Name: Paw-sürükleme: Bir Roman, Fare Silindir Test Hassas Analizi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-29T16:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: Öğrenin, farelerde beyin hasarını hassas bir şekilde analiz etmek için silindir testinde pati sürükleme davranışını nasıl nicelendireceğinizi. Bu yöntem, geleneksel ön pati asimetrisi analizinden daha duyarlıdır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz fotoğraf ve videografi ile teknik uzmanlık ve yardım için Sayın John Crowell ve Sayın Terry Upshall teşekkür ederiz. Bu çalışma İnme Kurtarma Catalyst hibe Kanada Sağlık Araştırma Enstitüleri ve Newfoundland Araştırma ve Geliştirme Kurumu ve Kalp ve Kanada Kanada Ortaklığı İnme Vakfı JLV hibe işletim tarafından desteklenmiştir. RBR bir Keith Griffiths Memorial Kalp ve İnme Vakfı Yüksek Lisans Bursu bir alıcı oldu.

Etik bildirimi: Bütün deneyler Hayvan Bakımı Kanada Konseyi kurallarına göre Newfoundland Hayvan Bakım Etik Kurulu Memorial Üniversitesi tarafından onaylanmıştır. 1. Fare <ol><li> Yetişkin fareler kullanın. Bu çalışmada, yetişkin erkek FVBN fare (n = 10) arasında 2-4 ay kullanılmıştır. 12:12 hr ev fareleri aydınlık-karanlık döngüsü ters ve standart kemirgen yemi ve su ad libitum sağlar. </li></ol> Silindir Testi İçin Gerekli Malzemeler 2. <ol><li> Silindir testin filme alınmasında şeffaf üst bir tablo elde etmek. Tablonun boyutları üst pleksiglas veya cam olmalı, ve masanın altına bir ayna konumlandırmak için yeterli yer olmalıdır, alakasız. Fare aşağıdan videoya edilmesi için bu izin verir. Silindir boyunca görüntü yansıtmak için aşağıdaki tabloda bir ayna kullanın. Varsa bir alternatif olarak, baş aşağı kamera kullanımı. Bu protokolde kullanılan tablonun boyutları 54 x 56 x 66.5cm 51 x 51cm üst (WXL) ile (ExBxY). </li><li> Bir ayna alın. Bu protokolde kullanılan ayna boyutları 34 x 58cm (WXL) bulunmaktadır. </li><li> Fare gerçekleştirmek için şeffaf / pleksiglas silindiri edinin. Bu protokolde kullanılan silindirin boyutları yüksek 17.5cm, 8,8 cm ID, 0.35cm bir duvar kalınlığı ile 9.5cm OD vardır. Bir uzun silindir daha aktif fare türü için de gerekli olabilir. </li><li> Masa üzerindeki silindir yerleştirin ve aşağıdaki aynada yansıması filme. </li><li> Bir video kamera ve tripod gereklidir. Yaklaşık silindir video 5 dakika başına 190MB yaklaşık 650KB / s Video kaydetme. Kamera silindir görüş tüm alanı kapsar emin olmak için bir yakınlaştırma işlevi olduğundan emin olun. NOT: Bu protokolde kullanılan video kamera standart tanımı, NTSC geçmeli videoyu kullanan bir Sony DCR-SR42, 40x optik zoom, 2,000x dijital zoom, 680kpix) olduğunu. </li><li> Analiz yazılımı edinin - Bir medya plvideo desteği ve oynatma hızı modülasyonu ile ayer. Bu protokolde kullanılan medya oynatıcı VLC Media Player v2.1.2 olduğunu. </li><li> Medya oynatıcı ve monitör çalıştırabilen bir işletim sistemine sahip bir bilgisayar edinin. </li><li> Videolar için elektronik depolama gereklidir. Harici bir sabit disk videoları indirin ya da uzun süreli saklama için DVD&#39;lere kopyalayın. NOT: Video başına 190MB anda, 84 seans, 16 GB SD karta uyacak ve 168 seans 32GB SD karta uyacaktır. Nedeniyle, SD medya göreceli ucuzluk ve bazı fareler 20 rears tamamlamak için ihtiyaç ne kadar zaman içinde belirsizlik, 32 GB kart önerilir. Bu çalışmada, videolar 2TB harici sabit disk kameradan kopyalanan ve daha sonra yedek olarak DVD&#39;lere recopied. </li></ol> Silindir Testi 3. Deneysel Kurulum <ol><li> Masa bir 45 derecelik açıyla aşağıdaki tabloda ayna sabitleyin. Masa ayakları bağlanmış bu kullanarak iki destek braketleri suppor için musunuzsırasıyla, aynanın alt ve üst t. Parantez yerleri tablosu (Şekil 1A) bir yan görünümü ve tablosu (Şekil 1B) bir yüzü üzerine görünümünde not edilir. </li><li> Masanın ortasına silindiri yerleştirin. Silindir siyah işaretleyici (Sharpie) silindir kaldırdı ve aynı pozisyona iade edilebilir ve böylece (Şekil 2) ile masaya oturur dört eşit uzaklıktaki çizgiler çizin. Şeffaf masa alt onları Çizim masa işaretleyici mürekkep eriterek olmadan hayvan testler arasında temizlenmelidir sağlar. </li><li> Kamera ve tripod takın. Resim silindir namlu doğrudan bakıyor böylece aynaya kamerayı yöneltin. Silindirin tam bir iç duvar tabanı (Şekil 3) ile görünür ve engelsiz olduğundan emin olun. , Kamera ve ayna ayarı göreli açısı dahil, kurulum yan görünüşe bakınız yukarıdaki (Şekil 4A) dan ve gelenFare yetiştirme (Şekil 4B) de dahil olmak üzere Tablo seviyesi. </li><li> Çekimlerin öncesinde her fare tanımlamak için işaret kartlarını hazırlayın. Kartlar tipik olarak, her bir fare için bir kimlik numarası, test zaman noktası (örn., 3 gün tedaviden sonra) ve film oturumu tarihini de emin olun. Deneyci kör sağlamak için işaret kartında tedavi grubunu dahil etmeyin. </li><li> Işığın bu seviyede gibi standart iç mekan aydınlatma koşullarında Film açıkça silindirin etrafına fare hareketlerini görmek için gereklidir. NOT: yeterli olabilir bir kırmızı ışık kamera ile karanlıkta filme Varsa, ancak bir ilk pençe dokunur ve Sürüyor açıkça ölçümü görebilir olup olmadığını test etmek gerekir. </li></ol> 4. Yürütme <ol><li> Filme başlayın. Kamera lensinin önünde uygun fare işaret kartını görüntüler. </li><li> Hemen işaret kartı filme sonra açık üstten silindir içine fare indirin. </li><li> Fareyi filme başlayın. Fareler startled eğer keşfetmek ilgi kaybedebilir olarak, bu süre boyunca gürültüyü en aza indirir. </li><li> Silindir keşfetmek için fareler arka gözlemleyin. Fare yirmi rears en az gerçekleştirene kadar video yakalama. NOT: Her iki forepaws zeminle temas kaybetmek ve fare arka ayakları üzerinde duruyor BIR arka oluşur. </li><li> Dezenfekte ve fare kokuları uzaklaştırmak için her fare arasında uygun bir temizleme solüsyonu ile masanın üzerinde ve silindir silin. </li><li> Fareler keşfetmek durdurmak ve sessizce yaklaşık 5 dakika boyunca dört ayak üzerinde oturan kalır zaman dondurma. Yirmi rears oluşmadan önce fareler dondurmak, bu testi başlamadan önce 10-20 dakika süreyle silindirden bunları kaldırmak için gerekli olabilir. Fareler yirmi rears yapmazsanız, onlar çalışmaya kaldırılır. NOT: Bizim tecrübelerimize göre, fareler yüzünden silindir keşfetmek için başarısızlık hariç gereken asla. </li></ol> Paw sürükleyerek kullanarak Silindir Testinin 5. DeğerlendirmeAnaliz <ol><li> Fare silindir araştırıyor ne kadar hızlı bağlı olarak 0.25X arasında 0.67x normal hızda hızında videoyu oynatın. Yavaş oynatma hızları sunan bir medya oynatıcı kullanın. </li><li> Pençe dokunur toplam sayısını ölçmek. Fare rears (Şekil 5A), silindir (Şekil 5B) yan dokunduğunda Paw dokunur sonra her ikisi de aynı anda pençeleri (Şekil 5C) ve arazilerin (Şekil 5D) ile kaldırır, ortaya çıkar. pençe olabilir veya tam hurma ile silindir duvara temas olmayabilir, ama silindir duvarı ile bazı temas gerçekleşmesi gerekir. Bir arka sırasında arka bacaklarda üzerinde dururken her iki forepaws ya da silindir duvarına (ne kadar kısa) fare temas ettiği sayısını sayarak pençe dokunur değerlendirin. Silindir duvarı ile temasın Not sadece bir &quot;pençe dokunuş&quot; veya &quot;pençe-drag&quot; fare bir arka pozisyonda ise sayılır - ayaktamasa kapalı hem forepaws ile arka bacaklarda üzerinde. Masa üzerine arka bacaklarda ve bir forepaw hem de ücretsiz pençe ile duvara dokunmak gelirleri - - fare 3 nokta duruşu kalırsa bu pençe dokunuş olarak sayılmaz. Fareler arka olabilir ve tek bir forepaw ile silindir duvara dokunun ve bu pençe dokunuş olarak sayılır. Not: Bir fare de ikiden fazla kişi yapıyor, bir arka sırasında silindir etrafında bedenini hareket edebilir. Her sol forepaw touch için bir ve her doğru forepaw touch için tek - Bu kişiler sayımı. </li><li> Pençe-drags sayısını ölçmek. Paw-sürükleyerek davranışı, normal pençe dokunur farklıdır. <ol><li> Pençe kişileri tam açık avuç (Şekil 6B) ile silindir duvarı varsa, yavaş yavaş hafif bir titreme ile sık sık, duvardan uzağa düşecek. Hareket complet uzak düşmeden önce silindir duvara ya medial veya aşağı yönde (Şekil 6C) sürükleyerek hane ile başlayanely (Şekil 6D). Fare sonra tüm ayak (Şekil 6F) açılış öncesi etkilenmeyen pençe (Şekil 6E) ile bağlantısını kesmek olacak. Bu pençe sürükleme olarak kabul edilir ve bir taksitli olarak sayılmalıdır. </li><li> Pençe tamamen açık hurma ile silindir duvara temas etmezse, silindir duvarından uzağa düşen öncesi hane ile silindir duvarını otlatmak olacaktır. Benzer şekilde, bir fare silindir duvara pençesini sürükleyip ama sökmek önce tamamen serbest olmayabilir. Bunlar hem dokunur yanı sıra pençe-sürükler ve taksitli hem olarak kabul edilmelidir kabul edilir. </li><li> Bir fare silindiri araştırıyor iken pençe da silindir duvar boyunca sürükleyebilirsiniz. O (Şekil 7E) sökme önce orijinal konumuna (Şekil 7A-D) sol veya sağ araştırıyor Bu durumda, pençe farenin gövde büküm takip edecektir. Rastgele seçerek fare bağlı olarak bu, bir pençe-sürükleyin kabul edilmezbir yönde keşfetmek ve kortikal hemisfer zarar gördüğü bağlı değildir. </li></ol></li><li> Paw-Sürüyor bir yüzdesi olarak ifade edilir bir oturum sırasında pençe dokunur toplam sayısı başına pençe-sürükler. Ayrı ayrı ön ayakları için toplam pençe rehber bir yüzdesi olarak pençe-drags sayısını ifade eder. </li><li> Bir pençe-drag sonuçlanan Dokunuşlar bir pençe-sürükle ve aynı zamanda bir dokunuş olarak sayılır. Fare onun pençe temas her defasında silindir duvarı pençesini sürükler Böylece, eğer pençe-sürükleyerek yüzdesi% 100 olarak ifade edilir. </li></ol> 6. Ek Deney Tasarımı Öneriler <ol><li> Yabancı değişkenleri en aza indirmek için: <ol><li> Her test gününde aynı anda fareler test edin. Onların uyanma döngüsü sırasında fareler test edin. 12 saat ters ışık döngüsü farelerin tutulması performansı kolaylaştırır. </li><li> Fareler gürültü veya yeni bir çevre yoluyla stresli ise silindir keşfetmek için isteksiz olabilir. Onların hayvan tutma oda veya bir odada fareler test onlar b vareen stresi azaltır aşina. Fare öncesinde silindir girmeden ya da alışma nedeniyle jostled olması durumunda oda, gürültülü, bu durum oluşabilir. NOT: Sınav bazal okuma olarak hizmet deneysel manipülasyon önce bir kez yapılmalıdır. O zaman kısa bir süre içinde silindire poz aşırı sayıda önlemek için tavsiye edilir olsa da manipülasyon sonra, test günleri, deneycinin takdirindedir. </li><li> Fareler silindire 6-7 maruz kalmalarından sonra arka isteksiz olabilir. Bu çalışmada, fareler iskemiden önce ve 1, 3, 7, 14, 21 ve 28, cerrahi sonrasında yedi kez, toplam silindir içinde test edildi. NOT: Bu çalışmada FVBN fare suşu kullanıldı. Daha önce, bir ET-1, iskemik yaralanma sonrası silindir ve gözlenen pençe sürükleyerek davranış C57BL / 6 fareleri test ettik (veriler gösterilmemiştir). C57BL / 6 fareleri yetiştirme sırasında FVBN farelere göre daha aktif ve sık silindirin jant üzerine arttıdışarı tırmanma önce. Fareler atlayarak kaçmaya çalışırsanız uzun silindir kullanılmalıdır. </li></ol></li></ol> 7. Endotelin-1 Cerrahi ve Enfarktüs Hacim Ölçümleri <ol><li> Daha önce yayınlanmış protokollere 4&#39;e göre Endotelin-1 cerrahi ve enfarktüs hacmi ölçümleri yapın. Ön ön ayakları, motor korteks hedeflemek için, her bir fare, aşağıdaki koordinat üç ET-1 enjeksiyonu yapılır: (i) 0,7 arterior (AP) için 1,5 medial-yanal (mi) / - 1.2 dorsal-ventral (DV), ( ii) 0,4 AP / 1.25 ml / - 1.2 DV ve (iii) 0,1 AP / 1.75 ml / -1.2 DV 4. </li></ol> 8. İstatistiksel Analiz <ol><li> Varyans iki yönlü tekrarlı ölçümler analizi (ANOVA) pençe-sürükleyerek farklı zaman noktalarında karşısında etkilenen ve etkilenmeyen pençelerinin için yüzde analiz etmek önerilir. </li></ol>

<ol><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke%2C+cortical+ablation%2C+parkinsonism+and+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li>
<li>Kolb, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+factor-stimulated+generation+of+new+cortical+tissue+and+functional+recovery+after+stroke+damage+to+the+motor+cortex+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Growth factor-stimulated generation of new cortical tissue and functional recovery after stroke damage to the motor cortex of rats.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 27 (5), 983-997 (2007).</li>
<li>Windle, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+four+different+methods+of+producing+focal+cerebral+ischemia+with+endothelin-1+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">An analysis of four different methods of producing focal cerebral ischemia with endothelin-1 in the rat.</a> Exp Neurol. 201 (2), 324-334 (2006).</li>
<li>Roome, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reproducible+Endothelin-1+model+of+forelimb+motor+cortex+stroke+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A reproducible Endothelin-1 model of forelimb motor cortex stroke in the mouse.</a> J Neurosci Methods. 233, 34-44 (2014).</li>
<li>Tennant, K. A., Jones, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorimotor+behavioral+effects+of+endothelin-1+induced+small+cortical+infarcts+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Sensorimotor behavioral effects of endothelin-1 induced small cortical infarcts in C57BL/6 mice.</a> J Neurosci Methods. 181 (1), 18-26 (2009).</li>
<li>Wang, Y., Jin, K., Greenberg, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurogenesis+associated+with+endothelin-induced+cortical+infarction+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Neurogenesis associated with endothelin-induced cortical infarction in the mouse.</a> Brain Res. 1167, 118-122 (2007).</li>
<li>Baskin, Y. K., Dietrich, W. D., Green, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+effective+behavioral+tasks+for+evaluating+sensorimotor+dysfunction+following+traumatic+brain+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Two effective behavioral tasks for evaluating sensorimotor dysfunction following traumatic brain injury in mice.</a> J Neurosci Methods. 129 (1), 87-93 (2003).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+behavioral+testing+after+focal+ischemia+in+the+mouse%3A+functional+recovery+and+the+effects+of+gender%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Chronic behavioral testing after focal ischemia in the mouse: functional recovery and the effects of gender.</a> Exp Neurol. 187 (1), 94-104 (2004).</li>
<li>Clarke, J., Ploughman, M., Corbett, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+qualitative+and+quantitative+analysis+of+skilled+forelimb+reaching+impairment+following+intracerebral+hemorrhage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">A qualitative and quantitative analysis of skilled forelimb reaching impairment following intracerebral hemorrhage in rats.</a> Brain Res. , 204-212 (2007).</li>
<li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27staircase+test%27%3A+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">The 'staircase test': a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> J Neurosci Methods. 36 (2-3), 219-228 (1991).</li>
<li>Farr, T. D., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+and+qualitative+impairments+in+skilled+reaching+in+the+mouse+%28Mus+musculus%29+after+a+focal+motor+cortex+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Quantitative and qualitative impairments in skilled reaching in the mouse (Mus musculus) after a focal motor cortex stroke.</a> Stroke. 33 (7), 1869-1875 (2002).</li>
<li>Tennant, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vermicelli+and+capellini+handling+tests%3A+simple+quantitative+measures+of+dexterous+forepaw+function+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">The vermicelli and capellini handling tests: simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice.</a> J Vis Exp. (41), (2010).</li>
<li>Clarkson, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AMPA+receptor-induced+local+brain-derived+neurotrophic+factor+signaling+mediates+motor+recovery+after+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">AMPA receptor-induced local brain-derived neurotrophic factor signaling mediates motor recovery after stroke.</a> J Neurosci. 31 (10), 3766-3775 (2011).</li>
<li>Clarkson, A. N., Huang, B. S., Macisaac, S. E., Mody, I., Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reducing+excessive+GABA-mediated+tonic+inhibition+promotes+functional+recovery+after+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Reducing excessive GABA-mediated tonic inhibition promotes functional recovery after stroke.</a> Nature. 468 (7321), 305-309 (2010).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarını var.

şunlardır silindir testinde pençe-sürükleyerek davranışı ölçülmesi sırasında kilit noktaları kurmak: i) sayısını ölçmek bir temel oluşturmak için beyin hasarı önce her pençe için toplam pençe dokunur karşı pençe-sürükler; ii) iskemik yaralanma sonrası her pençe için toplam pençe dokunur karşı pençe-drags sayısını ölçmek; ve iii) pençe-sürükle ve farenin gövde yanal dönüşü sırasında silindir duvar boyunca pençe lateral hareketi arasında ayrım. Paw-sürükleme ön ayakları sensorimotor korteks tr...

Nöral rejenerasyon stratejileri hedefi doku onarımı ve fonksiyonel iyileşmeyi hem göstermektir. Fonksiyonel iyileşme genellikle spesifik beyin bölgelerinde hasar ile ilişkili motor becerileri kapsayan bu durumda, fonksiyon kaybı ölçmek davranış testleri ile değerlendirilir. Travmatik beyin yaralanması ya da korteksin sensorimotor ön ayakları bölgesinde bir iskemik hasarı davranış testleri bir dizi ile ispat edilebilir. Böyle bir testi, silindir testi ön ayakları faaliyeti 1 işlev bozukluklarını değerlendirmek için sıçanlarda yaygın olarak kullanılır. Test şeffaf bir üst sadece bir silindir, kamera ve masa gerektiren düşük kurulum maliyeti vardır. O kemirgenler doğal keşif davranışı dayalı olarak yönetmek kolaydır, bu nedenle egzersiz öncesi ve gıda yoksunluğu veya ödülleri gerekli değildir. Bu sayısız avantajlara rağmen, silindir testi ön ayakları s odak yaralanmalar aşağıdaki farelerde ön ayakları açıklarını değerlendirmek altında kullanılmaktadırBiz silindir testi fare davranış analizine özellik korteksi, ensorimotor. Ön ayakları asimetri silindir testi için analiz klasik ölçüsüdür. Silindire yerleştirildiğinde, kemirgenler doğal olarak arka bacaklarda üzerine yetiştirme ve postural denge için kendi ön ayakları pençeleri ile silindir duvarları dokunarak silindirin duvarları keşfedebilirsiniz. Her ön ayakları ile duvar pençe dokunur sayısı kolaylıkla silindirin bu keşif sırasında kemirgenler filme ile ölçülür. Etkilenen ön ayakları pençe etkilenmeyen ön ayakları pençe daha duvar az dokunur yapar ve karşı sensorimotor korteks hasar gösterdiğinde ön ayakları asimetri oluşur. Sıçanlarda, damar daraltıcı madde intra-kortikal enjeksiyonlar, Endotelin ön ayakları sensorimotor kortekse (ET-1), karşı ön ayakları davranışsal hasarları ile sonuçlanan bir fokal iskemi lezyon neden olur. Karşı ön ayakları kullanımda Açıkları kolaylıkla f değişiklikler olarak tespit edilirSıçanlarda 1-3 silindir test asimetri orelimb. Ancak sıçanlar aksine, ön ayakları asimetri değişiklikler değişir ve karşılaştırılabilir ET-1 enjeksiyonu 4-6 ardından farelerde daha az uyumludur. Burada silindir testinde ön ayakları davranış yeni bir analizini göstermektedir - pençe-sürükleyerek davranışının analizi. Daha önce bu pençe sürükleyerek analizi, klasik ön ayakları asimetri analizine göre farelerde ön ayakları sensorimotor korteks hasar daha duyarlı bir ölçüdür ve bu nedenle fokal kortikal yaralanma modellerinin çeşitli uygulanabilir olduğunu göstermiştir. 4 pençe-sürükleyerek - nasıl forepaw temasların incelenmesi ön ayakları sensorimotor korteks iskemik hasar aşağıdaki silindir duvar farelerde yeni davranış ortaya koymuştur. Fare sonra kendi orta hatta doğru veya duvar süre aşağı silindir duvar boyunca onun etkilenen (-kontra lezyonal) pençe sürükler silindir duvarını keşfetmek için arka ayakları üzerinde duruyor zaman bir pençe sürükleme oluşuronun etkilenmemiş forepaw duvara postural destek sağlar. Paw-sürükler nadiren bu nedenle pençe-drag görünümü ön ayakları sensorimotor korteks 4 yaralanma olumlu bir göstergedir yaralanmamış farelere meydana gelir. Biz daha önce ön ayakları sensorimotor korteks ET-1 iskemik hasarı aşağıdaki farelerde pençe-sürükleyerek davranışını sayısal ve inme sonrası 4 iki haftaya kadar farelerde sürekli pençe-sürükleyerek davranışı göstermiştir. Burada pençe-sürükleyerek davranışı dört hafta sonrası inme kadar sürekli olduğunu göstermektedir. Pençe-sürükleyerek davranış analizi farelerde ön ayakları sensorimotor korteks fokal iskemik hasarı değerlendirmek için yeni ve duyarlı bir araç sağlar. Onun ucuz set-up, yönetim kolaylığı ve bu hızla farelerde ön ayakları davranış açıklarını değerlendirmek için basit ama kullanışlı bir araç haline puanlama.

<table><tbody><tr><td>Pleksi cam silindir</td><td></td><td></td><td>17,5 cm yüksekliğinde, 9,5 cm dış çap, 8,8 cm iç çap, duvar kalınlığı 0,35 cm (veya 3,5 mm)</td></tr><tr><td>görüntüleme masası</td><td></td><td></td><td>54x56x66,5 cm (genişlik x uzunluk x yükseklik), masanın üstü 51x51 cm pleksiglas levhadır.</td></tr><tr><td>ayna</td><td></td><td></td><td>34x58 cm ayna</td></tr><tr><td>video kamera</td><td>Sony</td><td>DCR-SR42</td><td>Dahili depolamalı video kamera, SD işlevselliği, 40x optik yakınlaştırmalı</td></tr><tr><td>bilgisayar</td><td>Dell</td><td>Optiplex 760</td><td>İşlemci: Intel, 3.0 GHz, Bellek 4.00GB (RAM)&nbsp;</td></tr><tr><td>bilgisayar monitörü</td><td>Samsung</td><td>S22C350H</td><td></td></tr><tr><td>Excel (Microsoft Office Professional Plus)</td><td>Microsoft</td><td>v14.0.7106.5003</td><td></td></tr><tr><td>VLC Media Player</td><td>Video LAN</td><td>v2.1.2</td><td>Oynatma hızı modülasyonu ve video desteği ile medya oynatıcı</td></tr><tr><td>Harici Sabit Disk</td><td>Western Digital</td><td>WDBAAU0020HBK-01</td><td>2 TB</td></tr></tbody></table>

paw-sürükleme: bir roman, fare silindir test hassas analizi

Paw-Dragging: a Novel, Sensitive Analysis of the Mouse Cylinder Test

Silindir testi rutin olarak kemirgenlerde ön ayakları motor korteks fokal iskemik hasarı tahmin etmek için kullanılır. Silindire yerleştirildiğinde, kemirgenler yetiştirme ve postural destek için onların ön ayakları pençeleri ile silindir duvarlarını dokunarak keşfedebilirsiniz. Ön ayakları sensorimotor korteks iskemik hasarı takiben, sıçanlar ön ayakları asimetri denir onların etkilenen pençe ile daha az dokunur sonuçlanan postural destek için etkilenmemiş ön ayakları pençe daha ağır güveniyor. Buna karşılık, fare beyninde fokal iskemik hasar ön ayakları asimetri karşılaştırılabilir tutarlı açıkları neden başarısız olur. Ön ayakları asimetri açıkları seyrek görülürken, fareler &quot;pençe-sürükleme&quot; olarak adlandırılan yeni bir davranış sonrası inme göstermek yok. Paw-sürükleme, bir dört ayaklı duruş bir arkadan sökülmesi sırasında doğrudan duvardan defol ziyade silindir duvar boyunca onun etkilenen pençe sürüklemek için fare eğilimidir. Daha önce olduğunu göstermiştirPençe-sürükleyerek davranış ön ayakları motor korteks küçük kortikal iskemik yaralanmalara oldukça duyarlıdır. Burada pençe-sürükleyerek analizi için ayrıntılı bir protokol sağlar. Bir pençe-drag ne olduğunu tanımlamak ve pençe-sürükleyerek davranışını ölçmek için nasıl gösterilmektedir. Silindir testi yönetmek için basit ve ucuz bir testtir ve ön eğitim veya gıda yoksunluk stratejileri gerektirmez. Daha küçük odak yaralanmaları popülaritesi artan ve üretirler iki model - silindir testi ile pençe-sürükleyerek analizini kullanarak, böyle Fototromboz ve Endotelin-1 (ET-1) teşvikli iskemi gibi kortikal iskemik yaralanma tahmin etmek için bir boşluğu doldurmaktadır Orta serebral arter tıkanıklığı daha. Son olarak, silindir testinde pençe-sürükleyerek davranışını ölçen önceki ön ayakları asimetri analizleri tutarlı açıklarını tespit etmek için başarısız oldu transgenik fare suşlarının geniş kohort kullanarak kortikal yaralanma sonrası fonksiyonel iyileşme çalışmalarını sağlayacaktır.

Biz daha önce bu pençe-sürükleyerek davranış ön ayakları sensorimotor korteks fokal iskemik yaralanma takip belirir ve hasar 4 olumlu bir gösterge olduğunu göstermiştir. Ön ayakları sensorimotor kortekse ET-1 intra-kortikal enjeksiyonlar bir iskemik bir lezyon (Şekil 8A, B) ikna etmek için kullanıldı. Potansiyel kullanım fonksiyonel iyileşmeyi değerlendirmek için pençe-sürükleyerek davranış daha uzun 14 gün sonrası yaralanma uzatıldı olup olmadığını bu çalışma incelendi. Fareler önce, operasy...

Silindir testi Klasik ön ayakları asimetri analizleri rutin beyin hasarı veya inme aşağıdaki sıçanlarda davranışsal açıkları değerlendirmek için kullanılır; Bununla birlikte, bu farelerin tutarlı açıkları tespit etmek için başarısız olur. Bu çalışma pençe-sürükleme davranışını miktarının farelerde beyin hasarının daha duyarlı bir analiz olduğunu göstermektedir.

Paw-sürükleme: Bir Roman, Fare Silindir Test Hassas Analizi

The cylinder test is routinely used to predict focal ischemic damage to the forelimb motor cortex in rodents. When placed in the cylinder, rodents explore ...

Merhaba, ben Dr. Jackie Vander Loot. Selam, benim adım Brian Room. Bugün, silindir testi pençe sürükleme hassas analizini tartışacağız.Silindir testi, kemirgenlerde dört ekstremite motor fonksiyonunun bir testidir. Bu testte fareler, arka ayakları üzerinde yükselerek ve silindir duvarına karşı postural destek için dört patilerini kullanarak pleksiglas bir silindiri keşfederler. Fare silindiri keşfederken dört patinin kullanımı incelenerek, farenin motor defisitleri olup olmadığı belirlenir.Özellikle, her bir ön patinin inme öncesi ve sonrası kullanımını karşılaştırıyoruz. İnme sonrası, hasarlı hemisferin kontralateralindeki ön pati daha seyrek kullanılır. Etkilenen ön patinin etkilenmeyen ön patiye göre kullanımındaki bu değişim, ön ekstremite asimetrisinin bir ölçütüdür.Günümüzde, orta serebral arter tıkanıklığı gibi büyük iskemik yaralanmalar sonrası fare ve sıçanlarda, inmenin davranışsal bir belirleyicisi olarak dört ekstremite asimetri analizi kullanılmaktadır. Büyük yaralanmaların aksine, küçük fokal iskemik yaralanması olan farelerde dört ekstremite asimetrisi gözlemlenmez. Bu durum, silindir testinin dört ekstremite asimetri analizinin büyük yaralanmalara duyarlı olmasından, ancak daha küçük yaralanmaların tespitinde yararlı olmamasından kaynaklanıyor olabilir.Fototromboz ve endotelyum tarafından indüklenen iskemi gibi küçük fokal iskemik yaralanmalar, çoğu modelde daha popüler hale gelmektedir. Bu durum, bu daha küçük kortikal yaralanmaları değerlendirmek için fonksiyonel davranışsal analizlere duyulan ihtiyacı vurgulamaktadır. Laboratuvarımda Brian Room, pençe sürükleme olarak adlandırdığımız silindir testine yönelik yeni bir analiz geliştirmiştir.Endotelium 1 iskemik hasarı sonrası farenin dört patisinin silindir duvarıyla nasıl temas ettiğini inceleyerek, etkilenen patide yeni bir davranış gözlemledik. Yaralanmamış farelerin pati sürüklemesinde, fare arka ayakları üzerinde yükselirken silindir duvarına ya tek patisiyle ya da her iki patisiyle temas eder; fare araştırma yaparken destek almak için dört patisini sıkıca duvara dayar ve ardından duvardan itilmek için patilerini kullanır. Endotelium 1 iskemik hasarı sonrası tekrar dört ayağı üzerine düştüğünde, etkilenen pati silindir duvarıyla temas kurmasına rağmen sıkı bir destek sağlamaz.Temasın ardından avuç içi yükselir ve parmaklar, tamamen serbest kalmadan önce silindir duvarı boyunca sürüklenir. Bu pençe sürükleme hareketi, pençenin ya gövdenin orta hattına doğru yatay bir yönde ya da zemine doğru dikey bir yönde hareket etmesiyle gerçekleşir. Daha önce farelerde inphi one iskemik yaralanma sonrası pod sürükleme davranışını nicelleştirmiş ve iskemiden sonraki iki haftaya kadar etkilenen uzuvda artan pod sürükleme davranışı olduğunu göstermiştik.Ayrıca, verilerimiz pod sürükleme davranışının dördüncü motor korteksteki hasarla ilişkili olduğunu göstermiştir. Bu videoda, silindir testinin nasıl kurulacağını ve kaydedilen videolardaki pod sürükleme davranışının nasıl analiz edileceğini göstereceğiz. Silindir testi kurulumu ve uygulanması kolaydır ve düşük maliyetlidir.Merkezi oyulmuş ve üzerine bir pleksiglas levha yerleştirilmiş bir masaya ihtiyaç vardır. Bu, çekimlerin çoğunlukla alttan yapılabilmesine olanak tanır. Pleksiglas silindir, masa tablasının üzerine yerleştirilir.Masa tablasının altına, silindirin konumunu belirtmek için dört siyah çizgi çizilmiştir. Bu, silindirin denemeler arasında konumunu değiştirmeden çıkarılıp tekrar yerleştirilebilmesi için bir kılavuz görevi görür. Ayrıca videonun karesinde de, masanın %70 ethanol ile temizlenmesinin mürekkebi silmemesi için işaretler masanın alt kısmına yerleştirilmiştir.Fareyi bir kamera ve tripod kullanarak alttan görüntüleyebilmek için, masa tablasının altına yaklaşık 45 derecelik bir açıyla bir ayna yerleştiriyoruz. Bu sayede, kamerayı masa tablasının altında sabit tutacak ayrı bir düzenek kurmanın yaratacağı zorluklardan kaçınmış oluyoruz. Ayna, burada ve burada gösterildiği gibi destek braketleri ile sabitlenmiştir.Kelepçelerin boyutu ve aynanın boyutu, masa ayakları arasındaki boşluğun boyutlarına bağlı olacaktır. Kamera ve tripod, silindirin tüm duvarının görüş alanı içinde görülebileceği bir mesafeye yerleştirilir. Bu mesafe tipik olarak birkaç fitten fazla değildir, ancak aynanın açısına, tripodun yüksekliğine ve kameranın zum kapasitesine bağlı olarak değişebilir.Testi gerçekleştirmek için, çekimden önce fareler silindirin üst kısmından yerleştirilir. Hangi farenin performans sergilediğini belirtmek için işaret kartları kullanılır. Silindir videolarını değerlendiren kişinin tedaviye karşı kör kalmasını sağlamak amacıyla bu kartlarda fare numarası veya bir kod adı yer alabilir.Çekim tarihi ve deneme numarası da karta eklenebilir. Fareler, 20 kez ayağa kalkana kadar kaydedilir. Bu şekilde yapılan sayımda, her iki ön pençenin de yerden kesilmesi gerekir; kısmi kalkışlar sayılmaz.Fare, bir patisiyle duvara dokunurken diğer patisi yerde kaldığında, silindir videoları VLC medya oynatıcı kullanılarak analiz edilir. Oynatma hızı modülasyonu olan herhangi bir medya oynatıcının kullanımı uygun olsa da, pod sürüklemeleri mekanik sayaçlarla veya kağıt üzerine çentik atarak sayılabilir. Biz, sayımları kağıda kaydettik ve daha sonra verileri bir hesap tablosuna aktardık.Sayımı etkili bir şekilde yapabilmek için videonun normal hızın 0,5 katında oynatılması önerilir. Zaman zaman durdurmak ve daha düşük hızda yeniden oynatmak gerekebilir.Bir farenin, arka ayaklarıyla iki kereden fazla temas kurarak gövdesini silindir çevresinde hareket ettirebileceği unutulmamalıdır. Bu temaslar, sol ön pençe için bir ve sağ ön pençe için bir şeklinde sayılır. Pençe sürüklemeleri, silindir duvarına yapılan toplam pençe teması sayısının yüzdesi olarak hesaplanır. Her bir pençe için pençe temasları, farenin bir veya iki ön pençesiyle silindir duvarına temas etme sayısı sayılarak değerlendirilir.Bir farenin silindir etrafında vücudunu hareket ettirerek iki kereden fazla temas kurabileceği unutulmamalıdır. Bu temaslar, her bir sol ön pati dokunuşu ve her bir sağ ön pati dokunuşu için birer adet olacak şekilde kaydedilerek pati sürükleme davranışının nicelleştirilmesi, normal pati dokunuşlarının nicelleştirilmesinden ayrı tutulur; pati sürükleme işlemi dikey bir sürükleme veya yatay bir sürükleme şeklinde gerçekleşebilir.Sürükleme genellikle, etkilenen patinin silindir duvarından ayrılırken hafif bir titreme göstermesini içerir; bu durum zayıflığa ve motor kontrol kaybına işaret eder. Stereotipik pati sürüklemesinde, etkilenen patide sıklıkla varyasyonlar görülür. Örneklerden biri, avuç içinin kalktığı ancak parmakların silindire süründüğü eksik pati sürüklemesidir; ancak bu durumda her iki pati de nihayetinde duvarla teması aynı anda keser. Pati sürükleme davranışı değerlendirilirken, farenin silindir etrafındaki lateral keşif hareketinin, dört ekstremite motor fonksiyonundaki bir eksiklikle karıştırılmaması önemlidir.Lateral eksplorasyon sırasında, fare silindirin etrafında yanlara doğru hareket eder ve arkada kalan dört pati, farenin gövdesinin izlediği yön boyunca çekilir. Örneğin fare, arka ayakları üzerinde yükselip her iki patisiyle duvara dokunur, patilerinden birinin konumunu değiştirir ve ardından patinin yeniden konumlandığı yöne doğru yanlamasına hareket eder. Bu gerçekleştiğinde, arkadaki patiler destek için yeniden yerleştirilene kadar duvar boyunca sürüklenir.Farenin gövdesinin bükülmesi, lateral keşif davranışının bir başka belirtisidir. Bu davranış, pençe sürükleme işleminden belirgin şekilde farklıdır; çünkü pençe sürükleme, sürükleme sırasında veya hemen öncesinde silindir duvarı etrafında lateral bir hareket içermez. Çalışmalarımız, dört uzuv motor korteksinde meydana gelen küçük bir fokal iskemik yaralanma sonrası pençe sürüklemeyi incelemiştir.Burada, etkilenen ön patinin sürüklenme davranışının inme sonrası birinci günde zirveye ulaştığını ve inme sonrası yedinci güne kadar azaldığını, ardından bu noktada stabilize olduğunu ve defisit uzamış göründüğü için inme sonrası dört haftaya kadar yüksek seyretmeye devam ettiğini gösteriyoruz. Bu durum, araştırmacıların küçük bir kortikal yaralanma sonrası kronik inme etkilerini incelemesine olanak tanıyacaktır. Ayrıca, küçük kortikal yaralanması olan farelerde inme tedavileri kısa veya uzun vadede çalışılabilir.Hücresel testin yeni PO sürükleme analizi, fototromboz veya endofilin ile indüklenenler gibi farelerdeki fokal iskemik inme için davranışsal bir analiz yöntemi olarak potansiyele sahiptir. Çoğu zaman ön pençe asimetrisinin meydana geldiği orta serebral arter oklüzyonu gibi yaralanmalara sahip farelerde kullanılabilir. POD sürükleme, daha küçük yaralanmaların boyutunu ve benzerlerini belirlemek için kullanılabilir.Pod sürükleme deneyleri, inme sonrası 28. güne kadar ve bu günü kapsayacak şekilde yükseltilmiştir. Bu yöntem, çeşitli kısa ve uzun süreli inme tedavi çalışmalarında kullanılma potansiyeline sahiptir.

paw-dragging-a-novel-sensitive-analysis-of-the-mouse-cylinder-test

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Şehriye ve forepaw beceri Capellini İşleme Testler, becerikli forepaw ve rakam hareketleri kullanarak besin öğeleri işlemek için kemirgenler doğal eğim yararlanmak. Pişmemiş kuru makarna kısa koluyla ele Hayvanlar videoya. Yavaş hareket video oynatma forepaw ayarlamaları ölçümü için izin verir.

Şehriye ve Capellini İşleme Testleri: sıçan ve fareler hünerli forepaw fonksiyonu Basit kantitatif tedbirler

Protokoller iki de kurulan motor koordinasyon görevleri, hızlandırılması rotarod ve yatay çubuk, son zamanlarda Oxford geliştirilen iki test, statik çubuklar ve paralel bar sunulmaktadır. Bu testler motoru potansiyel olarak kendi başlarına ilgi bozuklukları yanı sıra davranış diğer alanlarda testlerde değişkenlerin olmak algılayabilir.

Farelerde Motor Koordinasyon Ölçüm

Amiyotrofik lateral skleroz (ALS) için bir fare modelinde klinik ve davranışsal incelenmiştir. Beraberindeki immünohistolojik analizi için bir önkoşul olarak omurilik hazırlanmasında detaylı bir şekilde anlatılır.

Amyotrofik Lateral Skleroz için Fare Modeli (ALS) Klinik Test ve Omurilik Kaldırma

Genel olarak Parkinson hastalığı, hareket bozuklukları, hassas ve güvenilir bir davranış testleri yeni potansiyel terapötikler test etmek için gereklidir. Burada, nigrostriatal sistemine zarar derecelerine ve klinik öncesi çalışmalar için yararlı duyarlı olan fareler için duyu testler yönetilebilir bir pil açıklanmaktadır.

Parkinson Hastalığı Fare Modeller Duyusal Motor Fonksiyon Değerlendirilmesi

Sunulan, fare yenidoğan motor testlerinin kısa bir bataryasıdır. Bu testler kullanılarak, çeşitli neonatal motor bozukluklarda neonatal motor defisitler gösterilebilir. Standartlaştırılmış bir test setine sahip olarak, farklı çalışmalardan elde edilen sonuçlar karşılaştırılabilir ve bu da gruplar arasında daha iyi ve doğru raporlamaya olanak tanır.

Cerebral Palsy bir Yenidoğan Fare Modeli Motor Testleri A Pil

inme patofizyolojisini anlamak için, güvenilir modeller kullanmak önemlidir. Farelerde en sık kullanılan inme modellerinden birini anlatacağız Bu yazıda, orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli olarak adlandırılan reperfüzyon ile (ayrıca lümen içi filament veya sütür modeli olarak adlandırılır).

Farelerde Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Reperfüzyon Kaynaklı İnme Cerrahi Yaklaşım

Ağrı yanıt nöropatik hayvan modeli olarak hassas bir değerlendirme ağrı hastalıkları Patofizyoloji araştırmak ve yeni analjezikler geliştirmek çok önemlidir. Biz bir otomatik yürüyüş analizi sistemi tarafından hind pençe kemirgen duyusal işlev belirlemek için hassas ve objektif bir yöntem mevcut.

Kronik daralma Yaralanmalı farelerde otomatik yürüyüş analizi

Biz bir fare modeli için Parkinson hastaligi MPTP ve davranışsal değerlendirme motor işlevleri ölçmek için silindir ve açık alan testleri kullanarak kullanarak kurulması tanımlamak. O zaman bir örnek olarak PD ilaçların çalışmada bu modeli uygulamak nasıl göstermek için L-DOPA kullanın.

Bir fare MPTP kaynaklı Parkinson hastalığı modelinde kendiliğinden hareket davranış değerlendirme

Düşük maliyetli iletişim kuralı ayak izi analizini oluşan ve kısıtlama stres hareket bozuklukları fare modeli değerlendirmek için yararlı sonra kutu testi asılı.

Düşük maliyetli Protokolü ayak izi analizi ve kutu testi fareler için asılı kronik kısıtlama stres uygulanan

Mekanik çatışmadan kaçınma testi, farelerde ağrı duyarlılığının refleksif olmayan bir okuması olarak kullanılır ve çeşitli fare ağrısı modellerinde duygusal-motivasyonel tepkileri daha iyi anlamak için kullanılabilir.

Farelerde Ağrı Davranışını Ölçmek için Mekanik Çatışmadan Kaçınma Testi

Bu makale, büyük stroklu farelerde yüksek oranda ötelemeye dayalı ve bağımsız olarak kanıtlanmış fare Vuruş Birimi (mSU) kavramını yürütmek için bir protokol sunar. Ayrıca, farelerde fokal deneysel inme ölçeğinin yürütülmesi için standart bir protokol sağlar, bu da uzun vadede bile tespit edilen inme fokal eksikliklerini değerlendirir.

Translasyonel Fare İnme Çalışmaları için Standartlaştırılmış Nörolojik Skorlama ile Fare Vuruşu Birimi Protokolü

Öğrenin, farelerde beyin hasarını hassas bir şekilde analiz etmek için silindir testinde pati sürükleme davranışını nasıl nicelendireceğinizi. Bu yöntem, geleneksel ön pati asimetrisi analizinden daha duyarlıdır.

Paw-sürükleme: Bir Roman, Fare Silindir Test Hassas Analizi

Daha fazla video keşfet