Name: Bir Penetran Mikro-elektrot Array ile bir Kırımsız Hipokampal Hazırlık Sinir Faaliyet Yayılım (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
Description: Keşfedin fare hipokampusunu açma ve penetrant mikro-elektrot dizisi üzerine yerleştirme yöntemini. Bu teknik, sinir aktivitesinin uzunlamasına ve enlemesine yönlendirmelerde eşzamanlı kaydını sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüleri (Ulusal Nörolojik Bozukluklar ve İnme Enstitüsü) Hibe 1R01NS060757-01 ve E.L. Lindseth'in Dominique M. Durand'a bağışladığı kürsü tarafından desteklenmiştir. Dr. Andrew M. Rollins'in laboratuvarına OCT görüntüleme konusundaki yardımları için teşekkür ederiz.

NOT: Hayvan deneysel protokolleri gözden ve üniversitede Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi. P20 P10 çağındaki her iki cinsiyetten CD1 fareleri bu çalışmada kullanılmıştır. Cerrahi ve Deneysel Kayıt için 1. Çözümler <ol><li> NaCl 124, KCI 3.75, KH 2 PO4 1.25, MgSO 4 2, NaHCO 3 26, Dekstroz 10, ve CaCl 2 2: (mM) içeren normal bir yapay beyin omurilik sıvısı (aCSF) tampon hazırlayın. Deneyin başlangıcında yıkama sistemi yanı sıra, ayrıldıktan sonra, doku kurtarma için, bu normal aCSF kullanın. </li><li> Hipokampus diseksiyon sırasında ve içerir sükroz aCSF hazırlayın (mM olarak): Sakaroz 220, KCI 2.95 NaH 2 PO4 1.3, MgSO 4 2, NaHCO3, 26 Dekstroz 10 ve CaCI2 2. Sağlam hipokampal doku terkibi epileptiform activity uyarılması amacıyla, normal aCSF 4-aminopiridin (4-AP) ekleyin100 uM konsantrasyonu. </li></ol> Bozulmamış Hippocampus Preparasyon 2. Cerrahi Prosedür <ol><li> Bir kurutucu cam kavanoz (Belirli Malzeme ve Ekipman No.1) altındaki odasına izofluran (1 ml) Bırak ve hayvan ile temas almaz böylece alt aşamada yüzeyini kapsayacak şekilde düzenli bir kağıt havlu kullanın Sıvı. Ardından, kavanoza CD1 fare koyun ve kapağını kapatın. Yaklaşık 1 dakika ile 2 dakika süre ile, kapalı bir kavanoza hayvan tutun. Nefes sıklığı yaklaşık bir saniyede olduğunda, kavanoz fareyi çıkarın. </li><li> Cerrahi sahnede fare koyun ve uygun bir makasla başını kesmek. Hemen konusu hayvanın başı kesildikten sonra, yaklaşık 30 saniye boyunca buz soğukluğunda (3-4 ° C) içine baş, oksijenli sükroz aCSF yerleştirin. </li><li> Kafatasının üst deriyi kaldırmak ve tempo yakın iki ucunda yanı sıra baş orta hat boyunca kafatası kesmek için ince makas (Özel Malzeme ve Ekipmanları No.5) kullanınral lob. Kullanım forseps (Özel Malzeme ve Ekipmanları No. 6) beyin ortaya koymak için başın her iki tarafına doğru kesik kafatası soymak için. </li><li> Dikkatle kafatasının altından beyin kabuğu ve daha sonra üzerine düşmesi beyin ve kafatası parietal lob arasındaki boşluğa bir mikro laboratuar spatula (Belirli Malzeme ve Ekipmanları No 8) takın hazırlanmış bir buz-soğuk (3 Belirli Malzeme ve Ekipmanları) ıslak filtre kağıdı (No.2 ile kaplı -4 ° C) cerrahi evre. Bir buz-soğuk bıçak ile beyincik çıkarın ve beynin orta hat keserek iki hemisfer ayırın. Daha sonra,% 95 O 05/02% CO2 ile kabarcıklandırılmış buz gibi soğuk sükroz aCSF ile dolu bir beher içine iki ayrılmış hemisferlerin yerleştirin. </li><li> Buz gibi soğuk filtre kağıdı sahnede yarımkürede ve yerin yarısını alın. Ekstra çözüm emmek için beynin etrafında normal kağıt havlu veya filtre kağıdı yerleştirin. Malzeme iki yangın parlatılmış cam pipet araçları (No. 10 kullanın veEkipman) beynin orta kısmının geri kalanından ayırmak için korteksi. </li><li> Hipokampus korteks içinden maruz kalan ve buz-soğuk sahneye koymak sonra, doku üzerinde buz soğuk sakaroz aCSF iki veya üç damla koyun ve ardından hipokampus etrafında ekstra çözüm kaldırmak. Hipokampus iki ucunda korteks ile bağlantıları kesin. Ardından, yangın cilalı cam araçları ile beynin dışarı hipokampus incelemek ve beynin geri kalan kısmını kaldırın. </li><li> Onun alveus tarafı yukarı bakacak ve hipokampal sulkus aşağı bakacak şekilde tüm hipokampus ayırın. Hızla yeniden doku üzerinde buz soğuk sakaroz aCSF iki veya üç damla damla ve kağıt havlu parçası kullanarak doku etrafında ekstra çözüm kaldırmak. Sulkus (Şekil 1B, C) ​​maruz tüm hipokampus üzerinde açmak için bir ateş cilalı cam aracını kullanın. </li><li> Normal optik mikroskop altında, Özgül Materi bir ölçüye cam iğne (No. 11 yerleştirinals ve sulcus bir ucunu Ekipmanları) ve sulcus yönünde (Şekil 1C) boyunca, dentat subikulum için gyrus (DG) veya CA1 alanından lif bağlantıları kesmek. Gerekirse hipokampus septal ve zamansal biter süs için bir buz-soğuk bıçak uygulayın. Kesme sulkus içine (Özel Malzeme ve Ekipmanları No. 12), bir özel yapılmış metal tel döngü yerleştirin ve bir yangın parlatılmış cam aracı tarafından hipokampus subikulum / CA1 ucunu tutarak dokudan uzak DG üzerinden çekin (Şekil 1D) . </li><li> Yukarıda açılma prosedüre göre, doku üzerine buz gibi soğuk sükroz aCSF bir, iki veya üç damla ve doku çevresinde ilave uzaklaştırın. Daha sonra, kenarları (Şekil 1E) buz gibi soğuk bıçak ile katlanmamış hipokampus Döşeme ve ilgili (oda sıcaklığında, normal aCSF ile doldurulmuş ve% 95 O 05/02% CO2 ile kabarcıklandırılmış geri kazanılması haznesine bir spatula ile hazırlanmasını yer 25 ° C). Ayrılmakkatlanmamış hipokampus doku kayıt odasına yerleştirmeden önce yaklaşık 1 saat kurtarmak için. </li><li> Diğer beyin yarımkürede alın ve 2,5-2,9 adım adım gitmek için kullanabilirsiniz. Genellikle, bir tek hipokampus açılmak ve oksijenli ve sulu doku tutmak için sürekli buz gibi soğuk sakaroz aCSF damla tüm prosedürü tamamlamak için yaklaşık 1 ila 2 dakika sürebilir. </li></ol> 3. Deneysel Sistem Kurulumu <ol><li> Bir pim ızgara dizisi (PGA) paket üzerinde özel bir imal PMEA&#39;nm Tutkal ve ambalajın (Şekil 3B), bir pimin pedi tek bir mikroelektrot her ped bağlamak için mikro tel bağlanmasını kullanır. Ardından, ısmarlama bir devre kartı 13 sokete paketi takın. </li><li> Bireysel özel yapılmış devre kartı 13 100 kazanç 4 KHz ve amplifikatörler 1 Hz band geçiren kesme frekansı ile filtreleri her mikroelektrot bağlayın. A / D sohbetler devre kartından analog çıkış Sayısallaştırsistemi Erting ve bir bilgisayardaki verileri kazanmak ve depolamak. </li><li> Çözelti akış (Şekil 4A) için giriş ve çıkış boru ile dizi etrafında bir ısmarlama plastik kayıt odasına Tutkal. Sistemdeki farklı çözümler tutmak ve birleştirme ve üç valf ile şişelerin çıkış boru kontrol etmek için en az iki şişe kullanın. Kayıt odasına çözüm rehberlik IV damla odası ile bir boru sistemine tri-vana çıkışını bağlayın. </li><li> Tri-valf ve kayıt odasının giriş arasında, çözelti, kayıt odasına yönlendirilir önce kontrollü bir sıcaklıkta (35 ° C) çözelti ısıtmak için bir ısıtıcı ekleyin. Bir vakum tüpü bağlı balona çözüm toplamak için bir vakum tüp kayıt odasının çıkış takın. Bu çalışmada herhangi bir deneyde herhangi bir solüsyon geri verme. </li></ol> 4. PMEA&#39;nın üzerine Kırımsız Hippocampus Yerleştirme Sinir Aktivite kaydedin için </p&gt; <ol><li> Deney düzeneği hazırlamak için, bir normal aCSF ile şişe ve 4-AP aCSF ile bir şişe doldurun. Her iki şişelerde, kabarcık% 95 O, her denemenin başından itibaren 05/02% CO 2. Bir deney sırasında seçilen hangi çözüm denetlemek için bir üç-valf konnektörünü kullanın. Bir kabın içine toz çözüm pompalamak için odasının çıkışında bir vakum tüpü bağlayın. Kayıt odasına teslim etmeden önce boru hattı ısıtın ve kontrollü bir sıcaklık seviyesinde (35 ° C) çözüm tutmak. </li><li> Odasına kayıt giriş ve çıkış kapalı olduğunda, kayıt odasına katlanmamış hipokampus aktarmak ve yerleştirmek için özel yapılmış cam pipet damlalık kullanabilirsiniz. Mikroskop altında, doku çözeltide yüzen ise düzenli bir küçük boya fırçası kullanarak gelişeceğini hipokampus yerleştirin. Onun alveus tarafı uzak işaret, CA3 alanı aşağı bakacak ve CA1 alan araştırmacı bakacak ile gelişeceğini hipokampus yerleştirin. </li&gt; <li> Dikkatle odası kurutulur ve doku dizi üzerine indirilir kadar çözüm seviyesini düşürmek için kayıt odasının kenarından bir vakum pipet kullanarak odasında çözüm uzak emmek. Sonra, dikkatle dizi üzerine gelişeceğini hipokampus tutmak için doku üstünde bir ölçüye doku çapa (Şekil 4) (Belirli Malzeme ve Ekipmanları No. 14) yerleştirin. IV damla odasında saniyede iki damla akış hızını ayarlamak için giriş ve çıkış yeniden doldurmak ve yavaş yavaş açık kayıt odasına solüsyonu ve bir kaç damla koyun. </li><li> Kurtarmak için yaklaşık 1 dakika boyunca normal bir ACSF kayıt bölümü içinde doku inkübe, daha sonra 4-AP çözündürüldü aCSF çözüm kaynağı anahtarı ve düzgün bir akış hızını ayarlayın. Yaklaşık 5 ila 10 dakika süreyle aCSF çözülmüş 4-AP doku inkübe ve ardından araştırmacı spontan aktivite göründüğünde sinyali kaydetmek için yazılımını başlatmak olabilir. </li></ol> 5. ÇıkarmaBir Deney sonra PMEA&#39;nın gelen doku <ol><li> Bir micromanipulator doku çapa Kontrol ve yavaş yavaş kayıt odasından doku kaldırın. Kayıt odasında akışını durdurmak için hem giriş hem çıkış kapatın. Kayıt odası solüsyonu ile dolu veya kayıt odası dolu değilse odasını doldurmak için çözümün bir kaç damla eklemek gerekir. </li><li> Doku her köşesine kaldırmak için küçük bir boya fırçası kullanın. Doku solüsyonda yüzen değilse, o zaman doku hala dizi oturan ile dikkatli bir şekilde bölme kuru vakum borusunu kullanır. Sonra dikkatlice yavaş yavaş odasına dolum ve kayıt odası dolduğunda akışını durdurmak için giriş kapatmaya giriş açın. Yine doku her köşesini kaldırın küçük boya fırçası uygulayın. </li><li> Dokuya kadar adımı yineleyin 5.2 diziden ayrılmış ve çözelti içinde yüzer. Doku çözeltisi içinde yüzen, o uzak doku emmek için vakum tüpü kullanın. Açık tO girişinde akış ve çıkışına vakum açın. Damıtılmış suyla yıkayın sistemi ve kurur. </li></ol>

<ol><li>Richardson, K. A., Schiff, S. J., Gluckman, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+traveling+waves+in+the+Mammalian+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Rev+Lett%22%5BJournal%5D)">Control of traveling waves in the Mammalian cortex.</a> Phys Rev Lett. 94 (2), 028103-028112 (2005).</li>
<li>Luhmann, H. J., Dzhala, V. I., Ben-Ari, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+and+propagation+of+4-AP-induced+epileptiform+activity+in+neonatal+intact+limbic+structures+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Generation and propagation of 4-AP-induced epileptiform activity in neonatal intact limbic structures in vitro.</a> Eur J Neurosci. 12 (8), 2757-2768 (2000).</li>
<li>Grinvald, A., Manker, A., Segal, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+the+spread+of+electrical+activity+in+rat+hippocampal+slices+by+voltage-sensitive+optical+probes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Visualization of the spread of electrical activity in rat hippocampal slices by voltage-sensitive optical probes.</a> J Physiol. 333, 269-291 (1982).</li>
<li>Gloveli, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthogonal+arrangement+of+rhythm-generating+microcircuits+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Orthogonal arrangement of rhythm-generating microcircuits in the hippocampus.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 102 (37), 13295-13300 (2005).</li>
<li>Amaral, D. G., Witter, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+three-dimensional+organization+of+the+hippocampal+formation%3A+a+review+of+anatomical+data%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The three-dimensional organization of the hippocampal formation: a review of anatomical data.</a> Neuroscience. 31 (3), 571-591 (1989).</li>
<li>Albani, S. H., McHail, D. G., Dumas, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+studies+of+the+hippocampus+and+hippocampal-dependent+behaviors%3A+insights+from+interdisciplinary+studies+and+tips+for+new+investigators%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">Developmental studies of the hippocampus and hippocampal-dependent behaviors: insights from interdisciplinary studies and tips for new investigators.</a> Neurosci Biobehav Rev. 43, 183-190 (2014).</li>
<li>Zhang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propagation+of+Epileptiform+Activity+Can+Be+Independent+of+Synaptic+Transmission%2C+Gap+Junctions%2C+or+Diffusion+and+Is+Consistent+with+Electrical+Field+Transmission%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Propagation of Epileptiform Activity Can Be Independent of Synaptic Transmission, Gap Junctions, or Diffusion and Is Consistent with Electrical Field Transmission.</a> J Neurosci. 34 (4), 1409-1419 (2014).</li>
<li>Kibler, A. B., Durand, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthogonal+wave+propagation+of+epileptiform+activity+in+the+planar+mouse+hippocampus+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Orthogonal wave propagation of epileptiform activity in the planar mouse hippocampus in vitro.</a> Epilepsia. 52 (9), 1590-1600 (2011).</li>
<li>Wang, D., McMahon, S., Zhang, Z., Jackson, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybrid+voltage+sensor+imaging+of+electrical+activity+from+neurons+in+hippocampal+slices+from+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Hybrid voltage sensor imaging of electrical activity from neurons in hippocampal slices from transgenic mice.</a> J Neurophysiol. 108 (11), 3147-3160 (2012).</li>
<li>Wingenfeld, K., Wolf, O. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+%2C+memory%2C+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Stress , memory, the hippocampus.</a> Front Neurol Neurosci. 34, 109-121 (2014).</li>
<li>Liu, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+dynamics+of+high-K%2B-induced+epileptiform+discharges+in+hippocampal+slice+and+the+effects+of+valproate%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Bull%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal dynamics of high-K+-induced epileptiform discharges in hippocampal slice and the effects of valproate.</a> Neurosci Bull. 29 (1), 28-36 (2013).</li>
<li>Oka, H., Shimono, K., Ogawa, R., Sugihara, H., Taketani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+planar+multielectrode+array+for+extracellular+recording%3A+application+to+hippocampal+acute+slice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A new planar multielectrode array for extracellular recording: application to hippocampal acute slice.</a> J Neurosci Methods. 93, 61-68 (1999).</li>
<li>Kibler, A. B., Jamieson, B. G., Durand, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high+aspect+ratio+microelectrode+array+for+mapping+neural+activity+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A high aspect ratio microelectrode array for mapping neural activity in vitro.</a> J Neurosci Methods. 204 (2), 296-305 (2012).</li>
<li>Schechter, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potassium+channel+blockers+4-aminopyridine+and+tetraethylammonium+increase+the+spontaneous+basal+release+of+%5B3H%5D5-hydroxytryptamine+in+rat+hippocampal+slices%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">The potassium channel blockers 4-aminopyridine and tetraethylammonium increase the spontaneous basal release of [3H]5-hydroxytryptamine in rat hippocampal slices.</a> J Pharmacol Exp Ther. 282 (1), 262-270 (1997).</li>
<li>Perreault, P., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4-aminopyridine-induced+epileptiform+activity+and+a+GABA-mediated+long-lasting+depolarization+in+the+rat+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">4-aminopyridine-induced epileptiform activity and a GABA-mediated long-lasting depolarization in the rat hippocampus.</a> J Neurosci. 12 (1), 104-115 (1992).</li>
<li>Chesnut, T. J., Swann, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epileptiform+activity+induced+by+4-aminopyridine+in+immature+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+Res%22%5BJournal%5D)">Epileptiform activity induced by 4-aminopyridine in immature hippocampus.</a> Epilepsy Res. 2 (3), 187-195 (1988).</li>
<li>Nam, Y., Wheeler, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Vitro+Microelectrode+Array+Technology+and+Neural+Recordings%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Rev+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">In Vitro Microelectrode Array Technology and Neural Recordings.</a> Crit Rev Biomed Eng. 39 (1), 45-62 (2011).</li>
<li>Gonzalez-Sulser, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+neuron+firing+and+local+field+potentials+in+the+in+vitro+4-aminopyridine+epilepsy+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Hippocampal neuron firing and local field potentials in the in vitro 4-aminopyridine epilepsy model.</a> J Neurophysiol. 108 (9), 2568-2580 (2012).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

hipokampus uzunlamasına ve enine eksen delici mikroelektrot dizisi ile birlikte korunur gelişeceğini hipokampus hazırlama, geliştirme, hipokampus 7 anatomi bağlantıları veya nöral yayılmasını araştırmak için güçlü bir araç sağlar. Bu açılımı prosedür de yetişkin farelerde hipokampus incelemek için geçerlidir. Bu hazırlık Son çalışmalar 4-AP-kaynaklı epileptiform aktivite gelişeceğini hipokampus tüm alanı boyunca bir diyagonal dalga önünde (Şekil 6) 7,8 ile yaymak göstermiştir. Bu ç...

Nöral sinyallerin sinir iletimi veya ilerlemesini anlamak beyinde 1-3 normal fonksiyon ve patolojik durumlarda hem nöral iletişim mekanizmasının belirlenmesi için çok önemlidir. hipokamp bu bellek, ve mekansal izleme gibi pek çok beyin fonksiyonlarında önemli bir rol oynar ve önemli ölçüde davranışı, 1,6 etki, çeşitli patolojik değişikliklerinin olduğu için beyindeki en yaygın olarak araştırılmış yapılardan biridir. Hipokampus karmaşık bir organizasyon sergiler rağmen, yapısı farklı unsurları kolayca tespit ve dilim hazırlama 4-6 ulaşılabilir. Hipokampusun enine yönde nöral etkinlik kıvrımlarının (AD), CA3, CA1 andsubiculum 4,5 ihtiva tri-sinaptik yolu ile yaymak için bilinmektedir. Bu sinaptik iletim ve aksonal iletim communicati için çok önemli bir rol oynadığı da düşünülmektedirBu enine devresinde 4,6 üzerinde. Ancak, sinir sinyalin yayılma enine ve boyuna yönlerde 4,6 hem de yer alır. Bu hipokampus tamamen yayılma 4 belirli bir yöne gözlem sınırlamak dilim hazırlıkları kullanılarak araştırılmıştır edilemez olduğunu ima eder. uzunlamasına dilim uzunlamasına eksen 5 boyunca aksonal yolları araştırmak için geliştirilmiştir. Araştırmacılar ağırlıklı enine ve boyuna eksenleri sırasıyla 6 boyunca davranış özel gama ve teta salınımlar gözlemledik. Bu davranışlar ayrı ayrı ele alınmıştır, ancak her iki yöne aynı anda erişim bu davranışları anlamak önemlidir. Hatta sağlam hipokampus hazırlık gelişimi ile, bunun nedeni hipokampus 4 katlanmış-yapısına tüm dokusu boyunca yayılmasını izlemek zordur. katlanmamış hipokampus dolu nöronlar erişim sağlardüz iki boyutlu hücre tabakası 7,8 formunda. Dentat girus (DG), (Şekil 1) açılma olarak, hipokampus, enine ve uzunlamasına bağlantı hem CA3 ve CA1 her ikisini de içeren iki boyutlu bir tabaka halinde düzenlenmiş, piramidal hücre tabakası ile sağlam kaldığı bir dikdörtgen şekline sahip düzleştirilmiş bir şekli benimser Nöral yayılmasını araştırmak için kullanılabilecek nöral doku düz bir parça bırakarak (Şekil 2) 8. Sinir aktivitesi daha sonra münferit cam pipetler, mikroelektrot dizileri, uyarıcı elektrot ve aynı zamanda gerilim duyarlı boyalar (VSD), 3,7,8 ile izlenebilir. Buna ek olarak, transgenik farelerin genetik olarak kodlanmış gerilim göstergesi yayılım modelini 9 izlemek için kullanılabilir. katlanmamış hipokampal ağ yapılandırması düz optik yöntem kayıt için değil, aynı zamanda bir mikroelektrot dizisi için uygundur. Mpiyasada mevcut dizilerin ost düz ya da düşük profilli elektrotlar ile imal edilir ve doku dilimleri ve kültürlü nöronlar 10-12 hem nöral aktiviteyi kaydedebilirsiniz. Nöronların soma dokuya daha derin bulunduğu çünkü sinyallerin sağlam bir dokudan elde edilir, ancak bir sinyal-gürültü oranı (SNR) azalır. Yüksek boy oranları ile mikroelektrod elektrot diziler SNR geliştirmek için gereklidir. Bu amaçla, bir nüfuz mikroelektrot dizi (PMEA), laboratuarda geliştirilmiş ve katlanmamış hipokampus 7,13 bir 20 um çapında ve 200 mm yüksekliğinde 64 sivri sokulmasıyla direkt olarak dokunun araştırmak olanağı sağlar . Bu mikroelektrot dizisi gerilim duyarlı boya görüntüleme kıyasla daha yüksek SNR sahiptir ve SNR bir deney 7,13 sırasında sabit kalır. katlanmamış hipokampal hazırlanması ve PMEA&#39;nın kombinasyonu yatırım için yeni bir yol sağlariki boyutlu düzlem üzerinde nöral yayılmasını Igate. Bu tekniği kullanarak deneyler zaten sinirsel aktivite bağımsız sinaptik veya elektrik sinaps 7 yaymak sayede hipokampus nöral sinyal yayılım mekanizmaları hakkında önemli sonuçlar vermiştir.

<table><tbody><tr><td>kurutucu kavanoz</td><td>LABRECYCLERS Inc.</td><td>5410</td><td>Hayvan anestezisi kullanımı için kavanozun dibine normal kağıt havlular yerleştirin.</td></tr><tr><td>Hipokampusun açılması için bir bıçak ve Özel yapım cerrahi aşama</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Bir petri kabı, üzerine ıslak bir filtre kağıdı yerleştirilerek buzun içine baş aşağı (ortaya) yerleştirilir.</td></tr><tr><td>Özel yapım doku geri kazanım odası</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Plastik tüpler altta plastik ağ ile yapıştırıldı ve aCSF'de %95 O2 / %5 CO2 ile köpürtüldü.</td></tr><tr><td>Düz Çalışma&nbsp; Makas</td><td>Fisher Bilimsel</td><td>S17336B&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Medco Aletleri No.:81995&nbsp;</td><td>Bu makas şu amaçlarla kullanılır&nbsp; &nbsp; farelerin kafasını kes.</td></tr><tr><td>Integra Miltex Goldman-Fox&nbsp; Makas</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-460-517&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; MILTEX INC&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; No.:5-SC-320</td><td>Bu makas farelerin kafatasını kesmek için kullanılır.</td></tr><tr><td>Miltex Histerektomi Forseps</td><td>Claflin Tıbbi ekipman</td><td>CESS-722033-00001</td><td>Bu Forseps, beyni ortaya çıkarmak için kesilen kafatasını soymak için kullanılır</td></tr><tr><td>Mikro Spatula</td><td>Kardinal Sağlık</td><td></td><td>Bu mikro spatula, bir yarım kürenin tüm beynini yeniden çekirdek odasına aktarmak için kullanılır.&nbsp;</td></tr><tr><td>Frey Scientific Paslanmaz Çelik Yarı Mikro Spatula</td><td>Kardinal</td><td></td> Sağlık <td>Bu yarı mikro spatula, katlanmamış hipokampusu kurtarma odasındaki glikoz aCSF'ye aktarmak için kullanılır.</td></tr><tr><td>küçük boya</td><td>fırçası Lowe's</td><td>tem #:&nbsp; 105657&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Model #:&nbsp; 90219</td><td>Normal bir boya fırçası paketindeki en küçük boyuta sahip olan</td></tr><tr><td>Ateşle cilalanmış cam yardım aleti</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Bu alet ateşle parlatılmıştır ve normal Pasteur cam pipetlerinden yapılmıştır.</td></tr><tr><td>Özel yapım cam iğne</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Bu alet ateşle parlatıldı ve normal Pasteur cam pipetlerinden yapıldı.</td></tr><tr><td>Metal tel halkalı özel yapım cam alet</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Bu alet ateşle parlatıldı ve yeniden şekillendirilmiş metal tel halkalı normal Pasteur cam pipetlerinden yapıldı.</td></tr><tr><td>Özel yapım cam solüsyon damlalığı</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Bu alet, uçları kesilmiş ve kesilen uca bağlı bir lastik kafa ile normal Pasteur cam pipetlerinden yapılmıştır.</td></tr><tr><td>Özel yapım doku ankrajı</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Naylon elyaf ağ, yalıtılmış bir bakır tel halka üzerine yapıştırıldı. Doku ankrajı bir mikromanipülatör tarafından tutuldu.</td></tr><tr><td>Özel fabrikasyon mikroelektrot dizisi</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Dizi hakkında daha fazla ayrıntı lütfen bakınız&nbsp; Kibler ve ark., 2011.&nbsp;</td></tr><tr><td>N/A</td><td>N/A</td> <td>dizisi için özel yapım filtre ve amplifikatör devreleri</td><td>Dizi hakkında daha fazla detay için lütfen bakınız&nbsp; Kibler ve ark., 2011.&nbsp;</td></tr><tr><td>Veri toplama işlemcisi 3400a</td><td>Microstar Laboratories</td><td>N/A</td><td>Bu, A/D dönüştürücülü eksiksiz bir veri toplama sistemidir.</td></tr></tbody></table>

bir penetran mikro-elektrot array ile bir kırımsız hipokampal hazırlık sinir faaliyet yayılım

Neural Activity Propagation in an Unfolded Hippocampal Preparation with a Penetrating Micro-electrode Array

Bu protokol, hipokampus sinir aktivitesi eşleştirmek için bir mikro-talaşlı dizi ile birlikte in vitro düz hipokampus hazırlanmasında yeni hazırlanması için bir yöntem tarif eder. enine hipokampal dilim hazırlık hipokampus elektrofizyoloji çalışma en yaygın doku hazırlıktır. Bir uzunlamasına hipokampal dilim de hipokampus uzunlamasına bağlantıları araştırmak amacıyla geliştirilmiştir. kalınlığı yeterli oksijen difüzyonu sağlar, çünkü dokunulmamış fare hipokampüs, in vitro olarak yapılabilir. Doku bazı eksik ya da katlanmış ya olduğundan Ancak, bu üç hazırlıkları nöral yayılımı doğrudan erişim vermeyin. katlanmamış sağlam hipokampus enine ve in vitro hipokampus sinyal yayılma tam ölçüde analiz dokuya doğrudan erişim için düz bir konfigürasyonda boyuna bağlantıları hem de sağlar. Etkili bir t nöral aktiviteyi izlemek içinO hücre tabakası, özel imal edilmiş mikro-elektrot dizisi (PMEA) nüfuz yaptı ve katlanmamış hipokampus başvurdu. Yüksekliği 200 mikron 64 elektrot ile PMEA derin fare hipokampus içinde nöral aktiviteyi kayıt olabilir. katlanmamış hipokampal hazırlanması ve PMEA benzersiz kombinasyonu gürültü oranı yüksek bir sinyal ile hipokampusun iki boyutlu CA1-CA3 bölgeleri hızı ve sinir aktivitesinin yayılma yönü incelemek için yeni bir in vitro araç sağlar.

Burada, şekillerde gösterilen veriler 4-AP (100 uM) oda sıcaklığında kayıt bölümü içinde, dokunun inkübasyonu boyunca ilave aCSF (25 ° C) katlanmamış hipokampus hazırlanmasında kaydedildi. Normalde etkinlik 5 dakika içinde başlar, ancak daha yaşlı hayvanlarda bazı hipokampal dokularda daha uzun sürebilir. Daha önce 14,15 bildirilen PMEA ile gözlemlenen 4-AP ile uyarılan nöronal ateşleme aynıdır. Elektrotlar 200 um&#39;lik bir yüksekliğe sahip olduğundan, elektrot uçları hemen üzerinden hücre tabakası ...

Biz nöronların CA1-CA3 dizi koruyan bir in vitro katlanmamış hipokampus geliştirdik. Nüfuz mikro elektrot dizisi ile birlikte, sinir aktivitesi hem uzunlamasına hem de enine yönlerde izlenebilir. Tüm hipokampta yayılma aynı anda kaydedilebilir Bu yöntem hippocampal slice preparatlarda fazla avantajlar sağlamaktadır.

Bir Penetran Mikro-elektrot Array ile bir Kırımsız Hipokampal Hazırlık Sinir Faaliyet Yayılım

This protocol describes a method for preparing a new in vitro flat hippocampus preparation combined with a micro-machined array to map neural activity in ...

Bu prosedürün genel amacı, kemirgen hipokampusunun açılması ve düz doku preparatının penetran mikro elektrot dizisine yerleştirilmesi sürecini tanıtmaktır. Kayıt için. Bu, önce bir fare hipokampusunun beyninin yarısından izole edilmesiyle gerçekleştirilir.İkinci adım, hipokampusun kavisli yapısını özel yapım aletlerle ortaya çıkarmaktır. Daha sonra, katlanmamış hipokampus kayıt odasına aktarılır ve kayıt dizisine yerleştirilir. Son adım, deneyden sonra katlanmamış hipokampusu diziden çıkarmaktır.Sonuç olarak, nüfuz eden mikro elektrot dizisi tarafından kaydedilen nöral aktivite yayılımını göstermek için veri analizinde bireysel normalizasyon haritalama yöntemi kullanılır. Bu tekniğin temel avantajı, nöral aktiviteyi enine ve boyuna olmak üzere iki yönde kaydetmemize izin vermesidir. Nöral aktivitenin gerçek yayılımını görmek için, sağlam bir hipokampusa ihtiyacınız var, göçük kavanozlarını açın ve bir kayıt odasına düz bir şekilde uzanın ve yayılma daha sonra hem enine hem de boyuna yönlerde gerçekleşecektir.Ve daha sonra dokunun yayılma hızını anlayabildik. Biz her iki yönde de faaliyetteydik ve yayılma mekanizmalarını, özellikle de sinaptik olmayan mekanizmaları inceleyebildik. Bu sinaptik iletim ile yayılan aktiviteyi bu boşluk bağlantılarıyla görebildik ve hız nedeniyle, bunun difüzyon olmadığını biliyoruz.Şimdi bu yayılmanın gerçek mekanizmalarını çözmeye çalışıyoruz. Genel olarak, bu tekniğe yeni olan bireyler, hipokampusun açılması gibi zorlu prosedürler nedeniyle mücadele edecek ve düz doku preparatını, dokuya veya diziye zarar vermeden bu nüfuz eden mikro elektrot dizisine yerleştirecektir. Bu işleme başlamak için, fare kafasını buz gibi soğuk oksijenli sükroz içine yerleştirin.Bir BOS, kafatasının derisini çıkarmak için bir çift ince makas kullanır. Daha sonra, kafatasını orta hat boyunca ve temporal lobun yakınındaki iki ucu kesin. Ardından kesilen kafatasını başın yanlarına doğru soyun.Beyni açığa çıkarmak için, beyni spatula ile dikkatlice kafatasından çıkarın. Bundan sonra, beyni ıslak filtre kağıdı ile kaplı buz gibi soğuk bir cerrahi aşamaya yerleştirin. Beyincik'i buzla soğutulmuş bir bıçakla çıkarın.Daha sonra beynin orta hattını keserek iki yarım küreyi ayırın. Daha sonra iki ayrılmış yarım küreyi buz gibi soğuk sakarozla dolu bir behere yerleştirin. %95 oksijen, %5 karbondioksit ile köpürmüş bir BOSBir yarım küreyi filtre kağıdı ile kaplı buz gibi soğuk aşamaya aktarın. Ekstra çözeltiyi emmek için beynin etrafına normal kağıt havlular veya filtre kağıtları yerleştirin. Daha sonra, hipokampusu ortaya çıkarmak için korteksi beynin orta kısmından ayırmak için iki ateşle parlatılmış cam pipet kullanın.Daha sonra, dokuya iki ila üç damla buz gibi soğuk suse A BOS uygulayın ve fazla çözeltiyi çıkarın. Hipokampusun iki ucundaki korteks ile bağlantıları kesin. Daha sonra ateşle parlatılmış cam aletlerle hipokampusu beyinden çıkarın.Daha sonra, tüm hipokampusu, ous tarafı yukarı bakacak ve hipokampal sulkus aşağı bakacak şekilde ayırın: Dokuya tekrar iki ila üç damla buz gibi soğuk BOS'u hızla uygulayın ve etrafındaki fazla solüsyonu çıkarın. Ardından, tüm hipokampusu ters çevirmek için ateşle parlatılmış cam aletini kullanın. Sulkusu ortaya çıkarmak için, hipokampusun septal ve temporal uçlarını kesmek için buz gibi soğuk bir bıçak kullanın.Gerekirse, sulkusun içine özel yapım bir cam iğne sokun ve fiber yolunu DG'den yaklaşık üçe kadar kesin. Ardından DG'yi kenara çekmek ve hipokampusu açmak için metal bir tel halka kullanın. Tüm ameliyat süreci genellikle yaklaşık iki dakika sürer.Dokuya iki ila üç damla daha buz gibi soğuk sükroz A BOS uygulayın ve etrafındaki fazla solüsyonu çıkarın. Ardından, katlanmamış hipokampusun kenarlarını buz gibi soğuk bir bıçakla kesin. Preparatı, kayıt odasına aktarmadan önce bir saat boyunca normal A BOS ile doldurulmuş ve oda sıcaklığında %95 oksijen, %5 karbondioksit ile köpürtülmüş geri kazanım odasına aktarın.Bu prosedürde, bir şişeyi normal A BOS ile ve başka bir şişeyi dört AP A BOS balonu ile doldurun. %95 oksijen, %5 karbondioksit içeren çözeltiler deneylerin başından itibaren üretilmiştir. Bir deney sırasında hangi çözeltinin seçileceğini kontrol etmek için bir trivalf konektörü kullanın.Ardından, odanın çıkışına bir vakum tüpü bağlayın. Çözeltiyi bir toz haznesine çıkarmak için, çözeltiyi kayıt odasına vermeden önce boru hattını ısıtın ve 35 santigrat derece kontrollü sıcaklıkta tutun. Kayıt odasının giriş ve çıkışını kapattıktan sonra, katlanmamış hipokampusu kayıt odasına aktarmak için özel yapım bir cam pipet damlalığı kullanın.Mikroskop altında, katlanmamış hipokampusu, alvia tarafı aşağı bakacak şekilde, ca üç alan uzağa bakacak ve ca bir alan araştırmacıya doğru bakacak şekilde konumlandırın, kayıt odasının kenarından bir vakum pipeti kullanarak odadaki çözeltiyi dikkatlice aspire edin, oda kuruyana ve doku dizi üzerinde uzanana kadar. Ardından, katlanmamış hipokampusu dizi üzerinde tutmak için dokunun üzerine özel yapım bir doku ankrajını dikkatlice yerleştirin. Kayıt odasını birkaç damla çözelti ile doldurun.IV açma haznesinde akış hızını saniyede yaklaşık iki damlaya ayarlamak için girişi ve çıkışı kademeli olarak açın. Kayıt odasındaki dokuyu normal A BOS ile yaklaşık bir dakika inkübe edin. Ardından çözümleri değiştirin.Dört AP çözünmüş A BOS'a uygulayın ve akış hızını uygun şekilde ayarlayın. Dokuyu kayıttan önce yaklaşık beş ila 10 dakika boyunca dört AP çözünmüş A CS'de inkübe edin. Dokuyu PMEA'dan çıkarmak için, doku ankrajını bir mikro manipülatör ile kontrol edin ve ankrajı kayıt odasından kademeli olarak kaldırın.Akışı durdurmak için hem girişi hem de çıkışı kapatın. Kayıt odasında, dokunun köşesini kaldırmak için küçük bir boya fırçası kullanın. Doku çözelti içinde yüzmüyorsa, doku hala dizi üzerinde otururken odayı dikkatlice kurutmak için vakum tüpünü kullanın.Ardından, hazneyi kademeli olarak yeniden doldurmak için girişi dikkatlice açın ve akışı durdurmak için girişi kapatın. Kayıt haznesi dolduğunda, mendilin köşesini kaldırmak için küçük boya fırçasını kullanın. Yine. Doku çözelti içinde yüzüyorsa, dokuyu emmek için vakum tüpünü kullanın.Girişteki akışı ve çıkıştaki vakumu açın. Sistemi damıtılmış suyla yıkayın ve kurulayın. Bu, bazal dendritik bölgede bulunan mikro elektrotlardan birinden kaydedilen ve 34.9 desibellik bir sinyal-gürültü oranı olan 100 Mikromolar dört AP tarafından indüklenen spontan aktivitenin bir örneğidir.Ve işte kırmızı dikdörtgen içinde büyütülmüş aktiviteler. Bu, somata'ya daha yakın bulunan ve 27.2 desibellik bir sinyal-gürültü oranı gösterilen başka bir mikro elektrottan gelen ham verilerdir. İşte somatik tabaka içine yerleştirilmiş bir elektrottan elde edilen bir kaydın başka bir örneği.Bu örnekte, sinyal-gürültü oranı 18,53 desibeldir ve burada bir mikro elektrottan kaydedilen temel gürültü verilmiştir. Taban çizgisi genellikle 150 ila 200 mikrovolt arasında bir tepeden tepeye değere sahiptir ve tek bir elektrotun empedansı bir ila iki mega ohm civarındadır. Bu video, dizi ile kaydedilen ve daha sonra bireysel normalleştirme yöntemi kullanılarak işlenen nöral yayılımı gösterir.Veri analizinde, tüm doku boyunca tüm yayılma bu prosedürü takiben yaklaşık 100 milisaniye sürer. Nöro odakların hareketi gibi ek soruları cevaplamak için katlanmamış, hipokampus in vitu nörogörüntüleme gibi diğer yöntemler de gerçekleştirilebilir. Bu videoyu izledikten sonra, hipokampusun yerinde nasıl açılacağını, düz doku hazırlığının mikro ders dizisine nasıl açılacağını iyi anlamış olmalısınız.

neural-activity-propagation-an-unfolded-hippocampal-preparation-with

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

İzole hipokampi akut beyin kesitleri, hem de astrosit ve nöronların eşzamanlı elektrofizyolojik...

Akut Hipokampal Dilimler içinde Synaptically-uyarılmış astroglial ve Nöronal Cevaplarının İkili Elektrofizyolojik Kayıtlar

Bu video, katlanmamış bir hipokampustan nöral sinyalleri yakalamak için nüfuz eden bir mikroelektrot dizisi (PMEA) ile bir kayıt odası kurma prosedürünü gösterir. Bu yöntem, in vitro olarak katlanmamış hipokampus içindeki nöral aktivitenin yayılma hızını ve yönünü incelememizi sağlar.

Penetran Mikroelektrot Dizisi Kullanılarak Katlanmamış Hipokampal Dokunun Nöral Aktivitesinin Kaydedilmesi

Bu protokol, nöbete neden olan bir ilaca maruz kalan bir beyin dilimindeki elektriksel aktiviteyi kaydetmek için bir mikroelektrot dizisi (MEA) kullanmayı içerir. Prosedür, beyin diliminin bir MEA kayıt odasına yerleştirilmesini, yapay nöbetleri indüklemek için elektriksel stimülasyon uygulanmasını ve elde edilen sinyallerin analiz edilmesini içerir.

Mikroelektrot Dizileri Kullanılarak Beyin Dilimlerinde Nöbet ile İndüklenen Nöral Elektriksel Aktivitenin İzlenmesi

Bu video, sinaptik aktiviteyi kaydetmek için bir daldırma odasında bir beyin dilimi oluşturma prosedürünü göstermektedir. İşlem, dilimin lens kağıdına sabitlenmesini, nöronal canlılığı sağlamak için sürekli bir yapay beyin omurilik sıvısı (aCSF) akışının sürdürülmesini ve stimülasyonun ve kayıt elektrotlarının belirli bir beyin ilgi alanına göre doğru bir şekilde konumlandırılmasını içerir. Bu kurulum, temel sinaptik aktivitenin ve elektriksel stimülasyonun etkilerinin hassas bir şekilde...

Akut Hipokampal Dilimlerde Nöronal Alan Uyarıcı Postsinaptik Potansiyellerin Kaydedilmesi

Bu video, bir fare modelinin hipokampusuna bir tel elektrot dizisinin ve bir optik fiberin stereotaktik implantasyonunu göstermektedir.

Fare Hipokampusuna Bir Elektrot Dizisi ve Optik Fiber İmplante Edilmesi

Tek ünite elektrofizyolojik kayıtlar kullanılmak üzere microwires organize dizileri implante teknik sorunlar bir dizi sunuyor. Bu teknik ve gerekli ekipman yerine getirilmesi için yöntemler tarif edilmiştir. Ayrıca, yüksek uzaysal seçicilik ile farklı nöral altbölgeler kayıt örgütlü mikrotel dizilerin faydalı kullanımı tartışılmıştır.

Hayvanlar davranmak, Awake Tek-birim Recordings Microwires Organize Dizileri implantasyon için Usulü

Bu video makalesinde, kemirgenlerden alınan akut hipokampal dilimler kullanılarak CA1 piramidal nöronlarında sinaptik etiketleme, yakalama ve çapraz etiketleme gibi uzun vadeli plastisiteyi ve ilişkisel süreçlerini incelemek için deneysel prosedürler açıklanmaktadır.

Kemirgenler gelen akut Hipokampal Dilimleri kullanarak Synaptic Etiketleme / yakalama ve Çapraz yakalama İncelenmesi

4 aminopyridine uyarılan epileptiform aktivite kayıt ve elektrik modülasyon elektrot dizileri kullanma kemirgen beyin dilimler halinde gerçekleştirme göstermektedir. Özel kayıt odası doku canlılığı uzun süreli deneysel oturumları boyunca korur. Elektrot eşleme yaşamak ve uyarıcı çiftlerinin seçimi özel bir grafik kullanıcı arabirimi tarafından yapılmaktadır.

Kayıt ve modülasyon Epileptiform aktivite elektrot dizilerin birleştiğinde kemirgen beyin dilimleri içinde

Bu iletişim kuralı yerel alan potansiyelleri ile çoklu şaftlı doğrusal silikon sondalar kayıt açıklar. Geçerli kaynak yoğunluk analiz kullanarak sinyalleri dönüşüm yerel elektrik etkinlik yeniden inşası farenin hipokampus sağlar. Bu teknik ile dağınık şekilde kısıtlı beyin salınımlarını serbestçe fare hareket okudu olabilir.

Dağınık şekilde kayıt sınırlı salınım oluşur içinde fareler davranmak

Bu iletişim kuralı mikrosıvısal aygıtlarla çalışmak için nöronal kültürler iletimde Aksiyon potansiyeli vitro elektrot dizilerin nasıl göstermek amaçlamaktadır. Veri analizi, yani algılama ve karakterizasyonu Aksiyon potansiyelleri, yayma, gerçekleştirilen yeni bir kullanarak gelişmiş, henüz Kullanıcı dostu ve serbestçe kullanılabilir, hesaplama aracı.

Nöronal iletişim ve aksonal sinyal yayma çalışmak için elektrot dizileri ile ara yüz kullanımını Havacilik

Bu protokol, spontan keskin dalga dalgalanma aktivitesi sergileyen farelerden yatay hipokampal-entorhinal korteks (HEC) dilimlerinin hazırlanmasını açıklar. Dilimler basitleştirilmiş bir arayüz tutma odasında inkübe edilir ve kayıtlar, doku oksijenlenmesini ve ağ düzeyinde aktivitenin kendiliğinden ortaya çıkmasını teşvik etmek için hızlı akan yapay beyin omurilik sıvısı ile su altında koşullar altında gerçekleştirilir.

Spontan Hipokampal Ağ Aktivitesini Araştırmak için Akut Fare Beyin Dilimlemeyi

Keşfedin fare hipokampusunu açma ve penetrant mikro-elektrot dizisi üzerine yerleştirme yöntemini. Bu teknik, sinir aktivitesinin uzunlamasına ve enlemesine yönlendirmelerde eşzamanlı kaydını sağlar.

Bir Penetran Mikro-elektrot Array ile bir Kırımsız Hipokampal Hazırlık Sinir Faaliyet Yayılım

Daha fazla video keşfet