Kardiyoplejik Tutuklanma ile Miyokard Çarpıcı İlişkili sıçan İzole Kalp Modeli

Bu prosedürün genel amacı, kemirgenlerde iskemik kardiyoplejik arresti takiben ortaya çıkan miyokardiyal sersemlemeyi değerlendirmektir. Bu, yetişkin bir fareden alınan bir kalp olan ilk retrograd perfezing ile gerçekleştirilir. İkinci adımda, kalbin sol ventrikülüne bir balon yerleştirilir ve temel kontrol ölçümleri kaydedilir.

Hipotermik kardiyoplejik arrest daha sonra uygun deney periyodu için başlatılır ve ardından bir reperfüzyon periyodu takip edilir. Sonuç olarak, bu teknik, iskemik yaralanma sonrası miyokard fonksiyonunun iyileşmesi sırasında meydana gelen değişiklikleri izlemek için kullanılabilir. Bu yöntem, farede hafif iskemik intrüzetlerle ilişkili miyokardiyal sersemleme hakkında fikir verebilse de, sıçanlar ve iki ciddi iskemi reperfüzyon hasarı modeli gibi diğer memelilere de uygulanabilir.

Genel olarak, bu yönteme yeni olan bireyler mücadele edecektir, çünkü kalbi hızlı bir şekilde kanüle etmek zor olabilir, bu da stabil ve tekrarlanabilir bir hazırlık için bir gereklilik olabilir. Kalbi çıkarmak için torakotomi yapılır. İlk adım, sternumun hemen altında küçük bir delik açmak ve kesiği farenin yanlarına doğru uzatmaktır.

Ardından diyaframı hızlı bir şekilde kesin ve göğüs kafesinin yanlarını hızla yukarı kaldırın. Göğüs boşluğunu ortaya çıkarmak için göğüs kafesini bir kapaklı gibi geriye doğru çevirin. Sonra nazikçe kalbi tutun, makası altına yerleştirin ve organı çıkarın.

Kalbi buz gibi soğuk krema, henzel, hafif tampon veya KHB'den oluşan bir tabağa koyun ve büyük akciğer dokusu parçalarını kesin. Sonra yavaşça kalbi sıkın. Görünen herhangi bir kan, aortun açık ucunu göstermelidir.

Kalbi takmadan önce pompayı açın ve perfüzyon basıncının yaklaşık 20 milimetre cıva olduğunu onaylayın. Daha sonra kalbi aortun açık ucundan almak için ince cımbız kullanın ve kalbi yerinde tutarak kalbi perfüzyon sistemi kanülüne kaydırmak için başka bir ince cımbız seti kullanın. Aortu geçici olarak kanüle sabitlemek için yumuşak kenarlı bir klips kullanın.

Ardından, aortu klipsin hemen altındaki kanüle sabitlemek için dört sıfırlı ipek sütür kullanın. Düğümü sıkarken aortun bağlanmaması için bağı kanülün etrafına yerleştirmeye de özen gösterin. Kravat sıkıca yerine oturduktan sonra, klipsi çıkarın ve aortu kanüle güvenli bir şekilde sabitlemek için ek ipek dikişler kullanın.

Aorttan çıkan ve sızan veya perfüz sekizinci dışarı çıkan herhangi bir damar dalının altına dikişleri bağlamak. Perfüzyonun ilk aşamalarında, kan kalpten yıkanmalı ve tüm organ yumuşak pembe bir renge dönmelidir Kanül sabitlendiğinde, füzyon basıncı 70 milimetre cıvaya ulaşana kadar füzyon basıncını ve pompa hızını yavaşça artırın. Hala kalbe bağlı kalan dokuyu çıkarın.

Ardından sol ventrikülde bir açıklık oluşturmak için sol kulakçıkları kesin. Şimdi tutucunun üzerine bir balon yerleştirin ve söndürün. Daha sonra balon kanülünü aort kanülünün yakınına doğrudan sol ventrikül açıklığının üzerine yerleştirin ve aortun yırtılmaması için kalbi yerinde tutarken balonu dikkatlice sol ventriküle aşağı doğru yerleştirin.

Balon yerleştirildikten sonra, sol ventrikül ucu diyastolik basıncı yaklaşık sekiz milimetre cıvaya ulaşana kadar balonu yavaşça şişirmeye başlayın. Ardından, atık suyun sıcaklığını ölçmek için kalbin altına bir sıcaklık probu yerleştirin. Bazal ölçümü almak için, kalbi sürekli KHB perfüzyonu ile 37 santigrat dereceye ayarlanmış su ceketli bir perfüzyon odasına kapatın.

Ardından, uygun veri toplama sistemini kullanarak ilgilenilen fonksiyonel ölçümlerin sürekli kaydına başlayın. Atık su en az 15 dakika boyunca yaklaşık 37 santigrat dereceye ulaştığında ve kardiyak fonksiyonel parametreler stabil olduğunda, temel ölçümlerin süresine dikkat edin. Ardından, koroner atık suyun toplanması ve dereceli bir silindir yoluyla koroner akışı ölçün.

Bir dakika sonra hazneyi kapatın ve sıcaklığın ve fonksiyonun temel değerlere dönmesine izin verin. Tutuklamayı şimdi başlatmak için, ikinci bir rezervuara 100 mililitre soğuk kardiyoplejik veya CP tamponu ekleyin ve KHB rezervuar kanülünü CP rezervuarına aktarın. Hızlı boru bağlantı kesmelerini kullanarak, su ceketli muhafazayı ve bolluk ısıtma devresini ılık su banyosundan soğutmalı sirkülatöre aktarın, geçiş sırasında füzyon tüpüne giren hava kabarcığını takip edin.

İzole edilmiş kalbin yakınındaki kabarcık tuzağına girdiğinde, kardiyopleji için zamanlamayı başlatın ve tamponu iki dakika boyunca verin. CP verildiğinde ve kalp soğudukça, kardiyak fonksiyon azalacak ve ilk dozdan sonra diyastolü durduracaktır. Pompayı durdurun ve kalbi yaklaşık 20 santigrat derecede iki saat boyunca CP tamponunda tutun, CPE süresinin sonunda başka bir doz uygulamak için pompayı her yarım saatte bir bir dakika boyunca açın, rezervuar kanülünü tekrar oksijenli KKH'ye aktarın ve sıcaklık kontrol devrelerini ısıtma sirkülatörüne bağlayın.

Ardından, CP tamponunu yıkayarak 30 dakikalık bir reperfüzyon başlatmak için pompayı açın. İki ila dört dakika sonra, sıcaklık yükselecek ve kalp yavaşça atmaya başlayacak ve uygun koroner akış ölçümlerini elde etmek için atık suyu bir seferde 30 ila 60 saniye boyunca dereceli bir silindirde ritmik olarak toplayacaktır. Burada, bir fare deneyinden elde edilen tipik sonuçlar, sol ventrikül basıncının veya LVP'nin pozitif ve negatif ilk türevi olan sol ventrikül basıncının ve sıcaklığın, reperfüzyonda gösterildiği gibi, yaklaşık üç saat boyunca sürekli olarak kaydedildiği gösterilmiştir: depresif bir LVP ve LVP'nin taban çizgisine kıyasla depresif pozitif ve negatif ilk türevi burada gözlenmiştir.

İskemik CP tutuklamasından iki saniye önce ve sonra kaydedilen perfüzyon basıncı LVP ve önceki şekilden LVP verilerinin pozitif ve negatif ilk türevi gösterilmiştir. LVP'deki değişikliklerin ve LVP verilerinin pozitif ve negatif ilk türevinin nasıl gözlemlendiğini göstermek: 30 dakikalık reperfüzyondan sonra kardiyoplejinin indüksiyonundan ve kardiyak fonksiyonda yaklaşık% 30 ila 40 azalma, bu son grafikte izlenen sol ventrikül gelişmiş basınç verileriyle kanıtlandığı gibi tipik olarak gözlenir. Bir kez ustalaştıktan sonra, kalp uygun şekilde yapılırsa yaklaşık bir ila iki dakika içinde alınabilir ve perfüzyon cihazına monte edilebilir.

Bu videoyu izledikten sonra, bir fare kalbinin nasıl çıkarılacağını ve perfüze edileceğini, sonraki hipotermik kardiyoplejik arrest ve reperfüzyonu iyi anlamış olmalısınız.