HiPSC Sinir Lineage Özgül Knockin Muhabirleri Verimli Nesil kullanma CRISPR / Cas9 ve Cas9 Çift Nickase Sistemi

10.5K görüntülenme

5 kez atıf aldı

14:46 dk.

28 Mayıs 2015

10.3791/52539-v

28 Mayıs 2015

10.5K görüntülenme

* These authors contributed equally

CRISPR (Kümelenmiş Düzenli Aralıklı Kısa Palindromik Tekrarlar) / Cas (CRISPR ile ilişkili) sistemi gibi genom düzenleme araçları, insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerde (hiPSC'ler) gen hedefleme verimliliğini büyük ölçüde geliştirmiştir. Bu el yazması, CRISPR/Cas sistemi destekli homolog rekombinasyon kullanılarak soya özgü hiPSC raportörü oluşturmak için bir protokolü açıklamaktadır.

Daha fazla video keşfet

Knockin Reporter Üretimi

Chapters in this video

0:05

Başlık

1:54

Hedefleme Vektörlerinin Tasarımı

2:41

CRISPR/Cas9 Sistemi için sgRNA'ların Tasarımı ve Vektör Konstruksiyonu

5:20

Cas9n Çift Nikaz sgRNA'sının Tasarımı ve Konstruksiyonu

8:06

sgRNA'ların T7 Endonükleaz1 ile Değerlendirilmesi

11:03

Potansiyel Hedef Dışı Bölgelerin In Silico Tahmini

12:32

Sonuçlar: T7E1 Analizi, hiPSC'lere Transfeksiyon Öncesinde sgRNA'ları Değerlendirmek İçin Kullanılır

13:56

Sonuç

Related Videos