Name: Çok değişkenli Kronik Non-anestezi Kayıtlar için Yakın dönem Fetal Koyun enstrümantasyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-10-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 40 s
Description: Öğrenin, fetal koyun modelinde uzun süreli fizyolojik izleme için damar erişimi ve biyoelectrik monitörizasyon yöntemlerini. Bu teknik, gelişim biyolojisi ve sağlık-durum araştırmalarında değerli içgörüler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

yazarlar, Molly Towell Perinatal Araştırma Vakfı, Kanada Sağlık Araştırmaları Enstitüleri (CIHR) ve Fonds de Recherche du Québec – Santé (FRQS) (MGF'ye) ve CIHR-Quebec Perinatal Araştırma Eğitim Ağı'ndan (QTNPR) (LDD'ye) sağlanan fon desteğini minnetle kabul eder.
Yazarlar teknik yardım için Esther Simard, Marco Bosa, Carl Bernard ve Carmen Movila'ya teşekkür etmek istiyor.

Hayvan bakım Hayvan Bakımı Kanada Konseyi ve Hayvan Bakım Université de Montréal Konseyi (protokol # 10 Rech-1560) tarafından onay kuralları izledi. Maddeler ve kullanılan yöntemler ile ilgili detaylı bilgiler, Tablo 1 &#39;de verilmektedir. 1. Anestezi <ol><li> Bir şah damarına bir tek lümen kateter yerleştirin. </li><li> Oturaklı dişi kullanılarak asepromazin (Atravet 10 mg / ml), 2 mg intravenöz yaklaşık 30 dakika da kortizol seviyelerini azaltır prosedürü ile ilişkili stres azaltmak için anestezi verilmeden önce. </li><li> Diazepam yönetme (diazepam 5 mg / mL), 20 mg, ketamin (Ketalar 100 mg / ml) 4-5 mg / kg propofol (propofol 10 mg / ml) 0,5 ila 1 mg / kg iv, genel anestezi sağlamak. </li><li> Wisconsin tipi bıçak ile bir laringoskop kullanılarak trakea içine bir havayolu değişim kateteri takın entübasyon ile yardım etmek (Ekstra uzun 350 mm Bıçak Sol-El). Havayolu değişim kateter kapalı ve trakea içine silikon endotrakeal tüpün (9 ila 12 mm İç Çap) kaydırın. Bu teknik entübasyon işlemini kolaylaştırır. Trakea basıncı kaynaklı ülserasyon önlemek ve koyunların başına tüp sabitleşmek dikkatle endotrakeal tüpün şişirin. </li><li> Anestezi makinesinin solunum devresine endotrakeal tüp bağlayın ve hemen mekanik ventilasyon başlar. 35 ila 45 mmHg normal sınırlar içinde bir P CO 2 korumak için ventilatör ayarlarını yapın. </li><li> (; In 1.16 için [0.9 x 25 mm] [1.1 x 30 mm] 1 ile 22 G 20) ve doğrudan arteriyel kan basıncını izlemek için uyumlu olmayan boru bağlamak aurikular artere bir kateter yerleştirin. </li><li> Elektrokardiyogram, direkt arter kan basıncı, oksijen doygunluğunu (SpO2), kapnografi kaydetmek için bir çok parametre fizyolojik monitörü kullanın (P ET CO 2) ve sıcaklık her 5 dk. Tüm ph aktarınmerkezi fizyolojik veri toplama bilgisayara bir seri kablo aracılığıyla ysiologic verileri. Bir dolaşan su battaniye kullanarak normal vücut ısısını korumak. </li><li> Genel anestezinin ilk bir saat için 10 mL / kg&#39;lık bir dengeli bir poli-iyonik çözelti yönetme ve daha sonra 5 ml / kg / saat azaltır. </li><li> Hemen önce antibiyotik profilaksisi gibi cilt kesi ewe için trimetoprim-sulfadoksin 5 mg / kg IV yönetin. </li><li> Koyun ve fetüsün tüm cerrahi manipülasyonlar standart aseptik teknikler kullanın. </li><li> Bariyer hemşire her zaman koyunların. Bu aynı zamanda cerrahi olmayan personeli kapsar. Bu. Örneğin, Coxiella burnetii için enzootic potansiyelini en aza indirmek her zaman eldiven ve maske (N-95 tipi) kullanın olacak. </li></ol> Cerrahi Usul 2. Genel Bakış <ol><li> Karın kas hasarı en aza indirmek için linea alba yoluyla memeye hemen kranial alt karın duvarından bir 20 cm orta hat kesi olun. <ol><li> Rcranially büyük omentum etract ve rahim boynuzları elle palpe edilir. Fetus ve kendi büyüklüğü sayısını fark boynuz ucu rahim gövdesi her boynuz palpe. Birden fazla fetus varsa, elle baş boyutu ve yörüngeleri arasında genişliği değerlendirerek büyük fetus seçin. </li><li> Sıkıca kısmen batın rahim içinden seçilen fetusun baş tutun. Metzenbaum makas ile büyük eğrilik üzerinde 10 cm&#39;lik histerotomi gerçekleştirin. Başının üzerine hemen bir el sanki steril tuzlu su ile doldurulmuş bir lateks olmayan steril cerrahi eldiven koyun. Alternatif olarak, nemli fetal kafa tutmak için nemlendirilmiş 4x4s kullanın. Karın duvarına rahim sabitleyin. <ol><li> Sağ ve sol göğüs uzuvları exteriorize ve xiphoid sürecine rahim kadar dışarı yavaşça cenini çekin. </li></ol></li><li> Standart bir cut-down tekniği kullanılarak polivinil sağ ve sol brakiyal ven içine kateter ve arterleri yerleştirin. Anoth eklemefetusun sternum onun &#39;ucu fikse Amniyotik boşluğuna er polivinil kateter. <ol><li> Steril kateterleri kullanınız. Biz standart tesiste gaz sterilizasyonu tavsiye ediyoruz. Daha sonra kan örneklemesi veya basınç izleme sağlamak için bir çift vana bir iğne her kateter ve iğne takın. </li></ol></li><li> Manubrium, kılıç şeklinde bir süreç ve elektrokardiyogram izlemek için omuz (EKG) her noktasına, paslanmaz çelik elektrodlar dikin. </li><li> Rahme fetus dönün. Soldan küçük bir kesi yoluyla tüm kateterler ve elektrotlar çıkın. </li><li> Üç katmanlı kapatma kullanarak laparotomi insizyon kapatın. Basit sürekli bir şekilde emilebilir sentetik bir ameliyat dikiş ipliği monofilaman USP 2 karın duvarı dikin. Basit sürekli bir şekilde emilebilir sentetik bir ameliyat dikiş ipliğinin saç örgü USP 0 subkutan alan kapatın. Cilt insizyonu kapatmak için cerrahi paslanmaz çelik zımba kullanın. </li></ol></li><li&gt; cerrahi ayrıntılı açıklaması <ol><li> % 4 klorheksidin glukonat ve 3 dakika boyunca yumuşak bir fırça ile iyice ardından bıçak # 40 Temiz ile her tarafta kanadın kat meme bezinin ve birlikte ventral karın xiphoid süreci tıraş yün çıkarın. <ol><li> Klorheksidin glukonat% 4 karın merkezinden itibaren ve 3 dakika boyunca santrifüj tarzda ilerleyen bir standart, steril bir kese gerçekleştirin. Dezenfektan sabun kaldırmak için karın steril tuzlu dökün. Cerrahi hazırlık son adım için, Klorheksidin glukonat çözeltisi 2% ve izopropil alkol% 70, üç alternatif pasajlar gerçekleştirin. </li></ol></li><li> Anestezi derinliği insizyon öncesi yeterli olduğundan emin olun. Karın kas hasarı en aza indirmek için linea alba yoluyla memeye sadece kafatası umbilikustan standart bir laparotomi kesi yapmak. </li><li> Sol karın duvarı yukarı boyunca karın uzun sünger forseps yerleştirinparacostal bölgede kateter için planlanan çıkış sitesine. <ol><li> Onu bulmak ve uygun siteyi teyit edebiliriz asistan kadar duvara forseps ipuçları itin. Biraz (1 cm) açın forseps çene ve yardımcısı, 2 cm tam kat bıçak kesisi yapalım. </li><li> , Kesiden forseps ipuçları exteriorize tekrar açın ve yavaşça nihayet ventral karın kesiden karın dışına çekilir forseps ile kateterler kavramak. Unutmayın ki, bazı gruplar kateter implantasyonu ve sonra onları exteriorize. Bu intrasurgical fetal EKG izleme mümkün değildir gibi bir sakıncası vardır. </li></ol></li><li> Fetal pozisyon ve numaralarını belirlemek için rahim palpe. Arası işitsel mesafeyi kullanarak büyük fetus belirleyin. Kotiledonlar kaçınarak, başının sırtında üzerinden büyük eğrilik üzerinde rahim duvarına İnsizyon. <ol><li> Bir am elde etmek plasental zarlar yoluyla künt uçlu kanül takınkanama ücretsiz niotic sıvısı örneği. Makas kullanarak plasental membranlar İnsizyon. </li></ol></li><li> Bu kesiden fetusun beyin yarısını exteriorize. Normotermi korumaya yardımcı olmak için fetus başının üzerinde 37 ° C&#39;de steril tuzlu su ile doldurulmuş, steril olmayan bir lateks cerrahi eldiven yerleştirin. <ol><li> Rahim Fetal üst vücut çıkarılması sırasında, asistan amniyotik sıvı kaybını önlemek için Babcock doldu tutun var. Ardından, tekrar Babcock forseps kullanarak, amniyon sıvısı ile karın kirlenmesini önlemek için cilde fetal membranlar ve rahim duvarına tutturun. </li><li> Enstrümante ve rahim içinde kalan parçaları tutmak ya sırasıyla, (37 ° C) nemli ve sıcak steril bezler kapsamına gereken fetal vücudun sadece bölümlerini Açığa. </li></ol></li><li> Brakiyal arterin maruziyeti kolaylaştırmak ve ikili damar hem göğüs bacaklarda kaçırmaya. Antebrachium ve bakımı hem medial boyunca İnsizyonTamamen brakiyal arter ve ven çevresinde teşrih. </li><li> Sağ ve sol brakiyal arter ve standart cut-down tekniği kullanılarak damar sol brakiyal içine polivinil kateterler yerleştirin. <ol><li> Gemi Free 1 cm&#39;nin üzerinde komşu dokudan kateterize edilecek. Örgülü sentetik emilebilir USP 2-0 sütür ile damarın distal kısmını Arter. Geminin proksimal yönü bir bitişik harfleri Preplace ama çözdü tutun. <ol><li> Castroviejo makas kullanarak, çapı yaklaşık% 30 enine gemi kesti. Kısmen proksimal sütür çekerek kan akışını durdurun. Vücuda yakın bir yönde sonda yerleştirin. </li></ol></li><li> 8 cm proksimale veya direnç tespit ve sonra hafifçe geri çekin kadar polivinil kateter kadar yerleştirin. Geçici olarak bir damar kelepçe kullanarak kateterin proksimal yönü sabitleyin. Proksimal ve kateterin distal yönü hem etrafında başka dikiş yerleştirin. Bir asistan sürekli aspirating ve kateterin açıklığı sağlamak için kateter yıkama. </li><li> Sürekli dikiş deseni ile, USP 2-0 örgülü sentetik emilebilir sütür kullanarak fetal cilt kapatın. </li></ol></li><li> Sağ ve sol omuz, manubrium ve xiphoid süreci, fetal EKG izlenmesini kolaylaştırmak için yalıtılmış paslanmaz çelik elektrot sabitleşmek. </li><li> Sternum amniyotik basıncı ve örnekleme kateteri dikin. Bu kateter onun ucunda fenestre edilir. </li><li> USP 2-0 örgülü sentetik emilebilir sütür materyali kullanılarak fetusun sırtında tüm kateterler sabitleyin. </li><li> Geri rahim içine fetusun değiştirilmesi önce hipotansiyon önlemek ve rahim rahatlama sağlamak için yavaş yavaş 15 dakika boyunca Clenbuterol 30 ug IV yönetmek. </li><li> Sürekli desenli USP 4-0 örgülü sentetik emilebilir sütür materyali kullanarak fetal membranlar sütür. Pa içine bir seferde sadece tek bir kateter ya da elektrot birleştirinure sıkı kapanmasını sağlamak. USP 0 örgülü sentetik emilebilir sütür materyali kullanarak rahim kas tabakası kapatmak için Halsted ilkelerine saygı bir çift katmanlı Cushing deseni kullanın. Dikkatle cerrahi knot Bury. </li><li> Onlar sol paracostal kesi çıkmak gibi bir purse-string sütür desen kullanarak, tüm kateterler ve EKG kabloları sabitleyin. </li><li> USP 2 monofilament sentetik emilebilir sütür materyali kullanarak sürekli bir deseni ile linea alba sabitleyin. USP 2-0 sürekli bir deseni ile sentetik emilebilir sütür materyali örgülü kullanarak deri altı dokuları kapatın. Cerrahi zımba ile cilt tabakasını sabitleyin. </li><li> Amniyon boşluğuna amniyotik kateter yoluyla intravenöz tekrar ampisilin 250 mg yönetin. Ilık serum fizyolojik ile kayıp amniyotik sıvı değiştirin. </li><li> Kısırlık korumak için bir yer torbaya tüm batın kateterler ve EKG elektrotları yerleştirin. Tüm kateterler güvenli koyunların bir gövde etrafında bir stockinette yerleştirinKoyun gövdesi d elektrotlar. </li><li> Genel anestezi durdurun ve laringeal refleksler normale döndü bir kez koyunum ekstübe. </li><li> O genel anestezi aşağıdaki istikrarlı bir kez metabolik kafes koyunum dönün. Dişi deney süresince metabolik kafeste bulunacağı. Koyun, standı aşağı yalan ve anne sakinleştirici olmadan olmayan anestezi fetus izlerken libitum reklam yemek gerekir. </li><li> Aşağıdaki üç gün boyunca profilaktik ewe (Trimetoprim sulfadoksin 5 mg / kg) ve fetüsün (amniyotik kateter yoluyla intravenöz tekrar ampisilin 250 mg) antibiyotik yönetmek. </li><li> Koyun ve fetüs hem gaz analizleri kanını kullanarak metabolik durumunu değerlendirir. </li><li> Olası heparinli serum fizyolojik asgari hacmi ile tüm kateterler yıkayın. Dikkat - fetusa izin heparin ve sıvıların günlük dozu aşmayınız. Sıvı fetus aşırı mümkündür. Gömme yavaş yavaş kezantibiyotik profilaksisi sonra satır başına günde ~ 5 ml NaCl. </li></ol></li><li> Veri kayıt ve analiz <ol><li> Ameliyat sırasında, isteğe bağlı olarak maternal ve fetal EKG ve kalp hızı yanısıra anne arteriyel kan basıncı ve hava yolu basıncı (Paw) sürekli olarak (Şekil 1) kaydeder. EKG dışındaki tüm anne veri elde etmek Hayat Penceresi Monitor kullanın. Fetal ve maternal EKG sinyalleri ile birlikte analog-dijital dönüştürücü bu verileri Yem; 1901 öncesi amplifikatör ilk maternal ve fetal EKG geçmektedir. Tutanak üreticinin yazılım tüm verileri görüntülemek ve. </li><li> (Hemen ilk arteriyel kateter taktıktan sonra) ve rahim kapattıktan sonra fetal cerrahi başlayacak arteriyel kan gazı analizi, laktat, glukoz için koyun ve fetus aynı anda 1 ml arteriyel örneği alın ve (plazmada) aşırı belirlenmesini temel . </li><li> Ameliyat sonrası iyileşme sırasında, IL-6 ve TNF-α Inflamm ölçmek için 3 ml fetal kan örneği almakatory profilleri. Santrifüj 4 ° C &#39;de, plazma (4 dakika, 4000 x g), süzün ve daha sonra ELISA testleri için -80 ° C&#39; de plazma saklayın. Not: bildirilen temsili sonuçlar amacıyla, altı gün sonra, hayvanlar 20 cerrahi mL sodyum pentobarbital intravenöz enjeksiyonu ile kurban edilmiştir. Fetal büyüme beden, beyin, karaciğer ve anne ağırlıkları ile değerlendirildi. Deney süresinin uzunluğu besbelli belirli bir araştırma sorusu için seçilen tasarıma bağlı olarak değişir ve ~ 6 hafta ulaşabilirsiniz. </li></ol></li><li> Sitokin analizleri (opsiyonel adım) <ol><li> Bir koyun özgü sandviç ELISA kullanılarak plazma sitokin konsantrasyonları (IL-6, TNF-α) belirler. Bir konsantrasyonda ön-kaplama fare anti-koyun monoklonal antikorları (yakalama antikoru, IL-6) ya da fare anti-sığır monoklonal antikor (TNF-α) O / N 4 ° C&#39;de ELISA levhası üzerine 4 ug / ml, 3 kez sonra Yıkama tamponu (PBS içerisinde% 0.05 Tween 20, PBST) ile yıkayın. </li><li>PBST içinde% 1 BSA ile 1 saat boyunca levhalar bloke eder. Yıkama tamponu ile 3 kez plakaları yıkayın. </li><li> Bir seri seyreltileri, standart 7 31,25 pg / ml standart 1 2000 ng / ml arasında değişir hazırlamak ELISA standart olarak rekombinant koyun proteinleri (IL-6, TNF-α) kullanın. </li><li> Yük 50 seri seyreltilmiş Protein standartlarının ve oyuk başına örneklerin ul, oda sıcaklığında 2 saat süreyle inkübe plakaları 3 kez yıkayın. Nüsha olarak tüm standartları ve örnekleri çalıştırın. </li><li> 1 bir seyreltmede tavşan anti-koyun poliklonal antikorlarının 50 ul (tespit antikoru, IL-6) ya da tavşan anti-sığır poliklonal antikoru (TNF-α) uygulayın: kuyularda 250 ve oda sıcaklığında 30 dakika inkübe edilir. Yıkama tamponu ile 5 kez yıkayın plakaları. </li><li> 30 dakika boyunca IgG-HRP ile konjüge edilmiş keçi anti-tavşan (5000 sulandırma 1) 50 ul ekle. </li><li> Oyuk başına TMB substrat çözeltisi 50 ul kuluçkalayın. </li><li> 2 N sülfürik asit 25 ul istenilen zamanda Renk geliştirme reaksiyonunu durdurun. </li><li> Pl OkuBir 570 nm dalga boyu düzeltmesi ile 450 nm&#39;de ELISA plaka okuyucusu üzerinde Ateş. Not: deneylerimizde, IL-6, ELISA hassasiyeti 16 pg / ml arasında, ve duyarlılığı TNF-a ELISA, sırasıyla 13.9 pg / ml idi. Tüm deneyler için, varyans içi deneyi ve inter-analiz katsayıları sırasıyla &lt;5 ve% &lt;% 10 idi. </li></ol></li><li> İstatistiksel analizler Not: Tam istatistiksel yöntemler araştırma sorusu bağlıdır. Burada Tablo 2&#39;de kan gazları herhangi bir anlamlı farklılık test etmek için kullanılan yöntem sunulmaktadır. <ol><li> Uygun şekilde çoklu karşılaştırmalar için ayarlı parametrik veya non-parametrik testlerden ardından Kolmogorov-Smirnov testi kullanılarak normal veri dağılımı, test edin. </li><li> Kullanım ilgili pO 2 ve O 2 Sat değerlerini kendiliğinden hipoksik olduğu kohort fetusların belirlemek ve tespit etmek küme analizi K-ortalamaları (pO 2 &lt;20 mmHg düşünün veya beyaz peynir olarak O 2 Sat &lt;% 55l hipoksi). 44-48 </li><li> Analizler için SPSS gibi istatistik yazılımı kullanın. </li><li> Anlamlı kabul p &lt;0.05 istatistiksel farklılıklar ortalama ± SD olarak mevcut veriler. </li></ol></li></ol>

Herhangi bir açıklama yapılmadı.

Kronik aletli olmayan anestezi fetal koyun: anestezi ve cerrahi girişimler, fetal fizyolojisi ve patofizyolojisi çalışmak için bir hayvan modeli kurulması için gerekli olduğunu sunulmuştur. Protokolü içinde dört kritik adımlar vurgulanmalıdır. Birincisi, anne kanadını yoluyla kateterler ve elektrotlar geçen: Bu herhangi bir iç organ yaralanmaları önlemek için bir defada yapılır önemlidir. İkincisi, fetüsü exteriorizing önce uterotomy işletim sitesini güvence: Bunu önlemek veya amniyon sıvısı...

Hayvan modellerinde çeşitli laboratuar kemirgenler, insan olmayan primatlar ve yerli geviş getirenler da dahil olmak üzere normal ve tehlikeye gebeliklerin hem de çalışma için mevcuttur. 1,2,3,4,5 Kronik olarak gebe koyunun 50 yıl olarak için yaygın olarak kullanılmaktadır lipopolisakkaritler gibi patofizyolojik uyaranlar (LPS) insan fetal gelişim ve yanıtları bir modeldir. 6-10 LPS maruziyeti aşağıdaki lezyonlar nedeniyle her iki türün de benzer bir olgunlaşma profiline olan periventriküler lökomalazi ile erken doğan bebeklerde görülen tam olarak ne taklit. 11, 12 Diğer gebelik komplikasyonları ayrıca doğum öncesi glukokortikoidler akciğer gelişimini 13-15 ve fetus 16,17 üzerinde intrauterin büyüme geriliği (IUGR) etkisinin anlaşılması teşvik olduğunu keşif gibi büyük detaylı incelenmiştir. Fetal koyun modelinde geniş kullanımı uniq nedeniyletekrarlayan kan örneklemesi, biyoelektrik aktivitesinin kaydedilmesi, elektrik stimülasyonu ve in vivo beyin görüntüleme uygulaması sağlayan cerrahi yerleştirme ve kateter ve elektrotların bakımı olmayan anestezi fetal koyun vi amenability. daha az sıklıkla kullanılan rağmen 18 Telemetri de mümkündür henüz daha sofistike nedeniyle ilk ve bakım maliyeti yanı sıra kurmak. 19 Enstrümantasyon birçok varyasyonu ilgi önlemlere bağlı olarak mümkün olduğu Dahası, fetal koyun modeli çok yönlüdür. Örneğin, hafta gün içinde kaydetmek mümkündür böyle fetal solunum hareketlerinin, elektriksel beyin aktivitesi, kardiyovasküler tepkiler, elektrokardiyogram, organların bir dizi bölgesel kan akımı akış sondaları veya mikroküreler, vb Teşekkür kullanarak gerçek zamanlı olarak çok değişkenli sinyaller Bu çok yönlülük, çalışmaların geniş bir yelpazede Cardi geliştirilmesi dahil olmak üzere yapılmıştırovascular sistemi 20,21, hipotalamus-hipofiz-adrenal (HPA) eksen 22, özellikle de 24 yılında beyin gelişimi 23 ve uyku durumları geliştirme, hipoksi etkisi / asfiksi 25, terapötik hipotermi 26, inflamasyon 6-11, hem 27 kombinasyonu, glukokortikoidler 28,29 anti-depresanlar 30, bronko-pulmoner displazi (BPD) 31,32, önceki ve doğum sırasında adı ancak fetal programlama 33,34,35,36,37,38,39 veya yeni fetal izleme yöntemlerinin geliştirilmesi Soruşturmanın birkaç alanları. 40,41,42,43 Sunulan yöntemin genel amacı bu çok yönlü modelin temel uygulanmasını göstermektir. Bu hücresel bütünleştirici, organ ve moleküler düzeylerde fetal fizyolojisi ve patofizyolojisi okuyan akut ve kronik deneysel protokollerin geniş bir yelpazede kurulması sağlar.

<table><tbody><tr><td>ACE Işık kaynağı</td><td>Schott-Fostec</td><td>A20500</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon makası</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14060 - 11</td><td></td></tr><tr><td>Açılı diseksiyon makası</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>15006 - 09</td><td></td></tr><tr><td>Neşter sapı</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>10003 - 12</td><td>alternatif diseksiyon aleti</td></tr><tr><td>Kavisli neşter bıçakları #12</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>10012 - 00</td><td>alternatif diseksiyon aleti</td></tr><tr><td>Kemik makası</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>16044 - 10</td><td></td></tr><tr><td>S & T sütür bağlama forseps</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>00272 - 13</td><td></td></tr><tr><td>Dumont SS forseps - açılı</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>11203 - 25&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Örgülü ipek sütür boyutu 6-0</td><td>Teleflex Medical</td><td>07 - 30&nbsp; - 10</td><td></td></tr><tr><td>Tıbbi Bant</td><td>transpore</td><td>3M</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin hidroklorür 100 mg / ml</td><td>Hospira</td><td>NDC 0409 - 2051 - 05</td><td>Final Does 80 mg / kg</td></tr><tr><td>Tranqui Ved Enjeksiyonu (ksilazin 100 mg / ml)</td> <td>Vecdo</td><td>NDC 50989 - 234 - 11</td><td>Final Does 10 mg / kg</td></tr><tr><td>Reaktif turuncu 14</td><td>Sigma - Aldrich</td><td>R - 8254</td><td></td></tr><tr><td>Ringers Çözelti Bileşenleri Çözelti</td><td></td><td></td><td>%95 O2 ve %5 Co2 ile gaz dengelenmiştir, nihai pH 7.4</td></tr><tr><td>Sodyum klorür</td><td>Sigma - Aldrich</td><td>S7653</td><td>Nihai Konsantrasyon: 118 mM</td></tr><tr><td>Potasyum klorür</td><td>Fisher Scientific</td><td>P217 - 3</td><td>Nihai Konsantrasyon: 4.7 mM</td></tr><tr><td>Kalsiyum klorür dihidrat</td><td>Fisher Scientific</td><td>C79 - 500</td><td>Nihai Konsantrasyon: 2,5 mM</td></tr><tr><td>Potasyum fosfat monobazik</td><td>Fisher Scientific</td><td>P -285</td><td>Nihai Konsantrasyon: 1,2 mM</td></tr><tr><td>Magnezyum sülfat</td><td>JT Baker</td><td>Jan-00</td><td>Nihai Konsantrasyon: 0,57 mM</td></tr><tr><td>4- (2-Hidroksietil) piperazin-1-etansülfonik asit (HEPES)</td> <td>Fisher Scientific</td><td>BP 310 - 500</td><td>Son Konsantrasyon: 5,95 g/L</td></tr><tr><td>Glikoz</td><td>Sigma - Aldrich</td><td>G8270</td><td>Nihai Konsantrasyon: 5.5 mM</td></tr><tr><td>LifeWindow</td><td>Digicare Biyomedikal Teknoloji</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CED biyoamplifikatör ve ADC birimleri</td><td>Cambridge Electronic Design Limited, Unit 4, Science Park, Milton Road, Cambridge CB4 0FE İNGİLTERE.</td><td>Biyoamp: 1902; ADC: mikro1401; Veri toplama yazılımı: Spike 2, V7.13</td><td></td></tr><tr><td>Neurolog analog sinyal biyoamplifikatörü</td><td>Digitimer Ltd 37 Hydeway Welwyn Garden City Hertfordshire, AL7 3BE, İngiltere</td><td>NL108A</td><td></td></tr><tr><td>ABL800Flex</td><td>Radiometer Kanada; 200 Aberdeen Dr, Londra, N5V 4N2</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ON Eppendorf 5804R</td><td>Eppendorf Kanada; 2810 Arjantin Yolu, #2 Mississauga, Ontario, L5N 8L2</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Arrow Juguler Kateterizasyon Seti</td><td>Arrow International, Inc., 2400 Bernville Road, Reading, PA 19605 ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Atravet</td><td></td><td></td><td>10 mg / ml</td></tr><tr><td>Diazepam</td><td></td><td></td><td>5 mg / ml</td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Ketalar</td><td></td><td>100 mg / ml</td></tr><tr><td>Propofol</td><td></td><td></td><td>10 mg / ml</td></tr><tr><td>SurgiVeT</td><td>Endotrakeal Tüpler; Smiths Medical ASD, Inc. St. Paul, MN 55112, ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>RAPI-FIT Adaptörlü Cook Havayolu Değişim Kateteri</td><td>Cook Critical Care 750, Bloomington IN 47402-0489 ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dispomed Ventilatör</td><td>Dispomed Ltd., 745 Nazaire-Laurin, Joliette, Quebec J6E 0L6</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BD Insyte-W</td><td>Becton Dickinson, İnfüzyon Terapi Sistemleri A.Ş., 9450 S State St, Sandy Utah 84070 ABD</td><td></td><td>22 ila 20 g; 1 inç [0,9 x 25 mm] ila 1,16 inç [1,1 x 30 mm]</td></tr><tr><td>Edwards Lifesciences Ref: PX272 TruWave Tek Kullanımlık Basınçlı</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>LifeWindow LW6000</td> ile basınç izleme kiti <td>Digicare Biyomedikal Teknoloji 107 Ticaret Yolu, Boynton Plajı, FL 33426-9365 ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gaymar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Babcock</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Polivinil kateterler</td><td>SCI (Bilimsel Ürünler A.Ş.)</td><td></td><td>2 metre</td></tr><tr><td>2-0 Vicryl</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo makas</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>elektrokardiyogram (EKG)</td><td>LIFYY, Metrofunk Kabel-Union, Berlin, Almanya</td><td></td><td>tek kılıfta dört bakır elektrot, 2 metre</td></tr><tr><td>2-O Vicryl</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>3-0 Vicryl</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PDS II USP</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Trimetoprim sülfadoksin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ampisilin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Musluk</td><td>Argon Medikal, Cat&nbsp; 041220001A</td><td></td><td>Erkek luer kilitli Çift 4 Musluk</td></tr><tr><td>İğneler</td><td>Tyco Healthcare 8881202389</td><td></td><td>Monoject alüminyum göbek künt iğneler, 22Gx, 0.7mmx 38.1mm: fetal arteriyel ve venöz kateterler için</td></tr><tr><td>İğneler</td><td>Tyco Sağlık 8881202322</td><td></td><td>Monoject alüminyum göbek künt iğneler, 16Gx, 1.6mmx38.1mm: amniyotik kateterler için</td></tr></tbody></table>

Çok değişkenli kronik non-anestezi kayıtlar için yakın dönem fetal koyun enstrümantasyon

Instrumentation of Near-term Fetal Sheep for Multivariate Chronic Non-anesthetized Recordings

Kronik aletli gebe koyunlar, insan fetal gelişimi ve endotoksinler, bakteriler, göbek kordonu tıkanıklıkları, hipoksi ve çeşitli farmakolojik tedaviler gibi patofizyolojik uyaranlara yanıtların bir modeli olarak kullanılmıştır. Prematüre doğum riski taşıyan fetüslerde glukokortikoid tedavisi ve terapötik hipotermi ile ilgili hayat kurtarıcı klinik uygulamalar bu modelde geliştirilmiştir. Bunun nedeni, anestezi uygulanmamış fetal koyunların kateterlerin ve elektrotların cerrahi olarak yerleştirilmesi ve bakımına, tekrarlayan kan örneklemesine, madde enjeksiyonuna, biyoelektrik aktivitenin kaydedilmesine, elektrik stimülasyonunun uygulanmasına ve in vivo organ görüntülemesine izin veren benzersiz uygunluğudur. Burada, kan gazı, metabolik ve inflamasyon açısından ameliyat sonrası iyileşmenin karakterizasyonu da dahil olmak üzere, stabil, kronik olarak enstrümantasyonlu, anestezizleştirilmemiş bir fetal koyun modeli elde etmek için gereken cerrahi enstrümantasyon prosedürünü açıklıyoruz.

38 gebe zaman tarihli koyunların gebelik 128 ± 2 günde Enstrümante edildi (DGA ~ 0.88 gebelik, terim 145 dGA) arteriyel, venöz ve amniyotik kateter ve elektrokardiyogram (EKG), steril genel anestezi altında tekniği (ewe hem de fetus elektrotlar ile ). Ikiz gebelik durumunda fetus büyük palpe ve dönemlerarası çapı tahmin dayalı seçildi; alternatif Araçlı edilecek fetus herhangi bir potansiyel önyargı önlemek için rastgele seçilmiş olabilir veya her iki fetusun instrumented olabilir. Prosedürün toplam süresi 124 ± 27 daki...

Cerrahi yerleştirme ve kateter ve elektrotlar, tekrarlayan kan örneklemesi, madde enjeksiyonu, biyoelektrik aktivitesinin kaydedilmesi bakım ve in vivo görüntüleme izni nedeniyle kronik instrumented olmayan anestezi fetal koyun modeli, sağlık ve hastalık insan fetal gelişimini incelemek için kullanılır. Biz bu modeli kurmak için gerekli prosedürler açıklanmaktadır.

Çok değişkenli Kronik Non-anestezi Kayıtlar için Yakın dönem Fetal Koyun enstrümantasyon

The chronically instrumented pregnant sheep has been used as a model of human fetal development and responses to pathophysiologic stimuli such as ...

Bu prosedürün genel amacı, herhangi bir fizyolojik pertürbasyona yanıt olarak uzun süreli fizyolojik izleme için OV fetüsünün enstrümantasyonunu tanımlamaktır; bu araştırma modeli, anestezi uygulanmamış fetüsün in utero vasküler erişimine, elektrokardiyografik ve diğer biyoelektrik izlemine olanak tanır. Bu durum, vasküler oklüzyon veya pro-inflamatuar bir medyatör enjeksiyonu gibi fizyolojik bir pertürbasyon sırasında meydana gelen değişikliklere dair bilgi sağlar. Bu model, sağlıklı ve hastalık durumlarında fetal gelişimin anlaşılması açısından klinik olarak önem taşımaktadır.Burada sunulan tüm hayvan prosedürleri, Montreal Üniversitesi'nin hayvan kullanımı için Etik Kurulu tarafından onaylanmış ve Canadian Council for Animal Care tarafından belirlenen kılavuzlara uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Bu, non-Survival (hayatta tutulmayan) bir deneydir. Burada açıklanan anestezik protokolün inflamatuar yanıt üzerinde minimum etkisi vardır.Düşük doz propofol eklenmesi laringeal refleksleri azaltarak entübasyonu kolaylaştırır. Anestezi süresi boyunca çok parametreli bir fizyolojik monitör kullanılır. Ölçülen tüm maternal fizyolojik parametreler burada görülebilir.Elektrokardiyogram, do

instrumentation-near-term-fetal-sheep-for-multivariate-chronic-non

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Gelişim Biyolojisi

Ultra yüksek frekans ultrason küçük hayvanlarda kalp anormallikleri incelemek için güçlü bir canlı görüntüleme aracıdır. Bu girişimsel embriyoların fizyolojik durumunu korumak sağlar. Burada, rahimde embriyo E18.5 kalp oranlarını ölçmek için M-modu ultrason kullanımını gösterir.

Noninvaziv M-mod ekokardiyografi ile Fare Kalp Puan utero Ölçümünde

Burada, serbestçe hareket eden neonatal epileptik yavrulara elektroensefalografiyi (EEG) kaydetmek ve prosedürlerini, özelliklerini ve uygulamalarını tanımlamak için tasarlanmış yeni bir teknik sunuyoruz. Bu yöntem, EEG'yi 1 haftadan daha uzun süreyle kayıt ettirmenizi sağlar.

Yeni Bir Yöntemi Kullanarak Serbest Dolaşan Yenidoğan Sıçanlarında EEG Kaydı

Doğru ve etkili görselleştirme invaziv tıbbi cihazların ultrason destekli birçok minimal invaziv yordamlarda da son derece önemlidir. Burada, bir iğne ucu ultrason görüntüleme sonda göre kayma konumunu yerelleştirme için bir yöntem sunulur.

Üç boyutlu ultrasonik iğne ucu ile bir Fiber optik ultrason alıcı izleme

Yüksek frekanslı ultrason görüntüleme fetal fare görüntüleme çözümü geliştirdi ve hassas bir non-invaziv kalp geliştirme ve yapısal kusur karakterizasyonu sağlar. Burada özetlenen Protokolü gerçek zamanlı fetal fareler Ekokardiyografi vivo içindegerçekleştirmek için tasarlanmıştır.

Fetal fare bir yüksek frekans ultrason (30/45 MHZ) sistemi kullanarak Imaging kardiyovasküler

Fetal kuzu invaziv araçları yakından yeni doğmuş bebek taklit eden bir modeldir transitioning dolaşım doğru fizyolojik ölçümler sağlar.

Perinatal kuzu modeli oksijensiz: Yenidoğan Resusitasyon için bir Model

Burada, anestezik kullanımını gerektirmeyen erken doğum sonrası fareler için optimize edilmiş noninvaziv bir elektrokardiyografi (EKG) protokolü salıyoruz.

Perinatal Farede Noninvaziv Elektrokardiyografi

Bu protokol, in utero gelişmekte olan bir fetüste perivasküler olarak ilaç ve gen ekspresyon modifiye edici ajanların verilmesi için bir yöntemi tanımlamaktadır. Daha da önemlisi, ilaçların/ajanların kan akışı üzerindeki etkisi gebeliğin ilerlemesi ile ölçülebilir.

In vivo Küçükbaş Fetüste Karotis Kan Akışı Üzerindeki İlaç Etkilerinin Gerçek Zamanlı Çalışması

Trakeal oklüzyon ile akciğer hipoplazisini iyileştirmek için gereken oklüzyon basıncının ve süresinin optimizasyonu, konjenital diyafragma hernisi (CDH) için utero düzeltici tedavileri iyileştirmek için esastır. Bu çalışmada, CDH'nin tıkalı ve tıkasız fetal kuzu cerrahi modelinde trakeal basıncın sürekli ölçümü için yeni bir yöntem bildirilmiştir.

Fetal Kuzularda Sürekli Telemetrik In Utero Trakeal Basınç Ölçümleri

Bu çalışma, bir domuz modelinde tekrarlanan kronik kortikal kayıtlar için ölçeklenebilir, güvenilir ve tekrarlanabilir bir yöntem sunmaktadır. Yöntemin, ağrı araştırmaları ve nörolojik hastalık teşhisi dahil olmak üzere sinirbilimin çeşitli alanlarında uygulamaları vardır.

Domuzlarda anestezi sırasında tekrarlanan kortikal kayıtlar için kronik kraniyal pencere tekniği

Bu protokol, kalp atış hızı, arteriyel kan basıncı, düşük ve üstün vena kava basınçları ve kardiyak ritim dahil olmak üzere hemodinamik verilerin sürekli ve uzun süreli toplanmasını sağlamak için büyük bir hayvan kablosuz telemetri cihazının implante edilmesi için cerrahi metodolojiyi açıklar.

Sürekli ve Uzun Süreli Hemodinamik İzleme için Fontan Küçükbaş Hayvan Modelinde Kablosuz Telemetri Cihazı İmplantasyonu

Öğrenin, fetal koyun modelinde uzun süreli fizyolojik izleme için damar erişimi ve biyoelectrik monitörizasyon yöntemlerini. Bu teknik, gelişim biyolojisi ve sağlık-durum araştırmalarında değerli içgörüler sunar.

Çok değişkenli Kronik Non-anestezi Kayıtlar için Yakın dönem Fetal Koyun enstrümantasyon

Daha fazla video keşfet