Modifiye Delik Kurulu - Fareler ve Sıçanlarda Davranışı, Biliş ve Sosyal Etkileşim Ölçme

Aşağıdaki deneylerin genel amacı, küçük laboratuvar memelilerinin koşulsuz davranışlarını ölçmek ve bilişsel yeteneklerini analiz etmektir. Bu, hayvanların kafes arkadaşları varken veya yokken koşulsuz davranışlarını gözlemlemek ve puanlamak için modifiye edilmiş delikli tahtaya yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir. Ayrıca, testten önce düzeneğe yeni ve tanıdık bir nesne veya yem peleti yerleştirilebilir; bu, nesne tanıma veya gıda alımı inhibisyonunu ölçmek için kullanılabilir.

Bu yöntemin üçüncü bir uygulaması, ödülün kontrast renkli bir tanımlayıcı ile kuyruğa alındığı modifiye edilmiş tüm tahta düzeneğinin bilişsel versiyonuna hayvanın yerleştirilmesidir. Denek hayvanın bilişsel yeteneklerini ölçmek amacıyla elde edilen sonuçlar, koşulsuz davranışların bir yelpazesini göstermektedir. Yöntem, geleneksel delikli tahta ve açık alan testlerinin özelliklerini içeren tek bir paradigmada birden fazla davranışsal boyutu birleştirdiğinden; bu tekniğin temel avantajı, kullanılan hayvan sayısını azaltarak, olası test sırası etkilerini önleyerek ve zaman etkisini ve maliyetleri düşürerek bir test bataryasının dezavantajlarının üstesinden gelmesidir. Testler, normal olarak hayvanların barındurulduğu odada, hayvanın en aktif evresi olan karanlık evrede gerçekleştirilmelidir; ancak bu videonun amaçları doğrultusunda testler parlak ışık koşulları altında gerçekleştirilmiştir.

Davranışsal testler, çevrelerine ve deneycinin tutuşuna alıştırılmış hayvanlar üzerinde gerçekleştirilmelidir. Silindirleri içeren panoyu deney kutusunun ortasına yerleştirin. Ardından, pano ile kutu arasında ışık yoğunluğu farkı oluşturmak ve panonun itici karakterini artırmak için panonun üzerine bir sahne ışığı yerleştirin.

Başlamak için, tanıdık nesneyi aparata, başlangıç noktasının karşısındaki köşede bulunan yeni bir nesneden iki santimetre uzağa yerleştirin. Ardından, test edilecek hayvanı ev kafesinden çıkarın ve aparatın belirli bir köşesinde, yüzü duvara bakacak şekilde yerleştirin. Hayvanın yaklaşık beş dakika boyunca serbestçe keşfetmesine izin verin.

Davranışsal parametrelerin, deneyimli bir gözlemci tarafından davranışsal skorlama yazılımı kullanılarak puanlanmasını sağlayın. Bu tabloda listelenen parametreleri kullanın ve ayrıca hayvanın yeni ve tanıdık nesneye veya yeni ve tanıdık gıdaya yaklaşma süresini ölçün. Her denemeden sonra düzeneği musluk suyu ve kağıt havlu ile temizleyin.

Koku ipuçlarına dayalı bir yanlılığı önlemek için, deney hayvanını test etmeden önce grup arkadaşlarını alışma sağlamaları amacıyla grup bölmesine 10 ila 30 dakika boyunca yerleştirin. Ardından, deney hayvanını test bölmesine yerleştirin ve modifiye edilmiş tüm panoyu beş dakika boyunca veya kendi protokolünüzün gerektirdiği süre kadar serbestçe keşfetmesine izin verin. Tekrar olarak, deneyimli bir gözlemcinin, tablo bir'de listelenen parametreleri kullanarak davranışsal puanlama yazılımı aracılığıyla davranışsal parametreleri canlı olarak puanlamasını sağlayın.

Bu deneye başlamadan önce hayvanları oldukça iştah açıcı bir ödüle alıştırın. Burada bir parça badem kullanılmıştır. Deneyden önceki iki ardışık gün boyunca, günde bir kez ev kafesinde cımbızla ödül sunun; kutunun boyutunu 50 by 50 santimetreye indirmek için bir bölme yerleştirin.

Farelerin testi için, kutunun ortasına daha küçük bir tahta yerleştirin. Bu diyagram, modifiye edilmiş delikli tahtanın kurulumunu göstermektedir. Ardından, tüm 10 silindiri hayvanların ilgisini çekecek vanilya gibi bir kokuyla; tüm silindirlerdeki ödülleri ise çıkarılamayacak şekilde bir ızgaranın altına yerleştirerek yemleyin.

PVC ile kontrast oluşturan renkli bir halkaya sahip Q3 silindirlerini, çıkarılabilir bir ödülle yemleyin. Hayvanı tekrar aparatın aynı köşesine yerleştirin ve deneyimli bir gözlemcinin canlı puanlama yapmasını sağlayın. Davranışsal parametreleri davranışsal puanlama yazılımı kullanarak kaydedin.

Nesne tanıma veya gıda alımı inhibisyonu ile ilgili parametreler hariç olmak üzere, tablo birde daha önce gösterilenlere ek olarak tablo ikide listelenen parametreleri ölçün. Üç badem parçasının tamamının toplanması için sabit bir süre belirlenene kadar, sabit bir denemeler arası aralıkla günde dört eğitim denemesi gerçekleştirin. Tersinme öğrenmesini test etmek için koku ipuçlarına dayalı bir yanlılığı önlemek amacıyla, her denemeden sonra aparatı musluk suyu ve kağıt havlu ile temizleyin.

Hayvan tamamen eğitildikten sonra, üç farklı silindiri veya kendi protokolünüzün gerektirdiği sayıdaki farklı silindiri işaretleyin ve yemleyin; ardından hayvanı gerekli deneme sayısı boyunca test edin. İlk dört görüntü; hafif serebral hipoksi iskemili (HI 45 olarak etiketlenmiş), şiddetli hipoksi iskemili (HI 75 olarak etiketlenmiş) C 57 black six J farelerinin ve sham kontrol farelerinin bilişsel işlevselliğini ölçen bilişsel test paradigmasının sonuçlarını göstermektedir. Bu grafik, bir test günündeki dört denemeyi tamamlama süresinin ortalamasını göstermektedir.

Bu grafik, her test gününde yemlenmiş bir deliğe yapılan tekrar ziyaret sayısını göstermektedir. Kısa süreli bellek hatalarının bir ölçüsüdür. Burada, yemlenmemiş deliklere yapılan ziyaretler gösterilmiştir.

Bu, uzun süreli bellek hatalarının bir ölçümüdür. Burada, atlama hatalarının sayısına ilişkin veriler gösterilmiştir. Atlama hatası, ziyaret edilmeyen yemli silindirlerin sayısı olarak tanımlanır.

I 45 grubunda bilişsel bozukluk olmadığını teyit etmek için, bu grup sham kontrollerle karşılaştırılmıştır. Bir tersine çevirme (reversal) görevinde, yem konulmuş üç delik üç farklı silindire atanmış ve hayvanlar dört deneme boyunca test edilmiştir. Tersine çevirme etkisi, ilk aşamanın son denemesi ile tersine çevirme aşamasının ilk denemesi karşılaştırıldığında belirginleşmektedir.

Bu görüntü, her iki grup için denemeyi tamamlama süresini göstermektedir ve genel tedavi etkisi açıkça görülmektedir. Bu durum, modifiye edilmiş tüm tahta ve tersine çevirme görevi kullanılarak tespit edilebilen, HI 45 grubunda bozulmuş bilişsel esneklik olduğunu göstermektedir. Bu videoyu izledikten sonra, modifiye edilmiş tüm tahtanın hem genel hem de bilişsel versiyonda nasıl kullanılacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.