dair kavramsal anlayış, öğrencilerin deneyin bazı yönlerine aktif olarak katılmalarına izin vermek için tasarlanmış kısa bir laboratuvarda kolayca gösterilebilir. Bu video, laboratuvar öncesi hazırlığı, böbrek fonksiyon gösterimini ve sonuçların laboratuvar sonrası değerlendirmesini göstermektedir. Anestezi uygulanmış bir sıçanda GFR ölçümleri için gerekli cerrahi teknikler gösterilmiştir. Ek olarak, GFR için örnek hesaplamalar ve Na ve K'nin fraksiyonel atılımı, bir diüretik ilacın uygulanmasından önce ve sonra gösterilmiştir.

<table><tbody><tr><td>5-0 Örgülü İpek Cerrahi Sütür</td><td>Cerrahi Uzmanlık Alanları Corp</td><td>SP1033</td><td></td></tr><tr><td>Test Plakası, 96 Kuyulu</td><td>Costar&nbsp;</td><td>3922</td><td></td></tr><tr><td>Sığır Serumu Albümin</td><td>Sigma Chemical Co</td><td>A2934-25G</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Beckman Coulter</td><td>MicroFuge 18, 357160</td><td></td></tr><tr><td>Konik Örnek Tüpleri</td><td>Dot Scientific Inc.&nbsp;</td><td>#711-FTG</td><td></td></tr><tr><td>Pamuk Uçlu Aplikatörler</td><td>Solon Manufacturing Co</td><td>56200</td><td></td></tr><tr><td>Veri Toplama Yazılımı</td><td>ADI Cihazları</td><td>LabChart Pro 7.0</td><td></td></tr><tr><td>Dijital Tartı&nbsp;</td><td>Denver Enstrümanı</td><td>APX-4001</td><td></td></tr><tr><td>FITC-Inülin</td><td>Sigma Kimyasal Co</td><td>F3272-1G</td><td></td></tr><tr><td>Gazlı Bez Süngerler</td><td>Covidien</td><td>2146</td><td></td></tr><tr><td>Isıtmalı Cerrahi Yatak</td><td>EZ-Anestezi</td><td>EZ-212</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Sagnet</td><td>NDC 25021-402-10</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma Kimyasal Co</td><td>H3375</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Abbott Hayvan Sağlığı</td><td>IsoFlo, 5260-04-05</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran Buharlaştırıcı</td><td>EZ-Anestezi</td><td>EZ-190F</td><td></td></tr><tr><td>Mikro Diseksiyon Forseps</td><td>Biyomedikal Araştırma Aletleri A.Ş.</td><td>70-1020</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplaka Okuyucu - Fluoroskan</td><td>ThermoScientific</td><td>Ascent FL, 5210460</td><td></td></tr><tr><td>NOVA 5+ Sodyum/Potasyum Analizörü</td><td>NOVA BioMedical</td><td>14156</td><td></td></tr><tr><td>Olsen-Hegar Makaslı İğne Tutucular</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12002-12</td><td></td></tr><tr><td>PE-190 (mesane kateteri için)</td> <td>BD Medical</td><td>427435</td><td></td></tr><tr><td>Basınç Dönüştürücü ve nbsp;</td><td>Pyrex</td><td></td> Kültür Tüpleri MLT1199 <td></td></tr><tr><td>Ekipmanları</td><td>Corning Inc.</td><td>99445-12</td><td></td></tr><tr><td>Sıçan Femoral Konik Arter Kateteri</td><td>Stratejik Uygulamalar A.Ş.</td><td>RFA-01</td><td></td></tr><tr><td>Salix Furosemid% 5</td> <td>Intervet</td> <td># 34-478</td><td></td></tr><tr><td>Şaşılık Makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14075-11</td><td></td></tr><tr><td>Öğrenci Cerrahi Makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>91402-12</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Eldivenler</td><td>Kimberly-Clark</td><td>Sterling Nitril Eldiven</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga pompası</td><td>Razel Scientific</td><td>R99-E</td><td></td></tr><tr><td>Doku Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>91121-12</td><td></td></tr><tr><td>Doku Makası</td><td>George Tiemann&nbsp; Co</td><td>105-420</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">5-0 Örgülü İpek Cerrahi Sütür Cerrahi Uzmanlık Alanları Corp SP1033 Test Plakası, 96 Kuyulu Costar&nbsp; 3922 Sığır Serumu Albümin Sigma Chemical Co A2934-25G Santrifüj Beckman Coulter MicroFuge 18, 357160 Konik Numune Tüpleri Dot Scientific Inc.&nbsp; #711-FTG Pamuk Uçlu Aplikatörler Solon Manufacturing Co 56200 Veri Toplama Yazılımı ADInstruments LabChart Pro 7.0 Dijital Ölçek&nbsp; Denver Enstrüman APX-4001 FITC-Inulin Sigma Chemical Co F3272-1G Gazlı Bez Süngerler Covidien 2146 Isıtmalı Cerrahi Yatak EZ-Anestezi EZ-212 Heparin Sagnet NDC 25021-402-10 HEPES Sigma Chemical Co H3375 Isofluran Abbott Hayvan Sağlığı IsoFlo, 5260-04-05 İzofluran Buharlaştırıcı EZ-Anestezi EZ-190F Mikro Diseksiyon Forseps Biyomedikal Araştırma Aletleri A.Ş. 70-1020 Mikroplaka Okuyucu - Fluoroskan ThermoScientific Ascent FL, 5210460 NOVA 5+ Sodyum/Potasyum Analizörü NOVA BioMedical 14156 Olsen-Hegar Makaslı İğne Tutucular Güzel Bilim Araçları 12002-12 PE-190 (mesane kateteri için) BD Medical 427435 Basınç Dönüştürücü&nbsp; Pyrex Kültür Tüpleri MLT1199 Cihazlar Corning Inc. 99445-12 Sıçan Femoral Konik Arter Kateteri Stratejik Uygulamalar A.Ş. RFA-01 Salix Furosemid %5 Intervet #34-478 Şaşılık Makası Güzel Bilim Araçları 14075-11 Öğrenci Cerrahi Makas Güzel Bilim Araçları 91402-12 Cerrahi Eldivenler Kimberly-Clark Sterling Nitril Eldiven Şırınga pompası Razel Scientific R99-E Doku Forseps Güzel Bilim Araçları 91121-12 Doku Makası George Tiemann&nbsp; Co 105-420</sayfa ></td></tr></tbody></table>

fizyoloji laboratuvarı gösteri: bir sıçan glomerüler filtrasyon hızı

Physiology Lab Demonstration: Glomerular Filtration Rate in a Rat

Glomerüler filtrasyon hızı (GFR) ölçümleri ve sodyum (Na) ve potasyumun (K) fraksiyonel atılımı sağlık ve hastalıkta böbrek fonksiyonunu değerlendirmede kritik öneme sahiptir. GFR, glomerulusta süzülen, ancak nefron boyunca salgılanmayan veya yeniden emilmeyen inülinin kararlı durum renal klerensi olarak ölçülür. Na ve K'nin fraksiyonel atılımı, plazma ve idrardaki Na ve K konsantrasyonundan belirlenebilir. İnülinin renal klerensi, femoral arter, femoral ven ve mesanede kateterleri olan anestezi uygulanmış bir hayvanda gösterilebilir. Bu prosedür için kullanılan ekipman ve malzemeler, bir araştırma merkezinde yaygın olarak bulunanlardır ve bu nedenle bu prosedürü böbrek fonksiyonunu ölçmek için pratik bir araç haline getirir. Bu videonun amacı, bir idrar söktürücü ilaçtan önce ve sonra böbrek fonksiyonunun değerlendirildiği bir laboratuvar gösterimi gerçekleştirmek için gerekli prosedürleri göstermektir. Sunulan teknik, böbrek hastalığının sıçan modellerinde böbrek fonksiyonunu değerlendirmek için kullanılabilir.

laboratuvar gösteride kullanılan diüretik çok hızlı ilaç uygulama birkaç dakika içinde artmış Na, K sonuçlanan böbrek ve su atılımı tarafından filtre Na ve K emilimini inhibe furosemid oldu. Birincil mekanizma ile, furosemid GFH ve Na ve K filtrelenmiş yük üzerinde minimal etkisi olmalı, ama Na ve K idrar akışını ve fraksiyonel atılımını artacak Bir anestezi uygulanmış sıçanlarda, GFR ilaç öncesi değerlerin ortalaması / dakika, Na atılımı 0.58 umol / dakika (süzüldü yükün% 0.1) 3.2 ml oldu v...

Bu protokolün amacı, bir sıçanda glomerüler filtrasyon hızını, idrar akış hızını ve sodyum ve potasyum atılımını ölçmek ve hesaplamak için ilke ve teknikleri göstermektir. Bu gösteri, öğrencilere böbrek fonksiyonunun nasıl ölçüleceğine dair genel bir kavramsal anlayış sağlamak için kullanılabilir.

Fizyoloji Laboratuvarı Gösteri: Bir Sıçan Glomerüler Filtrasyon Hızı

Measurements of glomerular filtration rate (GFR), and the fractional excretion of sodium (Na) and potassium (K) are critical in assessing renal function ...

physiology-lab-demonstration-glomerular-filtration-rate-in-a-rat

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

2-foton mikroskopi yüksek çözünürlüklü intavital kullanan bir teknik doğrudan görselleştirmek ve yüzey glomerüllerde gloemrular filtrasyon ölçmek için. Bu yöntem, normal ve hastalıklı hem Devletler makromoleküllerin geçirgenlik özelliklerinin doğrudan belirlenmesi için olanak sağlar.

Münih Wistar Sıçanlarda 2-Foton Mikroskopi kullanarak Floresan Makromoleküllerin Glomerüler geçirgenliği miktarının

Glomerüler filtrasyon hızı (GFR) ölçümü böbrek fonksiyonunun değerlendirilmesi için altın standarttır. Burada iki aşamalı bir üstel bozulma modeli ile plazma ve GFR hesaplanmasında tek bolus enjeksiyon, floresein izotiyosiyanat belirlenmesi (FITC)-inulin kullanarak bilinçli farelerde GFR belirlenmesinde sağlayan yüksek verimli yöntem açıklanmaktadır.

Bilinçli Farelerde Glomerüler Filtrasyon Hızı Ölçümü için bir Yüksek verimli Yöntemi

Podositlerdeki hücre içi kalsiyum seviyelerindeki değişiklikler, glomerüllerin filtrasyon fonksiyonunu kontrol etmenin en önemli yollarından biridir. Burada, yeni izole edilmiş glomerüllerin podositlerinde gerçek zamanlı kalsiyum işlemenin ve tek iyon kanalları aktivitesinin tespit edilmesini sağlayan yüksek verimli bir yaklaşımı açıklıyoruz.

Taze İzole glomerulusların Podositler Tek kanallı Analizi ve Kalsiyum Görüntüleme

Glomerüler filtrasyon hızının (GFR) belirlenmesi, genel böbrek fonksiyonunu değerlendirmek için altın standarttır. Bununla birlikte, bu parametreyi ölçmek için geleneksel prosedürler zahmetlidir ve büyük bir zaman yatırımı gerektirir. Burada, GFR'yi transkutanöz olarak belirlemek için daha hızlı ve minimal invaziv bir yöntem tanımlanmıştır.

Bilinçli Kemirgenler Böbrek Fonksiyon Transkutanöz Değerlendirmesi

Bu iletişim kuralı bir tam böbrek iş-up glomerular hastalığı fare modellerinde yürütülmesi gereken açıklar. Yöntemler glomerular hastalığı tüm fare modelleri uygulanabilir glomerular işlevinin ayrıntılı işlevsel, yapısal ve mekanik analiz için olanak sağlar.

Fare modelleri Glomerular hastalığı böbrek fonksiyonlarının değerlendirilmesi

Bu protokol ana odak verimli bir şekilde uygun birincil glomeruli kültürlerin çeşitli aşağı akım uygulamaları kullanmak için en az kirletici maddeleri ile izole etmektir. İzole glomeruli bileşeni hücre tipleri arasındaki yapısal ilişkileri korumak ve kültürlü ex vivo kısa bir süre için olabilir.

Yetişkin sıçan böbrek üzerinden olduğu gibi Glomeruli yalıtmak için verimli bir eleme yöntemi

Burada tarif biz bilinçli, glomerular filtrasyon debisi (GFR) ölçmek için bir protokol bir transdermal GFR monitör kullanarak fareler serbestçe hareket.

Farelerde Glomerular filtrasyon transdermal ölçümü

Burada, farelerde çok hassas, radyoaktif olmayan bir izleyici kullanarak glomerüler geçirgenliği test etmek için bir protokol sıyoruz. Bu yöntem küçük idrar hacimleri ile tekrarlayan idrar analizleri sağlar.

Floresan Isotiyoyanat-polisucrose 70 ile Farelerde Glomerüler Geçirgenliğin Yüksek Hassas Ölçümü

Burada, uzun süreli üreter tıkanıklığının glomerüler dinamikler ve fonksiyon üzerindeki etkilerini ölçmek için Münih Wistar Fromter sıçanlarında yüzey glomerüllü 2-foton mikroskobu kullanan bir protokol sunuyoruz.

Kronik Tek Taraflı Üreter Tıkanıklığının Glomerüler Prosesler Üzerindeki Etkilerini Ölçmek için 2-Foton Mikroskobu Kullanılması

Mevcut protokol, bilinçli sıçanlarda böbrek kan akışının uzun süreli sürekli ölçümünü ve aynı anda implante edilmiş kateterlerle (sıvı dolu veya telemetri ile) kan basıncının kaydedilmesini açıklamaktadır.

Bilinçli Sıçanlarda Renal Kan Akışının Uzun Süreli Sürekli Ölçümü

Glomerüler filtrasyon hızı (GFR), böbrek fonksiyonlarını değerlendirmek için ideal bir belirteçtir. Bununla birlikte, seri kan ve idrar analizi ile inülin enjeksiyonu kullanan standart ölçüm yöntemi pratik değildir. Bu makalede, domuz yavrularında GFR'yi transdermal olarak ölçmek için pratik bir yöntem açıklanmaktadır.

Mekanik Havalandırmalı Domuz Yavrularında Glomerüler Filtrasyon Hızının Transdermal Ölçümü

Öğrenin sıçanlarda glomerüler filtrasyon hızı, idrar akış hızı ve sodyum-potasyum atılımı ölçüm tekniklerini. Bu fizyoloji laboratuvarı gösterisi böbrek fonksiyonlarını pratik olarak anlamanızı sağlar.

Fizyoloji Laboratuvarı Gösteri: Bir Sıçan Glomerüler Filtrasyon Hızı

Daha fazla video keşfet