Yüksek Çözünürlüklü EEG Kayıtlar kullanarak Odak Epilepsi Preklinik Rat Modelleri Beyin Kaynak Görüntüleme

Bu prosedürün genel amacı, fokal epilepsili sıçanlardan elde edilen yüksek çözünürlüklü EEG kayıtlarını kullanarak beyin kaynağı analizi yapmaktır. Bu, önce gece boyunca %0.2 klorür içeren damıtılmış suya bir EEG mini kapağı yerleştirilerek ve ertesi gün elektrot empedansını iyileştirmek için her elektrotu karışık bir iletken macunla doldurarak gerçekleştirilir. İkinci adım, EEG mini başlığını sedasyonlu bir sıçan üzerine ayarlamak ve yüksek çözünürlüklü EEG verilerini kaydetmektir.

Daha sonra, kaydedilen EEG sinyalleri, eşik tabanlı yöntem ve dalgacık ayrıştırma yöntemi kullanılarak farklı interiktal epileptiform türleri için ortalama sinyaller elde etmek üzere önceden işlenir. Son adım, bireysel veya olasılıksal MRG'ye dayalı elektrot pozisyonları ile sıçanın kafa hacmi iletken modelini oluşturmaktır. Sonuç olarak, ES Loretta ters çözümü, epileptojenik beyin bölgeleriyle ilgili olması beklenen tahmini beyin kaynaklarını göstermek için hesaplanır.

Preklinik RAM modelleri, elektrofizyolojik teknik aracılığıyla epigenezi incelemek için çok yararlıdır. Geçmişte epileptik sıçanları incelemek için invaziv elektrofizyolojik kayıtlar kullanılmış olsa da, bu sıçanda iğne anestezisi olmadan tüm beyin kaynağı görüntülemesini gerçekleştirmek için mevcut bir teknik yoktur. Bu çalışmada, bunu başarmak için bütün bir metodoloji öneriyoruz.

Bu videoda size EEG mini'yi nasıl hazırlayacağınızı ve kuracağınızı göstereceğim. Kayıt için RU hazırlığına hazır tüm prosedürlerden sorumlu olacağım. Bir G kaydı sırasında, bir G kayıt ekipmanı ve yazılımı çalıştıracağım.

Ek olarak, kaydedilen verilerden beyin kaynağı analizinin nasıl yapılacağını göstereceğim. Bu işleme başlamak için EEG elektrot macununu %0.9 NACL çözeltisi ile karıştırın. Elektrot macununu elektrotların içinde ve cilt üzerinde görselleştirmeye yardımcı olmak için bir damla metilen mavisi ekleyin.

Daha sonra, karışık macunu bir şırıngaya koyun ve içinde hava kabarcığı olmadığından emin olun. Daha sonra, sıçan için hazırlık prosedürünün bir parçası olarak herhangi bir hava kabarcığı oluşturmadan 32 elektrotun tümünü alttan macunla doldurun, daha sonra sıçanın kafasını kesin, izoflori% 2'ye düşürün. Kulak kanallarını kulak çubuklarıyla sabitleyin ve anestezik temini için burun konisini sabitleyin.

Sonra, hayvanın gözlerine oftalmik merhem sürün. Daha sonra başını tıraş edin ve kan damarlarını uyarmak ve yağı çıkarmak için cildi% 90 izopropil alkolle ovalayın. Daha sonra kafa derisine bir tuzlu su çubuğu yerleştirin ve EEG mini başlığı yerleştirilmeye hazır olana kadar iyi cilt iletkenliğini korumak için tamamen örtün.

Kayıt prosedürü sırasında fizyolojisini sürekli olarak izlemek için solunum sıcaklığını ve üç kurşun elektrokardiyogram probunu farenin vücuduna bağlayın. Bu prosedürde, sıçan kafa derisindeki salin swabını çıkarın ve hazırlanan EEG mini başlığını cildine yerleştirin. Mini kapağı lastik bantlarla sabitleyin.

Hem toprağa hem de referans elektrotlara bir kat yüksek iletkenlikli elektrot macunu uygulayın. Ardından, bunları ilgili kulaklara yerleştirin. Ardından EEG mini kapağını amplifikatöre bağlayın.

EEG izlerinin önizlemesine bakın ve tüm elektrotların performansını kontrol edin. Daha sonra Dexter'ı sıçan intraperitonealine kilogram başına 0.25 miligramda uygulayın ve hemen flor oranını %0'a düşürünSolunum hızı 30 ila 60 BPM aralığında değilse, flor oranını maksimum% 1'de nazikçe artırın Şimdi EEG kaydına başlayın ve EEG izlerinde paroksismal aktivitenin varlığını doğrulayın. Kayıttan sonra, EEG mini başlığının üç çıkıntılı dairesinin konumlarını, içlerine renkli bir kalem sokarak cildin üzerine işaretleyin.

EEG mini kapağı çıkarılmadan önce, yer işaretleriyle birlikte sıçan kafasının bir fotoğrafını çekin. IED tespiti ve sınıflandırması gerçekleştirilir Matlab'da kendi geliştirdiği kodlar kullanılarak, her bir IED alt tipi için ortalama EEG sinyalleri beyin kaynağı analizi için kullanılır. Aşağıdaki prosedürde, açık kaynaklı yazılım beyin fırtınası, Worcester sıçanları için MRI atlası ile birlikte kullanılacak, yazılıma MRI ve beyin yüzeyi girecek, varsayılan ayar ile kafa yüzeyini oluşturacaktır.

Ardından, MRG'ye dayalı olarak kafa derisi ve iç dış kafatası yüzeylerini oluşturun Kurşun alan hesaplaması için, görselleştirme seçeneğini kullanarak, elde edilen sıçan kafası resmini kullanarak, MRG'deki üç yer işaretinin konumlarını ve yer işaretlerinin ızgara noktalarını birlikte kaydedin. Referans olarak, elektrotlar iskele üzerine sabitlenirken elektrot konumlarını oluşturun. Ardından, yazılım ekranında beyin fırtınası yapmak için oluşturulan kanal dosyasını girin ve kurşun alan matrisini hesaplamak için tüm elektrotların konumunu onaylayın.

Deri, kafatası ve beyin oranını karşılayan iletkenlik değerlerini girin. Hacim iletkeni modeline ve oluşturulan elektrot konumlarına dayalı olarak kurşun alan matrisini elde edin. Bundan sonra, S Loretta gibi kaynak tahmin yöntemi seçeneğini seçerek bir IED alt tipi için ortalama EEG sinyallerini girin.

Ters çözüm, hesaplanan kurşun alan matrisine ve son çizimdeki giriş EEG sinyallerine dayalı olarak elde edilecektir. Burada gösterilen tahmini kaynaklar, ani yükselme ve keskin dalgalardaki farklı kümelere göre IED'lerin beyin kaynak konumlarının zaman serileridir. Değerlendirme, kırmızı dikey çizgi ile işaretlenmiş belirli bir zamanda gerçekleştirildi.

İşte EEG topografyaları ve işte kortikal akım kaynakları. Bu şekil, nöbet sırasında tahmini beyin kaynaklarını gösterir, zaman örneği kırmızı dikey çizgilerle işaretlenir. Bu videoyu izledikten sonra, yüksek devirli EEG'yi kaydetmek için kolay mini kapağın nasıl hazırlanacağını ve sıçan üzerinde beyin kaynağı analizi yapmayı iyi anlamış olmalısınız.

Burada sunduğumuz metodoloji, altta yatan epigenez üzerindeki mekanizmaları anlamak için klinik bir modele uygulandı.