April 29th, 2015
Silindir testi Klasik ön ayakları asimetri analizleri rutin beyin hasarı veya inme aşağıdaki sıçanlarda davranışsal açıkları değerlendirmek için kullanılır; Bununla birlikte, bu farelerin tutarlı açıkları tespit etmek için başarısız olur. Bu çalışma pençe-sürükleme davranışını miktarının farelerde beyin hasarının daha duyarlı bir analiz olduğunu göstermektedir.
Merhaba, ben Dr.Jackie Vander Loot. Merhaba, benim adım Brian Room. Bugün, silindir test pençesinin hassas bir analizini tartışacağız. Sürükle -yerek.
Silindir testi, kemirgenlerde dört ekstremite motor fonksiyonunun bir testidir. Bu testte fareler, silindir duvarına karşı postüral destek için dört pençelerini kaldırarak ve kullanarak bir pleksiglas silindiri keşfederler. Fare silindiri keşfederken dört pençe kullanımını incelemek, farenin motor açığı olup olmadığını belirlememizi sağlar.
Spesifik olarak, her dört pençenin vuruştan önce ve sonra kullanımını karşılaştırıyoruz. Bir felçten sonra, yaralı hemisfere kontralateral dört pençe daha az kullanılır. Etkilenen dört pençenin kullanımındaki bu değişiklik, etkilenmemiş dört pençeye karşı dört uzuv asimetrisinin bir ölçüsüdür.
Şu anda, dört ekstremite asimetrisi analizi, orta serebral arter tıkanıklığı gibi büyük iskemik yaralanmalardan sonra farelerde ve sıçanlarda inmenin davranışsal bir belirleyicisi olarak kullanılmaktadır. Büyük yaralanmaların aksine, küçük fokal iskemik yaralanmaları olan farelerde dört ekstremite asimetrisi gözlenmez. Bunun nedeni, silindir testinin dört uzuv asimetrisi analizinin büyük yaralanmalara duyarlı olması, ancak daha küçük yaralanmaları tespit etmede yararlı olmaması olabilir.
Foto tromboz ve endotel bir indüklenen iskemi gibi küçük fokal iskemik yaralanmalar çoğu modelde daha popüler hale gelmektedir. Bu, bu daha küçük kortikal yaralanmaları değerlendirmek için fonksiyonel davranışsal tahlillere olan ihtiyacı vurgulamaktadır. Laboratuvarımda, Brian Room, pençe sürükleme dediğimiz silindir testinin yeni bir analizini geliştirdi.
Farenin dört pençesinin endotel bir iskemik yaralanmayı takiben silindir duvarına nasıl temas ettiğini inceleyerek, etkilenen pençede yeni bir davranış gözlemledik. Bir pençe sürüklenmesi: Yaralanmamış fareler, fare yetiştirirken bir pençe veya her iki pençe ile silindir duvarına temas eder, keşif yaparken destek için dört pençesini duvara sıkıca diker ve ardından pençelerini duvardan itmek için kullanır. Dört ayak üzerine geri düştüğünde, endy bir iskemik yaralanmanın ardından, etkilenen pençe bu silindir duvarına temas etmesine rağmen sağlam bir destek sağlamaz.
Bunun yerine, temasın ardından avuç içi kalkar ve rakamlar tamamen serbest bırakmadan önce silindir duvarı boyunca sürüklenir. Bu pençe sürükleme hareketi, pençenin vücudun orta hattına doğru yatay yönde hareket etmesiyle veya zemine doğru dikey yönde hareket etmesiyle gerçekleşir. Daha önce bir inphi one iskemik yaralanmayı takiben farelerde bakla sürükleme davranışını ölçtük ve iskemi sonrası iki haftaya kadar etkilenen uzuv tarafından artmış bakla sürükleme davranışı gösterdik.
Ayrıca, verilerimiz pod sürükleme davranışının dört motor kortekse verilen hasarla ilişkili olduğunu gösterdi. Bu videoda, silindir testinin nasıl kurulacağını ve kaydedilen videolarda pod sürükleme davranışının nasıl analiz edileceğini göstereceğiz. Silindir testinin kurulumu ve yürütülmesi kolaydır ve düşük maliyetli ek yüke sahiptir.
Bir pleksiglas levha ile kaplı, içi boş bir merkeze sahip bir masaya sahip olmak gerekir. Bu, aşağıdan en fazla çekim yapmamızı sağlar. Pleksiglas silindir masa üstüne yerleştirilir.
Masanın alt kısmında, silindirin konumunu belirtmek için dört siyah çizgi çizilir. Bu, silindirin konumunu etkilemeden denemeler arasında çıkarılabilmesi ve değiştirilebilmesi için bir kılavuz görevi görür. Videonun karesinde de işaretler masanın alt tarafına yerleştirilmiştir, böylece masanın %70 etanol ile temizlenmesi mürekkebi silmez.
Fareyi bir kamera ve tripod kullanarak aşağıdan çekmek için, masa üstünün altına yaklaşık 45 derecelik bir açıyla bir ayna ekliyoruz. Bu, kamerayı masanın altında yerinde tutmak için ayrı bir aparat oluşturmanın komplikasyonlarından kaçınmamızı sağlar. Ayna, burada ve burada gösterildiği gibi destek braketleri ile yerinde tutulur.
Braketlerin boyutu ve aynanın boyutu, masa ayakları arasındaki boşluğun boyutlarına bağlı olacaktır. Kamera ve tripod, silindirin tüm duvarının görüş alanında görülebileceği bir mesafeye yerleştirilmiştir. Bu mesafe tipik olarak birkaç fitten fazla değildir, ancak aynanın açısına, tripodun yüksekliğine ve kameranın yakınlaştırma özelliklerine bağlı olarak değişebilir.
Testi yapmak için, fareler filme alınmadan önce silindirin üstünden yüklenir. İşaret kartları, hangi farenin performans gösterdiğini belirtmek için kullanılır. Bu, fare numarasını veya bir kod adını içerebilir, böylece silindir videolarını derecelendiren kişi tedaviye karşı kör olacaktır.
Çekim tarihi ve deneme numarası da karta dahil edilebilir. Fareler, 20 kez şahlanana kadar filme alınır. Bu şekilde sayılan her iki pençeyi de içermeli, zemin borçları sayılmamalıdır.
Fare bir pençeyle duvara dokunurken diğeri yerde kalırsa, silindir videolar VLC medya oynatıcı kullanılarak analiz edilir. Oynatma hızı modülasyonuna sahip herhangi bir medya oynatıcının kullanımı iyi olsa da, pod sürüklemeleri mekanik çeteleler kullanılarak veya kağıda bir çetele yazılarak sayılabilir. Çeteleleri kağıda kaydediyoruz ve daha sonra verileri bir elektronik tabloya aktarıyoruz.
Normalin 0,5 katı video oynatma. Etkili bir şekilde çetele yapabilmek için hız önerilir. Bazen, duraklatma ve daha düşük bir hızda tekrar oynatma gerekli olabilir.
Bir farenin, ikiden fazla temas kurarak arka sırasında gövdesini silindirin etrafında hareket ettirebileceğini de unutmayın. Bu kontaklar, her sol dört tencere dokunuşu için bir tane ve her biri için bir tane olmak üzere sayılır. Sağda, dört pota dokunuşlu pençe sürüklemesi, silindir duvarına yapılan toplam pençe dokunuşu sayısının yüzdesi olarak sayılır Her bir pençe için pençe dokunuşları, farenin dört pençeden biri veya her ikisi ile silindir duvarına kaç kez temas ettiği sayılarak değerlendirilir.
Bir farenin, ikiden fazla temas kurarak arka sırasında gövdesini silindirin etrafında hareket ettirebileceğini de unutmayın. Bu kontaklar, her biri için bir tane olmak üzere dört po touch ve her biri için bir tane olmak üzere sayılır. Pençe sürükleme davranışını ölçen sağ dört po dokunuşu, normal pençe dokunuşlarını ölçmekten farklıdır, pençe sürükleme dikey sürükleme veya yatay sürükleme pençesi ile gerçekleşebilir.
Sürükleme genellikle etkilenen pençede silindir duvarını terk ederken hafif bir titreme içerir, bu da zayıflık ve motor kontrol eksikliğini düşündürür. Basmakalıp pençe sürüklemesindeki varyasyonlar genellikle etkilenen pençede görülür. Bir örnek, avuç içi kaldırdığı ve rakamları silindire doğru sürüklediği tamamlanmamış bir pençe sürüklemesidir, ancak her iki pençe de sonuçta aynı anda duvarla teması keser Pençe sürükleme davranışını değerlendirirken, bir farenin silindir etrafındaki yanal keşif hareketini dört uzuv motor fonksiyonundaki bir eksiklikle karıştırmamak önemlidir.
Yanal keşif sırasında, fare silindirin etrafında yanal olarak hareket eder ve arkadaki dört pençe, farenin gövdesinin yönünü takip ederek çekilir. Örneğin, fare her iki pençesiyle duvara geri döner ve dokunur, pençelerinden birini yeniden konumlandırır ve ardından pençenin yeniden konumlandırılmasına doğru yanal olarak hareket eder. Bu meydana geldiğinde, arkadaki pençeler daha sonra destek için yeniden dikilene kadar duvar boyunca sürüklenir.
Farenin gövdesinin bükülmesi, yanal keşif davranışının bir başka işaretidir. Bu davranış, pençe sürüklemeden belirgin bir şekilde farklıdır, çünkü pençe sürükleme, sürükleme sırasında veya hemen öncesinde silindir duvarı etrafında yanal hareket içermez. Çalışmalarımız, dört ekstremite motor kortekste küçük bir fokal iskemik yaralanma sonrası pençe sürüklenmesini incelemiştir.
Burada, etkilenen dört P ile pençe sürükleme davranışının inme sonrası bir gün zirve yaptığını ve inme sonrası yedi güne düştüğünü, burada plato yaptığını ve açığın uzamış gibi göründüğü için inme sonrası dört haftaya kadar yüksek kaldığını gösteriyoruz. Bu, araştırmacıların küçük bir kortikal yaralanmadan sonra kronik inmenin etkilerini incelemelerine izin verecektir. Ayrıca, küçük kortikal yaralanmaları olan farelerde inme tedavileri kısa veya uzun vadede incelenebilir.
Hücresel testin yeni PO sürükleme analizimiz, foto tromboz veya endofilin tarafından indüklenenler gibi farelerde fokal iskemik inme için davranışsal bir test potansiyeline sahiptir. Orta serebral arter tıkanıklığı gibi yaralanmaları olan farelerde bir tane, lam asimetri için çoğu zaman meydana gelir. POD sürükleme, daha küçük yaralanmaların ve benzerlerinin boyutunu belirlemek için kullanılabilir.
Pod sürükleme gibi deneyler, vuruştan sonraki 28 güne kadar (bu tarih dahil) yükseltilir. Çeşitli kısa ve uzun süreli inme tedavisi çalışmalarında kullanılma potansiyeline sahiptir.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Bu çalışma, silindirle test sırasında pençe sürükleme davranışı ölçümünü kullanarak farelerde beyin hasarını daha hassas bir analiz ile sunmaktadır. Geleneksel yöntemler, farelerde tutarlı eksiklikleri saptamada sınırlılık göstermiştir ve bu da geliştirilmiş değerlendirme tekniklerine duyulan ihtiyacı vurgulamaktadır.