Name: Kemirgen Retina ve Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullamanın Koruyucu Etkileri Fonksiyonu Değerlendirmek Üzere elektroretinogram kullanma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 34 s
Description: Öğrenin, kemirgenlerde elektroretinogram kullanarak retina fonksiyonunu değerlendirmeyi ve uzaktan iskemik önkoşullamanın ışık kaynaklı stres sonrası nöroprotektif etkilerini incelemeyi. Bu yöntem görsel fonksiyon bozukluklarının araştırılmasında kritik öneme sahiptir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar kemirgen izleme, işleme ve deney Bayan Sharon Spana yardımı için müteşekkiriz. Doktora finansman desteği Vizyon Mükemmellik University of Sydney ve Avustralya Araştırma Merkezi tarafından sağlanmıştır.

Bu protokol University of Sydney hayvan bakım kurallarına uyar. 1. Yapımı elektrotlar <ol><li> Pozitif elektrot platin tel çapı 1-2 mm kısa (5 cm) uzunluğu (kornea irtibata geçecektir biri) Construct. Bir döngü içine çapında bir kaç mm o moda. Senin amplifikatör giriş aşamaya ulaşmak için yeterince uzun bir geleneksel kurşun bu döngü bağlayın (Şekil 4). </li><li> Bir Ag / AgCl de kongre kablosuna bağlı çapı 1-2 mm, pelet kullanılarak (hayvanın ağzına gidecek) negatif elektrot Construct (Şekil 4). </li><li> (Hayvanın kıç girecek) referans elektrot, aynı zamanda uygun uzunlukta bir kurşun bağlanmış temiz derialtı iğne (23 G) kullanmak gibi (Şekil 4). </li><li> İdeal olarak, (pozitif U üç elektrotları bağlamak için, cihaz üreticileri tarafından sağlanan üç kurşun kablolar kullanın94; Kornea, negatif → ağız, amplifikatör kıç → referans). </li></ol> Işık Stimulus ve ERG Set-up 2. Bağlantı ve Kalibrasyon <ol><li> Karanlık yapılabilir küçük bir kayıt laboratuvarı, oluşturun (veya bulmak). Kırmızı yapılan over-the-tezgah ışık veya kırmızı kafa lambasının ya da her ikisi ile donatın. </li><li> 1 lux geçmemesi kurulum sırasında sıçan göz ulaşan kırmızı ışık aydınlık onaylamak için bir lüks metre kullanın. Not: Bir nötral yoğunluk filtresi lamba parlaklığını azaltmak için kullanılabilir ve lamba ışık kaynağı, özellikle kırmızı ışık yayarlar gerekir. Işık kaynakları düşük (görünür) dalga boylarını yayan eğer karanlık adaptasyonu tehlikeye olacak. </li><li> (Bu genellikle şeffaf bant ile sebat gerektirir) kayıt laboratuvarı giren tüm sokak ışık kapatmak ve üzerinde sığacak kadar büyük ve o kadar loş bir nötral yoğunluk filtresi (bu yaprak satın alınabilir) hazırlamak, herhangi bir bilgisayar ekranı içinde olacak laboratuvar. Not: Kaçak ışık veBir ekranın ışık sıçan gözün karanlık adaptasyonu halel için yeterlidir. </li><li> Veri toplama donanımına amplifikatörü bağlayın. Amplifikatöre pozitif, negatif ve referans uçlarını bağlayın. Bilgisayar ve LED Ganzfeld güç kaynağı ünitesi güvenli bir zemin kaynağına bağlı olduğundan emin olun. Not: Bazı laboratuvarlar bina toprağa bağlı, topraklama noktaları uzman var; Bir su borusu etkili bir alternatiftir. </li><li> Bir araştırma kalitesinde Radyometresiz LED ışık kaynağı ayarlayın. Hayvanın gözü bir deney sırasında yer alacak hangi pozisyonda metrenin sensörünü sabitleyin. </li><li> Ganzfeld LED&#39;ler yanıp söner arasındaki flaş enerji, flaş süresi, flaş tekrarı ve zaman içinde adım adım artışlar tam saha ERG protokolünü çalıştırmak Program, interstimuls aralığı (ISI), ayarlar olarak adlandırılan. Bir örnek tam saha protokolü için bakınız Tablo 1. Not: ERG yanıp söner tekrarlayan loş yanıp söner yükselecek tam saha bBir adım akıllıca bir şekilde doğru yanıp söner. ikiz Flash program tam saha protokolü üzerinde izler ve çubuk ve koni yanıtları izolasyonunu sağlar. </li></ol> ERG Deney 3. Gün önce <ol><li> Karanlık kaydetmeden önce 12 saat Sprague-Dawley sıçanları adapte. Bu kaçak ışık ortadan edildikten sonra, kayıt laboratuvarda bunu yapmak uygundur. </li></ol> ERG Deney 4. Gün <ol><li> Hayvan kayıt sırasında hafifçe ısıtılır olabilmesi için düzenleyin. Biz hayvanın kafası Ganzfeld girişinde doğru noktada dinlenme böylece inşa hafif metal platformu kullanmak. platform, bir su banyosu içinde 40 ° C&#39;ye ısıtılmış su pompası içinden dahili boru vardır. Not: Deneyim bu 37 ° C&#39;de hayvanın çekirdek sıcaklığını korur olduğunu göstermektedir. </li><li> Karanlık koşullarda sıçan tartılır. Telaffuz ağırlığı ve doğru ketamin (60 mg / kg) ve ksilazin oluşturan (5 mg / kg) dozda. Sıçan gen dizginlemektly ve intraperitoneal anestezik enjekte. </li><li> Enjeksiyon zamanı not edin. Hayvan bilinçsiz sonra (genellikle 5 dakika içinde) hafifçe bir refleks yanıtı mevcut olup olmadığını görmek için, tek ayak pedi kısma anestezi derinliğini kontrol edin. Bu refleks geçmeden önce, yok ya da zayıf olana kadar beklemek en iyisidir. </li><li> Korneaya proxmethacaine tek atropin damla ve başka uygulayın. </li><li> Siyah iplik 10 cm uzunluğunda kesin. Basit bir düğüm ile bir döngü yapın ve göz ekvator üzerinde döngü kayma. Hafifçe sıkın; etkisi minimum basınç, hafif öne göz küresinin çekmektir. Bu göz kapaklarında net kornea tutar. </li><li> Uygula karbomer göz kornea yüzeyine düşer. Emin Karbomer kornea yüzeyinde kalır ve göz kapakları veya yüz dökülmemesine değildir. </li><li> Isıtmalı platformun üstüne emici yatak yerleştirin. </li><li> Ganzfeld açılışında önerilen yerde baş yatak üzerinde Pozisyonu sıçan. </li><li> Ekle intrektum içine ernal ısı probu. Kuyruk prob kablosunu bantlama pozisyon Güvenli ısı probu. </li><li> Subkutan arka bacak içine referans elektrodu (23 G iğne) yerleştirin ve amplifikatör bağlanın. </li><li> Güvenli ağızda negatif elektrot (Ag / AgCl pelet) yerleştirin. Bu ağız kaymasını önlemek için, sabit bir yüzeye bağlanarak kurşun yapıştırın. </li><li> Korneanın merkezi üzerinde pozitif elektrot yerleştirin. Bir mikromanipülatör kullanarak, elektrot hafifçe kornea dokunur emin olun. </li><li> 37.5 ° C - Kontrol vücut ısısı 37.0 yer almaktadır. </li><li> Hayvan düzgün yerleştirilmiş ve elektrotlar yerdesiniz sonra, opak malzeme ile tüm kurulum (Ganzfeld ve hayvan) asmak (karanlık adaptasyonu korumak için). Biz yumuşak siyah bir bez kullanın. </li><li> Ön toplama örnekleme 5 milisaniye ile 100-1000 msn koleksiyonu zaman 2 KHz örnekleme hızında ayarlanmış edinme yazılımında. 1-1,000 bant geçiren filtreler ayarlayınHz ve bu örnekleme sağlamak bir flaş aşağıdaki ~ 250 msn dönemini örnek tetiklenir. </li><li> Kayıt taban çizgisini kontrol edin. Bu gereksiz gürültü özgür olmak, ancak bazı amplifikatör gürültü ve solunum salınım göstermesi gerekir. </li><li> Bazal gereksiz gürültüyü gösteriyorsa, sorun giderme başlar. Çoğu problem elektrot pozisyonu veya topraklama kaymaya ilişkilidir. Kayıtlar gereksiz gürültü serbest olmasını sağlamak için bir Faraday kafesi kullanın. </li><li> Bir test flaş, 0.4 günlük scot cd.sm -2 çalıştırın. Benzer bir ERG dalga 2A görünmelidir Şekil. 0.4 günlük scot cd.sm -2 flaş laboratuvar tipik tepkiler (: -474 ± 39 mV ve b-dalgası: a-dalgası 1,512 ± 160 mV, n = 11) &#39;dir. </li><li> Karanlık hayvan 10 dakika süreyle yeniden adapte izin verin. Bu taban çizgisini yeniden kontrol etmek, bu 10 dakika kullanmak daha uygun olur. </li><li> Istikrarlı sinyal aşağıdaki onay kaydı başlar. </li><li> Kayıt oturumun sonunda, vücut temperat kontrolURE muhafaza edilmiştir. Elektrotları çıkarın. Kornealara karbomer polimer yeniden uygulayın. Hayvan konut dönmeden önce, tamamen mobil ve aktif olana kadar hayvan bir ısı pad üzerinde kurtarmak için izin verin. </li></ol> 5. Uzaktan İskemi <ol><li> Uyanık veya anesteziye kemirgenlerde ya uzaktan iskemi gerçekleştirin. </li><li> Hayvan anestezi ise, (yukarıda) ısıtılmış bir platform üzerine yattı ve diz net arka ekstremite, üst kısmı üzerinde tansiyon aleti Kolluğu kayma. </li><li> Hayvanlar işlenen için kullanılırsa, anestezi olmadan bu yordamı gerçekleştirmek mümkündür; Bu iki kişi gerekir. Bir kişi hafifçe hayvan kısıtlayan ve ikinci tansiyon aleti manşeti uygular ve sfingomanometre çalışır. </li><li> Uyanık hayvanlar için, yavaşça tek hindlimb ücretsiz, hayvan sarmak için havlu bir parça ~ 15 cm x 30-50 cm kullanın. Merkez sahibinin kol ve gövde, ve yeri arasında sıkışmış olan, sol önkol (diyelim ki) onun sırtında hayvan LayManşet tıpkı nitelendirdi. </li><li> Manşeti Deflate ve hava basınç valfi kapalı olduğundan emin olun. Narkoz hayvanlarda 160 mmHg manşeti Pompa ve uyanık hayvanlarda 180 mmHg. Bu sistolik basıncı (genellikle 140 mmHg ve 160 mmHg sırasıyla) aşıyor. </li><li> El pompası kullanılarak, gerektiğinde bu baskıları koruyun. </li><li> Iskemi için planlanan bir süre sonra (biz 5 dk reperfüzyon ile ayrılmış, 5 dakika 2 dönemleri kullanın), hava basınç valfi gevşeterek manşet basıncını Söndür. </li><li> Footpad bağlı bir cilt sıcaklık probu ile uzaktan iskemi etkisini onaylayın. Cilt sıcaklığı tipik olarak 5 dakika boyunca, 32-30 ° C&#39;ye düşer ve reperfüzyon kurtarır. </li></ol> 6. Işık Hasar <ol><li> Sıçanlar koyu adapte gecede, önce hafif hasar prosedüründe olduğundan emin olun. </li><li> (Gecikmeden bizim deneylerde) ekstremite iskemi aşağıdaki uygun zamanda, her bir hayvan, bir pleksiglas kutular, wi içine tek başına yerleştirilirzemin tabanlı kaplarda inci su ve gıda. Not: Işık kaynaklı hasar sadece albino hayvanlarda yapılabilir. </li><li> Standart bir süre (genellikle 09:00) bir önceden kalibre 1,000 lux beyaz ışık açın ve 24 saat süreyle bu durumu korumak. </li></ol> 7. ERG Veri çıkarımı ve Analizi <ol><li> ERG ortalama dalga formları edinin. Çıkarma ile sıfır olmayan bir taban için, gerekirse ayarlanır. </li><li> Başlangıç ​​ve birinci arasındaki gerilim farkı olarak, (yüksek uyaran yoğunluklarına orta ve sunulan) a dalgasının genlik ölçün (&lt;30 msn gecikme) oluk (Şekil 1). </li><li> Tipik 80-100 msn (Şekil 1) bir gecikme meydana gelen bir dalgasının tepe ve şu dalganın pozitif arasındaki gerilim farkı olarak b-dalgası genliği ölçün. </li><li> 90 Hz geçiş bandı ile, 60-235 Hz verileri süzmek için bir dönüşüm Fourier kullanarak osilatör potansiyelleri izole edin <sup&gt; 7. Gerekli izole salınımlı bir potansiyel sinyal daha sonra filtresiz dalga çıkarılır olabilir Bir dalga çukur kimliğini doğrulamak için. </li><li> a- ve b-dalgası zirveleri örtülü süresi (gecikme) da yararlı bir tedbir (Şekil 1) olabilir. Çubuk yanıtı izole etmek için ikiz yanıp kullanın. Karışık tepki (flaş 1) çubuk tepkisini izole etmek (Şekil 2) koni yanıt (flaş 2) çıkarın. </li><li> Bireysel ışık yoğunluğu bir dalga ve b-dalgası genlikleri (tedavi sonrası / post-tedavi-bazal) Normale veya tedavi grupları için ortalama. Yoğunluk-yanıt eğrileri flaş enerjiye karşı grup genlikleri ve hatayı arsa. </li></ol>

<ol><li>Arden, G. B., Heckenlively, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArden%2C+GB+%22Principles+and+practice+of+clinical+electrophysiology+of+vision%22">Principles and practice of clinical electrophysiology of vision</a>. , MIT Press. 139-183 (2006).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology-London%22%5BJournal%5D)">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> Journal of Physiology-London. 555 (1), 153-173 (2004).</li>
<li>Fortune, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+ganglion+cell+functional+loss+in+rats+with+experimental+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Selective ganglion cell functional loss in rats with experimental glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45 (6), 1854-1862 (2004).</li>
<li>Alarcon-Martinez, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+and+long+term+axotomy-induced+ERG+changes+in+albino+and+pigmented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Vision%22%5BJournal%5D)">Short and long term axotomy-induced ERG changes in albino and pigmented rats.</a> Molecular Vision. 15 (254-255), 2373-2383 (2009).</li>
<li>Lyubarsky, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functionally+rodless+mice%3A+transgenic+models+for+the+investigation+of+cone+function+in+retinal+disease+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">Functionally rodless mice: transgenic models for the investigation of cone function in retinal disease and therapy.</a> Vision Research. 42 (4), 401-415 (2002).</li>
<li>Bush, R. A., Sieving, P. A. A PROXIMAL RETINAL COMPONENT IN THE PRIMATE PHOTOPIC ERG A-WAVE. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 35 (2), 635-645 (1994).</li>
<li>Liu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+electroretinographic+oscillatory+potentials+in+normal+and+ROP+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Development of the electroretinographic oscillatory potentials in normal and ROP rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 47 (12), 5447-5452 (2006).</li>
<li>Casson, R. J., Wood, J. P. M., Melena, J., Chidlow, G., Osborne, N. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+ischemic+preconditioning+on+light-induced+photoreceptor+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The effect of ischemic preconditioning on light-induced photoreceptor injury.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44 (3), 1348-1354 (2003).</li>
<li>Lawson, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aerobic+Exercise+Protects+Retinal+Function+and+Structure+from+Light-Induced+Retinal+Degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Aerobic Exercise Protects Retinal Function and Structure from Light-Induced Retinal Degeneration.</a> Journal of Neuroscience. 34 (7), 2406-2412 (2014).</li>
<li>Grimm, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1-induced+erythropoietin+in+the+hypoxic+retina+protects+against+light-induced+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">HIF-1-induced erythropoietin in the hypoxic retina protects against light-induced retinal degeneration.</a> Nature Medicine. 8 (7), 718-724 (2002).</li>
<li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+electroretinography%3A+Methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Rodent electroretinography: Methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 27 (1), 1-44 (2008).</li>
<li>Bayer, A. U., Cook, P., Brodie, S. E., Maag, K. P., Mittag, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+different+recording+parameters+to+establish+a+standard+for+flash+electroretinography+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">Evaluation of different recording parameters to establish a standard for flash electroretinography in rodents.</a> Vision Research. 41 (17), 2173-2185 (2001).</li>
<li>Pugh, E. N., Lamb, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AMPLIFICATION+AND+KINETICS+OF+THE+ACTIVATION+STEPS+IN+PHOTOTRANSDUCTION%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+Et+Biophysica+Acta%22%5BJournal%5D)">AMPLIFICATION AND KINETICS OF THE ACTIVATION STEPS IN PHOTOTRANSDUCTION.</a> Biochimica Et Biophysica Acta. 1141 (2-3), 111-149 (1993).</li>
<li>Breton, M. E., Schueller, A. W., Lamb, T. D., Pugh, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ANALYSIS+OF+ERG+A-WAVE+AMPLIFICATION+AND+KINETICS+IN+TERMS+OF+THE+G-PROTEIN+CASCADE+OF+PHOTOTRANSDUCTION%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">ANALYSIS OF ERG A-WAVE AMPLIFICATION AND KINETICS IN TERMS OF THE G-PROTEIN CASCADE OF PHOTOTRANSDUCTION.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 35 (1), 295-309 (1994).</li>
<li>Mizota, A., Adachi-Usami, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+body+temperature+on+electroretinogram+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Effect of body temperature on electroretinogram of mice.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 43 (12), 3754-3757 (2002).</li>
<li>Szabo-Salfay, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+electroretinogram+and+visual+evoked+potential+of+freely+moving+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">The electroretinogram and visual evoked potential of freely moving rats.</a> Brain Research Bulletin. 56 (1), 7-14 (2001).</li>
<li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conscious+Wireless+Electroretinogram+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">Conscious Wireless Electroretinogram and Visual Evoked Potentials in Rats.</a> Plos One. 8 (9), (2013).</li>
<li>Galambos, R., Juhasz, G., Kekesi, A. K., Nyitrai, G., Szilagyi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NATURAL+SLEEP+MODIFIES+THE+RAT+ELECTRORETINOGRAM%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">NATURAL SLEEP MODIFIES THE RAT ELECTRORETINOGRAM.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91 (11), 5153-5157 (1994).</li>
<li>Galambos, R., Szabo-Salfay, O., Szatmar, E., Szilagyi, N., Juhasz, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+modifies+retinal+ganglion+cell+responses+in+the+normal+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Sleep modifies retinal ganglion cell responses in the normal rat.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 98 (4), 2083-2088 (2001).</li>
<li>Guarino, I., Loizzo, S., Lopez, L., Fadda, A., Loizzo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+chronic+implant+to+record+electroretinogram%2C+visual+evoked+potentials+and+oscillatory+potentials+in+awake%2C+freely+moving+rats+for+pharmacological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plasticity%22%5BJournal%5D)">A chronic implant to record electroretinogram, visual evoked potentials and oscillatory potentials in awake, freely moving rats for pharmacological studies.</a> Neural Plasticity. 11 (3-4), 241-250 (2004).</li>
<li>Huang, J. C., Salt, T. E., Voaden, M. J., Marshall, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NON-COMPETITIVE+NMDA-RECEPTOR+ANTAGONISTS+AND+ANOXIC+DEGENERATION+OF+THE+ERG+B-WAVE+IN-VITRO%5BTitle%5D)+AND+%22Eye+%28London%29%22%5BJournal%5D)">NON-COMPETITIVE NMDA-RECEPTOR ANTAGONISTS AND ANOXIC DEGENERATION OF THE ERG B-WAVE IN-VITRO.</a> Eye (London). 5 (4), 476-480 (1991).</li>
<li>Sasovetz, D. KETAMINE HYDROCHLORIDE - EFFECTIVE GENERAL ANESTHETIC FOR USE IN ELECTRORETINOGRAPHY. Annals of Ophthalmology. 10 (11), 1510-1514 (1978).</li>
<li>Mojumder, D. K., Wensel, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+Mydriatics+Affect+Light-Evoked+Retinal+Responses+in+Anesthetized+Mice%29%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Topical Mydriatics Affect Light-Evoked Retinal Responses in Anesthetized Mice).</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 51 (1), 567-576 (2010).</li>
<li>Fraunfel, F. t, Burns, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACUTE+REVERSIBLE+LENS+OPACITY+-+CAUSED+BY+DRUGS%2C+COLD%2C+ANOXIA%2C+ASPHYXIA%2C+STRESS%2C+DEATH+AND+DEHYDRATION%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">ACUTE REVERSIBLE LENS OPACITY - CAUSED BY DRUGS, COLD, ANOXIA, ASPHYXIA, STRESS, DEATH AND DEHYDRATION.</a> Experimental Eye Research. 10 (1), 19(1970).</li>
<li>Calderone, L., Grimes, P., Shalev, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACUTE+REVERSIBLE+CATARACT+INDUCED+BY+XYLAZINE+AND+BY+KETAMINE-XYLAZINE+ANESTHESIA+IN+RATS+AND+MICE%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">ACUTE REVERSIBLE CATARACT INDUCED BY XYLAZINE AND BY KETAMINE-XYLAZINE ANESTHESIA IN RATS AND MICE.</a> Experimental Eye Research. 42 (4), 331-337 (1986).</li>
<li>Behn, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dark+adaptation+is+faster+in+pigmented+than+albino+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Dark adaptation is faster in pigmented than albino rats.</a> Documenta Ophthalmologica. 106 (2), 153-159 (2003).</li>
<li>Sugawara, T., Sieving, P. A., Bush, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+relationship+of+the+scotopic+and+photopic+ERG+to+photoreceptor+cell+loss+in+light+damaged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Quantitative relationship of the scotopic and photopic ERG to photoreceptor cell loss in light damaged rats.</a> Experimental Eye Research. 70 (5), 693-705 (2000).</li>
<li>Machida, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((P23H+rhodopsin+transgenic+rat%3A+Correlation+of+retinal+function+with+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">P23H rhodopsin transgenic rat: Correlation of retinal function with histopathology.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41 (10), 3200-3209 (2000).</li>
<li>Brandli, A., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+Ischemia+Influences+the+Responsiveness+of+the+Retina%5BTitle%5D)+AND+%22Observations+in+the+Rat.+Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Remote Ischemia Influences the Responsiveness of the Retina.</a> Observations in the Rat. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 55 (4), 2088-2096 (2014).</li>
<li>Maccarone, R., Di Marco, S., Bisti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saffron+supplement+maintains+morphology+and+function+after+exposure+to+damaging+light+in+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Saffron supplement maintains morphology and function after exposure to damaging light in mammalian retina.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 49 (3), 1254-1261 (2008).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+abnormal+rod+photoreceptor+activity+with+the+a-wave+of+the+electroretinogram%3A+Applications+and+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Assessing abnormal rod photoreceptor activity with the a-wave of the electroretinogram: Applications and methods.</a> Documenta Ophthalmologica. 92 (4), 253-267 (1996).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 39, 1-22 (2014).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+COMPUTATIONAL+MODEL+OF+THE+AMPLITUDE+AND+IMPLICIT+TIME+OF+THE+B-WAVE+OF+THE+HUMAN+ERG%5BTitle%5D)+AND+%22Visual+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A COMPUTATIONAL MODEL OF THE AMPLITUDE AND IMPLICIT TIME OF THE B-WAVE OF THE HUMAN ERG.</a> Visual Neuroscience. 8 (2), 107-126 (1992).</li>
<li>Wachtmeister, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oscillatory+potentials+in+the+retina%3A+what+do+they+reveal%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Oscillatory potentials in the retina: what do they reveal.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 17 (4), 485-521 (1998).</li>
</ol>

Jonathan Stone CSCM Pty Ltd direktörü

Yukarıda tarif edilen koyu adapte flaş ERG yöntemi sıçanlarda retina fonksiyonlarını değerlendirmek için güvenilir bir yöntemdir. A-dalgası ve b-dalgası Hem hafif hasar azaltılmıştır. Uzaktan iskemik önkoşullama a-dalgası ve b dalga ışık hasar kaynaklı azalmalar hafifletilmiş. Retina fonksiyonunun Bu muhafaza uzak iskemik önkoşullama gibi hipoksi, iskemi ve egzersiz 8-10 gibi koruyucu önkoşullama diğer formları andıran, nöro kaynaklı olduğunu göstermektedir. Kayıt kurulumu, ışık uyaran parametreleri ve hayvan...

ERG ışığa karşılık olarak retina tarafından oluşturulur ve gözün korneal yüzeyi kaydedilen bir elektrik potansiyeli. Kayıt koşulları dikkatle idare edildiğinde, ERG retina fonksiyonunu değerlendirmek için çeşitli şekillerde kullanılabilir. İşte biz &#39;flaş ERG&#39;, retina, bir Ganzfeld arka planda sunulan kısa, parlak flaş maruz kaldığında oluşan potansiyeli kaydetmek nasıl tarif. Ganzfeld homojen ışık dağıtır ve ışık flaş yaklaşık eşit bütün retina ulaşır. Retina kaydetmeden önce koyu adapte edilir ve hayvan kayıt için hazırlanmış gibi koyu adaptasyonu devam edilirse, ERG hem çubuk ve koni fotoreseptör tarafından oluşturulan aldı. koyu adapte flaş ERG iki şekilde analiz edilmiştir karakteristik dalga biçimi vardır. İlk olarak, ERG, dalga biçiminin, erken ve geç bileşenleri ayırt ve nöron sekansına ilişkilendirilmiştirretina al aktivasyonu. erken bileşen kısa gecikme negatif gidiş potansiyel bir dalga (Şekil 1). Bu olumlu bir gidiş potansiyeli takip ediyor, b- dalgası olarak adlandırılan. b- dalga yükselen aşaması ayrı bir bileşen (osilatör potansiyelleri veya OP) olarak kabul edilir salınımları göstermektedir. a-dalgası fotoreseptör tarafından oluşturulan olarak kabul edilir, amacrine hücreleri 1 ile iç nükleer tabaka hücreleri ve ops b-dalgası. Uyarıcı gücüne dayalı, çok loş flaşlar tepkiler skotopik eşik tepkisi mümkündür adlandırılan. skotopik sınır tepkisi, retinal bez hücrelerin 2-4 elde edilmesi anlaşılmalıdır. İkincisi, flaş ERG ışık adaptasyon ile ayrılabilir veya bir iki flaş protokolü tarafından çubuk ve koni odaklı bileşenleri içine, aşağıda anlatılan. Fotopik koşullar altında, koni nüfusu düşük olduğu için dalga, sıçanlarda değil saptanabilir, ancak Operasyonel ve b-dalgası5 açık. Kimin retinalar yüksek koni nüfusa sahip primatlar, olarak, çubuk ve koni yollar hem saptanabilir bir dalga 6 üretir. Genellikle flaş ERG çıkarılan iki yararlı önlemler fotoreseptör nüfusu zarar verici parlak maruz bırakılarak, örneğin azalır, Şekil 2&#39;de gösterilen tipik bir flaş yanıtları. Şekil 1 &#39;deki gibi ölçülür A ve B amplitüdü, Hangi Işık, ERG tüm bileşenleri azalır. Gibi uzak iskemik önkoşullama (RIP) olarak nöroprotektif müdahaleler, a- b-dalgaları (Şekil 3) genliklerinin korunması ile doğrulanabilir. Özetle, ERG analizi hasarlı sağlıklı, hafif ve neuroprotected retina arasındaki karşılaştırmalar sağlar.

<table><tbody><tr><td>PC bilgisayar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Powerlab, 4 kanal satın alma donanımı</td><td>AD Instruments</td><td>PL 35044</td><td>ERG Animal</td></tr><tr><td>Bio Amp</td><td>AD Instruments'ın</td> Satın Alınması <td>FE 136</td><td>ERG için Amplifikatör</td></tr><tr><td>Lab şeması</td><td>AD Instruments</td><td></td><td>Sinyal toplama yazılımı</td></tr><tr><td>Ganzfield</td><td>Fotometrik çözümler</td><td>FS-250A</td><td>Işık uyaranı</td></tr><tr><td>Ganzfield işletim sistemi Fotometrik</td><td>çözümler</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Araştırma Radiometer</td><td>Uluslararası ışık teknolojileri</td><td>ILT-1700</td><td>kalibre ışık serisi</td></tr><tr><td>Lux metre</td><td></td><td>LX-1010B</td><td>kırmızı ışık aydınlatmasını kontrol et</td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kurşun teller</td><td>AD Instruments</td><td></td><td>Connect pozitif, negatif amplifikatöre toprak elektrotları</td></tr><tr><td>Kurşun teller - timsah</td><td>AD Instruments</td><td></td><td>topraklama ganzfield ve bilgisayara satın alma donanımı</td></tr><tr><td>Platin tel %95</td> <td>A& E metaller</td><td></td><td>pozitif elektrot</td></tr><tr><td>Ağız elektrodu Ag / AgCl Pelet</td><td>SDR</td><td>E205</td><td>negatif elektod</td></tr><tr><td>26 G iğne</td><td>BD</td><td></td><td>toprak elektrot</td></tr><tr><td>Su pompası</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Su banyosu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tüp</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Esnek problu homeotermik battaniye sistemi</td><td>Harvard Appartus</td><td>507222F</td><td></td></tr><tr><td>Atropin %1 w/v</td><td>Bausch & Lomb</td><td></td><td>topikal midriyazis</td></tr><tr><td>Prokmethycaine% 0.5 w / v</td><td>Bausch & Lomb</td><td></td>, <td>topikal anestezik</td></tr>, <tr><td>Visco, gözyaşı, göz damlası</td><td>, Novartis</td><td>karbomer</td>, <td></td> polimer</tr><tr><td>, İplik</td><td></td><td></td><td>, geri çekme, göz kapağı</td></tr>, <tr><td>Cımbız,</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yeniden kullanılabilir yapıştırıcı</td>, <td>Blu tac</td><td></td>, <td>Loş kırmızı far. Elektrotları yapıştırın</td></tr><tr><td>Emici yatak</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ketamil - ketamin 100 mg/ml - 50 ml</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>dissosiyatif</td></tr><tr><td>Ksilyum - Ksilazin 100 mg/ml - 50 ml</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>kas gevşetici</td></tr><tr><td>ölçek</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

kemirgen retina ve uzaktan ekstremite İskemik Önkoşullamanın koruyucu etkileri fonksiyonu değerlendirmek Üzere elektroretinogram kullanma

Using the Electroretinogram to Assess Function in the Rodent Retina and the Protective Effects of Remote Limb Ischemic Preconditioning

ERG, tüm retinal aktivitenin toplamıdır. ERG genellikle retinadan gelen sinyalleri toplayan ve toplayan bir anten görevi gören korneadan kaydedilir. ERG, pan-retinal olan retina fonksiyonundaki değişikliklerin hassas bir ölçüsüdür, ancak retinanın küçük bir alanıyla sınırlı hasarı tespit etmek için daha az etkilidir. Bu çalışmada, retina kısa bir ışık parlamasına maruz kaldığında oluşan potansiyel olan 'flaş' ERG'nin nasıl kaydedileceğini açıklıyoruz. Kayıt sırasında anestezi, midriyazis ve kornea yönetimi yöntemlerini açıklıyoruz; retinanın nasıl karanlık tutulacağı adapte edilir; elektrot malzemeleri ve yerleşimi; uyaran enerjisinin aralığı ve kalibrasyonu; parametrelerin kaydedilmesi ve verilerin çıkarılması. Ayrıca, bir uzuvda iskemiyi indükleme yöntemini ve bu retinadan uzak iskeminin ışık hasarından sonra retina fonksiyonu üzerindeki etkilerini değerlendirmek için ERG'nin nasıl kullanılacağını da açıklıyoruz. Karanlığa uyarlanmış ERG'nin koni tahrikli bileşeninin izolasyonuna ve böylece çubuk ve koni bileşenlerinin ayrılmasına izin veren iki flaşlı bir protokol tanımlanmıştır. Minimal invaziv tekniklerle kaydedilebildiği için ERG, retinanın fizyolojisi, farmakolojisi ve toksikolojisi ile ilgili çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. ERG'nin, nöroprotektif bir müdahale olsun ya da olmasın, ışıktan zarar görmüş retinanın işlevini değerlendirmek için kullanıldığı bu kullanışlılığın bir örneğini açıklıyoruz; uzak iskemi ile ön koşullandırma.

protokolü, in vivo olarak, kemirgen retina görme fonksiyonu ölçmek için kullanılabilir. a-dalgası, fotoreseptör fonksiyonunun bir ölçüsü, ve b-dalgası, iç retina fonksiyonun bir ölçümü olan, Şekil 1 &#39;de açıklanmış bulunmaktadır. Şekil 2A gösterildiği gibi artan ışık uyaran ile çubuk hakim ERG sinyal artar. a-dalgası 0.4 günlük scot cd.sm -2 ve 2.5 log Scot cd.sm de doyuma kadar a-dalgası artar genlik -2 (gösterilmemiştir) ~...

Elektroretinogram (ERG), ışığa tepki olarak retina tarafından üretilen bir elektrik potansiyelidir. Bu yazıda, karanlığa adapte olmuş sıçanlarda retina fonksiyonunu değerlendirmek için ERG'nin nasıl kullanılacağı ve bu durumda uzaktan iskemik ön koşullandırma gibi nöroprotektif bir girişimin değerlendirilmesinde nasıl kullanılabileceği anlatılmaktadır.

Kemirgen Retina ve Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullamanın Koruyucu Etkileri Fonksiyonu Değerlendirmek Üzere elektroretinogram kullanma

The ERG is the sum of all retinal activity. The ERG is usually recorded from the cornea, which acts as an antenna that collects and sums signals from the ...

Bu prosedürün genel amacı, ERG kullanarak normal ışık hasarlı, uzak iskemik ön koşullandırmalı ve ışık hasarlı sıçanlarda görsel fonksiyonu test etmek ve böylece uzak ekstremite iskemisinin retina üzerindeki koruyucu etkilerini göstermektir. Bu işlem, öncelikle sıçanların 12 saat boyunca karanlığa adapte edilmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım, LED ışık stimülasyonları ve dijital bir amplifikatör kullanılarak bazal karanlığa adapte ERG kaydının alınmasıdır.Ardından, sıçanları parlak ve sürekli bir ışığa maruz bırakarak retinal strese tabi tutun. Son adım, ışık hasarlı sıçanların ERG kayıtlarını, uzak ekstremite iskemisi ile ön koşullandırılmış olanlarınkilerle karşılaştırmak ve A dalgasında görülen fotoreseptör yanıtları ile B dalgasında görülen iç retinal yanıtları ölçmektir. Nihayetinde, skotopik görme fonksiyonunu değerlendirmek için karanlığa adapte ERG kullanılır.Böylece bu yöntem, uzak iskemik tabanlı nöroproteksiyon hakkında bilgiler sağlayabilir. Ayrıca, retinal hasarın ve hastalığın diğer formlarının farmakolojik testlerinde ve görme kusurları olan hayvanların taranmasında da uygulanabilir. Bu prosedüre başlamak için, sıçanı 12 saat boyunca karanlığa adapte edin, ardından ketamin ksilazin kokteyli enjekte ederek anestezi uygulayın.Hayvan bilincini kaybettiğinde, refleks yanıtının yok olduğundan emin olmak için ayağını hafifçe sıkarak anestezinin derinliğini kontrol edin. Ardından, korneasına bir damla atropin ve bir damla proksmetan uygulayın. 10 santimetre uzunluğunda siyah iplik kesin.Ardından iplikle bir ilmek oluşturun ve ilmeği gözün ekvatoruna geçirin; göz küresini hafifçe öne çekmek ve korneayı göz kapağından uzak tutmak için ilmeği hafifçe sıkın. Sonrasında, kornealara carmer göz damlası uygulayın. Sıçanı, başı ganzfeld açıklığına gelecek şekilde, ısıtılmış platformun üzerindeki emici yatağa yerleştirin.Ardından, vücut sıcaklığının 37 °C'de tutulduğundan emin olmak için iç sıcaklık probunu rektuma yerleştirin ve sıcaklık probunun kablosunu sıçanın kuyruğuna bantlayarak probu sabitleyin. Sonra, referans elektrodu arka ekstremiteye subkutan olarak yerleştirin. Elektrodun ağızdan kayıp çıkmasını önlemek için negatif elektrodu ağza güvenli bir şekilde yerleştirin.Bağlantı kablosunu sabit bir yüzeye tutturun. Ardından pozitif elektrodu korneanın merkezine konumlandırın ve bir mikro manipülatör kullanarak elektrodun korneaya nazikçe temas ettiğinden emin olun. Elektrotlar yerleştirildikten sonra, karanlık adaptasyonu korumak için ganzfeld ve hayvanı da içeren düzenek setini opak bir malzeme ile örtün.Kazanım yazılımında, örnekleme hızını 2 kHz, toplama öncesi örnekleme süresini 5 ms ve toplama süresini 100 ile 1000 ms arası olarak ayarlayın. Ardından band geçiren filtreleri 1 ile 1000 Hz arasına ayarlayın ve örneklemenin bir flaşı takiben 100 ms'lik bir süre boyunca tetiklendiğinden emin olun.Şimdi, kayıt baz hattını kontrol edin. Dış gürültüden arındırılmış olması, ancak amplifikatör gürültüsünü ve solunum osilasyonunu göstermesi gerekir. Ardından bir test flaşı uygulayın.Bu, test flaşına yanıt olarak alınan tipik bir ERG dalga formudur. İşlem tamamlandığında, hayvanın 10 dakika boyunca karanlığa yeniden adapte olmasına izin verin. Ardından, kararlı sinyal için baz hattını tekrar kontrol edin.Ardından, kayda başlayın. Kayıt oturumunun sonunda, hayvanın vücut sıcaklığının stabilitesini kontrol edin. Elektrotları çıkarın ve ardından kornealara carmer polimerini yeniden uygulayın. Sonrasında, hayvanı hayvan barınağına geri döndürmeden önce, tamamen hareketli ve aktif hale gelene kadar bir ısıtıcı ped üzerinde iyileşmeye bırakın.Bu şekil, karanlığa adapte edilmiş bir ERG'den elde edilen a dalgasının ve B dalgasının ölçümünü göstermektedir. Buradaki iz, karanlığa adapte edilmiş bir gözün korneasından, T sıfır olarak gösterilen zamanda verilen parlak bir ışık flaşına yanıt olarak kaydedilmiştir. Bir a dalgasının genliği, baz çizgiden ilk çukura kadar ölçülür.B dalgasının genliği, A dalgasının çukurundan takip eden pozitif tepeye kadar ölçülür. Latans, stimulus artefaktından iz üzerindeki ilgilenilen noktaya (örneğin A dalgasının çukuruna) kadar ölçülür. Ham ERG sinyali, artan ışık stimulu ile birlikte artış gösterir.Yaklaşık 0,4 log skotopik kandela saniye/m² değerinde bir dalga belirginleşir ve karma ERG sinyalini koni ve çubuk yanıtlarına ayırmak için ikiz flaş paradigması kullanılmıştır. Uzmanlaşıldığında, bu teknik 30 dakika içerisinde tamamlanabilir.

using-electroretinogram-to-assess-function-rodent-retina-protective

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu video, retina sağlığını ve görsel yol bütünlüğünü incelemek için bir sıçan modelinin hazırlanışını göstermektedir. Görsel uyarılmış potansiyel ve elektroretinografi referansı ve aktif elektrotlar sıçana bağlanır, ardından eşit retinal aydınlatma için platformu Ganzfeld çanağının önünde sıçan ile hizalar ve dış paraziti önlemek için Faraday kafesi kapatılır.

Bir Elektrofizyoloji Kurulumu Kullanarak Görsel Yol Bütünlüğünü Değerlendirmek için Bir Sıçan Modeli Hazırlama

Kaynak: Brandli, A. Uzaktan Ekstremite İskemik Ön Koşullandırma: Kemirgenlerde Nöroprotektif Bir Teknik. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, sistemik nöroproteksiyonu indüklemek için sıçanlarda non-invaziv bir ekstremite iskemik ön koşullandırma protokolünü göstermektedir. Prosedür, koruyucu faktörleri serbest bırakan hücresel stres yollarını tetikleyen kontrollü arteriyel oklüzyon ve reperfüzyonu içerir. Bu faktörler beyin ve retina gibi uzak organlarda iskemik ve metabolik yaralanmalara karşı...

Nöroproteksiyon için Bir Sıçan Modelinde Non-İnvaziv Ekstremite İskemik Ön Koşullandırma

Kemirgen retina uzun beyin için erişilebilir bir pencere olarak kabul edilmiştir. Bu teknik yazıda iskemik yaralanma sonrası, merkezi sinir sistemi içinde, vasküler rejenerasyon başarısız olmasına yol mekanizmaları incelemek için oksijen kaynaklı retinopatinin fare modeli kullanan bir protokol sağlar. Anlatılan sistem, aynı zamanda, retina ve CNS içindeki fonksiyonel kan damarlarının büyümesini teşvik etmek için stratejiler keşfetmek için dönüştüğü edilebilir.

Fare Retina kullanma CNS&#39;deki Vasküler Rejenerasyon Değerlendirilmesi

Uzaktan iskemik önkoşullama (RIP) zarar strese karşı koşullandırma dokuların bir yöntemdir. Biz 5-10 dakika bir tansiyon aleti manşet şişirilerek, arka bacak uzaktan iskemi bir yöntem kurduk. RIP nöroprotektif yetenekleri kemirgenlerde retina dejenerasyonu modelinde gösterilmiştir.

Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullanma: Kemirgenler Bir Nöroprotektiftir Tekniği

Ex vivo ERG, hayvanların veya insanların izole edilmiş sağlam retinalarından doğrudan retina hücrelerinin elektriksel aktivitesini kaydetmek için kullanılabilir. Burada, retina hücrelerinin elektriksel aktivitesini incelemek için in vivo ERG sistemlerinin ex vivo ERG kayıtlarına ne kadar yaygın olarak uyarlanabileceğini gösteriyoruz.

Eşzamanlı<em&gt; Ex vivo</emİki retina&gt; Fonksiyonel Test tarafından<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram Sistemi

Bu protokol, anestezi uygulanmış sıçanlarda elektroretinogram ve görsel uyarılmış potansiyellerin eş zamanlı ölçümünü tanımlar.

Elektroretinografi Eşzamanlı Kayıt ve Anestezi Sıçanlar Görsel Uyarılmış Potansiyeller

Biz kayıtları anestezi karıştırıcıların olmadan yapılan insan durumuna daha benzerdir gözün (Elektroretinogram) ve bilinçli sıçanlarda beyin (görsel uyarılmış potansiyel), görsel elektrofizyolojik sinyaller ölçmek için cerrahi implantasyon ve Kayıt işlemleri göstermektedir.

Bilinçli Sıçanlarda implantasyon ve Kablosuz Elektroretinogram Recording ve Görsel Uyarılmış Potansiyel

Burada, ilk olarak Marmorstein, Peachey ve meslektaşları tarafından 2000'li yılların başında tanımlanan DC-ERGs olarak bilinen bir tekniği kullanarak farelerde retina pigment epitelinin (RPE) ışık uyarılmış elektriksel tepkilerini kaydetmek için bir yöntem saklı tutuyoruz.

Mouse Retinal Pigment Epitelinin Işık Uyarılmış Elektriksel Tepkilerini Kaydetmek için Doğrudan Birleştirilmiş Elektroretinogram (DC-ERG)

Burada, basit dikişler ve bir kelepçe kullanarak geçici bilateral ortak karotis arter tıkanma ile retina iskemisinin bir fare modelini tarif ediyoruz. Bu model, kardiyovasküler anormalliklerin neden olduğu retina iskemisinin patolojik mekanizmalarını anlamak için yararlı olabilir.

Geçici Bilateral Ortak Karotid Arter Tıkanması sonucu İndüklenen İskemik Retina Yaralanmasının Murine Modeli

Mevcut multielektrot dizisinin veya yama kelepçesi ekipmanının modifikasyonu, ex vivo elektroretinogramı daha yaygın olarak erişilebilir hale getirir. Exvivo ışık yanıtlarını kaydetmek ve sürdürmek için geliştirilmiş yöntemler, sağlıklı retinada, göz hastalıklarının hayvan modellerinde ve insan donör retinalarında fotoreseptör ve ON-bipolar hücre fonksiyonunun incelenmesini kolaylaştırır.

Ex Vivo Elektroretinogramın Küçük ve Büyük Gözlerde Retina Fonksiyonunu İncelemesi için Kurulum ve Koşulların Optimize Edilmesi

Bu protokol, ön kamara kanülasyonu ve göz içi basınç yükselmesi yoluyla retina iskemiyi indükleyerek ve ardından reperfüzyonu başlatmak için göz içi basıncı normalizasyonu ile bir fare gözünde retinal iskemi-reperfüzyon hasarını modeller.

Bir Fare Gözü Modelinde Retinal İskemi-Reperfüzyon Hasarının İndüksiyonu

Öğrenin, kemirgenlerde elektroretinogram kullanarak retina fonksiyonunu değerlendirmeyi ve uzaktan iskemik önkoşullamanın ışık kaynaklı stres sonrası nöroprotektif etkilerini incelemeyi. Bu yöntem görsel fonksiyon bozukluklarının araştırılmasında kritik öneme sahiptir.

Kemirgen Retina ve Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullamanın Koruyucu Etkileri Fonksiyonu Değerlendirmek Üzere elektroretinogram kullanma (Video) | JoVE Journal

Kemirgen Retina ve Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullamanın Koruyucu Etkileri Fonksiyonu Değerlendirmek Üzere elektroretinogram kullanma

Daha fazla video keşfet