HiPSC Sinir Lineage Özgül Knockin Muhabirleri Verimli Nesil kullanma CRISPR / Cas9 ve Cas9 Çift Nickase Sistemi

10.5K görüntüleme

5 kez atıf

14:46 dk

28 Mayıs 2015

10.3791/52539-v

28 Mayıs 2015

10.5K görüntüleme

* These authors contributed equally

CRISPR (Kümelenmiş Düzenli Aralıklı Kısa Palindromik Tekrarlar) / Cas (CRISPR ile ilişkili) sistemi gibi genom düzenleme araçları, insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerde (hiPSC'ler) gen hedefleme verimliliğini büyük ölçüde geliştirmiştir. Bu el yazması, CRISPR/Cas sistemi destekli homolog rekombinasyon kullanılarak soya özgü hiPSC raportörü oluşturmak için bir protokolü açıklamaktadır.

Daha fazla video keşfet

Knockin Reporter retimi

Chapters in this video

0:05

Title

1:54

Design of Targeting Vectors

2:41

Design and Vector Construction of sgRNAs for CRISPR/Cas9 System

5:20

Design and Construction of Cas9n Double Nickase sgRNA

8:06

Evaluation of sgRNAs by T7 Endonuclease1

11:03

In Silico Prediction of Potential Off Target Sites

12:32

Results: The T7E1 Assay is Used to Evaluate sgRNAs Prior to Transfecting hiPSCs

13:56

Conclusion

Related Videos