Davranış Tahliller için Boyama Böcekler: anestezi ve Çiftleşme Davranışı Drosophila

Bu prosedürün genel amacı, davranışsal deneylerde tanımlanmaları için böcekleri invaziv olmayan bir şekilde birbirlerinden gözle görülür şekilde farklı kılmaktır. Bu, ilk önce normal drosophila gıdasının yüzeyinin standart bir sinek şişesinde birkaç damla gıda boyası ile gözle görülür şekilde boyanmasıyla gerçekleştirilir. Daha sonra, sinekler şişeye üç saat boyunca eklenir, bu noktada drosophila'nın karnın güçlü bir rengini göstermesi gerekir.

Örneğin, dişilerin belirli bir renge boyanmış erkekleri daha çekici bulup bulmadığını gözlemlemek için çiftleşme deneyleri yapılabilir. Sonuç olarak, bu boya tekniği, kolay deneysel tanımlama için böcekleri etiketlemenin hızlı, basit ve invaziv olmayan bir yoludur. Bu tekniği kullanmanın, sineğin kanadının bir kısmını çıkarmak gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, daha hızlı, daha az invaziv olması ve sonraki davranışları etkileme olasılığının daha düşük olmasıdır.

Bu yöntem, bireyleri veya sinek sınıflarını tanımlamanın önemli olduğu çok çeşitli deneylerde yararlı olabilir. Ayrıca okullarda veya kolejlerde basit deneylerde kullanılabilecek kadar kolaydır. Bu tekniği gösteren, her ikisi de Liverpool Üniversitesi'nde doktora öğrencisi olan Rudy Verse Bo ve Chloe Hayes olacak Yiyecek çağrıldıktan ve katılaştıktan sonra, yiyeceğin üzerine 0,5 ila bir mililitre mavi gıda boyası ekleyerek başlayın, boyayı şişenin tüm yüzeyine yayın.

Daha sonra, diyetin gıdanın üst tabakası tarafından emilmesine izin vermek için yiyeceği iki gün boyunca dört santigrat derecede saklayın. Daha sonra, deneyin ihtiyaçlarına göre sinekleri yiyeceğin üzerine aktarın. Bir gün içinde, diyet sinekleri, boyalı sineklerle bir çiftleşme denemesi yapmak için boyanmamış sineklerden kolayca ayırt edilebilir.

Tek tek bakire erkekleri 20 mililitre yiyecek içeren standart 75 x 20 milimetrelik plastik şişelere aktarmak için bir aspiratör kullanın. İki erkek çiftleşme denemesi yapıyorsanız, her tedavi grubundaki erkeklerin yarısını renkli yiyecekler içeren şişelere yerleştirin. Daha sonra, yeni çıkan dişileri 10'lu gruplar halinde taze gıda şişelerine aktarın.

Şimdi her iki cinsiyetin de türler için uygun sıcaklıkta çiftleşme yaşına kadar olgunlaşmasına izin verin. Drosophila hazır olduğunda, deney erkeklerini istenen tedaviye maruz bırakın. Örneğin, diğer sinekler karbondioksit ile uyuşturuluyor ve denemeden bir gün önce sineklerin hem tedavisini hem de renk durumunu belirlemek için şişeleri etiketliyor.

Sinekleri çiftleşme şişesine alıştırmak için dişileri 20 mililitre yiyecek içeren ayrı şişelere taşıyın ve deneyi kör etmek için şişeleri nötr etiketlerle etiketleyin. Daha sonra, tek bir dişi sinek içeren her çiftleşme şişesine bir veya iki erkek sinek ekleyin. Uygun şekilde.

İki erkek çiftleşme denemesi için kuluçka makinesinde yanan ışıklarla aynı zamana denk gelecek şekilde çiftleşme denemesine başlayın. Her erkeğin farklı bir tedaviden olmasına ve bir sineğin karın lekelenmesi göstermesine dikkat edin. Her erkek sineğin tedavisini ve renklendirmesini kaydedin.

Çiftleşme iki saat içinde gerçekleşirse, tek erkek çiftleşme denemeleri için çiftleşen erkeğin zar durumunu kaydedin. Çiftleşmenin başladığı ve durduğu zamanı kaydedin. Ardından, deneme için eşleşme başarısı, gecikme süresi ve süre verilerini hesaplayın.

Karbondioksitin etkisindeki değişimi açıklamak için bulunan en iyi model. Anestezi, bir faktör olarak türleri içerir. Örneğin, bu temsili deneylerde, karbondioksit anestezisi drosophila'nın çiftleşme başarısı üzerinde önemli bir etki göstermedi.

Drosophila melanogaster için yapılan iki erkek denemede psödofil obscure ve drosophila sub obscure sinekler, bununla birlikte, drosophila melanogaster toplama sırasında veya denemelerden bir gün önce gaza maruz kaldığında daha da büyük bir etki ile karbondioksit anestezisine maruz kalan erkekler için önemli ölçüde daha düşük bir çiftleşme başarısı gözlenmiştir. Üç türün hiçbiri için gıda rengindeki sineklerde çiftleşmede önemli bir fark gözlenmedi ve tek çiftleşme denemelerinde analize veya böceklerin çiftleşme durumuna muamele dahil edilmedi. Çiftleşmede fark yok.

Yakın zamanda ortaya çıkan yetişkinleri toplamak için karbondioksit anestezisi kullanıldığında üç türden herhangi biri için gecikme gözlendi. Çiftleşme süresi üzerinde bir etki, çiftleşme denemelerinden iki gün önce karbondioksite maruz kaldıklarında sadece drosophila alt belirsiz sinekler tarafından sergilendi. Bu videoyu izledikten sonra, deneyleriniz sırasında sineklerinizi etiketlemek için bağırsak boyamanın invaziv olmayan bir teknik olarak nasıl kullanılacağı konusunda iyi bir fikre sahip olmalısınız.

Bu prosedürü denerken, ilgilenilen boyanın odak türünüz üzerindeki herhangi bir etkisini test etmek önemlidir. Bazı boyalar toksik olabilir ve bazı renkler çiftleşme başarısını doğrudan etkileyebilir. Örneğin, bazı türlerde kırmızı gıda boyası tercih edilebilir.

Burada, rekabetçi çiftleşme denemelerinde sinekleri ayırt etmek için bu boya tekniğini kullandık. Bununla birlikte, saldırganlık, bölgesel savunma, gıda tercihi aktivitesi veya sosyal davranışları değerlendirmek için yapılan tahliller gibi sineklerin bireysel olarak tanımlanması gereken çeşitli başka deneylerde de kullanılabilir.