Name: Deneysel Spinal Kord Yaralanmalarında Omurilik Kan Akımının Değerlendirilmesi için geliştirilmiş Ultrason Görüntüleme Kontrast (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 19 s
Description: Öğrenin, sıçan omurilik yaralanması modelinde kontrastlı ultrason ile omurilik kan akışını nicelendirmeyi. Bu yöntem, in vivo kan akışı değişikliklerini ve morfolojik değerlendirmeyi birlikte sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Stephanie Gorgeard, Thierry Scheerlink (Toshiba Fransa) ve Christophe Lazare'ye (Bracco Fransa) teşekkür ederiz.

NOT: Bu yazıda anlatılan yöntemleri Tıp, Paris, Fransa (CEEALV / 2011-08-01) arasında Lariboisière Okulu Biyoetik Komitesi tarafından onaylandı. 1. Enstrüman Hazırlık <ol><li> Hazırlayın ve kateter aşağıdaki araçları temizleyin: Mikro forseps, mikro-makas, mikro vasküler kelepçe, büyük makas, cerrahi iplik (Siyah örgülü ipek 4-0) ve 14 G kateter. Bir heparin çözeltisi (5000 U / ml) ile kateter Heparinize. </li><li> Hazırlayın ve laminektomi için aşağıdaki araçları temizleyin: Büyük makas, neşter ve kemik kesici. Laminektomi (Şekil 1) sırasında omuriliği zarar riskini azaltmak için tasarlanmış bir ısmarlama kemik kesici ile laminektomi gerçekleştirin. </li><li> Set-up hayvan konumlandırılması ve stabilizasyonu için kullanılan 3D-çerçeve. ısmarlama çerçeve forseps ile birlikte bir Eksternal Fiksatör Hoffman 3 unsurları ile inşa edilmiştir yüklenebileceğinih hayvanın bel omurgasını uyması için kavisli oylandı. </li><li> Omurilik yaralanması biyomekanik için kullanılan ağırlık bırak cihazı (çarpma) hazırlayın. NOT: ısmarlama çarpma cihazı 3D yazılımı ile tasarlandı ve 3D basılmıştır. </li><li> Ultrason Makineyi açın. </li><li> Kontrast madde sulandırma için kiti hazırlayın. Not: Kit liyofilize edilmiş toz, 25 mg, 5 ml sodyum klorür ve bir mini başak transfer sistemi (Şekil 2) ihtiva eden 1, önceden doldurulmuş bir şırınga ihtiva eden 1 şişe içerir. kontrast madde yeniden oluşturulmak üzere adımlar (5. bölümünde) aşağıda detaylandırılmıştır. </li></ol> 2. Juguler Ven Kateterizasyon (Şekil 3) <ol><li> % 4 izofluran ile hayvan anestezisi. Yatar pozisyonda hayvan yerleştirin. Pençeleri bir forseps ile sıkışmak zaman hayvan tepkisiz sağlayarak doğru anesthetization onaylayın. Und sırasında kuruluğunu önlemek için gözleri veteriner merhem sürüner anestezi. </li><li> Boyun Tıraş ve cildi temizleyin. Boynun orta hat üzerinde bir kesi yapmak. Internal juguler ven bulmak için sternocleidomastoidian kas geri çekin. Ven rostral kısmında bir bitişik harfleri sıkın. </li><li> Ven, ligature altında 1 cm üzerinde bir mikrovasküler kelepçe uygulayın. Sadece kelepçe bırakıldığında sıkın olmaya hazır düğümlü kelepçe altında, ven etrafında başka geçirin. </li><li> Kelepçe ve rostral dikilen arasındaki damar (venotomi) duvarını açın. Ven lümeninde 14 G kateter tanıtılması ve kalbin doğru itin. </li><li> Bu kelepçe karşı karşıya gelince, ikincisi bırakın ve daha fazla kateter itin. Sıkıca iç kateter ile damara düğüm sıkarak, ven kateteri sabitleyin. </li><li> Kateter venöz kan küçük bir miktar geri çekilmesi ve daha sonra daha sonra heparinize tuzlu su ile yıkama ile kateterin açıklığı değerlendirmek. Bu c tıkanıklığı önlerpotansiyel bir kan pıhtısı ile atheter. </li><li> Kontrast madde (mikro kabarcıklar) daha enjeksiyon için kateter esnek boruyu bağlayın. Kullanıma hazır olana kadar (mühürlü) kapalı tutun. </li></ol> 3. Spine erişme laminektomi ve Rat Konumlandırma (3D-çerçevede) <ol><li> Düz eğilimli yatay konumda hayvan yerleştirin. Tıraş ve hayvan arkasını (torakal bölge) temizleyin. </li><li> Palpasyon (Şekil 4) son kaburga (sıçan XIII) tanımlayın. Bu kimse XIII torakal vertebra (ThXIII) yerini tahmin etmek için izin verir. </li><li> ThXIII merkezli orta hat üzerinde 4 cm&#39;lik cilt kesisi, emin olun. Cilt insizyonu ve altta yatan bursa açın. Arka kasların künt yanı sıra omurga omurga süreçlerinin ipuçlarını dikkate alın. </li><li> Dikkatle XIII kaburga palpe edilerek ThXIII omurga sürecini lokalize. Not: XIII yiv bu yüzden ThXIII bağlanır ve loca kolay temsil ederThXIII tanımlanması için te anatomik dönüm. Bu adım, ThXII lokalizasyonu spinöz olarak L1 ve L2 (birinci ve ikinci bel vertebralar) Thix sağlar. </li><li> Kas künt kesin ve L2 Thix dan spinöz süreçleri, laminalar ve faset eklemleri açığa iki tarafında kasları ayırın. Enine süreçlerden kasları ayırarak L1 ve L2 lateral yönlerini Açığa. </li><li> Pozisyon (Şekil 5) sabitlemek için 3D-çerçeve üzerinde hayvanın kesici dişleri Hook. Modifiye forseps ile L1 ve L2 vertebralar kelepçe. Hayvan stabilize etmek için, 3D-çerçeveye modifiye forseps bağlayın. </li><li> Yavaşça tüm omurgayı sıkın ve tezgah toraks yükseltmek amacıyla kaudal lomber omurga tutan forseps çekin. Not: Açıklanan düzenleme ile, hayvan nefes mümkün olmalıdır. Ayrıca, göğüs kafesi, omurga ve omurga solunum hareketlerinin rağmenkordon da hareketsiz kalmalıdır. </li><li> Thix gelen ThXII için spinöz prosedürlerinden çıkarın. Yavaşça ThXII sol lamina altında kemik kesici alt bıçak yerleştirin ve sonra lamina (Şekil 6) kesmek için kemik kesici kapatın. </li><li> Doğru lamina için aynı manevrayı tekrarlayın ve art arda arka kemer çıkarın. Dört seviyesi laminektomi elde etmek için Thix üzere omurganın ThXI önceki adımları tekrarlayın. Her omur hem faset eklemleri kaldırın. NOT: prosedür boyunca, yerel kanamadan operasyon alanını temizleyin. Bunun için, ılık tuzlu su ile pamuk bezlerden ve sulama kullanın. Hemostaz sistematik dakika içinde gerçekleşir. </li></ol> 4. CEU Probe Konumlandırma <ol><li> Ultrason jeli ile duramateri örtün. Bu prob ve omurilik (Şekil 7) arasındaki ultrason dalgalarının etkili iletimi sağlar. </li><li> Ultrason probu zekâ stabilizeDaha sonra, bir mafsallı kol ile 3D-çerçeveye bağlanabilir hektar kelepçesi. El ile prob yerleştirin. Sonda eğik bir boyuna sagital dilim elde etmek odaklı olduğundan emin olun. Doğru bir konumda, omurilik görüntü dikey ise ve omurilik merkezi kanal omurilik tam segmenti boyunca görülebilir. NOT: Konumlandırma ultrason makinesinin ekranda gerçek zamanlı B-mod görüntü ile yönlendirilmelidir. ultrason probunun odak mesafesi omuriliğin merkezi kanal ile aynı hizada olmalıdır. Şu anda, omurilik arka yüzleri sonuçta çarpma konumlandırılması için sağlayacak erişilebilir. </li><li> Ne zaman optimal pozisyonu stabilize etmek için eklemli kol kilitleyin. </li></ol> Kontrast Agent 5. Hazırlık - mikro-Sulandırma <ol><li> Ticari sulandırma kiti içeriğini kullanarak ve tig onu sıkarak piston kolu bağlamakhtly şırınga (saat yönünde) içine. Transfer sistemi blister açın ve şırınga ucu kapağı çıkarın. Transfer sistemi kapağını açın ve transfer sistemi şırınga bağlayın (sıkıca bağlayın). </li><li> Flakon koruyucu diski çıkarın. Şeffaf kovan içine flakon kaydırın </li><li> transfer sistemi ve sıkıca bastırın yerine flakon kilitlemek için. </li><li> Dalgıç çubuk üzerinde iterek şişenin içine şırınga içeriğini boşaltın. Beyaz renkteki bir sütümsü homojen bir sıvı elde etmek için bir küçük şişe içinde, tüm içerikleri karıştırmak için 20 saniye boyunca kuvvetli bir şekilde çalkalanır. </li><li> Sistemi ters çevirin ve dikkatlice şırınga içine kontrast madde çıkarın. Transfer sisteminden şırınga sökün. (Belirtildiği gibi), sulandırıldıktan sonra elde edilen dispersiyon, 1 ml mikro-kabarcıkların 8 ul kükürt heksafluorür içerir. 100 ml&#39;lik enjektöre kabarcıkların süspansiyon çizin. Elektrikli pompa içine 100 ml şırınga yerleştirin. Kapağı kapatın. </li><li> Yeniden sürekli ajitasyon başlatOluşturduğu mikro-kabarcıklar. Mikro-kabarcık süspansiyonu tutar şırınga, yavaş dönmesi ile elde edildi sabit bir ajitasyon. Esnek tüp yoluyla boyun kateter pompası bağlayın. &quot;Harmonic Mode&quot; ultrason makinesi olarak ayarlayın. Not: mikro-kabarcıklar özellikle algılanabilir ve görsel edilebileceği moduna ikinci uygun olmasıdır. Bu mod B-mod aksine mikrokabarcıkları yok etmez, düşük mekanik endeksi vardır. </li><li> Kontrast maddenin bir birinci doz (400 | il) infüzyonu ile kateter temizleyin. Bu ilk infüzyon sırasında mikro kabarcıklar ultrason ekranında görünmüyor olmadığını kontrol edin. Bu (sıçan kan dolaşımına şırınga) Bütün devre sağlam ve açık olduğunu doğrular. </li><li> Omurilik parankimi ve kan dolaşımında kalan birkaç kabarcıkların yıkımı görselleştirmek için &quot;B-modu&quot; ultrason makinesi olarak ayarlayın. &quot;B-Mode&quot; yüksek frekans tranarıza onları sağlayan mikro kabarcık için Smits yüksek enerji. </li><li> Hayvan yaklaşık 30 dakika boyunca hareketsiz yatıyordu edelim. Bu dönem hemodinamik parametrelerin stabilizasyonu için izin verir. </li></ol> Bozulmamış Omurilik içinde SCBF 6. Değerlendirilmesi <ol><li> &quot;Harmonic Mode&quot; ultrason makinesi olarak ayarlayın. Kontrast madde (400 ul), ve (2) kronometre eş zamanlı olarak (1) infüzyon başlatın. NOT: infüzyon sırasında, kan mikro-kabarcıkların konsantrasyonu omurilik (Şekil 8) kontrast dusunme sağlayan artmalıdır. Mikro kabarcıklar hızla tahrip olduğundan, mikrokabarcıkların kan konsantrasyonu enjeksiyonu omurilik kontrast görselleştirme ilerici bir azalma üretir tamamlandığında azalan başlar. </li><li> 1 dakika, select (basın) ultrason makinesinde &quot;Clip Store&quot; butonuna sonra. Bu r 1 dakika tasarruf sağlayacak biraw ultrason verileri ve kayıt görüntüleme, video (daha önce ultrason ekranında görüntülenen). </li><li> &quot;B-Mode&quot; ultrason makinesi olarak ayarlayın. Bu kalan mikrokabarcıkları ortadan kaldıracaktır. </li></ol> 7. Deneysel SCI <ol><li> ThX ve ThXI arasındaki kavşakta, çarpma ucu (spinal kord orta hatta üzerine) dura mater ile temas, böylece kilo damla çarpma cihazı yerleştirmek 3D çerçeveye bağlı mikromanipülatör kullanarak (Şekil 9) . NOT: Bu seviye ultrason aleti ile görülen omurilik segmentin orta uygun olmalıdır. vurucu ve çarpma gövde çapı 8 mm&#39;dir. yaralanma üretecektir çarpma ucu, çapı 3 mm dir. </li><li> 10 cm yüksekliğindeki pozisyonda çarpma cihazının forvet yerleştirin. Impaksiyon cihazın forvet bırakarak deneysel omurilik neden olur. forvet düşer ve bültenleri incie çarpma, omurilik yaralanmasına. ölçüye impaksiyon bir 10 g ağırlığına bir darbe eşdeğeri 10 cm yükseklikten düşürülen sunar. </li></ol> SCBF 5 dk Sonrası SCI 8. Değerlendirilmesi <ol><li> Bölüm 6 (SCBF Değerlendirilmesi) &#39;de açıklanan adımları tekrarlayın. microbubbles (Şekil 10) koyu kalır hasarlı mikrovasküler ve yaralanma merkez üssü geçmesi mümkün olmayacaktır. </li></ol> 9. Hayvan Kurban <ol><li> Pentobarbital intra-peritoneal öldürücü enjeksiyon (100 mg) ile bir hayvan ile öldürülür. </li></ol> Çevrimdışı Analizi SCBF 10. Kantitasyonu <ol><li> (Ultrason makinede) ölçümü için kullanılan Ultra uzatın Yazılımı başlatın. &quot;Dosyayı&quot; seçin ve ardından önceden kaydedilmiş ham veriyi seçin ve ilişkili dosyaları açın. (Seçerek) &quot;Chi Q&quot; tuşuna basarak &quot;miktar modu&quot; etkinleştirin. Select &quot;Set ROI&quot; (düğme) ve dairesel bir şekil seçin. </li><li> &quot;Yatırım getirisi Beraberlik&quot; ı seçin (düğme) ve omurilik (Şekil 11) faiz yedi bitişik dairesel bölgeleri (ROI) çizin. &quot;Montaj&quot; menüsünü açın ve işlev &quot;Eğri değerini&quot; seçeneğini seçin. Her bir ROI içindeki mikro kabarcık konsantrasyonu değişikliklerine karşılık, birkaç eğrileri görüntüleyen yazılım gözlemleyin. NOT: Her eğri bir &quot;perfüzyon-deperfusion&quot; profile sahiptir. eğrinin ilk aşaması düz ve kabarcıkların gelmeden önce döneme tekabül eder. İkinci aşamada, mikro-kabarcıkların konsantrasyonu hızlı infüzyon sonucu olarak artmaktadır. Bunlar kan disintegratse infüzyon tamamlandıktan sonra başlar, üçüncü aşamada, mikro-kabarcıkların konsantrasyonu giderek azalır. </li><li> C ikinci fazın başlangıcında ilk dikey çizgi yerleştirinurve ve &quot;SET&quot; i seçin. Bu analiz başlamak için yazılım bildirir. </li><li> &quot;SET&quot; seçeneğini bir kez daha kaydının sonunda ikinci dikey çizgi koyun ve. Bu analiz durdurmak için bir yazılım bildirir. </li><li> &quot;Cv&quot; menüsünden bakmak ve analiz &quot;Eğri Altındaki Alan&quot; karşılık &quot;EAA&quot; değeri, kayıt. Bu değer, karşılık gelen ROI içinde SCBF orantılıdır. </li></ol>

<ol><li>Cadotte, D. W., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+injury%3A+a+systematic+review+of+current+treatment+options%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Orthop+Relat+Res%22%5BJournal%5D)">Spinal cord injury: a systematic review of current treatment options.</a> Clin Orthop Relat Res. 469 (3), 732-741 (2011).</li>
<li>Beattie, M. S., Farooqui, A. A., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+current+evidence+for+apoptosis+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Review of current evidence for apoptosis after spinal cord injury.</a> J Neurotrauma. 17 (10), 915-925 (2000).</li>
<li>MacDonald, J. W., Sadowsky, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal-cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Spinal-cord injury.</a> Lancet. 359 (9304), 417-425 (2002).</li>
<li>Mautes, A. E., Weinzierl, M. R., Donovan, F., Noble, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+events+after+spinal+cord+injury%3A+contribution+to+secondary+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Ther%22%5BJournal%5D)">Vascular events after spinal cord injury: contribution to secondary pathogenesis.</a> Phys Ther. 80 (7), 673-687 (2000).</li>
<li>Martirosyan, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+supply+and+vascular+reactivity+of+the+spinal+cord+under+normal+and+pathological+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg+Spine%22%5BJournal%5D)">Blood supply and vascular reactivity of the spinal cord under normal and pathological conditions.</a> J Neurosurg Spine. 15 (3), 238-251 (2011).</li>
<li>Blight, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+morphology+of+chronic+spinal+cord+injury+in+the+cat%3A+analysis+of+myelinated+axons+by+line-sampling%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Cellular morphology of chronic spinal cord injury in the cat: analysis of myelinated axons by line-sampling.</a> Neuroscience. 10 (2), 521-543 (1983).</li>
<li>Bassingthwaighte, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity+of+microsphere+depositions+for+regional+myocardial+flows%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Validity of microsphere depositions for regional myocardial flows.</a> Am J Physiol. 253 (1 Pt 2), H184-H193 (1987).</li>
<li>Drescher, W. R., Weigert, K. P., Bunger, M. H., Hansen, E. S., Bunger, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+blood+flow+in+24-hour+megadose+glucocorticoid+treatment+in+awake+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Spinal blood flow in 24-hour megadose glucocorticoid treatment in awake pigs.</a> J Neurosurg. 99 (3 Suppl), 286-290 (2003).</li>
<li>Golanov, E. V., Reis, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+oxygen-sensitive+neurons+of+the+rostral+ventrolateral+medulla+to+hypoxic+cerebral+vasodilatation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Contribution of oxygen-sensitive neurons of the rostral ventrolateral medulla to hypoxic cerebral vasodilatation in the rat.</a> J Physiol. 495 (Pt 1), 201-216 (1996).</li>
<li>Ueda, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+on+spinal+cord+blood+flow+and+function+by+interruption+of+bilateral+segmental+arteries+at+up+to+three+levels%3A+experimental+study+in+dogs%29%5BTitle%5D)+AND+%22Spine+%28Phila+Pa+1976%29%22%5BJournal%5D)">Influence on spinal cord blood flow and function by interruption of bilateral segmental arteries at up to three levels: experimental study in dogs).</a> Spine (Phila Pa 1976). 30 (20), 2239-2243 (2005).</li>
<li>Carlson, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+spinal+cord+compression%3A+part+II%3A+effect+of+methylprednisolone+on+regional+blood+flow+and+recovery+of+somatosensory+evoked+potentials%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Joint+Surg+Am%22%5BJournal%5D)">Sustained spinal cord compression: part II: effect of methylprednisolone on regional blood flow and recovery of somatosensory evoked potentials).</a> J Bone Joint Surg Am. 85-A (1), 95-101 (2003).</li>
<li>Hamamoto, Y., Ogata, T., Morino, T., Hino, M., Yamamoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+direct+measurement+of+spinal+cord+blood+flow+at+the+site+of+compression%3A+relationship+between+blood+flow+recovery+and+motor+deficiency+in+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Spine+%28Phila+Pa+1976%29%22%5BJournal%5D)">Real-time direct measurement of spinal cord blood flow at the site of compression: relationship between blood flow recovery and motor deficiency in spinal cord injury.</a> Spine (Phila Pa 1976). 32 (18), 1955-1962 (2007).</li>
<li>Horn, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+intrathecal+hypotension+on+tissue+perfusion+and+pathophysiological+outcome+after+acute+spinal+cord+injury%29%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurg+Focus%22%5BJournal%5D)">The effects of intrathecal hypotension on tissue perfusion and pathophysiological outcome after acute spinal cord injury).</a> Neurosurg Focus. 25 (5), E12(2008).</li>
<li>Phillips, J. P., George, K. J., Kyriacou, P. A., Langford, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+photoplethysmographic+changes+using+a+static+compression+model+of+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Conf+Proc+IEEE+Eng+Med+Biol+Soc%22%5BJournal%5D)">Investigation of photoplethysmographic changes using a static compression model of spinal cord injury.</a> Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 2009, 1493-1496 (2009).</li>
<li>Phillips, J. P., George, K. J., Kyriacou, P. A., Langford, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+photoplethysmographic+changes+using+a+static+compression+model+of+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Conf+Proc+IEEE+Eng+Med+Biol+Soc%22%5BJournal%5D)">Investigation of photoplethysmographic changes using a static compression model of spinal cord injury.</a> Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 2009, 1493-1496 (2009).</li>
<li>Ishikawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+adhesion+and+arteriolar+dilation+in+the+photothrombosis%3A+observation+with+the+rat+closed+cranial+and+spinal+windows%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Platelet adhesion and arteriolar dilation in the photothrombosis: observation with the rat closed cranial and spinal windows.</a> J Neurol Sci. 194 (1), 59-69 (2002).</li>
<li>Soubeyrand, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+and+spatial+quantification+using+contrast-enhanced+ultrasonography+of+spinal+cord+perfusion+during+experimental+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Spine+%28Phila+Pa+1976%29%22%5BJournal%5D)">Real-time and spatial quantification using contrast-enhanced ultrasonography of spinal cord perfusion during experimental spinal cord injury.</a> Spine (Phila Pa 1976). 37 (22), E1376-E1382 (1976).</li>
<li>Huang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+spinal+cord+perfusion+by+using+contrast-enhanced+ultrasound+in+a+porcine+model+with+acute+spinal+cord+contusion%29%5BTitle%5D)+AND+%22Spinal+Cord%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of spinal cord perfusion by using contrast-enhanced ultrasound in a porcine model with acute spinal cord contusion).</a> Spinal Cord. 51 (3), 196-201 (2012).</li>
<li>Postema, M., Gilja, O. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrast-enhanced+and+targeted+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Contrast-enhanced and targeted ultrasound.</a> World J Gastroenterol. 17 (1), 28-41 (2011).</li>
<li>Soubeyrand, M., Badner, A., Vawda, R., Chung, Y. S., Fehlings, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Very+High+Resolution+Ultrasound+Imaging+for+Real-Time+Quantitative+Visualisation+of+Vascular+Disruption+After+Spinal+Cord+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Very High Resolution Ultrasound Imaging for Real-Time Quantitative Visualisation of Vascular Disruption After Spinal Cord Injury.</a> J Neurotrauma. , (2014).</li>
<li>Akhtar, A. Z., Pippin, J. J., Sandusky, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+spinal+cord+injury%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Animal models in spinal cord injury: a review.</a> Rev Neurosci. 19 (1), 47-60 (2008).</li>
</ol>

Yazarlar, rakip bir finansal çıkar çatışması olmadığını beyan ederler. Ultrason makinesi, Toshiba France şirketi tarafından nezaketle ödünç verildi. Vueject pompası, Bracco France şirketi tarafından nezaketle ödünç verildi.

Biz sıçan SKY kontüzyon modelinde CEU nasıl kullanılacağını tarif olmasına rağmen, bu protokol, diğer deneysel hedefleri veya SCI modellerini uyacak şekilde modifiye edilebilir. Biz ancak zaman noktalarının sayısı ve SCBF ölçümleri arasındaki gecikme, diğer çalışmaların ihtiyaçlarını karşılamak için adapte edilebilir, (yaralanma ve 15 dakika sonrası SKY öncesi) sadece iki kez noktalarında SCBF ölçmek için seçtiniz. Örneğin, önceki çalışmaları 17, ilk saat sonrası SCI genelinde beş ardışık zaman noktalarında S...

Travmatik spinal kord yaralanması (SKY) duyusal motorda ciddi bozulma ve özerk fonksiyonlar giden bir yıkıcı bir durumdur. Bugüne kadar, tedavi hastalardaki etkinliğini göstermiştir. Böyle nedenle, potansiyel tedavilerin değerlendirmesini artıracak ve daha fazla yaralanma pathiophysiology 1 aydınlatmak yeni teknikler belirlemek önemlidir. SCI olarak birincil ve ikincil yaralanma adlandırılan iki ardışık aşamadan oluşur. Birincil yaralanma ilk mekanik hasara karşılık gelir. Ayrıca ilk lezyon, doku hasarı ve dolayısıyla nörolojik defisit 2,3 ilerici genişlemesine katkıda ikincil yaralanma grupları (örneğin inflamasyon, oksidatif stres ve hipoksi gibi) çeşitli biyolojik olayların bir çağlayan Oysa. SCI akut aşamasında, nöro-koruyucu tedaviler ikincil yaralanma patoloji ve sh azaltılması hedefleniyorbuna göre nörolojik sonuçlarını iyileştirmek ould. Birçok ikincil yaralanma olayları arasında, iskemi çok önemli bir rol oynar 4,5&#39;ten. SCI merkez üssü düzeyinde, hasarlı parankimal mikrodamarlar etkili omurilik kan akımını (SCBF) engel. Ayrıca, SCBF de önemli ölçüde hasar merkezinden, özellikle &quot;iskemik penumbra bölgesi&quot; olarak bilinen bir alanı çevreleyen bölgede azalır. SCBF hızlı bir şekilde bu bölgeler içinde geri alınamaz ise, iskemi ek parankimal nekroz ve daha fazla sinir doku hasarına neden olabilir. Hatta en ufak bir doku koruma fonksiyonu önemli etkileri olabilir gibi, iskemi sonrası SCI azaltabilir ilaçlar ve tedaviler geliştirmek için önemli ilgi alanıdır. Bu olguyu vurgulamak için, önceki çalışma miyelinli akson sadece% 10 olduğunu göstermiştir korunması SKY sonrası 6 kedilerde yürüyüş izin için yeterli oldu. Çeşitli teknikler SCBF değerlendirmek için tarif edilmiş olmasına rağmeny tüm önemli sınırlamaları vardır. Örneğin, radyoaktif mikro-7,8 ve C14-iodopyrine otoradyografi 9&#39;a göre bir kullanım daha sonra hayvan kurban gerektirir ve daha sonraki zaman noktalarında tekrarlanmaz. Hidrojen boşluk tekniği 10 daha omuriliğe zarar verebilir intraspinal elektrotlar, ekleme bağlıdır. Lazer Doppler görüntüleme, 14,15 photoplethysmography ve in vivo ışık mikroskobu 16 ölçüm 11-13 çok sınırlı derinlik / alan varken. Ekibimiz daha önce kontrastlı ultrason (CEU) görüntüleme gerçek zamanlı değerlendirmek için kullanılabileceğini gösterdi ve in vivo sıçan omurilik parankimi 17 SCBF değişir. Benzer bir teknik, Huang ve arkadaşları tarafından uygulanmış olduğunu not etmek önemlidir. SCI 18 bir domuz modelinde. CEU gri tonlama morfolojik im ilişkilendirmek sağlar ultrason görüntüleme belirli bir mod uygularkan akımı 19 mekansal dağılımı ile (konvansiyonel B-mode ile elde edilir) yaşları. SCBF görüntüleme ve miktar eko-kontrast maddelerin intravasküler enjeksiyonu dayanır. kontrast madde (ortalama çapa, yaklaşık 2.5 mm ve çapı en az 6 um olan% 90) kükürt heksafluorür mikro-kabarcıkları oluşur fosfolipidler ile stabilize. mikro kabarcıklar böylece kan ekojenisitesini ve kan akışına göre dokuların artan kontrast artırıcı prob yaydığı ultrason ışınını yansıtacak. Bu yansıyan sinyalin yoğunluğuna göre ilgi konusu bir bölgedeki kan akışını değerlendirmek mümkündür. mikro-kabarcıklar, aynı zamanda, güvenli ve klinik olarak, insanlarda uygulanmıştır. kükürt heksafluorür hızlı bir şekilde temizlenir (terminal yarılanma ömrü anlamına 12 dk) ve kullanılan kükürt heksaflorür fazla% 80, enjeksiyondan sonra 2 dakika içinde nefes verme hava geri kazanılır. Bu protokol CEU im kullanmak için basit bir yol sağlarsıçan SCBF değişiklikleri değerlendirmek için yaşlanma.

<table><tbody><tr><td>Eksternal Fiksatör Hoffman 3</td><td>Stryker, Kalamazoo, ABD</td><td></td><td>Özel yapım 3D çerçeveyi ve ultrason probunu tutan eklemli kolu oluşturmak için kullanılan modüler sistem</td></tr><tr><td>Toshiba Uygulaması</td><td>Toshiba, Tokyo, Japonya</td><td></td><td>Ultrason makinesi</td></tr><tr><td>Sonovue</td><td>Bracco, Milano, İtalya</td><td></td><td>Kontrast madde: mikro kabarcıklar</td></tr><tr><td>Vueject pompası</td><td>Bracco, Milano, İtalya</td><td></td><td>Mikro kabarcıkların infüzyonu için elektrikli pompa bolus</td></tr><tr><td>Aquasonic Ultrason Jeli</td><td>Parker Laboratories, Fairfield, NJ, ABD</td><td></td><td>Ultrason dalgalarını iletmek için kullanılan ultrason jeli</td></tr><tr><td>Isovet</td><td>Piramal Healthcare, Mumbai, Hindistan</td><td></td><td>Anestezi için kullanılan izofluran</td></tr><tr><td>Ultra Extend</td><td>Toshiba, Tokyo, Japonya</td><td></td><td>Omurilik kan akışının</td></tr> <tr><td>miktarının belirlenmesi için kullanılan yazılımMastercraft Beş Parçalı Mini Pense Seti, Ürün #58-4788-6</td><td>Kanada Lastiği, Toronto, Kanada</td><td></td><td>Kendin yap işi için pense seti</td></tr></tbody></table>

deneysel spinal kord yaralanmalarında omurilik kan akımının değerlendirilmesi için geliştirilmiş ultrason görüntüleme kontrast

Contrast Enhanced Ultrasound Imaging for Assessment of Spinal Cord Blood Flow in Experimental Spinal Cord Injury

İndirimli omurilik kan akımı (SCBF) (yani, iskemi) travmatik omurilik yaralanması (SKY) patofizyolojisinde önemli bir rol oynar ve bu doğrultuda nöron koruyucu tedaviler için önemli bir hedeftir. Çeşitli teknikler SCBF değerlendirmek için tarif edilmiş olmasına rağmen, hepsi önemli sınırlamalar vardır. İkincisi aşmak için, gerçek zamanlı kontrastlı ultrason görüntüleme (CEU) kullanımını öneriyoruz. Burada SKY sıçan kontüzyon modelinde bu tekniğin uygulanmasını açıklar. Bir boyun kateterine sahip birinci kontrast ajanı kükürt heksafluorür kapsüllenmiş mikro-kabarcıkların bir sodyum klorür solüsyonu ile tekrar enjeksiyon için implante edilir. omurga daha sonra bir ısmarlama 3D çerçeve ile stabilize edilir ve omurilik dura mater Thix-ThXII bir laminektomi ile maruz kalmaktadır. ultrason prob, (ultrason jel ile kaplanmış), dura mater arka tarafına konumlandırılır. Ters başlangıçtaki SCBF, tek bir damar içi enjeksiyon (400 ul) değerlendirmekst madde sağlam omurilik mikrovasküler içinden geçişini kaydetmek için uygulanır. Bir ağırlık bırak cihaz, daha sonra SCI bir yeniden üretilebilen deneysel kontüzyon modeli oluşturmak için kullanılır. Kontrast madde sonrası SKY SCBF değişiklikleri değerlendirmek için yaralanma sonrası 15 dakika re-enjekte edilir. CEU Gerçek süre ve in vivo SCI, aşağıdaki SCBF değişikliklerin değerlendirilmesi sağlar. Yaralanmamış hayvanda, ultrason görüntüleme bozulmamış omurilik boyunca düzensiz kan akımı gösterdi. SCBF daha uzak sağlam yerlerde muhafaza kalmıştır Ayrıca, 15 dakika sonrası SCI, kritik iskemi üssü seviyesinde oldu. Üssü (rostral ve kaudal her ikisi de) bitişik bölgelerde SCBF önemli ölçüde azaltılmıştır. Bu daha önce açıklanan &quot;iskemik penumbra bölgesi&quot; karşılık gelir. Bu araç iskemi ve SCI sonra ortaya çıkan doku nekrozu sınırlama amaçlı tedavilerin etkilerini değerlendirmek için önemli bir ilgi alanıdır.

Protokolü, yukarıda tarif edilen ile, uzunlamasına bir omurga sagital segmenti boyunca SCBF harita mümkündür. Sağlıklı omurilik olarak parenkima (Şekil 12) içinde SCBF düzensizlikler gibi görünüyor. Bu başka bir hayvandan radiculo-medüller arterlerin değişken dağılımı (RMA) ile izah edilebilir. RMA ön spinal arter (ASA) ulaşmak ve bu nedenle omurilik parankimi kan akımı sağlayan atardamarların segmental anlamına gelir. Buna karşılık, radiküler arterler omurilik kan akımını v...

Kontrastlı Ultrason görüntüleme, deneysel bir sıçan omurilik yaralanması modelinde omurilik kan akışını ölçmek için güvenilir bir in-vivo araçtır. Bu makale, torasik omurilik yaralanmasının kontüzyon modeli ile birlikte bu tekniğin uygulanması için kapsamlı bir protokol içermektedir.

Deneysel Spinal Kord Yaralanmalarında Omurilik Kan Akımının Değerlendirilmesi için geliştirilmiş Ultrason Görüntüleme Kontrast

Reduced spinal cord blood flow (SCBF) (i.e., ischemia) plays a key role in traumatic spinal cord injury (SCI) pathophysiology and is accordingly an ...

Bu prosedürün genel amacı, omurilik kan akışını veya SCBF'yi değerlendirmektir. Bu işlem, öncelikle bir sıçanın juguler venine bir kateter yerleştirilerek gerçekleştirilir. Ardından, hayvan bir deney çerçevesinde stabilize edilir, laminektomi uygulanır ve ultrason probu konumlandırılır.Ardından bir kontrast madde hazırlanır ve mikrobaloncuklar enjekte edilerek sağlam omurilikteki kan akışı değerlendirilir; sonrasında deneysel bir omurilik yaralanması gerçekleştirilir ve yaralanmış omurilikteki kan akışını değerlendirmek için ikinci bir mikrobaloncuk enjeksiyonu yapılır. Nihai olarak, omurilik yaralanması sonucunda kan akışında meydana gelen değişiklikleri göstermek için ultrason kullanılır. Bu tekniğin lazer doppler gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, omurilik parankiminin morfolojik değerlendirmesini sağlarken, omurilik kan akışının in vivo temporal ve spatial kantifikasyonuna olanak tanımasıdır.Aletler, reaktifler, 3D çerçeve ve ağırlık düşürme cihazı hazırlandıktan ve hayvan metin protokolüne uygun olarak anestezi altına alındıktan sonra, pençeler pensle sıkılarak uygun anestezinin sağlandığı teyit edilir. Kurumayı önlemek için gözlere veteriner pomadı uygulanır.Boyun bö

contrast-enhanced-ultrasound-imaging-for-assessment-spinal-cord-blood

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kaynak: Zheng, W. et. al., Kronik Omurilik Sıkışmasında Difüzyon Tensör Manyetik Rezonans Görüntüleme. J. Vis. Uzm. (2019)Bu video, kronik omurilik kompresyonunun değerlendirilmesinde difüzyon tensör görüntülemeyi göstermektedir. Su difüzyon modellerini, fraksiyonel anizotropiyi ve görünür difüzyon katsayısı değerlerini analiz ederek, bulgular sıkıştırılmış bölgelerdeki aksonal hasarı ortaya koymaktadır. Bulgular, omurilik patolojisi ve yapısal bütünlük hakkında kritik bilgiler sağlar.

Difüzyon Tensör Görüntüleme Kullanılarak Omurilik Kompresyonunun Değerlendirilmesi

Bu protokolün amacı, doku mikroyapısının noninvaziv karakterizasyonu için sıçan omuriliğinin yüksek kaliteli difüzyon ağırlıklı manyetik rezonans görüntülemesini (DWI) elde etmektir. Bu protokol, DWI görüntülerinin artefaktlardan arındırılmasını sağlamak için MRI dizisinin, radyo frekansı bobininin ve analiz yöntemlerinin optimizasyonlarını açıklar.

Sıçan Servikal Spinal Kord difüzyon Görüntüleme

Fototromboz, omurilikte fokal iskemiyi indüklemek için minimal invaziv ve yüksek oranda tekrarlanabilir bir prosedürdür ve farelerde omurilik yaralanması modeli olarak hizmet eder.

Farelerde Omurilik Yaralanma Modeli Olarak Odak iskemisi Fototromboz kaynaklı

Burada lazer Doppler perfüzyon görüntüleme (LDPI) bir arada sunmak ve lazer Doppler perfüzyon (LDPM) spinal ölçmek için izleme kordon yerel kan akışı ve oksijen doygunluğu (SO2), omurilik tanıtmak için standart bir prosedür yanı sıra sıçan travmada.

Lazer Doppler görüntüleme ve izleme sıçan Spinal kord mikro analiz etmek için kullanma

Biz dinamik spinal vasküler değişiklikler yetişkin Sprague-Dawley Sıçanlarda contusive Medulla Spinalis Yaralanmalarında takip izlemek için iki farklı floresan boyalar kullanarak yöntemi Imaging bir vivo tanıtmak.

İçinde bir Vivo Vasküler Dynamics Contusive Medulla Spinalis Yaralanmalarında takip görüntüleme için duo-renk yöntemi

Omurilik mikroskrkülasyonu omurilik yaralanmasında önemli bir rol oynar. Çoğu yöntem, mikroskrkülasyon hedefli tedavilerin geliştirilmesi için gerekli olan omurilik mikroskrkülasyonunun gerçek zamanlı değerlendirilmesine izin vermez. Burada, büyük bir iskemi /reperfüzyon hayvan modelinde Lazer-Doppler-Akış İğne probları kullanarak bir protokol öneriyoruz.

İskemi/Reperfüzyon Porsin Modelinde Omurilik Mikroperfüzyonunun Gerçek Zamanlı Değerlendirilmesi

Kan-omurilik bariyerinin (BSCB) bozulması, mikrokabarcıkların intravenöz uygulaması ve düşük yoğunluklu odaklanmış ultrason (LIFU) uygulaması ile başarılı bir şekilde sağlanabilir. Bu protokol, ekipman kurulumu, mikro kabarcık enjeksiyonu, hedef lokalizasyonu ve BSCB bozulma görselleştirmesi dahil olmak üzere bir kemirgen modelinde LIFU kullanılarak BSCB'nin açılmasını detaylandırır.

Bir sıçan modelinde düşük yoğunluklu odaklanmış ultrason kullanılarak kan-omurilik bariyerinin bozulması

Biz ratlarda spinal kord yaralanmasının akut veya kronik dönemlerde iki dokunma duyusal test yöntemleri açıklanmaktadır. Bu onaylanmış prosedürler allodini gibi duyumların geliştirme ve bakım algılayabilir.

Sıçanlarda Spinal Kord Yaralanma sonrası Akut ve Kronik Dokunsal Duyu Testi

Ciddi omurilik yaralanması bir kontüzyon modeli açıklanmıştır. Ayrıntılı ameliyat öncesi, ameliyat ve ameliyat sonrası adımları tutarlı bir model elde etmek açıklanmıştır.

Sıçanlarda Şiddetli Spinal Kord Yaralanması bir bere modeli

Bu yayının amacı, kantitatif vektör tabanlı analizi kullanılarak kronik omurilik yaralanması olan kişilerde solunum kas aktivasyon kalıpları karakterize etmek için bir çok kas yüzeyel EMG yaklaşım bizim orijinal bir çalışma sunmaktır.

Kronik Spinal Kord Yaralanması Bireylerde Solunum Motor Kontrol Değerlendirmesi (RMCA) kullanarak Solunum Kas Aktivasyon Değerlendirilmesi

Öğrenin, sıçan omurilik yaralanması modelinde kontrastlı ultrason ile omurilik kan akışını nicelendirmeyi. Bu yöntem, in vivo kan akışı değişikliklerini ve morfolojik değerlendirmeyi birlikte sunar.

Deneysel Spinal Kord Yaralanmalarında Omurilik Kan Akımının Değerlendirilmesi için geliştirilmiş Ultrason Görüntüleme Kontrast

Daha fazla video keşfet